CN108102012B - 一种用于三叶苷分离纯化的改性树脂及其在木姜叶柯中的应用 - Google Patents

一种用于三叶苷分离纯化的改性树脂及其在木姜叶柯中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN108102012B
CN108102012B CN201711389735.8A CN201711389735A CN108102012B CN 108102012 B CN108102012 B CN 108102012B CN 201711389735 A CN201711389735 A CN 201711389735A CN 108102012 B CN108102012 B CN 108102012B
Authority
CN
China
Prior art keywords
resin
trilobatin
chloromethylated resin
chloromethylated
washing
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201711389735.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108102012A (zh
Inventor
刘佳佳
刘朝水
刘健
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Central South University
Original Assignee
Central South University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Central South University filed Critical Central South University
Priority to CN201711389735.8A priority Critical patent/CN108102012B/zh
Publication of CN108102012A publication Critical patent/CN108102012A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108102012B publication Critical patent/CN108102012B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F8/00—Chemical modification by after-treatment
    • C08F8/30—Introducing nitrogen atoms or nitrogen-containing groups
    • C08F8/32—Introducing nitrogen atoms or nitrogen-containing groups by reaction with amines
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
    • B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
    • B01J20/265—Synthetic macromolecular compounds modified or post-treated polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06—Separation; Purification
    • C07H1/08—Separation; Purification from natural products
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F8/00—Chemical modification by after-treatment
    • C08F8/18—Introducing halogen atoms or halogen-containing groups
    • C08F8/24—Haloalkylation

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了一种改性树脂及其在分离纯化木姜叶柯中三叶苷的应用。以传统树脂为起始树脂，经氯甲基化后与氨基葡萄糖盐酸盐反应得到氨基葡萄糖改性树脂。将木姜叶柯嫩叶干燥、粉碎、有机溶剂提取、碱化、萃取，萃取液经氨基葡萄糖改性树脂上柱纯化，浓缩结晶得到高纯度的三叶苷产品。经氨基葡萄糖改性后的树脂对木姜叶柯甜茶中三叶苷有较高的选择性，容易洗脱，减少了树脂的用量，改性树脂经乙醇洗脱之后，再生性能较好，有利于循环使用。

Description

一种用于三叶苷分离纯化的改性树脂及其在木姜叶柯中的 应用
技术领域
本发明涉及天然产物提取分离技术领域，具体涉及一种分离纯化用的树脂及其在木姜叶柯中的应用。
背景技术
三叶苷，(Trilobatin,CAS NO.4192-90-9),是木姜叶柯甜茶中一种重要的黄酮类化合物，分子式C21H24O10,相对分子质量436.413，其化学名称为1-[4-(β-D-Glucopyranosyloxy)-2,6-dihydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-propanone。三叶苷属于二氢查尔酮类化合物，具有抑制与Ⅱ型糖尿病有关的α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性，抗氧化性，清除自由基的活性，其甜度是蔗糖的300倍。在新药和功能性食品开发等方面具有广阔的应用前景。
专利201510358050.1报道了“一种大量分离天然甜味剂三叶苷的方法”，包括提取，分离纯化三叶苷的方法。该方法后续的分离采用的高速逆流萃取技术，成本高，不利于扩大化生产。
专利200910027421.2报道了“一种含三叶苷活性提取物及其用途”，包括提取方法以及用途等内容。分离方法采用的是传统树脂，消耗溶剂大，选择性不高，耗时较长。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种低成本、选择性高的用于高效分离纯化三叶苷的新型树脂，用该树脂来分离纯化三叶苷，树脂用量少，洗脱溶剂少，三叶苷回收率高，能有效降低生产成本。
为了解决上述问题，本发明采用传统树脂进行氯甲基化，然后与氨基葡萄糖盐酸盐反应得到新型树脂。对该类新型树脂的研究表明，该类树脂能高效选择性的吸附木姜叶柯甜茶提取液中的三叶苷，提取液中的三叶苷被选择性的吸附在新型树脂上，经梯度浓度乙醇溶液洗脱后可得到浓度较高的三叶苷洗脱液。将洗脱液碱化后经乙酸乙酯等低毒低成本溶剂萃取，可得高纯度的三叶苷。
该新型树脂具体制作步骤如下：
(1)商业树脂经预处理后，在体积为树脂质量5～10倍的二氯甲烷溶液中充分溶胀，加入质量为树脂质量1～2倍的氯化钠、质量为树脂质量0.5～2倍的氯化锌、体积为树脂质量0.5～1倍的氯甲基甲醚后回流搅拌10～40h，过滤、洗涤、干燥，得氯甲基化树脂；商业树脂优先选AB-8。
(2)将步骤(1)得到的氯甲基化树脂用无水乙醇浸泡12～24h，用蒸馏水洗至无醇味，再用1.0M HCl浸泡3h，洗至中性，然后用1.0M NaOH浸泡3h，再洗至中性后真空330K干燥8h。
(3)将步骤(2)中得到的树脂于体积为树脂质量10～20倍的DMF溶胀24～48h，加入质量为树脂质量2～3倍的氨基葡萄糖盐酸盐、质量为树脂质量2～4倍K2CO3。343～363K条件下恒温机械搅拌10～20h。反应结束后，过滤、水洗、醇洗、真空干燥，得到氨基葡萄糖修饰的树脂。
该新型树脂用于分离纯化木姜叶柯甜茶三叶苷的步骤如下：
a.木姜叶柯甜茶叶采摘、洗净、烘干、粉碎；
b.有机溶剂加热回流提取、碱性溶液萃取；
c.萃取液经新型树脂纯化；
d.30％-90％乙醇溶液洗脱、浓缩、结晶、干燥即得三叶苷产品。
与已有专利相比，本发明的特点和优点在于：采用高选择性的新型树脂对木姜叶柯甜茶叶提取液进行分离纯化，商业树脂中引入氨基葡萄糖官能团成为新型树脂后对提取酸液中三叶苷的吸附量由引入之前的3mg/g提高为15mg/g,提取液经新型树脂选择性吸附后，目标产物富集在树脂表面或者孔隙中，经梯度浓度的乙醇洗脱可以得到纯度较高的三叶苷产品。新型树脂的高选择性吸附有效的减少树脂用量，处理500g木姜叶柯甜茶叶，需要的新型树脂干重约为40g；后处理的碱化萃取过程采用经济低毒的石油醚、乙酸乙酯等溶剂作为萃取溶剂。有效节约生产成本，有利于工业化生产。
具体实施方式
本发明中涉及到的部分新型树脂及其用于分离纯化三叶苷的方法，用以下实施例进行说明，但本发明的保护范围不局限于此。
实施例1：
(1)将预处理好的200g AB-8干树脂加入三颈瓶中，加入1500mL二氯甲烷浸泡溶胀48h，后分别加入400g氯化钠、200g氯化锌、100mL氯甲基甲醚，于333K条件下回流搅拌24h，后经去离子水、甲醇洗涤，干燥，得氯甲基化树脂。
(2)称取步骤(1)得到的氯甲基化树脂100g用无水乙醇浸泡24h，用蒸馏水洗至无醇味，再用1.0M HCl浸泡3h，洗至中性，然后用1.0M NaOH浸泡3h，再洗至中性后真空330K干燥8h。
(3)将步骤(2)中得到的树脂于1500mL的DMF溶胀48h，加入质量为300g的氨基葡萄糖盐酸盐、质量为200g的K2CO3。353K条件下恒温机械搅拌20h。反应结束后，过滤、水洗，95％乙醇索氏抽提10h，产物在323K下真空干燥48h得到氨基葡萄糖修饰的新型树脂。
(4)称取100g木姜叶柯嫩叶粉碎，用80％的乙醇溶剂1000mL回流提取3次，合并提取液，浓缩去除醇溶液；再加入250mL 1％的碳酸钠溶液碱化，过滤，得木姜叶柯甜茶提取碱液。
(5)将步骤(4)得到的提取液上柱，用30％-90％乙醇溶液洗脱，用100mL乙酸乙酯萃取，浓缩得到纯度大于80％的三叶苷3.53g。
实施例2：
(1)将预处理好的200g AB-8干树脂加入三颈瓶中，加入2000mL二氯甲烷浸泡溶胀24h，后分别加入200g氯化钠、400g氯化锌、200mL氯甲基甲醚，于333K条件下回流搅拌24h，后经去离子水、甲醇洗涤，干燥，得氯甲基化树脂。
(2)称取步骤(1)得到的氯甲基化树脂100g用无水乙醇浸泡12h，用蒸馏水洗至无醇味，再用1.0M HCl浸泡3h，洗至中性，然后用1.0M NaOH浸泡3h，再洗至中性后真空330K干燥8h。
(3)将步骤(2)中得到的树脂于2000mL的DMF溶胀24h，加入质量为200g的氨基葡萄糖盐酸盐、质量400g的K2CO3。363K条件下恒温机械搅拌10h。反应结束后，过滤，水洗，95％乙醇索氏抽提10h，产物在323K下真空干燥48h得到氨基葡萄糖修饰的新型树脂。
(4)称取100g木姜叶柯干燥嫩叶粉碎，用85％的乙醇溶剂1000mL回流提取3次，合并提取液，浓缩去除醇溶液；再加入250mL 1％的碳酸钠溶液酸化，过滤，得木姜叶柯甜茶提取碱液。
(5)将步骤(4)得到的提取液上柱，用30％-90％乙醇溶液洗脱，用100mL乙酸乙酯萃取，浓缩得到纯度大于80％的三叶苷3.04g。

Claims (1)

1.一种用于三叶苷纯化分离的树脂分离纯化三叶苷的方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)将预处理好的200gAB-8干树脂加入三颈瓶中，加入1500mL二氯甲烷浸泡溶胀48h，后分别加入400g氯化钠、200g氯化锌、100mL氯甲基甲醚，于333K条件下回流搅拌24h，后经去离子水、甲醇洗涤，干燥，得氯甲基化树脂；
(2)称取步骤(1)得到的氯甲基化树脂100g用无水乙醇浸泡24h，用蒸馏水洗至无醇味，再用1.0M HCl浸泡3h，洗至中性，然后用1.0M NaOH浸泡3h，再洗至中性后真空330K干燥8h；
(3)将步骤(2)中得到的树脂于1500mL的DMF溶胀48h，加入质量为300g的氨基葡萄糖盐酸盐、质量为200g的K2CO3，353K条件下恒温机械搅拌20h，反应结束后，过滤、水洗，95％乙醇索氏抽提10h，产物在323K下真空干燥48h得到氨基葡萄糖修饰的新型树脂；
(4)称取100g木姜叶柯嫩叶粉碎，用80％的乙醇溶剂1000mL回流提取3次，合并提取液，浓缩去除醇溶液；再加入250mL 1％的碳酸钠溶液碱化，过滤，得木姜叶柯甜茶提取碱液；
(5)将步骤(4)得到的提取液上柱，用30％-90％乙醇溶液洗脱，用100mL乙酸乙酯萃取，浓缩得到三叶苷。
CN201711389735.8A 2017-12-21 2017-12-21 一种用于三叶苷分离纯化的改性树脂及其在木姜叶柯中的应用 Active CN108102012B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711389735.8A CN108102012B (zh) 2017-12-21 2017-12-21 一种用于三叶苷分离纯化的改性树脂及其在木姜叶柯中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711389735.8A CN108102012B (zh) 2017-12-21 2017-12-21 一种用于三叶苷分离纯化的改性树脂及其在木姜叶柯中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108102012A CN108102012A (zh) 2018-06-01
CN108102012B true CN108102012B (zh) 2020-11-24

Family

ID=62211579

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201711389735.8A Active CN108102012B (zh) 2017-12-21 2017-12-21 一种用于三叶苷分离纯化的改性树脂及其在木姜叶柯中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108102012B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110143988B (zh) * 2019-05-08 2022-07-05 湖南医药学院 一种三叶苷的提取方法
CN110946196B (zh) * 2019-11-22 2021-08-24 中南大学 木姜叶柯冲剂及制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101874824A (zh) * 2009-05-01 2010-11-03 常州高新技术产业开发区三维工业技术研究所有限公司 一种含三叶苷的活性提取物及其用途
CN101904882A (zh) * 2010-07-28 2010-12-08 广西壮族自治区中医药研究院 一种木姜叶柯总黄酮的制备方法
CN104711307A (zh) * 2015-04-09 2015-06-17 佛山市金骏康健康科技有限公司 一种柚子农业废弃物资源高值化利用的方法
CN104974201A (zh) * 2015-06-25 2015-10-14 中国农业科学院特产研究所 一种大量分离天然甜味剂三叶苷的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101874824A (zh) * 2009-05-01 2010-11-03 常州高新技术产业开发区三维工业技术研究所有限公司 一种含三叶苷的活性提取物及其用途
CN101904882A (zh) * 2010-07-28 2010-12-08 广西壮族自治区中医药研究院 一种木姜叶柯总黄酮的制备方法
CN104711307A (zh) * 2015-04-09 2015-06-17 佛山市金骏康健康科技有限公司 一种柚子农业废弃物资源高值化利用的方法
CN104974201A (zh) * 2015-06-25 2015-10-14 中国农业科学院特产研究所 一种大量分离天然甜味剂三叶苷的方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
含亲水性链结构的聚苯乙烯基螯合吸附剂;孙昌梅;《中国知网博士学位论文全文数据库 工程科技I辑》;20090415(第4期);第B016-15页 *
多穗柯黄酮化合物提取与分离技术研究;王倩文等;《广州化工》;20140731;第42卷(第14期);第69-71页 *
孙昌梅.含亲水性链结构的聚苯乙烯基螯合吸附剂.《中国知网博士学位论文全文数据库 工程科技I辑》.2009,(第4期), *

Also Published As

Publication number Publication date
CN108102012A (zh) 2018-06-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3064214B1 (en) Separation and purification method for vancomycin hydrochloride of high purity
CN108102012B (zh) 一种用于三叶苷分离纯化的改性树脂及其在木姜叶柯中的应用
CN100447147C (zh) 氨基糖苷类抗生素的大孔吸附树脂富集纯化方法
CN107501045A (zh) 一种利用大孔吸附树脂从发酵液中分离提纯丁三醇的方法
CN115093386B (zh) 一种无色无味无硼酸盐的玻色因的生产方法
CN106632137A (zh) 氨噻肟酸乙酯的制备方法
CN113512036B (zh) 一种从川黄柏中提取分离黄柏碱的方法
CN102311486B (zh) 使用大孔弱酸性阳离子树脂分离提取恩拉霉素的方法
CN108840869B (zh) 一种从吴茱萸中分离纯化去氢吴茱萸碱的方法
CN104231011B (zh) 一种毛蕊花糖苷的制备方法
CN111269309B (zh) 一种glp-1类似多肽的纯化方法
WO2012055253A1 (zh) 一种辅酶q10层析硅胶的再生方法
CN101987856A (zh) 一种花色苷单体矢车菊-3-葡萄糖苷的制备方法
CN101696201B (zh) 儿茶素类物质的制备方法
CN102250183B (zh) 一种以人参花蕾为原材料制备高纯度人参皂苷Re的方法
CN101838315B (zh) 雷莫拉宁的分离方法
CN111253221B (zh) 一种大麻二酚分离纯化的方法
CN111187328B (zh) 一种制备罗汉果醇的方法
CN110746303A (zh) 一种咖啡豆的处理方法及其提取物提纯方法
CN114015732A (zh) 一种穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的工业化制备方法
CN107032983A (zh) 一种利用大孔吸附树脂从发酵液中提取分离琥珀酸的方法
CN107712169B (zh) 一种茶叶加工方法
CN112125842A (zh) 一种从3-氰基吡啶废水中分离提纯烟酸的方法
CN112225765A (zh) 一种番泻苷a的纯化方法和应用
CN103159949A (zh) 一种提取ε-聚赖氨酸的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant