CN107995910A - 人免疫缺陷病毒复制的抑制剂 - Google Patents

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R.G.金特尔斯
A.彭里
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B.R.贝诺
R.A.弗里德尔
M.贝勒马
V.N.阮
Z.杨
G.王
S.库马拉维尔
S.桑加蒂鲁帕蒂
R.O.波拉
S.M.霍尔哈蒂
M.R.梅图
M.潘达
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Abstract

描述式I化合物，包括其药学上可接受的盐，和用于治疗人免疫缺陷病毒(HIV)感染的组合物和方法。

Description

人免疫缺陷病毒复制的抑制剂
相关申请的交叉引用
本申请要求2015年4月23日提交的美国临时申请系列号62/151,780的权益，其全文经此引用并入本文。
发明领域
本发明涉及用于治疗人免疫缺陷病毒(HIV)感染的化合物、组合物和方法。更具体地，本发明提供新型HIV抑制剂、含有此类化合物的药物组合物和在治疗HIV感染中使用这些化合物的方法。本发明还涉及用于制备在下文中描述的化合物的方法。
发明背景
获得性免疫缺陷综合征（AIDS）是被HIV感染的结果。其依然是一项重大医疗难题，估计在2011年底全球有3400万人感染，其中330万在15岁以下。在2011年，新增感染250万人，并且170万人死于HIV/AIDS造成的并发症。
HIV感染者目前的疗法由经批准的抗逆转录病毒药剂的组合组成。超过两打药物目前批准用于HIV感染，作为单一药剂或作为固定剂量组合或单一片剂方案，后两种含有2-4种经批准的药剂。这些药剂属于多种不同类别，其靶向病毒酶或病毒复制周期过程中病毒蛋白质的功能。由此，药剂分类为核苷类逆转录酶抑制剂（NRTIs）、非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTIs）、蛋白酶抑制剂（PIs）、整合酶抑制剂（INIs）或进入抑制剂（其一，马拉韦罗，靶向宿主CCR5蛋白质，而另一种，恩夫韦地，是靶向病毒gp160蛋白质的gp41区域的肽）。此外，不具有抗病毒活性的药代动力学增强剂（即，cobicistat，可以商品名TYBOST™(cobicistat)片剂购自Gilead Sciences, Inc.）近来已经批准与可受益于助推（boosting）的某些抗逆转录病毒剂（ARV）组合使用。
尽管有了药剂或药物组合的物质支持（armamentarium），仍然存在对新型抗逆转录病毒剂的医疗需求，部分是由于需要长期给药以对抗感染。涉及长期毒性的显著问题被记录在案，产生了解决和预防这些并存症（例如CNS、CV/代谢、肾脏疾病）的需要。同样，由于耐药菌株的存在或出现或由于药物假期或不良副作用导致的不依从性，现有疗法的持续增长的失败率仍然是个问题。例如，尽管进行了治疗，据估计接受组合疗法的患者的63%仍然存在病毒血症，因为他们具有>500拷贝数/毫升的病毒载量（Oette, M, Kaiser, R, Däumer, M等人, Primary HIV Drug Resistance and Efficacy of First-LineAntiretroviral Therapy Guided by Resistance Testing. J Acq Imm Def Synd 2006;41(5):573-581）。在这些患者中，76%具有耐受一类或多类抗逆转录病毒剂的病毒。因此，需要更容易摄取、具有对耐药性产生的高基因屏障和具有超越现有药剂的改善的安全性的新药物。在这一整套选择中，可用作优选的高效抗逆转录病毒疗法(HAART)方案的一部分的新型MOA仍然可以发挥主要作用，因为它们应该有效针对耐受现有药剂的病毒。
在WO 2013/006738、WO 2014/110298和WO 2014/134566中公开了某些治疗化合物。
本领域现在所需的是新型且可用于治疗HIV的另外的化合物。此外，这些化合物可合意地对药物用途提供例如关于其作用机制、结合、抑制功效、靶标选择性、溶解性、安全性状况或生物利用度方面的一项或多项的优点。还需要利用这些化合物的新制剂和治疗方法。
发明概述
本发明包含式I化合物，包括其药学上可接受的盐，以及药物组合物，及其抑制HIV和治疗感染HIV或AIDS的患者的用途。
在发明的一个方面，提供式I化合物，包括其药学上可接受的盐：
其中：
R1a和R1b各自独立地选自氢、烷基、芳基、芳基烷基、芳氧基芳基、环烷基、杂环基、杂环基烷基和-烷基CO(Rx)；其中所述杂环基通过碳原子连接到母体分子上，且进一步地其中所述R1a和R1b基团被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基（alkylthioxy）、苄氧基、炔基、芳基、芳基烷基、芳氧基、羧酸、氰基、环烷基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、杂环基、杂环基烷基、羟基、羟基烷基、巯基（thioxy）、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、 CO(Rx)、-CON(Ry)2、-NHCON(Ry)2、-NHCO-烷基、-NHCO2烷基、-NHSO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；或
R1a和R1b与它们所连接的氮原子一起形成杂环，所述杂环被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、羧酸、氰基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、巯基、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、-CO(Rx)、-CON(Ry)2、-N(Ry)CON(Ry)2、-N(Ry)CO-烷基、-N(Ry)CO2烷基、-N(Ry)SO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；
R2是-H、C1-C4烷基或C3-C4环烷基；
R3是-H、C1-C4烷基或C3-C4环烷基；
R4是-H、烷基、芳基、C5-C10双环烷基、C3-C7环烷基或杂芳基，所述基团具有0-4个独立地选自以下的基团：烯氧基、烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、苄氧基、甲酰胺、氰基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、-NHCO(烷基)、-SO2(Rx)、-OH和-CH2OH；
R5和R6独立地是H或烷基，或R5和R6与它们所连接的原子一起形成C3-C4环烷基；
R7是-H、烷基、芳基、杂环基或C3-C7环烷基，其中所述芳基或杂环基被0-3个选自以下的基团取代：-OH、-NHCO烷基、-NHCON(烷基)2、-NHCO2-烷基、-CONH2、-CN、-SO2N(烷基)2、烷氧基、烷基、卤素、卤代烷氧基和卤代烷基；
R8是-H、烷基、环烷基、卤代烷基、卤代环烷基烯基或芳氧基烷基；
或R7和R8 与它们所连接的氮原子一起形成杂环，所述杂环被0-4个独立地选自以下的基团取代：-OH、-NHCO烷基、-NHCON(烷基)2、-NHCO2-烷基、-CONH2、-CN、-SO2N(烷基)2、烷氧基、烷基、卤素、卤代烷氧基和卤代烷基。
本发明还涉及药物组合物，其包含本发明的化合物，包括其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。
此外，本发明提供一种或多种治疗HIV感染的方法，包括向患者给药治疗有效量的本发明的化合物。
还作为本发明的一部分提供一种或多种制备本发明的化合物的方法。
本发明涉及这些以及下文中描述的其它重要目的。
发明详述
单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数指代对象，除非上下文另有指示。
除非在本申请中其它之处另有明确说明，否则下列术语应具有下列含义：
“烯基”指的是具有至少一个双键并任选被0-3个卤素或烷氧基取代的包含2至10个碳的直链或支链烷基基团。
“烯氧基”指的是通过氧原子连接到母体结构上的烯基基团。
“烷氧基”指的是通过氧原子连接到母体结构上的烷基基团。
“烷氧基羰基”指的是通过羰基部分连接到母体结构上的烷氧基基团。
“烷基”指的是包含1至10个碳、优选1至6个碳的直链或支链饱和烃。
“烷基硫基”指的是通过硫原子连接到母体结构上的烷基基团。
“炔基”指的是包含2至10个碳、优选2至6个碳，含有至少一个三键且任选被0-3个卤素或烷氧基取代的直链或支链烷基基团。
“芳基”指的是包含稠合和/或键合的1-3个环并且其中至少一个或其组合是芳族的碳环基团。非芳族碳环部分当存在时将包含C3至C7烷基基团。芳族基团的实例包括但不限于苯基、联苯基、环丙基苯基、二氢化茚、萘和四氢化萘。该芳基基团可以通过该基团中的任何可取代的碳原子连接到母体结构上。
“芳基烷基”是连接到1至2个芳基基团上并通过烷基部分连向母体结构的C1-C5烷基基团。实例包括但不限于-(CH2)nPh（n = 1-5）、-CH(CH3)Ph、-CH(Ph)2。
“芳氧基”是通过氧连接到母体结构上的芳基基团。
“氮杂吲哚”指的是吲哚的6-元环中的一个“CH”部分被氮原子替代。
“氮杂吲哚啉”指的是吲哚啉的芳族“CH”部分被氮原子替代。
“氮杂四氢喹啉”指的是四氢喹啉的任意芳族CH部分被氮原子替代。
“苄氧基”指的是通过氧原子连接到母体结构上的苄基基团。该苄基部分的苯基基团可以任选被1-3个独立地选自烷基、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基和氰基的基团取代。
“Cx-Cy”表示法是指包含数目为‘x’ 至‘y’的碳的结构要素。例如，“C5-C10双环烷基”指的是包含5至10个碳的双环环体系，其中环以稠合、螺接或桥接的方式连接；C5-C10双环烷基的实例包括但不限于双环[2.2.2]辛烷。类似地，“C3-C4环烷基”是包含3至4个碳的单环环体系的子集。
“环烷基”指的是包含3至7个碳的单环环体系。
“氰基”指的是-CN。
“二氮杂吲哚”指的是吲哚的6-元环中的任意两个“CH”部分被氮原子替代。
“二氮杂吲哚啉”指的是吲哚啉的两个芳族“CH”部分被氮原子替代。
“二氮杂四氢喹啉”指的是四氢喹啉的任意两个芳族CH部分被氮原子替代。
“卤代”或“卤素”是指-F、-Cl、-Br或-I。
“卤代烷基”指的是被1至6个卤素原子的任意组合取代的烷基基团。
“卤代烷氧基”或“卤代烷基氧基”指的是通过氧原子连接到母体结构上的卤代烷基基团。
“羟基”指的是–OH。
“杂芳基”是如下定义的杂环基团的子集且包含1-3个环，其中至少一个或其组合是芳族的且芳族基团含有至少一个选自氧、氮或硫的原子。
“杂环基或杂环的”指的是包含碳和至少一个独立地选自氧、氮和硫的其它原子的1-3个环的环状基团。所述环可以是桥接的、稠合的和/或键合的，通过直接或螺连接，并任选其中的一个或其组合是芳族的。实例包括但不限于氮杂吲哚、氮杂吲哚啉、氮杂环丁烷、苯并咪唑、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并异噻唑、苯并噻唑、苯并噻二唑、苯并噻吩、苯并噁唑、咔唑、苯并二氢吡喃、二卤代苯并间二氧杂环戊烯基、二氢苯并呋喃、二氢-苯并[1,4]噁嗪、1,3-二氢苯并[c]噻吩 2,2-二氧化物、2,3-二氢苯并[d]异噻唑 1,1-二氧化物、3,4-二氢-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪、2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶及其位置异构变体、6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪及其位置异构变体、呋喃基苯基、咪唑、咪唑并[1,2-a]吡啶、吲唑、吲哚、吲哚啉、异喹啉、异喹啉酮、异噻唑烷1,1-二氧化物、吗啉、2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷、噁二唑-苯基、噁唑、苯基氮杂环丁烷、苯基吲唑、苯基哌啶、苯基哌嗪、苯基噁唑、苯基吡咯烷、哌啶、吡啶、吡啶基苯基、吡啶基吡咯烷、嘧啶、嘧啶基苯基、吡唑-苯基、吡咯烷、吡咯烷-2-酮、1H-吡唑并[4,3-c]吡啶及其位置异构变体、吡咯、5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪、7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶及其位置异构变体、喹唑啉、喹啉、喹喔啉、四氢异喹啉、1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶、四氢喹啉、4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶、1,2,5-噻二唑烷 1,1-二氧化物、噻吩、噻吩基苯基、三唑或三唑酮。除非另行特别地描述，该杂环基团可以通过导致稳定化合物的该基团中的任何合适原子连接到母体结构上。
应理解所示杂环实例的子集包含位置异构体。例如，“氮杂吲哚”是指任一下列位置异构体：1H-吡咯并[2,3-b]吡啶、1H-吡咯并[2,3-c]吡啶、1H-吡咯并[3,2-c]吡啶和1H-吡咯并[3,2-b]吡啶。此外，例如在“5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪及其位置异构变体”中的“位置异构变体”表示法也包含 7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶、7H-吡咯并[2,3-c]哒嗪、1H-吡咯并[2,3-d]哒嗪、5H-吡咯并[3,2-c]哒嗪和5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶。类似地，6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪及其位置异构变体也包含6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶和6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-c]哒嗪。还应理解，缺少“位置异构变体”表示法不以任何方式将权利要求范围仅限制于指示的实例 。
“杂环基烷基”是通过C1-C5 烷基基团连接到母体结构上的杂环基基团。实例包括但不限于-(CH2)n-RZ或-CH(CH3)-(RZ)，其中n = 1-5且RZ选自苯并咪唑、咪唑、吲唑、异噁唑、苯基-吡唑、吡啶、喹啉、噻唑、三唑、三唑酮、噁二唑。
“四氢喹啉”指的是1,2,3,4-四氢喹啉。
通过化学绘图显示为在多环体系（例如双环环体系）上的可变位置处键合的取代基意在键合至其中它们被绘制为附着的环上。括号和多括号术语意在向本领域技术人员阐明键合关系。例如，术语如((R)烷基)指的是进一步被取代基R取代的烷基取代基。
本文中未具体描述的那些术语应具有本领域中通常理解和接受的含义。
本发明包括化合物的所有药学上可接受的盐形式。药学上可接受的盐是其中抗衡离子不会显著助长该化合物的生理学活性或毒性的那些，并因此充当药理学等效物。这些盐可以采用市售试剂根据常见有机技术来制备。一些阴离子盐形式包括乙酸盐、醋硬脂酸盐、苯磺酸盐、溴化物、氯化物、柠檬酸盐、富马酸盐、葡糖醛酸盐（glucouronate）、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、碘化物、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和昔萘酸盐（xinofoate）。一些阳离子盐形式包括铵、铝、苄星（benzathine）、铋、钙、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、锂、镁、葡甲胺、4-苯基环己基胺、哌嗪、钾、钠、氨基丁三醇（tromethamine）和锌。
本发明的一些化合物以立体异构体形式存在。本发明包括化合物的所有立体异构体形式，包括对映异构体和非对映异构体。制备和分离立体异构体的方法在本领域中是已知的。本发明包括该化合物的所有互变异构形式。本发明包括阻转异构体和旋转异构体。
本发明意在包括在本发明的化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子数但具有不同质量数的那些原子。作为一般实例且非限制性地，氢的同位素包括氘和氚。碳的同位素包括13C和14C。同位素标记的本发明的化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过类似于本文中描述的那些的方法，使用适当的同位素标记的试剂取代原本使用的未标记试剂来制备。此类化合物可具有多种潜在用途，例如作为测定生物活性的标样和试剂。在稳定同位素的情况下，此类化合物可能具有有利地修改生物学、药理学或药代动力学性质的潜力。
在本发明的一个方面，提供式I化合物，包括其药学上可接受的盐：
其中：
R1a和R1b各自独立地选自氢、烷基、芳基、芳基烷基、芳氧基芳基、环烷基、杂环基、杂环基烷基和-烷基CO(Rx)；其中所述杂环基通过碳原子连接到母体分子上，且进一步地其中所述R1a和R1b基团被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、芳基烷基、芳氧基、羧酸、氰基、环烷基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、杂环基、杂环基烷基、羟基、羟基烷基、巯基（thioxy）、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、CO(Rx)、-CON(Ry)2、-NHCON(Ry)2、-NHCO-烷基、-NHCO2烷基、-NHSO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；或
R1a和R1b 与它们所连接的氮原子一起形成杂环，所述杂环被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、羧酸、氰基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、巯基、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、-CO(Rx)、-CON(Ry)2、-N(Ry)CON(Ry)2、-N(Ry)CO-烷基、-N(Ry)CO2烷基、-N(Ry)SO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；
R2是-H、C1-C4 烷基或C3-C4 环烷基；
R3是-H、C1-C4 烷基或C3-C4 环烷基；
R4是-H、烷基、芳基、C5-C10双环烷基、C3-C7 环烷基或杂芳基，所述基团具有0-4个独立地选自以下的基团：烯氧基、烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、苄氧基、甲酰胺、氰基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、-NHCO(烷基)、-SO2(Rx)、-OH和-CH2OH；
R5和R6独立地是H或烷基，或R5和R6与它们所连接的原子一起形成C3-C4 环烷基；
R7是-H、烷基、芳基、杂环基或C3-C7 环烷基，其中所述芳基或杂环基被0-3个选自以下的基团取代：-OH、-NHCO烷基、-NHCON(烷基)2、-NHCO2-烷基、-CONH2、-CN、-SO2N(烷基)2、烷氧基、烷基、卤素、卤代烷氧基和卤代烷基；
R8是-H、烷基、环烷基、卤代烷基、卤代环烷基烯基或芳氧基烷基；
或R7和R8与它们所连接的氮原子一起形成杂环，所述杂环被0-4个独立地选自以下的基团取代：-OH、-NHCO烷基、-NHCON(烷基)2、-NHCO2-烷基、-CONH2、-CN、-SO2N(烷基)2、烷氧基、烷基、卤素、卤代烷氧基和卤代烷基。
在本发明的另一方面，R7和R8可以是以下基团：
Rx是二烷基胺或通过氮原子连接到母体片段上的含氮杂环；且各Ry独立地是氢、烷基、卤代烷基或芳基。
在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中R1a和R1b各自独立地选自氢、烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和-烷基CO(Rx)，其中所述杂芳基通过碳原子连接至母体结构。
在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中R1a和R1b各自独立地选自氢、烷基、苯基、联苯基、萘、二氢化茚、吡啶、嘧啶、喹啉、异喹啉、苯并噻唑、苯并咪唑、1,3-二氢苯并[c]噻吩 2,2-二氧化物、-CH2CO(Rx)和与任一下列基团连接的烷基基团：苯基、联苯基、吡啶基、喹啉、苯并咪唑、咪唑、异噻唑、吡唑、噻唑、吲唑、三唑和三唑酮。
在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中R1a和R1b各自独立地被至少一个选自以下的成员取代：烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤素、苯基、噻唑、吡唑、苯氧基、噁唑、吡咯、苄氧基、吡啶基烷基、氨基甲酸甲酯、氰基、乙酰胺、吗啉-4-基磺酰基、吡咯烷-1-基磺酰基、哌啶-1-基磺酰基、-NHSO2Me、-CONH2、-NHCONMe2和-COCH3。
在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中R1a 和R1b各自独立地被至少一个选自以下的成员取代：烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤素、苯基、噻唑、吡唑、苯氧基、噁唑、吡咯、苄氧基、吡啶基烷基、氨基甲酸甲酯、氰基、乙酰胺、吗啉-4-基磺酰基、吡咯烷-1-基磺酰基、哌啶-1-基磺酰基、-NHSO2Me、-CONH2、-NHCONMe2和-COCH3。
在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中R1a 和R1b与它们所连接的氮一起形成杂环，且进一步地其中所述杂环具有1-3个环，所述环具有总共4-14个碳原子和至少一个内部氮原子以及任选地至少一个选自氧和硫的原子。在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中所形成的杂环选自四氢喹啉、氮杂四氢喹啉、二氮杂四氢喹啉、四氢异喹啉、吲哚啉、氮杂吲哚啉、二氮杂吲哚啉、吲哚、氮杂吲哚、二氮杂吲哚、吲唑、咔唑、氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、哌嗪、吗啉、2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶、2,3-二氢苯并[d]异噻唑 1,1-二氧化物、1H-吡唑并[4,3-c]吡啶、3,4-二氢-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪和螺[环丙烷-1,3'-吲哚啉]。在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中所形成的杂环被至少一个选自以下的成员取代：苯基、氨基烷基、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、卤素、羟基、吡啶、磺酰基烷基、-CO2NMe2和氰基。在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中所形成的杂环被至少一个选自以下的成员取代：苯基、氨基烷基、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、卤素、羟基、吡啶、磺酰基烷基、-CO2NMe2和氰基。
在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中所述R1a和R1b的至少一个是苯基。在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中所述苯基被至少一个选自以下的成员取代：烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤素、苯基、噻唑、吡唑、苯氧基、噁唑、吡咯、苄氧基、吡啶基烷基、氨基甲酸甲酯、氰基、乙酰胺、吗啉-4-基磺酰基、吡咯烷-1-基磺酰基、哌啶-1-基磺酰基、-NHSO2Me、-CONH2、-NHCONMe2和-COCH3。
在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中R2和R3各自是–H。
在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中R4是芳基。在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中所述芳基是苯基。
在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中R4是芳基。在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中所述芳基是苯基。
在本发明的一个方面，提供式I化合物，其中R8是烷基。
在本发明的一个方面，提供药物组合物，其包含本发明的化合物，例如式I、II或III，和药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。
在本发明的一个方面，提供治疗HIV感染的方法，包括向患者给药治疗有效量的本发明的化合物，例如式I、II或III。
在本发明的一个方面，提供式II化合物，包括其药学上可接受的盐：
其中：
R1a和R1b各自独立地选自氢、烷基、芳基、芳基烷基、芳氧基芳基、环烷基、杂环基、杂环基烷基和-烷基CO(Rx)；其中所述杂环基通过碳原子连接到母体分子上，且进一步地其中所述R1a和R1b基团被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、芳基烷基、芳氧基、羧酸、氰基、环烷基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、杂环基、杂环基烷基、羟基、羟基烷基、巯基、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、CO(Rx)、-CON(Ry)2、-NHCON(Ry)2、-NHCO-烷基、-NHCO2烷基、-NHSO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；或
R1a和R1b 与它们所连接的氮原子一起形成杂环，所述杂环被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、羧酸、氰基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、巯基、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、-CO(Rx)、-CON(Ry)2、-N(Ry)CON(Ry)2、-N(Ry)CO-烷基、-N(Ry)CO2烷基、-N(Ry)SO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；
R2是-H、C1-C2烷基或C3-C4环烷基；
R3是-H或C1-C4烷基；
R4是芳基、C5-C10双环烷基、C3-C7 环烷基或杂芳基，所述基团具有0-4个独立地选自以下的基团：烷氧基、烷基、氰基、卤素、卤代烷基和卤代烷氧基；
R7是芳基、杂环基或C3-C7环烷基，其中所述芳基或杂环基被0-3个选自以下的基团取代：-OH、-NHCO烷基、-NHCON(烷基)2、-NHCO2-烷基、-CONH2、-CN、-SO2N(烷基)2、烷氧基、烷基、卤素、卤代烷氧基和卤代烷基；
R8是烷基、环烷基、卤代烷基、卤代环烷基烯基或芳氧基烷基；
Rx是二烷基胺或通过氮原子连接至母体片段的含氮杂环；和
各Ry独立地是氢、烷基、卤代烷基或芳基。
在本发明的一个方面，提供式II化合物，其中R2和R3各自是–H。
在本发明的一个方面，提供式II化合物，其中R4是芳基。
在本发明的一个方面，提供式II化合物，其中所述芳基是苯基。
在本发明的一个方面，提供式II化合物，其中R8是烷基。
在本发明的一个方面，提供式III化合物，包括其药学上可接受的盐：
其中：
R1a和R1b各自独立地选自氢、烷基、芳基、芳基烷基、芳氧基芳基、环烷基、杂环基、杂环基烷基和-烷基CO(Rx)；其中所述杂环基通过碳原子连接到母体分子上，且进一步地其中所述R1a和R1b基团被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、芳基烷基、芳氧基、羧酸、氰基、环烷基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、杂环基、杂环基烷基、羟基、羟基烷基、巯基、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、CO(Rx)、-CON(Ry)2、-NHCON(Ry)2、-NHCO-烷基、-NHCO2烷基、-NHSO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；或
R1a和R1b 与它们所连接的氮原子一起形成杂环，所述杂环被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、羧酸、氰基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、巯基、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、-CO(Rx)、-CON(Ry)2、-N(Ry)CON(Ry)2、-N(Ry)CO-烷基、-N(Ry)CO2烷基、-N(Ry)SO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；
R2是-H或C1-C2烷基；
R4是芳基或杂芳基，所述基团具有 0-3个独立地选自以下的基团：烷氧基、烷基、氰基或卤素；
R7是芳基、杂环基，其中所述芳基或杂环基被 0-3个选自以下的基团取代：-OH、-NHCO烷基、-NHCON(烷基)2、-NHCO2-烷基、-CONH2、-CN、烷氧基、烷基、卤素、卤代烷氧基和卤代烷基；
R8是烷基、环烷基、卤代烷基、卤代环烷基烯基或苄氧基烷基；Rx是二烷基胺或通过氮原子连接至母体片段的含氮杂环；且
各Ry独立地是氢、烷基、卤代烷基或芳基。
在本发明的一个方面，提供式III化合物，其中R2是–H。
在本发明的一个方面，提供式III化合物，其中R4是芳基。
在本发明的一个方面，提供式III化合物，其中所述芳基是苯基。
在本发明的一个方面，提供式III化合物，其中R8是烷基。
本发明的优选化合物，包括其药学上可接受的盐，选自：
“Diast 1”和“Diast 2”分别是指非对映异构体1和非对映异构体2。
其它优选化合物，包括其药学上可接受的盐，选自：
。
药物组合物与使用方法
在本文中描述和列举的本发明的化合物通常作为药物组合物提供。这些组合物包含治疗有效量的式I的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体，并且可以含有常规的赋形剂和/或稀释剂。治疗有效量是提供有意义的患者益处所需的量。药学上可接受的载体是具有可接受的安全性状况的那些常规已知载体。组合物涵盖所有常见的固体和液体形式，包括胶囊剂、片剂、锭剂和粉末以及液体混悬剂、糖浆剂、酏剂和溶液。使用可用的配制技术和通常用于组合物的赋形剂（如粘合剂和润湿剂）和媒介物（如水和醇类）制备组合物。参见例如Remington’s Pharmaceutical Sciences, 第17版, Mack PublishingCompany, Easton, PA (1985)。
通常以剂量单位配制的固体组合物和每剂提供大约1至1000毫克的活性成分的组合物是优选的。剂量的一些实例是1毫克、10毫克、100毫克、250毫克、500毫克和1000毫克。通常，其它抗逆转录病毒剂以类似于临床使用的那类药剂的单位范围存在。通常，其为约0.25-1000毫克/单位。
液体组合物通常在剂量单位范围内。通常，该液体组合物在约1-100毫克/毫升的单位剂量范围内。剂量的一些实例是1毫克/毫升、10毫克/毫升、25毫克/毫升、50毫克/毫升和100毫克/毫升。通常，其它抗逆转录病毒剂以类似于临床使用的那类药剂的单位范围存在。通常，其为约1-100毫克/毫升。
本发明涵盖所有常规给药模式；口服和肠胃外方法是优选的。通常，给药方案类似于临床使用的其它抗逆转录病毒剂。通常，每日剂量为每天约1-100毫克/千克体重。通常，口服方式需要较多化合物，肠胃外方式需要较少化合物。但是，具体的给药方案将由医师采用合理的医疗判断来决定。
本发明的化合物合意地具有对抗HIV的活性。因此，本发明的另一方面是治疗人类患者的HIV感染的方法，包括给药治疗有效量的式I的化合物，包括其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。
本发明还涵盖其中在组合疗法中提供该化合物的方法。也就是说，所述化合物可以与可用于治疗AIDS和HIV感染的其它药剂结合但彼此分离地使用。该化合物还可用于组合疗法，其中该化合物与一种或多种其它药剂以固定剂量组合（FDC）物理结合在一起。这些药剂中的一部分包括HIV附着抑制剂、CCR5抑制剂、CXCR4抑制剂、HIV细胞融合抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV核苷类逆转录酶抑制剂、HIV非核苷类逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、萌芽与成熟抑制剂、免疫调节剂和抗感染剂。在这些组合方法中，式I的化合物通常以每天约1-100毫克/千克体重的每日剂量与其它药剂结合提供。其它药剂通常以治疗上所使用的量提供。但是，具体的给药方案将由医师采用合理的医疗判断来决定。
“组合”、“联合给药”、“并行”和表示式I的化合物与至少一种抗HIV剂一起给药的类似术语是指这些组分如AIDS与HIV感染领域中的执业医师所理解的那样是组合抗逆转录病毒疗法或HAART的一部分。
因此，如上所述，本文中预期的是式I的化合物与一种或多种可用于治疗AIDS的药剂的组合。例如，无论在暴露前和/或暴露后的时期，本发明的化合物可以有效地与有效量的AIDS抗病毒剂、免疫调节剂、抗感染剂或疫苗组合给药，如下列非限制性表中的那些：
“治疗有效”是指如AIDS与HIV感染领域中的执业医师所理解的那样提供有意义的患者益处所需的药剂量。通常，治疗有效的治疗的目标包括抑制病毒负载、恢复和保护免疫功能、提高生存质量以及降低与HIV相关的发病率和死亡率。
“患者”是指如AIDS与HIV感染领域中的执业医师所理解的那样被HIV病毒感染并且适于治疗的人。
“治疗”、“疗法”、“方案”、“HIV感染”、“ARC”、“AIDS”和相关术语如AIDS与HIV感染领域中的执业医师所理解的那样使用。
合成方法
根据各方面的本发明的化合物可以通过现有技术中可用的各种方法来制备，包括随后具体实施例中的下列方案中的那些。合成方案中显示的结构编号和变量编号可与权利要求书或说明书其余部分中的结构或变量编号不同，并且不应与其相混淆。方案中的变量仅意味着显示如何制备某些本发明的化合物。
方案中使用的缩写通常遵循本领域中使用的惯例。实施例中使用的一些具体化学缩写定义如下：“DMF”指N,N-二甲基甲酰胺；“MeOH”指甲醇；“Ar”指芳基；“TFA”指三氟乙酸；“BOC”指叔丁氧基碳酸酯；“DMSO”指二甲基亚砜；“h”指小时；“rt”指室温或保留时间（上下文将确定）；“min”指分钟；“EtOAc”指乙酸乙酯；“THF”指四氢呋喃；“Et2O”指乙醚；“DMAP”指4-二甲基氨基吡啶；“DCE”指1,2-二氯乙烷；“ACN”指乙腈；“DME”指1,2-二甲氧基乙烷；“HATU”指(1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化六氟磷酸盐)；“DIEA”指二异丙基乙胺。
本文中所用的某些其它缩写定义如下：“1×”指一次，“2×”指两次，“3×”指三次，“℃”指摄氏度，“eq”指当量，“g”指克，“mg”指毫克，“L”指升，“mL”指毫升，“μL”指微升，“N”指当量浓度，“M”指摩尔浓度，“mmol”指毫摩尔，“min”指分钟，“h”指小时，“rt”指室温，“RT”指保留时间，“atm”指大气，“psi”指磅/平方英寸，“conc.”指浓缩，“sat”或“sat’d”指饱和的，“MW”指分子量，“mp”指熔点，“ee”指对映体过量，“MS”或“Mass Spec”指质谱法，“ESI”指电喷雾离子化质谱法，“HR”指高分辨率，“HRMS”指高分辨率质谱法，“LCMS”指液相色谱法-质谱法，“HPLC”指高压液相色谱法，“RP HPLC”指反相HPLC，“TLC”或“tlc”指薄层色谱法，“NMR”指核磁共振波谱法，“1H”指质子，“δ”指delta, “s”指单峰，“d”指双峰，“t”指三重峰，“q”指四重峰，“m”指多重峰，“br”指宽峰，“Hz”指赫兹，并且“α”、“β”、“R”、“S”、“E”和“Z”是本领域技术人员熟知的立体化学命名。
实施例
仅通过举例的方式提供下列实施例，并且不应当解释为限制本发明的范围。
中间体JB-1
将HATU (1.5 g, 4.0 mmol)添加到4-甲氧基-N-甲基苯胺 (500 mg, 3.64 mmol)和(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯基丙酸 (1.06 g, 4.0 mmol)于DMF (20 mL)和DIPEA(1.3 mL, 7.3 mmol)中的搅拌溶液中并将反应混合物在rt搅拌4h。浓缩反应物，残余粗油在EtOAc (~60 mL) 和1/2饱和NaHCO3 (aq) (~60 mL)之间分配。有机组分用盐水(~40 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩并使用Biotage Horizon (80 g SiO2, 10-40% EtOAc/己烷)提纯以得到为澄清琥珀色稠油的中间体JB-1(1.34 g)。LC-MS保留时间 = 3.17 min; m/z= 385.3 [M+H]+。(柱: Phenonenex-Luna C18 2.0 x 50mm 3 μm；溶剂A = 95% 水:5%乙腈:10 mM NH4OAc；溶剂B = 5% 水:95% 乙腈:10 mM NH4OAc；流速 = 0.8 mL/min；起始% B= 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4 min；波长 = 220)。
中间体JB-2
将4 M HCl (15 mL, 60.0 mmol)/1,4-二氧杂环己烷溶液添加到中间体JB-1 (1.34g, 3.49 mmol)于THF (10 mL)中的搅拌溶液中并将反应混合物在rt搅拌5h。将反应混合物在真空下浓缩至干以得到标题化合物的HCl盐(1.11 g)，为凝固的泡沫，其不经另外提纯即使用。LC-MS保留时间 = 2.33 min; m/z = 285.2 [M+H]+。(柱: Phenonenex-Luna C182.0 x 50mm 3 μm；溶剂A = 95% 水:5% 乙腈:10 mM NH4OAc；溶剂B = 5% 水:95% 乙腈:10mM NH4OAc；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4 min；波长=220)。
中间体JB-3
将HATU (378 mg, 0.994 mmol)添加到 N-甲基喹啉-6-胺 (143 mg, 0.904 mmol)和(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯基丙酸(264 mg, 0.994 mmol)于DMF (6 mL)和DIPEA(0.32 mL, 1.8 mmol)中的搅拌溶液中并将反应混合物在 rt搅拌过夜（ON）。将反应混合物浓缩，在EtOAc (~25 mL)和1/2饱和NaHCO3 (aq) (~20 mL)之间分配，有机组分用盐水(~15mL)洗涤、干燥(MgSO4)、过滤并浓缩。残余物然后使用Biotage Horizon (24 g SiO2, 30-60% EtOAc/己烷)提纯以得到为澄清琥珀色稠油的标题化合物(230 mg)，其在干燥后凝固。LC-MS保留时间 = 0.980 min; m/z = 406.3 [M+H]+。(柱: Waters Aquity BEH C18 2.1X 50 mm 1.7U；溶剂A = 100%水 : 0.05% TFA；溶剂B = 100% 乙腈: 0.05% TFA；流速 =0.8 mL/min；起始% B = 2，最终% B = 98；梯度时间 = 1.5 min；波长 = 220)。
中间体JB-4
将4 M HCl (2.5 mL, 10 mmol)/1,4-二氧杂环己烷溶液添加到中间体JB-3 (225 mg,0.555 mmol)于THF (2 mL)中的搅拌溶液中并将反应混合物在rt搅拌过夜（ON）。将反应混合物在真空下浓缩至干以得到标题化合物的HCl盐(211 mg)，为凝固的琥珀色泡沫，其不经另外提纯即使用。LC-MS保留时间 = 0.749 min; m/z = 306.2 [M+H]+。(柱: WatersAquity BEH C18 2.1 X 50 mm 1.7U；溶剂A = 100%水 : 0.05% TFA；溶剂B = 100%乙腈:0.05% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 2，最终% B = 98；梯度时间 = 1.5 min；波长=220)。
中间体JB-5
将HATU (725 mg, 1.91 mmol)添加到4-乙氧基-N-乙基苯胺 (300 mg, 1.82 mmol)和(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯基丙酸 (506 mg, 1.91 mmol)于DMF (10 mL)和DIPEA(0.63 mL, 3.6 mmol)中的搅拌溶液中并将反应混合物在rt 搅拌5 h。将反应混合物浓缩，在EtOAc (~60 mL)和饱和NaHCO3 (aq) (~50 mL)之间分配，有机组分用盐水(~50 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。残余物然后使用Biotage Horizon (40 g SiO2, 15-40%EtOAc/己烷)提纯以得到为凝固灰白色泡沫的中间体JB-5 (632 mg)。LC-MS保留时间 =1.69 min; m/z = 413.3 [M+H]+。(柱: Phenomenex Luna 30 x 2.0 MM 3u；溶剂A = 90%水 : 10%乙腈 : 0.1% TFA；溶剂B = 10%水 : 90%乙腈 : 0.1% TFA；流速 = 1 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 2分钟；波长 = 220)。
中间体JB-6
将4 M HCl (1.036 mL, 4.15 mmol)于1,4-二氧杂环己烷中的溶液添加到中间体JB-5(684 mg, 1.66 mmol)于THF (2.2 mL)中的搅拌溶液中并将反应混合物在rt搅拌5 h。然后再次添加4 M HCl/1,4-二氧杂环己烷 (1.5 mL) 并继续搅拌过夜（ON）。浓缩反应混合物，残余物在高真空下干燥以得到中间体JB-6的HCl盐(632 mg)，为固化泡沫。LC-MS保留时间= 1.24 min; m/z = 313.3 [M+H]+。(柱: Phenomenex Luna 30 x 2.0 MM 3u；溶剂A =90%水 : 10%乙腈 : 0.1% TFA；溶剂B = 10%水 : 90%乙腈 : 0.1% TFA；流速 = 1 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 2分钟；波长 = 220)。
中间体ZY-1
将多聚甲醛 (80 mg, 2.7 mmol) 添加到苯并[d]噻唑-5-胺 (200 mg, 1.332 mmol)于MeOH (5 mL)中的搅拌溶液中。所得悬浮液然后用 25%w/w NaOMe/MeOH (1.5 mL, 6.7mmol)处理并将澄清反应混合物在60℃下搅拌16 h。使反应冷却至室温，然后用NaBH4 (126mg, 3.33 mmol)处理并在rt搅拌16 h。反应混合物用水 (10 mL)稀释并用CHCl3 (3 x 20mL)萃取。浓缩合并的有机组分并使用Biotage Horizon (12 g SiO2, 0-50% EtOAc/己烷)提纯以得到为黄色胶状物的中间体ZY-1 (217 mg)。LC-MS保留时间 = 0.67 min; m/z =165.05 [M+H]+。(柱: Waters Aquity BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A =100%水 : 0.05% TFA；溶剂B = 100%乙腈 : 0.05% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B =2，最终% B = 98；梯度时间 = 1.5 min；波长 = 220)。
中间体ZY-2
将HATU (1.90 g, 5.01 mmol)添加到中间体ZY-1 (685 mg, 4.17 mmol)和(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯基丙酸 (1.33 g, 5.01 mmol)于DMF (20 mL)和DIPEA (2.18mL, 12.5 mmol)中的溶液中并将反应混合物在rt搅拌6 h。粗反应混合物用饱和NaHCO3水溶液 (20 mL)稀释并用EtOAc (3 x 50 mL)萃取。合并的有机组分用盐水 (~60 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗物质然后使用Biotage Horizon (12 g SiO2, 0-40%-50%EtOAc/己烷)提纯以得到中间体ZY-2 (1.7 g)，为白色固体。LC-MS保留时间 = 1.19 min;m/z = 412.0 [M+H]+。(柱: Waters Aquity BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A= 100%水 : 0.05% TFA；溶剂B = 100%乙腈 : 0.05% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B =2，最终% B = 98；梯度时间 = 1.5 min；波长 = 220)。
中间体ZY-3
将4 M HCl (10 mL, 40.0 mmol)于1,4-二氧杂环己烷中的溶液添加到中间体ZY-2(1.7 g, 4.13 mmol)于THF (10 mL)中的搅拌溶液中并将反应混合物在rt搅拌16 h。将反应混合物浓缩，再溶于EtOH/甲苯，然后再次浓缩(3x)以得到中间体ZY-3的HCl盐 (1.7 g,4.42 mmol, 107 %产率)，为粉红色粘性固体。LC-MS保留时间 = 0.83 min; m/z = 312.0[M+H]+。(柱: Waters Aquity BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 100%水 :0.05% TFA；溶剂B = 100%乙腈 : 0.05% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 2，最终% B= 98；梯度时间 = 1.5 min；波长 = 220)。
中间体ZY-4
将HATU (592 mg, 1.556 mmol)添加到中间体ZY-1 (213 mg, 1.30 mmol)和(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (469 mg, 1.56 mmol)于DMF (7 mL)和DIPEA (0.45 mL, 2.6 mmol)中的搅拌溶液中并将反应混合物在rt搅拌16 h。粗反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(20 mL)稀释并用EtOAc 萃取(3 x 50 mL)。合并的有机组分用盐水(~60 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗物质然后使用Biotage Horizon (24 gSiO2, 0-50% EtOAc/己烷)提纯以得到为白色固体的中间体ZY-4 (581 mg)。LC-MS保留时间 = 1.23 min; m/z = 448.0 [M+H]+。(柱: Waters Aquity BEH C18, 2.0 x 50 mm,1.7-μm颗粒；溶剂A = 100%水 : 0.05% TFA；溶剂B = 100%乙腈 : 0.05% TFA；流速 = 0.8mL/min；起始% B = 2，最终% B = 98；梯度时间 = 1.5 min；波长 = 220)。
中间体ZY-5
将TFA (1.0 mL, 13 mmol)添加到中间体ZY-4 (0.58 g, 1.2 mmol)于DCM (2 mL)中的搅拌溶液中并将反应混合物在rt搅拌16 h。浓缩粗反应混合物，将残余物溶于MeOH/DCM和4 M HCl/二氧杂环己烷(2 mL)并再次浓缩。残余物再溶于EtOH/甲苯，然后再次浓缩(3x)以得到中间体ZY-5的HCl盐 (0.55 g)，为白色固体。LC-MS保留时间 = 0.83 min; m/z =348.1[M+H]+。(柱: Waters Aquity BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 100%水 : 0.05% TFA；溶剂B = 100%乙腈 : 0.05% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 2，最终% B = 98；梯度时间 = 1.5 min；波长 = 220)。
中间体VN-1
向2-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (0.5 g, 3.8 mmol)于THF (5 mL)中的溶液中添加DMAP (4.6 mg, 0.04 mmol)，接着添加二碳酸二叔丁酯(1.25 g, 5.73 mmol)。将反应混合物在~25℃下在氮气下搅拌3 h。将水 (0.1 mL) 添加到反应中并继续在~25℃搅拌1 h。真空除去所有溶剂。粗产物与甲苯 (2 x 3 mL)共沸以得到为浅黄色油状物的标题化合物(定量产率)。产物不经进一步提纯而使用。
中间体VN-2
在氮气下向Parr反应容器(500 mL)中的10%钯/碳 (0.412 g, 0.387 mmol)于MeOH(10 mL)中的混合物中添加中间体VN-1 (0.90 g, 3.9 mmol)于MeOH (30 mL)中的溶液。用氮气(3x)、然后氢气真空冲洗反应容器。将反应在60 psi在~25℃下剧烈摇晃47 h。通过硅藻土垫过滤反应物并真空浓缩以得到澄清油状物。将油状物装载在ISCO硅胶筒(120 g)上，用25% EtOAc/己烷经2592 mL的溶剂洗脱以得到回收的起始物质251.7 mg (第一洗脱物)和为澄清无色油状物的标题化合物 484.2 mg(第二洗脱物)。
中间体VN-3
将中间体VN-2 (0.466 g, 1.989 mmol)于4N HCl/二氧杂环己烷(20 mL)中的溶液在~25℃搅拌3 h。真空除去全部溶剂以得到标题化合物的HCl盐，为浅黄色固体(定量产率)。LC-MS保留时间 = 1.67 min; m/z = 135.04 [M+H]+; (柱: Phenomenex Luna C18 50 x2.0 mm 3 μm；溶剂A = 90%水 : 10% MeOH : 0.1% TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH :0.1% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟；柱温 = 40℃；波长 = 220 nm)。
中间体VN-4.1和VN 4.2
在氮气下向500 mL Parr反应容器中的10%钯/碳 (0.369 g, 0.347 mmol)于MeOH (20mL)中的混合物中添加2-甲基-1,8-萘啶 (0.500 g, 3.47 mmol)。反应混合物用氮气(3x)、接着氢气 (3x)真空冲洗并在氢气下在 60 psi在~25℃下剧烈摇晃23 h。反应物通过硅藻土垫过滤并用MeOH彻底洗涤。真空浓缩滤液以得到标题化合物的混合物(506.1 mg)，为白色固体。1H NMR表明为1:0.18比率的两种产物的混合物，其不经进一步提纯即使用。LC-MS保留时间 = 1.70 min; m/z = 149.06 [M+H]+。(柱: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0 mm3 μm；溶剂A = 90%水 : 10% MeOH : 0.1% TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH : 0.1% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟；柱温 = 40℃；波长 = 220 nm)。
中间体VN-5
向3-甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (1 g, 8 mmol)于THF (15 mL) 中的溶液中添加DMAP (9.2 mg, 0.08 mmol)，接着添加二碳酸二叔丁酯 (2.48 g, 11.4 mmol)。将反应在氮气下在~25℃搅拌20.5 h。将水 (0.1 mL)添加到反应中并继续在~25℃搅拌40 min。真空除去全部溶剂。粗产物与甲苯 (3 x 5 mL)共沸以得到为褐色固体的标题化合物(定量产率)。产物不经进一步提纯即使用。LC-MS保留时间 = 3.11 min; m/z = 255.10 [M+Na]+.(柱: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0 mm 3 μm；溶剂A = 90%水 : 10% MeOH : 0.1%TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH : 0.1% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B= 100；梯度时间 = 4分钟，然后在100% B保持1分钟；柱温 = 40℃；波长 = 220 nm)。
中间体VN-6
在氮气下向500 mL Parr反应容器中的10%钯/碳 (0.779 g, 0.732 mmol)于MeOH (10mL)中的混合物中添加中间体VN-5 (1.7 g, 7.3 mmol)于MeOH (40 mL)中的溶液。反应混合物用氮气(3x)、接着氢气 (3x)真空冲洗并在氢气下在 60 psi在~25℃下剧烈摇晃24 h。经硅藻土塞过滤反应物，用MeOH彻底洗涤并真空浓缩以得到粘性油。粗油状物装载至ISCO硅胶筒(120 g)，用25%EtOAc/己烷经1296 mL洗脱以得到为白色固体的回收的起始物质(372.9 mg)和为澄清无色粘性油的标题化合物(863.5 mg)。LC-MS保留时间 = 2.32 min;m/z = 257.11 [M+Na]+. (柱: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0 mm 3 μm；溶剂A = 90%水: 10% MeOH : 0.1% TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH : 0.1% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟；柱温 = 40℃；波长 = 220 nm)。
中间体VN-7和中间体VN-8
将中间体VN-6 (0.66 g, 2.8 mmol)于4M HCl/二氧杂环己烷(50 mL)中的溶液在~25℃搅拌15.5 h。真空除去全部溶剂以得到标题化合物的HCl盐的外消旋混合物(378 mg)，为浅黄色固体。通过制备手性SFC使用ChiralCel OD-H（21 x 250 mm, 5 μm 柱; 流动相:10% EtOH (w/0.1% DEA)/90% CO2; 压力150巴; 温度40℃; 流速 40 mL/min; UV 310nm; 进样0.2 mL (~25 mg/mL，于MeOH中); 分级收集: 斜率和水平 (补充流量 = 6 mL/min IPA) ）分离外消旋混合物以分别得到各个标题化合物: 中间体VN-7 (第一洗脱物)，为灰白色固体(185 mg) (未测定绝对立体化学);
。
中间体VN-8 (第二洗脱物)，为灰白色固体 (192 mg) (未测定绝对立体化学);
。
中间体GW-1
向6-甲基吡啶-3-胺(500 mg, 4.62 mmol)和甲醛 (208 mg, 6.94 mmol)于甲醇(10mL)中的溶液中添加甲醇钠 (5.29 mL, 23.2 mmol)并将反应混合物加热至50℃持续16 h。将反应混合物冷却至rt，用硼氢化钠(437 mg, 11.6 mmol)分两批处理并在rt搅拌6 h。缓慢添加水(10 mL)，混合物用EtOAc (2 x 20 mL)萃取。合并的有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并使用Biotage Horizon (0-100% EtOAc, 10-20% MeOH/EtOAc) 提纯以得到为红色油状物的标题化合物 (0.29 g)。
中间体GW-2
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.715 g, 2.37 mmol)和中间体GW-1 (0.29 g, 2.4 mmol)于DMF (7 mL)中的溶液中添加DIPEA (0.83 mL, 4.8mmol)、然后HATU (0.95 g, 2.5 mmol)，并将反应混合物在rt 搅拌2 h。反应混合物在水(70 mL)和EtOAc (35 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用BiotageHorizon (20-90% EtOAc/己烷)提纯以得到为灰白色泡沫状的标题化合物(0.67 g)。LC-MS保留时间 = 3.48 min; m/z = 428.07 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm,3 μm颗粒; 流动相A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相B: 90% MeOH-10% H2O-0.1%TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100% B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-3
向中间体GW-2 (0.67 g, 1.7 mmol)于二氧杂环己烷 (6 mL)中的溶液中添加HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (1.50 mL, 49.6 mmol)并将反应混合物在rt搅拌17 h。添加甲醇(2 mL)，将混合物超声处理以使其为澄清溶液，将反应混合物在rt搅拌8 h。浓缩反应混合物并在高真空下干燥以得到为灰白色固体的标题化合物的HCl盐 (0.62 g)。LC-MS保留时间 = 2.26 min; m/z = 306.06 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度 0-100% B经4 min, 然后在100% B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-4
向6-乙基吡啶-3-胺 (500 mg, 4.09 mmol) 和甲醛(184 mg, 6.14 mmol)于甲醇(15mL)中的溶液中添加甲醇钠(4.7 mL, 20 mmol)并将反应混合物在50℃加热16 h。将反应混合物冷却至rt并分两批添加硼氢化钠 (387 mg, 10.2 mmol)，将其在室温下搅拌2 h。缓慢添加水 (10 mL)并用EtOAc (2 x 20 mL)萃取混合物。合并的有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon (20-70% EtOAc/己烷) 提纯以得到为褐色油状物的标题化合物(0.41 g)。LC-MS保留时间 = 2.30 min; m/z = 137.05 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相B: 90%MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100% B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-5
将(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.55 g, 1.8 mmol)和中间体GW-4 (0.25 g, 1.8 mmol)于DMF (7 mL)中的溶液中添加DIPEA (0.64 mL, 3.7mmol)、接着HATU (0.73 g, 1.93 mmol)，并将反应混合物在 rt搅拌16 h。反应混合物在水(70 mL)和EtOAc (35 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用BiotageHorizon (0-100% EtOAc/己烷)提纯以得到为白色油状物的标题化合物(0.42 g)。LC-MS保留时间 = 3.54 min; m/z = 442.09 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3μm颗粒; 流动相A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相B: 90% MeOH-10% H2O-0.1%TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100% B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-6
向中间体GW-5 (0.42 g, 1.0 mmol)于二氧杂环己烷(1 mL)中的溶液中添加HCl (1.1mL, 35.8 mmol, 4N，于二氧杂环己烷中)并将溶液在rt搅拌4 h。添加甲醇 (1 mL)并继续在rt搅拌16 h。浓缩反应混合物以得到标题化合物的HCl盐 (0.26 g). LC-MS保留时间 =2.37 min; m/z = 320.12 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100% B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV220 nm)。
中间体GW-7
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.617 g, 2.05 mmol)和N,5-二甲基吡啶-2-胺 (0.25 g, 2.1 mmol)于DMF (7 mL)中的溶液中添加DIPEA (0.7mL, 4 mmol)、接着HATU (0.817 g, 2.15 mmol)，并将反应混合物在rt搅拌2 h。反应混合物在水 (70 mL)和EtOAc (35 mL)之间分配。有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon (0-100% EtOAc/己烷)提纯以得到为浅黄色油状物的标题化合物 (0.29g)。LC-MS保留时间 = 3.88 min; m/z = 406.12 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X50 mm, 3 μm颗粒; 流动相A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相B: 90% MeOH-10%H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在 100% B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-8
向中间体GW-7 (0.29 g, 0.72 mmol)于二氧杂环己烷(2 mL)中的溶液中添加HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (1.1 mL, 4.4 mmol)并将反应混合物在rt搅拌20 h。蒸发溶剂并在高真空下干燥64 h以得到为粉红色固体的标题化合物的HCl 盐(0.19 g)。LC-MS保留时间 = 2.75 min; m/z = 328.04 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA;温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100% B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min;检测: UV 220 nm)。
中间体GW-4.1
向5-氨基苯并[d]噻唑-2(3H)-酮 (300 mg, 1.81 mmol)于甲醇(10 mL)中的溶液中添加甲醛 (108 mg, 3.61 mmol)和甲醇钠 (2.1 mL, 9.0 mmol)并将反应混合物加热至 60℃持续16 h。将反应混合物冷却至rt并添加硼氢化钠 (171 mg, 4.51 mmol)，将其在rt 搅拌30 min。然后向反应混合物中添加甲醇 (2 mL)并将其在rt 搅拌6 h。将硅胶添加到反应混合物中，将其浓缩，残余物干法装载至Biotage Horizon (0-100% EtOAc/己烷, 20%MeOH/EtOA和100% MeOH) 上用于提纯。收集的物质通过制备HPLC进一步提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (140 mg)。LC-MS保留时间 = 1.36 min; m/z = 181.00 [M+H]+.(柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1%TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min,然后在100% B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-4.2
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (143 mg, 0.48 mmol)、中间体GW-4.1和2,2,2-三氟乙酸酯 (140 mg, 0.48 mmol)于DMF (4 mL)中的溶液中添加DIPEA (0.20 mL, 1.2 mmol)、接着HATU (190 mg, 0.50 mmol)，并将反应混合物在rt搅拌16 h。反应混合物在EtOAc (20 mL)和水 (40 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon (10-100% EtOAc己烷)提纯以得到为白色泡沫状的标题化合物(140 mg)。LC-MS保留时间 = 3.83 min; m/z = 486.02 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90%MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100% B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-4.3
向中间体GW-4.2 (140 mg, 0.30 mmol)于二氧杂环己烷(1 mL)中的溶液中添加HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (0.46 mL, 1.8 mmol)并将反应混合物在rt搅拌16 h。添加甲醇(1 mL)并继续搅拌8 h。蒸发溶剂并在高真空下干燥以得到为浅黄色固体的标题化合物的HCl盐(0.13 g)。LC-MS保留时间 = 2.91 min; m/z = 364.02 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B:90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100% B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-5.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (1278 mg, 4.24 mmol)和N,1-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-胺 (570 mg, 3.54 mmol)于DCM (20 mL)中的溶液中添加N-乙氧羰基-2-乙氧基-1,2-二氢喹啉 (1.05 g, 4.24 mmol)并将反应混合物在rt搅拌17h。蒸发溶剂，残余物用Biotage Horizon (30-100%己烷/EtOAc, 10-20% MeOH/EtOAc)提纯以得到为粉色固体的标题化合物(0.13 g)。LC-MS保留时间 = 3.29 min; m/z = 467.08[M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90%H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-5.2
向中间体GW-5.1 (0.13 g, 0.29 mmol)于二氧杂环己烷(2 mL)中的溶液中添加HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (0.9 mL, 3.6 mmol)并将反应混合物在rt搅拌4 h。反应混合物用(0.5 mL)处理并再搅拌4 h。蒸发溶剂，残余物在高真空下干燥以得到为浅黄色固体的标题化合物的HCl 盐 (0.12 g)。LC-MS保留时间 = 1.97 min; m/z = 345.19 [M+H]+. (柱:Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA;流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-6.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.79 g, 2.6 mmol)于DMF(6 mL)中的溶液中添加N-甲基-4-(三氟甲氧基)苯胺 (0.500 g, 2.62 mmol)、DIPEA(0.91 mL, 5.2 mmol)和HATU (1.04 g, 2.75 mmol)并将反应混合物在rt搅拌2 h。反应混合物在水 (60 mL)和EtOAc (30 mL)之间分配。有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon (0-100% EtOAc/己烷)提纯以得到为粉色固体的标题化合物 (0.80 g)。LC-MS保留时间 = 4.25 min; m/z = 375.14 [M-Boc+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10%H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速:0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-6.2
向中间体GW-6.1 (0.800 g, 1.68 mmol)于二氧杂环己烷(3 mL)中的溶液中添加HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (3.1 mL, 12.4 mmol)并将反应混合物在rt搅拌17 h。浓缩反应混合物并在高真空下干燥以得到为白色固体的标题化合物的HCl盐(0.65 g)。LC-MS保留时间 = 3.31 min; m/z = 375.15 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA;温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-7.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.82 g, 2.7 mmol)和N,1-二甲基-1H-吲唑-5-胺 (0.44 g, 2.7 mmol)于DMF (7 mL)中的溶液中添加DIPEA (0.95mL, 5.5 mmol)、接着HATU (1.09 g, 2.87 mmol)，并将反应混合物在rt搅拌19 h。反应混合物在水 (70 mL)和EtOAc (35 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon提纯以得到为粉色泡沫状的标题化合物(1.14 g)。LC-MS保留时间 =3.69 min; m/z = 467.07 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒;流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-7.2
向中间体GW-7.1 (1.14 g, 2.56 mmol)于二氧杂环己烷 (4 mL)中的溶液中添加HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (2.4 mL, 9.6 mmol) 并将反应混合物在rt搅拌1 h。添加甲醇(1mL)将沉淀物再溶并继续搅拌24 h。浓缩反应物并在高真空下干燥以得到为浅褐色固体的标题化合物的 HCl盐 (1.03 g)。LC-MS保留时间 = 2.67 min; m/z = 345.10 [M+H]+.(柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1%TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min,然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-8.1
将微波小瓶(20 mL)中的(S)-2-氨基-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (1.72 g, 8.55 mmol)和异苯并呋喃-1,3-二酮 (1.27 g, 8.55 mmol)于DMF (12 mL)中的混合物在微波反应器中在155℃下加热1 h。将粗混合物倒入水 (50 mL)中并搅拌30 min。通过过滤收集固体，用水洗涤并在高真空下干燥过夜以得到为浅褐色固体的标题化合物(2.3 g)。LC-MS保留时间= 3.57 min; m/z = 354.07 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟;流速: 0.8 mL/min; 检测:UV 220 nm)。
中间体GW-8.2
将中间体GW-8.1 (500 mg, 1.51 mmol)于SOCl2 (1.1 mL, 15 mmol)中的溶液在45℃下加热2.5 h。浓缩反应混合物并与DCM (3 x 10 mL)共沸，在高真空下干燥过夜以得到为白色固体的粗中间体(S)-3-(3,5-二氟苯基)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酰氯(0.49 g)。向粗 (S)-3-(3,5-二氟苯基)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酰氯(440 mg,1.26 mmol)和6-(三氟甲基)吡啶-3-胺(204 mg, 1.26 mmol)于DMF (6 mL)中的溶液中添加DIPEA (0.44 mL, 2.5 mmol)并将反应混合物在rt搅拌2 h。反应混合物在水 (60 mL)和EtOAc (30 mL)之间分配，分离有机组分并经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon(10-100% EtOAc/己烷) 提纯以得到为白色固体的标题化合物(0.39 g)。LC-MS保留时间 =3.92 min; m/z = 476.11 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度:40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV220 nm)。
中间体GW-8.3
向中间体GW-8.2 (0.39 g, 0.8 mmol)于DMF (6 mL)中的溶液中添加为分散体的60%NaH (0.036 g, 0.9 mmol)/矿物油并将反应混合物搅拌5 min，然后添加碘甲烷 (0.06mL, 0.9 mmol)并将反应混合物在rt搅拌23 h。反应用饱和NH4Cl (5 mL)和水 (5 mL)淬灭并用EtOAc (2 x 20 mL)萃取。合并的有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage (0-80% EtOAc/己烷)提纯以得到为无色油状物的标题化合物(0.19 g)。LC-MS保留时间 =3.73 min; m/z = 490.13 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度:40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV220 nm)。
中间体GW-8.4
向中间体GW-8.3 (0.19 g, 0.4 mmol)于乙醇(6 mL)中的溶液中添加水合肼(0.10mL, 2.3 mmol)并将反应混合物加热至50℃持续5 h。将冷却的反应混合物过滤并浓缩滤液，与乙醇 (2 x 10 mL)共沸并在高真空下干燥72 h以得到为粘性固体的标题化合物(0.14 g)。LC-MS保留时间 = 2.87 min; m/z = 360.11 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90%MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-9.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (1.02 g, 3.4 mmol)和4-环丙基-N-甲基苯胺 (0.50 g, 3.4 mmol)于DMF (7 mL) 中的溶液中添加 DIPEA (1.2mL, 6.8 mmol)、接着HATU (1.36 g, 3.6 mmol)，并将反应混合物在rt搅拌24 h。反应混合物在EtOAc (35 mL)和水 (70 mL)之间分配，分离有机组分，经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon (0-50% EtOAc/己烷)提纯以得到为浅褐色固体的标题化合物(1.03 g)。LC-MS保留时间 = 4.24 min; m/z = 453.20 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-9.2
向中间体GW-9.1 (1.03 g, 2.39 mmol)于二氧杂环己烷(5 mL)中的溶液中添加 HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (3.63 mL, 14.4 mmol)并将反应混合物在rt搅拌5 h。添加甲醇(5滴)并继续在rt搅拌39 h。浓缩反应混合物并在高真空下干燥过夜以得到为褐色固体的标题化合物的HCl盐 (0.87 g)。LC-MS保留时间 = 3.38 min; m/z = 331.17 [M+H]+.(柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1%TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min,然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-10.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.57 g, 1.88 mmol)和6-甲氧基-N-甲基吡啶-3-胺 (0.26 g, 1.9 mmol)于DMF (7 mL)中的溶液中添加DIPEA(0.66 mL, 3.8 mmol)、接着HATU (0.75 g, 2.0 mmol)，并将反应混合物在rt搅拌2 h。反应混合物在水 (70 mL)和EtOAc (35 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon (0-100% EtOAc)提纯以得到为粉色泡沫状的标题化合物(0.73 g)。LC-MS保留时间 = 3.93 min; m/z = 444.10 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-10.2
向中间体GW-10.1 (0.73 g, 1.7 mmol)于二氧杂环己烷(6 mL)中的溶液中添加HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (1.6 mL, 6.4 mmol)并将反应混合物在rt搅拌18 h。加入甲醇(2mL)，超声处理反应物以得到澄清溶液并继续搅拌5 h。浓缩反应混合物并在高真空下干燥过夜以得到为褐色固体的标题化合物的HCl盐(0.68 g)。LC-MS保留时间 = 2.92 min; m/z= 322.08 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10%MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度:0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-11.1
向(S)-3-(3,5-二氟苯基)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酰氯(1.21 g, 3.47mmol)和6-(二氟甲基)吡啶-3-胺 (0.500 g, 3.47 mmol)于DMF (6 mL)中的溶液中添加DIPEA (1.2 mL, 6.94 mmol)并将反应混合物在rt搅拌2 h。反应混合物在水 (60 mL)和EtOAc (30 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon (10-100% EtOAc/己烷)提纯以得到为白色固体的标题化合物(0.9 g)。LC-MS保留时间 = 3.79min; m/z = 458.13 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃;梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220nm )。
中间体GW-11.2
向中间体GW-11.1 (0.90 g, 2.0 mmol)于DMF (20 mL)中的溶液中添加为分散体的60% NaH (0.087 g, 2.17 mmol)/矿物油并将反应混合物搅拌5 min。然后添加碘甲烷(0.14 mL, 2.2 mmol)并继续在rt搅拌23 h。反应混合物用饱和NH4Cl水溶液 (10 mL)和水(100 mL)淬灭并通过EtOAc(2 x 20 mL)萃取。合并的有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon (0-60% EtOAc/己烷, 60-100% EtOAc/己烷) 提纯以得到为白色固体的标题化合物 (0.7 g)。LC-MS保留时间 = 3.58 min; m/z = 494.11 [M+Na]+. (柱:Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA;流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-11.3
向中间体GW-11.2 (0.44 g, 0.93 mmol)于乙醇(10 mL) 中的溶液中添加水合肼(0.27 mL, 5.6 mmol)并将反应混合物加热至50℃持续5 h。过滤反应混合物，浓缩滤液，与乙醇 (2 x 10 mL)共沸并在高真空下干燥64 h以得到为白色固体的标题化合物(0.29 g)。LC-MS保留时间 = 2.56 min; m/z = 364.13 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-12.1
向6-(二氟甲氧基)吡啶-3-胺 (250 mg, 1.56 mmol)和甲醛 (70 mg, 2.34 mmol)于甲醇(8 mL)中的溶液中添加甲醇钠 (1.8 mL, 7.8 mmol)并将反应混合物加热至50℃持续18 h。将反应混合物冷却至 rt，分两批添加硼氢化钠 (148 mg, 3.90 mmol)，将其在rt搅拌3 h。缓慢添加水 (5 mL)，混合物用EtOAc (2 x 20 mL)萃取，合并的有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon (20-100% EtOAc/己烷)提纯以得到为无色油状物的标题化合物 (0.23 g)。LC-MS保留时间 = 1.94 min; m/z = 175.05 [M+H]+. (柱:Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA;流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-12.2
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (398 mg, 1.32 mmol) 和中间体GW-12.1 (0.23 g, 1.3 mmol)于DMF (5 mL)中的溶液中添加DIPEA (0.50 mL, 2.6mmol)、接着HATU (527 mg, 1.39 mmol)，并将反应混合物在rt搅拌18 h。反应混合物在水(50 mL)和EtOAc (25 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用BiotageHorizon提纯以得到为无色油状物的标题化合物 (0.48 g)。LC-MS保留时间 = 4.00 min;m/z = 480.13 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A:10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220nm)。
中间体GW-12.3
中间体GW-12.3
向中间体GW-12.2 (0.48 g, 1.1 mmol)于二氧杂环己烷 (4 mL)中的溶液中添加HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (1.6 mL, 6.4 mmol)并将反应混合物在rt搅拌5 h。将反应混合物浓缩并在高真空下干燥过夜以得到为玻璃状褐色固体的标题化合物的HCl盐(0.51g)。LC-MS保留时间 = 2.92 min; m/z = 358.14 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-13.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (1003 mg, 3.33 mmol)和N,2-二甲基嘧啶-5-胺 (410 mg, 3.33 mmol)于DMF (5 mL)中的溶液中添加DIPEA (1.2mL, 6.7 mmol)和HATU (1329 mg, 3.50 mmol)并将反应混合物在rt搅拌4 h。反应混合物在水 (50 mL)和EtOAc (25 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并经BiotageHorizon (70-100% EtOAc/己烷)提纯以得到为白色固体的标题化合物(0.6 g)。LC-MS保留时间 = 3.60 min; m/z = 429.17 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1%TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-13.2
向中间体GW-13.1 (0.60 g, 1.5 mmol)于二氧杂环己烷(5 mL)中的溶液中添加HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (2.2 mL, 8.8 mmol)并将反应混合物在rt搅拌19 h。将反应混合物浓缩并在高真空下干燥过夜以得到为浅褐色固体的标题化合物的HCl 盐 (0.55 g)。LC-MS保留时间 = 2.29 min; m/z = 307.15 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm,3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1%TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-14.1
向(S)-3-(3,5-二氟苯基)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酰氯 (1.08 g, 3.09mmol)和5-氯-6-甲基吡啶-3-胺 (440 mg, 3.09 mmol)于DMF (5 mL)中的溶液中添加DIPEA (1.1 mL, 6.2 mmol)并将反应混合物在rt搅拌16 h。反应混合物在水 (50 mL)和EtOAc (25 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，浓缩并用Biotage Horizon (10-100%EtOAc/己烷)提纯以得到为白色固体的标题化合物(0.66 g)。LC-MS保留时间 = 3.64 min;m/z = 456.11 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A:10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220nm)。
中间体GW-14.2
向中间体GW-14.1 (0.66 g, 1.5 mmol)于DMF (10 mL)中的溶液中添加为分散体的60% NaH (0.064 g, 1.59 mmol)/矿物油并将反应混合物在rt搅拌5 min。然后添加碘甲烷(0.10 mL, 1.6 mmol)并将反应混合物在rt搅拌17 h，然后加热至60℃持续1 h。向冷却的反应混合物中缓慢添加饱和NH4Cl水溶液 (5 mL)，接着添加水 (100 mL)，然后将其用EtOAc (2 x 20 mL)萃取。合并的有机组分经Na2SO4干燥，浓缩并用Biotage Horizon (0-70% EtOAc/己烷)提纯以得到为白色固体的标题化合物(0.14 g)。LC-MS保留时间 = 3.80min; m/z = 470.07 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃;梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220nm)。
中间体GW-14.3
向中间体GW-14.2 (0.16 g, 0.34 mmol)于乙醇(5 mL)中的溶液中添加水合肼(0.10mL, 2.0 mmol)并将反应混合物加热至50℃持续5 h。过滤反应混合物，浓缩滤液，与乙醇(2x 10 mL)共沸并在高真空下干燥过夜以得到为白色固体的标题化合物(90 mg)。LC-MS保留时间 = 2.95 min; m/z = 340.09 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1%TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-15.1
向噻唑并[5,4-b]吡啶-6-胺 (0.50 g, 3.3 mmol)和甲醛 (0.149 g, 4.96 mmol)于MeOH (20 mL)中的溶液中添加甲醇钠(3.78 mL, 16.5 mmol)并将反应混合物加热至50℃持续18 h。将反应混合物冷却至rt，用硼氢化钠(0.313 g, 8.27 mmol) 分两批处理并在rt搅拌2 h。缓慢添加水 (5 mL)，将反应混合物部分浓缩，然后用EtOAc (20 mL)萃取。有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并通过Biotage Horizon (20-100% EtOAc/己烷)提纯以得到为粉色固体的标题化合物 (0.36 g)。LC-MS保留时间 = 1.04 min; m/z = 166.03 [M+H]+.(柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1%TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min,然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-15.2
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (656 mg, 2.18 mmol)于DMF (2 mL)中的溶液中添加中间体GW-15.1 (360 mg, 2.18 mmol)、DIPEA (0.76 mL, 4.4mmol)和HATU (870 mg, 2.29 mmol)并将反应混合物在rt搅拌16 h。反应混合物在水 (20mL)和EtOAc (10 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon(0-80% EtOAc/己烷)提纯以得到为浅黄色泡沫状的标题化合物(0.54 g)。LC-MS保留时间= 3.71 min; m/z = 471.11 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒;流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-15.3
向中间体GW-15.2 (500 mg, 1.12 mmol)于二氧杂环己烷(5 mL)中的溶液中添加HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (3.40 mL, 13.6 mmol)和甲醇(5滴)并将反应混合物在rt搅拌5h。浓缩反应混合物并在高真空下干燥过夜以得到为橙色固体的标题化合物的HCl盐(0.42g)。LC-MS保留时间 = 2.27 min; m/z = 349.10 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna C182.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 5% ACN-95% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 95% ACN-5% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体VN-17.1
在氮气下在~25℃下向3,6-二氯-1,2,4,5-四嗪 (2.67 g, 17.7 mmol)于甲基叔丁基醚(125 mL)中的溶液中添加丁-3-炔-1-胺盐酸盐(1.87 g, 17.7 mmol)，接着添加N,N-二异丙基乙胺 (12.4 mL, 70.7 mmol)并将反应混合物在~25℃下在氮气下搅拌26 h。向反应中添加硅胶(~5 g)并在真空下除去全部溶剂。将硅胶网装载在ISCO硅胶筒 (220 g)上，用25% EtOAc/己烷经2592 mL洗脱以得到为深红色/橙色粘性油的标题化合物 (853.3 mg)。
中间体VN-17.2
向中间体VN-17.1 (0.85 g, 4.6 mmol)于THF (70 mL)中的溶液中添加BOC-酸酐(4.04 g, 18.5 mmol)，接着添加DMAP (0.085 g, 0.694 mmol)。将反应在~25℃下在氮气下搅拌4天。真空除去全部溶剂。将残余物溶于CH2Cl2 (3 mL)并装载在ISCO硅胶筒 (120 g)上，用50% EtOAc/己烷经2592 mL洗脱以得到为茶色固体的标题化合物(366.1 mg)。LC-MS保留时间 = 2.82 min; m/z = 278.10 [M+Na]+. (柱: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0mm 3 μm；溶剂A = 90%水 : 10% MeOH : 0.1% TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH : 0.1%TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100%B保持1分钟；柱温 = 40℃；波长 = 220 nm)。
中间体VN-17.3
将500 mL Parr反应容器中的中间体VN-17.2 (0.366 g, 1.43 mmol)和10%钯/碳(0.152 g, 0.143 mmol)于MeOH (25 mL)中的混合物在60 psi下暴露于氢气。将反应混合物在~25℃下剧烈摇晃1 h。将反应物从氢气中移除并经注射器用Whatman Puradisc 13 mm针筒过滤器 (0.45 mm孔径)过滤，真空浓缩以得到为粉色泡沫状的标题化合物(定量产率)。产物不经进一步提纯即使用。LC-MS保留时间 = 2.10 min; m/z = 244.12 [M+Na]+.(柱: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0 mm 3 μm；溶剂A = 90%水 : 10% MeOH : 0.1%TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH : 0.1% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B= 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟。柱温 = 40℃；波长 = 220 nm)。
中间体VN-17.4
将中间体VN-17.3 (0.330 g, 1.491 mmol)于4N HCl/二氧杂环己烷 (25 mL)中的溶液在~25℃搅拌16 h。真空除去全部溶剂以得到为茶色固体的标题化合物(定量产率)。LC-MS保留时间 = 0.49 min; m/z = 未观察到. (柱: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0 mm 3μm；溶剂A = 90%水 : 10% MeOH : 0.1% TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH : 0.1% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟。柱温 = 40℃；波长 = 220 nm)。
中间体VN-17.5
在 0℃下在氮气下向氯磺酰异氰酸酯 (0.093 mL, 1.07 mmol)于CH2Cl2 (0.5 mL)中的溶液中逐滴添加2-甲基丙-2-醇 (0.102 mL, 1.07 mmol)。反应在0℃搅拌25 min，然后逐滴添加中间体VN-17.4 (0.140 g, 0.888 mmol)和三乙胺 (0.50 mL, 3.6 mmol)于CH2Cl2 (5 mL)中的溶液。将反应从冷浴中移除并在~25℃下在氮气下搅拌24 h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (8 mL)并在prep-HPLC (柱: SunFire Prep C18 OBD 30 x100 mm 5 μm. 溶剂A = 90%水 : 10% MeOH : 0.1% TFA. 溶剂B = 10%水 : 90% MeOH :0.1% TFA. 流速 = 30 mL/min. 起始% B = 25. 最终% B = 65. 梯度时间 = 20分钟, 停止时间 = 20 min. 波长 = 220 nm)上提纯以得到茶色/褐色粘性油(170.8 mg)。LC/MS表明其主要为(5H-吡咯并[2,3-c]哒嗪-7(6H)-基)磺酰基氨基甲酸叔丁酯和标题化合物产物的混合物。将混合物溶于25% TFA/CH2Cl2 (8 mL)并在~25℃下搅拌2 h。真空除去全部溶剂以得到为褐色固体的标题化合物(150 mg)。LC-MS保留时间 = 0.49 min; m/z = 201.05[M+H]+。(柱: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0 mm 3 μm；溶剂A = 90%水 : 10% MeOH :0.1% TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH : 0.1% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟。柱温 = 40℃；波长 = 220nm)。
中间体GW-16.1
向中间体GW-6 (200 mg, 0.51 mmol)于THF (12 mL)中的溶液中添加氯甲酸苯酯(80mg, 0.51 mmol)，然后添加TEA (0.20 mL, 1.5 mmol)并将反应混合物在rt搅拌17 h。浓缩反应混合物并用Biotage Horizon (10-100% EtOAc/己烷)提纯以得到为无色油状物的标题化合物(0.15 g)。LC-MS保留时间 = 3.76 min; m/z = 440.15 [M+H]+。(柱:Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA;流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体VN-19.1
在-78℃下在氮气下向2-甲基丙-2-醇 (1.10 g, 14.8 mmol)于乙醚 (60 mL)中的溶液中逐滴添加氯磺酰异氰酸酯(1.29 mL, 14.8 mmol)。将反应从冷浴移除并在~25℃下搅拌5.5 h。真空除去全部溶剂以得到氯磺酰基氨基甲酸叔丁酯。在0℃下在氮气下将粗氯磺酰基氨基甲酸叔丁酯逐滴添加到6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶, TFA (1.16 g, 4.93mmol)和三乙胺(3.44 mL, 24.7 mmol)于THF (25 mL)中的溶液中。将反应在0℃搅拌30min，然后在~25℃搅拌20 h。真空除去全部溶剂。残余物溶于水 (50 mL)和EtOAc (50 mL)。分离的水性组分用EtOAc (2 x 50 mL)进一步萃取。合并的有机组分经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。残余物自EtOAc/MeOH重结晶以得到为白色结晶固体的标题化合物(120 mg)，其不经进一步提纯即使用。1H NMR表明标题化合物与 (7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)磺酰基氨基甲酸叔丁酯的混合物。LC-MS保留时间 = 2.73 min; m/z = 201.04 [M-Boc+H]+.(柱: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0 mm 3 μm；溶剂A = 90%水 : 10% MeOH : 0.1%TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH : 0.1% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B= 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟。柱温 = 40℃；波长 = 220 nm)。
中间体VN-19.2.1和VN-19.2.2
将中间体VN-19.1和(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)磺酰基氨基甲酸叔丁酯(0.120 g,0.400 mmol)的混合物于25% TFA/CH2Cl2 (6 mL)中的溶液在~25℃下搅拌3 h。真空除去全部溶剂。残余物溶于MeOH (10 mL)并真空浓缩至干(3x)。然后将残余物溶于甲苯 (10 mL)并真空浓缩至干 (3x)以得到为白色固体的标题化合物的混合物(定量产率, 1:0.4摩尔比)，其不经进一步提纯即使用。LC-MS保留时间 = 0.53和0.94 min; m/z = 未观察到.(柱: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0 mm 3 μm；溶剂A = 90%水 : 10% MeOH : 0.1%TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH : 0.1% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B= 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟。柱温 = 40℃；波长 = 220 nm)。
中间体GW-17.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.697 g, 2.31 mmol)和N-甲基吡啶-3-胺 (0.250 g, 2.31 mmol)于DMF (5 mL)中的溶液中添加DIPEA (0.808mL, 4.62 mmol)、接着HATU (0.923 g, 2.43 mmol)，并将反应混合物在rt搅拌17 h。反应混合物在水 (50 mL)和EtOAc (25 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，浓缩并用BiotageHorizon (20-100% EtOAc/己烷)提纯以得到为白色泡沫状的标题化合物(0.27 g)。LC-MS保留时间 = 3.36 min; m/z = 292.16 [M+H]+ (- Boc). (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10%H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速:0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-17.2
向中间体GW-17.1 (0.27 g, 0.69 mmol)于二氧杂环己烷 (2 mL)中的溶液中添加HCl (4N，于二氧杂环己烷中) (1 mL, 4 mmol)并将反应混合物在rt搅拌4 h。加入甲醇(1mL)并继续在rt搅拌16 h。浓缩反应混合物并在高真空下干燥过夜以得到为橙色固体的标题化合物的HCl盐 (0.23 g)。LC-MS保留时间 = 2.15 min; m/z = 292.16 [M+H]+. (柱:Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA;流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-18.1
向5-氨基-3-甲基苯并[d]噻唑-2(3H)-酮 (690 mg, 3.83 mmol)和甲醛(172 mg,5.74 mmol)于甲醇(20 mL)中的悬浮液中添加甲醇钠 (4.4 mL, 19 mmol)并将反应混合物加热至50℃持续16 h。将反应混合物冷却至rt，用硼氢化钠(362 mg, 9.57 mmol)分两批处理并在rt搅拌3 h。浓缩反应混合物，混合物用硅胶干法装载至Biotage Horizon (0-80%EtOAc/己烷)用于提纯以得到为白色固体的标题化合物(0.54 g)。LC-MS保留时间 = 1.84min; m/z = 195.11 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃;梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220nm)。
中间体GW-18.2
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.392 g, 1.30 mmol)和中间体GW-18.1 (0.23 g, 1.2 mmol)于DMF (5 mL)中的溶液中添加DIPEA (0.40 mL, 2.4mmol)和HATU (0.495 g, 1.30 mmol)并将反应混合物在rt搅拌3 h。反应混合物在水 (50mL)和EtOAc (25 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，浓缩并用Biotage Horizon (120 gSiO2, 0-70% EtOAc/己烷和然后10-70% EtOAc/己烷)提纯两次以得到为白色泡沫状的标题化合物 (0.21 g)。LC-MS保留时间 = 3.92 min; m/z = 500.15 [M+Na]+. (柱:Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA;流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-18.3
向中间体GW-18.2 (210 mg, 0.44 mmol)于二氧杂环己烷(2 mL)中的溶液中添加 HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (0.67 mL, 2.7 mmol)并将反应混合物在rt搅拌24 h。浓缩反应混合物并在高真空下干燥过夜以得到为浅粉色固体的标题化合物的HCl盐(0.19 g)。LC-MS保留时间 = 2.67 min; m/z = 378.10 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1%TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-19.1
向5,6-二甲基吡啶-3-胺 (650 mg, 5.32 mmol)和甲醛 (240 mg, 7.98 mmol)于甲醇(20 mL)中的悬浮液中添加甲醇钠 (6.08 mL, 26.6 mmol)并将反应混合物加热至50℃持续 16 h。将反应混合物冷却至rt，用硼氢化钠(503 mg, 13.3 mmol)分两批处理并在rt搅拌3 h。浓缩反应混合物，用硅胶干法装载至Biotage Horizon (20-100% EtOAc/己烷，然后0-20% MeOH/EtOAc) 用于提纯，获得为白色固体的标题化合物(0.40 g)。LC-MS保留时间 =1.44 min; m/z = 137.13 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度:40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV220 nm)。
中间体GW-19.2
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.885 g, 2.94 mmol)和中间体GW-19.1 (0.40 g, 2.9 mmol)于DMF (5 mL)中的溶液中添加DIPEA (1.02 mL,5.87 mmol)和然后HATU (1.17 g, 3.08 mmol)并将反应混合物在rt搅拌4 h。反应混合物在水 (50 mL)和EtOAc (25 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用BiotageHorizon (20-100% EtOAc/己烷)提纯以得到为白色固体的标题化合物 (0.80 g)。LC-MS保留时间 = 3.27 min; m/z = 442.20 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1%TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-19.3
向中间体GW-19.2 (0.800 g, 1.90 mmol)于二氧杂环己烷 (6 mL)中的溶液中添加HCl (4N，于二氧杂环己烷中) (2.90 mL, 11.6 mmol)并将反应混合物在rt搅拌20 h。除去大部分溶剂，然后添加HCl (4N，于二氧杂环己烷中) (2.90 mL, 95 mmol)并将反应混合物在rt搅拌2 h。加入甲醇 (2 mL)，搅拌1 h，再加入甲醇 (2 mL)并继续在rt搅拌20 h。浓缩反应混合物并在高真空下干燥以得到为白色固体的标题化合物的HCl盐(0.7 g)。 LC-MS保留时间 = 2.20 min; m/z = 320.19 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1%TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体VN-28.1
向N 1-甲基乙烷-1,2-二胺 (2.0 g, 27 mmol)于吡啶 (30 mL)中的溶液中添加磺酰二胺 (3.10 g, 32.4 mmol)。将反应在120℃在氮气下加热24 h。真空除去全部溶剂。残余物在饱和NaCl (aq, 25 mL)和EtOAc (125 mL)之间分配，有机组分用 1N HCl (aq, 50 mL)和饱和NaCl (aq, 25 mL)洗涤。有机组分经MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩以得到为黄色粘性油的标题化合物(799.4 mg)。产物不经进一步提纯即使用。
中间体VN-29
向中间体ZY-5的HCl盐 (0.50 g, 1.3 mmol)于THF (30 mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苯酯 (0.16 mL, 1.3 mmol)和三乙胺 (0.55 mL, 3.9 mmol)并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩至干，用DCM (4 mL)稀释并使用Biotage Horizon (80 gSiO2, 40% EtOAc/己烷)提纯以得到为白色泡沫状的标题化合物(545 mg)。LC-MS保留时间= 3.89 min; m/z = 468.11 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒;流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-20.1
向(2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氨基甲酸叔丁酯(1.28 g, 4.84 mmol)于乙腈 (50 mL)中的溶液中添加selectfluor (3.43 g, 9.68 mmol)并将反应混合物在rt搅拌19 h。反应混合物在EtOAc (20 mL)和水(20 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤并用BiotageHorizon (0-40% EtOAc/己烷) 提纯以得到为白色固体的标题化合物(0.33 g)。LC-MS保留时间 = 3.86 min; m/z = 283.13 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1%TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-20.2
向中间体GW-20.1 (0.33 g, 1.2 mmol)于二氧杂环己烷 (2 mL)中的溶液中添加HCl(4N，于二氧杂环己烷中) (1.1 mL, 4.4 mmol)并将反应混合物在rt搅拌5 h，加入甲醇 (1mL)并继续在rt搅拌7 h。再添加HCl (4N，于二氧杂环己烷中) (1.06 mL, 4.24 mmol)并继续在rt搅拌16 h。浓缩反应混合物并在高真空下干燥以得到为褐色固体的标题化合物(0.29 g)。LC-MS保留时间 = 2.24 min; m/z = 183.03 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90%MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-20.3
向中间体GW-8.1 (338 mg, 1.02 mmol)和中间体GW-20.2 (260 mg, 1.02 mmol)于DMF (1 mL)中的溶液中添加DIPEA (0.62 mL, 3.6 mmol)和HATU (407 mg, 1.09 mmol)并将反应混合物在rt搅拌3 h。反应混合物在水 (10 mL) 和EtOAc (5 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤并用Biotage Horizon (0-70% EtOAc/己烷)提纯以得到不纯的标题化合物 (0.28 g, 含有杂质)。该物质用Biotage Horizon (10-70% EtOAc/己烷, 120 g柱)再次提纯以得到为绿色油状物的标题化合物(0.12 g)。LC-MS保留时间 = 3.86 min;m/z = 496.14 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A:10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220nm)。
中间体GW-20.4
向中间体GW-20.3 (0.15 g, 0.30 mmol)于DMF (5 mL)中的溶液中添加为分散体的60% NaH (0.013 g, 0.33 mmol)/矿物油并将反应混合物在rt搅拌3 min。然后添加碘甲烷(0.02 mL, 0.33 mmol)并继续在rt搅拌17 h。反应混合物在水 (50 mL)和EtOAc (25 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon (0-80% EtOAc/己烷)提纯以得到为白色固体的标题化合物(60 mg)。LC-MS保留时间 = 3.92 min; m/z =510.12 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10%MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度:0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-20.5
向中间体GW-20.4 (60 mg, 0.12 mmol)于乙醇(3 mL)中的溶液中添加水合肼(0.030mL, 0.71 mmol)并将反应混合物加热至50℃持续5 h。浓缩溶剂，残余物与乙醇(2 x 10mL)共沸并在高真空下干燥过夜以得到为白色固体的标题化合物(40 mg)。LC-MS保留时间= 2.69 min; m/z = 380.20 [M+H]+. (柱: Phenomenex C18 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒;流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-21.1
向中间体GW-8.1 (838 mg, 2.53 mmol)和4-氟苯并[d]噻唑-5-胺(610 mg, 2.53mmol)于DMF (6 mL)中的溶液中添加DIPEA (1.5 mL, 8.9 mmol) 和HATU (1010 mg, 2.66mmol)并将反应混合物在rt搅拌3 h。反应混合物在水 (60 mL)和EtOAc (30 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤并用Biotage Horizon (0-70% EtOAc/己烷)提纯以得到为无色油状物的标题化合物 (0.62 g)。LC-MS保留时间 = 2.52 min; m/z = 482.15 [M+H]+.(柱: Phenomenex C18 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1%TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min,然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-21.2
向中间体GW-21.1 (0.62 g, 1.3 mmol)于DMF (12 mL)中的溶液中添加为分散体的60% NaH (0.057 g, 1.42 mmol)/矿物油并将反应混合物搅拌3 min。然后加入碘甲烷(0.090 mL, 1.4 mmol)并将反应混合物在rt搅拌16 h。将其在水 (120 mL)和EtOAc (60mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤并用Biotage Horizon (0-80% EtOAc/己烷)提纯以得到为无色油状物的标题化合物(0.32 g)。LC-MS保留时间 = 2.35 min; m/z =496.15 [M+Na]+. (柱: Phenomenex C18 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10%MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度:0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-21.3
向中间体GW-21.2 (320 mg, 0.65 mmol)于乙醇(10 mL)中的溶液中添加水合肼(0.19mL, 3.88 mmol)并将反应混合物加热至50℃持续5.5 h。过滤反应混合物，滤液与乙醇(2 x10 mL)共沸，在高真空下干燥过夜并用Biotage Horizon (0-100% MeOH/EtOAc)提纯以得到为固体的标题化合物(60 mg)。LC-MS保留时间 = 1.79 min; m/z = 366.25 [M+H]+.(柱: Phenomenex C18 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1%TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min,然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-22.1
在-78℃下向苯并[d]噻唑-5-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯 (0.88 g, 3.3 mmol)于THF(40 mL)中的溶液中添加正丁基锂 (2.5M于己烷中) (2.26 mL, 5.66 mmol)并将反应混合物搅拌30 min。然后添加D2O (0.72 mL, 39.9 mmol)，除去水浴并将反应混合物在rt搅拌17 h。浓缩反应混合物并在水(20 mL)和EtOAc (20 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤并用Biotage Horizon (10-80% EtOAc/己烷) 提纯以得到为黄色固体的标题化合物(0.48 g)。LC-MS保留时间 = 2.63 min; 观察值m/z = 210.20 [M-tBu+H]+. (柱:Phenomenex C18 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-22.2
向中间体GW-22.1 (0.46 g, 1.73 mmol)于二氧杂环己烷 (4 mL)中的混合物中添加HCl (4N，于二氧杂环己烷中) (2.63 mL, 10.52 mmol)并将澄清溶液在rt搅拌17 h。浓缩反应混合物并在高真空下干燥64 h以得到为米黄色固体的标题化合物的HCl盐(0.4 g)。LC-MS保留时间 = 1.81 min; m/z = 166.07 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-22.3
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.523 g, 1.74 mmol)和中间体GW-22.2 (0.35 g, 1.7 mmol)于DMF (5 mL)中的溶液中添加DIPEA (0.76 mL, 4.3mmol)和然后HATU (0.69 g, 1.8 mmol)并将反应混合物在rt搅拌3 h。反应混合物在水(50 mL)和EtOAc (20 mL)之间分配，有机组分经Na2SO4干燥，过滤并用Biotage Horizon(0-80% EtOAc/己烷)提纯以得到为浅黄色泡沫状的标题化合物(0.50 g)。LC-MS保留时间= 3.85 min; m/z = 471.21 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒;流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-22.4
向中间体GW-22.3 (0.500 g, 1.12 mmol)于二氧杂环己烷 (3 mL)中的溶液中添加HCl (4N，于二氧杂环己烷中) (1.69 mL, 6.76 mmol)并将反应混合物在rt搅拌17 h。加入甲醇(1 mL)并将反应混合物在rt搅拌5 h。浓缩反应混合物并在高真空下干燥过夜以得到为浅黄色固体的标题化合物的HCl盐 (0.43 g)。LC-MS保留时间 = 2.83 min; m/z =349.13 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10%MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度:0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体GW-23.1
在氮气下在0℃下向1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2(3H)-酮 (2.00 g, 14.9 mmol)于DMF(30 mL)和THF (30 mL)中的溶液中添加60% 氢化钠/矿物油 (0.600 g, 15.0 mmol)。将反应混合物在0℃搅拌1 h。然后经3 min逐滴添加 (2-(氯甲氧基)乙基)三甲基甲硅烷 (3.17mL, 17.9 mmol)并经21 h使反应温热至rt而不移除冷浴。反应混合物在水 (50 mL)和EtOAc (50 mL)之间分配，水相用EtOAc (2 x 50 mL)萃取，合并的有机组分用水 (2 x 50mL)、盐水(50 mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon (25% EtOAc/己烷)提纯以得到为粘性橙色油状物的标题化合物(2.26 g)。LC-MS保留时间 = 3.49 min; m/z= 265.20 [M+H]+。(柱: Phenomenex C18 50 x 2.0 mm 3 μm；溶剂A = 90%水 : 10% MeOH: 0.1% TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH : 0.1% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟。柱温 = 40℃；波长 = 220nm)。
中间体GW-23.2
在rt下在氮气下向中间体GW-23.1(2.21 g, 8.38 mmol)于DMF (40 mL)中的溶液中添加 60%氢化钠/矿物油 (0.670 g, 16.8 mmol)。反应混合物在rt下在氮气下搅拌1.5 h。经3min向反应混合物中逐滴添加 1,2-二溴乙烷 (0.722 mL, 8.38 mmol)并将反应混合物在rt搅拌2 h。反应混合物在水 (50 mL)和EtOAc (50 mL)之间分配，水性组分用EtOAc (2 x25 mL)萃取。合并的有机组分用水 (2 x 25 mL)、盐水 (25 mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤，浓缩并用 Biotage Horizon (120 g 柱, 25% EtOAc/己烷)提纯以得到为浅黄色粘性油的标题化合物 (1.87 g)。
中间体GW-23.3
将中间体GW-23.2 (1.87 g, 6.44 mmol)于25% TFA/CH2Cl2 (60 mL)中的溶液在rt搅拌1.5 h。将反应混合物冷却至0℃，用饱和NaHCO3溶液(aq)小心地使其成碱性，并用CH2Cl2(2 x 50 mL)萃取。合并的有机组分经MgSO4干燥，过滤并浓缩以得到灰白色固体。将该固体自EtOAc中重结晶以得到为粉色晶体的标题化合物(0.85 g)。LC-MS保留时间 = 1.60 min;m/z = 161.0 [M-MeOH+H]+。(柱: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0 mm 3 μm；溶剂A = 95%水 : 5% AcCN : 10mM NH4OAC；溶剂B = 5%水 : 95% AcCN : 10mM NH4OAc；流速 = 0.8mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟。柱温= 40℃；波长 = 220 nm)。
中间体GW-23.4
向中间体GW-23.3(0.500 g, 2.63 mmol)于MeOH (50 mL)中的悬浮液中添加6N HCl(aq) (100 mL)。悬浮液变为均一溶液，同时在rt 搅拌5 d。浓缩反应混合物，残余物在EtOAc (25 mL)和饱和NaHCO3溶液(aq, 25 mL)之间分配。水性组分用EtOAc (2 x 25 mL)进一步萃取，合并的有机组分经MgSO4干燥，过滤，浓缩并用Biotage Horizon (120 g 柱,75% EtOAc/己烷和然后120 g 柱, 50% EtOAc/己烷)提纯两次。所得混合物溶于MeOH (18mL)并通过制备HPLC (柱: XTERRA 30 x 100 mm S5. 溶剂A = 90%水 : 10% MeOH : 0.1%TFA. 溶剂B = 10%水 : 90% MeOH : 0.1% TFA. 流速 = 40 mL/min. 起始% B = 0. 最终% B = 100. 梯度时间 = 10分钟, 然后在100% B保持2分钟. 波长 = 220 nm)提纯以得到为白色固体的标题化合物(0.247 g)。LC-MS保留时间 = 1.29 min; m/z = 161.1 [M+H]+。(柱: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0 mm 3 μm；溶剂A = 95%水 : 5% AcCN : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% AcCN : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟。柱温 = 40℃；波长 = 220nm)。
中间体GW-23.5
在rt下经1min向中间体GW-23.4 (0.050 g, 0.31 mmol)于THF (1 mL)中的溶液中逐滴添加1M氢化锂铝/THF (0.624 mL, 0.624 mmol)。反应在rt搅拌18.5 h。反应用EtOAc (2mL)、接着水 (2 mL)小心淬灭。向所得浆液中添加Rochelle's盐溶液 (aq, 10 mL)，混合物用EtOAc (3 x 25 mL)萃取。合并的有机组分经MgSO4干燥，过滤，浓缩并用BiotageHorizon (24 g 柱, 75% EtOAc/己烷)提纯以得到为白色固体的标题化合物(22.5 mg)。LC-MS保留时间 = 1.93 min; m/z = 147.1 [M+H]+。(柱: Phenomenex Luna C18 50 x2.0 mm 3 μm；溶剂A = 95%水 : 5% AcCN : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% AcCN :10 mM NH4OAc；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟。柱温 = 40℃；波长 = 220 nm)。
中间体AW-2
步骤1。
向6-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (180 mg, 1.215 mmol)和DMAP (14.8 mg,0.121 mmol)于THF (5 mL)中的溶液中添加BOC2O (0.338 mL, 1.46 mmol)。所得溶液在rt搅拌1 h，然后密封，并在油浴中在70℃加热2 h。真空除去溶剂，残余物通过快速二氧化硅色谱法 (40 g硅胶筒)提纯，用梯度 0~35%的EtOAc-己烷洗脱以得到6-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯 (300 mg)。LC-MS保留时间 = 1.87 min; m/z = 271.07 [M+Na]+ (起始% B = 0, 最终% B = 100, 梯度时间 = 2 min, 流速 = 1 mL/min, 波长 =220, 溶剂对 =水:乙腈 10 mM乙酸铵, 溶剂A = 95%水: 5%乙腈 10 mM 乙酸铵, 溶剂B =5%水: 95%乙腈 10 mM乙酸铵, 柱 = Phenomenex Luna C18 2.0 X 30mm 3µm, 柱温 = 40℃)。
步骤2。
向6-甲氧基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-甲酸叔丁酯 (298 mg, 1.20 mmol)于甲醇(10 mL)中的溶液中添加10% Pd/C (64 mg, 0.060 mmol)。将所得混合物放置在1 atmH2 (气囊)下并在rt搅拌4 h。反应混合物通过硅藻土垫过滤，用MeOH洗涤并真空浓缩。残余物通过快速二氧化硅色谱法(40 g硅胶筒)提纯，用梯度 0~35%的EtOAc-己烷提纯以得到为白色固体的叔丁基-1-甲酸酯保护的中间体AW-2 (278 mg)。
步骤3。
向叔丁基-1-甲酸酯保护的中间体AW-2 (275 mg, 1.10 mmol)于甲醇(1 mL)中的溶液中添加HCl (4N，于二氧杂环己烷中) (5.5 mL, 22 mmol)并将反应混合物在rt搅拌6h。真空蒸发溶剂。残余物用乙醚 (10 mL)研磨，过滤，用乙醚洗涤，并真空干燥以得到为灰白色固体的中间体AW-2的HCl盐 (170 mg)。LC-MS保留时间 = 1.19 min; m/z = 151.03[M+H]+ (起始% B = 0, 最终% B = 100, 梯度时间 = 2 min, 流速 = 1 mL/min, 波长 =220, 溶剂对 =水:乙腈 10 mM乙酸铵, 溶剂A = 95%水: 5%乙腈 10 mM乙酸铵, 溶剂B =5%水: 95%乙腈 10 mM乙酸铵, 柱 = Phenomenex Luna C18 2.0 X 30mm 3µm, 柱温 = 40℃)。
中间体AW-3
步骤1。
向3-氟-4-甲氧基苯胺 (3.00 g, 21.3 mmol)和多聚甲醛(1.28 g, 42.5 mmol)于MeOH (100 mL)中的混合物中添加甲醇钠(19.4 mL, 85.0 mmol)。密封反应混合物并在55℃下加热2 h。冷却至rt后，然后以小份添加硼氢化钠 (2.01 g, 53.1 mmol)。最终混合物在rt搅拌过夜（ON）。真空除去溶剂，残余物溶于EtOAc (100 mL)并用水(150 mL)洗涤。水性组分用 NaCl 饱和并用EtOAc (100 mL)萃取。合并的有机组分用盐水 (50 mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。残余物溶于DCM (10 mL)并通过FCC (80 g硅胶筒)提纯，用梯度 5%~50% EtOAc-己烷洗脱以得到为浅黄色油状物的3-氟-4-甲氧基-N-甲基苯胺 (3.08g)。LC-MS保留时间 = 1.34 min; m/z = 153.42 [M-H]-. (起始% B = 0, 最终% B =100, 梯度时间 = 2 min, 流速 = 1 mL/min, 波长 = 220, 溶剂对 =水:乙腈 10 mM乙酸铵, 溶剂A = 95%水: 5%乙腈 10 mM乙酸铵, 溶剂B = 5%水: 95%乙腈 10 mM乙酸铵, 柱= Phenomenex Luna C18 2.0 X 30mm 3µm, 柱温 = 40℃)。
步骤2。
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (971 mg, 3.22mmol)、3-氟-4-甲氧基-N-甲基苯胺 (500 mg, 3.22 mmol)和HATU (1.35 g, 3.54 mmol)于DMF (15 mL)中的溶液中逐滴添加DIPEA (2.25 mL, 12.9 mmol)。反应溶液在rt 搅拌过夜（ON），用EtOAc (50 mL) 稀释并倒入水 (100 mL)中。分离的水性组分用NaCl饱和，用EtOAc (20 mL)萃取。合并的有机组分用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并真空蒸发。残余物溶于DCM (20 mL)并通过FCC (220 g硅胶筒)提纯，用梯度 35%~65% EtOAc-己烷洗脱以得到为白色泡沫状的(S)-(3-(3,5-二氟苯基)-1-((3-氟-4-甲氧基苯基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯 (1.26 g)。LC-MS保留时间 = 1.30 min; m/z = 439.05 [M+H]+. (起始% B = 0, 最终% B = 98, 梯度时间 = 1.5 min, 流速 = 0.8 mL/min, 波长= 220, 溶剂对 =水/乙腈/TFA, 溶剂A = 100%水/ 0.05% TFA, 溶剂B = 100%乙腈/0.05%TFA, 柱 =Waters Aquity BEH C18 2.1 X 50 mm 1.7µm, 柱温 = 40℃)。
步骤3。
将(S)-(3-(3,5-二氟苯基)-1-((3-氟-4-甲氧基苯基)(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯 (1.26 g, 2.88 mmol)和4 M HCl/1,4-二氧杂环己烷 (5.76 mL,23.0 mmol) 的混合物在rt搅拌1 h。浓缩反应混合物，然后将其真空干燥以得到为灰白色泡沫状的标题化合物的HCl盐 (1.10 g)。LC-MS保留时间 = 0.90 min; m/z = 339.20 [M+H]+。(起始% B = 0, 最终% B = 98, 梯度时间 = 1.5 min, 流速 = 0.8 mL/min, 波长 =220, 溶剂对 =水/乙腈/TFA, 溶剂A = 100%水/0.05% TFA, 溶剂B = 100%乙腈/0.05%TFA, 柱 =Waters Aquity BEH C18 2.1 X 50 mm 1.7µm, 柱温 = 40℃)。
中间体AW-4
经由添加漏斗向氯甲酸苯酯(0.034 mL, 0.26 mmol)于DCM (2.5 mL)中的冰浴冷却的溶液中逐滴添加中间体AW-3的HCl盐 (101 mg, 0.261 mmol)和TEA (0.109 mL, 0.784mmol)于DCM (2.5 mL)中的溶液。所得溶液在0℃搅拌30 min，然后在rt搅拌30 min。将混合物冷却至0℃，再加入氯甲酸苯酯(0.034 mL, 0.26 mmol)并继续在rt 搅拌过夜（ON）。反应混合物用DCM (5 mL)稀释，用水、盐水和1 M NaOH洗涤，经MgSO4干燥，过滤并真空蒸发以得到为灰白色胶状物的标题化合物(122 mg)，其不经进一步提纯即使用。LC-MS保留时间 =1.73 min; m/z = 459.20 [M+H]+. (起始% B = 0, 最终% B = 100, 梯度时间 = 2 min,流速 = 1 mL/min, 波长 = 220, 溶剂对 =水:乙腈 10 mM乙酸铵, 溶剂A = 95%水: 5%乙腈 10 mM乙酸铵, 溶剂B = 5%水: 95%乙腈 10 mM乙酸铵, 柱 = Phenomenex Luna C182.0 X 30mm 3µm, 柱温 = 40℃)。
中间体ZY-24.1
将HATU (127 mg, 0.33 mmol)添加到(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (100 mg, 0.33 mmol)和N-甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂芑-6-胺 (50 mg,0.30 mmol)于DMF (2 mL)和DIPEA (0.16 mL, 0.91 mmol)中的混合物中并将反应混合物在rt搅拌2 h。过滤反应物，并通过制备 HPLC提纯以得到标题化合物(125 mg)。LC-MS保留时间 = 1.94 min; m/z = 449.2 [M+H]+. (柱:Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟, 然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体ZY-24.2
将4 M HCl于二氧杂环己烷中的溶液(1.5 mL, 6.00 mmol)添加到中间体ZY-24.1(125 mg, 0.28 mmol)于MeOH (1.5 mL)中的溶液中并将反应混合物在rt搅拌16 h。浓缩反应物，残余物与EtOH共沸并干燥以得到为黄色固体的标题化合物的HCl盐 (119 mg)。LC-MS保留时间 = 0.87 min; m/z = 349.2 [M+H]+. (柱:Waters Aquity BEH C18 2.1 X 50mm 1.7U；溶剂A = 100%水: 0.05% TFA；溶剂B = 100%乙腈: 0.05% TFA；流速 = 0.8 mL/min；梯度: 2-98% B；梯度时间 = 1.5 min；波长 = 220)。
中间体ZY-25.1
将HATU (148 mg, 0.39 mmol)添加到(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (117 mg, 0.39 mmol)和4-氯-N-甲基苯胺(50 mg, 0.35 mmol)于DMF (2 mL)和DIPEA (0.18 mL, 1.1 mmol)中的混合物中并将反应混合物在rt搅拌2 h。过滤反应物，并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物 (108.7 mg)。LC-MS保留时间 = 2.37 min; m/z =425.0 [M+H]+. (柱:Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度:50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟, 然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
中间体ZY-25.2
将4M HCl于二氧杂环己烷中的溶液 (1.5 mL, 6.0 mmol)添加到中间体ZY-25.1 (108mg, 0.25 mmol)于MeOH (1.5 mL)中的溶液中并将反应混合物在rt搅拌16 h。将反应物浓缩，残余物与 EtOH共沸并干燥以得到为黄色固体的标题化合物的HCl盐(108 mg)。LC-MS保留时间 = 0.91 min; m/z = 325.1 [M+H]+. (柱:Waters Aquity BEH C18 2.1 X 50 mm1.7U；溶剂A = 100%水: 0.05% TFA；溶剂B = 100%乙腈: 0.05% TFA；流速 = 0.8 mL/min；梯度: 2-98% B；梯度时间 = 1.5 min；波长 = 220)。
中间体BB-1.1
在氮气气氛下在0℃下向叔丁醇 (1.59 mL, 16.7 mmol)于DCM (20 mL)中的搅拌溶液中缓慢添加氯磺酰异氰酸酯 (2.36 g, 16.7 mmol)并搅拌15 min。向上述反应混合物中添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (2.00 g, 16.7 mmol)和TEA (7.0 ml, 40 mmol)的DCM (5 mL)溶液并在0℃搅拌30 min和在室温搅拌1h。反应混合物用冰冷饱和的NaHCO3水溶液(50 mL)稀释并用DCM (2 x 50 mL)萃取。合并的有机层用盐水 (75 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过 combiflash色谱法(24 g Redisep® SiO2 柱, 用30 %EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为粘性液体的标题化合物 (1.6 g)。LC-MS保留时间 =1.69 min; m/z = 300.2 [M+H]+. 柱: KINETIX C18, 75x3 mm 2.6微米; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 1% HCOOH/水; 流动相 B: ACN; 20% B-100% B经4分钟，然后在100% B保持0.6分钟，流速 1.5 ml/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-1.2
向中间体BB-1.1 (2.00 g, 6.68 mmol)于二氧杂环己烷 (20 mL)中的搅拌溶液中添加4M HCl/二氧杂环己烷 (16.70 mL, 66.8 mmol)并在RT搅拌5h。在减压下蒸发反应混合物；粗产物用碳酸氢钠水溶液 (50 mL)洗涤，然后用乙酸乙酯(100 mL)萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下蒸发以得到为浅黄色固体的中间体BB-1.2 (1.15 g)。LC-MS保留时间 = 0.73 min; m/z = 200 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mMHCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-2.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (200 mg, 0.66 mmol) 于DMF (5 mL)中的搅拌溶液中添加HATU (380 mg, 0.1 mmol)、DIPEA (0.39 mL, 1.99mmol)并将反应混合物搅拌30 min。将N-甲基-4-丙基苯胺 (120 mg, 0.8 mmol)添加到上述反应混合物中并在室温搅拌16 h。反应混合物然后用水 (20 mL)稀释，用EtOAc (3 X 25mL)萃取。合并的有机层用10%NaHCO3水溶液(25 mL)、水 (25 mL)、盐水 (25 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (24 g Redisep® SiO2 柱, 用0-15%EtOAc/己烷洗脱)提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (0.25 g)。LC-MS保留时间 =1.33 min; m/z = 377.2 [M-异丁烯+H]+. 柱: Acquity BEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 µ:流速: 0.8 mL/min; 流动相 A: 5 mM NH4OAc/水 (pH=3.5): ACN (95:5); 流动相 B: 5mM NH4OAc/水: ACN (5:95); 5% B至95% B 经1.1分钟，然后在95% B下保持0.6分钟，流速0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-2.2
向中间体BB-2.1 (250 mg, 0.58 mmol)于DCM (10 mL)中的搅拌溶液中添加HCl/二氧杂环己烷 (4M, 457 µL, 1.83 mmol)并将反应混合物在室温搅拌4h。将反应混合物浓缩至干；残余物用己烷 (2 x 25 mL)研磨以得到为灰白色固体的标题化合物(0.2 g)。LC-MS保留时间 = 2.93 min; m/z = 333.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm;流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mMHCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-2.3
在0℃下向中间体BB-2.2 (100 mg, 0.3 mmol)和吡啶 (0.05 mL, 0.6 mmol)于DCM(5 mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苯酯 (0.05 mL, 0.36 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (20 mL) 稀释并用DCM (2 x 20 mL)萃取。合并的有机层用1.5 NHCl溶液(25 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (4gRedisep® SiO2 柱, 用25 % EtOAc/正己烷)提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (80mg)。LC-MS保留时间 = 3.46 min; m/z = 453.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3mm, 2.6 μm; 流速: 0.7 mL/min; 流动相 A: 含5 mM CH3CO2NH4 的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM CH3CO2NH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-3.1
向2-氯-5-硝基吡啶 (3.5 g, 22 mmol)于2-丙醇(20 mL)和DMF (25 mL)中的搅拌溶液中添加 NaH (1.32 g, 33.1 mmol, 60%于矿物油中)并在0℃搅拌20 min，温热至室温并搅拌1h。反应混合物用饱和NH4Cl 溶液 (100 mL)淬灭，用EtOAc (2 x 60 mL)萃取，合并的有机层用盐水 (100 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法(80g Redisep® SiO2 柱, 用8 % EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色液体的标题化合物 (1.65 g)。LC-MS保留时间 = 2.64 min; m/z = 182 [M-H]. 柱: KINETIX XB-C18,75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含5 mM CH3CO2NH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM CH3CO2NH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-3.2
向中间体BB-3.1 (1.65 g, 9.06 mmol)于甲醇(60 mL)中的搅拌溶液中添加10%钯/碳(0.241 g, 2.264 mmol)并在氢气气氛下搅拌16 h。经硅藻土垫过滤反应混合物，滤液在减压下蒸发以得到为黑色液体的标题化合物 (1.15g)。LC-MS保留时间 = 0.99 min; m/z =153.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A:含1% HCO2H 的水; 流动相 B: ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-3.3
在-78℃下在氮气下向中间体BB-3.2 (1.65 g, 10.8 mmol)于THF (10 mL)中的搅拌溶液中添加LDA (8.13 mL, 16.3 mmol)并将反应混合物在相同温度下搅拌1h。然后添加碘甲烷(0.74 mL, 11.93 mmol)并使反应混合物在室温下搅拌16 h。然后反应混合物用饱和NH4Cl溶液 (50 mL)淬灭，用EtOAc (2 x 60 mL)萃取，合并的有机层用盐水(100 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (80g Redisep® SiO2 柱, 用15 % EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色液体的标题化合物(0.68 g)。LC-MS保留时间 = 2.44 min; m/z = 167.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速:1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-3.4
在0℃下向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (453 mg, 1.504mmol)于DCM (5 mL) 中的溶液中添加中间体BB-3.3 (250 mg, 1.50 mmol)、吡啶 (0.608mL, 7.52 mmol)和POCl3 (0.280 mL, 3.01 mmol)并使反应混合物达到室温并搅拌 1 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释，用 EtOAc (2 x 25 mL)萃取，合并的有机层用盐水(50mL))洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep®SiO2 柱, 用28% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为褐色固体的标题化合物 (0.35 g)。LC-MS保留时间 = 3.35 min; m/z = 450.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B 经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-3.5
将HCl/二氧杂环己烷 (4M溶液, 0.118 mL, 3.89 mmol)添加到中间体BB-3.4 (350mg, 0.779 mmol)中并将反应混合物在室温搅拌2 h。将粗反应混合物浓缩至干，残余物用饱和NaHCO3水溶液(25 mL)碱化并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱, 用2 %MeOH/氯仿洗脱)提纯以得到为红色液体的标题化合物(0.260 g)。LC-MS保留时间 = 1.08min; m/z = 350.3 [M+H]+. 柱: Acquity BEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 µ: 流速: 0.5mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN(5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min; 检测:UV 220 nm。
中间体BB-3.6
在0℃下向中间体BB-3.5 (150 mg, 0.429 mmol)于DCM (5 mL)中的搅拌溶液中添加吡啶 (0.174 mL, 2.15 mmol)、氯甲酸苯酯(0.065 mL, 0.515 mmol)并将反应混合物在室温搅拌2 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释并用DCM (2 x 25 mL)萃取。合并的有机层用1.5N HCl溶液(40 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (12g Redisep® SiO2 柱, 用20 % EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为红色液体的标题化合物(180 mg)。LC-MS保留时间 = 3.49 min; m/z = 470.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18,75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4 的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-4.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (200 mg, 0.66 mmol) 于DCM (5 mL)中的搅拌溶液中添加 3-氟-N,5-二甲基苯胺 (139 mg, 0.996 mmol)、N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氢喹啉 (226 mg, 0.913 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16h。浓缩反应混合物，粗产物通过combiflash色谱法 (40 g Redisep® SiO2 柱, 用 20 %EtOAc/己烷洗脱)提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(0.25g)。LC-MS保留时间 = 3.18min; m/z = 367.2 [M-异丁烯+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的2%水/98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测:UV 220 nm。
中间体BB-4.2
向中间体BB-4.1 (250 mg, 0.59 mmol)于DCM (10 mL)中的溶液中添加HCl/二氧杂环己烷 (4M, 0.15 mL, 0.59 mmol)并将反应混合物在室温搅拌4h。将反应混合物浓缩至干，残余物用正己烷(2 x 25 mL)研磨以得到为灰白色固体的标题化合物 (0.2 g)。LC-MS保留时间 = 2.83 min; m/z = 323.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-4.3
在0℃下向中间体BB-4.2 (100 mg, 0.3 mmol)和吡啶 (0.05 mL, 0.6 mmol)于DCM(5 mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苯酯 (0.05 mL, 0.36 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用 水 (20 mL) 稀释，用DCM (2 x 20 mL)萃取。合并的有机层用1.5 NHCl溶液 (25 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (4gRedisep® SiO2 柱, 用30 % EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(80 mg)。LC-MS保留时间 = 1.32 min; m/z = 443.4 [M+H]+. 柱: Acquity BEH C8 (2.1x 50 mm) 1.7 µ: 流速: 0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc 的水: ACN (95:5);流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在 90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-5.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (250 mg, 0.83 mmol)于DCM (5 mL)中的搅拌溶液中添加3-氟-N,4-二甲基苯胺 (139 mg, 0.996 mmol)、N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氢喹啉 (226 mg, 0.913 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。浓缩反应混合物，粗产物通过combiflash 色谱法 (40 g Redisep® SiO2 柱, 用20 %EtOAc/己烷洗脱)提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(0.27g)。LC-MS保留时间 = 3.35min; m/z = 423.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min;流动相A: 含5 mM NH4OAc的98%水/2% ACN; 流动相B: 含5 mM NH4OAc的2%水/ 98% ACN;20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220nm。
中间体BB-5.2
向中间体BB-5.1 (250 mg, 0.59 mmol)于DCM (10 mL)中的搅拌溶液中添加HCl/二氧杂环己烷 (4M, 0.15 mL, 0.59 mmol)并在室温搅拌4h。将反应混合物浓缩至干，残余物用正己烷 (2 x 25 mL)研磨以得到为灰白色固体的标题化合物(0.2 g)。LC-MS保留时间 =2.93 min; m/z = 323.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的2%水/98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测:UV 220 nm。
中间体BB-5.3
在0℃下向中间体BB-5.2 (100 mg, 0.300 mmol)和吡啶 (0.05 mL, 0.6 mmol)于DCM(5 mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苯酯 (0.050 mL, 0.36 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水(20 mL)稀释并用DCM (2 x 20 mL)萃取。合并的有机层用1.5 NHCl溶液 (25 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤和浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (4gRedisep® SiO2 柱, 用30% EtOAc/己烷洗脱)提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(80mg)。LC-MS保留时间 = 3.39 min; m/z = 443.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的 98%水/ 2% ACN; 流动相B: 含5 mM NH4OAc的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-6.1
在0℃下向中间体GW-8.1 (0.400 g, 1.21 mmol)、4-氨基-2-甲基苯腈 (0.191 g,1.45 mmol)和吡啶(0.586 mL, 7.24 mmol)于DCM (8 mL)中的搅拌溶液中添加POCl3(0.338 mL, 3.62 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用10% NaHCO3水溶液(25 mL)稀释并用DCM (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物用乙醚和DCM的混合物(7:3)洗涤并在真空下干燥以得到为灰白色固体的标题化合物(0.35 g)。LC-MS保留时间 = 3.02 min; m/z = 446.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18,75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-6.2
在0℃下向中间体BB-6.1 (0.35 g, 0.79 mmol)于DMF (8 mL) 中的搅拌溶液中逐份添加NaH (0.063 g, 60%，于矿物油中, 1.6 mmol)并搅拌10 min。在0℃下添加碘甲烷(0.197 mL, 3.14 mmol)并在室温下进一步搅拌16 h。反应混合物用冰冷饱和的NH4Cl水溶液 (50 mL)稀释并用EtOAc (2 x 50 mL)萃取。合并的有机层用盐水(75 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过 combiflash色谱法 (24 g Redisep® SiO2 柱, 用25 %EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色固体的标题化合物 (0.25 g)。LC-MS保留时间 =3.31 min; m/z = 460.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4 的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min;检测: UV 220 nm。
中间体BB-6.3
向密封管中的中间体BB-6.2 (0.17 g, 0.37 mmol)于乙醇 (4 mL)中的搅拌溶液中添加40%甲胺水溶液 (0.144 g, 1.85 mmol)并将所得反应混合物在65℃搅拌16 h。将反应混合物冷却至室温；在减压下除去乙醇，残余物用水(25 mL)稀释并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (12 gRedisep® SiO2 柱, 用3% MeOH/氯仿洗脱)提纯以得到为黄色固体的标题化合物 (100mg)。LC-MS保留时间 = 0.98 min; m/z = 330.3 [M+H]+. 柱: Acquity BEH C8 (2.1 x50 mm) 1.7 µ: 流速: 0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-6.4
在0℃下向中间体BB-6.3 (40 mg, 0.12 mmol)和吡啶 (0.020 mL, 0.24 mmol)于DCM(4 mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苯酯 (0.019 mL, 0.146 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (20 mL)稀释并用DCM (2 x 20 mL)萃取。合并的有机层用1.5NHCl溶液 (25 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash 色谱法 (4gRedisep® SiO2 柱, 用25 % EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(33 mg)。LC-MS保留时间 = 3.17 min; m/z = 450.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18,75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相A: 含10 mM HCOONH4的98%水/2% ACN; 流动相B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-7.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.25 g, 0.83 mmol)和4-氯-N-3-二甲基苯胺 (0.142 g, 0.913 mmol)于DCM (5mL)中的搅拌溶液中添加N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氢喹啉 (0.226 g, 0.913 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。然后将反应混合物浓缩至干，粗产物通过combiflash色谱法 (120g Redisep® SiO2 柱,用30 % EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色油状物的标题化合物(0.23 g)。LC-MS保留时间 = 3.39 min; m/z = 439 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相B: 含10 mMHCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-7.2
向中间体BB-7.1 (0.230 g, 0.524 mmol)于二氧杂环己烷 (1 mL)中的溶液中添加4MHCl/二氧杂环己烷 (2 mL, 8 mmol)并在室温搅拌3 h。将反应混合物浓缩至干；残余物用10% NaHCO3溶液 (30 mL)碱化并用EtOAc (3 x 10 mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩至干以得到为浅黄色油状物的标题化合物(0.15 g)。LC-MS保留时间 = 2.6 min; m/z = 339.0 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速:1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-7.3
在0℃下向中间体BB-7.2 (0.100 g, 0.295 mmol) 和吡啶 (0.048 mL, 0.59 mmol)于DCM (2 mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苯酯(0.04 mL, 0.3 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (30 mL)稀释，用DCM (3 x 10 mL)萃取，合并的有机层用10%HCl溶液(15 mL)、盐水(15 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (4g Redisep® SiO2 柱, 用30% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色油状物的标题化合物(0.11 g)。LC-MS保留时间 = 1.41 min; m/z = 459.2 [M+H]+. 柱: AcquityBEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 µ; 流速: 0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的水:ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟并在90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-8.1
向甲醇钠 (4.32 g, 80 mmol)于MeOH (10 mL)中的搅拌悬浮液中添加 4-氟-3-甲基苯胺 (2.0 g, 16 mmol)并搅拌15min。将所得溶液倒入多聚甲醛(0.672 g, 22.37 mmol)于MeOH (10 mL)中的悬浮液中并将反应混合物在室温搅拌16 h。加入NaBH4 (0.605 g,15.98 mmol)并将反应混合物回流3 h。将反应混合物浓缩至干；向残余物添加1N KOH溶液(15 mL)并用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合并的有机层用水 (20 mL)、盐水(20 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。LC-MS保留时间 = 2.13 min; m/z = 140 [M+H]+. 柱: KINETIXXB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-8.2
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.25 g, 0.83 mmol)和中间体BB-8.1 (0.127 g, 0.913 mmol)于DCM (5 mL)中的搅拌溶液中添加N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氢喹啉(0.226 g, 0.913 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。然后将反应混合物浓缩至干，粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱, 用30 %EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色油状物的标题化合物 (0.23 g)。LC-MS保留时间= 1.36 min; m/z = 423.2 [M+H]+. 柱: Acquity BEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 µ: 流速:0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min;检测: UV 220 nm。
中间体BB-8.3
向中间体BB-8.2 (0.230 g, 0.544 mmol)于二氧杂环己烷(91mL)中的搅拌溶液中添加4M HCl/二氧杂环己烷 (2 mL, 8 mmol)并将反应混合物在室温搅拌3 h。将反应混合物浓缩至干；残余物用10% NaHCO3水溶液 (15 mL)处理并用 EtOAc (3 x 10 mL)萃取。合并的有机层用盐水 (15 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩以得到为黄色液体的标题化合物 (0.16 g)。LC-MS保留时间 = 0.99 min; m/z =323.4 [M+H]+. 柱: Acquity BEH C8(2.1 x 50 mm) 1.7 µ: 流速: 0.5 mL/min; 流动相 A: 含0.1% TFA的水; 流动相 B:ACN; 2% B至98% B经1.0分钟, 然后在98% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min; 检测: UV220 nm。
中间体BB-8.4
在0℃下向中间体BB-8.3 (0.090 g, 0.28 mmol)和吡啶 (0.045 mL, 0.56 mmol)于DCM (2 mL)中的搅拌冷却溶液中添加氯甲酸苯酯(0.039 mL, 0.31 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (30 mL)稀释，用DCM (3 x 10 mL)萃取，合并的有机层用10% HCl溶液(15 mL)、盐水(15 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (4g Redisep® SiO2 柱, 用30 % EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色油状物的标题化合物 (0.08 g)。LC-MS保留时间 = 3.24 min; m/z = 443.2 [M+H]+.柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mMHCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100%B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速 1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-9.1
在-30℃下向5-(二-Boc-氨基)-2-氯吡啶 (4.00 g, 12.2 mmol)于THF (200 mL)和NMP (58.5 mL, 608 mmol)中的搅拌溶液中添加乙酰丙酮铁(III) (2.58 g, 7.30 mmol)，接着添加异丙基氯化镁 (85 mL, 170 mmol)，并使反应混合物温热至0℃并搅拌1h。反应混合物用饱和NH4Cl溶液 (100 mL)淬灭，用EtOAc (2 x 60 mL)萃取，合并的有机层用盐水(100 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (80g Redisep®SiO2 柱, 用10% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色固体的标题化合物(2.2 g)。LC-MS保留时间 = 2.38 min; m/z = 237.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-9.2
在0℃下向中间体BB-9.1 (0.500 g, 2.12 mmol)于DMF (5 mL)中的搅拌溶液中添加NaH (0.127 g, 60%，于矿物油中, 3.17 mmol)并搅拌10 min。在0℃下添加碘甲烷(0.265mL, 4.23 mmol)并将反应混合物在室温下进一步搅拌16 h。反应混合物用冰冷的NH4Cl饱和溶液 (50 mL)稀释并用EtOAc (2 x 50 mL)萃取。合并的有机层用盐水 (75 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (24 g Redisep® SiO2 柱, 用10% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为无色液体的标题化合物(0.45 g)。LC-MS保留时间 =2.76 min; m/z = 251.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min;检测: UV 220 nm。
中间体BB-9.3
将HCl/二氧杂环己烷 (2.0 mL, 65.8 mmol, 4M溶液)添加到中间体BB-9.2 (0.45 g,1.8 mmol)中并将反应混合物在室温搅拌 2 h。将粗反应混合物浓缩至干，用饱和NaHCO3水溶液(25 mL)碱化并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩以得到为浅黄色胶状固体的标题化合物(0.26 g)，其不经进一步提纯即用于下一步骤。LC-MS保留时间 = 1.92 min; m/z = 151.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经 4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-9.4
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (450 mg, 1.49 mmol)和中间体BB-9.3 (224 mg, 1.49 mmol)于DMF (4 mL)中的搅拌溶液中添加HATU (1136 mg,2.99 mmol)和DIPEA (0.058 mL, 0.33 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释，用EtOAc (2 x 25 mL)萃取，合并的有机层用盐水(50 mL))洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱，用30%EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为褐色固体的标题化合物 (0.26 g)。LC-MS保留时间 =3.19 min; m/z = 434.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4 的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B 经 4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min;检测: UV 220 nm。
中间体BB-9.5
将HCl/二氧杂环己烷 (5.0 mL, 165 mmol, 4M溶液)添加到中间体BB-9.4 (0.26 g,0.6 mmol)中并将反应混合物在室温搅拌2 h。将粗反应混合物浓缩至干；残余物用饱和NaHCO3水溶液(25 mL)碱化并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱, 用2% MeOH/氯仿洗脱)提纯以得到为褐色固体的标题化合物 (0.2 g)。LC-MS保留时间 = 2.16 min; m/z =334.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A:含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4 的2%水/ 98% ACN; 20%B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-9.6
在0℃下向中间体BB-9.5 (100 mg, 0.3 mmol)和吡啶 (0.036 mL, 0.45 mmol)于DCM(5 mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苯酯 (0.042 mL, 0.33 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释并用DCM (2 x 25 mL)萃取。合并的有机层用1.5NHCl溶液 (40 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (12 gRedisep® SiO2 柱, 用50% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色固体的标题化合物(100 mg)。LC-MS保留时间 = 3.31 min; m/z = 454.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18,75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-10.1
向甲醇钠 (2.176 g, 10.07 mmol)于甲醇(5 mL)中的悬浮液中添加5-甲氧基吡啶-3-胺 (0.250 g, 2.01 mmol)并搅拌15min。将所得溶液倒入多聚甲醛 (0.085 g, 2.82mmol)于甲醇(5 mL)中的悬浮液中并将反应混合物在室温搅拌16 h。添加NaBH4 (0.114 g,3.02 mmol)并将反应混合物搅拌2 h。将反应混合物浓缩，残余物用冰冷水 (30 mL)稀释并用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱, 用2% MeOH/氯仿洗脱)提纯以得到为浅黄色固体的标题化合物(0.24 g)。LC-MS保留时间 = 1.02 min; m/z = 139.2 [M+H]+. 柱:KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-10.2
向中间体BB-10.1 (92 mg, 0.66 mmol)和(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (200 mg, 0.664 mmol)于DMF (4 mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA (0.058mL, 0.33 mmol)和HATU (505 mg, 1.33 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水(25 mL)稀释并用EtOAc (3x10 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过 combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱, 用40% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为褐色固体的标题化合物 (105 mg)。LC-MS保留时间 = 2.72 min; m/z = 422.2[M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经 4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-10.3
将HCl/二氧杂环己烷 (5.0 mL, 17 mmol, 4M溶液)添加到中间体BB-10.2 (260 mg,0.617 mmol)中并将反应混合物在室温搅拌2 h。将反应混合物浓缩至干；残余物用饱和NaHCO3水溶液(25 mL)碱化并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱, 用2% MeOH/氯仿洗脱) 提纯以得到为褐色胶状固体的标题化合物 (0.2 g)。LC-MS保留时间 = 1.55 min; m/z = 322.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN;20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-10.4
在0℃下向中间体BB-10.3 (100 mg, 0.311 mmol)和吡啶 (0.038 mL, 0.47 mmol)于DCM (5 mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苯酯 (0.043 mL, 0.342 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL) 稀释并用DCM (2 x 25 mL)萃取。合并的有机层用1.5N HCl 溶液 (40 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物用combiflash色谱法(12 g Redisep® SiO2 柱, 用50% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色固体的标题化合物(100 mg)。LC-MS保留时间 = 2.98 min; m/z = 442.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4 的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-11.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (250 mg, 0.83 mmol)于DCM (5 mL)中的搅拌溶液中添加3-氟-N,5-二甲基苯胺 (155 mg, 0.996 mmol)、N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氢喹啉 (226 mg, 0.913 mmol)并将反应混合物在室温搅拌 16 h。将反应混合物浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (40 g Redisep® SiO2 柱, 用20 %EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (0.25 g)。LC-MS保留时间 =1.46 min; m/z = 439.2 [M+H]+. 柱: Acquity BEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 µ: 流速:0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在90% B保持0.6分钟，流速0.5 mL/min;检测: UV 220 nm。
中间体BB-11.2
向中间体BB-11.1 (250 mg, 0.57 mmol)于DCM (10 mL)中的搅拌溶液中添加HCl/二氧杂环己烷 (0.15 mL, 0.57 mmol, 4M于二氧杂环己烷中)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩至干；残余物用正己烷(2 x 25 mL)研磨以得到为灰白色固体的标题化合物(0.210 g)。LC-MS保留时间 = 3.13 min; m/z = 339.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18,75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟， 流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-11.3
在0℃下向中间体BB-11.2 (100 mg, 0.295 mmol)和吡啶 (0.05 mL, 0.6 mmol)于DCM (5 mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苯酯 (0.050 mL, 0.36 mmol)并将反应混合物在室温下搅拌16 h。反应混合物用水 (20 mL)稀释并用DCM (2 x 20 mL)萃取。合并的有机层用1.5N HCl 溶液 (25 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (4g Redisep® SiO2 柱, 用30% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (110 mg)。LC-MS保留时间 = 3.48 min; m/z = 459.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 0.7 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的 2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100%B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-12.1
在0℃下向中间体GW-8.1 (0.25 g, 0.755 mmol)、3-氨基-6-氯苯腈 (0.138 g,0.906 mmol) 和吡啶 (0.366 mL, 4.53 mmol)于DCM (8 mL)中的搅拌溶液中添加 POCl3(0.211 mL, 2.26 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用10%NaHCO3 水溶液(25 mL)稀释并用DCM (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (24 g Redisep® SiO2 柱, 用25% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为黄色固体的标题化合物(0.275 g)。LC-MS保留时间 = 3.32 min; m/z = 466.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mMHCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4 的2%水/ 98% ACN; 20% B至100%B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-12.2
在0℃下向中间体BB-12.1 (0.25 g, 0.54 mmol) 于DMF (8 mL)中的搅拌溶液中逐份添加 NaH (0.026 g, 60%，于矿物油中, 0.64 mmol) 并搅拌10 min。在0℃下添加碘甲烷(0.05 mL, 0.805 mmol)并在室温下进一步搅拌6 h。反应混合物用冰冷饱和 NH4Cl水溶液(50 mL)稀释并用EtOAc (2 x 50 mL)萃取。合并的有机层用盐水(75 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法(24 g Redisep® SiO2 柱, 用25%EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色固体的标题化合物 (0.175 g)。LC-MS保留时间 =2.88 min; m/z = 480.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min;检测: UV 220 nm。
中间体BB-12.3
向密封管中的中间体BB-12.2 (0.175 g, 0.365 mmol)于乙醇(4 mL)中的搅拌溶液中添加40%甲胺水溶液 (0.227 mL,1.82 mmol)并将所得反应混合物在65℃下搅拌16 h。在减压下浓缩反应混合物；残余物用水 (25 mL)稀释并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱,用3% MeOH/氯仿洗脱)提纯以得到为黄色固体的标题化合物 (80 mg)。LC-MS保留时间 =1.04 min; m/z = 350.2 [M+H]+. 柱: Acquity BEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 µ: 流速:0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B 经1.1分钟，然后在90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-12.4
在0℃下向中间体BB-12.3 (75 mg, 0.21 mmol)和吡啶 (0.035 mL, 0.43 mmol)于DCM (4 mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苯酯 (0.03 mL, 0.236 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水(20 mL)稀释并用DCM (2 x 20 mL)萃取。合并的有机层用1.5N HCl溶液 (25 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (4gRedisep® SiO2 柱, 用25% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(33 mg)。LC-MS保留时间 = 2.9 min; m/z = 470.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-13
向2-(4-氨基苯基)乙醇 (1 g, 7.29 mmol)于EtOAc (15 mL)中的溶液中添加 Boc-酸酐 (1.862 mL, 8.02 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物在减压下蒸发并用己烷 (30 mL)研磨以得到为白色固体的标题化合物 (1.65 g)。LC-MS保留时间 = 1.84min; m/z = 238.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min;流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98%ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV220 nm。
中间体BB-14.1
在-78℃下向草酰氯 (0.83 mL, 9.4 mmol)于DCM (15 mL)中的搅拌溶液中添加DMSO(1.84 mL, 26 mmol)，然后添加中间体BB-13 (1.4 g, 5.9 mmol)/DCM (10 mL)并在相同温度下搅拌2h，然后使其缓慢温热至室温并用TEA (4.11 mL, 29.5 mmol)淬灭。反应混合物用饱和 NH4Cl溶液 (150 mL)稀释，用DCM (2 x 75 mL)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。在0℃将粗醛溶解于DCM (20 mL)并添加DAST (1.559 mL, 11.80 mmol)，在室温搅拌30min。反应混合物用冰水 (100 mL)淬灭，用EtOAc (2 x 100 mL)萃取，用盐水 (75 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (24 g Redisep® SiO2 柱,用12% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为无色液体的标题化合物 (0.56 g)。LC-MS保留时间 = 2.85 min; m/z = 256.2 [M-H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速:1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-14.2
向中间体BB-14.1 (470 mg, 1.83 mmol)于DMF (10 mL) 中的搅拌溶液中添加NaH(110 mg, 2.74 mmol, 60%，于矿物油中)并在0℃下搅拌15min。添加碘甲烷(0.171 mL,2.74 mmol)并在室温下继续搅拌30 min。反应混合物用饱和NH4Cl溶液(50 mL)稀释并用EtOAc (2 x 50 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩以得到为浅黄色液体的标题化合物(0.38 g)，其不经进一步提纯即用于下一步骤。LC-MS保留时间 = 1.25 min;m/z = 216 [M-异丁烯+H]+. 柱: Acquity BEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 µ: 流速: 0.5mL/min; 流动相 A: 含10 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含10 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min;检测: UV 220 nm。
中间体BB-14.3
将HCl/二氧杂环己烷 (4M溶液, 5 mL, 20 mmol)添加到中间体BB-14.2 (550 mg,2.03 mmol)中并将反应混合物在室温搅拌2 h。将粗反应混合物浓缩至干；残余物用饱和NaHCO3水溶液(25 mL)碱化并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩以得到为浅黄色液体的标题化合物(0.26 g)，其不经进一步提纯即用于下一步骤。LC-MS保留时间 = 2.74 min; m/z = 172.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm,2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B:含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经 4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-14.4
向中间体BB-14.3 (200 mg, 1.17 mmol)、 (S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (352 mg, 1.17 mmol)于DMF (5 mL)中的搅拌溶液中添加HATU (888 mg,2.34 mmol)、DIPEA (1.020 mL, 5.84 mmol)并将反应混合物在室温搅拌3 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释，用EtOAc (2 x 25 mL)萃取，合并的有机层用盐水(50 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱, 用28%EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色液体的标题化合物 (0.38 g)。LC-MS保留时间 =2.48 min; m/z = 399.2 [M-异丁烯+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mMHCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-14.5
将HCl/二氧杂环己烷 (4M溶液, 0.125 mL, 4.18 mmol)添加到中间体BB-14.4 (380mg, 0.836 mmol)/DCM (10 mL)中并在室温搅拌2 h。将粗反应混合物浓缩至干；残余物用饱和NaHCO3水溶液(25 mL)碱化并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱, 用2%MeOH/氯仿洗脱)提纯以得到为褐色固体的标题化合物(0.25 g)。LC-MS保留时间 = 2.95min; m/z = 355.2 [M+H]+ (Agilent 6330 Ion Trap). 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm,2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4 的水; 流动相 B: ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-14.6
在0℃下向中间体BB-14.5 (200 mg, 0.564 mmol) 于DCM (10 mL) 中的搅拌溶液中添加吡啶 (0.228 mL, 2.82 mmol)和氯甲酸苯酯(0.106 mL, 0.677 mmol)并使反应混合物在室温下搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释并用DCM (2 x 25 mL)萃取。合并的有机层用1.5N HCl溶液(40 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱, 用15% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色固体的标题化合物(260 mg)。LC-MS保留时间 = 3.34 min; m/z = 475.2 [M+H]+. 柱: KINETIXXB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-15.1
向1-(苯基磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-甲酸 (3.60 g, 11.9 mmol) 于DMF(30 mL)中的搅拌溶液中添加 DIPEA (6.24 mL, 35.7 mmol)、HATU (6.79 g, 17.8 mmol)和二甲胺 (8.9 mL, 17.8 mmol)。将所得反应混合物在室温下搅拌16 h。将反应混合物倒入冰水 (50 mL)中并用乙酸乙酯 (3 x 30 mL)萃取，有机层用水(3 x 50 mL)、盐水 (2 x30 mL)洗涤。合并的有机层经Na2SO4干燥并浓缩以得到为灰白色固体的标题化合物 (4 g)。LC-MS保留时间 = 0.64 min; m/z = 330.4 [M+H]+. 柱: ACQUITY BEH C8 (2.1 x 50mm)1.7 µ: 流速: 0.7 mL/min; 流动相 A: 含0.1% TFA的水; 流动相 B: 含0.1% TFA的ACN;2% B至98% B经1.0 min., 然后在98% B保持0.6分钟，流速 0.7 ml/min; 检测: UV 220nm。
中间体BB-15.2
N,N-二甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-甲酰胺
向中间体BB-15.1 (4.00 g, 12.1 mmol)于THF (40 mL)中的搅拌溶液中添加叔丁醇钾(12.1 mL, 12.1 mmol. 1.0 M)并搅拌1h。过滤反应混合物，用乙醚洗涤以得到为灰白色固体的标题化合物 (2.4 g)。LC-MS保留时间 = 0.43 min; m/z =190.2 [M+H]+. 柱:Acquity BEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 µ: 流速: 0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-16.1
向N,N-二甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-甲酰胺 (2.4g, 12.68 mmol)于乙腈 (25mL)中的搅拌溶液中添加4-二甲基氨基吡啶 (0.155 g, 1.27 mmol)、Boc2O (4.42 mL,19.03 mmol)并搅拌16 h。在减压下浓缩反应混合物以得到粗化合物，将其溶于乙酸乙酯(50 mL)，有机层用水 (2x30 mL)、饱和NH4Cl (2x40 mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩以得到为黄色固体的标题化合物 (1.3 g)。LC-MS保留时间 = 0.83 min; m/z =290.2 [M+H]+.柱: Acquity BEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 µ: 流速: 0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mMNH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-16.2
在惰性气氛下向中间体BB-16.1 (800 mg, 2.77 mmol)于乙醇(10 mL)中的搅拌溶液中添加10%钯/碳(400 mg, 0.376 mmol)，然后在氢气囊压力下搅拌16 h。将反应物浓缩至干，粗产物通过 combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱, 用0-10% MeOH/DCM洗脱)提纯以得到标题化合物 (600 mg)。LC-MS保留时间 = 0.66 min; m/z =292.2 [M+H]+.柱: Acquity BEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 µ: 流速: 0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mMNH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在 90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-16.3
向中间体BB-16.2 (600 mg, 2.06 mmol)于二氧杂环己烷 (5 mL)中的溶液中添加4M盐酸/1,4-二氧杂环己烷 (2.57 mL, 10.3 mmol)并将所得溶液在室温下搅拌2 h。在减压下浓缩反应混合物以得到为灰白色固体的中间体BB-16.3, 盐酸盐 (500 mg)。LC-MS保留时间 = 0.49 min; m/z =192.1 [M+H]+. 柱: Acquity BEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 µ:流速: 0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mMNH4OAc 的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在90% B保持0.6分钟，流速0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-16.4
向叔丁醇 (0.25 mL, 2.6 mmol) 于DCM (5 mL)中的搅拌溶液中添加氯磺酰异氰酸酯(0.23 mL, 2.6 mmol)于DCM (5 mL)中的溶液并搅拌1 h。然后将中间体BB-16.3, 盐酸盐(500 mg, 2.61 mmol)和TEA (1.09 mL, 7.84 mmol)于DCM (5 mL)中的溶液添加到上述搅拌的反应混合物中并进一步在0℃下搅拌1h，然后在室温下搅拌16 h。反应混合物然后用水(20 mL)稀释并用 DCM (3 X 25 mL)萃取。合并的有机层用10%NaHCO3水溶液(25 mL)、水(25 mL)、盐水(25 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法(12g Redisep® SiO2 柱, 用0-10% MeOH/CHCl3洗脱)提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(0.5 g)。LC-MS保留时间 = 0.48 min; m/z = 371.3 [M+H]+. 柱: Acquity BEH C8 (2.1x 50 mm) 1.7 µ: 流速: 0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-16.5
向中间体BB-16.4 (500 mg, 1.35 mmol)于DCM (10 mL)中的搅拌溶液中添加HCl/二氧杂环己烷 (4M, 0.34 mL, 1.4 mmol)并将反应混合物在室温搅拌1h。将反应混合物浓缩至干，残余物用己烷 (2 x 25 mL)研磨以得到为灰白色固体的标题化合物 (0.4 g)。LC-MS保留时间 = 0.65 min; m/z = 271.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm;流速: 0.7 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含5 mMNH4OAc的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B 经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-17.1
向压力管中的7-溴喹唑啉 (0.500 g, 2.39 mmol) 和甲胺(7.00 mL, 2.39 mmol)的溶液中添加CuI (0.046 g, 0.24 mmol)并将反应容器密封，在100℃下搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释并用EtOAc (3 x 25 mL)萃取。合并的有机层用水 (50 mL)、盐水(50mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep®SiO2 柱, 用70% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅绿色固体的标题化合物(0.12 g)。LC-MS保留时间 = 1.24 min; m/z = 160.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm,2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B:含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-17.2
在0℃下向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.300 g, 0.996mmol)于DMF (3 mL)中的溶液中添加DIPEA (0.52 mL, 3 mmol)和HATU (0.757 g, 2mmol)并搅拌5 min。添加中间体BB-17.1 (0.174 g, 1.1 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (30 mL)稀释，用EtOAc (3 x 30 mL)萃取，合并的有机层用水(30 mL)、盐水(30 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤和浓缩。粗产物通过combiflash色谱法(12 g Redisep® SiO2 柱, 用50% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色油状物的标题化合物 (0.25 g)。LC-MS保留时间 = 2.77 min; m/z = 443.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-17.3
向中间体BB-17.2 (0.10 g, 0.23 mmol)于二氧杂环己烷 (0.5 mL)中的溶液中添加4M HCl/二氧杂环己烷 (1 mL, 4 mmol)并将反应混合物在室温搅拌3 h。将反应混合物浓缩至干；残余物用10 %NaHCO3水溶液(15 mL)碱化并用EtOAc (3x 10 mL)萃取。合并的有机层用水 (15 mL)、盐水 (15 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩以得到为浅黄色油状物的标题化合物(50 mg)。LC-MS保留时间 = 0.56 min; m/z = 343.2 [M+H]+. 柱: AcquityBEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7 µ: 流速: 0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的水:ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-17.4
在0℃下向中间体BB-17.3 (0.1 g, 0.292 mmol)和吡啶 (0.047 mL, 0.584 mmol)于DCM (2 mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苯酯(0.040 mL, 0.321 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (20 mL)稀释并用DCM (3 x 20 mL)萃取。合并的有机层用1.5N HCl 溶液 (15 mL)、水 (15 mL)、盐水 (15 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (4g Redisep® SiO2 柱, 用4% MeOH/CHCl3洗脱)提纯以得到为浅黄色油状物的标题化合物 (0.1 g)。LC-MS保留时间 = 2.99 min; m/z = 463.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mMHCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100%B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-18.1
向中间体GW-8.1 (1.0 g, 3.0 mmol)、HATU (1.4g, 3.6 mmol)和DIPEA (1.3 mL,7.5 mmol)于DMF (20 mL)中的溶液中添加4-甲氧基苯胺 (0.4g, 3.3 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。将反应物淬灭至水 (50 mL)中，用EtOAc (2 x 30 mL)萃取，合并的有机层用水 (50 mL)、盐水(50 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (40 g Redisep® SiO2 柱, 用40-45% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为无色液体的标题化合物 (1.0 g)。LC-MS保留时间 = 1.16 min; m/z = 437.4 [M+H]+. 柱:XBridge BEH C18 (2.1 x 50mm) 2.5 µ: 流速: 0.5 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 20% B至90% B经1.1分钟，然后在90% B保持0.6分钟，流速 0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-18.2
向中间体BB-18.1 (500 mg, 1.5 mmol)于甲苯 (5 mL)中的溶液中添加环丙基硼酸(197 mg, 2.30 mmol)、碳酸铯(187 mg, 0.57 mmol)、二乙酰氧基铜.H2O (208 mg, 1.15mmol)、吡啶 (0.3 mL, 3.44 mmol)并将所得反应混合物在90℃在氧气囊下搅拌36h。反应混合物淬灭至水 (50 mL)中，用EtOAc (2 x 30 mL)萃取，合并的有机层用水 (50 mL)、盐水(50 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过 combiflash 色谱法 (24 gRedisep® SiO2 柱, 用40-50 % EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色固体的标题化合物 (0.5 g)。LC-MS保留时间 =1.58 min; m/z = 477.5 [M+H]+. 柱: ACQUITY BEH C18(2.1 x 50mm) 1.7 µ: 流速: 0.7 mL/min; 流动相 A: 含0.1% TFA的水; 流动相 B: 含1% TFA的ACN; 2% B至98% B经1.0分钟，然后在98% B保持0.6分钟，流速 0.7 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-18.3
向中间体BB-18.2 (500 mg, 1.05 mmol)于乙醇(20 mL)中的溶液中添加一水合肼(525 mg, 10.49 mmol)并将所得溶液加热至90℃并搅拌4h。将反应混合物冷却至 RT，滤除沉淀出的固体，浓缩滤液以得到粗产物，其用正己烷研磨、过滤并真空干燥以得到为浅黄色固体的标题化合物 (0.5 g)。LC-MS保留时间 =1.04 min; m/z = 347.5 [M+H]+. 柱:ACQUITY BEH C18 (2.1 x 50mm) 1.7 µ: 流速: 0.7 mL/min; 流动相 A: 含0.1% TFA的水; 流动相 B: 含.1% TFA的ACN; 2% B至98% B经1.0分钟，然后在98% B保持0.6分钟，流速 0.7 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-18.4
向中间体BB-18.3 (350 mg, 1.01 mmol)于DCM (20 mL)中的溶液中添加吡啶 (0.25mL, 3.03 mmol)、接着添加氯甲酸苯酯(190 mg, 1.21 mmol)并在室温搅拌16 h。将反应混合物浓缩，粗产物用冰冷水淬灭以得到固体产物，将其过滤，干燥，用正己烷研磨以得到为浅黄色固体的标题化合物(250 mg)。LC-MS保留时间=1.12 min; m/z = 467.5 [M+H]+.柱: ACQUITY BEH C18 (2.1 x 50mm) 1.7 µ: 流速: 0.7 mL/min; 流动相 A: 含0.1%TFA的水; 流动相 B: ACN; 2% B至98% B经1.0分钟，然后在98% B保持0.6分钟，流速 0.7mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-19.1
在0℃下经10分钟向苯并[d]噻唑-5-胺 (250 mg, 1.66 mmol)于乙腈 (5 mL)中的搅拌溶液中逐份添加K2CO3 (276 mg, 2.00 mmol)并将反应混合物在65℃加热30 min。然后使温度达到30℃，加入 ((2-溴乙氧基)甲基)苯 (0.290 mL, 1.83 mmol)并将所得反应混合物回流24h。将反应混合物浓缩至干；粗物质溶于水 (30 mL)，用乙醚 (2 x 30 mL)洗涤以除去有机杂质，水层用1.5N HCl中和至pH 7并用乙醚(3 x 50 mL)萃取。合并的有机层用水(30 mL)、盐水 (30 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过硅胶色谱法 (24 gRedisep® 柱, 用30% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅褐色固体的标题化合物 (285mg)。LC-MS保留时间 = 2.56 min; m/z = 285.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm,2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B:含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-19.2
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (500 mg, 1.66 mmol)于DMF (2.5 mL)中的搅拌溶液中添加HATU (947 mg, 2.49 mmol)、DIPEA (0.870 mL, 4.98mmol)并将反应混合物在室温搅拌15 min。然后添加中间体BB-19.1 (519 mg, 1.83 mmol)并将反应混合物搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL) 稀释并用DCM (2 x 20 mL)萃取。合并的有机层用1.5N HCl溶液(25 mL)、水 (25 mL)、盐水 (25 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过硅胶色谱法 (24 g Redisep® 柱, 用30% EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅褐色固体的标题化合物(825 mg)。LC-MS保留时间 = 3.71min; m/z = 568.2[M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-19.3
向中间体BB-19.2 (300 mg, 0.528 mmol)于DCM (5 mL)中的搅拌溶液中添加4M HCl/二氧杂环己烷 (0.661 mL, 2.64 mmol)并在室温搅拌16 h。将反应混合物浓缩至干；残余物用乙醚 (3 x 50 mL)研磨，使所得固体沉降，轻轻倒出上清液以得到为褐色固体的标题化合物的HCl盐(245 mg)。LC-MS保留时间 = 2.68 min; m/z = 468.2 [M+H]+. 柱:KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-19.4
在0℃下向中间体BB-19.3盐酸盐 (0.12 g, 0.24 mmol)和吡啶 (0.039 mL, 0.48mmol)于DCM (2 mL)中的搅拌冷却溶液中添加氯甲酸苯酯 (0.034 mL, 0.26 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (30 mL)稀释并用DCM (3 X 10 mL)萃取。合并的有机层用1.5N HCl溶液 (15 mL)、盐水(15 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (4 g Redisep® SiO2 柱, 用30 % EtOAc/正己烷洗脱) 提纯以得到为浅黄色油状物的标题化合物(85mg)。LC-MS保留时间 = 3.38 min; m/z = 588.2[M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mMHCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100%B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速 1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-20.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (3.13 g, 10.4 mmol)和4-(二氟甲氧基)-N-甲基苯胺 (1.20 g, 6.93 mmol)于DCM (25 mL)中的搅拌溶液中添加 N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氢喹啉 (5.14 g, 20.8 mmol)，将反应混合物在室温搅拌16h。将反应混合物浓缩至干，粗产物通过combiflash色谱法 (24 g Redisep® SiO2 柱, 用10 % EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为无色胶状固体的标题化合物(2.3 g)。LC-MS保留时间 = 3.13 min; m/z = 457.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速:1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速 1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-20.2
将HCl/二氧杂环己烷 (4M溶液, 16.1 mL, 46 mmol) 添加到中间体BB-20.1 (2.10g, 4.60 mmol)中并将反应混合物在室温搅拌2 h。将粗反应混合物浓缩至干；残余物用饱和 NaHCO3水溶液(50 mL)碱化并用EtOAc (2 x 50 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过combiflash色谱法 (24 g Redisep® SiO2 柱, 用2 %MeOH/氯仿洗脱)提纯以得到为褐色胶状固体的标题化合物 (1.3 g)。LC-MS保留时间 =2.30 min; m/z = 357.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4 的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速 1.5 mL/min;检测: UV 220 nm。
中间体BB-20.3
在0℃下向中间体BB-20.2 (1.30 g, 3.65 mmol)和吡啶 (0.443 mL, 5.47 mmol)于DCM (15 mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苯酯(0.551 mL, 4.38 mmol)并将反应混合物在室温下搅拌16 h。反应混合物用水 (50 mL)稀释并用DCM (2 x 50 mL)萃取。合并的有机层用1.5N HCl 溶液 (50 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (24 g Redisep® SiO2 柱, 用50 % EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色固体的标题化合物 (1.3 g)。LC-MS保留时间 = 2.83 min; m/z = 477.2 [M+H]+. 柱: KINETIXXB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4 的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min，然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-21.1
在0℃下向(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯 (1.00 g, 4.46mmol)于DMF (10 mL)中的搅拌溶液中逐份添加60% NaH (0.446 g, 11.2 mmol, 矿物油中的分散体)并将反应混合物在室温搅拌20 min。在相同温度下逐滴添加碘甲烷(0.418 mL,6.69 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (50 mL)稀释并用EtOAc (3x 30 mL)萃取。合并的有机层用水 (50 mL)、盐水(50 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩以得到为浅黄色油状物的标题化合物 (1g)。LC-MS保留时间 = 1.34 min; m/z = 239.2[M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10mM HCOONH4 的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B 经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-21.2
向中间体BB-21.1 (1.0 g, 4.2 mmol)于二氧杂环己烷 (2 mL)中的搅拌溶液中添加4M HCl/二氧杂环己烷 (6.0 mL, 4.2 mmol)并在室温下搅拌3 h。将反应混合物浓缩至干；残余物用乙醚(3 x 50 mL)研磨，使所得固体沉降，轻轻倒出上清液以得到为灰白色固体的标题化合物(0.5 g)。LC-MS保留时间 = 0.45 min; m/z = 139.2 [M+H]+. 柱: KINETIXXB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经 4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-21.3
在0℃下向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.250 g, 0.830mmol)于DMF (2 mL)中的搅拌溶液中添加HATU (0.38 g, 1 mmol)和DIPEA (0.73 mL, 4.2mmol)并将反应混合物搅拌30 min。将中间体BB-21.2 (0.17 g, 0.91 mmol)添加到反应混合物中并将其在室温下搅拌16 h。反应混合物用水 (20 mL)稀释并用EtOAc (3 x 25 mL)萃取。合并的有机层用10% NaHCO3溶液 (20 mL)、水 (25 mL)、盐水(25 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩以得到为深蓝色油状物的标题化合物(0.31 g)。LC-MS保留时间 =2.10 min; m/z = 422.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B 经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min;检测: UV 220 nm。
中间体BB-21.4
在0℃下向中间体BB-21.3 (0.30 g, 0.71 mmol)于二氧杂环己烷 (1 mL)中的搅拌溶液中添加4M HCl/二氧杂环己烷 (3.0 mL, 0.71 mmol)并将反应混合物在室温搅拌3 h。将反应混合物浓缩至干；残余物用乙醚(3 x 50 mL)研磨。使所得固体沉降，轻轻倒出上清液以得到为褐色固体的标题化合物(0.21 g)。LC-MS保留时间 = 0.92 min; m/z = 322.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mMHCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100%B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-22.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (4.46 g, 14.8 mmol)于DMF (100 mL)中的搅拌溶液中添加HATU (8.44 g, 22.2 mmol)、TEA (4.12 mL, 29.6mmol)并将反应混合物搅拌30 min。将N-甲基-4-乙基苯胺 (2.00 g, 14.8 mmol) 添加到上述反应混合物中并在室温下搅拌16 h。反应混合物然后用水 (50 mL)稀释并用EtOAc (3x 50 mL)萃取。合并的有机层用10%NaHCO3水溶液 (50 mL)、盐水 (50 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (40 g Redisep® SiO2 柱, 用0-15%EtOAc/己烷洗脱)提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (2.5 g)。LC-MS保留时间 = 3.7min; m/z = 419.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min;流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98%ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV220 nm。
中间体BB-22.2
向中间体BB-22.1 (4.0 g, 9.6 mmol) 于DCM (25 mL) 中的搅拌溶液中添加 HCl/二氧杂环己烷 (4M, 10 mL, 38.2 mmol)并将反应混合物在室温搅拌4 h。将反应混合物浓缩至干；残余物用己烷 (2 x 25 mL)研磨以得到为灰白色固体的标题化合物 (3.0 g)。LC-MS保留时间 = 1.03 min; m/z = 319.2 [M+H]+. 柱: Acquity BEH C8 (2.1 x 50 mm) 1.7µ: 流速: 0.8 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含5mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 5% B至99% B经1.1分钟，然后在95% B保持0.6分钟，流速0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-23.1
向4-吗啉代苯胺 (1.50 g, 8.42 mmol)于甲醇 (10 mL)中的溶液中添加甲醇钠(2.20 mL, 10.1 mmol)、多聚甲醛(0.278 g, 9.26 mmol)并将反应混合物在室温下搅拌10h。向该搅拌的反应混合物中添加硼氢化钠(0.480 g, 12.6 mmol)并在室温下进一步搅拌2h。反应混合物用饱和NH4Cl水溶液 (50 mL)稀释并用EtOAc (2 x 50 mL)萃取。合并的有机层用盐水(75 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩以得到为黑色固体的标题化合物(1.3g)。LC-MS保留时间 = 0.99 min; m/z = 193.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相B: 含10 mM HCOONH4的 2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-23.2
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (2.59 g, 8.58 mmol)于DMF (20 mL)中的搅拌溶液中添加中间体BB-23.1 (1.50 g, 7.80 mmol)、HATU (4.45 g,11.70 mmol)，接着添加DIPEA (6.81 mL, 39.0 mmol)，并将反应混合物在室温搅拌3 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释，用EtOAc (2 x 25 mL)萃取，合并的有机层用盐水(50 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩以得到为褐色固体的标题化合物(2.5 g)。将该粗产物不经任何进一步提纯即用于下一反应。LC-MS保留时间 = 2.8 min; m/z = 476.2 [M+H]+. 柱:KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-23.3
将HCl/二氧杂环己烷 (4M溶液, 13.0 mL, 52.6 mmol) 添加到中间体BB-23.2 (2.5g, 5.3 mmol) 中并将反应混合物在室温搅拌2 h。将粗反应混合物浓缩至干；用饱和NaHCO3水溶液(25 mL)碱化并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩以得到为浅红色液体的标题化合物(1.2 g)。LC-MS保留时间 = 1.93 min; m/z =376.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A:含10 mM HCOONH4 的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20%B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-24
向4-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (3.5 g, 23 mmol)于MeOH (30 mL)中的溶液中添加Raney-Ni (9 g)并将反应混合物在50 psi 氢压下在70℃下搅拌6 h。经硅藻土垫过滤反应混合物，用甲醇(50 mL)洗涤，收集合并的滤液，在减压下蒸发，粗产物通过combiflash色谱法 (40 g Redisep® SiO2 柱, 用0-15% EtOAc/己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色固体的标题化合物 (1 g)。LC-MS保留时间 = 2.38 min; m/z = 155.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-25.1
在0℃下向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (0.250 g, 0.830mmol)于DMF (2 mL)中的搅拌溶液中添加HATU (0.379 g, 0.996 mmol)和DIPEA (0.725mL, 4.15 mmol)并将反应混合物搅拌30 min。加入4-(甲基氨基)苯甲酰胺 (0.125 g,0.83 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (20 mL)稀释并用EtOAc (3x 25 mL)萃取。合并的有机层用10% NaHCO3水溶液 (25 mL)、水 (25 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过combiflash色谱法 (12 g Redisep® SiO2 柱, 用2.5%MeOH/CHCl3洗脱)提纯以得到为浅黄色油状物的标题化合物 (0.08g)。LC-MS保留时间 =2.19 min; m/z = 434.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B 经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min;检测: UV 220 nm。
中间体BB-25.2
在0℃下向中间体BB-25.1 (0.080 g, 0.19 mmol)于二氧杂环己烷 (1 mL)中的搅拌溶液中添加4M HCl/二氧杂环己烷 (1 mL, 4 mmol)并将反应混合物在室温搅拌3 h。然后将反应混合物浓缩至干；残余物用冷乙醚(3 x 30 mL)研磨。使所得固体沉降并轻轻倒出上清液。固体产物与甲苯 (2 x 20 mL)共沸以得到为黄色固体的标题化合物 (0.04g) 。LC-MS保留时间 = 0.34 min; m/z = 334.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-26.1
向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯基丙酸 (1.39 g, 5.23 mmol)于DCM (30 mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-N,3-二甲基苯胺 (0.74 g, 4.8 mmol) 和N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氢喹啉 (1.29 g, 5.23 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。将反应混合物浓缩至干，粗产物通过combiflash色谱法 (40 g Redisep® SiO2 柱, 用30 % EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为浅黄色油状物的标题化合物(1.8 g)。LC-MS保留时间 = 3.28min; m/z =403.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min;流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98%ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV220 nm。
中间体BB-26.2
向中间体BB-26.1 (1.8 g, 4.5 mmol)于二氧杂环己烷 (5 mL)中的搅拌溶液中添加4M HCl/二氧杂环己烷 (8 mL, 32 mmol)并将反应混合物在室温搅拌3 h。将反应混合物浓缩至干；残余物用乙醚 (30 mL)研磨，过滤固体产物，用己烷洗涤并真空干燥以得到为灰白色固体的标题产物 (0.74g)。LC-MS保留时间 = 2.52 min; m/z =303.2 [M+H]+. 柱:KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4 的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
中间体BB-27.1
在0℃下在氮压力下向2-甲基丙-2-醇 (0.671 mL, 7.07 mmol)于DCM (10 mL)中的搅拌溶液中添加氯磺酰异氰酸酯(0.617 mL, 7.07 mmol)，接着添加二乙胺 (0.731 mL,7.07 mmol)和三乙胺 (2.95 mL, 21.2 mmol)于DCM (5 mL)中的混合物并将所得溶液在室温下搅拌30min。反应混合物用DCM (20 mL)稀释，用水 (20 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩以得到为无色液体的标题化合物(1.7 g)。
中间体BB-27.2
向中间体BB-27.1 (1.7 g, 7.93 mmol)于DCM (20 mL)中的搅拌溶液中添加TFA(1.832 mL, 23.78 mmol)并在室温下进一步搅拌1 h。反应混合物在减压下浓缩以得到为油腻液体的标题化合物的TFA盐 (1.8g)。
中间体BB-28.1
将HATU (1.39 g, 3.65 mmol) 添加到(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸 (1.00 g, 3.32 mmol)、4-甲氧基-N-甲基苯胺 (0.455 g, 3.32 mmol)和N,N-二异丙基乙胺 (1.16 mL, 6.64 mmol)于DMF (35 mL)中的搅拌溶液中并将反应混合物在rt搅拌过夜（ON）。在高真空下浓缩反应物以得到为粘性油的标题化合物 (1.39 g)。LC-MS保留时间 = 3.95 min; m/z = 443.11 [M+Na]+; (柱: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0 mm3 μm；溶剂A = 90%水 : 10% MeOH : 0.1% TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH : 0.1% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟。柱温 = 40℃；波长 = 220 nm)。
中间体BB-28.2
将中间体BB-28.1 (1.39 g, 3.31 mmol) 于4M HCl/二氧杂环己烷 (50 mL) 中的溶液在~25℃搅拌1 h。然后在真空下浓缩反应混合物以得到为灰色固体的标题化合物的HCl盐(1.18 g)。LC-MS保留时间 = 2.98 min; m/z = 321.1 [M+H]+。(柱: Phenomenex Luna50 X 2.0 mm 3 μm；溶剂A = 90%水 : 10% MeOH : 0.1% TFA；溶剂B = 10%水 : 90% MeOH: 0.1% TFA；流速 = 0.8 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 4分钟, 然后在100% B保持1分钟；波长 = 220 nm)。
中间体BB-28.3
将中间体BB-28.2 盐酸盐 (250 mg, 0.701 mmol)溶于DCM (10 mL)，冷却至0℃，然后逐滴添加吡啶 (0.085 mL, 1.1 mmol)。然后用氯甲酸苯酯 (0.11 mL, 0.84 mmol)处理反应混合物并在0℃搅拌2 h。反应混合物用冰H2O稀释并用EtOAc(2 x 30 mL)萃取。将合并的有机组分干燥，过滤，浓缩并通过combiflash色谱法 (80 g SiO2 柱, 用20 % EtOAc/正己烷洗脱)提纯以得到为白色固体的标题化合物 (230 mg)。LC-MS保留时间 = 3.29 min; m/z = 441.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN;20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220nm。
实施例JB-1
在0℃下将中间体JB-2的HCl盐 (250 mg, 0.779 mmol)于DCM (~3 mL)中的溶液逐滴添加到氯磺酰异氰酸酯 (0.075 mL, 0.86 mmol)于DCM (1 mL)中的搅拌溶液中并将反应混合物在0℃搅拌1 h。然后经由注射器将一部分的该反应混合物(20%, ~0.8 mL)添加到吲哚啉 (46 mg, 0.39 mmol)于TEA (0.075 mL)和DCM (1 mL)中的搅拌溶液中并将反应在rt搅拌3 h。浓缩反应混合物，在EtOAc (~2 mL) 和1M HCl (1 mL) 之间分配，有机组分用盐水 (1 mL)洗涤并浓缩。残余物溶于MeOH，过滤并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(22.3 mg)。LC-MS保留时间 = 2.52 min; m/z = 509.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18,2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 :95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间= 3分钟, 然后在100% B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-2
使用上述对于实施例JB-1所述的程序用1,2,3,4-四氢喹啉替代吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-2。LC-MS保留时间 = 2.63 min; m/z = 523.2[M+H]+。(柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B= 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟, 然后在100% B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-3
使用上述对于实施例JB-1所述的程序用N-甲基苯胺替代吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例 JB-3。LC-MS保留时间 = 2.54 min; m/z = 497.2[M+H]+。(柱: Waters BEHC18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B =5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100% B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-4
使用上述对于实施例JB-1所述的程序用苯胺替代吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-4。LC-MS保留时间 = 2.39 min; m/z = 483.2[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100% B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-5
使用上述对于实施例JB-1所述的程序用2-氯苯胺替代吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-5。LC-MS保留时间 = 2.46 min; m/z = 517.7[M+H]+。(柱: Waters BEH C18,2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 :95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间= 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-6
使用上述对于实施例JB-1所述的程序用2-氯-N-甲基苯胺替代吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-6。LC-MS保留时间 = 1.82 min; m/z = 531.1[M+H]+。(柱: Waters BEHC18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-7
使用上述对于实施例JB-1所述的程序用1,2,3,4-四氢异喹啉, HCl替代吲哚啉作为最终胺输入和在最终步骤中再使用TEA (总共0.10 mL)来合成实施例JB-7。LC-MS保留时间 =1.87 min; m/z = 523.3[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 =0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-8
使用上述对于实施例JB-1所述的程序用3-苯基氮杂环丁烷,HCl替代吲哚啉作为最终胺输入和在最终步骤中再使用TEA (总共0.10 mL)来合成实施例JB-8。LC-MS保留时间 =1.91 min; m/z = 523.3[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 =0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-9
使用上述对于实施例JB-1所述的程序用2-氯-N-甲基苯胺替代吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-9。LC-MS保留时间 = 1.70 min; m/z = 557.4[M+H]+。(柱: Waters BEHC18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-10
在0℃下将中间体 JB-4 的HCl盐(210 mg, 0.555 mmol)于DCM (~2 mL)和DIPEA(0.20 mL, 1.2 mmol) 中的溶液逐滴添加到氯磺酰异氰酸酯 (0.075 mL, 0.86 mmol)于DCM (2 mL)中的搅拌溶液中并将反应混合物在0℃搅拌1h，然后用TEA (0.12 mL, 0.83mmol)处理并再搅拌5 min。然后经由注射器将一部分的该反应混合物 (25%, ~1.0 mL)添加到2-氯苯胺 (42.5 mg, 0.333 mmol)于TEA (0.075 mL)和DCM (1 mL)中的搅拌溶液中并将反应在rt搅拌2 h。将反应混合物浓缩，在EtOAc (~2 mL)和饱和NaHCO3 (~1.5 mL)之间分配，有机组分用盐水(1 mL)洗涤并浓缩。残余物溶于MeOH，过滤并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物。LC-MS保留时间 = 1.51 min; m/z = 538.3 [M+H]+。(柱: Waters BEHC18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-11
使用上述对于实施例JB-10所述的程序用2-氯-N-甲基苯胺替代2-氯苯胺作为最终胺来合成实施例JB-11。LC-MS保留时间 = 1.70 min; m/z = 552.3[M+H]+。(柱: Waters BEHC18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-12
使用上述对于实施例JB-10所述的程序用2-甲氧基苯胺替代2-氯苯胺作为最终胺来合成实施例JB-12。LC-MS保留时间 = 2.28 min; m/z = 534.3[M+H]+。(柱: Waters BEHC18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B =5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-13
使用上述对于实施例JB-10所述的程序用2-甲氧基-N-甲基苯胺替代2-氯苯胺作为最终胺来合成实施例JB-13。LC-MS保留时间 = 1.73 min; m/z = 548.3[M+H]+。(柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B= 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-14
使用上述对于实施例JB-1所述的程序用哌啶替代吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-14。LC-MS保留时间 = 1.85 min; m/z = 475.3[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-15
使用上述对于实施例JB-1所述的程序用二甲胺替代吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-15。LC-MS保留时间 = 2.34 min; m/z = 435.3[M+H]+。(柱: Waters BEH C18,2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 :95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间= 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-16
在0℃下将(S)-2-氨基-N-(4-甲氧基苯基)-N-甲基-3-苯基丙酰胺的HCl盐 (中间体JB-2) (700 mg, 1.86 mmol)于DCM (~2 mL)中的溶液逐滴添加到氯磺酰异氰酸酯 (0.075mL, 0.857 mmol)于DCM (4 mL)中的搅拌溶液中并将反应混合物在0℃搅拌1h，然后用TEA(0.827 mL, 5.93 mmol)/DCM (2.8 mL)处理并再搅拌3 min。然后经由注射器将一部分的该反应混合物(~8.3%, ~0.8 mL)添加到2-甲氧基苯胺 (45.7 mg, 0.371 mmol)于DCM (1mL)中的搅拌溶液中并将反应在rt搅拌 2 h。浓缩反应混合物，在EtOAc (~2 mL)和1M HCl(~1 mL)之间分配 (注: 对于此处概述的程序后的反应，在最终实施例中存在碱性胺，在后处理中使用饱和NaHCO3水溶液代替1 M HCl)，有机组分用盐水(1 mL)洗涤和浓缩。将残余物溶于MeOH，过滤并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物。LC-MS保留时间 = 2.57 min;m/z = 513.3[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水: 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 =220)。
注: 在随后反应中，当实施例16作为参考程序呈现且最终胺输入为酸盐时，在最终添加之前、期间或之后再添加足够的TEA以提供所述胺的游离碱，除非另有说明。
实施例JB-17
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用邻甲苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-17。LC-MS保留时间 = 2.66 min; m/z = 497.4[M+H]+。(柱: Waters BEHC18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B =5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-18
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用2-甲基-N-甲基苯胺,HCl替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-18。LC-MS保留时间 = 2.82 min; m/z = 511.4[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-19
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用3-氯苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-19。LC-MS保留时间 = 2.57 min; m/z = 517.2[M+H]+。(柱: Waters BEHC18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B =5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-20
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用3-甲氧基苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-20。LC-MS保留时间 = 2.44 min; m/z = 513.3 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-21
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用3-氨基吡啶替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-21。LC-MS保留时间 = 2.18 min; m/z = 484.2 [M+H]+。(柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B= 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-22
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用4-氯苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-22。LC-MS保留时间 = 2.59 min; m/z = 517.3[M+H]+。(柱: Waters BEHC18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B =5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-23
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用2-甲氧基-N-甲基苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-23。LC-MS保留时间 = 2.66 min; m/z = 527.3[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-24
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用间甲苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-24。LC-MS保留时间 = 2.55 min; m/z = 497.3[M+H]+。(柱: Waters BEHC18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B =5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-25
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用3-甲基-N-甲基苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-25。LC-MS保留时间 = 2.70 min; m/z = 511.3[M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-26
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用对甲苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-26。LC-MS保留时间 = 1.71 min; m/z = 497.3[M+H]+。(柱: Waters BEHC18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-27
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用4-甲氧基苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-27。LC-MS保留时间 = 1.59 min; m/z = 513.3 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-28
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用4-甲氧基-N-甲基苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-28。LC-MS保留时间 = 2.58 min; m/z = 527.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-29
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用2-氨基嘧啶替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-29。LC-MS保留时间 = 2.06 min; m/z = 485.3 [M+H]+。(柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B= 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-30
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用N,N-二甲基-2-(甲基氨基)乙酰胺,HCl替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-30。LC-MS保留时间 = 2.23 min; m/z =506.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 =220)。
实施例JB-31
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-31。LC-MS保留时间 = 1.49 min; m/z = 510.3[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 :10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B =0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-32
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用异喹啉-1-胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-32。LC-MS保留时间 = 2.56 min; m/z = 534.3 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-33
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用2-苯基乙胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-33。LC-MS保留时间 = 2.66 min; m/z = 511.3 [M+H]+。(柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B= 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-34
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用3-甲氧基-N-甲基苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-34。LC-MS保留时间 = 2.58 min; m/z = 527.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-35
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用4-氯-N-甲基苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-35。LC-MS保留时间 = 2.69 min; m/z = 531.3 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-36
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用1H-苯并[d]咪唑-6-胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-36。LC-MS保留时间 = 2.12 min; m/z = 523.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-37
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用3-氯-N-甲基苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-37。LC-MS保留时间 = 1.61 min; m/z = 531.3 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-38
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用(2-氟苯基)甲胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-38。LC-MS保留时间 = 1.60 min; m/z = 515.3 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-39
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用吡啶-2-基甲胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-39。LC-MS保留时间 = 2.26 min; m/z = 498.3 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-40
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用N-甲基-1,1-二苯基甲胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-40。LC-MS保留时间 = 2.98 min; m/z = 587.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-41
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用1-(4-乙基苯基)-N-甲基甲胺,HCl 替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-41。LC-MS保留时间 = 1.99 min; m/z = 539.4[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 :10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B =0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-42
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用外消旋1-甲基-3-苯基哌嗪替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-42。LC-MS保留时间 = 2.56 min; m/z = 566.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B =0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220). 1H NMR谱分析显示独特信号，暗示非对映异构体的1:1混合物。
实施例JB-43
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用噻唑-2-基甲胺,HCl 替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-43。LC-MS保留时间 = 1.24 min; m/z = 504.2 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-44
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶, HCl 替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-44。LC-MS保留时间 = 2.14 min; m/z =510.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 =220)。
实施例JB-45
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用喹啉-3-基甲胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-45。LC-MS保留时间 = 2.46 min; m/z = 548.3 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-46
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用3,5-二氟苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-46。LC-MS保留时间 = 2.22 min; m/z = 519.1 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-47
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用(3-(1H-吡唑-1-基)苯基)甲胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-47。LC-MS保留时间 = 2.49 min; m/z = 563.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B =0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-48
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用2,5-二氟苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-48。LC-MS保留时间 = 2.39 min; m/z = 519.1 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-49
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用5-氯-2-氟苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-49。LC-MS保留时间 = 1.48 min; m/z = 535.2 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-50
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用4-氟苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-50。LC-MS保留时间 = 2.42 min; m/z = 501.3 [M+H]+。(柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B= 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-51
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用3,4-二氟苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-51。LC-MS保留时间 = 1.47 min; m/z = 519.3 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-52
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用3-(4-氨基苯基)-1,1-二甲基脲替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-52。LC-MS保留时间 = 2.19 min; m/z = 569.4[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH :10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B= 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-53
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用外消旋2-苯基哌啶,HCl替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-53。LC-MS保留时间 = 2.00 min; m/z = 551.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。1H NMR谱分析显示独特信号，暗示为非对映异构体的1:1混合物。
实施例JB-54
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用(2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)甲胺,2HCl替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-54。LC-MS保留时间 = 2.24 min; m/z= 551.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 :5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 =220)。
实施例JB-55
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-55。LC-MS保留时间 = 2.08 min; m/z = 501.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B =0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-56
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用苯基甲胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-56。LC-MS保留时间 = 2.55 min; m/z = 497.3 [M+H]+。(柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B= 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-57
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用(3-氟苯基)甲胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-57。LC-MS保留时间 = 1.60 min; m/z = 515.3 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-58
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用外消旋1-(6-甲基吡啶-2-基)乙胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-58。LC-MS保留时间 = 1.65 min; m/z = 526.2[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 :10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B =0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220). 1H NMR谱分析显示独特信号，暗示为非对映异构体的1:1混合物 。
实施例JB-59
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用(5-甲基异噁唑-3-基)甲胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-59。LC-MS保留时间 = 1.35 min; m/z = 502.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-60
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用外消旋1-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)乙胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-60。LC-MS保留时间 = 2.33 min; m/z= 529.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 :5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 =220)。非对映异构体的1:1混合物。
实施例JB-61
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用3-氨基苯甲酰胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-61。LC-MS保留时间 = 2.09 min; m/z = 526.3 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-62
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用(4-氨基苯基)氨基甲酸甲酯,HCl替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-62。LC-MS保留时间 = 1.28 min; m/z = 556.4[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 :10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B =0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-63
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用(1-甲基-1H-咪唑-2-基)甲胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-63。LC-MS保留时间 = 1.60 min; m/z = 501.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-64
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用外消旋1-(2-甲基噻唑-4-基)乙胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-64。LC-MS保留时间 = 1.79 min; m/z = 532.2[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 :10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B =0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。非对映异构体的1:1混合物。
实施例JB-65
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用外消旋1-(吡啶-3-基)乙胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-65。LC-MS保留时间 = 2.31 min; m/z = 512.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B =0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。非对映异构体的1:1混合物。
实施例JB-66和JB-67
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用(1H-吲唑-3-基)甲胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-66和JB-67。对于实施例66: LC-MS保留时间 = 1.56 min; m/z = 537.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水: 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 =220)。对于实施例67: LC-MS保留时间 = 1.64 min; m/z = 537.3 [M+H]+。(柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B =100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-68
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用外消旋1-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)乙胺,2HCl替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-68。LC-MS保留时间 = 2.05min; m/z = 516.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A =95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 =0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。1H NMR谱分析显示独特信号，暗示为非对映异构体的1:1混合物。
实施例JB-69
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用3-((甲基氨基)甲基)-1H-1,2,4-三唑-5(4H)-酮替代2-甲氧基苯胺,HCl作为最终胺输入来合成实施例JB-69。LC-MS保留时间 =2.03 min; m/z = 518.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-70
在0℃下将中间体JB-6的HCl盐 (280 mg, 0.803 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液逐滴添加到氯磺酰异氰酸酯 (0.010 mL, 1.1 mmol)于DCM (3 mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在0℃搅拌1h，然后添加TEA (0.358 mL, 2.57 mmol)/DCM (1.1 mL)并将反应混合物在0℃搅拌3 min。将一部分的粗反应混合物(~0.8 mL)添加到5-甲基吲哚啉 (32.1 mg, 0.241mmol)于DCM (1 mL)中的搅拌溶液中并将反应在rt搅拌 2 h。浓缩反应混合物，在EtOAc (~2 mL)和1M HCl (~1 mL)之间分配 (注: 对于此处概述的程序后的反应，在最终实施例中存在碱性胺，在后处理中使用饱和NaHCO3水溶液代替1 M HCl)，有机组分用盐水(1 mL)洗涤和浓缩。将残余物溶于MeOH，过滤并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物 (5.6 mg)。LC-MS保留时间 = 2.88 min; m/z = 551.5 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm,1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH :10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-71
使用上述对于实施例JB-70所述的程序用2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶替代5-甲基吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-71。LC-MS保留时间 = 2.56 min; m/z = 538.4[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH :10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B= 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-72
使用上述对于实施例JB-70所述的程序用4-氯吲哚啉替代5-甲基吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-72。LC-MS保留时间 = 2.06 min; m/z = 571.4 [M+H]+。(柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B= 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-73
使用上述对于实施例JB-70所述的程序用吲哚啉替代5-甲基吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-73。LC-MS保留时间 = 2.76 min; m/z = 537.4 [M+H]+。(柱: Waters BEHC18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B =5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-74
使用上述对于实施例JB-70所述的程序用5-甲氧基-7-甲基吲哚啉替代5-甲基吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-74。LC-MS保留时间 = 2.85 min; m/z = 581.5 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-75
使用上述对于实施例JB-70所述的程序用1H-吲哚替代5-甲基吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-75。LC-MS保留时间 = 1.98 min; m/z = 535.5 [M+H]+。(柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒； 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B= 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc； 流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-76
使用上述对于实施例JB-70所述的程序用5,7-二氯吲哚啉替代5-甲基吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例JB-76。LC-MS保留时间 = 2.92 min; m/z = 605.4 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-77
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用1H-吡咯并[2,3-b]吡啶替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-77。LC-MS保留时间 = 2.11 min; m/z = 508.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-78
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用4,5,6,7-四氢-1H-吲哚替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-78。LC-MS保留时间 = 2.53 min; m/z = 579.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-79
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用2,3-二氢苯并[d]异噻唑1,1-二氧化物替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-79。LC-MS保留时间 = 2.19 min; m/z =559.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 =220)。
实施例JB-80
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用1H-吡咯并[3,2-c]吡啶替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-80。LC-MS保留时间 = 1.25 min; m/z = 506.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例JB-81
使用上述对于实施例JB-16所述的程序用4-乙氧基-N-甲基苯胺替代2-甲氧基苯胺作为最终胺输入来合成实施例JB-81。LC-MS保留时间 = 2.58 min; m/z = 527.5 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-1
在0℃下将中间体JB-2的HCl盐 (35 mg, 0.11 mmol)于DCE (0.50 mL)中的溶液缓慢添加到氯磺酰异氰酸酯 (0.014 mL, 0.16 mmol)于DCE (0.25 mL)中的搅拌溶液中并将反应混合物在0℃下搅拌1 h。反应混合物用TEA (0.049 mL, 0.35 mmol)于DCE (0.25 mL)中的溶液处理，在0℃搅拌5分钟，然后添加到4-氯吲哚啉 (33.5 mg, 0.218 mmol)于DCE(0.25 mL)中的溶液中。将反应物密封，在rt震摇2h，浓缩，然后通过制备HPLC提纯以得到标题化合物。LC-MS保留时间 = 2.70 min; m/z = 543.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18,2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 :95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间= 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
使用上述对于实施例CA-1所述的程序用适当的替代前体物替代4-氯吲哚啉作为最终胺输入来合成实施例 CA-2至CA-66。
实施例CA-2
LC-MS保留时间 = 2.67 min; m/z = 523.1[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH: 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-3
LC-MS保留时间 = 1.83 min; m/z = 577.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-4
LC-MS保留时间 = 2.74 min; m/z = 533.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-5
LC-MS保留时间 = 2.73 min; m/z = 533.1[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-6
LC-MS保留时间 = 2.43 min; m/z = 508.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-7
LC-MS保留时间 = 2.51 min; m/z =501.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-8
LC-MS保留时间 =2.34 min; m/z = 534.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-9
LC-MS保留时间 = 1.43 min; m/z = 508.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-10
LC-MS保留时间 = 1.45 min; m/z = 501.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-11
LC-MS保留时间 = 2.80 min; m/z = 523.5 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-12
LC-MS保留时间 = 1.64 min; m/z = 551.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-13
LC-MS保留时间 = 2.76 min; m/z = 511.5 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-14
LC-MS保留时间 = 1.68 min; m/z = 511.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-15
LC-MS保留时间 = 1.36 min; m/z = 508.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-16
LC-MS保留时间 = 1.59 min; m/z = 561.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-17
LC-MS保留时间 = 2.17 min; m/z = 540.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-18
LC-MS保留时间 = 2.88 min; m/z = 575.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-19
LC-MS保留时间 = 1.30 min; m/z = 525.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-20
LC-MS保留时间 = 2.96 min; m/z = 539.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-21
LC-MS保留时间 = 1.83 min; m/z = 525.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-22
LC-MS保留时间 = 1.25 min; m/z = 526.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-23
LC-MS保留时间 = 2.78 min; m/z = 511.5 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-24
LC-MS保留时间 = 1.28 min; m/z = 540.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-25
LC-MS保留时间 = 2.90 min; m/z = 525.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-26
LC-MS保留时间 = 1.62 min; m/z = 567.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-27
LC-MS保留时间 = 1.39 min; m/z = 550.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-28
LC-MS保留时间 = 1.61 min; m/z = 551.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-29
LC-MS保留时间 = 1.75 min; m/z = 559.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-30
LC-MS保留时间 = 1.61 min; m/z = 551.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-31
LC-MS保留时间 = 1.76 min; m/z = 559.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-32
LC-MS保留时间 = 1.84 min; m/z = 589.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-33
LC-MS保留时间 = 2.85 min; m/z = 575.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-34
LC-MS保留时间 = 1.65 min; m/z = 567.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-35
LC-MS保留时间 = 2.71 min; m/z = 567.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-36
LC-MS保留时间 = 2.80 min; m/z = 575.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-37
LC-MS保留时间 = 2.79 min; m/z = 559.5 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-38
LC-MS保留时间 = 1.36 min; m/z = 550.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-39
LC-MS保留时间 = 2.49 min; m/z = 574.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-40
LC-MS保留时间 = 2.72 min; m/z = 541.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-41
LC-MS保留时间 = 2.88 min; m/z = 539.5 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-42
LC-MS保留时间 = 1.30 min; m/z = 540.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-43
LC-MS保留时间 = 2.41 min; m/z = 616.1[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH: 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-44
LC-MS保留时间 = 1.34 min; m/z = 632.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-45
LC-MS保留时间 = 2.65 min; m/z = 548.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-46
LC-MS保留时间 = 1.34 min; m/z = 576.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-47
LC-MS保留时间 = 1.38 min; m/z = 632.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-48
LC-MS保留时间 = 1.25 min; m/z = 573.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-49
LC-MS保留时间 = 1.68 min; m/z = 551.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-50
LC-MS保留时间 = 2.73 min; m/z = 551.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-51
LC-MS保留时间 = 1.32 min; m/z = 518.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-52
LC-MS保留时间 = 1.25 min; m/z = 492.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-56
LC-MS保留时间 = 2.67 min; m/z = 553.5 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-58
LC-MS保留时间 = 2.64 min; m/z = 609.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-59
LC-MS保留时间 = 1.19 min; m/z = 534.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-60
LC-MS保留时间 = 2.61 min; m/z = 551.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-61
LC-MS保留时间 = 1.34 min; m/z = 507.9 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-62
LC-MS保留时间 = 2.38 min; m/z = 522.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-63
LC-MS保留时间 = 3.09 min; m/z = 584.4 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-64
LC-MS保留时间 = 1.66 min; m/z = 551.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-65
LC-MS保留时间 = 2.53 min; m/z = 555.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-66
LC-MS保留时间 = 1.60 min; m/z = 577.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例ZY-1
在0℃下将中间体ZY-5的HCl盐 (55 mg, 0.13 mmol)于DCM (0.5 mL)和TEA (0.018mL, 0.13 mmol)中的溶液添加到氯磺酰异氰酸酯(0.014 mL, 0.16 mmol)于DCM (0.5 mL)中的溶液中并将反应混合物在0℃下搅拌20 min。然后，将2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (23.6 mg, 0.196 mmol)/DCM (0.5 mL)和TEA (0.073 mL, 0.52 mmol)添加到反应混合物中并继续在rt 搅拌2 h。浓缩粗反应混合物，将残余物溶于MeOH，过滤并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(24.5 mg)。LC-MS保留时间 = 2.22 min; m/z = 571.1 [M-H]-。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例ZY-2
在0℃下将中间体ZY-3的HCl盐 (50 mg, 0.13 mmol)于DCM (0.5 mL)和TEA (0.036mL, 0.26 mmol)中的溶液添加到氯磺酰异氰酸酯(0.011 mL, 0.13 mmol)于DCM (0.5 mL)中的溶液中并将反应混合物在0℃搅拌30 min。然后，将2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(17.2 mg, 0.143 mmol)/DCM (0.5 mL)和TEA (0.054 mL, 0.39 mmol)添加到反应混合物中并继续在rt搅拌2 h。浓缩粗反应混合物，将残余物溶于MeOH，过滤并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(3.9 mg)。LC-MS保留时间 = 2.49 min; m/z = 536.9 [M+H]+。(柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3.5分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例ZY-8
使用上述对于实施例ZY-1所述的程序用吲哚啉替代2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶作为最终胺输入来合成实施例ZY-8。LC-MS保留时间 = 1.47 min; m/z = 572.6 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例ZY-9
使用上述对于实施例ZY-1所述的程序用N-乙基苯胺替代2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶作为最终胺输入来合成实施例ZY-9。LC-MS保留时间 = 1.71 min; m/z = 574.6 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例ZY-10
使用上述对于实施例ZY-1所述的程序用对甲苯胺替代2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶作为最终胺输入来合成实施例ZY-10。LC-MS保留时间 = 1.47 min; m/z = 560.5 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例ZY-11
使用上述对于实施例ZY-1所述的程序用4-(叔丁基)苯胺替代2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶作为最终胺输入来合成实施例ZY-11。LC-MS保留时间 = 1.75 min; m/z = 602.7[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 :10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B =0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例ZY-12
使用上述对于实施例ZY-1所述的程序用5-氟吲哚啉替代2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶作为最终胺输入来合成实施例ZY-12。LC-MS保留时间 = 1.47 min; m/z = 590.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例ZY-15
使用上述对于实施例ZY-1所述的程序用7-氟吲哚啉替代2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶作为最终胺输入来合成实施例ZY-15。LC-MS保留时间 = 2.36 min; m/z = 590.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B =0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例ZY-18
使用上述对于实施例ZY-1所述的程序用5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪替代2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶作为最终胺输入来合成实施例ZY-18。LC-MS保留时间 = 2.04 min; m/z= 572.1[M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95% MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 =220)。
对于实施例CA-113至CA-120，利用以下程序：
在0℃下将中间体ZY-5的HCl盐 (380 mg, 1.0 mmol)和三乙胺 (280 μL, 2.0 mmol)于DCM (5.0 mL)中的溶液逐滴添加到氯磺酰异氰酸酯 (130 μL, 1.5 mmol)于DCM (2.5mL)中的溶液中并将反应混合物在氮气下在0℃下搅拌1 h。然后添加三乙胺(490 μL, 3.5mmol)于DCM (2.5 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌5 min。然后将一部分粗反应混合物(1mL)添加到适当苯胺(0.20 mmol)于DCM (0.25 mL)中的溶液中并将反应混合物在rt 震摇过夜。反应物用MeOH (0.5 mL)稀释，浓缩至干，溶于DMF (1 mL)，过滤并通过制备HPLC提纯以得到各标题化合物。
实施例CA-113
LC-MS保留时间 = 1.30 min; m/z =561.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 :10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-114
LC-MS保留时间 = 2.14 min; m/z = 547.2 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-115
LC-MS保留时间 = 2.75 min; m/z = 545.9 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-116
LC-MS保留时间 = 1.57 min; m/z = 579.9 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒. 溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc. 溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-117
LC-MS保留时间 = 1.69 min; m/z = 577.9 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-118
LC-MS保留时间 = 1.54 min; m/z = 591.0 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-119
LC-MS保留时间 = 2.47 min; m/z = 590.3 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5% MeOH : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%MeOH : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-120
LC-MS保留时间 = 1.33 min; m/z = 560.9 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例CA-121
LC-MS保留时间 = 1.41 min; m/z = 575.1 [M+H]+。(柱: Waters BEH C18, 2.0 x50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例VN-1和VN-2
两种非对映异构体
使用上述对于实施例ZY-1所述的程序用2-(吡咯烷-2-基)吡啶替代2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶作为最终胺输入来合成实施例VN-1和VN-2。通过制备HPLC (柱: XBridgeC18, 19 x 200 mm, 5-μm颗粒，CH3CN, 水, NH4OAc)提纯以得到实施例VN-1 (39.2 mg)和实施例VN-2 (21.2 mg)。
实施例VN-1: LC-MS保留时间 = 1.53 min; m/z = 601.1 [M+H]+. ((柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例VN-2: LC-MS保留时间 = 1.58 min; m/z = 601.1 [M+H]+. (柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B= 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例VN-3和VN-4
两种非对映异构体
使用上述对于实施例ZY-1所述的程序用2-苯基吡咯烷替代2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶作为最终胺输入来合成实施例VN-3和VN-4。通过制备HPLC (柱: XBridge C18, 19x 200 mm, 5-μm颗粒，CH3CN, 水, NH4OAc)提纯以得到实施例VN-3 (24.3 mg)和实施例VN-4 (9.7 mg)。
实施例VN-3: LC-MS保留时间 = 1.82 min; m/z = 600.5 [M+H]+. (柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mM NH4OAc；溶剂B= 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例VN-4 : LC-MS保留时间 = 1.85 min; m/z = 600.6 [M+H]+. (柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；溶剂A = 95%水 : 5%乙腈 : 10 mMNH4OAc；溶剂B = 5%水 : 95%乙腈 : 10 mM NH4OAc；流速 = 0.5 mL/min；起始% B = 0，最终% B = 100；梯度时间 = 3分钟，然后在100%B保持0.5分钟。波长 = 220)。
实施例ZY-19
向氯磺酰异氰酸酯(0.016 mL, 0.18 mmol)于DCM (0.5 mL)中的溶液中添加中间体ZY-5的HCl盐 (50 mg, 0.12 mmol)和TEA (0.017 mL, 0.12 mmol)于DCM (0.5 mL)中的溶液并将反应混合物在rt搅拌20 min。然后添加4-氯-1H-吲唑 (27.2 mg, 0.18 mmol)/DCM(0.5 mL)和TEA (0.066 mL, 0.47 mmol)并将反应混合物在rt搅拌1 d。浓缩反应混合物，将残余物溶于MeOH，过滤并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(4.7 mg)。LC-MS保留时间= 1.48 min; m/z = 605.4 [M+H]+. (柱:Waters Acquity BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.5分钟; 流速: 0.5mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例ZY-20
向氯磺酰异氰酸酯(0.016 mL, 0.18 mmol)于DCM (0.5 mL)中的溶液中添加中间体ZY-5的HCl盐 (50 mg, 0.12 mmol)和TEA (0.017 mL, 0.12 mmol)于DCM (0.5 mL)中的溶液并将反应混合物在rt搅拌1 h。然后添加5-氟-1H-吲唑 (24.3 mg, 0.18 mmol)于DCM(0.5 mL)和TEA (0.066 mL, 0.47 mmol)中的溶液并将反应混合物在rt搅拌16 h。过滤反应物并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(10.4 mg)。LC-MS保留时间 = 1.43 min; m/z= 589.5 [M+H]+. (柱:Waters Acquity BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.5分钟; 流速: 0.5 mL/min; 检测: UV220 nm)。
实施例VN-5
在氮气下在0℃下经1分钟向氯磺酰异氰酸酯(0.022 g, 0.16 mmol)于CH2Cl2 (0.5mL)中的溶液中逐滴添加中间体ZY-5的HCl盐 (0.050 g, 0.130 mmol)和三乙胺(0.018mL, 0.130 mmol)于CH2Cl2 (0.5 mL)中的溶液。在0℃下在氮气下将反应混合物搅拌30min，然后逐滴添加 1,2,3,4-四氢喹啉 (0.017 g, 0.13 mmol)于CH2Cl2 (0.5 mL) 中的溶液，接着添加三乙胺 (0.091 mL, 0.65 mmol)。将反应从冷浴中移除并在~25℃在氮气下搅拌18 h。真空浓缩反应物。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯以得到标题化合物(9.1 mg); LC-MS保留时间 = 1.54 min; m/z = 586.5 [M+H]+.(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0%B, 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.5分钟; 流速: 1 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例VN-6和实施例VN-7
在氮气下在0℃下向氯磺酰异氰酸酯(0.041 g, 0.29 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液中添加中间体ZY-5的HCl盐 (0.10 g, 0.3 mmol)和三乙胺 (0.036 mL, 0.26 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液。将反应在0℃在氮气下搅拌30 min，然后添加外消旋中间体VN-3的HCl盐 (0.044 g, 0.26 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液，接着添加三乙胺(0.182 mL,1.303 mmol)。将反应从冷浴移除并在氮气下在~25℃搅拌18 h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯，然后通过SFC进一步手性分离 (柱: Chiralpak IA制备柱, 30 x 250 mm, 5μm; 流动相: 35% MeOH/CO2, 150巴; 温度: 35℃，流速: 70 mL/min持续16 min, 检测: UV 220 nm，进样: 0.75 mL的~4 mg/mLMeOH溶液 (~13 mg，通过叠式注射提纯)以得到两种标题化合物：
实施例VN-6 (2.2 mg); LC-MS保留时间 = 1.476 min; m/z = 587.1 [M+H]+. (柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0%B, 0-100% B 经3分钟，然后在100% B保持0.5分钟; 流速: 1 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例VN-7 (6.8 mg). LC-MS保留时间 = 1.381 min; m/z = 587.1 [M+H]+.(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM 乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0%B, 0-100%B 经3分钟，然后在100%B保持0.5分钟; 流速: 1 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例VN-8
在氮气下在0℃下经1分钟向氯磺酰异氰酸酯(0.044 g, 0.31 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液中逐滴添加中间体ZY-5的HCl盐 (0.10 g, 0.3 mmol)和三乙胺 (0.036 mL,0.26 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液。将反应在0℃在氮气下搅拌20 min。然后在氮气下将反应混合物添加到1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (0.031 g, 0.26 mmol)和为分散体的60% NaH(0.031 g, 0.782 mmol)/矿物油于DMF (1 mL)中的混合物中并在~25℃搅拌18 h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (1 mL)并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯以得到标题化合物 (4.4 mg)。LC-MS保留时间 = 1.27 min; m/z = 571.5 [M+H]+. (柱: WatersBEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0%B, 0-100% B经3分钟，然后在100%B保持0.5分钟; 流速: 1 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例ZY-21
向氯磺酰异氰酸酯(0.016 mL, 0.18 mmol)于DCM (0.5 mL)中的溶液中添加中间体ZY-5的HCl盐 (50 mg, 0.12 mmol)于DCM (0.5 mL)和TEA (0.017 mL, 0.12 mmol)中的溶液并将反应混合物在rt搅拌30 min。然后添加5-溴-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(35.5 mg, 0.18 mmol)/DMF和TEA (0.066 mL, 0.47 mmol)并将反应混合物在rt搅拌16h。浓缩反应混合物，将残余物溶于MeOH，过滤并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(19.8mg)。LC-MS保留时间 = 1.39 min; m/z = 651.5 [M+H]+. (柱:Waters Acquity BEH C18,2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.5分钟; 流速: 0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例ZY-22
向氯磺酰异氰酸酯(0.016 mL, 0.18 mmol)于DCM (0.5 mL)中的溶液中添加中间体ZY-5的HCl盐 (50 mg, 0.12 mmol)和TEA (0.017 mL, 0.12 mmol)于DCM (1.5 mL)中的溶液并将混合物在rt搅拌20 min。然后添加6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-b]吡嗪的HCl盐 (28.1mg, 0.18 mmol)于DCM (0.5 mL)、DMF (1 mL)和TEA (0.066 mL, 0.47 mmol)中的溶液并将反应混合物在rt搅拌16 h。浓缩反应混合物，将残余物溶于MeOH/DMF，过滤并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(12.7 mg)。LC-MS保留时间 = 1.08 min; m/z = 574.5 [M+H]+. (柱:Waters Acquity BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.5分钟; 流速: 0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例VN-9
在氮气下在0℃下经1分钟向氯磺酰异氰酸酯(0.044 g, 0.31 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液中逐滴添加中间体ZY-5的HCl盐 (0.10 g, 0.26 mmol)和三乙胺(0.036 mL,0.26 mmol) 于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液。将反应在0℃下在氮气下搅拌25 min，然后经1分钟逐滴添加1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶 (0.035 g, 0.26 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液，接着添加三乙胺(0.145 mL, 1.04 mmol)。将反应从冷浴移除并在~25℃在氮气下搅拌2 h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (MeOH/水/NH4OAc)提纯，然后用(AcCN/水/NH4OAc)再次提纯以得到标题化合物 (18.0 mg). LC-MS保留时间 = 3.024min; m/z = 587.05 [M+H]+. (柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95 MeOH:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5 MeOH:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0%B, 0-100% B 经3分钟，然后在100%B保持0.5分钟; 流速: 1 mL/min;检测: UV 220 nm)。
实施例ZY-23
向氯磺酰异氰酸酯(0.015 mL, 0.17 mmol)于DCM (0.5 mL)中的溶液中添加(S)-2-氨基-3-(3,5-二氟苯基)-N-甲基-N-(2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)丙酰胺的HCl盐 (61 mg,0.14 mmol)和TEA (0.020 mL, 0.14 mmol)的DCM (1 mL)溶液并将混合物在rt搅拌20min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (25.3 mg, 0.21 mmol)于DCM (0.5 mL)和TEA (0.078 mL, 0.56 mmol) 中的溶液并将反应混合物在rt搅拌4 h。浓缩反应混合物，将残余物溶于MeOH，过滤并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物 (33.4 mg)。LC-MS保留时间 = 1.55 min; m/z = 586.9 [M+H]+. (柱:Waters Acquity BEH C18, 2.0 x 50 mm,1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟, 然后在100% B保持0.5分钟; 流速:0.5 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例VN-10和实施例VN-11
在氮气下在0℃下经1分钟向氯磺酰异氰酸酯(0.041 g, 0.29 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液中逐滴添加中间体ZY-5的HCl盐 (0.1 g, 0.3 mmol)和三乙胺(0.036 mL, 0.26mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液。将反应在0℃下在氮气下搅拌30 min。然后经1分钟逐滴添加外消旋2-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉 (0.038 g, 0.26 mmol)于CH2Cl2 (1 mL) 中的溶液，接着添加三乙胺 (0.145 mL, 1.04 mmol)。将反应从冷浴中移除并在~25℃搅拌5.5 h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC提纯以得到两种标题化合物:
实施例VN-10 (16.1 mg): LC-MS保留时间 = 1.81 min; m/z = 600.2 [M+H]+. (柱:Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0%B, 0-100% B 经3分钟，然后在100%B保持0.5分钟; 流速: 1 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例VN-11 (13.1 mg): LC-MS保留时间 = 1.85 min; m/z = 600.2 [M+H]+.(柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0%B, 0-100% B经3分钟，然后在100%B保持0.5分钟; 流速: 1 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例VN-12
在氮气下在0℃下经1分钟向氯磺酰异氰酸酯(0.023 mL, 0.26 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液中逐滴添加中间体ZY-5的HCl盐 (0.1 g, 0.3 mmol)和三乙胺(0.036 mL, 0.26mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液。将反应在氮气下在0℃下搅拌8 min。然后将中间体VN-4.1和VN 4.2的混合物 (0.039 g, 0.26 mmol)(1:0.18)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液添加到反应混合物中，接着经2分钟逐滴添加三乙胺 (0.182 mL, 1.30 mmol)。将反应从冷浴移除并在~25℃在氮气下搅拌3.5 h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯以得到标题化合物(10.9 mg)。LC-MS保留时间 = 1.685 min;m/z = 600.8 [M+H]+. (柱: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例ZY-24
向氯磺酰异氰酸酯(0.012 mL, 0.14 mmol)于DCM (0.5 mL)中的溶液中添加中间体ZY-24.2的HCl盐 (48 mg, 0.13 mmol)和TEA (0.017 mL, 0.13 mmol)的DCM (1 mL)溶液。将反应混合物搅拌20 min，将2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (22.5 mg, 0.19 mmol)于DCM (0.5 mL)和TEA (0.07 mL, 0.5 mmol)中的溶液添加到反应中，继续在rt搅拌16 h。浓缩反应混合物，溶于MeOH，过滤并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物 (7.3 mg)。LC-MS保留时间 = 1.88 min; m/z = 574.0 [M+H]+. (柱:Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B 经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例VN-14
在0℃在氮气下经1分钟向氯磺酰异氰酸酯(0.023 mL, 0.26 mmol)于CH2Cl2 (0.5mL)中的溶液中逐滴添加中间体ZY-5的HCl盐 (0.10 g, 0.26 mmol)和三乙胺(0.036 mL,0.26 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液。将反应在0℃在氮气下维持15 min，然后添加中间体VN-7 (为单一立体异构体，未测定绝对立体化学) (0.035 g, 0.26 mmol) 于CH2Cl2 (1mL)中的溶液，接着在氮气下在0℃下经2 min逐滴添加三乙胺(0.145 mL, 1.04 mmol)。将反应在0℃搅拌25 min。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC(AcCN/水/NH4OAc) 提纯以得到标题化合物(49.4 mg)。LC-MS保留时间 = 1.566 min; m/z= 586.9 [M+H]+. (柱: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min;检测: UV 220 nm)。
实施例VN-15
在0℃在氮气下经1分钟向氯磺酰异氰酸酯(0.023 mL, 0.26 mmol)于CH2Cl2 (0.5 mL)中的溶液中逐滴添加中间体ZY-5的HCl盐 (0.10 g, 0.26 mmol)和三乙胺(0.036 mL,0.26 mmol)的溶液。将反应混合物在0℃在氮气下搅拌20 min。然后添加中间体VN-8 (为单一立体异构体，未测定绝对立体化学) (0.035 g, 0.26 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液，接着经2分钟逐滴添加三乙胺 (0.145 mL, 1.04 mmol)。将反应混合物在0℃在氮气下搅拌20 min。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯以得到标题化合物 (28.1 mg). LC-MS保留时间 = 1.540 min; m/z = 586.9[M+H]+. (柱: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A:5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃;梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV220 nm)。
实施例GW-2
经2分钟向冰水浴中的氯磺酰异氰酸酯(34 mg, 0.24 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液中添加中间体GW-3的HCl盐 (75 mg, 0.20 mmol)和TEA (0.1 mL, 0.6 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌20 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (36mg, 0.30 mmol)于DCM (1 mL) 中的溶液，接着添加TEA (0.1 mL, 0.79 mmol)，移除水浴并将反应混合物在rt搅拌2 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于甲醇并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物 (9.8 mg)。LC-MS保留时间 = 2.69 min; m/z = 553.08 [M+Na]+.(柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1%TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min,然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例ZY-25
向氯磺酰异氰酸酯(0.012 mL, 0.14 mmol)于DCM (0.5 mL)中的溶液中添加中间体ZY-25.2的HCl盐 (46.4 mg, 0.13 mmol)的DCM (1 mL)溶液并将反应混合物搅拌20 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (23.1 mg, 0.19 mmol)于DCM (0.5 mL)和TEA(0.072 mL, 0.51 mmol)中的溶液，并将反应混合物在rt 搅拌3 h。浓缩反应混合物，溶于MeOH，过滤并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(27.3 mg)。LC-MS保留时间 = 1.72min; m/z = 549.9 [M+H]+. (柱:Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-1
向中间体BB-21.4 (0.05 g, 0.16 mmol)于DCM (2 mL)中的搅拌溶液中添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (0.028 g, 0.23 mmol)，接着添加TEA (0.022 mL, 0.16mmol)并将反应混合物在室温搅拌5 min以形成均一溶液。将反应混合物冷却至0℃，添加氯磺酰异氰酸酯(0.026 g, 0.19 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液和TEA (10.84 µl, 0.078mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。将反应混合物浓缩至干，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (2.8 mg)。LC-MS保留时间 = 1.15 min; m/z = 547.1[M+H]+. 柱: Ascentis Express C18 (50 x 2.1) mm, 2.7 μm; 流速: 1.1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含10 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 温度: 50℃; 0% B至100% B经3分钟; UV 检测在220 nm。
实施例BB-2
向中间体BB-22.2 (100 mg, 0.31 mmol)和中间体BB-1.2盐酸盐 (57 mg, 0.47mmol)于DCM (5 mL)中的搅拌溶液中添加TEA (0.04 mL, 0.3 mmol)并将反应混合物在室温搅拌5 min。将反应混合物冷却至 0℃，逐滴添加氯磺酰异氰酸酯(0.03 mL, 0.37 mmol)于DCM (1.0 mL)中的溶液，将所得溶液温热至室温并搅拌2 h。反应混合物用水(15 mL)稀释并用EtOAc (2 x 15 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(18 mg)。LC-MS保留时间 = 1.79 min; m/z= 544.2 [M+H]+. 柱: Ascentis Express C18 (50 x 2.1) mm, 2.7 μm; 流速: 1.1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含10 mM NH4OAc的水:ACN (5:95); 温度: 50℃; 0% B至100% B经3分钟; UV 检测在220 nm。
实施例GW-3
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(22 mg, 0.15 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液中添加中间体GW-6的HCl盐 (50 mg, 0.13 mmol)和TEA (0.05 mL, 0.4 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌20 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (23 mg, 0.19mmol)于DCM (1 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.07 mL, 0.5 mmol)并将反应混合物搅拌2min，移除水浴并继续在rt 搅拌2 h。蒸发溶剂，将残余物再溶于DMF并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(3.6 mg)。LC-MS保留时间 = 2.89 min; m/z = 567.07 [M+Na]+. (柱:Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA;流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例AW-1
在-15℃下向0.1 M 氯磺酰异氰酸酯于DCM中的溶液 (2.88 mL, 0.288 mmol)中逐滴添加中间体ZY-5 (100 mg, 0.288 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液。然后将反应混合物在-15℃下搅拌30 min。然后添加3,4-二氢-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪(39.2 mg, 0.288mmol)和TEA (0.160 mL, 1.15 mmol)并将反应溶液在rt 搅拌30 min。真空除去溶剂，将残余物溶于DMF (1 mL)，过滤，并通过制备HPLC提纯以得到为白色固体的标题化合物(22mg)。LC-MS保留时间 = 1.07 min; m/z = 589.15 [M+H]+. (起始% B = 0, 最终% B =100, 梯度时间 = 2 min, 流速 = 1.0 mL/min, 波长 = 220, 溶剂对 =水/乙腈/TFA, 溶剂A = 10%乙腈/90%水/ 0.1% TFA, 溶剂B = 90%乙腈/10%水/0.1% TFA, 柱 =Phenomenex Luna 30 x 2.0 MM 3µm 柱温 = 40℃)。
实施例GW-4
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(22 mg, 0.16 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液中添加中间体GW-8的HCl盐 (50 mg, 0.13 mmol)和TEA (0.05 mL, 0.39 mmol)于DCM (1 mL)中的混合物，将反应混合物搅拌20 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (23.8 mg,0.20 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.1 mL, 0.53 mmol)。将反应混合物搅拌3 min，移除水浴并继续在rt 搅拌1.5 h。蒸发溶剂，将残余物再溶于DMF并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(5.5 mg)。LC-MS保留时间 = 3.41 min; m/z = 553.05 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例GW-5
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(27.6 mg, 0.20 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液中添加中间体GW-4.3的HCl盐 (65 mg, 0.16 mmol)和TEA (0.05 mL, 0.3 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌20 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (29 mg,0.24 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.10 mL, 0.65 mmol)，移除水浴并将反应混合物在rt搅拌2 h。蒸发溶剂，将残余物再溶于甲醇并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(5.7 mg)。LC-MS保留时间 = 3.44 min; m/z = 589.06 [M+H]+. (柱:Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA;流动相B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例GW-6
在冰水浴中经2分钟向氯磺酰异氰酸酯(20 mg, 0.14 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液中添加中间体GW-5.2的HCl盐 (50 mg, 0.12 mmol)和TEA (0.05 mL, 0.4 mmol)于DCM (1mL)中的混合物并将反应混合物在rt搅拌20 min。添加 2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(22 mg, 0.18 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.07 mL, 0.48 mmol)，然后移除水浴并将反应混合物在rt搅拌2 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于甲醇并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物 (2.6 mg)。LC-MS保留时间 = 2.45 min; m/z = 570.05 [M+H]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例GW-7
在冰水浴中经2分钟向氯磺酰异氰酸酯(25 mg, 0.18 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液中添加中间体GW-6.2的HCl盐 (60 mg, 0.15 mmol)和TEA (0.04 mL, 0.3 mmol)于DCM (1mL)中的混合物并将反应混合物在rt搅拌20 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (26 mg, 0.22 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.08 mL, 0.6 mmol)，移除水浴并将反应混合物在rt搅拌2 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于甲醇并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(10.7 mg). LC-MS保留时间 = 3.86 min; m/z = 622.14 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例GW-8
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(27 mg, 0.19 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液中缓慢添加中间体GW-7.2 (65 mg, 0.16 mmol)和TEA (0.1 mL, 0.47 mmol)于DCM (1 mL)中的混合物并将反应混合物搅拌20 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (28 mg,0.23 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.10 mL, 0.62 mmol)并将反应混合物搅拌5 min，移除水浴，继续搅拌2 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于甲醇并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(1.2 mg)。LC-MS保留时间 = 3.50 min; m/z = 592.21 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-3
向2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (96 mg, 0.80 mmol)、中间体BB-23.3 (200 mg,0.533 mmol)于DCM (10 mL)中的搅拌溶液中添加氯磺酰异氰酸酯 (0.057 mL, 0.64mmol)并将反应混合物在0℃搅拌 30 min。反应混合物用DCM (20 mL)稀释，用水 (20 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为浅黄色固体的标题产物(7 mg)。LC-MS保留时间 = 1.54 min; m/z =601.2 [M+H]+. 柱: Ascentis Express C18(50 x 2.1) mm, 2.7 μm; 流速: 1.1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM NH4OAc的水: ACN(95:5); 流动相 B: 含10 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 温度: 50℃; 0% B至100% B经3分钟; UV 检测在220 nm。
实施例BB-4
向中间体BB-24 (145 mg, 0.937 mmol)、中间体BB-28.2 HCl (200 mg, 0.624 mmol)于DCM (10 mL)中的搅拌溶液中添加氯磺酰异氰酸酯(0.066 mL, 0.75 mmol)并进一步在0℃搅拌30 min。反应混合物用DCM (20 mL)稀释，用水 (20 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题产物 (15 mg)。LC-MS保留时间= 1.64 min; m/z = 580.1 [M+H]+. 柱: Ascentis Express C18 (50 x 2.1) mm, 2.7 μm; 流速: 1.1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含10mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 温度: 50℃; 0% B至100% B经3分钟; UV 检测在220 nm。
实施例GW-9
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(36 mg, 0.25 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液中添加中间体GW-8.4 (90 mg, 0.25 mmol)和TEA (0.05 mL, 0.38 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌 20 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (45.1 mg, 0.376mmol)于DCM (2 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.11 mL, 0.751 mmol)并将反应混合物搅拌2 min。然后移除水浴并继续在rt 搅拌2 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于甲醇并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物 (24.4 mg)。LC-MS保留时间 = 3.53 min; m/z = 607.14[M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90%H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例GW-10
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(35 mg, 0.25 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液中添加中间体GW-9.2 (100 mg, 0.25 mmol) 和TEA (0.1 mL, 0.7 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌20 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (45 mg, 0.37mmol)于DCM (2 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.14 mL, 0.99 mmol)并将反应混合物搅拌2min，移除水浴，继续在rt 搅拌2 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于甲醇并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物 (14.2 mg)。LC-MS保留时间 = 3.91 min; m/z = 578.21 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例GW-11
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(36 mg, 0.25 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液中添加中间体GW-10.2 (100 mg, 0.25 mmol)和TEA (0.1 mL, 0.8 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液，搅拌1 min，然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (46 mg, 0.38 mmol)于DCM (2mL)中的溶液，接着添加TEA (0.14 mL, 1.0 mmol)，搅拌3 min，移除水浴并将反应混合物在rt搅拌4 h。浓缩反应混合物，再溶于DMF并通过制备HPLC提纯 (MeOH/水/TFA)，然后通过制备HPLC (ACN/水/TFA) 再提纯以得到标题化合物(8.0 mg)。LC-MS保留时间 = 3.43min; m/z = 569.18 [M+Na]+. (柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃;梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220nm)。
实施例GW-12
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(21 mg, 0.15 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液中添加中间体GW-11.3 (50 mg, 0.15 mmol)和TEA (0.020 mL, 0.15 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液并将反应混合物在rt搅拌2 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (26 mg,0.22 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.04 mL, 0.29 mmol)，移除水浴并将反应混合物在rt搅拌2 h。浓缩反应混合物，再溶于甲醇并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物 (2.9 mg). LC-MS保留时间 = 2.72 min; m/z = 567.00 [M+H]+. (柱:Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA;流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-5
向中间体BB-25.2 (0.120 g, 0.360 mmol)于DCM (2 mL)中的搅拌溶液中添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (0.065 g, 0.54 mmol)，接着添加TEA (0.050 mL, 0.36mmol)并将反应混合物在室温搅拌5 min以形成均一溶液。将反应混合物冷却至0℃，添加氯磺酰异氰酸酯(0.038 mL, 0.43 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液和TEA (0.025 mL, 0.18mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。将反应混合物浓缩至干，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题产物(14.5 mg)。LC-MS保留时间 = 1.19 min; m/z =559.1 [M+H]+. Ascentis Express C18 (50x2.1)mm, 2.7μm; 温度 50℃; 流速:1.1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM NH4OAc的95%水/ 5% ACN; 流动相 B: 含10 mM NH4OAc的5%水/ 95%ACN; 0% B至100% B经3 min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-6
向中间体BB-26.2 (0.20 g, 0.66 mmol)于DCM (2 mL)中的搅拌溶液中添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (0.119 g, 0.991 mmol)，接着添加TEA (0.092 mL, 0.66mmol)并将反应混合物在室温搅拌5 min以形成均一溶液。将反应混合物冷却至0℃，添加氯磺酰异氰酸酯(0.069 mL, 0.79 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液和TEA (0.046 mL, 0.330mmol)并在室温搅拌16 h。将反应混合物浓缩至干，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题产物 (6 mg)。LC-MS保留时间 = 1.83 min; m/z = 528.1 [M+H]+. 柱:Ascentis Express C18 (50x2.1) mm, 2.7μm; 温度 50℃; 流速: 1.1 mL/min; 流动相A: 含10 mM NH4OAc的95%水/ 5% ACN; 流动相 B: 含10 mM NH4OAc的5%水/ 95% ACN; 0%B至100% B经3 min; 然后在100% B保持1分钟，流速1.1 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例GW-13
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(23 mg, 0.16 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液中添加中间体GW-12.3 (70 mg, 0.16 mmol)和TEA (0.07 mL, 0.5 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌1 min。添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (29 mg, 0.24 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液，接着添加 TEA (0.1 mL, 0.65 mmol)并将反应混合物搅拌3 min，移除水浴并继续在rt 搅拌4 h。浓缩反应混合物，再溶于DMF并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(13.7 mg)。LC-MS保留时间 = 3.57 min; m/z = 605.17 [M+Na]+. (柱:Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA;流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-8
向中间体BB-24 (66.8 mg, 0.432 mmol)、中间体ZY-5 (100 mg, 0.288 mmol)于DCM(10 mL)中的搅拌溶液中添加氯磺酰异氰酸酯(0.031 mL, 0.35 mmol)并在0℃进一步搅拌30 min。反应混合物用DCM (20 mL)稀释，用水 (20 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(15 mg)。LC-MS保留时间 =2.03 min; m/z = 607.1 [M+H]+。柱: Ascentis Express C18 (50x2.1) mm, 2.7μm; 温度 50℃; 流速: 1.1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM NH4OAc的95%水/ 5% ACN; 流动相 B:含10 mM NH4OAc的5%水/ 95% ACN; 0% B至100% B经3 min; 然后在100% B保持1分钟，流速1.1 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例AW-2
在0℃下向氯磺酰异氰酸酯(0.017 mL, 0.20 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液中逐滴添加中间体ZY-5的HCl盐 (70 mg, 0.17 mmol)和TEA (0.023 mL, 0.17 mmol)于DCM (0.5mL)中的预制备溶液。将所得混合物在0℃搅拌30 min。在0℃添加中间体AW-2的HCl盐(59.5 mg, 0.266 mmol)于DCM (0.5 mL)和TEA (0.116 mL, 0.833 mmol)中的溶液，将所得溶液在rt 搅拌2 h。然后真空除去溶剂。将残余物溶于DMF (1 mL)，过滤，并通过制备HPLC提纯以得到为白色固体的标题化合物(17 mg)。LC-MS保留时间 = 1.18 min; m/z =603.05 [M+H]+。(起始% B = 0, 最终% B = 100, 梯度时间 = 2 min, 流速 = 1.0 mL/min, 波长 = 220, 溶剂对 =水/乙腈/TFA, 溶剂A = 10%乙腈/90%水/ 0.1% TFA, 溶剂B= 90%乙腈/10%水/0.1% TFA, 柱 = Phenomenex Luna 30 x 2.0 MM 3µm, 柱温 = 40℃)。
实施例BB-9
在0℃下向中间体ZY-5 (150 mg, 0.432 mmol)于DCM (10 mL)中的搅拌溶液中添加氯磺酰异氰酸酯 (0.030 mL, 0.35 mmol)、TEA (0.181 mL, 1.30 mmol)并将反应混合物搅拌30 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶 (78 mg, 0.648 mmol)/DCM (10mL)，接着添加TEA (0.18 mL, 1.3 mmol)并将反应混合物在室温搅拌2 h。将反应混合物浓缩至干；粗物质通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题产物 (7 mg)。LC-MS保留时间 = 1.43 min; m/z = 573.1 [M+H]+。柱: Ascentis Express C18 (50 x 2.1) mm, 2.7μm; 流速: 1.1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B: 含10 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 温度: 50℃; 0% B至100% B经3分钟; UV 检测在220nm。
实施例BB-10
在0℃下向中间体BB-28.2 HCl (150 mg, 0.47 mmol)于DCM (10 mL)中的搅拌溶液中添加氯磺酰异氰酸酯 (0.033 mL, 0.38 mmol)、TEA (0.20 mL, 1.4 mmol)并将反应混合物搅拌30 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶 (84 mg, 0.702 mmol)/DCM(10 mL)，接着添加TEA (0.20 mL, 1.4 mmol)并将反应混合物在室温搅拌2 h。将反应混合物浓缩至干；粗物质通过制备 HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题产物(3 mg)。LC-MS保留时间 = 1.53 min; m/z =546.2 [M+H]+。柱: Ascentis Express C18 (50 x 2.1) mm,2.7 μm; 流速: 1.1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM NH4OAc的水: ACN (95:5); 流动相 B:含10 mM NH4OAc的水: ACN (5:95); 温度: 50℃; 0% B至100% B经3 min; UV 检测在220nm。
实施例VN-16
向中间体VN-29 (0.050 g, 0.11 mmol)和N,N-二甲基磺酰胺 (0.015 g, 0.12 mmol)于乙腈 (1 mL)中的溶液中添加DBU (0.018 mL, 0.12 mmol)。将反应在~25℃下在氮气下搅拌45 min。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯以得到标题化合物(33.0 mg)。LC-MS保留时间 = 1.400 min; m/z = 497.9[M+H]+。(柱: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A:5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃;梯度: 0-100% B经3分钟, 然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV220 nm)。
实施例VN-17
向中间体VN-29 (0.060 g, 0.13 mmol)和中间体VN-17.5 (0.028 g, 0.14 mmol)于乙腈 (2 mL)中的混合物中添加 DBU (0.021 mL, 0.14 mmol)。将反应在~25℃下搅拌3.5h。添加另一等量的DBU (0.021 mL, 0.14 mmol)并将反应在40℃加热3.5 h。将反应从热移除并真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯以得到标题化合物 (21.3 mg); LC-MS保留时间 = 1.348 min; m/z = 573.9 [M+H]+。(柱: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度:0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例GW-14
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(37 mg, 0.26 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液中添加中间体GW-13.2 (100 mg, 0.26 mmol)和TEA (0.11 mL, 0.79 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌2 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (48 mg, 0.39mmol)于DCM (2 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.15 mL, 1.1 mmol)，移除水浴并继续在rt搅拌2 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于DMF并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(31.4 mg)。LC-MS保留时间 = 3.06 min; m/z = 554.16 [M+Na]+。(柱: Phenomenex-Luna2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90%MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例GW-15
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(25 mg, 0.18 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液中添加中间体GW-14.3 (60 mg, 0.18 mmol) 和TEA (0.040 mL, 0.27 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌20 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (32 mg, 0.27mmol)于DCM (2 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.07 mL, 0.5 mmol)并将反应混合物搅拌2min，移除水浴并继续在rt搅拌2 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于甲醇并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物 (13.7 mg)。LC-MS保留时间 = 3.53 min; m/z = 565.10 [M+H]+。(柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1%TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min,然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-11
向中间体BB-2.3 (80 mg, 0.17 mmol)和中间体BB-1.2盐酸盐 (35 mg, 0.17 mmol)于乙腈 (5 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (40 mg, 0.27 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (15 mL)稀释，用EtOAc (2 x 15 mL)萃取，将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(3mg)。LC-MS保留时间 = 3.32 min; m/z = 558.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm,2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B:含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例GW-16
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(24 mg, 0.17 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液中添加中间体GW-15.3 (70 mg, 0.17 mmol)和TEA (0.07 mL, 0.5 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌2 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (30 mg, 0.25mmol)于DCM (2 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.050 mL, 0.33 mmol)，移除水浴并将反应混合物在rt搅拌2 h。浓缩反应混合物，再溶于DMF并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(4.0 mg). LC-MS保留时间 = 3.13 min; m/z = 573.95 [M+H]+。(柱: Phenomenex-Luna2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90%MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-12
向中间体BB-3.6 (118 mg, 0.251 mmol)于DCM (10 mL)中的搅拌溶液中添加中间体BB-1.2盐酸盐 (50 mg, 0.25 mmol)、DBU (0.076 mL, 0.50 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (15mg)。LC-MS保留时间 = 2.64 min; m/z = 575.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm,2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B:含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-13
向中间体BB-4.3 (110 mg, 0.25 mmol)和中间体BB-1.2 盐酸盐 (50 mg, 0.25mmol)于乙腈 (5 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (57 mg, 0.37 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (15 mL)稀释并用EtOAc (2 x 15 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(18 mg)。LC-MS保留时间 = 1.97 min; m/z = 548.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的98%水/ 2% ACN; 流动相 B:含5 mM NH4OAc的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B 经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例GW-17
向中间体GW-16.1 (60 mg, 0.18 mmol)和N,N-二甲基磺酰胺 (19 mg, 0.15 mmol)于乙腈 (1 mL)中的溶液中添加DBU (0.020 mL, 0.15 mmol)并将反应混合物在rt搅拌1 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于DMF并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(34.7 mg)。LC-MS保留时间 = 4.73 min; m/z = 470.14 [M+H]+。(柱: Phenomenex-Luna 2.0 X 50mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例VN-19和实施例VN-20
向中间体VN-29 (0.060 g, 0.128 mmol)和中间体VN-19.2.1/ VN-19.2.2混合物(0.028 g)于乙腈 (1 mL)中的混合物中添加DBU (0.021 mL, 0.14 mmol)。将反应在~25℃下搅拌1.5 h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯以得到标题化合物：
实施例VN-19 (36.0 mg): LC-MS保留时间 = 1.157 min; m/z = 574.0 [M+H]+。(柱:Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100%B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)
实施例VN-20 (6 mg): LC-MS保留时间 = 1.335 min; m/z = 571.9 [M+H]+。(柱:Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100%B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-14
向中间体BB-5.3 (110 mg, 0.249 mmol)和中间体BB-1.2盐酸盐 (50 mg, 0.25mmol)于乙腈 (5 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (57 mg, 0.37 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (15 mL)稀释并用EtOAc (2 x 15 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(45 mg)。LC-MS保留时间 = 2.61 min; m/z = 548.2 [M+H]+. 柱: KINETIX XB-C18,75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含5 mM HCO2NH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含5 mM HCO2NH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-15
向中间体BB-6.4 (30 mg, 0.067 mmol)和中间体BB-1.2盐酸盐(18.88 mg, 0.080mmol)于乙腈 (4 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.015 mL, 0.100 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。然后反应混合物用水 (15 mL)稀释并用EtOAc (2 x 15 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(2.3 mg)。LC-MS保留时间 = 1.73 min; m/z = 555.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测:
实施例VN-21
向中间体VN-29 (0.050 g, 0.11 mmol)和二乙基磺酰胺 (0.018 g, 0.12 mmol)于乙腈 (1 mL)中的混合物中添加DBU (0.018 mL, 0.12 mmol)。反应混合物在~25℃下搅拌2h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯以得到标题化合物(47.5 mg)。LC-MS保留时间 = 1.643 min; m/z = 526.0 [M+H]+。(柱:Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100%B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例VN-22
向中间体VN-29 (0.050 g, 0.11 mmol)和吡咯烷-1-磺酰胺 (0.018 g, 0.12 mmol)于乙腈 (1 mL)中的混合物中添加DBU (0.018 mL, 0.12 mmol)。将反应在~25℃下搅拌2h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯以得到标题化合物 (45.8 mg)。LC-MS保留时间 = 1.517 min; m/z = 524.0 [M+H]+。(柱:Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100%B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例VN-23
向中间体VN-29 (0.050 g, 0.11 mmol)和吗啉-4-磺酰胺 (0.020 g, 0.12 mmol)于乙腈 (1 mL)中的溶液中添加DBU (0.018 mL, 0.12 mmol)。将反应在~25℃搅拌2 h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备 HPLC (AcCN/水/NH4OAc) 提纯和通过制备HPLC (MeOH/水/NH4OAc)再提纯以得到标题化合物(44.7 mg). LC-MS保留时间 =1.267 min; m/z = 540.0 [M+H]+。(柱: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm,1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速:1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例VN-24
向中间体VN-29 (0.033 g, 0.070 mmol) 和哌啶-1-磺酰胺 (0.013 g, 0.077 mmol)于乙腈 (1 mL)中的混合物中添加DBU (0.012 mL, 0.077 mmol)。将反应在~25℃搅拌2.5h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯以得到标题化合物(27.9 mg)。LC-MS保留时间 = 1.623 min; m/z = 538.0 [M+H]+。(柱:Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100%B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-16
在室温下向中间体BB-7.3 (0.050 g, 0.11 mmol)、中间体BB-1.2 盐酸盐 (0.024 g,0.12 mmol)于乙腈 (1 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.025 mL, 0.16 mmol)并搅拌16 h。反应混合物用水 (15 mL)稀释并用EtOAc ( 3 x 10 mL)萃取。合并的有机层用水 (15mL)、盐水(15 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过 combiflash色谱法 (4gRedisep® SiO2 柱, 用2.5% MeOH/CHCl3洗脱)、接着通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(4.7 mg)。LC-MS保留时间 = 2.81 min; m/z = 564.2 [M+H]+。柱:KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-17
向中间体BB-8.4 (0.050 g, 0.11 mmol)和中间体BB-1.2盐酸盐(0.025 g, 0.12mmol)于乙腈 (1 mL)中的溶液中添加DBU (0.026 mL, 0.17 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (40 mL)稀释并用EtOAc (3 x 20 mL)萃取。合并的有机层用水(20 mL)、盐水 (20 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤和浓缩。粗产物通过combiflash色谱法(4gRedisep® SiO2 柱, 用2.5% MeOH/CHCl3洗脱)、接着制备HPLC 提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (6 mg)。LC-MS保留时间 = 1.92 min; m/z = 548.2 [M+H]+。柱: KINETIXXB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-18
向中间体BB-9.6 (100 mg, 0.221 mmol)和中间体BB-1.2盐酸盐 (43.9 mg, 0.221mmol)于乙腈 (4 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.066 mL, 0.44 mmol)，将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释和用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤和浓缩。粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(25 mg)。LC-MS保留时间 = 1.67 min; m/z = 559.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/2% ACN; 流动相B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-19
向中间体BB-10.4 (100 mg, 0.227 mmol) 和中间体BB-1.2盐酸盐 (45.1 mg, 0.227mmol)于乙腈 (4 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.068 mL, 0.45 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。合并的有机层用1.5N HCl溶液 (25 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (29 mg)。LC-MS保留时间 = 1.31 min; m/z = 547.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mMHCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100%B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例VN-25
向中间体VN-29 (0.050 g, 0.11 mmol)和磺酰二胺(sulfuric diamide)(0.011 g,0.12 mmol)于乙腈 (1 mL)中的溶液中添加DBU (0.018 mL, 0.12 mmol)。将反应在~25℃下搅拌3.5 h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯以得到标题化合物 (47.7 mg)。LC-MS保留时间 = 1.29 min; m/z = 469.9[M+H]+。(柱: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A:5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃;梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV220 nm)。
实施例BB-20
向中间体BB-11.3 (110 mg, 0.249 mmol)和中间体BB-1.2盐酸盐 (50 mg, 0.25mmol) 于乙腈 (5 mL)中的溶液中添加DBU (57 mg, 0.37 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。然后反应混合物用水 (15 mL)稀释并用EtOAc (2 x 15 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤和浓缩。粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(110 mg)。LC-MS保留时间 = 2.16 min: m/z = 564.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18,75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含0.1 %甲酸的水; 流动相 B: ACN; 5%B至40% B经3分钟，然后在100% B保持0.5分钟，流速 1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例GW-18
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(23 mg, 0.17 mmol) 于DCM (1 mL)中的溶液中添加中间体GW-17.2 (60 mg, 0.17 mmol)和DIPEA (0.06 mL, 0.33 mmol) 于DCM (1 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌2 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (30 mg, 0.25mmol)于DCM (1 mL)中的溶液，接着添加DIPEA (0.1 mL, 0.66 mmol)并将反应混合物搅拌2 min。移除水浴，反应混合物在rt搅拌2 h，浓缩，将残余物再溶于DMF并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物 (9.9 mg). LC-MS保留时间 = 2.54 min; m/z = 517.20 [M+H]+。(柱:Phenomenex C18 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例GW-19
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(22 mg, 0.16 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液中添加中间体GW-18.3 (70 mg, 0.15 mmol)和DIPEA (0.05 mL, 0.3 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌2 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (28.0 mg, 0.233mmol)于DCM (2 mL)中的溶液，接着添加 DIPEA (0.11 mL, 0.62 mmol)并将反应混合物搅拌2 min，移除水浴并继续在rt 搅拌2 h。浓缩反应混合物并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物 (19.4 mg)。LC-MS保留时间 = 3.37 min; m/z = 603.20 [M+H]+。(柱:Phenomenex C18 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例GW-20
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(27 mg, 0.19 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液中添加中间体GW-19.3 (75 mg, 0.19 mmol)和DIPEA (0.07 mL, 0.4 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌2 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (35 mg, 0.29mmol)于DCM (2 mL)中的溶液，接着添加DIPEA (0.13 mL, 0.77 mmol)并将反应混合物搅拌2 min，移除水浴并继续搅拌1 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于DMF并通过制备 HPLC提纯以得到标题化合物 (19.9 mg)。LC-MS保留时间 = 2.64 min; m/z = 545.20 [M+H]+。(柱: Phenomenex C18 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1%TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min,然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例AW-3
在0℃下向0.1 M 氯磺酰异氰酸酯于DCM中的溶液 (2.28 mL, 0.228 mmol) 中逐滴添加中间体AW-3的HCl盐 (80 mg, 0.21 mmol) 和TEA (0.029 mL, 0.21 mmol)于DCM (0.5mL)中的预制溶液。将反应混合物在0℃搅拌30 min。然后添加 4,4-二氟哌啶, HCl (49.0mg, 0.311 mmol)和TEA (0.144 mL, 1.04 mmol)于DCM (0.5 mL)中的溶液，移除冷浴并将所得溶液在rt 搅拌1 h。真空除去溶剂，将残余物溶于DMF (1 mL)，过滤并通过制备HPLC提纯以得到为白色固体的标题化合物 (45 mg)。LC-MS保留时间 = 1.86 min; m/z = 565.15[M+H]+。(起始% B = 0, 最终% B = 100, 梯度时间 = 2 min, 流速 = 1.0 mL/min, 波长= 220, 溶剂对 =水/乙腈/TFA, 溶剂A = 10%乙腈/90%水/ 0.1% TFA, 溶剂B = 90%乙腈/10%水/0.1% TFA, 柱 = Phenomenex Luna 30 x 2.0 MM 3µm, 柱温 = 40℃)。
实施例AW-4
向哌啶-1-磺酰胺 (16 mg, 0.097 mmol)于乙腈 (1 mL)中的溶液中添加DBU (0.018mL, 0.12 mmol) 并将混合物在rt 搅拌10 min。然后加入中间体AW-4 (45 mg, 0.097mmol)并继续在rt搅拌2 h。然后真空除去溶剂，将残余物溶于DMF (1 mL)，过滤并通过制备HPLC提纯以得到为白色固体的标题化合物(26 mg)。LC-MS保留时间 = 1.86 min; m/z =529.20 [M+H]+。(起始% B = 0, 最终% B = 100, 梯度时间 = 2 min, 流速 = 1.0 mL/min, 波长 = 220, 溶剂对 =水/乙腈/TFA, 溶剂A = 10%乙腈/90%水/ 0.1% TFA, 溶剂B= 90%乙腈/10%水/0.1% TFA, 柱 = Phenomenex Luna 30 x 2.0 MM 3 µm, 柱温 = 40℃)。
实施例BB-21
向中间体BB-28.3 (50 mg, 0.114 mmol)和(S)-N,N-二甲基-1-氨磺酰基吡咯烷-2-甲酰胺盐酸盐 (29.3 mg, 0.114 mmol)于乙腈 (4 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.04 mL,0.227 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。然后反应混合物用水 (15 mL)稀释并用EtOAc (2 x 15 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (10 mg)。LC-MS保留时间 = 2.15 min; m/z= 568.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A:含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20%B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-22
向中间体VN-29 (50 mg, 0.107 mmol)和 (S)-N,N-二甲基-1-氨磺酰基吡咯烷-2-甲酰胺盐酸盐 (27.6 mg, 0.107 mmol)于乙腈 (4 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.032 mL,0.214 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。然后反应混合物用水 (15 mL)稀释并用EtOAc (2 x 15 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (4.5 mg)。LC-MS保留时间 = 1.62 min; m/z =595.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A:含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4 的2%水/ 98% ACN; 20%B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例VN-26
在0℃下在氮气下经1分钟向氯磺酰异氰酸酯(0.021 mL, 0.24 mmol)于CH2Cl2 (0.5mL)中的溶液中逐滴添加中间体ZY-5的HCl盐 (0.1 g, 0.2 mmol)和三乙胺 (0.033 mL,0.24 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液。将反应从冷浴中移除并在~25℃在氮气下搅拌30min，然后冷却至0℃，经1分钟逐滴添加 (S)-吡咯烷-3-醇盐酸盐 (0.044 g, 0.36 mmol)和三乙胺 (0.166 mL, 1.19 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的悬浮液。将反应从冷浴移除并在~25℃搅拌4.5 h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备 HPLC (AcCN/水/NH4OAc)提纯和再提纯(MeOH/水/NH4OAc) 以得到标题化合物 (5.6 mg)。LC-MS保留时间= 1.682 min; m/z = 539.9 [M+H]+。(柱: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-23
向中间体BB-12.4 (50 mg, 0.106 mmol)和中间体BB-1.2盐酸盐 (21.2 mg, 0.106mmol)于乙腈 (4 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.016 mL, 0.106 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。然后反应混合物用水 (15 mL)稀释并用EtOAc (2 x 15 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(5.2 mg)。LC-MS保留时间 = 2.12 min; m/z = 575.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例VN-27
在0℃在氮气下经1分钟向氯磺酰异氰酸酯(0.025 mL, 0.29 mmol)于CH2Cl2 (0.5mL)中的溶液中逐滴添加中间体ZY-5的HCl盐 (0.10 g, 0.2 mmol)和三乙胺 (0.033 mL,0.24 mmol)于CH2Cl2 (1 mL)中的溶液。将反应从冷浴移除并在~25℃在氮气下搅拌 35min，然后冷却至0℃，并经1分钟用 (R)-吡咯烷-3-醇(0.031 g, 0.357 mmol) 和三乙胺(0.166 mL, 1.190 mmol)于CH2Cl2 (1 mL) 中的溶液逐滴处理。然后将反应从冷浴移除并在~25℃在氮气下搅拌1.5 h。真空除去全部溶剂。将残余物溶于MeOH (2 mL)并通过制备HPLC (ACN/水/NH4OAc)提纯以得到标题化合物 (13.6 mg)。LC-MS保留时间 = 1.275 min;m/z = 540.0 [M+H]+。(柱: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒;流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水;温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min;检测: UV 220 nm)。
实施例VN-28
向中间体VN-29 (0.050 g, 0.11 mmol)和中间体VN-28.1 (0.016 g, 0.118 mmol)于乙腈 (1 mL)中的混合物中添加DBU (0.018 mL, 0.12 mmol)。将反应混合物在~25℃搅拌3h。反应用乙腈 (1 mL)稀释并通过制备HPLC (AcCN/水/NH4OAc) 提纯以得到标题化合物(9.3 mg)。LC-MS保留时间 = 1.579 min; m/z = 510.0 [M+H]+。(柱: Waters AcquityUPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水;流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-24
向中间体BB-14.6 (100 mg, 0.211 mmol) 于乙腈 (5 mL)中的搅拌溶液中添加中间体BB-1.2 盐酸盐(42.0 mg, 0.211 mmol) 和DBU (0.048 mL, 0.32 mmol)并将反应混合物在室温搅拌3 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(25 mg)。LC-MS保留时间 = 1.83min; m/z = 580.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18,75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-25
向实施例ZY-1 (80 mg, 0.14 mmol)于乙腈 (10 mL)中的溶液中添加Na2CO3 (14.81mg, 0.14 mmol)，接着添加碘甲烷 (0.04 mL, 0.7 mmol)并将所得反应在室温搅拌16 h。反应混合物用水淬灭，用DCM (2 x 25 mL)萃取，将合并的有机层干燥(Na2SO4)，蒸发，粗产物通过HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(10 mg)。LC-MS保留时间 = 3.27 min;m/z = 587.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 0.7 mL/min; 流动相 A: 含5 mM NH4OAc的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含5 mM NH4OAc的2%水/ 98% ACN;20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220nm。
实施例BB-26
向中间体VN-29 (75 mg, 0.160 mmol)和(R)-N,N-二甲基-1-氨磺酰基吡咯烷-2-甲酰胺盐酸盐 (41.3 mg, 0.160 mmol)于乙腈 (4 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.048 mL,0.32 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。然后反应混合物用水 (15 mL)稀释并用EtOAc (2 x 15 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤和浓缩。粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(4.5 mg)。LC-MS保留时间 = 1.70 min; m/z= 595.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A:含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20%B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-27
向中间体BB-28.3 (75 mg, 0.17 mmol)和(R)-N,N-二甲基-1-氨磺酰基吡咯烷-2-甲酰胺盐酸盐(43.9 mg, 0.170 mmol)于乙腈 (4 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.034 mL,0.34 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。然后反应混合物用水 (15 mL)稀释并用EtOAc (2 x 15 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(4.5 mg)。LC-MS保留时间 = 1.94 min; m/z =568.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A:含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20%B 至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例CA-122至CA-158
通用实验程序
在0℃下向氯磺酰异氰酸酯(750 μL, 8.5 mmol)于DCM (8.5 mL)中的溶液中逐滴添加中间体ZY-5的HCl盐 (1.4 g, 3.4 mmol)和TEA (950 μL, 6.8 mmol)于DCM (17 mL)中的溶液。将反应混合物在氮气下在0℃下搅拌5分钟，之后添加三乙胺(2.1 mL, 15 mmol)于DCM (8.5 mL)中的溶液。然后将一部分(1.0 mL, 0.10 mmol)上述反应混合物添加到氨输入 (0.20 mmol)于DCM (0.25 mL)中的溶液中，密封反应容器并将其在rt震摇1 h。反应混合物然后用MeOH (0.5 mL)稀释，浓缩至干，溶于DMF (1 mL)，过滤并通过制备 HPLC提纯以得到下表中的实施例(CA-122至CA-158)。
*QC-ACN-TFA-XB - 柱: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm颗粒; 流动相 A: 5:95乙腈:含0.1%三氟乙酸的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含0.1% 三氟乙酸的水; 温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0mL/min; 检测: UV 220 nm。
*QC-ACN-AA-XB - 柱: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm颗粒;流动相 A: 5:95乙腈:含10 mM乙酸铵的水; 流动相 B: 95:5乙腈:含10 mM乙酸铵的水;温度: 50℃; 梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100% B保持0.75分钟; 流速: 1.0 mL/min;检测: UV 220 nm
注: 如果上表中的质量值下直接存在“TFA”，则制备HPLC提纯利用了TFA缓冲的洗脱剂，但未测定最终产物的精确TFA组成。
实施例GW-21
向冰水浴中的氯磺酰异氰酸酯(15 mg, 0.11 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液中添加中间体GW-20.5 (40 mg, 0.11 mmol)和TEA (0.018 mL, 0.11 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液。将反应混合物搅拌1 min，然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (19 mg, 0.16mmol)于DCM (1 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.04 mL, 0.21 mmol)并将反应混合物搅拌2min。然后将水浴移除并继续在rt搅拌2 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于DMF并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(17.3 mg)。LC-MS保留时间 = 3.03 min; m/z = 605.20 [M+H]+。(柱: Phenomenex C18 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-28 & 实施例BB-29
向中间体VN-29 (100 mg, 0.21 mmol)、中间体BB-16.5 (57.8 mg, 0.21 mmol)于乙腈 (5 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (49 mg, 0.32 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16h。然后反应混合物用水 (15 mL)稀释并用EtOAc (2 x 15 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到标题化合物的两种非对映异构体：实施例BB-28(22 mg), 灰白色固体，和实施例BB-29 (4 mg)，灰白色固体。
实施例BB-28: LC-MS保留时间 = 1.25 min m/z = 644.2 [M+H]+。柱: KINETIXXB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCO2NH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCO2NH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-29: LC-MS保留时间 = 1.26 min m/z = 644.2 [M+H]+。柱: KINETIXXB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCO2NH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCO2NH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例GW-22
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(17 mg, 0.12 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液中添加中间体GW-21.3 (45 mg, 0.12 mmol)和TEA (0.02 mL, 0.1 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液并将反应混合物搅拌2 min。然后添加 2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (22 mg, 0.18mmol)于DCM (1 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.040 mL, 0.25 mmol)，移除水浴并继续在rt 搅拌18 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于DMF并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(4.8 mg)。LC-MS保留时间 = 2.37 min; m/z = 591.25 [M+H]+. (柱: Phenomenex C182.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90%MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-30
向中间体BB-17.4和中间体BB-1.2盐酸盐 (0.019 g, 0.095 mmol)于乙腈 (1mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.020 mL, 0.13 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (20 mL)稀释，用EtOAc (3 x 20 mL)萃取，合并的有机层用盐水(40 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤和浓缩。粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(5.76mg)。LC-MS保留时间 = 1.02 min; m/z = 568.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm,2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4 的98%水/ 2% ACN; 流动相 B:含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例GW-23
在冰水浴中向氯磺酰异氰酸酯(20.2 mg, 0.142 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液中添加中间体GW-22.4的HCl盐 (60 mg, 0.14 mmol)和TEA (0.050 mL, 0.29 mmol)于DCM (1mL)中的溶液并将反应混合物搅拌1 min。然后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶 (26mg, 0.21 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液，接着添加TEA (0.08 mL, 0.43 mmol)，移除水浴并继续在rt 搅拌3 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于DMF并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(1.5 mg)。LC-MS保留时间 = 3.46 min; m/z = 574.22 [M+H]+。(柱:Phenomenex-Luna 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒; 流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA;流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例GW-24
将中间体ZY-5 (39 mg, 0.09 mmol)和TEA (0.030 mL, 0.18 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液添加到氯磺酰异氰酸酯的溶液(0.09 M于DCM中, 1 mL, 0.09 mmol)中并将反应混合物密封和搅拌1 min。然后添加中间体GW-23.5 (20 mg, 0.14 mmol)于DCM (1 mL)中的溶液，接着添加 TEA (0.050 mL, 0.28 mmol)，移除水浴并继续在rt搅拌 2 h。浓缩反应混合物，将残余物再溶于DMF并通过制备HPLC提纯以得到标题化合物(1.4 mg)。LC-MS保留时间 = 3.10 min; m/z = 599.10 [M+H]+。(柱: Phenomenex C18 2.0 X 50 mm, 3 μm颗粒;流动相 A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA; 流动相 B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA; 温度: 40℃; 梯度: 0-100% B经4 min, 然后在100%B保持1分钟; 流速: 0.8 mL/min; 检测: UV 220 nm)。
实施例BB-31
向中间体BB-28.3 (80 mg, 0.18 mmol)和中间体BB-1.2盐酸盐 (39.8 mg, 0.200mmol)于乙腈 (2 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.041 mL, 0.27 mmol)，将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释，用EtOAc (2 x 25 mL)萃取，将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (13.6 mg)。LC-MS保留时间 =1.49 min; m/z = 546.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18,75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-32
向中间体BB-18.4 (120 mg, 0.25 mmol)和中间体BB-1.2盐酸盐 (62 mg, 0.31mmol)于乙腈 (10 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.08 mL, 0.5 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。然后反应混合物用水(15 mL)稀释并用EtOAc (2 x 15 mL)萃取。将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (2.26 mg)。LC-MS保留时间 = 1.81 min; m/z = 572.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-33
向吡咯烷-2-酮 (50 mg, 0.59 mmol)于THF (10 mL)中的溶液中添加N-甲基-N-(三甲基甲硅烷基)三氟乙酰胺 (0.33 mL, 1.8 mmol)，将反应混合物在室温搅拌1 h并在减压下缓慢蒸发30分钟以得到残余物。将中间体ZY-5 (204 mg, 0.588 mmol)/DCM (1 mL)冷却至0℃，然后添加氯磺酰异氰酸酯(0.052 mL, 0.588 mmol)，接着添加上述残余物的THF (5mL)溶液并搅拌16 h。反应混合物用水稀释并用10% MeOH/ DCM (2 x 50 mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(55 mg)。LC-MS保留时间 = 1.11 min; m/z = 538.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4 的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-34
向中间体BB-19.4 (85 mg, 0.15 mmol)和中间体BB-1.2盐酸盐(34.6 mg, 0.174mmol)于乙腈 (3 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.033 mL, 0.22 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释，用EtOAc (2 x 25 mL)萃取，将合并的有机层干燥 (Na2SO4)，过滤和浓缩。粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (12.17 mg)。LC-MS保留时间 = 2.08 min; m/z = 693.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2%ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-35
向中间体BB-20.3 (100 mg, 0.210 mmol)和中间体BB-1.2盐酸盐 (41.8 mg, 0.210mmol)于乙腈 (4 mL)中的搅拌溶液中添加DBU (0.063 mL, 0.42 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释并用EtOAc (2 x 25 mL)萃取。合并的有机层用1.5N HCl溶液 (25 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤和浓缩。粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物(28 mg)。LC-MS保留时间 = 1.73 min; m/z = 582.2 [M+]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mMHCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100%B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-36
向中间体BB-20.3 (100 mg, 0.210 mmol)于乙腈 (5 mL)中的搅拌溶液中添加中间体BB-27.2的TFA盐 (55.9 mg, 0.210 mmol)和DBU (0.095 mL, 0.630 mmol)并将反应混合物在室温搅拌 16 h。反应混合物用DCM (20 mL)稀释，用水 (20 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤，浓缩，粗物质通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题产物 (35 mg)。LC-MS保留时间 = 2.68 min; m/z = 535.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mM HCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mMHCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100% B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5mL/min; 检测: UV 220 nm。
实施例BB-37
向中间体BB-20.3 (50 mg, 0.11 mmol)和DBU (0.016 mL, 0.11 mmol)于乙腈 (2mL)中的搅拌溶液中添加二甲基氨磺酰胺 (0.020 g, 0.16 mmol)并将反应混合物在室温搅拌16 h。反应混合物用水 (25 mL)稀释并用 EtOAc (2 x 25 mL)萃取。合并的有机层用1.5N HCl溶液(25 mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤和浓缩。粗产物通过制备HPLC提纯以得到为灰白色固体的标题化合物 (17 mg)。LC-MS保留时间 = 2.07 min; m/z = 507.2 [M+H]+。柱: KINETIX XB-C18, 75x3 mm, 2.6 μm; 流速: 1 mL/min; 流动相 A: 含10 mMHCOONH4的98%水/ 2% ACN; 流动相 B: 含10 mM HCOONH4的2%水/ 98% ACN; 20% B至100%B经4 min, 然后在100% B保持0.6分钟，流速1.5 mL/min; 检测: UV 220 nm。
生物学方法
HIV细胞培养测定 - MT-2细胞、293T细胞和NL4-3病毒的前病毒DNA克隆获自NIH AIDSResearch and Reference Reagent Program。MT-2细胞在补充有10%的热灭活胎牛血清（FBS）、100 μg/ml青霉素G和最高100单位/毫升链霉素的RPMI 1640培养基中增殖。293T细胞在补充有10%热灭活FBS、100 μg/mL青霉素G和100 μg/mL链霉素的DMEM培养基中增殖。重组NL4-3前病毒克隆（其中nef基因片段由海肾荧光素酶基因替代）用于制备这些研究中使用的参照病毒。该重组病毒通过使用来自Mirus Bio LLC（Madison, WI）的Transit-293转染试剂将重组NL4-3前病毒克隆转染到293T细胞中来制备。在2-3天后收获上清液（Supernatent），使用荧光素酶活性作为标记通过测量荧光素酶活性在MT-2细胞中滴定存在的病毒量。使用来自Promega（Madison, WI）的EnduRen活细胞底物量化荧光素酶。化合物针对该重组病毒的抗病毒活性通过测量在该化合物的连续稀释液的存在下用该重组病毒感染4-5天的MT-2细胞中的荧光素酶活性来量化。
通过使用其中(Fa) = 1/[1+ (ED50/药物浓度)m]的中效方程的指数形式来计算50%有效浓度（EC50）（Johnson VA, Byington RT. Infectivity Assay，在Techniques in HIV Research中，编辑Aldovini A, Walker BD. 71-76. New York: StocktonPress.1990）。
除使用未感染的细胞之外，使用如抗病毒测定中所述的相同的方案来测定化合物细胞毒性和相应的CC50值。通过使用基于XTT（2,3-双[2-甲氧基-4-硝基-5-磺苯基]-2H-四唑鎓-5-甲酰苯胺内盐）的比色测定法（Sigma-Aldrich, St Louis, Mo）在未感染的MT2细胞中在第4天评估细胞毒性。
如下表1中所示，化合物展现了抗病毒活性。等于A的活性是指化合物具有EC50 <100 nM，而B和C表示化合物具有100 nM至1μM之间(B)或>1μM (C)的EC50。
表1
本公开不限于前述说明性实施例，且实施例应当在所有方面视为说明性的而非限制性的，参考所附权利要求，而非前述实施例，并且落在与权利要求等效的含义和范围内的所有变化因此旨在涵盖于其中。

Claims (20)

1.式I化合物，包括其药学上可接受的盐：
其中：
R1a和R1b各自独立地选自氢、烷基、芳基、芳基烷基、芳氧基芳基、环烷基、杂环基、杂环基烷基和-烷基CO(Rx)；其中所述杂环基通过碳原子连接到母体分子上，且进一步地其中所述R1a和R1b基团被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、芳基烷基、芳氧基、羧酸、氰基、环烷基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、杂环基、杂环基烷基、羟基、羟基烷基、巯基、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、CO(Rx)、-CON(Ry)2、-NHCON(Ry)2、-NHCO-烷基、-NHCO2烷基、-NHSO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；或
R1a和R1b与它们所连接的氮原子一起形成杂环，所述杂环被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、羧酸、氰基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、巯基、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、-CO(Rx)、-CON(Ry)2、-N(Ry)CON(Ry)2、-N(Ry)CO-烷基、-N(Ry)CO2烷基、-N(Ry)SO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；
R2是-H、C1-C4烷基或C3-C4环烷基；
R3是-H、C1-C4烷基或C3-C4环烷基；
R4是-H、烷基、芳基、C5-C10双环烷基、C3-C7环烷基或杂芳基，所述基团具有0-4个独立地选自以下的基团：烯氧基、烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、苄氧基、甲酰胺、氰基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、-NHCO(烷基)、-SO2(Rx)、-OH和-CH2OH；
R5和R6独立地是H或烷基，或R5和R6与它们所连接的原子一起形成C3-C4环烷基；
R7是-H、烷基、芳基、杂环基或C3-C7环烷基，其中所述芳基或杂环基被0-3个选自以下的基团取代：-OH、-NHCO烷基、-NHCON(烷基)2、-NHCO2-烷基、-CONH2、-CN、-SO2N(烷基)2、烷氧基、烷基、卤素、卤代烷氧基和卤代烷基；
R8是-H、烷基、环烷基、卤代烷基、卤代环烷基烯基或芳氧基烷基；
或R7和R8与它们所连接的氮原子一起形成杂环，所述杂环被0-4个独立地选自以下的基团取代：-OH、-NHCO烷基、-NHCON(烷基)2、-NHCO2-烷基、-CONH2、-CN、-SO2N(烷基)2、烷氧基、烷基、卤素、卤代烷氧基和卤代烷基；
Rx是二烷基胺或通过氮原子连接至母体片段的含氮杂环；且
各Ry独立地是氢、烷基、卤代烷基或芳基。
2.权利要求1所述的化合物，其中R1a和R1b各自独立地选自氢、烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和-烷基CO(Rx)，其中所述杂芳基通过碳原子连接至母体结构。
3.权利要求2所述的化合物，其中R1a和R1b各自独立地选自氢、烷基、苯基、联苯基、萘、二氢化茚、吡啶、嘧啶、喹啉、异喹啉、苯并噻唑、苯并咪唑、1,3-二氢苯并[c]噻吩 2,2-二氧化物、-CH2CO(Rx)和与任一下列基团连接的烷基基团：苯基、联苯基、吡啶基、喹啉、苯并咪唑、咪唑、异噻唑、吡唑、噻唑、吲唑、三唑和三唑酮。
4.权利要求2所述的化合物，其中R1a和R1b各自独立地被至少一个选自以下的成员取代：烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤素、苯基、噻唑、吡唑、苯氧基、噁唑、吡咯、苄氧基、吡啶基烷基、氨基甲酸甲酯、氰基、乙酰胺、吗啉-4-基磺酰基、吡咯烷-1-基磺酰基、哌啶-1-基磺酰基、-NHSO2Me、-CONH2、-NHCONMe2和-COCH3。
5.权利要求3所述的化合物，其中R1a 和R1b各自独立地被至少一个选自以下的成员取代：烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤素、苯基、噻唑、吡唑、苯氧基、噁唑、吡咯、苄氧基、吡啶基烷基、氨基甲酸甲酯、氰基、乙酰胺、吗啉-4-基磺酰基、吡咯烷-1-基磺酰基、哌啶-1-基磺酰基、-NHSO2Me、-CONH2、-NHCONMe2和-COCH3。
6.权利要求1所述的化合物，其中R1a 和R1b与它们所连接的氮一起形成杂环，且其中所述杂环具有1-3个环，所述环具有总共4-14个碳原子和至少一个内部氮原子以及任选地至少一个选自氧和硫的原子。
7.权利要求6所述的化合物，其中所形成的杂环选自四氢喹啉、氮杂四氢喹啉、二氮杂四氢喹啉、四氢异喹啉、吲哚啉、氮杂吲哚啉、二氮杂吲哚啉、吲哚、氮杂吲哚、二氮杂吲哚、吲唑、咔唑、氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、哌嗪、吗啉、2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶、2,3-二氢苯并[d]异噻唑 1,1-二氧化物、1H-吡唑并[4,3-c]吡啶、3,4-二氢-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪和螺[环丙烷-1,3'-吲哚啉]。
8.权利要求6所述的化合物，其中所形成的杂环被至少一个选自以下的成员取代：苯基、氨基烷基、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、卤素、羟基、吡啶、磺酰基烷基、-CO2NMe2和氰基。
9.权利要求7所述的化合物，其中所形成的杂环被至少一个选自以下的成员取代：苯基、氨基烷基、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、卤素、羟基、吡啶、磺酰基烷基、-CO2NMe2和氰基。
10.权利要求2所述的化合物，其中所述R1a和R1b的至少一个是苯基。
11.权利要求10所述的化合物，其中所述苯基被至少一个选自以下的成员取代：烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤素、苯基、噻唑、吡唑、苯氧基、噁唑、吡咯、苄氧基、吡啶基烷基、氨基甲酸甲酯、氰基、乙酰胺、吗啉-4-基磺酰基、吡咯烷-1-基磺酰基、哌啶-1-基磺酰基、-NHSO2Me、-CONH2、-NHCONMe2和-COCH3。
12.组合物，其包含权利要求1所述的化合物和药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。
13.治疗HIV 感染的方法，其包括向患者给药治疗有效量的权利要求1所述的化合物。
14.式II化合物，包括其药学上可接受的盐：
其中：
R1a和R1b各自独立地选自氢、烷基、芳基、芳基烷基、芳氧基芳基、环烷基、杂环基、杂环基烷基和-烷基CO(Rx)；其中所述杂环基通过碳原子连接到母体分子上，且进一步地其中所述R1a和R1b基团被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、芳基烷基、芳氧基、羧酸、氰基、环烷基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、杂环基、杂环基烷基、羟基、羟基烷基、巯基、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、CO(Rx)、-CON(Ry)2、-NHCON(Ry)2、-NHCO-烷基、-NHCO2烷基、-NHSO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；或
R1a和R1b 与它们所连接的氮原子一起形成杂环，所述杂环被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、羧酸、氰基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、巯基、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、-CO(Rx)、-CON(Ry)2、-N(Ry)CON(Ry)2、-N(Ry)CO-烷基、-N(Ry)CO2烷基、-N(Ry)SO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；
R2是-H、C1-C2烷基或C3-C4环烷基；
R3是-H或C1-C4烷基；
R4是芳基、C5-C10双环烷基、C3-C7 环烷基或杂芳基，所述基团具有0-4个独立地选自以下的基团：烷氧基、烷基、氰基、卤素、卤代烷基和卤代烷氧基；
R7是芳基、杂环基或C3-C7环烷基，其中所述芳基或杂环基被0-3个选自以下的基团取代：-OH、-NHCO烷基、-NHCON(烷基)2、-NHCO2-烷基、-CONH2、-CN、-SO2N(烷基)2、烷氧基、烷基、卤素、卤代烷氧基和卤代烷基；
R8是烷基、环烷基、卤代烷基、卤代环烷基烯基或芳氧基烷基；
Rx是二烷基胺或通过氮原子连接至母体片段的含氮杂环；和
各Ry独立地是氢、烷基、卤代烷基或芳基。
15.权利要求14所述的化合物，其中R2和R3各自是-H。
16.权利要求14所述的化合物，其中R4是芳基。
17.式III化合物，包括其药学上可接受的盐；
其中：
R1a和R1b各自独立地选自氢、烷基、芳基、芳基烷基、芳氧基芳基、环烷基、杂环基、杂环基烷基和-烷基CO(Rx)；其中所述杂环基通过碳原子连接到母体分子上，且进一步地其中所述R1a和R1b基团被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、芳基烷基、芳氧基、羧酸、氰基、环烷基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、杂环基、杂环基烷基、羟基、羟基烷基、巯基、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、CO(Rx)、-CON(Ry)2、-NHCON(Ry)2、-NHCO-烷基、-NHCO2烷基、-NHSO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；或
R1a和R1b 与它们所连接的氮原子一起形成杂环，所述杂环被0-4个独立地选自以下的基团取代：烯基、烷氧基、烷氧基羰基、烷基、烷基硫基、苄氧基、炔基、芳基、羧酸、氰基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、羟基烷基、巯基、-CH2NH2、-烷基-杂芳基、-CO-烷基、-CO(Rx)、-CON(Ry)2、-N(Ry)CON(Ry)2、-N(Ry)CO-烷基、-N(Ry)CO2烷基、-N(Ry)SO2-烷基、-OCH2-芳基、-SO2-烷基、-SO2-N(Ry)2和-SO2-杂环基；
R2是-H或C1-C2烷基；
R4是芳基或杂芳基，所述基团具有 0-3个独立地选自以下的基团：烷氧基、烷基、氰基或卤素；
R7是芳基、杂环基，其中所述芳基或杂环基被 0-3个选自以下的基团取代：-OH、-NHCO烷基、-NHCON(烷基)2、-NHCO2-烷基、-CONH2、-CN、烷氧基、烷基、卤素、卤代烷氧基和卤代烷基；
R8是烷基、环烷基、卤代烷基、卤代环烷基烯基或苄氧基烷基；
Rx是二烷基胺或通过氮原子连接至母体片段的含氮杂环；且
各Ry独立地是氢、烷基、卤代烷基或芳基。
18.权利要求17所述的化合物，其中R2是-H。
19.权利要求17所述的化合物，其中所述芳基是苯基。
20.权利要求17所述的化合物，其中R8是烷基。
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