CN107969362B - 紫彩血蛤苗种规模化繁育方法 - Google Patents

紫彩血蛤苗种规模化繁育方法 Download PDF

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Abstract

一种紫彩血蛤苗种规模化繁育方法,涉及水产养殖技术领域,特别是属于一种紫彩血蛤的苗种规模化繁育方法。其特征在于,包括如下步骤:1)四级饵料制备:冬季12月~1月或在亲贝产卵前3~4个月开始培育单细胞藻类一级藻种,春季2月~3月进行二级藻种的制备,春季3月~5月进行三级藻液的生产,春夏季4月~8月进行池塘规模化单细胞饵料的生产;2)亲贝采集产卵;3)受精卵孵化;4)幼体培育。本发明具有不受自然条件限制、产量大、规模化效益显著的积极效果。

Description

紫彩血蛤苗种规模化繁育方法
技术领域
本发明涉及水产养殖技术领域,特别是属于一种紫彩血蛤的苗种规模化繁育方法。
背景技术
紫彩血蛤是一种生活在近岸潮间带低潮区及潮下带的双壳贝类,由于味道鲜美、独特,壳薄出肉率高,近年来消费者对紫彩血蛤的需求量大大增加,从而导致了其采挖量的增高;加之沿海污染物的排放破坏了其生存环境,严重影响了紫彩血蛤的繁殖成活率;所以紫彩血蛤的生存数量一直处于下降的趋势。目前,紫彩血蛤人工育苗技术已被研究,但存在单细胞藻类供应极不稳定,藻类培育池原生动物污染频繁,尤其是幼虫伏底后饵料严重不足,另外由于幼虫培育方法不成熟,存在成活率低,平均成活率仅30﹪,出苗量极不稳定等缺陷,无法生产出大批量优质的苗种来满足增殖放流和人工养殖需求。相对于现有的紫彩血蛤人工育苗技术而言,紫彩血蛤苗种规模化繁育方法具有单细胞藻类供应稳定、具有1个/ml以上受精卵、孵化率高、幼体质量好、幼虫成活率提高30~50﹪、能够稳定生产出壳长≥2mm的优质商品苗种一亿个、达到了规模化苗种生产要求等诸多优点,而现如今关于紫彩血蛤苗种规模化繁育在水产行业一直处于空白状态。
发明内容
本发明的目的在于提供一种紫彩血蛤人工苗种规模化繁育方法,以达到提高幼体成活率、增加紫彩血蛤的资源总量、提高经济效益和生态效益的目的。
本发明所提供的紫彩血蛤人工苗种规模化繁育方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)饵料制备:
步骤1-1,冬季12月~1月或在亲贝产卵前3~4个月开始培育单细胞藻类一级藻种,种类为叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻或角毛藻等,容器为10升~20升的小口透明玻璃瓶或塑料瓶,培育用水为经沉淀→沙滤→蛋白泡沫分离器→1000目网袋过滤后,再经100℃烧开冷却至15℃~25℃的海水;
步骤1-2,春季2月~3月进行二级藻种的制备,容器为70升~500升小口白色塑料桶,培育用海水与一级藻种培育水的过滤程序相同,再经500×10-6g/ml漂白液(有效氯含量5%~10%)消毒24~48小时后,用30×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后使用;
步骤1-3,春季3月~5月进行三级藻液的生产,培育设施为室内水泥池或玻璃钢水池,面积10㎡~40㎡,池深60cm~80cm,培育用水同二级藻种制备,在生产中如果小球藻等不活动的藻类池中有原生动物,在22:00用60×10-6g/ml漂白液(有效氯含量5%~10%)全池泼洒并搅匀,第二天早晨5:00~6:00用50×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5~6天后用于投喂。对于金藻等活动藻类中的原生动物,漂白液用量减少,选在天黑后用50×10-6g/ml漂白液(有效氯含量5%~10%)杀虫4小时后,用45×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5~6天镜检金藻已完全恢复活力后用于投喂;
步骤1-4,春夏季4月~8月进行池塘规模化单细胞饵料的生产,培育设施为室外土池,面积0.5亩~6亩,池深50cm~200cm。提前抽干池水,用漂白粉或漂白液全池泼洒,晾晒5天~10天,加入经过沉淀、沙滤的新鲜海水50cm,用500×10-6g/ml漂白液(有效氯含量5%~10%)消毒2~10天,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后,用水泵将室内水泥池青岛大扁藻或小球藻等适合池塘培育的藻类接种到土池中,施入60×10-6g/ml硝酸钠、30×10-6g/ml尿素、4×10-6g/ml磷酸二氢钾等,促进藻类繁殖;
2)亲贝采集产卵:
步骤2-1,将无污染的海水在蓄水池沉淀后,经沙滤池抽入水塔中,再通过蛋白泡沫分离器净化,1000目网袋过滤后,加入幼虫培育池中备用;
步骤2-2,春季3月下旬至5月中旬在紫彩血蛤分布的河流入海口区域,利用干潮时间在细沙质底质中采挖成体,选择壳长≥2cm的作为亲贝,生产1000万个苗种需准备亲贝5㎏;
步骤2-3,将紫彩血蛤亲贝用海水清洗干净,按雌:雄=1~2:1的比例放入幼虫培育池中,密度为150~250克/㎡,集中放于多层产卵箱中,每层的亲贝平铺均匀,培育池水加5-30×10-6g/ml的EDTA-2Na中和重金属离子;
步骤2-4,培育池中加入小硅藻或小球藻或青岛大扁藻等单细胞藻类,密度达到1~10万个cell/ml,保持池内培育用水温度在12℃~20℃之间,盐度为20~30,PH值为7.8~8.9,促进亲贝成熟;
步骤2-5,每天上午8:00-9:00用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部的物质,方法为用手掌完全堵住硬管的上端出口,然后将硬管插入池底,放开上端出口,放出管内空气后,再用手掌完全堵住硬管的上端出口,将管中的水倒入烧杯中,用肉眼观察杯底,如有许多白色细小的圆颗粒,则可以在显微镜下进一步确认,其受精卵卵膜很厚,不同于其它双壳贝的受精卵,极易辨别;
步骤2-6,如果亲贝没有产卵,则将多层产卵箱下面的池底及周围的贝类粪便用直径为10mm的塑料软管吸出;
步骤2-7,当发现受精卵密度达到1个/ml以上时,及时将多层产卵箱连同亲贝移入另一个新池中继续产卵,防止亲贝将受精卵滤食。由于紫彩血蛤亲贝生殖腺中的精卵是分批成熟的,亲贝一般连续产卵2~3天后,会有1~3天的停顿,使精卵发育成熟,在亲贝休整后,将池中水全部放掉,冲刷池底,将多层产卵箱下面的粪便清理干净,加入新水,亲贝会在夜间继续产卵;
3)受精卵孵化:
步骤3-1,每天往池中添加过滤好的新鲜海水,添加水中补施5~30×10-6g/mlEDTA-2Na,池水中加入微生态制剂EM菌液2×10-6g/ml,不施抗生素或消毒剂;
步骤3-2:使水温保持在13℃~20℃,盐度为20~30,PH值为7.8~8.9,溶解氧5mg/L以上。与其它双壳贝不同,其受精卵的孵化时间较长,在13℃~14℃水温下,需经120小时(5天)大多数受精卵才能孵出D形幼虫,在孵化期间幼虫未出膜前不投喂饵料,保持水质良好;
4)幼体培育:
步骤4-1,用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下观察,当发现膜内D形幼虫转动很快时,往培育池中加入三级饵料池中密度在200万个cell/ml以上的叉鞭金藻或金藻3011藻液,使幼虫培育池单细胞藻类密度达到2~4万个cell/ml,藻液在每次入池前先冲干净运输藻液的管道并对藻液进行显微镜检查,如藻液中有少量原生动物或藻渣,则不能作为幼虫的开口饵料;
步骤4-2,每天用强光手电(非LED灯)检查培育池水中幼虫分布情况,当发现上层水中幼虫密度逐渐增大时,用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下检查,当幼虫很少时,用直径为10mm的塑料软管吸出池底亲贝残留的粪便及其它杂质;
步骤4-3,每天换水20~40﹪,随着幼虫生长逐渐加大换水量,并使水温保持在14~23℃,水中添加三级室内池中培育的金藻及小球藻或小硅藻等,每天2~4次,使培育池水中藻类密度分别达到4~10万cell/mL和2~6万cell/mL;
步骤4-4,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂;
步骤4-5,将海沙过筛去除石砾、贝壳等杂质后洗净,用浓度为20×10-6g/ml的高锰酸钾溶液消毒后,铺在室内普通水泥池或玻璃缸池中,厚度为2~5cm,池中加水1/3~1/2;
步骤4-6,当用强光手电(非LED灯)检查培育池上层水中幼虫密度下降时,用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部水在显微镜下检查,当发现已有幼虫伸足时,用200~300目捞子(不锈钢圈口径40~50cm,筛绢深60~100cm)将幼虫全部接出,放入铺好沙的池中,要分多次接出,并使幼虫始终在水中,出水的水流保持平缓;
步骤4-7,投喂室内三级池中培育的角毛藻、叉鞭金藻、3011、巴夫藻等及室外池塘中的小球藻、青岛大扁藻等,投喂时用300目网袋过滤,培育池采用自然水温,每天换水2次,每次换40~50﹪,加入的新水同亲贝产卵时用水的处理方法相同,严格控制挠足类、轮虫等小型浮游动物及卵进入培育池;
步骤4-8,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂,定时用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部细沙在显微镜下检查幼虫生长情况;
紫彩血蛤在自然界每年繁殖一次,将野生紫彩血蛤亲体在室内进行规模化产卵繁殖,这时与滩涂上野生种群的繁殖时间相一致,培育出的大批量苗种可以放流到自然环境中,修复自然资源,也可以用来继续进行人工养殖。配套的生产流程使紫彩血蛤所需的繁殖环境进一步优化,进而使紫彩血蛤的繁殖、苗种产量更为稳定,这种规模化苗种繁育方法一次可生产紫彩血蛤壳长≥2mm的商品苗种1亿个,提高苗种成活率30~50﹪;因此,具有不受自然条件限制、产量大、规模化效益显著的积极效果。
具体实施方式
以下结合具体实施例作进一步的说明。该实施例在山东日照沿海4月上旬进行。
实施例一:
1)饵料制备:
步骤1-1,冬季12月开始培育单细胞藻类一级藻种,种类为叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻或角毛藻等,容器为10升及20升的小口透明玻璃瓶,培育用水为经沉淀→沙滤→蛋白泡沫分离器→1000目网袋过滤后,再经100℃烧开冷却至15~25℃的海水,小硅藻用水为15.0℃,叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻用水为20℃,角毛藻用水为25.0℃。藻种室用空调24小时保持气温24℃;
步骤1-2,春季2月进行二级藻种的制备,容器为75升及500升小口白色塑料桶,培育用海水与一级藻种培育水的过滤程序相同,再经500×10-6g/ml漂白液(有效氯含量7%)消毒36小时后,用30×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后使用,二级藻种培育室用空调24小时保持气温24℃;
步骤1-3,春季3月~5月进行三级藻液的生产,培育设施为室内水泥池,面积24㎡,池深80cm,3月~4月培育室内屋顶及墙面用透明塑料薄膜围起保温,5月撤掉薄膜并开门窗通风,并加门帘窗纱阻止昆虫进入污染饵料。培育用水同二级藻种制备,在生产中如果小球藻等不活动的藻类池中有原生动物,在22:00用60×10-6g/ml漂白液(有效氯含量7%)全池泼洒并搅匀,第二天早晨5:00用50×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育6天后用于投喂,对于金藻等活动藻类中的原生动物,漂白液用量减少,夜间用50×10-6g/ml漂白液(有效氯含量5%~10%)杀虫4小时后,用45×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5天镜检金藻已完全恢复活力后用于投喂;
步骤1-4,春夏季4月~8月进行池塘规模化单细胞饵料的生产,培育设施为室外土池,面积4亩,池深150cm,共2个池塘。提前抽干池水,用漂白粉或漂白液全池泼洒,晾晒7天,加入经过沉淀、沙滤的新鲜海水50cm,用500×10-6g/ml漂白液(有效氯含量7%)消毒5天,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后,用水泵分别将室内水泥池青岛大扁藻和小球藻接种到2个土池中,施入60×10-6g/ml硝酸钠、30×10-6g/ml尿素、4×10-6g/ml磷酸二氢钾等,促进藻类繁殖;
2)亲贝采集产卵:
步骤2-1,将无污染的海水在蓄水池沉淀后,经沙滤池抽入水塔中,再通过蛋白泡沫分离器净化,1000目网袋过滤后,加入幼虫培育池中备用;
步骤2-2,春季4月上旬在紫彩血蛤分布的日照两城河入海口中心位置,利用干潮时间在细沙质底质中采挖成体,选择壳长≥2cm的作为亲贝,生产5000万个苗种,采挖亲贝25㎏;
步骤2-3,将紫彩血蛤亲贝用海水清洗干净,按雌:雄=1:1的比例放入幼虫培育池中,密度为200克/㎡,集中放于多层产卵箱中,每层的亲贝平铺均匀,培育池水加5×10-6g/ml的EDTA-2Na中和重金属离子;
步骤2-4,培育池中加入小硅藻或小球藻或青岛大扁藻等任一种藻类,每天1次,使培育池水中藻类密度达到6万个cell/ml,保持池内培育用水温度在14℃,盐度为26,PH值为8.0,促进亲贝成熟;
步骤2-5,每天上午8:30用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部的物质,方法为用手掌完全堵住硬管的上端出口,然后将硬管插入池底,放开上端出口,放出管内空气后,再用手掌完全堵住硬管的上端出口,将管中的水倒入烧杯中,用肉眼观察杯底,如有许多白色细小的圆颗粒,则可以在显微镜下进一步确认,其受精卵卵膜很厚,不同于其它双壳贝的受精卵,极易辨别;
步骤2-6,如果亲贝没有产卵,则将多层产卵箱下面的池底及周围的贝类粪便用直径为10mm的塑料软管吸出;
步骤2-7,当发现受精卵密度达到1个/ml以上时,及时将多层产卵箱连同亲贝移入另一个新池中继续产卵,防止亲贝将受精卵滤食。在亲贝休整后,将池中水全部放掉,冲刷池底,将多层产卵箱下面的粪便清理干净,加入新水,使亲贝继续产卵;
3)受精卵孵化:
步骤3-1,每天往池中添加过滤好的新鲜海水,添加水中补施5×10-6g/mlEDTA-2Na,池水中加入海水用微生态制剂EM菌液2×10-6g/ml,不施抗生素或消毒剂;
步骤3-2:保持培育池水温度为14℃,盐度为26,PH值为8.0,溶解氧5㎎/L以上。经120小时(5天)大多数受精卵孵出D形幼虫,在孵化期间幼虫未出膜前不投喂饵料,保持水质良好,受精卵孵化率由普通育苗方法的80﹪提高到95﹪;
4)幼体培育:
步骤4-1,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下观察,当发现膜内D形幼虫转动很快时,往培育池中加入三级饵料池中密度在200万个cell/ml以上的叉鞭金藻或金藻3011藻液,使幼虫培育池单细胞藻类密度达到3万个cell/ml,藻液在每次入池前先冲干净运输藻液的管道并对藻液进行显微镜检查,如藻液中有少量原生动物或藻渣,则不能作为幼虫的开口饵料;
步骤4-2,每天用单一灯泡的强光手电(非LED灯,提前调好聚光)检查培育池水中幼虫分布情况,当发现上层水中幼虫密度逐渐增大时,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下检查,当幼虫很少时,用直径为10mm的塑料软管吸出池底亲贝残留的粪便及其它杂质;
步骤4-3,每天换水30﹪,随着幼虫生长逐渐加大换水量到60﹪,前期用300目网箱,后期用200目网箱,并使水温保持在16℃,水中添加三级室内池中培育的金藻及小球藻或小硅藻等,每天3次,使培育池水中藻类密度分别达到8万cell/mL和4万cell/mL;
步骤4-4,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂;
步骤4-5,将海沙过筛去除石砾、贝壳等杂质后洗净,用浓度为20×10-6g/ml的高锰酸钾溶液消毒后,铺在室内普通水泥池或玻璃缸池中,厚度为4cm,池中加水1/2;
步骤4-6,当用强光手电(非LED灯)检查培育池上层水中幼虫密度下降时,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部水在显微镜下检查,当发现已有幼虫伸足时,用300目捞子(口径50cm不锈钢材质,深80cm筛绢网)将幼虫全部接出,放入铺好沙的池中,接幼虫时,先用1根直径50mm的换水管将幼虫及水吸入捞子中,用2个捞子交替分多次转移幼虫,当水位为10cm时,半开池底的出水口,将幼虫分多次缓缓接入捞子中;
步骤4-7,投喂室内三级池中培育的角毛藻、叉鞭金藻、3011、巴夫藻等及室外池塘中的小球藻、青岛大扁藻,投喂时用300目网袋过滤,培育池采用自然水温,每天换水2次,每次换50﹪,换水网箱为150目,加入的新水同亲贝产卵时用水的处理方法相同,严格控制挠足类、轮虫等小型浮游动物及卵进入培育池;
步骤4-8,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂,每隔3天用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部细沙在显微镜下检查幼虫生长情况,苗种达到壳长≥2mm时作为商品苗出池,苗种成活率由普通育苗方法的30﹪提高到80﹪。
实施例二:
1)饵料制备:
步骤1-1,冬季12月开始培育单细胞藻类一级藻种,种类为叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻或角毛藻等,容器为10升及20升的小口透明玻璃瓶,培育用水为经沉淀→沙滤→蛋白泡沫分离器→1000目网袋过滤后,再经100℃烧开冷却至15℃~25℃的海水,如15.5℃、16℃、16.5℃、17℃、17.5℃、18℃、19℃、20℃、20.5℃、21℃、21.5℃、22℃、22.5℃、23℃、23.5℃、24℃、24.5℃等,藻种室用空调24小时保持气温20~26℃,如20.2℃、20.5℃、21℃、21.5℃、22℃、22.5℃、23℃、23.5℃、24℃、24.5℃、25℃等;
步骤1-2,春季2月进行二级藻种的制备,容器为75升及500升小口白色塑料桶,培育用海水与一级藻种培育水的过滤程序相同,再经500×10-6g/ml漂白液(有效氯含量5%~10%)消毒36小时后,用30×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后使用,二级藻种培育室用空调24小时保持气温20~26℃,如20.2℃、20.5℃、21℃、21.5℃、22℃、22.5℃、23℃、23.5℃、24℃、24.5℃、25℃等;
步骤1-3,春季3月~5月进行三级藻液的生产,培育设施为室内水泥池,面积24㎡,池深80cm,3月~4月培育室内屋顶及墙面用透明塑料薄膜围起保温,5月撤掉薄膜并开门窗通风,并加门帘窗纱阻止昆虫进入污染饵料。培育用水同二级藻种制备,在生产中如果小球藻等不活动的藻类池中有原生动物,在22:00用60×10-6g/ml漂白液(有效氯含量5%~10%)全池泼洒并搅匀,第二天早晨5:00用50×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育6天后用于投喂,对于金藻等活动藻类中的原生动物,漂白液用量减少,夜间用50×10-6g/ml漂白液(有效氯含量5%~10%)杀虫4小时后,用45×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5天镜检金藻已完全恢复活力后用于投喂;
步骤1-4,春夏季4月~8月进行池塘规模化单细胞饵料的生产,培育设施为室外土池,面积4亩,池深150cm,共2个池塘。提前抽干池水,用漂白粉或漂白液全池泼洒,晾晒7天,加入经过沉淀、沙滤的新鲜海水50cm,用500×10-6g/ml漂白液(有效氯含量5%~10%)消毒5天,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后,用水泵分别将室内水泥池青岛大扁藻和小球藻接种到2个土池中,施入60×10-6g/ml硝酸钠、30×10-6g/ml尿素、4×10-6g/ml磷酸二氢钾等,促进藻类繁殖;
2)亲贝采集产卵:
步骤2-1,将无污染的海水在蓄水池沉淀后,经沙滤池抽入水塔中,再通过蛋白泡沫分离器净化,1000目网袋过滤后,加入幼虫培育池中备用;
步骤2-2,春季4月上旬在紫彩血蛤分布的日照两城河入海口中心位置,利用干潮时间在细沙质底质中采挖成体,选择壳长≥2cm的作为亲贝,生产5000万个苗种,采挖亲贝25㎏;
步骤2-3,将紫彩血蛤亲贝用海水清洗干净,按雌:雄=1:1的比例放入幼虫培育池中,密度为200克/㎡,集中放于多层产卵箱中,每层的亲贝平铺均匀,培育池水加5×10-6g/ml的EDTA-2Na中和重金属离子;
步骤2-4,培育池中加入小硅藻或小球藻或青岛大扁藻等任一种藻类,每天1次,使培育池水中藻类密度达到6万个cell/ml,保持池内培育用水温度在13℃~15℃之间,如保持池内培育用水温度为13.5℃、13.8℃、14℃、14.5℃、14.8℃等,采用自然水温,盐度为26,PH值为7.8~8.9,如PH值为7.9、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8等,促进亲贝成熟;
步骤2-5,每天上午8:30用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部的物质,方法为用手掌完全堵住硬管的上端出口,然后将硬管插入池底,放开上端出口,放出管内空气后,再用手掌完全堵住硬管的上端出口,将管中的水倒入烧杯中,用肉眼观察杯底,如有许多白色细小的圆颗粒,则可以在显微镜下进一步确认,其受精卵卵膜很厚,不同于其它双壳贝的受精卵,极易辨别;
步骤2-6,如果亲贝没有产卵,则将多层产卵箱下面的池底及周围的贝类粪便用直径为10mm的塑料软管吸出;
步骤2-7,当发现受精卵密度达到1个/ml以上时,及时将多层产卵箱连同亲贝移入另一个新池中继续产卵,防止亲贝将受精卵滤食。在亲贝休整后,将池中水全部放掉,冲刷池底,将多层产卵箱下面的粪便清理干净,加入新水,使亲贝继续产卵;
3)受精卵孵化:
步骤3-1,每天往池中添加过滤好的新鲜海水,添加水中补施5×10-6g/mlEDTA-2Na,池水中加入海水用微生态制剂EM菌液2×10-6g/ml,不施抗生素或消毒剂;
步骤3-2:使水温保持在13℃~15℃,如保持池内培育用水温度为13.5℃、13.8℃、14℃、14.5℃、14.8℃等,盐度为26,PH值为7.8~8.9,如PH值为7.9、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8等,溶解氧5㎎/L以上。经120小时(5天)大多数受精卵孵出D形幼虫,在孵化期间幼虫未出膜前不投喂饵料,保持水质良好,受精卵孵化率由普通育苗方法的80﹪提高到95﹪;
4)幼体培育:
步骤4-1,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下观察,当发现膜内D形幼虫转动很快时,往培育池中加入三级饵料池中密度在200万个cell/ml以上的叉鞭金藻或金藻3011藻液,使幼虫培育池单细胞藻类密度达到2~4万个cell/ml,如幼虫培育池单细胞藻类密度达到2.5万个cell/ml、3万个cell/ml、3.5万个cell/ml、3.8万个cell/ml,藻液在每次入池前先冲干净运输藻液的管道并对藻液进行显微镜检查,如藻液中有少量原生动物或藻渣,则不能作为幼虫的开口饵料;
步骤4-2,每天用单一灯泡的强光手电(非LED灯,提前调好聚光)检查培育池水中幼虫分布情况,当发现上层水中幼虫密度逐渐增大时,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下检查,当幼虫很少时,用直径为10mm的塑料软管吸出池底亲贝残留的粪便及其它杂质;
步骤4-3,每天换水30﹪,随着幼虫生长逐渐加大换水量到60﹪,前期用300目网箱,后期用200目网箱,并使水温保持在14~18℃,如使水温保持在15℃、15.5℃、16℃、16.5℃、17℃、17.5℃水中添加三级室内池中培育的金藻及小球藻或小硅藻等,每天3次,使培育池水中藻类密度分别达到8万cell/mL和4万cell/mL;
步骤4-4,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂;
步骤4-5,将海沙过筛去除石砾、贝壳等杂质后洗净,用浓度为20×10-6g/ml的高锰酸钾溶液消毒后,铺在室内普通水泥池或玻璃缸池中,厚度为4cm,池中加水1/2;
步骤4-6,当用强光手电(非LED灯)检查培育池上层水中幼虫密度下降时,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部水在显微镜下检查,当发现已有幼虫伸足时,用300目捞子(口径50cm不锈钢材质,深80cm筛绢网)将幼虫全部接出,放入铺好沙的池中,接幼虫时,先用1根直径50mm的换水管将幼虫及水吸入捞子中,用2个捞子交替分多次转移幼虫,当水位为10cm时,半开池底的出水口,将幼虫分多次缓缓接入捞子中;
步骤4-7,投喂室内三级池中培育的角毛藻、叉鞭金藻、3011、巴夫藻等及室外池塘中的小球藻、青岛大扁藻,投喂时用300目网袋过滤,培育池采用自然水温,每天换水2次,每次换50﹪,换水网箱为150目,加入的新水同亲贝产卵时用水的处理方法相同,严格控制挠足类、轮虫等小型浮游动物及卵进入培育池;
步骤4-8,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂,每隔3天用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部细沙在显微镜下检查幼虫生长情况,苗种达到壳长≥2mm时作为商品苗出池,苗种成活率由普通育苗方法的30﹪提高到60﹪~80﹪。
实施例三:
1)四级饵料制备:
步骤1-1,冬季12月~1月或在亲贝产卵前3~4个月开始培育单细胞藻类一级藻种,种类为叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻或角毛藻,培育用水为经沉淀→沙滤→蛋白泡沫分离器→1000目网袋过滤后,再经100℃烧开冷却至18℃~20℃的海水;
步骤1-2,春季2月~3月进行二级藻种的制备,容器为100升~400升小口白色塑料桶,培育用海水与一级藻种培育水的过滤程序相同,再经有效氯含量为5%~8%的漂白液500×10-6g/ml消毒24~48小时后,用30×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后使用;
步骤1-3,春季3月~5月进行三级藻液的生产,培育设施为室内水泥池或玻璃钢水池,在生产中如果小球藻等不活动的藻类池中有原生动物,在22:00用有效氯含量为5%~10%的漂白液60×10-6g/ml全池泼洒并搅匀,第二天早晨5:00~6:00用50×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5~6天后用于投喂,对于金藻等活动藻类中的原生动物,漂白液用量减少,选在天黑后用有效氯含量为6%~8%的漂白液50×10-6g/ml杀虫4小时后,用45×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5~6天镜检金藻已完全恢复活力后用于投喂;
步骤1-4,春夏季4月~8月进行池塘规模化单细胞饵料的生产,培育设施为室外土池;
2)亲贝采集产卵:
步骤2-1,春季3月下旬至5月中旬在紫彩血蛤分布的河流入海口区域,利用干潮时间在细沙质底质中采挖成体,选择壳长≥2cm的作为亲贝;
步骤2-2,将紫彩血蛤亲贝用海水清洗干净,按雌:雄=1~2:1的比例放入幼虫培育池中,密度为150~250克/㎡,集中放于多层产卵箱中,每层的亲贝平铺均匀;
步骤2-3,培育池中加入室内三级培育的小硅藻或小球藻或青岛大扁藻单细胞藻类,密度达到1~10万个cell/ml,保持池内培育用水温度在15℃~18℃之间,盐度为25~28,PH值为8.0~8.5,促进亲贝成熟;
步骤2-4,每天上午8:00-9:00用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部的物质,将管中的水倒入烧杯中,用肉眼观察杯底,如有许多白色细小的圆颗粒,则在显微镜下进一步确认;
步骤2-5,如果亲贝没有产卵,则将多层产卵箱下面的池底及周围的贝类粪便用直径为10mm的塑料软管吸出;
步骤2-6,当发现受精卵密度达到1个/ml以上时,及时将多层产卵箱连同亲贝移入另一个新池中继续产卵,防止亲贝将受精卵滤食;
3)受精卵孵化:
步骤3-1,池水中加入海水用微生态制剂EM菌液2×10-6g/ml,不施抗生素或消毒剂;
步骤3-2:使水温保持在15℃~18℃,盐度为25~38,PH值为8.0~8.5,溶解氧5㎎/L以上,在孵化期间幼虫未出膜前不投喂饵料,保持水质良好;
4)幼体培育:
步骤4-1,用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下观察,当发现膜内D形幼虫转动很快时,往培育池中加入三级饵料池中密度在200万个cell/ml以上的叉鞭金藻或金藻3011藻液,使幼虫培育池单细胞藻类密度达到2~4万个cell/ml;
步骤4-2,每天用非LED灯的强光手电检查培育池水中幼虫分布情况,当发现上层水中幼虫密度逐渐增大时,用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下检查,当幼虫很少时,用直径为10mm的塑料软管吸出池底亲贝残留的粪便及其它杂质;
步骤4-3,当用非LED灯的强光手电检查培育池上层水中幼虫密度下降时,用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部水在显微镜下检查,当发现已有幼虫伸足时,用不锈钢圈口径40~50cm且筛绢网深60~100cm的200~300目捞子将幼虫全部接出,放入铺好沙的池中,要分多次接出,并使幼虫始终在水中,出水的水流保持平缓;
步骤4-4,投喂室内三级池中培育的角毛藻、叉鞭金藻、3011、巴夫藻等及室外池塘中的小球藻、青岛大扁藻,投喂时用300目网袋过滤,培育池采用20℃~25℃自然水温;
步骤4-5,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂,定时用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部细沙在显微镜下检查幼虫生长情况。苗种达到壳长≥2mm时作为商品苗出池,苗种成活率由普通育苗方法的30﹪提高到75﹪。
实施例四:
1)饵料制备:
步骤1-1,冬季12月开始培育单细胞藻类一级藻种,种类为叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻或角毛藻等,容器为10升及20升的小口透明玻璃瓶,培育用水为经沉淀→沙滤→蛋白泡沫分离器→1000目网袋过滤后,再经100℃烧开冷却至18~22℃的海水,小硅藻用水为18.0℃,叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻用水为20℃,角毛藻用水为22.0℃。藻种室用空调24小时保持气温24℃;
步骤1-2,春季2月进行二级藻种的制备,容器为75升及500升小口白色塑料桶,培育用海水与一级藻种培育水的过滤程序相同,再经有效氯含量为8%的500×10-6g/ml漂白液消毒36小时后,用30×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后使用,二级藻种培育室用空调24小时保持气温24℃;
步骤1-3,春季3月~5月进行三级藻液的生产,培育设施为室内水泥池,面积24㎡,池深80cm,3月~4月培育室内屋顶及墙面用透明塑料薄膜围起保温,5月撤掉薄膜并开门窗通风,并加门帘窗纱阻止昆虫进入污染饵料。培育用水同二级藻种制备,在生产中如果小球藻等不活动的藻类池中有原生动物,在22:00用有效氯含量为8%的60×10-6g/ml漂白液全池泼洒并搅匀,第二天早晨5:00用50×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育6天后用于投喂,对于金藻等活动藻类中的原生动物,漂白液用量减少,夜间用有效氯含量为8%的50×10-6g/ml漂白液杀虫4小时后,用45×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5天镜检金藻已完全恢复活力后用于投喂;
步骤1-4,春夏季4月~8月进行池塘规模化单细胞饵料的生产,培育设施为室外土池,面积4亩,池深150cm,共2个池塘。提前抽干池水,用漂白粉或漂白液全池泼洒,晾晒7天,加入经过沉淀、沙滤的新鲜海水50cm,用有效氯含量为8%的500×10-6g/ml漂白液消毒5天,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后,用水泵分别将室内水泥池青岛大扁藻和小球藻接种到2个土池中,施入60×10-6g/ml硝酸钠、30×10-6g/ml尿素、4×10-6g/ml磷酸二氢钾等,促进藻类繁殖;
2)亲贝采集产卵:
步骤2-1,将无污染的海水在蓄水池沉淀后,经沙滤池抽入水塔中,再通过蛋白泡沫分离器净化,1000目网袋过滤后,加入幼虫培育池中备用;
步骤2-2,春季4月上旬在紫彩血蛤分布的日照两城河入海口中心位置,利用干潮时间在细沙质底质中采挖成体,选择壳长≥2cm的作为亲贝,生产5000万个苗种,采挖亲贝25㎏;
步骤2-3,将紫彩血蛤亲贝用海水清洗干净,按雌:雄=1:1的比例放入幼虫培育池中,密度为200克/㎡,集中放于多层产卵箱中,每层的亲贝平铺均匀,培育池水加5×10-6g/ml的EDTA-2Na中和重金属离子;
步骤2-4,培育池中加入小硅藻或小球藻或青岛大扁藻等任一种藻类,每天1次,使培育池水中藻类密度达到6万个cell/ml,保持池内培育用水温度在14℃,盐度为26,PH值为8.0,促进亲贝成熟;
步骤2-5,每天上午8:30用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部的物质,方法为用手掌完全堵住硬管的上端出口,然后将硬管插入池底,放开上端出口,放出管内空气后,再用手掌完全堵住硬管的上端出口,将管中的水倒入烧杯中,用肉眼观察杯底,如有许多白色细小的圆颗粒,则可以在显微镜下进一步确认,其受精卵卵膜很厚,不同于其它双壳贝的受精卵,极易辨别;
步骤2-6,如果亲贝没有产卵,则将多层产卵箱下面的池底及周围的贝类粪便用直径为10mm的塑料软管吸出;
步骤2-7,当发现受精卵密度达到1个/ml以上时,及时将多层产卵箱连同亲贝移入另一个新池中继续产卵,防止亲贝将受精卵滤食。在亲贝休整后,将池中水全部放掉,冲刷池底,将多层产卵箱下面的粪便清理干净,加入新水,使亲贝继续产卵;
3)受精卵孵化:
步骤3-1,每天往池中添加过滤好的新鲜海水,添加水中补施5×10-6g/mlEDTA-2Na,池水中加入海水用微生态制剂EM菌液2×10-6g/ml,不施抗生素或消毒剂;
步骤3-2:保持培育池水温度为15℃,盐度为26,PH值为8.0,溶解氧5㎎/L以上。经120小时大多数受精卵孵出D形幼虫,在孵化期间幼虫未出膜前不投喂饵料,保持水质良好,受精卵孵化率由普通育苗方法的80﹪提高到95﹪;
4)幼体培育:
步骤4-1,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下观察,当发现膜内D形幼虫转动很快时,往培育池中加入三级饵料池中密度在200万个cell/ml以上的叉鞭金藻或金藻3011藻液,使幼虫培育池单细胞藻类密度达到3万个cell/ml,藻液在每次入池前先冲干净运输藻液的管道并对藻液进行显微镜检查,如藻液中有少量原生动物或藻渣,则不能作为幼虫的开口饵料;
步骤4-2,每天用非LED灯的单一灯泡的强光手电,提前调好聚光检查培育池水中幼虫分布情况,当发现上层水中幼虫密度逐渐增大时,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下检查,当幼虫很少时,用直径为10mm的塑料软管吸出池底亲贝残留的粪便及其它杂质;
步骤4-3,每天换水30﹪,随着幼虫生长逐渐加大换水量到60﹪,前期用300目网箱,后期用200目网箱,并使水温保持在16℃,水中添加三级室内池中培育的金藻及小球藻或小硅藻等,每天3次,使培育池水中藻类密度分别达到8万cell/mL和4万cell/mL;
步骤4-4,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂;
步骤4-5,将海沙过筛去除石砾、贝壳等杂质后洗净,用浓度为20×10-6g/ml的高锰酸钾溶液消毒后,铺在室内普通水泥池或玻璃缸池中,厚度为4cm,池中加水1/2;
步骤4-6,当用非LED灯的强光手电检查培育池上层水中幼虫密度下降时,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部水在显微镜下检查,当发现已有幼虫伸足时,用300目捞子将幼虫全部接出,放入铺好沙的池中,接幼虫时,先用1根直径50mm的换水管将幼虫及水吸入捞子中,用2个捞子交替分多次转移幼虫,当水位为10cm时,半开池底的出水口,将幼虫分多次缓缓接入捞子中;
步骤4-7,投喂室内三级池中培育的角毛藻、叉鞭金藻、3011、巴夫藻等及室外池塘中的小球藻、青岛大扁藻,投喂时用300目网袋过滤,培育池采用自然水温,每天换水2次,每次换50﹪,换水网箱为150目,加入的新水同亲贝产卵时用水的处理方法相同,严格控制挠足类、轮虫等小型浮游动物及卵进入培育池;
步骤4-8,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂,每隔3天用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部细沙在显微镜下检查幼虫生长情况,苗种达到壳长≥2mm时作为商品苗出池。苗种达到壳长≥2mm时作为商品苗出池,苗种成活率由普通育苗方法的30﹪提高到78﹪。
上述的500×10-6g/ml漂白液、60×10-6g/ml漂白液、50×10-6g/ml漂白液的有效氯含量为5%~10%,如有效氯含量为5.5%、6%、6.5%、7%、7.8%、8%、8.5%、9%、9.5%、9.8%等。
上述的单细胞藻类是无胚,自养,以孢子进行繁殖的低等植物。藻体为单细胞、群体或多细胞体,为角毛藻、叉鞭金藻、3011、巴夫藻等及室外池塘中的小球藻、青岛大扁藻中的任意一种或多种。

Claims (4)

1.一种紫彩血蛤苗种规模化繁育方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)四级饵料制备:
步骤1-1,冬季12月~1月或在亲贝产卵前3~4个月开始培育单细胞藻类一级藻种,种类为叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻或角毛藻,培育用水为经沉淀→沙滤→蛋白泡沫分离器→1000目网袋过滤后,再经100℃烧开冷却至15℃~25℃的海水;
步骤1-2,春季2月~3月进行二级藻种的制备,容器为70升~500升小口白色塑料桶,培育用海水与一级藻种培育水的过滤程序相同,再经有效氯含量为5%~10%的漂白液500×10-6g/ml消毒24~48小时后,用30×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后使用;
步骤1-3,春季3月~5月进行三级藻液的生产,培育设施为室内水泥池或玻璃钢水池,在生产中如果小球藻不活动的藻类池中有原生动物,在22:00用有效氯含量为5%~10%的漂白液60×10-6g/ml全池泼洒并搅匀,第二天早晨5:00~6:00用50×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5~6天后用于投喂,对于金藻活动藻类中的原生动物,漂白液用量减少,选在天黑后用有效氯含量为5%~10%的漂白液50×10-6g/ml杀虫4小时后,用45×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5~6天镜检金藻已完全恢复活力后用于投喂;
步骤1-4,春夏季4月~8月进行池塘规模化单细胞饵料的生产,培育设施为室外土池;
2)亲贝采集产卵:
步骤2-1,春季3月下旬至5月中旬在紫彩血蛤分布的河流入海口区域,利用干潮时间在细沙质底质中采挖成体,选择壳长≥2㎝的作为亲贝;
步骤2-2,将紫彩血蛤亲贝用海水清洗干净,按雌:雄=1~2:1的比例放入幼虫培育池中,密度为150~250g/m2,集中放于多层产卵箱中,每层的亲贝平铺均匀;
步骤2-3,培育池中加入室内三级培育的小硅藻或小球藻或青岛大扁藻单细胞藻类,密度达到1~10万个cell/ml,保持池内培育用水温度在12℃~20℃之间,盐度为20~30,PH值为7.8~8.9,促进亲贝成熟;
步骤2-4,每天上午8:00-9:00用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部的物质,将管中的水倒入烧杯中,用肉眼观察杯底,如有许多白色细小的圆颗粒,则在显微镜下进一步确认;
步骤2-5,如果亲贝没有产卵,则将多层产卵箱下面的池底及周围的贝类粪便用直径为10㎜的塑料软管吸出;
步骤2-6,当发现受精卵密度达到1个/ml以上时,及时将多层产卵箱连同亲贝移入另一个新池中继续产卵,防止亲贝将受精卵滤食;
3)受精卵孵化:
步骤3-1,池水中加入海水用微生态制剂EM菌液2×10-6g/ml,不施抗生素或消毒剂;
步骤3-2:使水温保持在13℃~20℃,盐度为20~30,PH值为7.8~8.9,溶解氧5㎎/L以上,在孵化期间幼虫未出膜前不投喂饵料,保持水质良好;
4)幼体培育:
步骤4-1,用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下观察,当发现膜内D形幼虫转动很快时,往培育池中加入三级饵料池中密度在200万个cell/ml以上的叉鞭金藻或金藻3011藻液,使幼虫培育池单细胞藻类密度达到2~4万个cell/ml;
步骤4-2,每天用非LED灯的强光手电检查培育池水中幼虫分布情况,当发现上层水中幼虫密度逐渐增大时,用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下检查,当幼虫很少时,用直径为10mm的塑料软管吸出池底亲贝残留的粪便及其它杂质;
步骤4-3,当用非LED灯的强光手电检查培育池上层水中幼虫密度下降时,用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部水在显微镜下检查,当发现已有幼虫伸足时,用不锈钢圈口径40~50cm且筛绢网深60~100cm的200~300目捞子将幼虫全部接出,放入铺好沙的池中,要分多次接出,并使幼虫始终在水中,出水的水流保持平缓;
步骤4-4,投喂室内三级池中培育的角毛藻、叉鞭金藻、3011、巴夫藻及室外池塘中的小球藻、青岛大扁藻,投喂时用300目网袋过滤,培育池采用15℃~30℃自然水温;
步骤4-5,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂,定时用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部细沙在显微镜下检查幼虫生长情况。
2.根据权利要求1所述的紫彩血蛤苗种规模化繁育方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)四级饵料制备:
步骤1-1,冬季12月~1月或在亲贝产卵前3~4个月开始培育单细胞藻类一级藻种,种类为叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻或角毛藻,培育用水为经沉淀→沙滤→蛋白泡沫分离器→1000目网袋过滤后,再经100℃烧开冷却至18℃~20℃的海水;
步骤1-2,春季2月~3月进行二级藻种的制备,容器为100升~400升小口白色塑料桶,培育用海水与一级藻种培育水的过滤程序相同,再经有效氯含量为5%~8%的漂白液500×10-6g/ml消毒24~48小时后,用30×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后使用;
步骤1-3,春季3月~5月进行三级藻液的生产,培育设施为室内水泥池或玻璃钢水池,在生产中如果小球藻不活动的藻类池中有原生动物,在22:00用有效氯含量为5%~10%的漂白液60×10-6g/ml全池泼洒并搅匀,第二天早晨5:00~6:00用50×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5~6天后用于投喂,对于金藻活动藻类中的原生动物,漂白液用量减少,选在天黑后用有效氯含量为6%~8%的漂白液50×10-6g/ml杀虫4小时后,用45×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5~6天镜检金藻已完全恢复活力后用于投喂;
步骤1-4,春夏季4月~8月进行池塘规模化单细胞饵料的生产,培育设施为室外土池;
2)亲贝采集产卵:
步骤2-1,春季3月下旬至5月中旬在紫彩血蛤分布的河流入海口区域,利用干潮时间在细沙质底质中采挖成体,选择壳长≥2㎝的作为亲贝;
步骤2-2,将紫彩血蛤亲贝用海水清洗干净,按雌:雄=1~2:1的比例放入幼虫培育池中,密度为150~250g/m2,集中放于多层产卵箱中,每层的亲贝平铺均匀;
步骤2-3,培育池中加入室内三级培育的小硅藻或小球藻或青岛大扁藻单细胞藻类,密度达到1~10万个cell/ml,保持池内培育用水温度在15℃~18℃之间,盐度为25~28,PH值为8.0~8.5,促进亲贝成熟;
步骤2-4,每天上午8:00-9:00用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部的物质,将管中的水倒入烧杯中,用肉眼观察杯底,如有许多白色细小的圆颗粒,则在显微镜下进一步确认;
步骤2-5,如果亲贝没有产卵,则将多层产卵箱下面的池底及周围的贝类粪便用直径为10mm的塑料软管吸出;
步骤2-6,当发现受精卵密度达到1个/ml以上时,及时将多层产卵箱连同亲贝移入另一个新池中继续产卵,防止亲贝将受精卵滤食;
3)受精卵孵化:
步骤3-1,池水中加入海水用微生态制剂EM菌液2×10-6g/ml,不施抗生素或消毒剂;
步骤3-2:使水温保持在15℃~18℃,盐度为25~38,PH值为8.0~8.5,溶解氧5㎎/L以上,在孵化期间幼虫未出膜前不投喂饵料,保持水质良好;
4)幼体培育:
步骤4-1,用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下观察,当发现膜内D形幼虫转动很快时,往培育池中加入三级饵料池中密度在200万个cell/ml以上的叉鞭金藻或金藻3011藻液,使幼虫培育池单细胞藻类密度达到2~4万个cell/ml;
步骤4-2,每天用非LED灯的强光手电检查培育池水中幼虫分布情况,当发现上层水中幼虫密度逐渐增大时,用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下检查,当幼虫很少时,用直径为10mm的塑料软管吸出池底亲贝残留的粪便及其它杂质;
步骤4-3,当用非LED灯的强光手电检查培育池上层水中幼虫密度下降时,用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部水在显微镜下检查,当发现已有幼虫伸足时,用不锈钢圈口径40~50cm且筛绢网深60~100cm的200~300目捞子将幼虫全部接出,放入铺好沙的池中,要分多次接出,并使幼虫始终在水中,出水的水流保持平缓;
步骤4-4,投喂室内三级池中培育的角毛藻、叉鞭金藻、3011、巴夫藻及室外池塘中的小球藻、青岛大扁藻,投喂时用300目网袋过滤,培育池采用20℃~25℃自然水温;
步骤4-5,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂,定时用直径为5~10mm的PVC中空硬管吸取培育池底部细沙在显微镜下检查幼虫生长情况。
3.根据权利要求1所述的紫彩血蛤苗种规模化繁育方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)饵料制备:
步骤1-1,冬季12月开始培育单细胞藻类一级藻种,种类为叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻或角毛藻,容器为10升及20升的小口透明玻璃瓶,培育用水为经沉淀→沙滤→蛋白泡沫分离器→1000目网袋过滤后,再经100℃烧开冷却至15~25℃的海水,小硅藻用水为15.0℃,叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻用水为20℃,角毛藻用水为25.0℃,藻种室用空调24小时保持气温24℃;
步骤1-2,春季2月进行二级藻种的制备,容器为75升及500升小口白色塑料桶,培育用海水与一级藻种培育水的过滤程序相同,再经有效氯含量7%为500×10-6g/ml漂白液消毒36小时后,用30×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后使用,二级藻种培育室用空调24小时保持气温24℃;
步骤1-3,春季3月~5月进行三级藻液的生产,培育设施为室内水泥池,面积24m2,池深80cm,3月~4月培育室内屋顶及墙面用透明塑料薄膜围起保温,5月~6月撤掉薄膜并开门窗通风,并加门帘窗纱阻止昆虫进入污染饵料;培育用水同二级藻种制备,在生产中如果小球藻不活动的藻类池中有原生动物,在22:00用有效氯含量7%的60×10-6g/ml漂白液全池泼洒并搅匀,第二天早晨5:00用50×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育6天后用于投喂,对于金藻活动藻类中的原生动物,漂白液用量减少,夜间用有效氯含量7%的50×10-6g/ml漂白液杀虫4小时后,用45×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5天镜检金藻已完全恢复活力后用于投喂;
步骤1-4,春夏季4月~8月进行池塘规模化单细胞饵料的生产,培育设施为室外土池,面积4亩,池深150cm,共2个池塘,提前抽干池水,用漂白粉或漂白液全池泼洒,晾晒7天,加入经过沉淀、沙滤的新鲜海水50cm,用有效氯含量7%的500×10-6g/ml漂白液消毒5天,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后,用水泵分别将室内水泥池青岛大扁藻和小球藻接种到2个土池中,施入60×10-6g/ml硝酸钠、30×10-6g/ml尿素、4×10-6g/ml磷酸二氢钾,促进藻类繁殖;
2)亲贝采集产卵:
步骤2-1,将无污染的海水在蓄水池沉淀后,经沙滤池抽入水塔中,再通过蛋白泡沫分离器净化,1000目网袋过滤后,加入幼虫培育池中备用;
步骤2-2,春季4月上旬在紫彩血蛤分布的日照两城河入海口中心位置,利用干潮时间在细沙质底质中采挖成体,选择壳长≥2㎝的作为亲贝,生产5000万个苗种,采挖亲贝25㎏;
步骤2-3,将紫彩血蛤亲贝用海水清洗干净,按雌:雄=1:1的比例放入幼虫培育池中,密度为200g/m2,集中放于多层产卵箱中,每层的亲贝平铺均匀,培育池水加5×10-6g/ml的EDTA-2Na中和重金属离子;
步骤2-4,培育池中加入小硅藻或小球藻或青岛大扁藻任一种藻类,每天1次,使培育池水中藻类密度达到6万个cell/ml,保持池内培育用水温度在14℃,盐度为26,PH值为8.0,促进亲贝成熟;
步骤2-5,每天上午8:30用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部的物质,方法为用手掌完全堵住硬管的上端出口,然后将硬管插入池底,放开上端出口,放出管内空气后,再用手掌完全堵住硬管的上端出口,将管中的水倒入烧杯中,用肉眼观察杯底,如有许多白色细小的圆颗粒,则可以在显微镜下进一步确认,其受精卵卵膜很厚,不同于其它双壳贝的受精卵,极易辨别;
步骤2-6,如果亲贝没有产卵,则将多层产卵箱下面的池底及周围的贝类粪便用直径为10㎜的塑料软管吸出;
步骤2-7,当发现受精卵密度达到1个/ml以上时,及时将多层产卵箱连同亲贝移入另一个新池中继续产卵,防止亲贝将受精卵滤食;在亲贝休整后,将池中水全部放掉,冲刷池底,将多层产卵箱下面的粪便清理干净,加入新水,使亲贝继续产卵;
3)受精卵孵化:
步骤3-1,每天往池中添加过滤好的新鲜海水,添加水中补施5×10-6g/mlEDTA-2Na,池水中加入海水用微生态制剂EM菌液2×10-6g/ml,不施抗生素或消毒剂;
步骤3-2:保持培育池水温度为14℃,盐度为26,PH值为8.0,溶解氧5mg/L以上,经120小时大多数受精卵孵出D形幼虫,在孵化期间幼虫未出膜前不投喂饵料,保持水质良好,受精卵孵化率由普通育苗方法的80﹪提高到95﹪;
4)幼体培育:
步骤4-1,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下观察,当发现膜内D形幼虫转动很快时,往培育池中加入三级饵料池中密度在200万个cell/ml以上的叉鞭金藻或金藻3011藻液,使幼虫培育池单细胞藻类密度达到3万个cell/ml,藻液在每次入池前先冲干净运输藻液的管道并对藻液进行显微镜检查,如藻液中有少量原生动物或藻渣,则不能作为幼虫的开口饵料;
步骤4-2,每天用非LED灯的单一灯泡的强光手电,提前调好聚光,检查培育池水中幼虫分布情况,当发现上层水中幼虫密度逐渐增大时,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下检查,当幼虫很少时,用直径为10mm的塑料软管吸出池底亲贝残留的粪便及其它杂质;
步骤4-3,每天换水30﹪,随着幼虫生长逐渐加大换水量到60﹪,前期用300目网箱,后期用200目网箱,并使水温保持在16℃,水中添加三级室内池中培育的金藻及小球藻或小硅藻,每天3次,使培育池水中藻类密度分别达到8万cell/ml和4万cell/ml;
步骤4-4,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂;
步骤4-5,将海沙过筛去除石砾、贝壳杂质后洗净,用浓度为20×10-6g/ml的高锰酸钾溶液消毒后,铺在室内普通水泥池或玻璃缸池中,厚度为4cm,池中加水1/2;
步骤4-6,当用非LED灯的强光手电检查培育池上层水中幼虫密度下降时,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部水在显微镜下检查,当发现已有幼虫伸足时,用口径50cm不锈钢材质,深80cm筛绢网的300目捞子将幼虫全部接出,放入铺好沙的池中,接幼虫时,先用1根直径50mm的换水管将幼虫及水吸入捞子中,用2个捞子交替分多次转移幼虫,当水位为10cm时,半开池底的出水口,将幼虫分多次缓缓接入捞子中;
步骤4-7,投喂室内三级池中培育的角毛藻、叉鞭金藻、3011、巴夫藻及室外池塘中的小球藻、青岛大扁藻,投喂时用300目网袋过滤,培育池采用自然水温,每天换水2次,每次换50﹪,换水网箱为150目,加入的新水同亲贝产卵时用水的处理方法相同,严格控制挠足类、轮虫小型浮游动物及卵进入培育池;
步骤4-8,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂,每隔3天用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部细沙在显微镜下检查幼虫生长情况,苗种达到壳长≥2mm时作为商品苗出池。
4.根据权利要求1所述的紫彩血蛤苗种规模化繁育方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)饵料制备:
步骤1-1,冬季12月开始培育单细胞藻类一级藻种,种类为叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻或角毛藻,容器为10升及20升的小口透明玻璃瓶,培育用水为经沉淀→沙滤→蛋白泡沫分离器→1000目网袋过滤后,再经100℃烧开冷却至18~22℃的海水,小硅藻用水为18.0℃,叉鞭金藻、3011、巴夫藻、小硅藻、小球藻、青岛大扁藻用水为20℃,角毛藻用水为22.0℃,藻种室用空调24小时保持气温24℃;
步骤1-2,春季2月进行二级藻种的制备,容器为75升及500升小口白色塑料桶,培育用海水与一级藻种培育水的过滤程序相同,再经有效氯含量为8%的500×10-6g/ml漂白液消毒36小时后,用30×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后使用,二级藻种培育室用空调24小时保持气温24℃;
步骤1-3,春季3月~5月进行三级藻液的生产,培育设施为室内水泥池,面积24㎡,池深80cm,3月~4月培育室内屋顶及墙面用透明塑料薄膜围起保温,5月~6月撤掉薄膜并开门窗通风,并加门帘窗纱阻止昆虫进入污染饵料;培育用水同二级藻种制备,在生产中如果小球藻不活动的藻类池中有原生动物,在22:00用有效氯含量为8%的60×10-6g/ml漂白液全池泼洒并搅匀,第二天早晨5:00用50×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育6天后用于投喂,对于金藻活动藻类中的原生动物,漂白液用量减少,夜间用有效氯含量为8%的50×10-6g/ml漂白液杀虫4小时后,用45×10-6g/ml硫代硫酸钠中和,再培育5天镜检金藻已完全恢复活力后用于投喂;
步骤1-4,春夏季4月~8月进行池塘规模化单细胞饵料的生产,培育设施为室外土池,面积4亩,池深150cm,共2个池塘,提前抽干池水,用漂白粉或漂白液全池泼洒,晾晒7天,加入经过沉淀、沙滤的新鲜海水50㎝,用有效氯含量为8%的500×10-6g/ml漂白液消毒5天,经淀粉碘化钾溶液测定无余氯后,用水泵分别将室内水泥池青岛大扁藻和小球藻接种到2个土池中,施入60×10-6g/ml硝酸钠、30×10-6g/ml尿素、4×10-6g/ml磷酸二氢钾,促进藻类繁殖;
2)亲贝采集产卵:
步骤2-1,将无污染的海水在蓄水池沉淀后,经沙滤池抽入水塔中,再通过蛋白泡沫分离器净化,1000目网袋过滤后,加入幼虫培育池中备用;
步骤2-2,春季4月上旬在紫彩血蛤分布的日照两城河入海口中心位置,利用干潮时间在细沙质底质中采挖成体,选择壳长≥2cm的作为亲贝,生产5000万个苗种,采挖亲贝25kg;
步骤2-3,将紫彩血蛤亲贝用海水清洗干净,按雌:雄=1:1的比例放入幼虫培育池中,密度为200g/m2,集中放于多层产卵箱中,每层的亲贝平铺均匀,培育池水加5×10-6g/ml的EDTA-2Na中和重金属离子;
步骤2-4,培育池中加入小硅藻或小球藻或青岛大扁藻任一种藻类,每天1次,使培育池水中藻类密度达到6万个cell/ml,保持池内培育用水温度在14℃,盐度为26,PH值为8.0,促进亲贝成熟;
步骤2-5,每天上午8:30用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部的物质,方法为用手掌完全堵住硬管的上端出口,然后将硬管插入池底,放开上端出口,放出管内空气后,再用手掌完全堵住硬管的上端出口,将管中的水倒入烧杯中,用肉眼观察杯底,如有许多白色细小的圆颗粒,则可以在显微镜下进一步确认,其受精卵卵膜很厚,不同于其它双壳贝的受精卵,极易辨别;
步骤2-6,如果亲贝没有产卵,则将多层产卵箱下面的池底及周围的贝类粪便用直径为10㎜的塑料软管吸出;
步骤2-7,当发现受精卵密度达到1个/ml以上时,及时将多层产卵箱连同亲贝移入另一个新池中继续产卵,防止亲贝将受精卵滤食;在亲贝休整后,将池中水全部放掉,冲刷池底,将多层产卵箱下面的粪便清理干净,加入新水,使亲贝继续产卵;
3)受精卵孵化:
步骤3-1,每天往池中添加过滤好的新鲜海水,添加水中补施5×10-6g/mlEDTA-2Na,池水中加入海水用微生态制剂EM菌液2×10-6g/ml,不施抗生素或消毒剂;
步骤3-2:保持培育池水温度为15℃,盐度为26,PH值为8.0,溶解氧5mg/L以上,经120小时大多数受精卵孵出D形幼虫,在孵化期间幼虫未出膜前不投喂饵料,保持水质良好,受精卵孵化率由普通育苗方法的80﹪提高到95﹪;
4)幼体培育:
步骤4-1,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下观察,当发现膜内D形幼虫转动很快时,往培育池中加入三级饵料池中密度在200万个cell/ml以上的叉鞭金藻或金藻3011藻液,使幼虫培育池单细胞藻类密度达到3万个cell/ml,藻液在每次入池前先冲干净运输藻液的管道并对藻液进行显微镜检查,如藻液中有少量原生动物或藻渣,则不能作为幼虫的开口饵料;
步骤4-2,每天用非LED灯的单一灯泡的强光手电,提前调好聚光检查培育池水中幼虫分布情况,当发现上层水中幼虫密度逐渐增大时,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部及下层水在显微镜下检查,当幼虫很少时,用直径为10mm的塑料软管吸出池底亲贝残留的粪便及其它杂质;
步骤4-3,每天换水30﹪,随着幼虫生长逐渐加大换水量到60﹪,前期用300目网箱,后期用200目网箱,并使水温保持在16℃,水中添加三级室内池中培育的金藻及小球藻或小硅藻,每天3次,使培育池水中藻类密度分别达到8万cell/ml和4万cell/ml;
步骤4-4,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂;
步骤4-5,将海沙过筛去除石砾、贝壳杂质后洗净,用浓度为20×10-6g/ml的高锰酸钾溶液消毒后,铺在室内普通水泥池或玻璃缸池中,厚度为4cm,池中加水1/2;
步骤4-6,当用非LED灯的强光手电检查培育池上层水中幼虫密度下降时,用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部水在显微镜下检查,当发现已有幼虫伸足时,用300目捞子将幼虫全部接出,放入铺好沙的池中,接幼虫时,先用1根直径50㎜的换水管将幼虫及水吸入捞子中,用2个捞子交替分多次转移幼虫,当水位为10cm时,半开池底的出水口,将幼虫分多次缓缓接入捞子中;
步骤4-7,投喂室内三级池中培育的角毛藻、叉鞭金藻、3011、巴夫藻及室外池塘中的小球藻、青岛大扁藻,投喂时用300目网袋过滤,培育池采用自然水温,每天换水2次,每次换50﹪,换水网箱为150目,加入的新水同亲贝产卵时用水的处理方法相同,严格控制挠足类、轮虫小型浮游动物及卵进入培育池;
步骤4-8,水中每天添加海水用微生态制剂EM菌液1×10-6g/ml来改善水质,禁用抗生素及消毒剂,每隔3天用直径为6mm的PVC中空硬管吸取培育池底部细沙在显微镜下检查幼虫生长情况,苗种达到壳长≥2mm时作为商品苗出池。
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