CN108085311A - 一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法 - Google Patents

一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108085311A
CN108085311A CN201611022542.4A CN201611022542A CN108085311A CN 108085311 A CN108085311 A CN 108085311A CN 201611022542 A CN201611022542 A CN 201611022542A CN 108085311 A CN108085311 A CN 108085311A
Authority
CN
China
Prior art keywords
lactic acid
acid bacteria
apple
preparation
block
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201611022542.4A
Other languages
English (en)
Inventor
陈涛
陈福生
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201611022542.4A priority Critical patent/CN108085311A/zh
Publication of CN108085311A publication Critical patent/CN108085311A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/04—Preserving or maintaining viable microorganisms

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Fruits And Vegetables (AREA)

Abstract

采用苹果作为固定材料，洗净去皮后切成小块，添加到数量为108‑1010CFU/mL的纯培养的乳酸菌悬浮液中，使菌液浸没苹果块，37℃静置培养9‑12h后，倒掉菌液，用无菌水清洗2‑3次，得到含乳酸菌苹果块固定化载体。将固定化载体在‑80℃预冻3h，然后在‑54℃，5mtorr下冻干24‑36h，得固定化乳酸菌冻干菌剂。本发明得到的冻干菌剂活菌数量多、稳定性好、成本低廉、使用方便，可用于乳酸菌发酵食品的生产和直投式冻干发酵剂的制备。

Description

一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法
技术领域
本发明涉及一种采用苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的生产方法。属于微生物保藏与活菌制剂的制备领域。
背景技术
乳酸菌(Lactic acid bacteria，LAB)自古以来就被人类作为食品微生物利用的一大类细菌，广泛应用于发酵乳制品、医药、轻工业和畜牧业等领域，是公认的安全的食品微生物。由于LAB的培养增殖难度高、对外抵抗力差，难以长期保存，所以LAB的保藏和在生产过程中的菌种活化与扩大培养一直是困扰相关产品生产的一个难题。为此，目前在酸奶等LAB发酵产品的生产中，越来越多的生产厂家使用直投式的LAB发酵剂(无需进行菌种扩大培养，可直接用于生产的一种菌剂)。这样既可以大大节约种子液的准备时间，也可以更好地保证产品的稳定性和一致性。为了方便保藏、运输和使用，在直投式LAB等发酵剂的生产过程中，需要对微生物菌体进行干燥处理。在干燥过程中，通常需要采用包埋剂(保护剂)对微生物菌体进行处理，以提高直投式发酵剂的微生物存活率和使用过程中的复苏能力。
传统的包埋剂主要包括无机材料和有机高分子材料。无机材料有陶瓷、活性炭和氧化铝等；有机高分子材料又分为天然高分子材料和人工合成高分子材料。其中天然高分子材料有海藻酸钠、琼脂、明胶、卡拉胶和壳聚糖等；人工合成高分子材料有聚乙烯亚胺(PEI)，聚乙烯醇(PVA)等。随着消费者对食品安全的要求越来越高，传统的包埋剂已不能满足人们的需求，寻找新型绿色安全的包埋剂成为研究热点。中国专利CN102919669B以谷物粉为包埋材料固定化益生菌，以纯谷物为原料，在常温下用水浸泡8-12h后，磨浆，再离心分离不溶性成分，取可溶部分进行自乳化处理，并调节pH使自乳化处理后的溶液中微胶囊表面带负电荷，最后将得到的谷物胶体溶液并与益生菌培养液混合后干燥成微胶囊粉末，得到固定化益生菌粉。中国专利CN104388416A发明了一种微孔淀粉包埋LAB的制备方法，将微孔淀粉于烧杯中，加入LAB悬浮液，搅拌10min使菌完全吸附，再加入海藻酸钠溶液，继续搅拌，至形成均匀乳化液。将乳化液挤入一定浓度CaCl2溶液中，固化30min，形成微胶囊。固化后，把颗粒转移到浓度为3.5％的CaCl2溶液中浸泡一段时间，使其硬化。硬化处理后，用清水漂去CaCl2残液，立即进行冷冻干燥，即得成品。这些专利均需要对包埋材料进行预处理，时间较长，而且要加入一些化学试剂，应用于食品领域安全性难以保证，而且制备步骤比较繁琐。
本发明使用的苹果是一种可食用的天然材料，由于其内部含有大量由微管束，内表面积大，利于吸附微生物细胞，且苹果来源丰富价格低，是一种理想的生产直投式LAB发酵剂的保护材料。国内未见相关研究报道与专利申请。
发明内容
本发明利用苹果块为包埋剂制备直投式乳酸菌发酵剂，能够解决游离乳酸菌培养增殖难度高、对外抵抗力差，难以长期保存的问题，提高了乳酸菌应用的方便性，延长了乳酸菌的保藏期。
其工艺流程及工艺控制条件如下：
LAB固定化载体制备：采用苹果作为固定材料，洗净去皮后切成小块，取苹果块添加到数量为108-1010CFU/mL的纯培养的乳酸菌培养液中，使菌液浸没苹果块，37℃静置培养9-12h后，倒掉菌液，用无菌水清洗2-3次，得乳酸菌固定化载体。固定化乳酸菌冻干发酵剂的制备：将固定化载体在-80℃预冻3h，然后在-54℃，5mtorr下冻干24-36h。
所述的苹果为市场上购买的新鲜无腐烂的可食用的苹果。所述的苹果块的大小为长宽高不大于1cm的块状。
所述的乳酸菌菌液的浓度为108-1010CFU/mL，为纯培养的。所述的固定化载体是苹果块浸没在乳酸菌菌液中，37℃静置培养9-12h后，倒掉菌液，用无菌水清洗2-3次，得乳酸菌固定化载体，载体中乳酸菌活菌数量不小于108CFU/g。
本发明利用苹果块为包埋剂制备直投式乳酸菌发酵剂，该发酵剂可广泛用于乳酸菌发酵食品，固定化材料是可食用的苹果，可作为原辅料直接添加到食品中。制备的直投式乳酸菌发酵剂，细胞冻干以后的存活率在80％以上，复苏效率稳定。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1
一种以苹果块为固定化载体的乳酸菌的保藏方法，该方法是采用苹果作为固定材料，洗净去皮后切成0.3cm见方的小块，取苹果块添加到数量为108CFU/mL的纯培养的乳酸菌悬浮液中，使菌液浸没苹果块，37℃静置培养9h；固定过程完成以后，倒掉菌液，用无菌水清洗2次，得乳酸菌固定化载体。将固定化载体在-80℃预冻3h，然后在-54℃，5mtorr下冻干24h，得固定化乳酸菌冻干发酵剂。
实施例2
一种以苹果块为固定化载体的乳酸菌的保藏方法，该方法是采用苹果作为固定材料，洗净去皮后切成0.6cm见方的小块，取苹果块添加到数量为109CFU/mL的纯培养的乳酸菌悬浮液中，使菌液浸没苹果块，37℃静置培养10h；固定过程完成以后，倒掉菌液，用无菌水清洗3次，得乳酸菌固定化载体。将固定化载体在-80℃预冻3h，然后在-54℃，5mtorr下冻干30h，得固定化乳酸菌冻干发酵剂。
实施例3
一种以苹果块为固定化载体的乳酸菌的保藏方法，该方法是采用苹果作为固定材料，洗净去皮后切成1cm见方的小块，取苹果块添加到数量为1010CFU/mL的纯培养的乳酸菌悬浮液中，使菌液浸没苹果块，37℃静置培养12h；固定过程完成以后，倒掉菌液，用无菌水清洗3次，得乳酸菌固定化载体。将固定化载体在-80℃预冻3h，然后在-54℃，5mtorr下冻干36h，得固定化乳酸菌冻干发酵剂。

Claims (5)

1.一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法，其特征在于，采用苹果作为固定材料，洗净去皮后切成小块，取苹果块添加到数量为108-1010CFU/mL的纯培养的乳酸菌悬浮液中，使菌液浸没苹果块，37℃静置培养9-12h，倒掉菌液，用无菌水清洗2-3次，得乳酸菌固定化载体。将固定化载体在-80℃预冻3h，然后在-54℃，5mtorr下冻干24-36h，得固定化乳酸菌冻干冻干菌剂。
2.根据权利要求1根据权利要求所述的一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法，其特征在于，所述的苹果为市场上购买的新鲜无腐烂的可食用的苹果，所述的苹果块的大小为长宽高分别为不大于1cm的块状。
3.根据权利要求1所述的一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法，其特征在于，所述的乳酸菌悬浮液制备方法为：将保存菌株分别用MRS液体培养基活化2次，然后接种于MRS液体培养基中，于37℃下培养至对数生长期，5 000r/min，4℃离心10min，收集菌体，加入少许无菌生理盐水悬浮菌泥，再倒入15g/L无菌CaC12溶液中制成悬浮液，乳酸菌的浓度为108-1010CFU/mL。
4.根据权利要求1所述的一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法，其特征在于，所述的固定化载体是苹果块浸没在乳酸菌菌液中，37℃静置培养9-12h后，倒掉菌液，用无菌水清洗2-3次，得乳酸菌固定化载体，载体中乳酸菌活菌数量不少于108CFU/g。
5.根据权利要求1所述的一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法，其特征在于，固定化载体在-80℃预冻3h，然后在-54℃，5mtorr下冻干24-36h，得固定化乳酸菌冻干菌剂，存活率在80％以上，且复苏效率稳定。
CN201611022542.4A 2016-11-21 2016-11-21 一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法 Pending CN108085311A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611022542.4A CN108085311A (zh) 2016-11-21 2016-11-21 一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611022542.4A CN108085311A (zh) 2016-11-21 2016-11-21 一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108085311A true CN108085311A (zh) 2018-05-29

Family

ID=62169254

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201611022542.4A Pending CN108085311A (zh) 2016-11-21 2016-11-21 一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108085311A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110042094A (zh) * 2019-05-21 2019-07-23 张红宇 一种杨梅汁固定化发酵方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1793325A (zh) * 2005-11-30 2006-06-28 东北农业大学 芳香型直投式酸奶发酵剂
CN101502287A (zh) * 2009-02-18 2009-08-12 上海谱莱生物技术有限公司 一种直投式酸奶发酵剂的制备方法
CN102172253A (zh) * 2011-01-20 2011-09-07 天津商业大学 一种常温下制备乳酸菌直投式发酵剂的方法
CN103602617A (zh) * 2013-11-15 2014-02-26 文昌中椰科技有限公司 一种直投式木葡萄糖酸醋杆菌发酵剂及其制备方法
CN104694417A (zh) * 2015-01-26 2015-06-10 江南大学 一种利用复合保护剂提高抗冻性的乳酸菌酸面团发酵剂冻干粉

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1793325A (zh) * 2005-11-30 2006-06-28 东北农业大学 芳香型直投式酸奶发酵剂
CN101502287A (zh) * 2009-02-18 2009-08-12 上海谱莱生物技术有限公司 一种直投式酸奶发酵剂的制备方法
CN102172253A (zh) * 2011-01-20 2011-09-07 天津商业大学 一种常温下制备乳酸菌直投式发酵剂的方法
CN103602617A (zh) * 2013-11-15 2014-02-26 文昌中椰科技有限公司 一种直投式木葡萄糖酸醋杆菌发酵剂及其制备方法
CN104694417A (zh) * 2015-01-26 2015-06-10 江南大学 一种利用复合保护剂提高抗冻性的乳酸菌酸面团发酵剂冻干粉

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Y. KOURKOUTAS: "Lactobacillus casei cell immobilization on fruit pieces for probiotic additive, fermented milk and lactic acid production", 《PROCESS BIOCHEMISTRY》 *
陈涛: "苹果块固定化乳酸菌的发酵特性及冻干剂制备", 《食品与发酵工业》 *
陈涛: "适合豆乳发酵的乳酸菌筛选及其应用", 《食品与发酵工业》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110042094A (zh) * 2019-05-21 2019-07-23 张红宇 一种杨梅汁固定化发酵方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103598420B (zh) 一种香蕉茎叶青贮的微生物复合菌剂及其制备方法
CN106047709B (zh) 一种植物乳杆菌冻干粉及其制备方法
CN104894098B (zh) 一种固定化益生菌发酵剂及其制备方法
CN111849810B (zh) 拮抗幽门螺旋杆菌的乳酸菌zjuids03及其应用
CN112553128B (zh) 益生菌冻干粉及其制备方法和应用
CN107937320A (zh) 一株植物乳杆菌、该植物乳杆菌冻干粉及其制备方法
CN112094790B (zh) 一种调节肠道菌群的植物乳杆菌lp45活菌制剂及应用
CN110720638A (zh) 一种益生菌粉及其生产方法
CN102453681B (zh) 用于约氏乳杆菌真空冷冻干燥的保护剂及其应用
CN108103128A (zh) 一种用于治疗仔猪腹泻的乳酸菌素的制备方法
CN106906160A (zh) 一种用于乳酸菌发酵的增效剂及其发酵方法
CN103283948A (zh) 一种以两歧双歧杆菌为主的微生态制剂
CN104784739B (zh) 一种载磺胺嘧啶银复合抗菌敷料的制备方法
CN105104532A (zh) 一种荸荠营养果粒的制备方法
CN104195091B (zh) 一种固体生物菌剂的制备方法及以其制备的固体生物菌剂
CN109749964A (zh) 提高嗜酸乳杆菌发酵与冻干活菌数的培养基处理方法
CN104450575B (zh) 一种笋壳青贮饲料乳酸菌制剂、制备方法及应用方法
CN106635925B (zh) 一种基于微生物相互作用筛选的复合微生物泡菜发酵剂及其应用
CN108085311A (zh) 一种以苹果块为包埋剂的直投式乳酸菌发酵剂的制备方法
CN105567590A (zh) 一种双歧杆菌乳酸菌混合发酵菌酶解法制备工艺及其运用
CN108741038A (zh) 一种酵素水果片及制备方法
CN112831086A (zh) 一种用于液体发酵培养的专用固体菌种制备方法及其应用
CN110283730B (zh) 溶液共混法包埋复合微生态制剂的工艺
Urbański et al. Influence of whey on viability of Lactobacillus gasseri during freeze-drying process
CN106754522A (zh) 一种枯草芽孢杆菌发酵液的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20180529