CN107974480A - 一种南极磷虾肽制备方法 - Google Patents

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王祖哲
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Abstract

本发明提供了一种南极磷虾肽制备方法。以南极磷虾为原料，经匀浆、酶解、离心操作，得到分层的酶解液，其中游离油层和乳层可以用于提取南极磷虾油。收集水层溶液，加入复合蛋白酶进行二次酶解，酶解液添加氧化钙进行脱氟处理、离心。离心后的清液通过膜分离设备截留大分子物质，滤过液经过减压浓缩，然后进行喷雾干燥得到氟含量低、分子量小的南极磷虾低聚肽粉。本工艺操作简单，得到的南极磷虾肽氟含量低，营养成分破坏小，而且分子量低，人体吸收率高，为开发功能性的低氟南极磷虾低聚肽奠定基础。

Description

一种南极磷虾肽制备方法
技术领域
本发明涉及南极磷虾的深加工技术。
背景技术
南极磷虾是地球上数量最大，繁衍最成功的单种生物资源之一。据统计，南极磷虾的生物量约1.25～7.25亿吨，年可捕捞量在1300万吨以上，是重要的潜在渔业资源。我国自2009年开始对南极磷虾进行探捕，2013年的捕捞量已超过2万吨，南极磷虾资源开发已上升为国家战略。
南极磷虾肽中富含各种氨基酸、活性肽类、有机酸等，尤其是两种人体需求量较大的赖氨酸和亮氨酸，且易于吸收，可以作为一种良好的人体氨基酸营养补充剂；也含有大量的高活性的血管紧张素转化酶抑制肽和抗氧化肽等，在预防衰老、降血压、预防心脑血管疾病和防止动脉粥样硬化中有重要作用。
南极磷虾中存在氟含量过高的问题。同样，南极磷虾肽也存在氟含量过高的问题，限制了南极磷虾的进一步加工利用，因此开发南极磷虾低氟水解技术极其重要。
发明内容
本发明的目的在于解决上述不足问题，提供一种南极磷虾肽制备方法，旨在获得一种氟含量低、分子量小的南极磷虾低聚肽粉，营养成分破坏小，而且分子量低，人体吸收率高，为开发功能性的低氟南极磷虾低聚肽奠定基础。
为了达到上述目的，本发明提供一种南极磷虾肽制备方法，包括如下步骤：
（1）以南极磷虾为原料，匀浆机进行斩拌、匀浆。
（2）将南极磷虾浆和纯水按照质量比1：1～1:5比例混合均匀，用氢氧化钠溶液调节pH值至8.0～10.0，加入0.5～5.0％（蛋白总量）的碱性蛋白酶，40℃～60℃温度下搅拌酶解1h～2h。升温至80℃～95℃保持10～20min灭酶。
（3）酶解液冷却至室温后离心，离心后的酶解液分为游离油层+乳层1、水层、乳层2、残渣；
（4）收集水层溶液，调节底物浓度至1～15％，用氢氧化钠溶液调节PH至7.0～9.0，加入0.5～5.0％（蛋白总量）的复合蛋白酶，40℃～55℃温度下搅拌酶解3h～5h。升温至80℃～95℃保持10～20min灭酶。
（5）对酶解液进行脱氟处理。添加溶液质量的0.1％～1.5％的氧化钙，搅拌均匀，静置后离心，取上清液；
（6）上清液用2000～5000Da分子量大小孔径的膜进行过滤，将大分子物质截留，小分子低聚肽透过。
（7）滤液进行减压浓缩至固形物含量为15%～20％，再经喷雾干燥获得氟含量低、分子量小的南极磷虾低聚肽粉。
本发明的优点在于：
蛋白质酶解收率与产物肽分子量的大小将衡量选择的酶是否正确和酶解工艺是否合理。本发明中二次酶解采用的复合蛋白酶 （其中10万u/g 中性蛋白酶 20％～70％、胰蛋白酶10％～50％、60万u/g木瓜蛋白酶5％～30％、风味酶1％～10％）对南极磷虾蛋白的酶解收率达70％以上，分子量＜ 2000Da 的小肽含量占 95％以上，产品没有苦味。
采用氧化钙对酶解液进行脱氟。由于氧化钙在溶液中形成氢氧化钙，溶液呈碱性，利于氟的除去；而且氢氧化钙呈悬浊状态，易于除去，防止残留。
制备的南极磷虾肽氟含量低，分子量小，人体吸收率高，具有抗 氧化、降血压等多种活性，具有极高的实际应用价值。
具体实施方式
实施例1
（1）以南极磷虾为原料，匀浆机进行斩拌、匀浆。
（2）将南极磷虾浆和纯水按照质量比1：3比例混合均匀，用氢氧化钠溶液调节pH值至9.0，加入0.5％（蛋白总量）的碱性蛋白酶，50℃温度下搅拌酶解1h。升温至95℃保持20min灭酶。
（3）酶解液冷却至室温后离心，离心后的酶解液分为游离油层+乳层1、水层、乳层2、残渣；
（4）收集水层溶液，调节底物浓度至5％，用氢氧化钠溶液调节PH至9.0，加入1.0％（蛋白总量）的复合蛋白酶，50℃温度下搅拌酶解4h。升温至95℃保持20min灭酶。
（5）对酶解液进行脱氟处理。添加溶液质量的0.2％的氧化钙，搅拌均匀，静置后离心，取上清液；
（6）上清液用2000～5000Da分子量大小孔径的膜进行过滤，将大分子物质截留，小分子低聚肽透过。
（7）滤液进行减压浓缩至固形物含量为15%，再经喷雾干燥获得氟含量低、分子量小的南极磷虾低聚肽粉。所得南极磷虾肽粉中肽的回收率达76 ％，氟含量为 217μg/g（干基）。
实施例2
（1）以南极磷虾为原料，匀浆机进行斩拌、匀浆。
（2）将南极磷虾浆和纯水按照质量比1：3比例混合均匀，用氢氧化钠溶液调节pH值至9.0，加入0.5％（蛋白总量）的碱性蛋白酶，50℃温度下搅拌酶解2h。升温至95℃保持20min灭酶。
（3）酶解液冷却至室温后离心，离心后的酶解液分为游离油层+乳层1、水层、乳层2、残渣；
（4）收集水层溶液，调节底物浓度至10％，用氢氧化钠溶液调节PH至9.0，加入1.0％（蛋白总量）的复合蛋白酶，50℃温度下搅拌酶解5h。升温至95℃保持20min灭酶。
（5）对酶解液进行脱氟处理。添加溶液质量的0.3％的氧化钙，搅拌均匀，静置后离心，取上清液；
（6）上清液用2000～5000Da分子量大小孔径的膜进行过滤，将大分子物质截留，小分子低聚肽透过。
（7）滤液进行减压浓缩至固形物含量为20%，再经喷雾干燥获得氟含量低、分子量小的南极磷虾低聚肽粉。所得南极磷虾肽粉中肽的回收率达73％，氟含量为 226μg/g（干基）。

Claims (1)

1.一种南极磷虾肽制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）以南极磷虾为原料，匀浆机进行斩拌、匀浆；
（2）将南极磷虾浆和纯水按照质量比1：1～1:5比例混合均匀，用氢氧化钠溶液调节pH值至8.0～10.0，加入0.5～5.0％（蛋白总量）的碱性蛋白酶，40℃～60℃温度下搅拌酶解1h～2h，升温至80℃～95℃保持10～20min灭酶；
（3）酶解液冷却至室温后离心，离心后的酶解液分为游离油层+乳层1、水层、乳层2、残渣；
（4）收集水层溶液，调节底物浓度至1～15％，用氢氧化钠溶液调节PH至7.0～9.0，加入0.5～5.0％（蛋白总量）的复合蛋白酶，40℃～55℃温度下搅拌酶解3h～5h，升温至80℃～95℃保持10～20min灭酶；
（5）对酶解液进行脱氟处理，添加溶液质量的0.1％～1.5％的氧化钙，搅拌均匀，静置后离心，取上清液；
（6）上清液用2000～5000Da分子量大小孔径的膜进行过滤，将大分子物质截留，小分子低聚肽透过；
（7）滤液进行减压浓缩至固形物含量为15%～20％，再经喷雾干燥获得氟含量低、分子量小的南极磷虾低聚肽粉。
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