CN108148880A - 一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)毛燕窝唾液酸提取1；(2)毛燕窝唾液酸提取2；(3)毛燕窝低聚肽提取；(4)提取液浓缩和(5)干燥。本发明的方法具有过程简单、易操作和产品无杂味等优点，制备的混合物中富含燕窝唾液酸和低聚肽；本发明可避免美拉德反应并抑制有色物质的产生，使制备的唾液酸和低聚肽混合物呈白色或乳白色。

Description

一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法

技术领域

本发明属于食品加工领域，具体地，本发明涉及一种以毛燕窝为原料通过分步提取和酶解等过程制备唾液酸和低聚肽混合物的方法。

技术背景

燕窝是雨燕科动物金丝燕及多种同属燕类用唾液等凝结所筑的巢窝，经过水洗、去毛、成型等处理后的燕窝是名贵的补益精品，具有养阴润燥、补中益气、入胃补脾、化痰止咳等功能，传统上被视为名贵滋补品和高级宴席佳肴。燕窝含有丰富的蛋白质、糖类和矿物质，其中蛋白质约50％，多糖类成分约30％，水份约10％，灰分约3％以及部分微量元素等。

燕窝中蛋白质以糖蛋白的形式存在，称为唾液酸糖蛋白，是燕窝的特征成份，分子量范围约40kDa～120kDa，其中蛋白质部分最主要由组氨酸、精氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸等18种氨基酸组成，约占燕窝干重的46％～58％，糖类主要是唾液酸，约占燕窝干重的15％左右。唾液酸是一种天然存在的碳水化合物，是神经氨酸的氮或氧基取代的9-碳单糖的衍生物，多以α-糖苷的形式存在于非还原性寡聚糖末端，是构成细胞膜上糖蛋白、游离低聚糖和糖脂的重要成分。目前已发现的唾液酸有数十种余种，包括N-乙酰基神经氨酸、N-羟乙酰基神经氨酸和脱氨神经氨酸三种核心单体，燕窝中的唾液酸主要是N-乙酰基神经氨酸。近年来许多研究发现，燕窝唾液酸及其衍生物在各种生命活动调节中起着重要的作用，唾液酸含量及种类异常会导致许多疾病，在抑制唾液酸转移酶和抗癌转移、促进神经细胞增长与抗老年痴呆症、抑制唾液酸酶与抗病毒、抑制白细胞粘附与抗炎等方面具有很大作用。唾液酸是燕窝中最重要的功效成分之一，燕窝降解后的低聚肽应最大程度保留唾液酸等功效成分。

在正常条件下，人体摄入的燕窝经过肠胃消化后才能被吸收，首先是在胃进行初步消化，胃蛋白酶初步分解燕窝蛋白成多肽并释放出部分唾液酸，然后在小肠里内胰腺分泌的胰蛋白酶、胰糜蛋白酶以及小肠分泌的氨基肽酶等肠道酶将多肽进一步水解为氨基酸和低聚肽并继续释放出唾液酸，低聚肽和唾液酸透过小肠绒毛上皮进入血液被人体吸收。肠胃功能正常是保证燕窝消化和吸收的关键。随着年龄的增长，人体内胃肠分泌蛋白酶的能力逐渐下降，燕窝蛋白被消化的几率大幅度降低，而传统的隔水蒸的烹制方法并不能有效降将其降解，因此，随着年龄的增长，燕窝蛋白和唾液酸被人体消化和吸收的难度逐渐增加。

将燕窝酶解成为低聚肽并最大程度保留唾液酸是提高燕窝在人体内吸收和综合利用率的关键。专利申请(92112013.3)公开了燕窝的酶法水解加工工艺及其制品，将燕窝原料经反复漂洗后置于水解锅中蛋白酶降解制备水解物，专利申请(200810061920.9)公开了利用酶解与膜滤耦合技术连续制备窄分子量分布燕窝提取物的方法，利用蛋白酶降解和膜分离耦合的方法制备了燕窝提取物，专利申请(201410735503.3)公开了燕窝复合酶解加工工艺，采用先干燥后粉碎再进行蛋白酶降解的方法制备了燕窝降解物，专利申请(201410056263.4)公开了将压力与酶结合提取燕窝的方法，将燕窝、酶及一定比例的水混合后在高压下将燕窝进行了水解。专利申请(201610380446.0)公开了一种用于生产可食用的燕窝提取物的酸基酶促方法。专利(201010571507.4)公开了燕窝寡肽组合物及其制备方法和使用，采用酶解与酸水解结合来水解燕窝，专利申请(200510068015.2)公开了燕窝多肽的制备方法和用途，主要是采用无花果蛋白酶对燕窝进行降解。类似的研究还包括不同加工工艺对燕窝产品唾液酸含量的影响(食品工业科技，2016)，燕窝糖肽的分离与鉴定(1984,12:949-952)，微波辅助酶法提取燕窝唾液酸及其益智功能性的研究(热带农业科学，2015，35(11):81-86)等。

燕窝中存在一定量的还原糖，这些还原糖经传统的蛋白酶法降解后被释放，并进一步与蛋白质降解后的多肽的氨基等发生美拉德反应，美拉德反应后的燕窝糖蛋白对胃蛋白酶有较强的耐消化能力并导致有色物质生成，使燕窝降解物不易被被降解和吸收。因此，燕窝酶解过程应在最大程度上使唾液酸释放和蛋白质降解，同时减少美拉德反应的发生。

发明内容

针对传统的燕窝食用方法存在的问题以及燕窝化学或生物降解过程存在的美拉德反应导致的耐消化等问题以及有色物质产生，本发明旨在提供一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法，本发明的技术方案是通过以下方式实现的。一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

(1)毛燕窝唾液酸提取1：称取一定量的毛燕窝并作为计量基准，使用5-15倍毛燕窝重量的碱性水溶液清洗2-6次，然后使用去离子水清洗至中性，然将其加入到5-15倍毛燕窝重量的酸性水溶液，在20℃-75℃条件下浸泡4.5-16h，然后进行固液分离，分别收集清液A和固形物A，清液A为含有酸溶性水溶唾液酸的溶液。

(2)毛燕窝唾液酸提取2：将步骤(1)获得的固形物A重新悬浮到5-15倍毛燕窝重量的去离子水中，采用胶体磨进行处理后获得悬浮液，向悬浮液中加入毛燕窝重量1/1000～1/100的糖苷酶，调节溶液pH至3-8，在常压和搅拌条件下酶解1h～20h，然后进行固液分离，分别收集清液B和固形物B，清液B中含有以多糖降解物形式存在的唾液酸。

(3)毛燕窝低聚肽提取：向步骤(2)获得的固形物B中加入5-10倍毛燕窝重量的去离子水，加入毛燕窝重量1/500～1/50的蛋白酶，调节pH至7-10，在常压和搅拌条件下酶解1h～18h，然后进行固液分离，收集的清液C为含有燕窝低聚肽的溶液。

(4)提取液浓缩：将步骤(1)获得的清液A和步骤(2)获得的清液B合并，调节pH至中性后浓缩至5-20％，获得浓缩液N_A-B，将步骤(3)获得的清液C调节pH至中性后浓缩至10-30％，获得浓缩液N_C，将浓缩液N_A-B和浓缩液N_C的温度均降至30℃以下再进行混合。

(5)干燥：将步骤(4)获得的溶液进行干燥，干燥后粉末为燕窝唾液酸和低聚肽混合物。

优选地，所述的步骤(1)毛燕窝唾液酸提取1中使用的原料可以是含有一定量羽毛等杂物的毛燕窝盏，毛燕窝碎块或其混合物。

优选地，所述的步骤(1)毛燕窝唾液酸提取1过程中，使用的碱性水溶液可以是氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾的水溶液，pH范围可以是7.5-10.0。

优选地，所述的步骤(1)毛燕窝唾液酸提取1过程中，使用的酸性水溶液可以是盐酸或醋酸的水溶液，pH范围可以是2.5-6.0。

优选地，所述的步骤(2)毛燕窝唾液酸提取2过程中，加入的糖苷酶可以是甘露糖苷酶、半乳糖苷酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶，或这些酶的混合物。

优选地，所述的步骤(3)毛燕窝低聚肽提取过程中，加入的蛋白酶可以是胰蛋白酶、糜蛋白酶、碱性蛋白酶，或这些酶的混合物。

本发明的一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法具有过程简单、易操作和产品无杂味等优点，制备的混合物中富含燕窝唾液酸和低聚肽；本发明首先将燕窝中酸溶性唾液酸进行分离，然后再使用酶法提取以多糖形式存在的唾液酸，最后采用酶法降解燕窝中的蛋白质，有效避免了美拉德反应并抑制了有色物质的产生，使制备的唾液酸和低聚肽混合物呈白色或乳白色。

附图说明

图1为一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法的流程图

具体实施例

下面通过具体实施例对本发明进行具体地描述，值得提出的是，实施例只是对本发明的一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法的举例说明，并不能代表本发明专利的全部，更不能理解为对本发明保护范围的限制，在不脱离本发明实质的构思前提条件下，还可以做出若干调整或改进，均都属于本发明的保护范围。

实施例1

原料为含有一定量的羽毛、木屑等杂物的毛燕窝盏，其中总蛋白质含量为49％，唾液酸含量为10％，含水量9％，总多糖含量28％，灰分4％，羽毛和木屑等杂物含量约9％。

(1)毛燕窝唾液酸提取1：称取1000g毛燕窝盏，使用10kg、pH为8.0的NaOH水溶液清洗3次，然后使用2kg去离子水清洗至中性，然将其加入到10kg、pH为3.0的盐酸水溶液中，在50℃条件下浸泡6h，使用200目的筛网进行过滤，分别收集清液A为7.5kg和固形物A为5.4kg。

(2)毛燕窝唾液酸提取2：将步骤(1)获得的5.4kg固形物A重新悬浮到10kg去离子水中，采用胶体磨进行打浆处理，向悬浮液中加入10g的半乳糖苷酶，调节溶液pH至6.0，在常压和搅拌条件下酶解6h，离心处理，收集清液B为10.2kg和固形物B为5.2kg。

(3)毛燕窝低聚肽提取：向步骤(2)获得的5.2kg固形物B中加入6kg去离子水，加入10g胰蛋白酶，使用碳酸钠调节pH至8.0，在常压和搅拌条件下酶解6h，然后进行固液分离，收集的清液C为10.8kg。

(4)提取液浓缩：将步骤(1)获得的7.5kg清液A和步骤(2)获得的10.2kg清液B合并，调节pH至7.0后浓缩至15％，获得2kg的浓缩液N_A-B，将步骤(3)获得的10.8kg清液C调节pH至中性后浓缩至约24.5％，获得2kg浓缩液N_C，将浓缩液N_A-B和浓缩液N_C的温度均降至20℃后再进行混合。

(5)干燥：将步骤(4)获得的合并后的浓缩液进行喷雾干燥，干燥后的粉末称重为820g；其中多肽含量为58.2％，总多糖含量为33.8％(其中总唾液酸含量为12.2％)，含水量为4.5％，总灰分为3.1％。

实施例2

原料为含有一定量的羽毛等杂物的毛燕窝碎，其中总蛋白质含量为47％，唾液酸含量为9.8％，含水量10.1％，总多糖含量27％，灰分4％，羽毛木屑等杂物含量约11.7％。

(1)毛燕窝唾液酸提取1：称取1kg毛燕窝碎，使用10kg、pH为7.5的KOH水溶液清洗4次，然后使用3kg去离子水清洗至中性，然将其加入到10kg、pH为3.5的醋酸水溶液中，在40℃条件下浸泡8h，使用200目的筛网进行过滤，分别收集清液A为7.7kg和固形物A为5.1kg。

(2)毛燕窝唾液酸提取2：将步骤(1)获得的5.1kg固形物A重新悬浮到10kg去离子水中，采用胶体磨进行打浆处理，向悬浮液中加入10g的甘露糖苷酶，调节溶液pH至5.8，在常压和搅拌条件下酶解5h，离心处理，收集清液B为10.2kg和固形物B为4.9kg。

(3)毛燕窝低聚肽提取：向步骤(2)获得的4.9kg固形物B中加入6kg去离子水，加入10g胰蛋白酶和糜蛋白酶的混合物，使用碳酸钠调节pH至8.0，在常压和搅拌条件下酶解8h，然后进行固液分离，收集的清液C为10.6kg。

(4)提取液浓缩：将步骤(1)获得的7.7kg清液A和步骤(2)获得的10.2kg清液B合并，调节pH至7.0后浓缩至13.5％，获得2kg的浓缩液NA-B，将步骤(3)获得的10.6kg清液C调节pH至7.0后浓缩至23％，获得2kg浓缩液N_C，将浓缩液N_A-B和浓缩液N_C的温度均降至25℃后再进行混合。

(5)干燥：将步骤(4)获得的合并后的浓缩液进行喷雾干燥，干燥后的粉末称重为780g；其中含多肽为460g，含总多糖为280g(其中总唾液酸为97g)，含总灰分20g。

Claims (6)

1.一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)毛燕窝唾液酸提取1：称取一定量的毛燕窝并作为计量基准，使用5-15倍毛燕窝重量的碱性水溶液清洗2-6次，然后使用去离水清洗至中性，然将其加入到5-15倍毛燕窝重量的酸性水溶液，在20℃-75℃条件下浸泡4.5-16h，然后进行固液分离，分别收集清液A和固形物A，清液A为含有酸溶性水溶唾液酸的溶液。

(2)毛燕窝唾液酸提取2：将步骤(1)获得的固形物A重新悬浮到5-15倍毛燕窝重量的纯水中，采用胶体磨进行处理后获得悬浮液，向悬浮液中加入毛燕窝重量1/1000～1/100的糖苷酶，调节溶液pH至3-8，在常压和搅拌条件下酶解1h～20h，然后进行固液分离，分别收集清液B和固形物B，清液B中含有以多糖降解物形式存在的唾液酸。

(3)毛燕窝低聚肽提取：向步骤(2)获得的固形物B中加入5-10倍毛燕窝重量的纯水，加入毛燕窝重量1/500～1/50的蛋白酶，调节pH至7-10，在常压和搅拌条件下酶解1h～18h，然后进行固液分离，收集的清液C为含有燕窝低聚肽的溶液。

(4)提取液浓缩：将步骤(1)获得的清液A和步骤(2)获得的清液B合并，调节pH至中性后浓缩至5-20％，获得浓缩液N_A-B，将步骤(3)获得的清液C调节pH至中性后浓缩至10-30％，获得浓缩液N_C，将浓缩液N_A-B和浓缩液N_C的温度均降至30℃以下进行混合。

(5)干燥：将步骤(4)获得的溶液进行干燥，干燥后粉末为燕窝唾液酸和低聚肽混合物。

2.根据权利要求1所述的一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法，其特征在于所述的原料是毛燕窝盏，毛燕窝碎块或其混合物。

3.根据权利要求1所述的一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法，其特征在于所述的步骤(1)使用的碱性水溶液是氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾的水溶液，pH范围是7.5-10.0。

4.根据权利要求1所述的一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法，其特征在于所述的步骤(1)使用的酸性水溶液是盐酸或醋酸水溶液，pH范围是2.5-6.0。

5.根据权利要求1所述的一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法，其特征在于所述的步骤(2)使用的糖苷酶可以是甘露糖苷酶、半乳糖苷酶和乙酰氨基葡萄糖苷酶中的一种或几种。

6.根据权利要求1所述的一种以毛燕窝为原料制备唾液酸和低聚肽混合物的方法，其特征在于所述的步骤(3)加入的蛋白酶可以胰蛋白酶、糜蛋白酶和碱性蛋白酶中的一种或几种。