CN108135965A - 用于伤口愈合的含p物质的药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种用于伤口愈合的含有表面活性剂、抗氧化剂、增稠剂和P物质的药物组合物，涉及一种包括向受试者施用所述药物组合物步骤的用于伤口愈合的方法，以及一种用于伤口愈合的含有增稠剂和P物质的准药物组合物。本发明的药物组合物具有减少伤口大小和血管新生作用、显示真皮和表皮再生作用、成熟肉芽组织和产生胶原，因此可有利地用于愈合伤口。

Description

用于伤口愈合的含P物质的药物组合物
技术领域
本发明涉及一种用于伤口愈合的包含增稠剂、抗氧化剂、表面活性剂和P物质(SP)的药物组合物，一种用于愈合伤口的包括向受试者施用所述药物组合物的方法，以及一种用于伤口愈合的包含增稠剂、抗氧化剂、表面活性剂和SP的准药物组合物。
背景技术
伤口愈合是一个皮肤、其他器官或组织在损伤后自行愈合的复杂过程。正常皮肤中，表皮(最外层)和真皮(内层或深层)形成对外界环境的保护屏障。一旦保护屏障被打破，便会立即发动一个伤口愈合的正常生理过程。然而，伤者的健康或年龄，诸如糖尿病的疾病，或异物或坏死组织的存在可能影响伤口愈合速度。如果伤口愈合被延迟，伤口处便有继发感染的危险。此外，在一些伤口中对伤口恢复的不完全控制会引起过度的疤痕形成，导致功能性和美容性的劣质(inferior)疤痕形成的问题。因此，当出现伤口时，快速无副作用地愈合伤口非常重要。
目前，东华制药(DongWha Pharmaceutical)的夫西地酸钠(Fucidin)，东国制药(Dongkook Pharmaceutical)的积雪草苷(Madecassol)等是用于伤口愈合的代表性市售产品。然而，有报导称对夫西地酸钠的主要成分夫西地酸具有耐药性的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)正在增加(Arch Dis Child 2004；89:74-44)。并且有持续报导称使用夫西地酸钠或积雪草苷会引起过敏反应、皮疹等副作用。因此，对新药研究的需求日益增加。
同时，一个由11个氨基酸组成的神经肽SP被报导在某些细胞和肉芽组织中有表达。一些研究报导称SP改善角膜上皮伤口中角膜上皮屏障功能并在角膜病中呈现出治疗作用(Invest Ophthalmol Vis Sci.2003Jul；44(7):2937-40)。此外，韩国专利公开号第10-2006-0037176号公开了SP和间充质干细胞可用来开发用于伤口愈合的有效治疗剂。然而，缺点是当干细胞实际上作为原材料被用于美容时容易死亡，并在死亡后产生细胞毒性。因此仍然需要使用SP开发伤口愈合剂。
发明内容
技术问题
本发明的一个目的是提供一种用于伤口愈合的包含增稠剂和SP的药物组合物。
本发明的另一个目的是提供一种用于伤口愈合的包含增稠剂和SP的准药物组合物。
本发明的又一个目的是提供一种愈合伤口的方法，包括向受试者施用药物组合物。
技术方案
本发明人为了提高含有SP在内的药物的伤口愈合功效而进行了大量努力，结果发现，与市售产品相比，含有抗氧化剂、表面活性剂、增稠剂和SP的药物组合物显示出优异的伤口愈合功效，从而完成了本发明。
有益效果
本发明的药物组合物具有降低伤口大小、血管生成、和表皮及真皮再生的优异作用，因而可被用作具有改善伤口愈合功效的药物。
附图说明
图1示出根据处理人真皮成纤维细胞的SP浓度的细胞增殖率图表；
图2A示出用SP、包含SP和羧甲基纤维素(SP+CMC)的制剂、包含SP和羟乙基纤维素(SP+HEC)的制剂、Madecassol软膏、和Easyef软膏处理小鼠皮肤切创模型0天和6天后的伤口大小图像；
图2B示出用SP、SP+CMC、和SP+HEC处理小鼠皮肤切创模型6天后减少伤口大小的定量图；
图2C示出用SP+CMC、SP+HEC、Madecassol软膏、和Easyef软膏处理小鼠皮肤切创模型6天后减小伤口大小的定量图；
图3示出用SP、SP+CMC、SP+HEC、Madecassol软膏、和Easyef软膏处理小鼠皮肤切创模型的伤口皮肤6天后的血管生成图像；
图4A示出用SP、SP+CMC、SP+HEC、Madecassol软膏、和Easyef软膏处理小鼠皮肤切创模型的伤口皮肤6天后的真皮再生定量图；
图4B示出用SP、SP+CMC、SP+HEC、Madecassol软膏、和Easyef软膏处理小鼠皮肤切创模型的伤口皮肤6天后的真皮再生图像；
图5A示出用SP、SP+CMC、SP+HEC、Madecassol软膏、和Easyef软膏处理小鼠皮肤切创模型的伤口皮肤6天后的表皮再生定量图；
图5B示出用SP、SP+CMC、SP+HEC、Madecassol软膏、和Easyef软膏处理小鼠皮肤切创模型的伤口皮肤6天后的表皮再生图像；
图6示出用SP、SP+CMC、SP+HEC、Madecassol软膏、和Easyef软膏处理小鼠皮肤切创模型的伤口皮肤6天后的肉芽组织成熟图像；
图7示出用SP、SP+CMC、SP+HEC、Madecassol软膏、和Easyef软膏处理小鼠皮肤切创模型的伤口皮肤6天后的胶原合成图像。
最佳实施方式
本发明的一方面提供一种用于伤口愈合的药物组合物，其包含增稠剂和SEQ IDNO:1中所示的SP。
本发明人确认，与市售伤口愈合剂相比，包含增稠剂和SP的伤口愈合药物组合物显示出优异的血管生成作用和真皮再生作用，良好地形成成熟的肉芽组织，并改善胶原合成，从而完成了本发明。
本发明的组合物中，SP指一种由SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列“Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2”组成的神经肽。已知SP广泛分布于诸如脑和脊髓和外周器官的中枢神经系统，并在初级感觉神经元中传递疼痛感觉。
包含在本发明的药物组合物中的SP浓度可以为0.1μg/mL至100μg/mL，具体为3μg/mL至8μg/mL。
本发明的实施例中，证明了与阴性对照组相比，0.1μg/mL至100μg/mL的SP显示出优异的细胞增殖作用，并且特别是3μg/mL至8μg/mL的SP显示出最优异的细胞增殖作用(图1)。
由此可见，当SP浓度为0.1μg/mL至100μg/mL时可显示出优异的细胞增殖作用，并使本发明的药物呈现出优异的伤口愈合作用。
在本发明的组合物中，增稠剂是指为了提供粘度而添加的添加剂，也可被称为稠化剂(thickening agent)或稠化稳定剂(thickening stabilizer)。
本发明的增稠剂可具体为羧甲基纤维素钠或羟乙基纤维素，更具体为羟乙基纤维素。
增稠剂的含量相对于本发明组合物的总重量可以为1重量％至5重量％。如果增稠剂的含量相对于本发明组合物的总重量为1重量％以下，则药物组合物的稳定性存在问题。如果增稠剂的含量相对于本发明组合物的总重量为5重量％以上，药物组合物的粘度过度增加而使组合物不适于应用。
本发明的实施例中，证实了与SP和市售伤口愈合剂相比，包含羧甲基纤维素钠或羟乙基纤维素作为增稠剂的药物组合物具有优异的减小伤口大小的作用(图2A和2B)。特别是，与包含不同种类增稠剂的药物组合物相比，包含羟乙基纤维素作为增稠剂的药物组合物具有优异的减小伤口大小作用(图2C)。
因此，根据本发明的药物组合物中包含的增稠剂的种类，伤口愈合作用可以变化，并且当包含羧甲基纤维素钠或羟乙基纤维素作为增稠剂时，可获得优异的伤口愈合作用。特别是，当增稠剂为羟乙基纤维素时，它可能适用于伤口愈合的药物组合物。
本发明的药物组合物可用作单一制剂，或可进一步包含被批准用于伤口愈合的公知药物配制成复合制剂。通过使用药物学上可接受的载体或赋形剂来配制，组合物可配置在单位剂量形式或包含在多剂量容器中。
“药物学上可接受的载体”是指不会对生物体引起显著刺激，且不会消除施用的复合物的生物学活性和性质的载体、赋形剂、或稀释剂，具体地可以是非天然存在的载体。本发明中使用的载体种类并无特殊限制，只要是本领域常用的载体，可以使用任何药物学上可接受的载体。该载体的非限制性实施例可以包括生理盐水(saline)、无菌水、林格氏(Ringer’s)溶液、缓冲生理盐水、白蛋白输注液、葡萄糖溶液、麦芽糊精溶液、甘油、乙醇等。这些材料可单独或以其任意两种以上的组合使用。
包含药物学上可接受的载体的组合物可以是多种口服或肠外制剂。该制剂可用稀释剂或诸如常用的填充剂、膨化剂、结合剂、湿润剂、崩解剂等赋形剂配置。具体而言，口服固体制剂可包括片剂、丸剂、药粉、颗粒剂、胶囊剂等。固体制剂可由上述化合物与至少一种例如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖、明胶等的赋形剂混合制备而成。除简单赋形剂外，也可使用诸如硬脂酸镁和滑石的润滑剂。口服液体制剂可包括混悬剂、内服溶液、乳剂、糖浆剂等。除常用的诸如水和液体石蜡的简单稀释剂外，可使用很多不同赋形剂，例如湿润剂、调味剂、香料、防腐剂等。肠外制剂可包括无菌水溶液、非水溶剂、混悬剂、乳剂、冻干制剂、或栓剂。非水溶剂和混悬剂可包括丙二醇、聚乙二醇、诸如橄榄油的植物油、诸如油酸乙酯的注射用酯等。栓剂的基料可包括witepsol、聚乙二醇(macrogol)、吐温61、可可脂、甘油三月桂酸酯(laurin butter)、甘油明胶等。
作为药物学上可接受的载体的实施例，本发明的组合物可进一步包含抗氧化剂和表面活性剂。具体而言，本发明的组合物可进一步包含抗氧化剂或可进一步包含表面活性剂，且更具体而言，包含抗氧化剂和表面活性剂两者。
在本发明的组合物中，抗氧化剂是指为了通过作用于活性成分在空气中氧化过程中生成的自由基或过氧化物而终止氧化链反应，并防止有效成分的氧化和有效成分变质的目的而加入的一种材料。
在本发明中，由于抗氧化剂可以阻止含SP药物组合物伤口愈合作用的退化，其可用作伤口愈合组合物的活性成分。
可以在本领域中使用的常规抗氧化剂可以用作非限制性的抗氧化剂，具体而言，可使用但不限于β-巯基乙醇(β-ME)、谷胱甘肽(GSH)、抗坏血酸、维生素E、β-胡萝卜素、番茄红素、辅酶Q-10、硒、铬、镁、牛磺酸、亚牛磺酸、海藻糖等。具体而言，在本发明中，抗氧化剂可以为硫代硫酸钠。
只要可以阻止药物组合物伤口愈合作用的退化，抗氧化剂的含量并无特殊限制，但其含量相对于本发明组合物的总重量可以是0.01重量％至1重量％。
在本发明的组合物中，表面活性剂是指使用疏水性油组分帮助保持均一液体组合物的材料。
表面活性剂可以是通常用于制备药物组合物的普通表面活性剂，例如药物学上可接受的阴离子型、阳离子型、非离子型或两性表面活性剂。具体而言，在本发明中，表面活性剂可以为聚山梨醇酯80。
相对于本发明组合物的总重量，表面活性剂的含量可以是0.001重量％至0.02重量％。如果表面活性剂的含量相对于本发明组合物的总重量为0.001重量％以下，可降低本发明组合物的乳化能力以使制剂沉淀稳定性减少。如果表面活性剂的含量相对于本发明组合物的总重量为0.02重量％以上，就会有本发明的组合物粘度过度上升的问题，或者出现相转化的问题。
本文所用术语“伤口愈合”是指治疗或减轻由皮肤细胞损伤引起的伤口，术语“伤口治疗”是指向受伤受试者施用本发明药物组合物以减轻或有利于伤口症状的所采取的所有行动。
“受试者”是指已经受伤或可能受伤的包括人类在内的所有动物。动物不仅包括人还可以是牛、马、绵羊、猪、山羊、骆驼、羚羊、狗、猫等需要治疗相似但不限于此症状的哺乳动物。
作为用以伤口愈合的本发明药物组合物的具体实施例可为包含SP、硫代硫酸钠、聚山梨醇酯80、和羧甲基纤维素钠的组合物。另一本发明组合物的具体实施例可为包含SP、硫代硫酸钠、聚山梨醇酯80、和羟乙基纤维素的组合物。
本发明药物组合物可以是具有改善血管生成、表皮再生、肉芽组织成熟和胶原合成特点的组合物。
具体而言，本发明的实施例中证实了，与市售伤口愈合剂相比，包含抗氧化剂、表面活性剂、增稠剂和SP的药物组合物具有优异的血管生成作用(图3)和优异的表皮再生作用(图5A和5B)。特别是其表明与包含不同种类增稠剂的药物组合物相比，包含羟乙基纤维素作为增稠剂的药物组合物显示优异的上述作用。
此外，本发明的实施例中证实了，与市售伤口愈合剂相比，包含抗氧化剂、表面活性剂、增稠剂和SP的药物组合物形成了成熟的肉芽组织(图6)，并具有优异的增加胶原作用(图7)。特别是其表明与包含不同种类增稠剂的药物组合物相比，包含羟乙基纤维素作为增稠剂的药物组合物显示优异的上述作用。
本发明的另一方面提供用于伤口愈合的准药物组合物，其包含增稠剂和SEQ IDNO:1中所示的SP。
本文中使用的术语“增稠剂”、“P物质(SP)”和“伤口愈合”如上说述。
本文中使用的术语“准药物”是指为了在人或动物中治疗、减轻、治愈或预防疾病目的而使用的纤维、橡胶制品或类似产品。此外，作为一种制剂，其用于为预防感染的杀菌、杀虫剂或相似目的，非电器、非机械、或非装置性用于诊断、治疗、减轻、治愈或预防人或动物疾病的目的，或用于对人或动物的结构或功能产生药理作用的目的。准药物也可包括个人卫生用品。个人卫生用品可包括但不限于消毒清洁剂、沐浴泡沫、漱口水、湿纸巾、清洁皂、洗手液、或软膏。具体地，关于本发明组成物，准药物可为外用制剂。
当用作准药物添加剂时，本发明组合物可单独加入或根据常规方法与其他准药物或准药物成分联合使用。根据使用目的可合理确定混合物中活性成分的量。
本发明的又一方面提供一种愈合伤口的方法，包括向受伤受试者施用包含增稠剂和SEQ ID NO:1中所示的SP的伤口愈合药物组合物的步骤。
术语“增稠剂”、“P物质(SP)”和“受试者”如上述相同。
本文中使用的术语“施用”是指用任何合适的方法将本发明的伤口愈合药物组合物引入患者体内。只要可以让组合物到达靶组织，组合物施用途径可以是任何途径。组合物可以通过但不限于腹腔注射、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、皮内注射、口服、外用，或经鼻施用。因为其伤口愈合作用的特点，可以通过皮肤敷用施用本发明组合物。
包含增稠剂和SEQ ID NO:1中所示的SP的伤口愈合药物组合物可以以药物学有效量施用。
术语“药物学有效量”是指以任何医疗适用的合理的利益/风险比率治疗疾病的足够用量。有效剂量水平可以根据受试者类型和严重程度、年龄和性别、药物的活性、对药物的敏感性、给药时间、给药途径、排泄率、治疗持续时间、同时使用的药物和其他医疗领域已知的其他因素决定。例如，该药物组合物可以在日剂量为0.0001mg/kg至1000mg/kg的情况下施用，具体地为0.001mg/kg至100mg/kg。
本发明组合物可以每日或间歇施用，施用频率可为每日一次或2至3次。如果两种活性成分中的每一种均为单一制剂，则其施用频率可彼此相同或相异。此外，本发明组合物可以单独使用或与其他伤口愈合药物联合使用。考虑到所有上述因素，重要的是在无副作用情况下以最低剂量施用以达到最佳疗效，而这可以由本领域技术人员容易地确定。
实施方式
以下将会参考实施例更详细描述本发明的构成和作用。然而，这些实施例仅用于说明目的，并不意图将这些实施例限制本发明。
实施例1：SP处理对人真皮成纤维细胞上的细胞增殖作用
MTT法检测SP的细胞增殖效应。
详细而言，将100μL 3×104CFU/mL的人真皮成纤维细胞悬浮液置于96孔培养板中，孵育24小时。移除FGM培养液(巯基乙酸盐液体培养基；含有hFGF-B、胰岛素、胎牛血清(FBS)、庆大霉素、和两性霉素-B的成纤维细胞基础培养基)，并随后将180μL新鲜FGM培养基分配到每孔中，然后接入20μL不同浓度(0.1、1、5、10、50、和100μg/mL)的用磷酸盐缓冲液(PBS)稀释的SP。
同时，使用20μL磷酸盐缓冲液作为阴性对照组。接种后，将细胞在37℃孵育48小时，随后移除培养基、SP和阴性对照组。细胞用磷酸盐缓冲液洗涤三次。将90μL的FGM培养基与10μL的MTT溶液(0.5mg/mL)混合并加入每个孔内，使其在37℃下反应4小时。
最后，细胞用磷酸盐缓冲生理盐水洗涤细胞，并在150μL异丙醇溶液内搅拌10分钟，测量570nm的吸光度。
结果发现SP在0.1μg/mL至100μg/mL的所有浓度组均可以增加人真皮成纤维细胞的细胞增殖。具体而言，发现在所有浓度组的细胞增殖率均在170％以上。特别是当SP浓度为5μg/mL时，细胞增殖率为200％以上，说明其与其他浓度组相比呈现出一个优异的细胞增殖作用。与阴性对照组相比，5μg/mL的SP仍然显示出2.2倍或更高的增殖率(图1)。
因此，可以确定SP呈现出优异的细胞增殖作用而没有细胞毒性，因而其可被用作为伤口愈合的药物组合物。
实施例2：制备用于伤口愈合包含SP的新型制剂
除了实施例1中确定的在人真皮成纤维细胞上显示出细胞增殖作用的SP外，还通过使用抗氧化剂、表面活性剂和增稠剂来制备新型组合物。SP用一种多肽合成技术使用Fmoc化学法通过固/液相合成，并通过高效液相色谱法纯化。最后，使用纯度为85％以上的SP。在新制剂中，按照如下列表1中的成分和含量制备含羧甲基纤维素作为增稠剂的制剂。
表1
此外，在新制剂中，按照如下列表2中的成分和含量配置含羟乙基纤维素作为增稠剂的制剂。
表2
实施例3：新型制剂在小鼠皮肤切创模型中的伤口愈合作用
实施例3-1：小鼠皮肤切创模型的制备和新型制剂的施用
为比较包含SP新型制剂(SP+CMC制剂和SP+HEC制剂)之间的伤口愈合作用，制备了全层皮肤切创模型。市售伤口愈合剂，Madecassol护理软膏(东国制药)和Easyef细胞再生软膏(大熊制药)被用作为阳性对照组。
详细而言，将7周龄雌性BALB/c小鼠(韩国DooYeol生物技术)适应一周后腹腔注射氯胺酮(Ketamine)和隆朋(rumpun)混合物进行麻醉。用电动剃刀和脱毛膏(Veet)去除背部毛发。用聚维酮和70％乙醇待除去表皮的区域进行消毒，用5mm的活检钳在臀部下方两侧给予全层皮肤切创，同时避免老鼠的脊柱。用缝合线将一个外径15mm内径8mm的硅胶圈连接在伤口区以防止小鼠体表肌肉造成的伤口自主收缩。
此后，在伤口部位，施用磷酸盐缓冲液作为阴性对照，以及施用Madecassol护理和Easyef细胞再生软膏作为阳性对照。作为实验组，施用5μg/mL的SP、新型制剂即SP+CMC制剂和SP+HEC制剂。具体地，每日一次持续5日在全层皮肤伤口施用每30μL的SP和每种新型制剂。
实施例3-2：新型制剂在小鼠皮肤切创模型中的伤口大小减小作用
如实施例3-1，向小鼠皮肤切创模型施用新型制剂，然后评估伤口大小的降低以比较伤口大小减小作用。详细而言，通过分析新型药物施用0天和6天后的伤口图像计算创面的大小作为减小的伤口大小。用Photoshop量化伤口面积的大小。
用肉眼检查伤口的大小，结果证实了与SP相比，新型制剂具有优异的减小伤口大小的作用。具体地，肉眼证实了施用新型制剂(SP+CMC和SP+HEC)6天后，与SP处理相比，伤口大小有减小(图2A)。
还对伤口面积的大小进行了量化，结果发现，所有的新型制剂均具有优异的减小伤口大小作用。具体地，施用SP后伤口面积为约40％以上，而新型制剂处理的伤口面积为约20％，表明新型制剂的伤口大小减小作用至少高出两倍。
特别是，伤口大小定量结果显示当施用使用羟乙基纤维素作为新型制剂的增稠剂(SP+HEC)的制剂时，伤口大小为20％以下(图2B)，表明与单独SP相比，包含SP的新型制剂(SP+CMC和SP+HEC)具有优异的减小伤口大小的作用。
此外，对新型制剂和阳性对照的伤口大小减小作用进行定量，新型制剂的结果为，与Madecassol软膏相比，SP+CMC具有优异的减小伤口大小的作用，且其作用与Easyef软膏的作用相似。相比之下，与所有阳性对照组相比，SP+HEC证实具有优异的减小作用(图2C)。
这些结果提示与市售伤口愈合剂相比，新型制剂具有优异的减小伤口大小的作用。具体地，证实了新型制剂SP+HEC制剂作用优于SP+CMC制剂。
实施例3-3：新型制剂在小鼠皮肤切创模型中的血管生成作用
如实施例3-1，将新型制剂施用于小鼠皮肤切创模型，然后比较血管生成作用。详细而言，在施用新型制剂6天后对创面皮肤组织活检，之后通过肉眼检查皮肤组织上的血管生成图像证实血管生成的增加。
结果证实，与SP相比，新型制剂具有优异的血管生成作用。具体地，施用SP组和无处理组之间的伤口大小略有差异，血管生成也不明显。相反，在施用新型制剂组可以观察到伤口大小的减小和创面周围许多新血管的形成。特别是，证实了与市售伤口愈合剂Madecassol护理和Easyef细胞再生软膏相比，SP+CMC制剂和SP+HEC制剂具有优异的减小伤口大小和血管生成作用(图3)。
实施例3-4：新型制剂在小鼠皮肤切创模型中的真皮再生作用
如实施例3-1，将新型制剂施用于小鼠皮肤切创模型，然后测量减小的真皮间隙(DG)以检测真皮再生作用。详细而言，在施用新型制剂6天后获取创面的活检皮肤组织，并在10％福尔马林中固定，随后用苏木精&伊红(H&E)染色。染色后，测量真皮间隙(DG)以检测伤口组织的真皮再生。
分析定量真皮间隙的图表和组织图像，结果发现所有施用组包括施用SP组均有相似的真皮再生。特别是新型制剂SP+HEC制剂显示出最优异的真皮再生(图4A和4B)。
实施例3-5：新型制剂在小鼠皮肤切创模型中的表皮再生作用
如实施例3-1，将新型制剂施用于小鼠皮肤切创模型，然后测量减小的表皮间隙(EG)以检测表皮再生作用。详细而言，在施用新型制剂6天后获取创面的活检皮肤组织，并在10％福尔马林中固定，随后用苏木精&伊红(H&E)染色。染色后，测量表皮间隙以检测伤口组织的表皮再生。
分析定量真皮间隙的图表和组织图像，结果证实与对照组相比，表皮间隙在所有施用组包括施用SP组中均有减小。具体的，施用SP后表皮间隙减小至约60％，施用市售伤口愈合药物Madecassol护理和Easyef细胞再生软膏后表皮间隙减小至约60％以下。相比而言，施用新型制剂后表皮间隙减小至约30％以下，说明新型制剂的表皮再生作用比市售产品至少高出两倍。此外，证实了与SP+CMC制剂相比，SP+HEC制剂具有优异的表皮再生作用(图5A和5B)。
实施例3-6：新型制剂在小鼠皮肤切创模型中的肉芽组织成熟作用
如实施例3-1，将新型制剂施用于小鼠皮肤切创模型，然后检查伤口组织上的肉芽组织成熟。详细而言，在施用新型制剂6天后获取创面的活检皮肤组织，并在10％福尔马林中固定，随后用苏木精&伊红(H&E)染色。染色后，检查肉芽组织成熟。
结果与阴性对照组相比，阳性对照组施用Madecassol护理和Easyef细胞再生软膏组，以及实验组SP和新型制剂显示致密肉芽组织形成。具体的，在SP+HEC制剂情况下，构成真皮组织的成纤维细胞呈现稳定、扁平的成熟形态，说明SP+HEC制剂可形成最成熟的肉芽组织(图6)。
实施例3-7：新型制剂在小鼠皮肤切创模型中的胶原增加作用
如实施例3-1，将新型制剂施用于小鼠皮肤切创模型，然后检查伤口组织上的胶原增加程度。详细而言，在施用新型制剂6天后获取创面的活检皮肤组织，并在10％福尔马林中固定，随后用Masson三色(Trichrome)染色。染色后，检查伤口组织的胶原增加程度。
结果显示，当施用新型制剂时，与SP相比呈现更强染色，说明新型制剂具有优异的胶原增加作用。特别是，SP+CMC制剂和SP+HEC制剂显示比市售伤口愈合剂Madecassol护理和Easyef细胞再生软膏更强的染色，说明本制剂具有优异的胶原增加作用。此外，与SP+CMC制剂相比，SP+HEC制剂具有优异的胶原增加作用(图7)。
因此，与单独SP和市售伤口愈合剂Madecassol护理和Easyef细胞再生软膏相比，本发明包含SP的新型制剂具有优异的伤口愈合作用。特别是证实了对新型制剂而言，包含SP和羟乙基纤维素的制剂具有最优异的伤口愈合作用。
基于以上描述，本领域的技术人员将会理解，本发明可以在不改变其技术精神或基本特征的情况下以不同具体形式进行实施。因此，应该理解的是，上述实施例被认为是说明性的，而不是对本文所述的本发明的限制。本发明的范围由所附权利要求书限定而不是由前述说明书限定，并且意在将落入权利要求书的等同物的含义和范围内的所有改变包括在其中。

Claims (14)

1.一种用于伤口愈合的药物组合物，其包含增稠剂和由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成的P物质。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述P物质的浓度为0.1μg/mL至100μg/mL。
3.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述P物质的浓度为3μg/mL至8μg/mL。
4.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述增稠剂为羧甲基纤维素钠或羟乙基纤维素。
5.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述增稠剂为羟乙基纤维素。
6.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述增稠剂的含量相对于所述组合物的总重量为1重量％至5重量％。
7.如权利要求1所述的药物组合物，还包含抗氧化剂和表面活性剂。
8.如权利要求7所述的药物组合物，其中所述抗氧化剂为硫代硫酸钠。
9.如权利要求7所述的药物组合物，其中所述抗氧化剂的含量相对于所述组合物的总重量为0.01重量％至1重量％。
10.如权利要求7所述的药物组合物，其中所述表面活性剂为聚山梨醇酯80。
11.如权利要求7所述的药物组合物，其中所述表面活性剂的含量相对于所述组合物的总重量为0.001重量％至0.02重量％。
12.一种用于伤口愈合的准药物组合物，其包含增稠剂和由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成的P物质。
13.如权利要求12所述的准药物组合物，其中所述组合物是用于外用的制剂。
14.一种愈合伤口的方法，包括将权利要求1的药物组合物施用于非人类受试者。
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