CN108004278A - 一种谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法 - Google Patents

一种谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ‑聚谷氨酸的方法，本发明将黄色短杆菌与海藻酸钠溶液混匀，滴入到CaCl2溶液中固化后，再置于普鲁兰多糖溶液中成膜，得到谷氨酸产生菌活菌胶囊。然后同时接种枯草芽孢杆菌和谷氨酸产生菌活菌胶囊进行混合发酵培养。本发明采用谷氨酸产生菌活菌胶囊来发酵生产γ‑聚谷氨酸，谷氨酸产生菌活菌胶囊将谷氨酸产生菌包裹在胶囊内部，避免了发酵过程所需的两种菌直接接触，从而消除了菌种之间的相互作用，提高了发酵效率。本发明发酵方法利用谷氨酸产生菌活菌胶囊生产谷氨酸，为聚谷氨酸的发酵生产提供谷氨酸前体，因而不需要添加谷氨酸。本发明活菌胶囊可以连续发酵20次以上。

Description

一种谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法
技术领域
本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种使用谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法。
背景技术
γ-聚谷氨酸能溶于水、可生物降解、可食用、对人体无毒性、对环境无污染。由于其特殊的物理和化学特性，可以在食品制作中作为增稠剂、在医药行业作为药物载体、保湿剂等，广泛用于食品、医药和化妆品行业中，在农业中也可以作为保水剂，果蔬的保鲜剂、防冻剂，也可以作为水处理过程中的絮凝剂和重金属螯合剂等。
由于γ-聚谷氨酸(γ-PGA)是由L-谷氨酸或D-谷氨酸单体通过α-氨基和γ-羧基之间形成酰胺键生成的，因此在聚谷氨酸发酵培养基中需要加入前体物质谷氨酸。
在以往的γ-聚谷氨酸发酵生产中都直接在发酵培养基中加入谷氨酸钠，由于谷氨酸用量大，转化率低，在一定程度上增加了生产成本。中国专利申请号201310755717.2(一种发酵生产高分子量γ-聚谷氨酸的方法)采用天津短杆菌与地衣芽孢杆菌混合发酵，由天津短杆菌发酵合成的谷氨酸供地衣芽孢杆菌合成γ-聚谷氨酸。但该方法中间需要改变培养条件，生产过程中不易控制。且两种菌混在一起培养，容易产生菌种间的相互作用，影响发酵的效率。
虽然，现有技术表明微生物细胞微囊化发酵方式能够提高发酵产物的浓度、生产效率，但是目前一般只在乳酸链球菌中应用。尚未有采用谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的相关报道。
发明内容
本发明为克服现有技术中发酵生产γ-聚谷氨酸方法的不足，提供一种使用谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法。本发明方法与现有技术相比，解决了现有技术中不能在同一条件下连续发酵的问题，提高了γ-聚谷氨酸的发酵效率；同时，本发明还提供一种谷氨酸产生菌活菌胶囊—黄色短杆菌活菌胶囊。
为了实现上述目的，本发明使用谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，采用如下技术方案：
(1)谷氨酸产生菌活菌胶囊的制备
将黄色短杆菌与海藻酸钠溶液混匀，滴入到CaCl2溶液中固化后，再置于普鲁兰多糖溶液中成膜，得到谷氨酸产生菌活菌胶囊。
(2)发酵
以5％的接种量接种枯草芽孢杆菌，并同时接种5％谷氨酸产生菌活菌胶囊进行混合发酵培养，发酵时间64～72h。
(3)回收谷氨酸产生菌活菌胶囊
将发酵液用盐酸调pH 2.5～3.5，过滤回收谷氨酸产生菌活菌胶囊，同时，向滤液中加入无水乙醇沉淀，干燥，得到聚谷氨酸粗品。
具体地，本发明使用谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，步骤如下：
(1)谷氨酸产生菌活菌胶囊的制备
将黄色短杆菌种子液在4 000～6 000r/min离心3～5min，弃去上清，再加入同体积的生理盐水得菌悬液。将10～20g/L海藻酸钠溶液与黄色短杆菌菌悬液按10:1混合均匀，用一次性注射器滴入到25～35g/L搅拌着的CaCl2溶液中，固化60～120min，灭菌水冲洗，然后将其置于3～7g/L普鲁兰多糖溶液中缓慢成膜10～50min，再用0.05％普鲁兰多糖溶液覆膜3～18min，得到谷氨酸产生菌活菌胶囊。
所述黄色短杆菌种子液制备方法是：将黄色短杆菌接种于装有种子培养基的三角瓶中，接种量1％，32～35℃、150r/min培养，培养至种子液OD600达到1.4～1.7。
黄色短杆菌的种子培养基的组成是：葡萄糖20～30g/L，尿素3～6g/L，酵母膏2～4g/L，MgSO4 0.1～0.5g/L，K2HPO4 1～4g/L，pH 7.2～7.5。
(2)发酵
聚谷氨酸生产菌株：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。
枯草芽孢杆菌的种子培养基组成是：葡萄糖5～10g/L，酵母粉3～5g/L，硫酸铵2～10g/L，MgSO4 0.1～1.0g/L，pH 7.2～7.5。
枯草芽孢杆菌种子液制备方法是：将枯草芽孢杆菌接种于装有种子培养基的三角瓶中，接种量1％，于32～37℃，180～220r/min摇床震荡培养至OD600达到1.8～2.2。
发酵培养基：柠檬酸2～5g/L，尿素3～6g/L，蛋白胨20～40g/L，MgSO4 0.1～0.5g/L，K2HPO4 1～4g/L，葡萄糖100～200g/L，pH 7.2～7.5。
发酵条件：以5％的接种量接种枯草芽孢杆菌，并同接种5％谷氨酸产生菌活菌胶囊进行混合发酵培养。温度32～37℃，发酵罐条件下通气搅拌培养：转速100～300rpm、罐压0.05～0.1MPa或摇瓶振荡培养150～250r/min，发酵时间64～72h，pH不控制。
(3)回收谷氨酸产生菌活菌胶囊
将发酵液用盐酸调pH 2.5～3.5，过滤回收谷氨酸产生菌活菌胶囊，同时，向滤液中加入无水乙醇沉淀，干燥，得到聚谷氨酸粗品。
本发明在发酵前期利用谷氨酸产生菌活菌胶囊生产谷氨酸，为聚谷氨酸的发酵生产提供谷氨酸前体。在聚谷氨酸发酵过程中，发酵前期发酵液粘度低，营养物质和胶囊内产物谷氨酸可以透过微胶囊膜，进行胶囊内外物质交换，增加培养基中谷氨酸的含量，当谷氨酸含量达到一定浓度后，通过反馈抑制胶囊内谷氨酸的合成，同时，随着聚谷氨酸含量不断增加，发酵液粘度增加，微胶囊内外传质速率降低，进而谷氨酸发酵终止，枯草芽孢杆菌利用谷氨酸发酵生产聚谷氨酸(如图1)。
本发明的突出优点是：
(1)本发明首次采用谷氨酸产生菌活菌胶囊来发酵生产γ-聚谷氨酸。谷氨酸产生菌活菌胶囊将谷氨酸产生菌包裹在胶囊内部，避免了发酵过程所需的两种菌直接接触，从而消除了菌种之间的相互作用，提高了发酵效率。
(2)本发明首次采用生物活性物质普鲁兰多糖作为活菌微胶囊的成膜剂，成膜性好，胶囊稳定性好。且该胶囊制作工艺简单，制作过程参数容易控制，发酵过程中该胶囊对菌体生长无影响，试验表明该方法的可行性较高。
(3)本发明试验证明本发明活菌胶囊可以连续发酵20次以上。而且试验证明20批次的发酵产量无显著差异，可以推测得出该活菌胶囊还可以继续发酵进行发酵。现有技术中的报道的活菌胶囊，如乳酸链球菌活菌胶囊或NaCS-PD MDAAC的黄色短杆菌微胶囊，试验表明可以连续发酵12批次。本发明胶囊的发酵批次显著高于现有技术的活菌胶囊。所产生的显著经济效益不言而喻。
(4)采用本发明方法发酵生产γ-聚谷氨酸，不需要额外添加谷氨酸作为发酵底物。利用谷氨酸产生菌活菌胶囊即可为聚谷氨酸发酵提供充足的谷氨酸前体。从而极大地降低了生产成本。
(5)本发明方法在发酵过程中，不需要中途调整发酵条件，一次条件设置直至发酵结束即可。发酵结束后，从发酵液中分离出微胶囊用于下次发酵，分离采用普通的过滤就可实现。故本发明方法更适合工业化生产，方便快捷，操作易，成本低。
附图说明
图1是本发明谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸，发酵液中谷氨酸与γ-聚谷氨酸含量随发酵时间的变化；图中横坐标表示发酵时间，纵坐标表示谷氨酸和γ-聚谷氨酸的含量。
图2是本发明使用谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸与现有技术直接在培养基中添加谷氨酸前体发酵生产聚谷氨酸的比较；图中横坐标表示发酵时间，纵坐标表示γ-聚谷氨酸的含量。
图3是利于本发明谷氨酸产生菌活菌胶囊连续发酵20批次，各批次聚谷氨酸的产量；图中横坐标表示发酵批次，纵坐标表示各发酵批次的γ-聚谷氨酸产量。
具体实施方式
下面结合具体试验方法对本发明的技术方案及其所产生的技术效果做进一步的阐述。应当理解，下述说明仅是为了解释本发明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。本发明所述方法如无特殊说明，均为本领域常规方法。
实施例1
(1)枯草芽孢杆菌种子液制备
枯草芽孢杆菌(FRD518CGMCC NO.6772)的种子培养基组成是：葡萄糖8g/L,酵母粉4g/L，硫酸铵5g/L，MgSO4 0.5g/L，pH 7.2，100mL培养基装于500mL三角瓶中，115℃灭菌20min。
枯草芽孢杆菌种子液制备：将枯草芽孢杆菌接种于装有种子培养基的三角瓶中，接种量1％，于35℃，200r/min摇床震荡培养至OD600达到2.0。
(2)黄色短杆菌种子液制备
产谷氨酸黄色短杆菌(市售)的种子培养基组成是：葡萄糖25g/L，尿素5g/L，酵母膏3g/L，MgSO4 0.3g/L，K2HPO4 2g/L，pH 7.2，50mL培养基装于250mL三角瓶中，115℃灭菌20min。
产谷氨酸黄色短杆菌种子液制备方法是：接种量1％，34℃、150r/min培养，培养至种子液OD600达到1.5。
(3)谷氨酸产生菌活菌胶囊制作
将步骤(2)黄色短杆菌种子液在4 000～6 000r/min离心3～5min，弃去上清，再加入同体积的生理盐水得到混悬液。将10～20g/L海藻酸钠溶液与黄色短杆菌菌悬液按10:1混合均匀，用一次性注射器滴入到25～35g/L搅拌着的CaCl2溶液中，固化60～120min，灭菌水冲洗；然后将其置于3～7g/L普鲁兰多糖溶液中缓慢成膜10～50min，再用0.05％普鲁兰多糖溶液覆膜3～18min，得到谷氨酸产生菌活菌胶囊。
(4)γ-聚谷氨酸发酵
γ-聚谷氨酸发酵培养基：柠檬酸3g/L，尿素5g/L，蛋白胨30g/L，MgSO40.3g/L，K2HPO4 3g/L，葡萄糖150g/L，pH 7.20，115℃灭菌20min。
发酵过程：在装有100mL培养基的500mL三角瓶中，使用枯草芽孢杆菌进行γ-聚谷氨酸发酵，以5％的接种量接种发酵培养基，并同时以5％接种谷氨酸产生菌活菌胶囊进行混合发酵培养，发酵条件：温度33℃，摇瓶震荡培养150r/min，发酵时间65h，pH不控制，最终γ-聚谷氨酸含量达到65g/L。
(5)回收谷氨酸产生菌活菌胶囊
发酵结束后，将发酵液用盐酸调pH 2.5，过滤回收谷氨酸产生菌活菌胶囊，向发酵液中加入无水乙醇沉淀，干燥，得到γ-聚谷氨酸粗品。
实施例2
枯草芽孢杆菌种子液制备方法按实施例1方法，使用实施例1中过滤回收的谷氨酸产生菌活菌胶囊。
γ-聚谷氨酸发酵培养基：柠檬酸5g/L，尿素6g/L，蛋白胨40g/L，MgSO40.5g/L，K2HPO4 4g/L，葡萄糖200g/L，pH 7.5，115℃灭菌20min。
采用10L发酵罐发酵培养，使用枯草芽孢杆菌进行γ-聚谷氨酸发酵，以5％的接种量接种发酵培养基，并同时以5％接种谷氨酸产生菌活菌胶囊进行混合发酵培养，发酵条件：温度37℃，发酵罐条件下通气搅拌培养：转速300rpm、罐压0.1MPa，发酵时间72h，pH不控制，最终γ-聚谷氨酸含量达到78g/L。
发酵结束后，将发酵液用盐酸调pH 3.5，过滤回收谷氨酸产生菌活菌胶囊，向发酵液中加入无水乙醇沉淀，干燥，得到γ-聚谷氨酸粗品。
实施例3
使用实施例2中过滤回收的谷氨酸产生菌活菌胶囊，按实施例2的方法发酵生产聚谷氨酸，作为试验组。
对比例A：按照常规方法，在发酵培养基中加入100g/L谷氨酸，使用枯草芽孢杆菌进行γ-聚谷氨酸发酵，以5％的接种量接种发酵培养基，作为对照组。
两组发酵过程中，聚谷氨酸含量变化，如图2所示。
结果显示：本发明方法不需要加入谷氨酸，且聚谷氨酸发酵产量高于在发酵培养基中直接加入谷氨酸的常规发酵方法。
结论：本发明的谷氨酸产生菌活菌胶囊在发酵初期生产谷氨酸，为聚谷氨酸的发酵生产提供谷氨酸前体。然后枯草芽孢杆菌利用谷氨酸发酵生产聚谷氨酸。说明本发明所提供的谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法可以在不添加谷氨酸前体的情况下发酵生产聚谷氨酸，且发酵产量高于直接向培养基中加入谷氨酸前体。
实施例4
按照实施例1的方法制作谷氨酸产生菌活菌胶囊和枯草芽孢杆菌种子液，进行聚谷氨酸发酵。
在发酵结束后，利用过滤回收的谷氨酸产生菌活菌胶囊以与实施例1相同的方法进行第2批次发酵。
第2批次发酵结束后，再利用过滤回收的谷氨酸产生菌活菌胶囊以与实施例1相同的方法进行第3批次发酵。
如此重复利用过滤回收的谷氨酸产生菌活菌胶囊，以与实施例1相同的方法进行聚谷氨酸发酵，连续发酵20批次，每批次的聚谷氨酸产量如图3。
结果显示：在连续使用谷氨酸产生菌活菌胶囊20次发酵过程中，聚谷氨酸产量均在65g/L以上。
结论：本发明所提供的谷氨酸产生菌活菌胶囊稳定性好，可以连续使用20次，而且直至第20次，发酵产量也在65g/L以上。这主要是因为普鲁兰糖为微生物发酵制品，安全性高，对菌体无毒害，此外普鲁兰糖是线状结构，黏度远低于其它多糖，这种性质有利于制膜，而且线状结构减少了与其他物质结合的空间阻力，胶囊壳稳定性好。
本发明正是由于采用了上述技术手段，因而本发明方法大大提高了聚谷氨酸生产效率，降低了生产成本。

Claims (9)

1.一种谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征是，方法如下：
(1)谷氨酸产生菌活菌胶囊的制备
将黄色短杆菌与海藻酸钠溶液混匀，滴入到CaCl2溶液中固化后，再置于普鲁兰多糖溶液中成膜，得到谷氨酸产生菌活菌胶囊；
(2)发酵
以5％的接种量接种枯草芽孢杆菌，并同时接种5％谷氨酸产生菌活菌胶囊进行混合发酵培养即得γ-聚谷氨酸。
2.如权利要求1所述的谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征是，发酵结束后回收谷氨酸产生菌活菌胶囊：将发酵液用盐酸调pH 2.5～3.5，过滤回收谷氨酸产生菌活菌胶囊，同时，向滤液中加入无水乙醇沉淀，干燥，得到聚谷氨酸粗品。
3.如权利要求1所述的谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征是，所述步骤(1)谷氨酸产生菌活菌胶囊的制备，具体方法是：将黄色短杆菌种子液在4 000～6 000r/min离心3～5min，弃去上清，再加入同体积的生理盐水得菌悬液；将10～20g/L海藻酸钠溶液与黄色短杆菌菌悬液按10:1混合均匀，用一次性注射器滴入到25～35g/L搅拌着的CaCl2溶液中，固化60～120min，灭菌水冲洗，然后将其置于3～7g/L普鲁兰多糖溶液中缓慢成膜10～50min，再用0.05％普鲁兰多糖溶液覆膜3～18min，得到谷氨酸产生菌活菌胶囊。
4.如权利要求3所述的谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征是，所述黄色短杆菌种子液的制备方法是：将黄色短杆菌接种于装有种子培养基的三角瓶中，接种量1％，32～35℃、150r/min培养，培养至种子液OD600达到1.4～1.7；
所述黄色短杆菌的种子培养基的组成是：葡萄糖20～30g/L，尿素3～6g/L，酵母膏2～4g/L，MgSO4 0.1～0.5g/L，K2HPO4 1～4g/L，pH 7.2～7.5。
5.如权利要求1所述的谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征是，所述枯草芽孢杆菌的培养方法是：将枯草芽孢杆菌接种于装有种子培养基的三角瓶中，接种量1％，于32～37℃，180～220r/min摇床震荡培养至OD600达到1.8～2.2；
所述枯草芽孢杆菌的种子培养基组成是：葡萄糖5～10g/L，酵母粉3～5g/L，硫酸铵2～10g/L，MgSO4 0.1～1.0g/L，pH 7.2～7.5。
6.如权利要求1所述的谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征是，所述步骤(2)发酵过程中所用发酵培养基：柠檬酸2～5g/L，尿素3～6g/L，蛋白胨20～40g/L，MgSO4 0.1～0.5g/L，K2HPO4 1～4g/L，葡萄糖100～200g/L，pH 7.2～7.5。
7.如权利要求1所述的谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征是，所述步骤(2)发酵过程中发酵条件是：以5％的接种量接种枯草芽孢杆菌，并同接种5％谷氨酸产生菌活菌胶囊进行混合发酵培养；温度32～37℃，发酵罐条件下通气搅拌培养：转速100～300rpm、罐压0.05～0.1MPa或摇瓶振荡培养150～250r/min，发酵时间64～72h，pH不控制。
8.如权利要求1或2所述的谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征是，所述谷氨酸产生菌活菌胶囊回收后用于下一批次发酵。
9.如权利要求8所述的谷氨酸产生菌活菌胶囊发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征是，发酵批次大于20次。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115521959A (zh) * 2022-10-12 2022-12-27 江苏力凡胶囊有限公司 一种普鲁兰多糖的提取方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101705260A (zh) * 2009-11-16 2010-05-12 天津北洋百川生物技术有限公司 惰性载体固态发酵法生产γ-聚谷氨酸的方法
CN102250977A (zh) * 2011-06-28 2011-11-23 三峡大学 一种利用固定化细胞制备l-异亮氨酸的方法
CN103667412A (zh) * 2013-12-27 2014-03-26 天津北洋百川生物技术有限公司 一种发酵生产高分子量γ-聚谷氨酸的方法
CN104762087A (zh) * 2015-01-21 2015-07-08 河海大学 一种用于改良滩涂盐碱土壤结构的微生物添加物及其制备方法和应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101705260A (zh) * 2009-11-16 2010-05-12 天津北洋百川生物技术有限公司 惰性载体固态发酵法生产γ-聚谷氨酸的方法
CN102250977A (zh) * 2011-06-28 2011-11-23 三峡大学 一种利用固定化细胞制备l-异亮氨酸的方法
CN103667412A (zh) * 2013-12-27 2014-03-26 天津北洋百川生物技术有限公司 一种发酵生产高分子量γ-聚谷氨酸的方法
CN104762087A (zh) * 2015-01-21 2015-07-08 河海大学 一种用于改良滩涂盐碱土壤结构的微生物添加物及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SAROTE SIRISANSANEEYAKUL等: "Microbial production of poly-γ-glutamic acid", 《WORLD J MICROBIOL BIOTECHNOL》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115521959A (zh) * 2022-10-12 2022-12-27 江苏力凡胶囊有限公司 一种普鲁兰多糖的提取方法

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