CN108107028A - 一种检测三磷酸腺苷（atp）的生物传感器 - Google Patents
一种检测三磷酸腺苷（atp）的生物传感器 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种检测三磷酸腺苷的生物传感器，包括核酸外切酶III，引发链，ATP适配体，发卡探针和分子信标；可采用荧光检测测定溶液中ATP含量，激发波长为486 nm，发射波长为518 nm，检测范围500 nm‑650 nm。本发明的生物传感器的特异性好、灵敏度高，反应条件温和、重复性好；检测方法操作简便、检测周期短；检测的主要过程均是在均相中实现的，提高了反应速度，降低了操作的复杂程度。
Description
技术领域
本发明属于生物传感器技术领域，特别涉及基于核酸适配体检测三磷酸腺苷（ATP）的荧光生物传感器。
背景技术
三磷酸腺苷（Adenosine Triphosphate，ATP）存在于从微生物到高等动植物所有的生物体中，是各种生命活动能量的直接来源，但本身在体内含量并不高，在细胞中ATP的摩尔浓度通常是1-10 mM。ATP在细胞内主要作用是提供能量，参与脂肪、蛋白质、糖和核酸的代谢，在维持生物体的正常机能上有无可替代的作用。ATP是活细胞的重要能量组分，死亡的细胞将不能测到ATP，癌细胞的ATP代谢特别活跃。通过测定细胞内ATP的含量不仅可以观察细胞的状态，还可以观察不同外界因素对细胞的效应。迅速而准确地测定ATP，对于研究细胞乃至机体的生理活性和代谢过程、进行药物敏感实验以及食品卫生监控都有非常重要的意义。ATP的检测被广泛应用于包括肿瘤药物敏感性筛选、细胞凋亡检测、多种重要细胞活性及微生物含量分析等方面。发展ATP的新型检测方法对于医学临床诊断及机体代谢水平具有重要意义。
建立简单、快速、灵敏和准确的ATP分析方法不仅有助于推动生命过程的研究，而且对于临床诊断、药物分析、药物开发等领域也有着重要的实际意义。传统的ATP检测方法有电泳法、高效液相色谱法、同位素示踪法、生物发光法和化学发光法。在电泳法测定ATP中，样品需经电泳分离，再利用紫外分光光度计进行比色，操作比较复杂；采用高效液相色谱法需要繁琐的分离过程，仪器与试剂昂贵，检测时间长，检测器多为紫外检测，灵敏度有限，微量的ATP很难准确检测。同位素示踪法具有简单、灵敏的优点，但放射性同位素影响实验操作者的健康，应用难度大。化学发光法和生物发光法虽然具有很高的测量精度，能够满足不同范围的检测要求，但是其稳定性和特异性是一直存在的问题。因此，急需建立价格低廉、灵敏度高、特异性好的ATP检测方法。
发明内容
为了解决以上现有技术中检测ATP的方法特异性和灵敏度都比较低、检测周期长的问题，本发明提供了一种特异性和灵敏度高、检测速度快的基于核酸外切酶III协助的双放大荧光法检测ATP的生物传感器。
本发明还提供了上述生物传感器荧光检测ATP方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。
一种检测三磷酸腺苷（ATP）的生物传感器，包括核酸外切酶III（ExoIII）引发链（Trigger），ATP适配体（Aptamer），发卡探针（HAP）和分子信标（MB）；
所述引发链的序列如SEQ No. 1所示；
所述ATP适配体的序列如SEQ No. 2所示；
所述发卡探针的序列如SEQ No. 3所示；
所述分子信标的序列如SEQ No. 4所示，其中5’端修饰荧光基团，3’端第四位碱基上修饰荧光猝灭基团。
作为优选，所述荧光基团为6-羧基荧光素（FAM），荧光猝灭基团为4-(4’-二甲基氨基偶氮苯基)苯甲酸（Dabcyl）。
一种采用上述生物传感器检测ATP的方法，包括以下步骤：
（1）将引发链和ATP适配体杂交为探针；
（2）将ATP标准溶液与待测液分别与探针混合，同时加入发卡探针、分子信标、核酸外切酶III和反应缓冲液，37℃恒温孵育；
（3）将步骤（2）所得的溶液检测荧光，根据ATP标准溶液的荧光强度作标准曲线，计算回归方程，由待测液的荧光强度计算其中ATP的浓度。
所述步骤（1）中杂交步骤为95℃下变性，然后缓慢冷却至室温。
Exo III酶浓度为10-150U/mL；优选为10-100U/mL。
HAP浓度为1-6μM；优选为1-5μM。
MB浓度为2-12μM；优选为2-10μM。
孵育时间为60-150min；优选为60-120min。
所述荧光检测的激发波长为486 nm，发射波长为518 nm，检测范围500 nm-650nm。
本生物传感器的工作原理如下：
Trigger与Aptamer进行碱基互补配对形成弓型结构。当有ATP存在时，Aptamer与ATP进行结合，这可以将弓型结构打开，同时使得Trigger释放。释放出的Trigger可以与HAP的3’端进行碱基互补配对，使得HAP的3’形成平末端，在核酸外切酶III的作用下产生R序列，同时Trigger链进行循环利用，实现外切酶III的第一次循环放大。随后，R与MB杂交，将MB的发夹结构打开形成双链结构，外切酶III作用于MB使得R进行循环利用，实现外切酶III协助的第二次循环，同时MB上的荧光基团与猝灭基团分离，产生荧光信号，通过测量荧光强度来定量检测ATP。
本发明具有以下优点：
本发明的生物传感器的特异性好、灵敏度高，反应条件温和、重复性好；检测方法操作简便、检测周期短；检测的主要过程均是在均相中实现的，提高了反应速度，降低了操作的复杂程度；制作该生物传感器的工艺成本低，适用于产业化中价廉的要求。
附图说明
图1为本生物传感器的工作原理示意图；
图2为Exo III对检测ATP荧光强度的影响；
图3为不同浓度HAP对检测ATP荧光强度的影响；
图4为不同浓度MB对检测ATP荧光强度的影响；
图5为不同反应时间对检测ATP荧光强度的影响；
图6为系列浓度ATP的荧光强度；
图7为检测ATP的标准曲线。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明做进一步说明，但本发明不受下述实施例的限制。
实施例1 不同浓度Exo III对检测ATP荧光强度的影响。
（1）将14 μL 灭菌水，2 μL Exo III酶缓冲液，2 μL 100 μM Aptamer链和2 μL100 μM Trigger链加入到预先准备好的灭菌的EP管中；震荡30s，在95℃下孵育5min，缓慢冷却至室温，储存于-20 ℃下备用。
（2）取6μL步骤（1）中的溶液加入EP管中，紧接着加入ATP（5 μL，102 nM）、HAP（3 μL，5μM）、MB（6 μL，10μM）、3 μL Exo III（浓度分别为10 U/mL，25 U/mL，50 U/mL，75 U/mL，100 U/mL，125 U/mL，150 U/mL），6 μL ExoIII酶缓冲液和31 μL灭菌水。震荡30s，放入37℃的恒温箱中孵育2 h。
（3）将60 μL上步反应后的溶液稀释至70 μL，荧光仪激发波长设置为486 nm，发射波长为518 nm，检测范围500 nm-650 nm，读取荧光信号变化。
结果见图2，从图中可以看出，随着核酸外切酶III量的增加，实验得到的荧光强度不断增强，在酶量达到100 U/mL之后，荧光强度基本不变。
实施例2 不同浓度HAP对检测ATP荧光强度的影响。
（1）将14 μL 灭菌水，2 μL Exo III酶缓冲液，2 μL 100 μM Aptamer链和2 μL100 μM Trigger链加入到预先准备好的灭菌的EP管中；震荡30s，在95℃下孵育5min，缓慢冷却至室温，储存于-20 ℃下备用；
（2）取6 μL步骤（1）中的溶液加入EP管中，紧接着加入3 μL HAP（终浓度分别为1 μM，2μM，3 μM，4 μM，5 μM，6 μM）、ATP（5 μL102 nM）、MB（6 μL，5μM）、核酸外切酶III（3 μL，100U/mL），6 μL ExoIII酶缓冲液和31 μL灭菌水。震荡30 s，放入37℃的恒温箱中孵育2 h；
（3）将60 μL 上步反应后的溶液稀释至70 μL，荧光仪激发波长设置为486nm，发射波长为518nm，检测范围500 nm-650 nm，读取荧光信号变化。
结果见图3，从图中可以看出，随着发夹HAP的浓度增加，实验得到的荧光强度不断增强，在发夹HAP浓度达到5 μM之后，荧光强度基本不变。
实施例3 不同浓度MB对检测ATP荧光强度的影响。
（1）将14 μL 灭菌水，2 μL Exo III酶缓冲液，2 μL 100 μM Aptamer链和2 μL100 μM Trigger链加入到预先准备好的灭菌的EP管中；震荡30s，在95℃下孵育5min，缓慢冷却至室温，储存于-20 ℃下备用；
（2）取6μL步骤（1）中的溶液加入EP管中，紧接着加入6 μL MB（终浓度分别为2 μM，4 μM，6 μM，8 μM，10 μM，12 μM）、ATP（5 μL102 nM）、HAP（3 μL，5μM）、Exo III酶（3 μL，100U/mL），6 μL ExoIII酶缓冲液和31 μL灭菌水。震荡30s，放入37℃的恒温箱中孵育2 h；
（3）将60 μL上步反应后的溶液稀释至70 μL，荧光仪激发波长设置为486 nm，发射波长为518 nm，检测范围500 nm-650 nm，读取荧光信号变化。
结果见图4，从图中可以看出，随着MB浓度的增加，实验得到的荧光强度不断增强，在MB浓度达到10 μM之后，荧光强度基本不变。
实施例4 不同反应时间对检测ATP荧光强度的影响。
（1）将14 μL 灭菌水，2 μL外切酶缓冲液，2 μL 100 μM Aptamer链和2 μL 100 μMTrigger链加入到预先准备好的灭菌的EP管中；震荡30s，在95℃下孵育5min，缓慢冷却至室温，储存于-20 ℃下备用；
（2）取6μL步骤（2）中的溶液加入EP管中，紧接着加入HAP（3 μL，5μM）、ATP（5 μL，102nM）、MB（6 μL，10μM）、核酸外切酶III（3 μL，100U/mL），6 μL ExoIII酶缓冲液和31 μL灭菌水。震荡30 s，放入37℃的恒温箱中分别孵育60 min，75 min，90 min，105 min，120 min，135 min，150 min。
（3）将60 μL上步反应后的溶液稀释至70 μL，荧光仪激发波长设置为486 nm，发射波长为518 nm，检测范围500 nm-650 nm，读取荧光信号变化。
结果见图5，从图中可以看出，随着反应时间的增加，实验得到的荧光强度不断增强，在反应时间达到120 min之后，荧光强度基本不变。说明核酸外切酶III协助的双循环放大检测ATP的最佳检测时间为120 min
实施例5 对ATP的荧光检测。
（1）将14 μL 灭菌水，2 μL ExoIII缓冲液，2 μL 100 μM Aptamer链和2 μL 100 μM Trigger链加入到预先准备好的灭菌的EP管中。震荡30s，在95℃下孵育5min，缓慢冷却至室温，储存于-20 ℃下备用；
（2）取6μL步骤（1）中的溶液加入EP管中，紧接着加入5 μL ATP（终浓度为0，1×10-3，1×10-2，1×10-1，1，1×101，1×102 nM）或待测液、HAP（3 μL，5μM）、MB（6 μL，10μM）、ExoIII酶（3 μL，100U/mL），6 μL ExoIII酶缓冲液和31 μL灭菌水。震荡30s，放入37℃的恒温箱中孵育2 h；
（3）将60 μL上步反应后的溶液稀释至70 μL，荧光仪激发波长设置为486nm，发射波长为518nm，检测范围500nm-650nm，读取荧光信号变化。
检测结果如图6所示，图中可知，当ATP浓度在1 pM到1×105 pM时吸光值不断减小，反应稳定进行。在ATP的浓度在1 pM到1×105 pM时，ATP浓度的对数与荧光峰值的大小成正比关系，拟合曲线：F = 15.8 + 145.9×log (CATP / pM)，其中，Y是荧光强度峰值，C是ATP的浓度。R为0.985。经计算得到该方法的检测下限为0.8 pM。经测定，待测液的荧光强度是201，ATP的浓度为18.3 pM。计算得到该方法的检测下限为0.8 pM。
<110> 济南大学
<120> 一种检测三磷酸腺苷（ATP）的生物传感器
<130> 20171212
<160> 4
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 26
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Trigger
<400> 1
ccttcctcca aaaccccagg taaaaa 26
<210> 2
<211> 31
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Apt
<400> 2
acctggggga gtattgcgga ggaaggtttt t 31
<210> 3
<211> 42
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HAP
<400> 3
gataacgccc cgactaagta tacgttatct tttggaggaa gg 42
<210> 4
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> MB
<400> 4
aacgcttagt cggggcgtt 19
Claims (6)
1.一种检测三磷酸腺苷（ATP）的生物传感器，其特征在于，包括核酸外切酶III，引发链，ATP适配体，发卡探针和分子信标；
所述引发链的序列如SEQ No. 1所示；
所述ATP适配体的序列如SEQ No. 2所示；
所述发卡探针的序列如SEQ No. 3所示；
所述分子信标的序列如SEQ No. 4所示，其中5’端修饰荧光基团，3’端第四位碱基上修饰荧光猝灭基团。
2.根据权利要求1所述的生物传感器，其特征在于，所述荧光基团为6-羧基荧光素，荧光猝灭基团为4-(4’-二甲基氨基偶氮苯基)苯甲酸。
3.一种采用如权利要求1所述的生物传感器检测ATP的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将引发链和ATP适配体杂交为探针；
（2）将ATP标准溶液与待测液分别与探针混合，同时加入发卡探针、分子信标、核酸外切酶III和反应缓冲液，37℃恒温孵育；
（3）将步骤（2）所得的溶液检测荧光，根据ATP标准溶液的荧光强度作标准曲线，计算回归方程，由待测液的荧光强度计算其中ATP的浓度。
4.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤（1）中杂交步骤为95℃下变性，然后缓慢冷却至室温。
5. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于，ExoIII酶浓度为10-150U/mL； HAP浓度为1-6μM；MB浓度为2-12μM；孵育时间为60-150min。
6. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤（3）中荧光检测的激发波长为486nm，发射波长为518 nm，检测范围500 nm-650 nm。
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|---|---|
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Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109406467A (zh) * | 2018-10-16 | 2019-03-01 | 商丘师范学院 | 用于atp检测的分裂适配体传感器及其应用 |
| CN109470673A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-03-15 | 济南大学 | 一种检测三磷酸腺苷的荧光生物传感器及其制备方法 |
| CN109504740A (zh) * | 2018-11-26 | 2019-03-22 | 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 | 一种循环放大检测方法及其用途 |
| CN109975561A (zh) * | 2019-04-25 | 2019-07-05 | 河北医科大学 | 一种基于核酸适配体的超灵敏检测多巴胺的方法 |
| CN110609020A (zh) * | 2019-08-15 | 2019-12-24 | 济南大学 | 基于回文分子信标检测atp的生物传感器及其制备方法和应用 |
| CN112067602A (zh) * | 2020-08-19 | 2020-12-11 | 南昌大学 | 一种基于酶切辅助无标记适体传感器的atp化学发光检测方法 |
| CN112557646A (zh) * | 2021-01-21 | 2021-03-26 | 天津工业大学 | 一种基于核酸适体与酶促靶标循环的荧光三磷酸腺苷传感器 |
| CN112877329A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-06-01 | 大连理工大学 | 一种基于脱氧核酶的细胞外atp快速传感方法及应用试剂盒 |
| CN112899346A (zh) * | 2021-01-05 | 2021-06-04 | 南京普济生物有限公司 | 一种降低pcr非特异性扩增的核苷酸及其设计方法与应用 |
| CN113552106A (zh) * | 2021-07-23 | 2021-10-26 | 济南大学 | 一种检测ATP、谷胱甘肽、Fpg糖基化酶的通用荧光生物传感器 |
| CN114047243A (zh) * | 2021-11-16 | 2022-02-15 | 南开大学 | 一种基于CRISPR/Cas12a检测SARS-CoV-2的电化学适配体传感器 |
| CN114410601A (zh) * | 2021-12-24 | 2022-04-29 | 山东大学 | 一种酶包埋的zif-8/dna纳米复合探针及其制备方法和应用 |
| CN114437709A (zh) * | 2021-09-15 | 2022-05-06 | 中国科学院海洋研究所 | 一种核酸功能化mof材料及其制备和应用 |
-
2018
- 2018-02-02 CN CN201711324298.1A patent/CN108107028A/zh not_active Withdrawn
Cited By (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109406467B (zh) * | 2018-10-16 | 2021-01-29 | 商丘师范学院 | 用于atp检测的分裂适配体传感器及其应用 |
| CN109406467A (zh) * | 2018-10-16 | 2019-03-01 | 商丘师范学院 | 用于atp检测的分裂适配体传感器及其应用 |
| CN109504740A (zh) * | 2018-11-26 | 2019-03-22 | 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 | 一种循环放大检测方法及其用途 |
| CN109470673A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-03-15 | 济南大学 | 一种检测三磷酸腺苷的荧光生物传感器及其制备方法 |
| CN109975561A (zh) * | 2019-04-25 | 2019-07-05 | 河北医科大学 | 一种基于核酸适配体的超灵敏检测多巴胺的方法 |
| CN109975561B (zh) * | 2019-04-25 | 2021-11-09 | 河北医科大学 | 一种基于核酸适配体的超灵敏检测多巴胺的方法 |
| CN110609020A (zh) * | 2019-08-15 | 2019-12-24 | 济南大学 | 基于回文分子信标检测atp的生物传感器及其制备方法和应用 |
| CN110609020B (zh) * | 2019-08-15 | 2021-10-01 | 济南大学 | 基于回文分子信标检测atp的生物传感器及其制备方法和应用 |
| CN112067602A (zh) * | 2020-08-19 | 2020-12-11 | 南昌大学 | 一种基于酶切辅助无标记适体传感器的atp化学发光检测方法 |
| CN112067602B (zh) * | 2020-08-19 | 2021-12-14 | 南昌大学 | 一种基于酶切辅助无标记适体传感器的atp化学发光检测方法 |
| CN112899346A (zh) * | 2021-01-05 | 2021-06-04 | 南京普济生物有限公司 | 一种降低pcr非特异性扩增的核苷酸及其设计方法与应用 |
| CN112557646A (zh) * | 2021-01-21 | 2021-03-26 | 天津工业大学 | 一种基于核酸适体与酶促靶标循环的荧光三磷酸腺苷传感器 |
| CN112877329A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-06-01 | 大连理工大学 | 一种基于脱氧核酶的细胞外atp快速传感方法及应用试剂盒 |
| CN113552106A (zh) * | 2021-07-23 | 2021-10-26 | 济南大学 | 一种检测ATP、谷胱甘肽、Fpg糖基化酶的通用荧光生物传感器 |
| CN114437709A (zh) * | 2021-09-15 | 2022-05-06 | 中国科学院海洋研究所 | 一种核酸功能化mof材料及其制备和应用 |
| CN114047243A (zh) * | 2021-11-16 | 2022-02-15 | 南开大学 | 一种基于CRISPR/Cas12a检测SARS-CoV-2的电化学适配体传感器 |
| CN114410601A (zh) * | 2021-12-24 | 2022-04-29 | 山东大学 | 一种酶包埋的zif-8/dna纳米复合探针及其制备方法和应用 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WW01 | Invention patent application withdrawn after publication | ||
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Application publication date: 20180601 |