CN108184547B - 金针菇液体菌种的培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供金针菇液体菌种的培养方法,该方法包括摇瓶菌种的培养和发酵罐培养步骤,在培养过程中向液体培养基中合理添加添加剂,得到的液体菌种品质好,产量高,经由固体栽培时可以更好的吸收营养物质,得到的金针菇子实体中蛋白质含量高,营养价值好,经济效益高。
Description
技术领域
本发明属于食用菌培植技术领域,特别涉及金针菇液体菌种的培 养方法。
背景技术
金针菇既是一种美味食品,又是较好的保健食品,其富含B族维 生素、维生素C、碳水化合物、矿物质、胡萝卜素、多种氨基酸、植 物血凝素、多糖、牛磺酸、香菇嘌呤、麦冬甾醇、细胞溶解毒素、冬 菇细胞毒素等,对增强智力尤其是对儿童的身高和智力发育有良好的 作用,国外称之为“增智菇”。金针菇具有很高的药用价值,经常使用 金针菇能够增强机体对癌细胞的抗御能力,常食金针菇还能降胆固醇, 预防肝脏疾病和肠胃道溃疡,增强机体正气,防病健身。总之,金针 菇营养价值高、口味好,颇受广大消费者的青睐,市场需求量不断增 加,从而推动金针菇的产业发展向规模化、工业化前进。
液体培养具有很多如周期短、产量高、占地面积少、便于操控、 生产条件稳定等优点,有关金针菇菌种液体培养技术的研究虽有一些 报道,但多围绕菌丝的生长状态进行考察,较少考虑得到的液体菌种 的本身性能的优良性,更较少有对经由液体菌种培养来提高金针菇整 体生产性能的方面进行考察的研究。
发明内容
为了解决上述技术问题,本发明提供金针菇液体菌种的培养方法, 技术方案为:
本发明提供金针菇液体菌种的培养方法,包括如下步骤:
(1)摇瓶菌种的培养,将斜面活化后的母种接种于液体培养基中, 置于24-26℃恒温培养箱中震荡培养,摇床转速为160-180r/min,通 气量为:每分钟每1mL液体培养基通入0.2-0.3mL的气体,培养3~4d, 得到摇瓶菌种;在培养1天后,向液体培养基中添加摇瓶中加入的液 体培养基总重量0.05-0.08倍的第一添加剂;在培养2天后,向液体 培养基中添加摇瓶中加入的液体培养基总重量0.10-0.17倍的第二添 加剂;
(2)发酵罐培养,取步骤(1)制备的摇瓶菌种按照10-15%的体积 比接种量接种至装有液体培养基的发酵罐进行发酵培养,保证Ph值为 4.5-7.5,培养温度为20-28℃,通气量为2.7-4.1L/min;在培养1天 后,向液体培养基中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.15-0.21 倍的第一添加剂;在培养3天后,向液体培养基中添加发酵罐中加入 的液体培养基总重量0.2-0.3倍的第三添加剂;在培养5天后,向液 体培养基中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.6-0.8倍的第四 添加剂;
其中,液体培养基包括如下重量份的各成分:碳源15-25、氮源9-16、 维生素B 1-2、磷酸二氢钾0.1-0.5、过磷酸钙1-1.5、聚氧丙烯甘油 醚2-4、水63-75;
所述第一添加剂包括如下重量份的各成分:碳源1-2、氮源1-2;
所述第二添加剂包括如下重量份的各成分:氮源1-2、氯化锌 0.2-0.4;
所述第三添加剂包括如下重量份的各成分:氯化锌1-2、谷胱甘肽0.1-0.2;
所述第四添加剂包括如下重量份的各成分:氮源2-3、谷胱甘肽 0.2-0.4、氯化锌0.5-0.7。
本发明所提供的金针菇液体菌种的制备方法,经过大量试验得到 培养过程中的合理技术参数,利用本发明所述的制备方法得到的金针 菇液体菌种,品质好,产量高,经由固体栽培时可以更好的吸收营养 物质,得到的金针菇子实体中蛋白质含量高,营养价值好,经济效益 高。
进一步地,所述碳源为重量份数比为5:8的玉米淀粉和红薯粉的 混合物。
进一步地,所述氮源为重量份数比为2:3的花生壳酶解液和冷榨 黄豆饼粉。
进一步地,所述花生壳酶解液的制备方法如下:取花生壳洗净晾 干,粉碎后加入到花生壳重量20倍的枸缘酸钠水溶液中,升温至 80-90℃搅拌1h后降温至35-45℃得混合溶液,向混合溶液中加入等重 量的纤维素酶和胰蛋白酶混合物,35-45℃搅拌12-14h,然后离心收集 上清液,即得所述花生壳酶解液。
上述培养液的改进,在配合本发明的其他培养条件基础上,提高 了菌球的产量和质量。
更进一步地,所述步骤(2)的具体培养条件如下:培养第1~2 天,保证Ph值为4.5-4.7,通气量为2.7-2.9L/min,温度为26-28℃; 培养第3~4天,保证Ph值为4.8-5.3,通气量为3.5-4.1L/min,温 度为21-25℃;培养第5~6天,保证Ph值为6.5-7.5,通气量为 3.2-4.0L/min,温度为20-23℃。
更进一步地,所述步骤(1)中,通气方式如下:培养第1d连续 通入5-7h氧气,培养第2d间隔通入,每隔40min通入20min氧气, 累积通入氧气的时间为5-7h,培养第3~4d间隔通入,每隔2h通入 30min氧气,累积通入氧气的时间为3-5h,剩余时间通入空气。所述 步骤(2)中,通气方式如下:培养的第2和第4~6天按照2h的间隔 分批通入20min氧气,累积通入时间为2-3h,剩余时间通入空气。
经由上述通气方面的方法优化,得到的液体菌种活性高,在固体 栽培过程中,出菇时间短,产量高。
更进一步地,所述第一添加剂还包括重量份数为0.5-1的臭氧生 理盐水。优选地,所述臭氧生理盐水为现配制的,配制方法为:向生 理盐水中通入臭氧气体至臭氧在生理盐水中的浓度为10-20ug/mL。
经由上述进一步的改进优化,得到的液体菌种功能优良,固体栽 培后得到的金针菇长势整齐,菌柄和菌盖的大小适宜,商品性状好, 大幅提高经济效益。
更进一步地,所述培养方法还包括一级液体菌种培养前对金针菇 初始母种进行培养得到金针菇母种溶液,具体培养工艺为:将金针菇 初始母种接入斜面培养基中,于26-28℃中培养5-6天,所述斜面培养 基包括如下重量份的各成分:麦芽糖醇0.5-1.5、泛酸钙4-7、氯化铵 0.3-1.1、月桂酰肌氨酸1-2、玉米渣15-19、硫酸铁0.5-1.5、琼脂 0.5-1.5、水64-77。
本发明所提供的金针菇液体菌种的制备方法,得到的金针菇液体 菌种品质好,产量高,活性强,性能优良,经过常规固体栽培后得到 的金针菇长势均匀,蛋白质含量高,生物效率高,出菇时间短,且产 品状态符合商品需求,经济效益高。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的描述,本发明没有具体说明 的步骤均可按照常规培养方法进行。
实施例1
提供金针菇液体菌种的培养方法,如下步骤:
(1)摇瓶菌种的培养,将斜面活化后的母种接种于液体培养基中, 置于26℃恒温培养箱中震荡培养,摇床转速为160r/min,通气量为: 每分钟每1mL液体培养基通入0.2mL的气体,培养4d,得到摇瓶菌种; 在培养1天后,向液体培养基中添加摇瓶中加入的液体培养基总重量 0.05倍的第一添加剂;在培养2天后,向液体培养基中添加摇瓶中加 入的液体培养基总重量0.10倍的第二添加剂;
(2)发酵罐培养,取步骤(1)制备的摇瓶菌种按照15%的体积比 接种量接种至装有液体培养基的发酵罐进行发酵培养,保证Ph值为 4.5-7.5,培养温度为20-28℃,通气量为2.7-4.1L/min;在培养1天 后,向液体培养基中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.15倍的 第一添加剂;在培养3天后,向液体培养基中添加发酵罐中加入的液 体培养基总重量0.2倍的第三添加剂;在培养5天后,向液体培养基 中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.6倍的第四添加剂;
其中,液体培养基包括如下重量份的各成分:碳源15、氮源16、维 生素B 1、磷酸二氢钾0.5、过磷酸钙1.5、聚氧丙烯甘油醚4、水75;
所述第一添加剂包括如下重量份的各成分:碳源1、氮源2;
所述第二添加剂包括如下重量份的各成分:氮源1、氯化锌0.4;
所述第三添加剂包括如下重量份的各成分:氯化锌2、谷胱甘肽0.1;
所述第四添加剂包括如下重量份的各成分:氮源3、谷胱甘肽0.4、 氯化锌0.5。
实施例2
提供金针菇液体菌种的培养方法,如下步骤:
(1)摇瓶菌种的培养,将斜面活化后的母种接种于液体培养基中, 置于24℃恒温培养箱中震荡培养,摇床转速为180r/min,通气量为: 每分钟每1mL液体培养基通入0.3mL的气体,培养3d,得到摇瓶菌种; 在培养1天后,向液体培养基中添加摇瓶中加入的液体培养基总重量 0.08倍的第一添加剂;在培养2天后,向液体培养基中添加摇瓶中加 入的液体培养基总重量0.17倍的第二添加剂;
(2)发酵罐培养,取步骤(1)制备的摇瓶菌种按照10%的体积比 接种量接种至装有液体培养基的发酵罐进行发酵培养,保证Ph值为 4.5-7.5,培养温度为20-28℃,通气量为2.7-4.1L/min;在培养1天 后,向液体培养基中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.21倍的 第一添加剂;在培养3天后,向液体培养基中添加发酵罐中加入的液 体培养基总重量0.3倍的第三添加剂;在培养5天后,向液体培养基 中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.8倍的第四添加剂;
其中,液体培养基包括如下重量份的各成分:碳源25、氮源9、维 生素B 2、磷酸二氢钾0.1、过磷酸钙1、聚氧丙烯甘油醚2、水63;
所述第一添加剂包括如下重量份的各成分:碳源2、氮源1;
所述第二添加剂包括如下重量份的各成分:氮源2、氯化锌0.2;
所述第三添加剂包括如下重量份的各成分:氯化锌1、谷胱甘肽0.2;
所述第四添加剂包括如下重量份的各成分:氮源2、谷胱甘肽0.2、 氯化锌0.7;
其中,所述碳源为重量份数比为5:8的玉米淀粉和红薯粉的混合物; 所述氮源为重量份数比为2:3的花生壳酶解液和冷榨黄豆饼粉。
实施例3
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例2区别在于,进一步 限定,所述花生壳酶解液的制备方法如下:取花生壳洗净晾干,粉碎 后加入到花生壳重量20倍的枸缘酸钠水溶液中,升温至80℃搅拌1h 后降温至45℃得混合溶液,向混合溶液中加入等重量的纤维素酶和胰 蛋白酶混合物,45℃搅拌12h,然后离心收集上清液,即得所述花生 壳酶解液。
实施例4
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例2区别在于,进一步 限定,所述花生壳酶解液的制备方法如下:取花生壳洗净晾干,粉碎 后加入到花生壳重量20倍的枸缘酸钠水溶液中,升温至90℃搅拌1h 后降温至35℃得混合溶液,向混合溶液中加入等重量的纤维素酶和胰 蛋白酶混合物,35℃搅拌14h,然后离心收集上清液,即得所述花生壳 酶解液。
实施例5
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例1区别在于,进一步 限定,所述步骤(2)的具体培养条件如下:培养第1~2天,保证Ph 值为4.5,通气量为2.7L/min,温度为26℃;培养第3~4天,保证 Ph值为4.8,通气量为3.5L/min,温度为25℃;培养第5~6天,保 证Ph值为6.5,通气量为3.2L/min,温度为20℃;所述步骤(1)中, 通气方式如下:培养第1d连续通入5h氧气,培养第2d间隔通入,每 隔40min通入20min氧气,累积通入氧气的时间为5h,培养第3~4d 间隔通入,每隔2h通入30min氧气,累积通入氧气的时间为5h,剩余 时间通入空气;所述步骤(2)中,通气方式如下:培养的第2和第4~ 6天按照2h的间隔分批通入20min氧气,累积通入时间为3h,剩余时 间通入空气。
实施例6
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例3区别在于,进一步 限定,所述步骤(2)的具体培养条件如下:培养第1~2天,保证Ph 值为4.7,通气量为2.9L/min,温度为28℃;培养第3~4天,保证 Ph值为5.3,通气量为4.1L/min,温度为21℃;培养第5~6天,保 证Ph值为7.5,通气量为4.0L/min,温度为23℃;所述步骤(1)中, 通气方式如下:培养第1d连续通入7h氧气,培养第2d间隔通入,每 隔40min通入20min氧气,累积通入氧气的时间为7h,培养第3~4d 间隔通入,每隔2h通入30min氧气,累积通入氧气的时间为3h,剩余 时间通入空气;所述步骤(2)中,通气方式如下:培养的第2和第4~ 6天按照2h的间隔分批通入20min氧气,累积通入时间为2h,剩余时 间通入空气。
实施例7
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例1区别在于,进一步 限定,所述第一添加剂还包括重量份数为0.5的臭氧生理盐水;所述 臭氧生理盐水为现配制的,配制方法为:向生理盐水中通入臭氧气体 至臭氧在生理盐水中的浓度为20ug/mL。
实施例8
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例5区别在于,进一步 限定,所述第一添加剂还包括重量份数为1的臭氧生理盐水;所述臭 氧生理盐水为现配制的,配制方法为:向生理盐水中通入臭氧气体至 臭氧在生理盐水中的浓度为10ug/mL。
对照实施例1
提供金针菇液体菌种的培养方法,如下步骤:
(1)摇瓶菌种的培养,将斜面活化后的母种接种于液体培养基中, 置于26℃恒温培养箱中震荡培养,摇床转速为160r/min,通气量为: 每分钟每1mL液体培养基通入0.2mL的气体,培养4d,得到摇瓶菌种;
(2)发酵罐培养,取步骤(1)制备的摇瓶菌种按照15%的体积比 接种量接种至装有液体培养基的发酵罐进行发酵培养,保证Ph值为 4.5-7.5,培养温度为20-28℃,通气量为2.7-4.1L/min;
其中,液体培养基包括如下重量份的各成分:碳源15、氮源16、维 生素B 1、磷酸二氢钾0.5、过磷酸钙1.5、聚氧丙烯甘油醚4、水75;
对照实施例2
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例1区别在于,
所述第一添加剂包括如下重量份的各成分:碳源1、氮源2;
所述第二添加剂、第三添加剂、第四添加剂成分相同,包括如下重 量份的各成分:碳源1、氯化锌0.4;
对照实施例3
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例1区别在于,
所述第一添加剂包括如下重量份的各成分:碳源1、氮源2;
所述第二添加剂包括如下重量份的各成分:谷胱甘肽0.1、氯化锌 0.4;
所述第三添加剂包括如下重量份的各成分:碳源2、半胱氨酸0.1;
所述第四添加剂包括如下重量份的各成分:氮源3、半胱氨酸0.4、 氯化锌0.5。
对照实施例4
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例1区别在于,在步骤 (1)摇瓶菌种的培养过程中,在培养1天后,向液体培养基中添加摇 瓶中加入的液体培养基总重量0.05倍的第二添加剂;在培养3天后, 向液体培养基中添加摇瓶中加入的液体培养基总重量0.10倍的第三添 加剂;
对照实施例5
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例1区别在于,在步骤 (2)发酵罐培养过程中,在培养1天后,向液体培养基中添加发酵罐 中加入的液体培养基总重量0.15倍的第一添加剂;在培养2天后,向 液体培养基中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.2倍的第二添 加剂;在培养3天后,向液体培养基中添加发酵罐中加入的液体培养 基总重量0.6倍的第四添加剂;
对照实施例6
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例2区别在于,液体培 养基包括如下重量份的各成分:玉米淀粉25、冷榨黄豆饼粉9、维生 素B 2、磷酸二氢钾0.1、过磷酸钙1、聚氧丙烯甘油醚2、水63。
对照实施例7
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例3区别在于,液体培 养基包括如下重量份的各成分:红薯粉25、花生壳酶解液9、维生素 B 2、磷酸二氢钾0.1、过磷酸钙1、聚氧丙烯甘油醚2、水63。
对照实施例8
提供金针菇液体菌种的培养方法,与实施例3区别在于,其中, 液体培养基包括如下重量份的各成分:碳源25、氮源9、维生素B 2、 磷酸钠0.1、过磷酸钙1、水63;
其中,所述碳源为重量份数比为5:8的玉米淀粉和红薯粉的混合 物;所述氮源为重量份数比为2:3的花生壳酶解液和冷榨黄豆饼粉。
试验例1不同制备方法对金针菇液体菌种的影响
一、试验菌种
金针菇21,陕西众兴高科生物科技有限公司提供。
二、试验方法
取上述金针菇菌种,采用实施例1、2、4、5、7和对照实施例6-8 的培养方法制备液体金针菇菌种,定期取培养液样品进行镜检和对菌 丝体形态及状态观察,测定菌丝球数量,并对菌球直径进行测量;
菌丝球数量测定:取10mL培养液,过滤获取菌丝球,用蒸馏水 清洗3次,将洗净的菌丝球悬浮于100mL蒸馏水中,再从中吸取1mL 悬浮液置于平皿中,皿下衬黑白相间方格纸计数,每次处理重复3次, 取平均数。
菌丝干重的测量:培养好的菌丝体用滤纸过滤后,用蒸馏水冲洗3 次,防止烘干且已经称重的培养皿中,电热恒温古风干燥箱中105℃ 烘干0.5h,直至2次称重的重量差不超过2mg。
三、试验结果
将金针菇菌种按照上述培养方法进行培养,并对培养结束后测量 的菌丝体形态及性状等,测定结果见表1。
表1不同制备方法对金针菇液体菌种生长的影响
注:1、####表示菌丝球颜色洁白,大小均匀,边缘多毛刺;在显微镜下观察, 发现菌丝具有横隔,有锁状联合,菌球由菌丝紧密缠绕而成,###表示菌丝球洁 白,表面毛刺少;##表示菌丝球颜色变深,表面毛刺少,结构松散,部分成索状, 边缘较为光滑,#表示菌丝球颜色发黄,结构松散,横隔不明显,锁状联合少, 多疏松地集合在一起;
上述试验结果可知,本发明所提供的金针菇液体菌种的制备方法, 得到的金针菇液体菌种,品质好,产量高,抗污染能力强,经济效益 好,由对照例可知,在其他制备方法的技术特征确定的情况下,更改 单一或者某些技术特征,均会导致金针菇液体菌种的产量和质量的下 降。
试验例2不同制备方法得到的液体菌种生产性能比较
一、试验菌种
金针菇21,陕西众兴高科生物科技有限公司提供。
二、试验方法
取实施例1、3、5、6、7和对照例1-5的制备方法所得到的液体菌 种,按照下述培养方法进行固体菌种栽培。
菌种栽培:以棉籽壳为主要原料,按常规方法进行菌种栽培试验。 1200ml培养瓶装干料900g,分为11组,每组3瓶,灭菌后分别接种 相应组别的液体菌种,每瓶接种量5%。
其栽培流程如下:拌料—装瓶—消毒灭菌—接种—菌丝培养—搔 菌—出菇—催菇生长—采收。
栽培过程中首先将培养温度控制在18~20℃。湿度控制在70%~ 80%,并定期进行通风换气。菌丝长满瓶后调节室内温度13~14℃、相 对湿度85%~90%进行培养。待子实体萌发后,将栽培瓶移入室温为4℃ 的控制室,CO2浓度保持0.12%-0.14%,观测栽培瓶内菌丝生长及出菇 情况,并统计瓶满天数和生物学效率;同时还采用半微量凯氏定氮法测定子实体内粗蛋白含量(质量百分比);检测满足下述条件的优良金 针菇占本组金针菇总产量的质量百分比,优良金针菇确定条件为:菌 柄长度在9-12cm,菌柄直径在1.8-1.2cm,菌盖呈球形,直径在 2-3.5cm;结果见表2。
生物学效率=子实体鲜重/培养料干重×l00%。
表2本发明液体菌种与对照组液体菌种生产性能的比较
由上述结果可知,由实施例1与对照例1-5相比较可知,采用本 发明所提供的金针菇液体菌种培养方法得到的金针菇液体菌种,在固 体栽培过程中,对营养成分的吸收利用好,相同栽培条件下得到的金 针菇子实体内粗蛋白含量高,营养价值更好,同时还具有产量高、生 物效率高和商品性状好的优点。对照例1-5对液体菌种培养方法中的 各个添加剂的添加情况和成分情况做一定的改变,得到类似的培养方 法,但得到的液体菌种经由相同条件的固体栽培后,得到的金针菇不 但蛋白质含量不高,金针菇的品质也较差,培养过程中观察可知,对 照例1得到的金针菇生物学效率低,菌丝增长速度慢;对照例2和3 得到的金针菇菌丝松散,菌柄较短,伞盖较大,不适宜商业上优良金 针菇的标准,对照例4和5所得到的金针菇,长势较差,菌盖开伞较 多,且产量低。实施例5和6与实施例1相比较,从通气控制角度进 一步优化了液体菌种培养方法,可看到可以大大提高液体菌种的活性, 得到的液体菌种在固定栽培过程中出菇时间明缩短,、生物效率进一步 提高,提高生产效率;实施例7于实施例1相比,得到的金针菇长势 更为均一,金针菇的优良质量比最高,得到的金针菇商品性状最好, 非常适合于大众对金针菇的要求,经济效益大大提高。
Claims (9)
1.一种金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
(1)摇瓶菌种的培养,将斜面活化后的母种接种于液体培养基中,置于24-26℃恒温培养箱中震荡培养,摇床转速为160-180r/min,通气量为:每分钟每1mL液体培养基通入0.2-0.3mL的气体,培养3~4d,得到摇瓶菌种;在培养1天后,向液体培养基中添加摇瓶中加入的液体培养基总重量0.05-0.08倍的第一添加剂;在培养2天后,向液体培养基中添加摇瓶中加入的液体培养基总重量0.10-0.17倍的第二添加剂;
(2)发酵罐培养,取步骤(1)制备的摇瓶菌种按照10-15%的体积比接种量接种至装有液体培养基的发酵罐进行发酵培养,保证Ph值为4.5-7.5,培养温度为20-28℃,通气量为2.7-4.1L/min;在培养1天后,向液体培养基中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.15-0.21倍的第一添加剂;在培养3天后,向液体培养基中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.2-0.3倍的第三添加剂;在培养5天后,向液体培养基中添加发酵罐中加入的液体培养基总重量0.6-0.8倍的第四添加剂;
其中,液体培养基基包括如下重量份的各成分:碳源15-25、氮源9-16、维生素B 1-2、磷酸二氢钾0.1-0.5、过磷酸钙1-1.5、聚氧丙烯甘油醚2-4、水63-75;
所述第一添加剂包括如下重量份的各成分:碳源1-2、氮源1-2;
所述第二添加剂包括如下重量份的各成分:氮源1-2、氯化锌0.2-0.4;
所述第三添加剂包括如下重量份的各成分:氯化锌1-2、谷胱甘肽0.1-0.2;
所述第四添加剂包括如下重量份的各成分:氮源2-3、谷胱甘肽0.2-0.4、氯化锌0.5-0.7。
2.如权利要求1所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述碳源为重量份数比为5:8的玉米淀粉和红薯粉的混合物。
3.如权利要求2所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述氮源为重量份数比为2:3的花生壳酶解液和冷榨黄豆饼粉的混合物。
4.如权利要求3所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述花生壳酶解液的制备方法如下:取花生壳洗净晾干,粉碎后加入到花生壳重量20倍的枸缘酸钠水溶液中,升温至80-90℃搅拌1h后降温至35-45℃得混合溶液,向混合溶液中加入等重量的纤维素酶和胰蛋白酶混合物,35-45℃搅拌12-14h,然后离心收集上清液,即得所述花生壳酶解液。
5.如权利要求1所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述步骤(2)的具体培养条件如下:培养第1~2天,保证Ph值为4.5-4.7,通气量为2.7-2.9 L/min,温度为26-28℃;培养第3~4天,保证Ph值为4.8-5.3,通气量为3.5-4.1 L/min,温度为21-25℃;培养第5~6天,保证Ph值为6.5-7.5,通气量为3.2-4.0L/min,温度为20-23℃。
6.如权利要求1-5任一所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述步骤(1)中,通气方式如下:培养第1d连续通入5-7h氧气,培养第2d间隔通入,每隔40min通入20min氧气,累积通入氧气的时间为5-7h,培养第3~4d间隔通入,每隔2h通入30min氧气,累积通入氧气的时间为3-5h,剩余时间通入空气。
7.如权利要求1-5任一所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述步骤(2)中,通气方式如下:培养的第2和第4~6天按照2h的间隔分批通入20min氧气,累积通入时间为2-3h,剩余时间通入空气。
8.如权利要求1所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述第一添加剂还包括重量份数为0.5-1的臭氧生理盐水。
9.如权利要求8所述的金针菇液体菌种的培养方法,其特征在于,所述臭氧生理盐水为现配制的,配制方法为:向生理盐水中通入臭氧气体至臭氧在生理盐水中的浓度为10-20ug/mL。
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