CN108244621B - 一种源于发酵果汁的醇溶组分及其用途 - Google Patents

一种源于发酵果汁的醇溶组分及其用途 Download PDF

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Abstract

本发明属于功能保健食品研究领域，具体的说，本发明涉及一种源于小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁的组分及其制备方法和应用。本发明的发酵果汁醇提物，其包括：多肽组分；多酚组分；以及糖组分。

Description

一种源于发酵果汁的醇溶组分及其用途
技术领域
本发明属于功能保健食品研究领域，具体的说，本发明涉及一种源于小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁的醇溶组分以及其用途。
背景技术
小麦胚芽是小麦的核心和生命，其重量仅占麦粒重量的2％，但营养却占整个麦粒的97％，其中蕴藏着50多种人体所需丰富营养及一些还未被当今科学发现的微量生理活性成分，具有极高的营养价值和药用价值，小麦胚芽对人体健康的神奇作用，为世界所公认。小麦胚芽富含油酸、亚麻油酸和哥亚油酸等不饱和脂肪酸，以及类黄酮、甾醇、二十八碳醇和谷胱甘肽等功能性物质，具有抗氧化、降低胆固醇、增进肌体的体力、耐力、精力，提高肌体的应激能力和代谢率，改善心肌功能等功能。
微生物生化转化是利用微生物产生的一种或几种特殊的酶，将食品中固有的某些物质转化成为活性物质，或降低其所含有的抗营养因子，从而实现对其功能成分的结构修饰，提高其营养性和功能性。现已有研究发现，通过微生物对小麦胚芽进行生化转化，可生成某些新的功能物质，从而获得更多或者更好的生理功能。
炎症性肠病(Inflammatory Bowel Disease,IBD)是一种病因不明且无法治愈的慢性非特异性肠炎，其包括的主要疾病有溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)和克罗恩病(Crohn's disease,CD)，且前者存在较高的癌变风险。目前最新的UC治疗目标将肠黏膜愈合作为有效治疗评价标准。而临床上尚无治疗UC的特效药物。传统治疗药物，如氨基水杨酸制剂、糖皮质激素和免疫抑制剂等，普遍存在特异性差，副作用强和用药难度大等问题，临床治疗中无法取得满意疗效。
痛风性关节炎是由于尿酸盐沉积在关节囊、滑囊、软骨、骨质和其他组织中而引起病损及炎性反应。尿酸是嘌呤代谢的最终产物。痛风是长期嘌呤代谢障碍、血尿酸增高引起。如果患者无临床症状，血中尿酸浓度高于正常值，医学上称为“高尿酸血症”。血中尿酸浓度如果达到饱和溶解度的话，这些物质最终形成结晶体，积存于软组织中。最终导致身体出现炎症反应。目前痛风性关节炎通常采用如双氯芬酸钠或双氯芬酸钾，或塞来昔布、美洛昔康等非甾类抗炎药以及秋水仙碱进行治疗，也是存在副作用大的问题。
药食同源是中国传统中医思想之一，即某些材料既可以作为食品也可以作为药物。药食材料来源的提取物也同样具有某些治疗或者辅助治疗疾病的作用，但其副作用相对目前的西药具有副作用小等优点，因此具有很大的挖掘空间。
发明内容
本发明的发明人利用乳酸菌对小麦胚芽苹果汁进行发酵，得到一种具有良好口感，并具有一定抗氧化性、调节肠道菌群功能等功能的果汁饮料。本发明主要对该果汁饮料的醇溶组分进行提取并对其进行分析，并对发现这种醇溶组分在抑制结肠炎、以及痛风性关节炎方面的用途。
本发明的目的在于提供了一种源于小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁的醇溶组分及其应用。
本发明还提供了一种源于小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁的醇溶组分的制备方法，包括如下步骤：
将小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁在冷冻干燥机进行干燥成粉末，将干燥粉末溶于75％乙醇中，超声波清洗机超声1h，8,000r/min离心10min，取上清，利用旋转蒸发仪将乙醇及水分挥发干净，所得组分即为醇溶组分。
本发明通过小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁有效成分，进行了小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁醇提物的应用研究，发现小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁醇提物具有显著的预防或治疗炎症性肠病及痛风性关节炎，，对于预防和治疗溃疡性结肠炎药物、食品、保健品的开发和应用具有广泛的应用价值。
采用上述方法得到的小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁醇提物，淡黄色，具芳香气味，有粘性。以小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁醇提物总重量计，该方法制备得到的小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁醇提物中含有：
多肽组分：
来源于低分子量谷蛋白VFLQqqcSPVAmPQSLAR、SQMLQQSIcHVMQQQccQQLR、VFLqQQcIPVAmQR、VFLQQQcSHVAMSQR；
来源于小麦胚胎发育晚期丰富蛋白EGIDIDESKFK、EGETVVPGGTGGK、KGGLSTMEESGGER、AAETKDQTGSYLGEK、DQTGSYLGEKTEmAK、AAETKDqTGSYLGEKTEmAK、DQTASTLGEKTEAAK；
来源于淀粉酶抑制剂LPIVVDASGDGAYVcK、EHGAQEGQAGTGAFPR、LQcnGSQVPEAVLR、LTAASITAVcR；
来源于乳酸菌细胞壁关联水解酶IAEAnGLSNPNLIIAGK；
来源于磷酸甘油酸脱氢酶GASQNIIPSSTGAAK；
多酚组分为麦黄酮、绿原酸、咖啡酸、芹菜素糖苷组分、阿魏酸三聚体及山奈素糖苷中的一种或多种；
优选地，本发明所述炎症性肠炎为溃疡性结肠炎。
进一步优选地，所述溃疡性结肠炎是由DSS诱导产生的。
本领域技术人员可以理解，可以根据实际需要将所述药物或保健品制备成本领域公知的各种剂型，如固体制剂中的片剂、胶囊剂、丸剂等，液体制剂中的注射剂、溶液剂等，半固体制剂中的凝胶剂，气体制剂中的气雾剂、喷雾剂等。或者，可以根据实际需要将所述食品制备成本领域公知的种类，如饼干、面包等。
本领域技术人员同样可以理解，在以本发明的蜂胶乙醇提取物为主要活性成分制备用于预防或治疗炎症性肠炎的药物、食品、保健品时，可根据实际需要加入常规的助剂，如流平剂、填充剂、润湿剂、崩解剂、助溶剂、润滑剂等。
在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可以相互组合，即得本发明各较佳实例。
本发明涉及到的原料和试剂均可市购获得。
具体来说，本发明涉及以下内容：
1.一种发酵果汁醇提物，其包括：
多肽组分；
多酚组分；以及
糖组分。
2.根据项1所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述多肽组分的含量占全部醇提物的5～40重量％，优选6～35重量％，进一步优选7～32重量％，进一步优选7.6～31.8重量％；
所述多酚组分的含量占全部醇提物的50～90重量％，优选55～88重量％，进一步优选57～85重量％，进一步优选60～82重量％；
所述糖组分的含量占全部醇提物的3～10重量％，优选5～9重量％，进一步优选6～8.5重量％，进一步优选6.3～8.0重量％，
其中，多肽组分、多酚组分以及糖组分的总量不大于100重量％。
3.根据项1所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述多肽组分包括：来源于低分子量谷蛋白的多肽分子以及来源于小麦胚胎发育晚期丰富蛋白的多肽分子。
4.根据项3所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述来源于低分子量谷蛋白的多肽分子包括序列为如下的多肽分子：
VFLQqqcSPVAmPQSLAR、SQMLQQSIcHVMQQQccQQLR、VFLqQQcIPVAmQR、VFLQQQcSHVAMSQR。
5.根据项3所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述来源于小麦胚胎发育晚期丰富蛋白的多肽分子包括序列为如下的多肽分子：
EGIDIDESKFK、EGETVVPGGTGGK、KGGLSTMEESGGER、AAETKDQTGSYLGEK、DQTGSYLGEKTEmAK、AAETKDqTGSYLGEKTEmAK、DQTASTLGEKTEAAK。
6.根据项3所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述多肽组分包括还包括：
来源于淀粉酶抑制剂LPIVVDASGDGAYVcK、EHGAQEGQAGTGAFPR、LQcnGSQVPEAVLR、LTAASITAVcR；
来源于乳酸菌细胞壁关联水解酶IAEAnGLSNPNLIIAGK；以及
来源于磷酸甘油酸脱氢酶GASQNIIPSSTGAAK。
7.根据项1所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述多酚组分包括：麦黄酮、绿原酸、咖啡酸、芹菜素糖苷组分、阿魏酸三聚体及山奈素糖苷中的一种或多种。
8.根据项1～7中任一项所述的发酵果汁醇提物用于制备用于治疗或预防炎症性肠炎的药物的用途。
9.根据项1～7中任一项所述的发酵果汁醇提物用于制备用于治疗或预痛风性关节炎的药物的用途。
10.根据项1～7中任一项所述的发酵果汁醇提物用于制备用于治疗或预防结肠炎的药物的用途。
11.一种用于治疗炎症性肠炎的方法，其包括：向有此需要的哺乳动物或人中给予有效量的项1～7中所述的发酵果汁醇提物。
12.一种用于痛风性关节炎的方法，其包括：向有此需要的哺乳动物或人中给予有效量的项1～7中所述的发酵果汁醇提物。
13.一种用于结肠炎的方法，其包括：向有此需要的哺乳动物或人中给予有效量的项1～7中所述的发酵果汁醇提物。
发明的效果
本发明提供一种源于小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁的醇溶组分，利用该组分可以有效地治疗或预防痛风性关节炎、炎症性肠炎等疾病。此外由于本发明提供的组分源于小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁，是一种安全且成本较低的营养和药效成分。
附图说明
图1总多酚含量测定标准曲线。
图2总糖测定标准曲线。
图3还原糖测定标准曲线。
图4Tricine-SDS-PAGE电泳。
图5发酵前后果汁与醇溶组分的液相色谱图谱。
图6发酵前后果汁与醇溶组分的质谱图。
图7实施例7中的小鼠的体重指数。
图8小鼠的脾重指数。
图9小鼠的结肠长度。
图10小鼠组织HE染色比较。
图11发酵前后果汁、醇提物缓解结肠炎比较。
图12实施例8中的不同浓度醇提物缓解结肠炎实验的综合评分结果。
图13实施例9中的不同发酵时间醇溶组分的抗结肠炎活性的综合评分结果。
图14XOD抑制实验，(A)孔道1,4为空白组；2,5为无XOD抑制剂组；3表嘌呤醇组；6醇提溶物组；(B)1孔道为空白组；2为无XOD抑制剂组；3～6分别为醇提物稀释10、5、2、1倍组。
图15血尿酸活性测定。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
本发明涉及一种源于小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁的醇溶组分，也称为一种发酵果汁醇提物，其包括多肽组分；多酚组分；以及糖组分。
具体来说，多肽组分的含量占全部醇提物的5～40重量％，优选6～35重量％，进一步优选7～32重量％，进一步优选7.6～31.8重量％；多酚组分的含量占全部醇提物的50～90重量％，优选55～88重量％，进一步优选57～85重量％，进一步优选60～82重量％；糖组分的含量占全部醇提物的3～10重量％，优选5～9重量％，进一步优选6～8.5重量％，进一步优选6.3～8.0重量％，其中，多肽组分、多酚组分以及糖组分的总量不大于100重量％。
具体来说，多肽组分的含量可以占全部醇提物的5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40重量％。
具体来说，多酚组分的含量可以占全部醇提物的50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89或90重量％。
具体来说，糖组分的含量可以占全部醇提物的3、4、5、6、7、8、9或10重量％。
除了上述物质之外，本发明的醇提物中还含有一些灰分。此外，总糖包括多糖和还原糖。
可见在本本发明的醇提物中，多酚组分是最为主要的成分，通过分析显示，与发酵前的原料相比，发酵后的醇提物中的多酚包括：麦黄酮(小麦黄素)、绿原酸、咖啡酸、芹菜素糖苷组分、阿魏酸三聚体及山奈素糖苷中的一种或多种。
其中，麦黄酮(Lricin)，也称为小麦黄素或者苜蓿素，化学名为4,5,7，三羟基-3,5二甲氧基黄酮(4',5,7-trihydroxy-3',5'-dimethoxyflavone)，存在于小麦属、豆科植物紫苜蓿等植物中。已有报道麦黄酮具有抗炎、抗肝纤维化等功能；绿原酸(Chlorogenicacid，以下简称CA)，是由咖啡酸(Caffeic acid)与奎尼酸(Quinicacid，1-羟基六氢没食子酸)生成的缩酚酸，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。绿原酸具有广泛的生物活性，现代科学对绿原酸生物活性的研究已深入到食品、保健、医药和日用化工等多个领域。绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。咖啡酸，又称3,4-二羟基肉桂酸，有较广泛的抑菌和抗病毒活性。芹菜素也称为芹菜甙元，是一种多酚。它是很多人类食物中包含的类黄酮之一。芹菜素及其糖苷具有抗炎，抗肿瘤，抗痉挛作用，抗氧化及抗癌能力。阿魏酸(Ferulic Acid)的化学名称为4-羟基-3-甲氧基肉桂酸，是桂皮酸(又称肉桂酸，3-苯基2-丙烯酸，分子结构)的衍生物之一。阿魏酸能清除自由基，促进清除自由基的酶的产生，增加谷胱甘肽转硫酶和醌还原酶的活性，并抑制酪氨酸酶活性，来调节人体生理机能。阿魏酸可通过微生物发酵及过氧化物酶转化得到脱氢二聚体或者三聚体，经药理活性研究发现二聚体或者三聚体具有比阿魏酸更显著的抗炎药理活性。山奈素是一种化学物质，分子式是C16H12O6，主要存在于姜科植物山柰Kaempferia galanga L.根茎，小檗科植物窝儿七Diphylleia sinensis Li根茎，檀香科植物白瑞草Thesiumchinense Turcz.全草，大戟科植物猫眼草Euphorbia lunulata Bge.地上部分，豆科植物槐树Sophora japonica L的干燥成熟果实中。山奈素含有多个酚羟基,且具有较强的抗氧化能力。山奈素对金黄色葡萄球菌及伤寒杆菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌等均有抑制作用。有抑制大鼠植入羊毛球的发炎作用。
其次，在醇提物中含量较多的是多肽成分。通过分析显示多肽组分包括：来源于低分子量谷蛋白的多肽分子以及来源于小麦胚胎发育晚期丰富蛋白的多肽分子。来源于低分子量谷蛋白的多肽分子包括序列为如下的多肽分子：VFLQqqcSPVAmPQSLAR、SQMLQQSIcHVMQQQccQQLR、VFLqQQcIPVAmQR、VFLQQQcSHVAMSQR。来源于小麦胚胎发育晚期丰富蛋白的多肽分子包括序列为如下的多肽分子：EGIDIDESKFK、EGETVVPGGTGGK、KGGLSTMEESGGER、AAETKDQTGSYLGEK、DQTGSYLGEKTEmAK、AAETKDqTGSYLGEKTEmAK、DQTASTLGEKTEAAK。除此之外，多肽组分包括还包括：来源于淀粉酶抑制剂LPIVVDASGDGAYVcK、EHGAQEGQAGTGAFPR、LQcnGSQVPEAVLR、LTAASITAVcR；来源于乳酸菌细胞壁关联水解酶IAEAnGLSNPNLIIAGK；以及来源于磷酸甘油酸脱氢酶GASQNIIPSSTGAAK。
本发明的发酵果汁醇提物显示治疗或预防炎症性肠炎的活性。通常认为炎症性肠炎包括溃疡性结肠炎与克劳恩病。通过本发明的实施例的数据显示，相比于结肠炎组小鼠，发酵前果汁组、发酵后果汁组、发酵前醇提物组、发酵后醇提物组的小鼠造模后第1天出现不同程度的厌食、懒动、体重下降(参见图7)、大便隐血或血便，但根据小鼠状态与便血情况等指标综合造模损害程度为模型组>发酵前果汁组(发酵前果汁指的是就是小麦胚芽及苹果汁但是尚未经过发酵，下文相同)>发酵后果汁组>发酵前醇提物组>发酵后醇提物。可见发酵前果汁、发酵后果汁、发酵前醇提物、发酵后醇提物均可以抑制小鼠的体重的下降。发酵后醇提物的效果最为明显。发酵后醇提物组的脾脏指数相比于模型组则大大减小，说明发酵后醇提物减缓了由于造模带来的脾脏增大现象。此外发酵后醇提物组的脾脏指数相比于模型组则大大减小，说明发酵后醇提物减缓了由于造模带来的脾脏增大现象。相比正常组，模型组小鼠结肠肠粘膜表面不完整，上皮杯状细胞丢失严重，炎症细胞浸润达粘膜肌层。而给予发酵前果汁组、发酵后果汁组、发酵前醇提物组、发酵后醇提物组处理后结肠粘膜组织病变、上皮杯状细胞丢失、炎症细胞浸润及细胞损伤等均不同程度减轻，结肠粘膜表面相对完整；其中发酵后醇提物组结肠粘膜部分脱落、杯状细胞部分丢失，少量炎症细胞浸润，损伤程度明显减轻。可见，本发明涉及的醇提物可以抑制小鼠的体重的下降、减缓了由于造模带来的脾脏增大现象、发酵后醇提物组处理后结肠粘膜组织病变、上皮杯状细胞丢失、炎症细胞浸润及细胞损伤等均不同程度减轻，结肠粘膜表面相对完整、进一步发酵后醇提物组结肠粘膜部分脱落、杯状细胞部分丢失，少量炎症细胞浸润，损伤程度明显减轻。可见本发明的醇提物显示治疗或预防结肠炎的活性。并且在一定范围内，醇提物给药量越多，该效果越明显。
本发明的醇提物显示治疗或预防痛风性关节炎的活性。本发明的醇提物能够抑制XOD酶活性，并且本发明醇提物抑制XOD酶活性具有明显的剂量依赖性。别嘌醇组与模型组比较，血尿酸值下降明显。低剂量醇提物降低血尿酸值的效果不明显，但中剂量及高剂量组降低则比较明显，尤其是高剂量组降低程度与表嘌呤醇组相当，说明中高剂量的醇提物有非常好的抑制尿酸形成的活性。
实施例
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的药材原料、试剂材料等，如无特殊说明，均可自常规生化试剂商店或药品经营企业购买得到。
实施例1
制备源于小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁的醇溶组分A，过程如下：
1)取新鲜苹果，去皮去核，将果肉切成1～2厘米左右方块，在苹果块中加入0.05％的维生素C、0.01半胱氨酸及1.1倍苹果体积的水，用榨汁机榨汁，将榨出的果汁用80目筛子过滤，弃滤渣，得到苹果汁；
2)取新鲜小麦胚芽，将粉碎后的小麦胚芽以1:10的料液比投入水中并于70℃浸提1h，用搅拌机高速破碎，进行纱布过滤，弃滤渣，得到橙黄色小麦胚芽汁；
3)发酵剂的制备：在无菌条件下，将活化好的乳酸菌菌种(保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌、植物乳杆菌)分别接种在MRS液体培养基(蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母膏0.5％，柠檬酸氢二铵0.2％，葡萄糖2％，吐温80 0.1％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，pH 6.2～6.6)中，在28℃培养24小时后，再取1％种子液转接一次MRS培养基，培养后进行低温离心分离，去除上清液，接着加入灭菌后的生理盐水进行清洗，再次进行离心分离，重复3次菌体以后，加入适当的无菌生理盐水，通过调节最后所得液体的吸光值来确定最终接入果汁中的乳酸菌种子液。以生理盐水为参比，波长为600nm，测得含有菌体的盐水的吸光值需达到1.9以上；
4)以苹果汁:小麦胚芽汁1:1的比例进行添加调配，再按5g/100mL(脱脂奶粉:苹果小麦胚芽混合液)的比例加入脱脂奶粉，加入5％蔗糖，巴氏灭菌(70℃水浴15分钟)后，在混合果汁里接入3％的乳酸菌(其中保加利亚乳杆菌:干酪乳杆菌:植物乳杆菌:瑞士乳杆菌1:1:1:1，于35℃静止培养18小时。发酵结束后，进行纱布过滤后加入0.1％黄原胶、0.1％海藻酸钠、0.3％瓜尔豆胶，经过离心分离与灌装后，得到小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁。
5)将小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁在冷冻干燥机进行干燥成粉末，将干燥粉末溶于75％乙醇中，超声波清洗机超声1h，8,000r/min离心10min，取上清，利用旋转蒸发仪将乙醇及水分挥发干净，所得组分即为醇溶组分A。
实施例2
制备源于小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁的醇溶组分B，过程如下：
1)取新鲜苹果，去皮去核，将果肉切成1～2厘米左右方块，在苹果块中加入0.15％的维生素C、0.015％半胱氨酸及1.25倍苹果体积的水，用榨汁机榨汁，将榨出的果汁用80目筛子过滤，弃滤渣，得到苹果汁；
2)取新鲜小麦胚芽，将粉碎后的小麦胚芽以1:7.5的料液比投入水中并于78℃浸提2h，用搅拌机高速破碎，进行纱布过滤，弃滤渣，得到橙黄色小麦胚芽汁；
3)发酵剂的制备：在无菌条件下，将活化好的乳酸菌菌种(保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌、植物乳杆菌)分别接种在MRS液体培养基(蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母膏0.5％，柠檬酸氢二铵0.2％，葡萄糖2％，吐温80 0.1％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，pH 6.2～6.6)中，在28℃培养24小时后，再取1％种子液转接一次MRS培养基，培养后进行低温离心分离，去除上清液，接着加入灭菌后的生理盐水进行清洗，再次进行离心分离，重复3次菌体以后，加入适当的无菌生理盐水，通过调节最后所得液体的吸光值来确定最终接入果汁中的乳酸菌种子液。以生理盐水为参比，波长为600nm，测得含有菌体的盐水的吸光值需达到1.9以上；
4)以苹果汁:小麦胚芽汁1:3的比例进行添加调配，再按7.5g/100mL(脱脂奶粉:苹果小麦胚芽混合液)的比例加入脱脂奶粉，加入7.5％蔗糖，巴氏灭菌(70℃水浴15分钟)后，在混合果汁里接入6％的乳酸菌(其中保加利亚乳杆菌:干酪乳杆菌:植物乳杆菌:瑞士乳杆菌1.5:1:1:1，于40℃静止培养18～36小时。发酵结束后，进行纱布过滤后加入0.15％黄原胶、0.15％海藻酸钠、0.4％瓜尔豆胶，经过离心分离与灌装后，得到小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁。
5)将小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁在冷冻干燥机进行干燥成粉末，将干燥粉末溶于75％乙醇中，超声波清洗机超声1h，8,000r/min离心10min，取上清，利用旋转蒸发仪将乙醇及水分挥发干净，所得组分即为醇溶组分B。
实施例3
制备源于小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁的醇溶组分C，过程如下：
1)取新鲜苹果，去皮去核，将果肉切成1～2厘米左右方块，在苹果块中加入0.2％的维生素C、0.02％半胱氨酸及1.5倍苹果体积的水，用榨汁机榨汁，将榨出的果汁用80目筛子过滤，弃滤渣，得到苹果汁；
2)取新鲜小麦胚芽，将粉碎后的小麦胚芽以1:5的料液比投入水中并于85℃浸提3h，用搅拌机高速破碎，进行纱布过滤，弃滤渣，得到橙黄色小麦胚芽汁；
3)发酵剂的制备：在无菌条件下，将活化好的乳酸菌菌种(保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌、植物乳杆菌)分别接种在MRS液体培养基(蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母膏0.5％，柠檬酸氢二铵0.2％，葡萄糖2％，吐温80 0.1％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，pH 6.2～6.6)中，在28℃培养24小时后，再取1％种子液转接一次MRS培养基，培养后进行低温离心分离，去除上清液，接着加入灭菌后的生理盐水进行清洗，再次进行离心分离，重复3次菌体以后，加入适当的无菌生理盐水，通过调节最后所得液体的吸光值来确定最终接入果汁中的乳酸菌种子液。以生理盐水为参比，波长为600nm，测得含有菌体的盐水的吸光值需达到1.9以上；
4)以苹果汁:小麦胚芽汁1:3的比例进行添加调配，再按10g/100mL(脱脂奶粉:苹果小麦胚芽混合液)的比例加入脱脂奶粉，加入10％蔗糖，巴氏灭菌(70℃水浴15分钟)后，在混合果汁里接入3％～8％的乳酸菌(其中保加利亚乳杆菌:干酪乳杆菌:植物乳杆菌:瑞士乳杆菌2:1:1:1，于45℃静止培养36小时。发酵结束后，进行纱布过滤后加入0.2％黄原胶、0.2％海藻酸钠、0.5％瓜尔豆胶，经过离心分离与灌装后，得到小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁。
5)将小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁在冷冻干燥机进行干燥成粉末，将干燥粉末溶于75％乙醇中，超声波清洗机超声1h，8,000r/min离心10min，取上清，利用旋转蒸发仪将乙醇及水分挥发干净，所得组分即为醇溶组分C。
实施例4醇提物各组分含量的测定
总蛋白(多肽)含量检测
分别准确称量100mg醇溶组分A、B、C(实施例1～3中获得的)溶于50mL75％乙醇中，醇提物总蛋白含量的测定采用北京全式金生物技术(TransGen Biotech)有限公司的EasyProtein Quantitative Kit进行测定，具体实施步骤按照试剂盒的方法进行。实验测得发酵后醇溶组分A、B、C的总蛋白含量为633.8、293.0、151.5ug/mL，进一步计算得到醇溶组分中蛋白(多肽)含量为31.8％、14.7％、7.6％。
总多酚含量测定
实验原理：多酚与FoLin-CiocaLteu试剂发生特异性反应，反应产物对特定波长的有最大吸收，且吸光值与多酚的量在一定浓度范围内成线性关系。先以标准酚类物质建立标准曲线，再测定待测样品吸光值，据此可求出待测样品中多酚的含量
仪器：紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、微波炉、回流装置、25mL容量瓶、25mL具塞试管、250mL烧瓶
药品：没食子酸标准品100mg、无水乙醇1000mL、无水碳酸钠500g、盐酸500mL、FoLin-CiocaLteu试剂100mL
实验步骤：精确称量没食子酸标准品25mg，用水溶解后定容于250mL容量瓶中，得到0.1mg/mL的标准贮备溶液。分别移取没食子酸标准储备溶液0.0、1.0、2.0、5.0、8.0、、12.0、15.0mL置于25mL具塞试管中，分别加入FoLin-CiocaLteu试剂1mL，摇匀后再分别加入质量分数12％Na2CO3溶液2mL，用水定容至25mL，摇匀。平行三组。室温下避光反应2h后，在765nm波长下测定吸光度。以没食子酸标准溶液的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，制作标准曲线，如图1所示。吸取2.00mL 200μg/mL醇提物溶液于25mL具塞试管中，分别加入FoLin-CiocaLteu试剂1mL及质量分数为12％的碳酸钠溶液2mL并定容至刻度，在室温下避光反应2h，在765nm波长处测定样品的吸光度，并根据工作曲线来计算提取液中的总多酚含量。
实验结果：不同浓度的连苯三酚所测得的吸光度值如图1所示，实验测定发酵后醇提物质的吸光度值为0.36、0.4461、0.52，根据标准曲线计算得25mL醇溶组分A、B、C的多酚含量为240μg、304μg、343μg，进一步计算得醇溶组分总多酚含量为60.0％、76.0％、86.0％。
糖含量检测
总糖含量使用苯酚-硫酸法进行测定，还原糖用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定，多糖含量＝总糖-还原糖。
(1)总糖测定
实验原理：多糖在硫酸作用下，先水解成单糖，并脱水生成糖醛衍生物，与苯酚生成橙黄色溶液，在490nm处有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。
试剂：浓硫酸(分析纯)、5％苯酚溶液(分析纯)、标准葡萄糖。
操作步骤：①制作标准曲线：准确称取105℃烘干至恒重的葡萄糖50mg于500ml容量瓶中配成0.1mg/ml的标准溶液，用蒸馏水分别配成0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1mg/ml。1ml标准液分别加入5％苯酚溶液1ml，并迅速加入浓硫酸5ml，静置10min。摇匀，30℃放置30min后于490nm测定OD值，以葡萄糖含量为横坐标，OD值为纵坐标，制作得到标准曲线，如图2所示。②样品含量测定：吸取1.0ml 10mg/mL醇溶组分样品溶液，按照上述步骤操作测定OD490，并代入标准曲线计算样品的总糖含量。
(2)还原糖测定
实验原理：碱性条件下，DNS可与还原糖反应生成3-氨基-5-硝基水杨酸。此物质在煮沸条件下成棕红色，且颜色深浅在一定范围内与还原糖含量成线性关系。据此可通过测定OD值确定还原糖含量。
试剂及配制：浓度为1mg/ml的葡萄糖标准溶液。DNS显色液：称取3.25g DNS溶于少量蒸馏水中并转移至500ml容量瓶中，加入2mol/L的NaOH溶液162.5ml，再加入7.5ml的丙三醇，摇匀，加蒸馏水定容至500ml，摇匀。
操作步骤①标准曲线制作：在6支试管中分别加入1mg/ml葡萄糖标准溶液0.00ml，0.10ml，0.20ml，0.30ml，0.40ml，0.50ml，补蒸馏水至0.5ml，然后加入DNS试剂1.5ml，充分混匀。置于沸水浴中煮沸5min，然后迅速流水冷却，并分别向试管中加入4ml蒸馏水，混匀。在540nm处读OD值。以葡萄糖浓度(μg/ml)为横坐标，以OD值为纵坐标制作标准曲线，如图3所示，得到其线性回归方程。②样品含量测定：吸取0.5ml10mg/mL醇溶组分样品溶液，按照上述步骤操作测定OD值，并代入回归方程中计算样品中的还原糖含量。
(3)实验结果
利用两种方法分别测得1.0ml 10mg/mL醇溶组分A、B、C样品溶液中的总糖含量为0.6325mg、0.7468mg、0.8015mg，即醇溶组分A、B、C样品溶液中的总糖含量(m/m)为6.3％、7.5％、8.0％；0.5ml10mg/mL醇溶组分A、B、C样品溶液的还原糖含量(m/m)为0.07125mg、0.08185mg、0.08456，即醇溶组分A、B、C样品溶液中的还原糖含量(m/m)为1.4％、1.6％、1.7％，进一步计算出为醇溶组分A、B、C样品溶液中的多糖含量为4.9％、5.9％、6.3％。
灰分含量检测
仪器：马福炉；坩埚钳；带盖坩埚(石英坩埚或瓷坩埚)；分析天平；干燥器。
测定步骤：坩埚用体积分数为20﹪的盐煮1～2h，洗净晾干后，用三氯化铁与蓝墨水的混合夜在坩埚外壁及盖上写上编号。置于马福炉中，在(550±25)℃下灼烧0.5h，冷至200℃一下后，取出。放入干燥器中冷却至室温，准确称量，并反复灼烧至恒重(两次称重之差不超过0.5mg)。准确称取1g醇溶组分量的坩埚中，先在沸水浴上蒸干，再进行炭化。小火加热使试样充分炭化至无烟。炭化后的试样置马福炉中，在(550±25)℃下灼烧4h。冷至200℃以下后取出，放入干燥器中冷却30min。在称量前如灼烧残渣有碳粒时，应向试样中滴入少许水湿润，使结块松散，蒸出水分再次灼烧至无碳粒即灰化完全，冷至200℃以下，取出放入干燥器中冷却30min后，准确称量。反复灼烧至前后两次称量相差不超过0.5mg即为恒重。醇溶组分的灰分按以下公式进行计算：
X＝(M3-M1)/(M2-M1)*100﹪
式中X----样品中总灰分的含量；M1--空坩埚的质量，g；M2---样品和坩埚的质量，g；M3---残灰和坩埚的质量，g。
实验结果：实验测得1g样品中残灰的质量为12.5mg、15.4mg、18.3mg，进一步计算出为醇溶组分A、B、C样品溶液中的灰分含量为1.3％、1.6％、1.8％。
实施例5蛋白质或多肽组分定性检测
蛋白及多肽采用Tricine-SDS-PAGE分析，具体步骤如下：
试剂及缓冲液：AB-3浓缩胶:9.6g丙烯酰胺0.3g甲叉双丙烯酰胺溶于20ml水(49.5％T,3％Cmixture)；AB-6分离胶:9.3g丙烯酰胺0.6g甲叉双丙烯酰胺溶于20ml水.(49.5％T,6％Cmixture)；凝胶缓冲液:1X 2.422gTris0.02gSDS溶于20ml水,HCL调节pH＝8.45.样品缓冲液:1X12％SDS,6％mercaptoethanol,30％glycerol,0.05％coomassieblue G-250,150mMTris\HCL(pH＝7.0)；阴极缓冲液:1X 1.0MTris 1.0MTricine1％SDS pH8.25；阳极缓冲液:1X 1.0MTris 0.225MHCL pH＝8.9；固定液:250ml甲醇,50ml冰醋酸,0.05mol醋酸铵加水定容500ml.(0.7mm,30min)；染色液:0.025％考马斯亮蓝G-250 10％冰醋酸.(0.7mm,60min)；脱色液:10％冰醋酸.(0.7mm,2h或者过夜)；配胶:0.07×14×14cm两块胶的用量.
(一)Separating gel 16％gel
1.AB-6:5ml；2.凝胶缓冲液:5ml；3.Glycerol:1.5g；4.上述加水至15ml；5.10％APS 50ul；6.TEMED 5ul
(二)Spacer gel 10％gel
1.AB-3:600ul；2.凝胶缓冲液:1ml；3.Glycerol:0.3g；4.上述加水至3ml5.10％APS 15ul；6.TEMED 1.5ul
(三)Stacking gel 4％gel
1.AB-3:500ul；2.凝胶缓冲液:1.5ml；3.上述加水至6ml；4.10％APS 45ul；5.TEMED 4.5ul
上样：取30μL发酵前后10mg/mL醇提物溶液加入6×Loading buffer，振动混合5min，100℃水浴5min，10000r/min离心5min备用；采用Tricine-SDS-PAGE电泳，电泳上样量为20μL，30v恒压电泳1h,100V电泳至溴酚蓝到达底部；取出胶片用2.5％的考马斯亮兰染色4h，用甲醇/冰醋酸脱色液脱至透明。胶片采用UVP凝胶成像仪(Ultra-Violet公司产品)摄像及分析。
结果如图4所示：发酵前的多肽片段主要集中在1kDa～20kDa，发酵后的多肽片段主要集中在1kDa～15kDa。图中，利用“后”表示发酵后的条带，利用“前”表示发酵前的条带，从图4的结果可以看出，发酵前后多肽片段明显不同。
质谱分析
将以上Tricine-SDS-PAGE得到的蛋白条带用质谱分析：MALDI-TOF-MS为Bruker公司的一级MS质谱，使用MS 2k V反射模式采集数据，加速电压20k V，质量扫描范围700～3500m/z，误差≤0.1Da。二级MS/MS质谱数据采用MS/MS 2k V反射模式，从一级谱图中选择信噪比大于20的质谱峰。本实验所用[M+H]+均为单电荷峰质量数。Nano-ESI-MS/MS为英国Micromass公司的正交加速电喷雾串联质谱仪。对GSGPs进行Nano-ESI-MS/MS分析，串联质谱图经Micromass专用软件处理后，用Spectrum List通过Mascot查询NCBI、SWISSPROT等数据库，经Mas Seq软件分析，得到的序列：
来源于低分子量谷蛋白VFLQqqcSPVAmPQSLAR、SQMLQQSIcHVMQQQccQQLR、VFLqQQcIPVAmQR、VFLQQQcSHVAMSQR；
来源于小麦avenin蛋白：QQQPQQQWQGMYQPQQPAQHESIR、cQAIHNVAEAIR、QLSQIPEQFR、DKTGSVLQQAGETVVNAVVGAK、DAVANTLGmGGDNATKDTTTGATTK；
来源于小麦胚胎发育晚期丰富蛋白EGIDIDESKFK、EGETVVPGGTGGK、KGGLSTMEESGGER、AAETKDQTGSYLGEK、DQTGSYLGEKTEmAK、AAETKDqTGSYLGEKTEmAK、DQTASTLGEKTEAAK；
来源于淀粉酶抑制剂LPIVVDASGDGAYVcK、EHGAQEGQAGTGAFPR、LQcnGSQVPEAVLR、LTAASITAVcR；
来源于乳酸菌细胞壁关联水解酶IAEAnGLSNPNLIIAGK；
来源于磷酸甘油酸脱氢酶GASQNIIPSSTGAAK；
实施例6发酵后高效液相色谱-串联质谱检测
液相材料与条件：进样量：30μL；柱子：ZORBAX Eclipse Plus C18；流动相：A：1％醋酸水或0.1％TFA；B：100％乙腈；流量：0.60mL/min；检测方法：HPLC-DAD-ESI-MS/MS，检测波长：280/360nm
洗脱条件：
Min A B
0-20 87％ 13％
20-55 87％～55％ 13％-45％
55-90 55％～0％ 45％-100％
90-95 0-87％ 100％-13％
检测结果如图5所示，发酵后组分有系列峰，经进一步检测为主要为多肽成分及麦黄酮(小麦黄素)、绿原酸、咖啡酸、芹菜素糖苷组分、阿魏酸三聚体及山奈素糖苷。
实施例7缓解结肠炎实验
实验动物为雄性SPF级C57/B6雄性小鼠(30只，8周龄，体重30±1.8g)购自北京维通利华实验动物技术有限公司。动物饲养于清华大学实验动物中心，培养环境为12h光照+12h黑暗，温度23℃，相对湿度50％～70％，自由采食和饮水。小鼠在经过一周的适应性饲养后，随机分为6组：空白对照组、模型组、发酵前果汁组、发酵后果汁组、发酵前醇提物组、发酵后醇提物组，每组各5只。除空白对照组饮用蒸馏水外其余25只小鼠饮用均饮用含3％DSS，持续8d，DSS饮水开始后直到实验结束。同时，发酵前果汁组、发酵后果汁组、发酵前醇提物组、发酵后醇提物组每天分别给予250mg/kg发酵前果汁、发酵后果汁、发酵前醇提取物、发酵后醇提取物，经口灌胃。实验小鼠每天称重，观察，根据体重下降、大便性状、隐血情况和动物总体状况评分相加，得出每只小鼠的疾病活动指数。
实验结束后处死小鼠，取血、脾脏，取整段结肠测量长度，而后取1.0cm远端结肠组织样本采用10％福尔马林固定，并采用石蜡包埋，切片采用苏木精-伊红染色法对结肠组织进行染色。切片在尼康光学显微镜(Nikon eclipse80i)下观察并拍照。
结果发现：
(1)对小鼠培养表观状态的影响
正常组的小鼠反应灵活，正常进食，无腹泻及血便，大便呈球形或条形，未出现异常情况。模型组、发酵前果汁组、发酵后果汁组、发酵前醇提物组、发酵后醇提物组的小鼠造模后第1天出现不同程度的厌食、懒动、体重下降(参见图7)、大便隐血或血便，但根据小鼠状态与便血情况等指标综合造模损害程度为模型组>发酵前果汁组>发酵后果汁组>发酵前醇提物组>发酵后醇提物。
(2)对小鼠脾脏指数(小鼠脾脏重量/小鼠体重)的影响
结肠炎的发生过程往往伴随脾脏的增大。由图8所示，模型组的小鼠脾脏指数明显大于健康组，发酵前果汁组、发酵后果汁组、发酵前醇提物组的脾脏指数未见减小，反而比模型组略微增大，而发酵后醇提物组的脾脏指数相比于模型组则大大减小，说明发酵后醇提物减缓了由于造模带来的脾脏增大现象。
(3)对小鼠结肠长度的影响
小鼠的结肠长度如图9所示，1～6分别为健康组、DSS造模组、发酵前果汁、发酵后果汁、发酵前醇溶组分、发酵后醇溶组分的结肠及其长度测量结果。如图所示小鼠造模后，结肠充血、水肿、溃疡面积、结肠厚度增加等均能使结肠长度缩短。正常组比较，模型组的小鼠造模后，结肠充血、水肿、溃疡面积、结肠厚度增加等均能使结肠长度缩短。与健康组比较，结肠长度明显缩短，结肠长宽比明显减小。发酵前果汁组的结肠长度相比模型组并没有好转，而发酵后果汁组、发酵前醇提物组、发酵后醇提物组结肠长度相比模型组均有所增长，结肠健康程度也高于模型组。此外，正常组肉眼观察结肠黏膜无明显水肿、糜烂和溃疡形成，模型组的小鼠肠壁可见明显的充血和水肿，沿肠系膜纵向剖开可见肠壁黏膜有散在的溃疡点和糜烂，病变主要累及远端结肠，以直肠病变最严重。酵后果汁组、发酵前醇提物组、发酵后醇提物组结肠长度相比模型组均有好转。
(4)对小鼠结肠组织HS的影响
结肠病理切片结果如图10显示，正常小鼠肠粘膜绒毛表面完整，固有层可见小血管、毛细血管、淋巴管；粘膜下层疏松结缔组织，富有血管、淋巴管，肌层和浆膜层次清晰；隐窝正常，无杯状细胞减少，个别有轻度炎性细胞浸润。相比正常组，模型组小鼠结肠肠粘膜表面不完整，上皮杯状细胞丢失严重，炎症细胞浸润达粘膜肌层。而给予发酵前果汁组、发酵后果汁组、发酵前醇提物组、发酵后醇提物组处理后结肠粘膜组织病变、上皮杯状细胞丢失、炎症细胞浸润及细胞损伤等均不同程度减轻，结肠粘膜表面相对完整；其中发酵后醇提物组结肠粘膜部分脱落、杯状细胞部分丢失，少量炎症细胞浸润，损伤程度明显减轻。
(5)对小鼠影响的综合打分
图11示出了发酵前后果汁、醇提物缓解结肠炎比较，如图10所示，根据小鼠的状态、脾脏指数、结肠长度、以及组织状态综合打分，可以得到各组实验小鼠的综合病理恢复状态。由图可以看出，发酵前果汁组、发酵后果汁组、发酵前醇提物组、发酵后醇提物组相比模型组均有所好转，其中以发酵后醇提物组的好转程度最为显著。
实施例8不同浓度醇提物缓解结肠炎实验
小鼠在经过一周的适应性饲养后，随机分为6组：空白对照组、模型组、醇提物高、中、低(500、250、50mg/kg·d)剂量组，每组各5只。除空白对照组饮用蒸馏水外其余25只小鼠饮用均饮用含3％DSS，持续8d，DSS饮水开始后直到实验结束。经口灌胃。实验小鼠每天称重，观察，根据体重下降、大便性状、隐血情况和动物总体状况评分相加，得出每只小鼠的疾病活动指数，结果如图12所示。
实施例9不同发酵时间醇溶组分的抗结肠炎活性
按照实施例1中的方法进行接种发酵，发酵时间分别为12h、24h、36、48h，得不同时间发酵的小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁。将小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁在冷冻干燥机进行干燥成粉末，将干燥粉末溶于75％乙醇中，超声波清洗机超声1h，8,000r/min离心10min，取上清，利用旋转蒸发仪将乙醇及水分挥发干净，得不同发酵时间的醇溶组分。
小鼠在经过一周的适应性饲养后，随机分为6组：空白对照组、模型组、不同发酵时间12h、24h、36、48h组(各250mg/kg·d)，每组各5只。除空白对照组饮用蒸馏水外其余25只小鼠饮用均饮用含3％DSS，持续8d，DSS饮水开始后直到实验结束。经口灌胃。实验小鼠每天称重，观察，根据体重下降、大便性状、隐血情况和动物总体状况评分相加，得出每只小鼠的疾病活动指数，结果如图13所示。
结果表明：12h时醇溶组分已经有一定的缓解结肠炎的作用，随着发酵时间的增加，其发酵醇溶组分的缓解作用在增加，但24h、36h、48h缓解结肠炎的作用差距并不大。
实施例10缓解痛风性关节炎
在高尿酸血症和痛风患者体内，氧化型黄嚓吟氧化酶(XOD)水平增加，促进了尿酸的产生,使氧自由基产生过量，产生氧化应激，所以对高尿酸血症和痛风患者来说，抑制XO活性，防止自由基形成，避免尿酸过量产生是非常重要的。
1.XOD酶抑制实验
黄嘌呤氧化酶(XOD)测试盒(货号A002)购于南京建成生物工程有限公司，实验仪器、材料及测定方法按照试剂盒说明书执行。实验分为两步，第一步测定本发明的醇提物的XOD酶抑制活性并与市面上公认的抗痛风药物比较；第二步对本发明醇提物进行稀释在测定其XOD酶抑制活性。实验结果如图14所示，由图14(A)可以看出空白组没有XOD活性颜色很浅，无XOD抑制剂组体现出很强的XOD活性，因此颜色很深。别嘌呤醇组颜色较浅，说明其XOD酶抑制活性较强，而本发明醇提物组的颜色与别嘌呤醇组相当，说明其抑制XOD酶活性也与别嘌呤醇组相当。由图14(B)可以看出，醇提物稀释两倍后其抑制变弱，稀释5倍及10倍后基本无XOD抑制活性，说明本发明醇提物抑制XOD酶活性具有明显的剂量依赖性。
2.降尿酸活性
实验动物及试剂：实验动物为雄性SPF级C57/B6雄性小鼠(30只，8周龄，体重30±1.8g)购自北京维通利华实验动物技术有限公司。动物饲养于清华大学实验动物中心，培养环境为12h光照+12h黑暗，温度23℃，相对湿度50％～70％，自由采食和饮水。尿酸检测试剂盒购自于南京建成生物工程有限公司。
实验分组：雄性小鼠60只，按体重随机分为空白组、模型组、西药别嘌醇对照组(50mg/kg·d)、醇提物高、中、低(500、250、50mg/kg·d)剂量组，每组10只。灌胃给药，连续7d，空白组给予相同剂量的生理盐水。末次给药2h后，腹腔注射300mg/kg氧嗪酸钾盐造成小鼠高尿酸血症，空白组腹腔注射同等体积的生理盐水。注射1h后，各组小鼠摘眼球取血，水浴(37℃)中静置至分层后，1800r/min离心10min，取血清测定血尿酸值。
实验结果如图15所示：结果模型组与空白组比较，血尿酸明显升高，差异比较显著性，证明造模成功。别嘌醇组与模型组比较，血尿酸值下降明显。低剂量组降低不明显，中剂量及高剂量组降低则比较明显，尤其是高剂量组降低程度与表嘌呤醇组相当，说明中高剂量的醇提物有非常好的抑制尿酸形成的活性。

Claims (14)

1.一种源于小麦胚芽苹果汁乳酸菌发酵果汁醇提物，其包括：
多肽组分；
多酚组分；以及
糖组分，
所述多肽组分包括：来源于低分子量谷蛋白的多肽分子以及来源于小麦胚胎发育晚期丰富蛋白的多肽分子，
所述来源于低分子量谷蛋白的多肽分子包括序列为如下的多肽分子：
VFLQQQCSPVAMPQSLAR、SQMLQQSICHVMQQQCCQQLR、VFLQQQCIPVAMQR、VFLQQQCSHVAMSQR；
所述来源于小麦胚胎发育晚期丰富蛋白的多肽分子包括序列为如下的多肽分子：
EGIDIDESKFK、EGETVVPGGTGGK、KGGLSTMEESGGER、AAETKDQTGSYLGEK、DQTGSYLGEKTEMAK、AAETKDQTGSYLGEKTEMAK、DQTASTLGEKTEAAK；
所述多酚组分包括：麦黄酮、绿原酸、咖啡酸、芹菜素糖苷组分、阿魏酸三聚体及山奈素糖苷中的一种或多种；
其中，
所述多肽组分的含量占全部醇提物的5～40重量％；
所述多酚组分的含量占全部醇提物的50～90重量％；
所述糖组分的含量占全部醇提物的3～10重量％，
其中，多肽组分、多酚组分以及糖组分的总量不大于100重量％；
所述醇提物由苹果汁与小麦胚芽汁混合后接入乳酸菌发酵后溶于乙醇中醇提得到，其中所述乳酸菌为保加利亚乳杆菌:干酪乳杆菌:植物乳杆菌:瑞士乳杆菌1:1:1:1、1.5:1:1:1或2:1:1:1。
2.根据权利要求1所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述多肽组分的含量占全部醇提物的6～35重量％。
3.根据权利要求1所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述多肽组分的含量占全部醇提物的7～32重量％。
4.根据权利要求1所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述多肽组分的含量占全部醇提物的7.6～31.8重量％。
5.根据权利要求1所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述多酚组分的含量占全部醇提物的55～88重量％。
6.根据权利要求1所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述多酚组分的含量占全部醇提物的57～85重量％。
7.根据权利要求1所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述多酚组分的含量占全部醇提物的60～82重量％。
8.根据权利要求1所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述糖组分的含量占全部醇提物的5～9重量％。
9.根据权利要求1所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述糖组分的含量占全部醇提物的6～8.5重量％。
10.根据权利要求1所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述糖组分的含量占全部醇提物的6.3～8.0重量％。
11.根据权利要求1～10中任一项所述的发酵果汁醇提物，其中，
所述多肽组分包括还包括：
来源于淀粉酶抑制剂LPIVVDASGDGAYVCK、EHGAQEGQAGTGAFPR、LQCNGSQVPEAVLR、LTAASITAVCR；
来源于乳酸菌细胞壁关联水解酶IAEANGLSNPNLIIAGK；以及
来源于磷酸甘油酸脱氢酶GASQNIIPSSTGAAK。
12.根据权利要求1～11中任一项所述的发酵果汁醇提物用于制备用于治疗或预防炎症性肠病的药物的用途。
13.根据权利要求1～11中任一项所述的发酵果汁醇提物用于制备用于治疗或预防痛风性关节炎的药物的用途。
14.根据权利要求1～11中任一项所述的发酵果汁醇提物用于制备用于治疗或预防结肠炎的药物的用途。
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