CN107899003A - 一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜及其制备方法，该医用伤口护理膜以水溶性低聚壳聚糖为基材可制成溶液剂、喷剂等，具有止血，减少组织液渗出、防止组织粘连的作用，使得产品具有良好的生物相容性、止血抗菌和保湿性能的同时，还能有效预防伤口脂肪液化，用于创面处理，可预防创面感染，促进创面快速愈合，对于慢性难愈合或烧烫伤创面的护理效果尤其显著。

Description

一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜及其制备方法

技术领域

本发明属于医用伤口护理技术领域，具体涉及一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜及其制备方法。

背景技术

伤口愈合通常是指因伤造成的缺损组织通过修复和再生的一系列生理过程，表现为组织再生、肉芽生长、瘢痕形成等复杂组合的协同作用。伤口按时间分类可以分为急性伤口和慢性伤口，按受伤累及皮肤深度来划分，又可以分为浅层伤口和全层伤口。导致伤口延迟愈合的原因，内在因素主要与患者的年龄、自体敏感度、营养状况、糖尿病等因素有关，外在因素可能与伤口的损伤程度、感染情况、以及脂肪液化等情况有关系。所以要避免伤口的延迟愈合，必须遵循一定的伤口护理原则，首先我们要控制和减少影响伤口愈合的因素，同时要维持局部伤口的正常生理环境，而这样的要求是传统的干性愈合理论及其敷料所不能满足的。湿性环境有助于伤口的愈合是现代医学对于伤口愈合认知的一个重大突破，在过去人们一直误以为干燥的愈合环境才能避免伤口感染化脓，直到1962年，英国的WINTER博士通过动物实验证明，湿性环境下伤口愈合速度比干性愈合快1倍，此实验为后续的研究奠定了实际基础。传统的敷料用于伤口主要发挥隔离和抑菌作用，但常常导致伤口干燥、破坏健康的生长因子且容易粘连在新生组织上，在敷料去除时会导致伤口的二次创伤；而湿性环境则有助于减轻疼痛，消退炎症，保护新生的肉芽组织，并更好的发挥生长因子的作用从而促进伤口的愈合。因此，理想的医用伤口敷料除了具备细菌阻隔作用外，还必须具备良好的保湿性能。

壳聚糖是一种天然的阳离子多糖，由于它独特的物理特性，足以模拟人体皮肤组织的生理环境，并且直接干预到了创面愈合的三个阶段，因此对创面起到了很好的促愈合、防粘连、防感染、止血、抑制疤痕形成等作用。然而，壳聚糖作为一种高分子化合物，分子量通常在几十万至上百万左右，并且分子结构紧密，不能溶解于水等大部分普通的溶剂这大大限制了其在创面护理方面的应用。为了增加壳聚糖的水溶性，将壳聚糖经特殊的生物酶技术、化学降解或微波降解技术处理后，可以得到一种聚合度在2～20之间的寡糖产品，分子量≤3200Da，它具有壳聚糖所没有的较高溶解度，容易被生物体吸收利用，且生物活性比壳聚糖更强，是水溶性较好、功能作用大、生物活性高的低分子量产品，称为低聚壳聚糖或壳寡糖。低聚壳聚糖，能溶于水，具有优良的生物相溶性和成膜性，并且有滋润、亲肤的特性，可增加人体的免疫力，在弱酸环境中具有较强的抗菌作用和显著的保湿吸湿能力，消除由于微生物侵害而引起的皮炎，对破损的皮肤起到促进愈合的效果。

以低聚壳聚糖为原料的水溶性抗菌复合物在国内外已有一些专利和文献报道，如CN101654499A的发明专利申请公开了低聚壳聚糖的两亲性接枝共聚物与碘的复合物，包括亲水基团和疏水基团，其中的亲水基团含有N-乙烯基吡咯烷酮的聚合物链段；制备时，将碘及表面活性剂通过乳化搅拌形成复合溶液后，加入低聚壳聚糖的两亲性接枝共聚物的水溶液并进一步的高速乳化搅拌分散，最终得到具有良好抗菌效果及药效持久的复合物。但是这种复合物制备工艺复杂，接枝后的低聚壳聚糖成膜效果变差，止血速度缓慢，保湿效果降低，难以给伤口提供合理的湿性环境，使得伤口愈合速度较慢，增加了伤口感染的几率而出现伤口液化的症状。

为此，亟需研发一种制备工艺简单，成膜性等物理性能较好、止血快、保湿效果好、愈合速度快且无毒性的伤口护理膜。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明提供一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜及其制备方法，该医用伤口护理膜以水溶性低聚壳聚糖为基材可制成溶液剂、喷剂等，具有止血，减少组织液渗出、防止组织粘连的作用，使得产品具有良好的生物相容性、止血抗菌和保湿性能的同时，还能有效预防伤口脂肪液化，用于创面处理，可预防创面感染，促进创面快速愈合，对于慢性难愈合或烧烫伤创面的护理效果尤其显著。

本发明采取的技术方案为：一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，以重量份计，包括以下原料：低聚壳聚糖15～30份、聚谷氨酸5～15份、紫苏叶提取物1～5份、表皮生长因子仿生肽1～5份、超低粘度海藻酸钾0.2～5份、维生素C 1～10份、维生素K 1～10份、冰片1～5份、水60～90份。

本发明采用水溶性低聚壳聚糖、聚谷氨酸抗菌、止血、促进细胞再生的物质，与超低粘度海藻酸钾配合，将药效包被在海藻酸钾的网状结构中，在使用时，将抗菌、止血、促细胞再生功能缓慢的释放出来，具有持久稳定的促进创面愈合的效果；同时辅助添加紫苏叶提取物、表皮生长因子仿生肽、超低粘度海藻酸钾、维生素C、维生素K及冰片，共同起到提高了皮肤的抵抗力，促进皮肤的新陈代谢能力，为伤口提供湿润、无菌的愈合环境，具有快速止血的效果，有利于伤口愈合；另外海藻酸钾的水凝性，将本发明产品制成喷剂喷到伤口上后，能够形成一层保护膜，防止外来二次感染。本发明的原材料来源广而易于获得，通过以上原材料配伍，能够迅速高效的杀灭人体皮肤表面的各种细菌，并能够清除腐败物质，促进表皮细胞的优化与生长，增强表皮细胞的质体，在人体表皮形成一层保护膜，使细菌难以到达表皮细胞，从而达到迅速高效止血、抗菌、消炎、促进细胞再生、促进愈合、抑制疤痕增生。

其中，聚谷氨酸是一种可溶性、不含毒性的生物高分子，其结构可控、生物可降解、生物相容性良好，且具有极强的保湿、修复皮肤的功效(与透明质酸相比，其保湿效果超出2～3倍)，而且具有较好的生物黏附性，有利于控制组织的持续性渗血，止血能力较强，其止血过程可不受正常凝血机制影响，对使用抗凝剂的病人、血小板和全血细胞低的病人仍能发挥止血作用；紫苏叶提取物的加入能使产品具有更好的细胞相容性，有利于促进创面肉芽组织的再生；表皮生长因子仿生肽能够激发透明质酸的生物形成，激发纤维母细胞的增殖，并使其合成胶原蛋白和弹性蛋白，启动表皮细胞的生长和细胞的分裂，能控制大部分细胞因子在皮肤上的作用，并通过控制每种细胞因子的产生时间来影响细胞的增殖与分化，促进表皮的再生，促进严重受伤的肉芽组织再生，使得加入表皮生长因子仿生肽后的产品具有显著的促进创面愈合的作用；超低粘度海藻酸钾可以与抗菌物质发生交联反应，将抗菌剂包被在海藻酸钾的网状结构中，可以在使用的时候，使抗菌剂缓慢的释放出来，具有持久稳定的抗菌效果；维生素C、维生素K，能够提高皮肤的抵抗力，促进皮肤新陈代谢，具有促进创面修复的功效，对组织无毒副作用，可以有效的抑制或杀灭伤口细菌，避免出现耐药性，还提供组织细胞赖以生存的葡萄糖和氨基酸等营养物质，促进伤口组织修复生长，促进上皮再生和胶原蛋白的沉积；冰片具有散瘀、止痛、消炎、消肿之功，对多种致病性病毒皮肤真菌具有抑制作用，同时具有凉感，降低伤口周围温度，降低疼痛与灼痛感。

优选的，一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，以重量份计，包括以下原料：低聚壳聚糖20份、聚谷氨酸8份、紫苏叶提取物3份、表皮生长因子仿生肽2份、超低粘度海藻酸钾3份、维生素C 5份、维生素K 5份、冰片2份、水85份。

优选的，所述低聚壳聚糖的分子量在1000～3000之间，脱乙酰度优化为80～95％。

优选的，所述超低粘度海藻酸钾的粘度为40～60cps。

优选的，所述表皮生长因子仿生肽为至少含10个氨基酸的小分子多肽，分子量为1000～2000Da，并采用纳米技术进行包裹，平均粒径在120～150nm之间。间接控制护理膜的粒径，使本发明产品能更快速到达皮肤的表皮层及真皮层并被吸收进入组织及细胞中，促进角质细胞和纤维原细胞的生长，增加细胞黏附，增加角质细胞和纤维原细胞中的胶原蛋白和透明质酸的合成，使创面快速并彻底愈合。

本发明还提供了上述任一医用伤口护理膜的制备方法，包括如下步骤：

(1)按重量份称取各原料；

(2)将低聚壳聚糖、聚谷氨酸、紫苏叶提取物加入部分水中，在温度为40℃～60℃下高速混合搅拌10～30min，再加入海藻酸钾，慢速搅拌30min～60min至均匀，备用；

(3)将维生素C、维生素K加入剩余水中，高速搅拌2～5min至均匀，再加入表皮生长因子仿生肽，高速搅拌2～5min，混合均匀后，备用；

(4)将步骤(2)制得的溶液和步骤(3)制得的溶液混合，并高速搅拌10～20min至均匀，调节pH值至5.5～7.5，然后分装，辐射灭菌后即得到所述所述医用伤口护理膜产品。

优选的，步骤(2)所述高速混合搅拌的搅拌速度150～500r/min。

优选的，步骤(2)溶液的平均粒径在100nm～500nm之间。

本发明主要是采用高速混合搅拌的方式使具有水溶性、良好生物相容性的各原材料分子能在水溶液中自组装形成尺寸均匀的纳米粒，制备出均匀稳定纳米级的溶液型医用伤口护理膜。采用本发明方法制备的护理膜更易透皮，也更易进入组织和细胞中，对皮肤无损伤，具有起效止血速度快、愈合效果好、无任何毒副作用的特点，且能在创面一层保护膜，为创面提供理想的湿性愈合环境，隔绝了空气中的细菌及水，维持创面局部低氧状态，促进坏死组织的溶解，加速清创，另外在促愈的同时减少了伤口的收缩，减小了疤痕的形成，使愈合后的创面更加平整光洁，适用于体表创面伤口的止血、冲洗或湿敷治疗，对于慢性难愈合或烧烫伤创面的护理效果尤其显著。

由于低聚壳聚糖高温时会失去活性，因此，优选的，步骤(2)、(3)、(4)溶液制备过程中温度始终保持在40～60℃。这样在产品制备过程中，一方面保持了有效成份和产品性能的稳定，另一方面降低了能耗。

由于本发明产品选用的各原材料均为水溶性物质，因此采用上述方法可将医用伤口护理膜制成贴剂、喷雾剂或溶液剂，使得护理膜的使用方法可任意选择。

上述护理膜及其制备条件所取的范围是本发明发明人通过大量试验确定的，使得本发明护理膜与现有技术相比，具有如下有益效果：(1)本发明采用水溶性低聚壳聚糖、聚谷氨酸抗菌、止血、促进细胞再生的物质，与超低粘度海藻酸钾配合，将药效包被在海藻酸钾的网状结构中，使产品具有快速且持久地抗菌、止血、促细胞再生、抑制疤痕增生的功效；同时辅助添加紫苏叶提取物、表皮生长因子仿生肽、超低粘度海藻酸钾、维生素C、维生素K及冰片，共同起到提高了皮肤的抵抗力，促进皮肤的新陈代谢能力，为伤口提供湿润、无菌的愈合环境，将本发明产品制成喷剂喷到伤口上后，能够形成一层保护膜，防止外来二次感染。(2)采用本发明方法可制备具有均匀稳定纳米级结构的护理膜，使护理膜具有更好的生物相溶性且更易透皮被吸收，具有持久稳定的抗菌效果，提高皮肤的抵抗力，促进皮肤的新陈代谢能力，加速伤口的愈合，且护理膜的成膜效果好，能够很快的在创面及治疗部位表层形成一层柔软的透明薄膜，可以使护理膜持久停留在修复创面及治疗部位，发挥作用，能给伤口提供湿润的愈合环境，适用于体表创面伤口的止血、冲洗或湿敷治疗；(3)本发明产品能够有效预防伤口脂肪液化，使伤口愈合速度更快且无疤痕，对于慢性难愈合或烧烫伤创面的护理效果尤其显著。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，以重量份计，包括以下原料：低聚壳聚糖20份、聚谷氨酸8份、紫苏叶提取物3份、表皮生长因子仿生肽2份、超低粘度海藻酸钾3份、维生素C5份、维生素K 5份、冰片2份、水85份。其中，低聚壳聚糖的分子量在1850Da之间，脱乙酰度优化为95％；所述超低粘度海藻酸钾的粘度为45cps；所述表皮生长因子仿生肽为含12个氨基酸的小分子多肽，分子量为1500Da，并采用纳米技术进行包裹，平均粒径125nm。

低聚壳聚糖医用伤口护理膜的制备方法，包括如下步骤：

(1)按上述重量份称取各原料；

(2)将低聚壳聚糖、聚谷氨酸、紫苏叶提取物加入部分水中，在温度为45℃下高速混合搅拌25min，搅拌速度450r/min，再加入海藻酸钾，慢速搅拌45min至均匀，备用，溶液的平均粒径300nm；

(3)将维生素C、维生素K加入剩余水中，高速搅拌3min至均匀，再加入表皮生长因子仿生肽，高速搅拌3min，混合均匀后，备用；

(4)将步骤(2)制得的溶液和步骤(3)制得的溶液混合，并高速搅拌15min至均匀，调节pH值至6.5，然后分装，辐射灭菌后即得到所述所述医用伤口护理膜产品。

步骤(2)、(3)、(4)溶液制备过程中温度始终保持在45℃。

实施例2

一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，与实施例1的相比：原料相同，制备方法不同，具体步骤为：

(1)按上述重量份称取各原料；

(2)将低聚壳聚糖、聚谷氨酸、紫苏叶提取物加入部分水中，在温度为55℃下高速混合搅拌20min，搅拌速度500r/min，再加入海藻酸钾，慢速搅拌50min至均匀，备用，溶液的平均粒径450nm；

(3)将维生素C、维生素K加入剩余水中，高速搅拌4min至均匀，再加入表皮生长因子仿生肽，高速搅拌3min，混合均匀后，备用；

(4)将步骤(2)制得的溶液和步骤(3)制得的溶液混合，并高速搅拌15min至均匀，调节pH值至7.5，然后分装，辐射灭菌后即得到所述所述医用伤口护理膜产品。

步骤(2)、(3)、(4)溶液制备过程中温度始终保持在55℃。

实施例3

一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，以重量份计，包括以下原料：低聚壳聚糖15份、聚谷氨酸15份、紫苏叶提取物5份、表皮生长因子仿生肽1份、超低粘度海藻酸钾5份、维生素C 2份、维生素K 8份、冰片5份、水60份；所述低聚壳聚糖的分子量在2000Da，脱乙酰度优化为85％；所述超低粘度海藻酸钾的粘度为60cps；所述表皮生长因子仿生肽为含10个氨基酸的小分子多肽，分子量为2000Da，并采用纳米技术进行包裹，平均粒径150nm。

所述低聚壳聚糖医用伤口护理膜的制备方法，包括如下步骤：

(1)按上述重量份称取各原料；

(2)将低聚壳聚糖、聚谷氨酸、紫苏叶提取物加入部分水中，在温度为50℃下高速混合搅拌15min，搅拌速度250r/min，再加入海藻酸钾，慢速搅拌40min至均匀，备用，溶液的平均粒径100nm；

(3)将维生素C、维生素K加入剩余水中，高速搅拌3min至均匀，再加入表皮生长因子仿生肽，高速搅拌2min，混合均匀后，备用；

(4)将步骤(2)制得的溶液和步骤(3)制得的溶液混合，并高速搅拌20min至均匀，调节pH值至6.0，然后分装，辐射灭菌后即得到所述所述医用伤口护理膜产品。

步骤(2)、(3)、(4)溶液制备过程中温度始终保持在50℃。

实施例4

一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，以重量份计，包括以下原料：低聚壳聚糖25份、聚谷氨酸10份、紫苏叶提取物2份、表皮生长因子仿生肽4份、超低粘度海藻酸钾1份、维生素C 10份、维生素K 2份、冰片3份、水75份。所述低聚壳聚糖的分子量在2500Da之间，脱乙酰度优化为90％。所述超低粘度海藻酸钾的粘度为50cps。所述表皮生长因子仿生肽为含10个氨基酸的小分子多肽，分子量为1300Da，并采用纳米技术进行包裹，平均粒径130nm。

所述低聚壳聚糖医用伤口护理膜的制备方法与实施例2相同。

实施例5

一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，以重量份计，包括以下原料：低聚壳聚糖27份、聚谷氨酸12份、紫苏叶提取物5份、表皮生长因子仿生肽3份、超低粘度海藻酸钾2份、维生素C 8份、维生素K 10份、冰片4份、水70份。所述低聚壳聚糖的分子量1500Da，脱乙酰度优化为95％。所述超低粘度海藻酸钾的粘度为55cps。所述表皮生长因子仿生肽为含12个氨基酸的小分子多肽，分子量为1800Da，并采用纳米技术进行包裹，平均粒径140nm。

所述低聚壳聚糖医用伤口护理膜的制备方法，包括如下步骤：

(1)按上述重量份称取各原料；

(2)将低聚壳聚糖、聚谷氨酸、紫苏叶提取物加入部分水中，在温度为40℃下高速混合搅拌30min，搅拌速度150r/min，再加入海藻酸钾，慢速搅拌60min至均匀，备用，溶液的平均粒径250nm；

(3)将维生素C、维生素K加入剩余水中，高速搅拌5min至均匀，再加入表皮生长因子仿生肽，高速搅拌2min，混合均匀后，备用；

(4)将步骤(2)制得的溶液和步骤(3)制得的溶液混合，并高速搅拌10min至均匀，调节pH值至5.5，然后分装，辐射灭菌后即得到所述所述医用伤口护理膜产品。

步骤(2)、(3)、(4)溶液制备过程中温度始终保持在40℃。

实施例6

一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，以重量份计，包括以下原料：低聚壳聚糖30份、聚谷氨酸5份、紫苏叶提取物1份、表皮生长因子仿生肽5份、超低粘度海藻酸钾0.2份、维生素C 1份、维生素K 1份、冰片1份、水90份。所述低聚壳聚糖的分子量1000Da，脱乙酰度优化为80％；所述超低粘度海藻酸钾的粘度为40cps；所述表皮生长因子仿生肽为含15个氨基酸的小分子多肽，分子量为1000Da，并采用纳米技术进行包裹，平均粒径120nm。

所述低聚壳聚糖医用伤口护理膜的制备方法，包括如下步骤：

(1)按上述重量份称取各原料；

(2)将低聚壳聚糖、聚谷氨酸、紫苏叶提取物加入部分水中，在温度为60℃下高速混合搅拌10min，搅拌速度350r/min，再加入海藻酸钾，慢速搅拌30min至均匀，备用，溶液的平均粒径500nm；

(3)将维生素C、维生素K加入剩余水中，高速搅拌2min至均匀，再加入表皮生长因子仿生肽，高速搅拌4min，混合均匀后，备用；

(4)将步骤(2)制得的溶液和步骤(3)制得的溶液混合，并高速搅拌10min至均匀，调节pH值至7.0，然后分装，辐射灭菌后即得到所述所述医用伤口护理膜产品。

步骤(2)、(3)、(4)溶液制备过程中温度始终保持在50℃。

对比例1

一种伤口护理剂，与实施例1的相比：本实施例包括以下原料：低聚壳聚糖48份、水85份，制备方法与实施例1相同。

对比例2

一种伤口护理剂，与实施例1的相比：本实施例用等量的低聚壳聚糖代替聚谷氨酸，制备方法与实施例1相同。

对比例3

一种伤口护理剂，与实施例1的相比：本实施例用等量的低聚壳聚糖代替超低海藻酸钾，制备方法与实施例1相同。

对比例4

一种伤口护理剂，与实施例1的相比：本实施例用等量的低聚壳聚糖代替紫苏叶提取物，制备方法与实施例1相同。

为验证本发明低聚壳聚糖医用伤口护理膜是否达到预期的效果，将上述实施例1～6及对比例1～4制成溶液型的喷剂，对喷剂进行抗菌试验、成膜效果对比和动物试验，分析本发明止血、抗菌、成膜、促愈合、抗疤痕等功效。

一、抗菌试验

试验结果如下表所示：

从上表可以看出，本发明制备的低聚壳聚糖医用伤口护理膜具有持久稳定的抗菌效果。通过对比实施例和对比例可以发现，采用本发明实施例原料及制备方法得到的低聚壳聚糖医用伤口护理膜对大部分致病菌的抗菌效果优于其它护理剂。

二、成膜效果

将实施例1-6及对比例1-3相应喷剂在人体肌肤进行成膜效果的观察，发现实施例1-6的喷剂能在体表迅速形成一层薄薄的膜，3分钟后膜面依旧湿润，皮肤无紧绷感觉；对比例1、3的喷剂，使皮肤表面湿润，但不成膜，皮肤无紧绷感觉，3分钟后皮肤表面渐干；对比例2的喷剂能在体表迅速形成一层薄薄的膜，皮肤无紧绷感觉，3分钟后膜面渐干，保湿效果差。

三、动物实验

取健康50只SD大鼠，随机平均分为10组，戊巴比妥麻醉(30mg/kg)，在其背部脊柱一侧旁开1cm，利刀全层切除皮肤，形成面积3cm²的圆形全层皮肤切除创面，对侧对称部位皮肤作为正常自身对照。将实施例1-6以及对比例1-4的喷剂喷于创面。观察喷剂成膜效果及大鼠创面恢复情况。

现象：实施例1-6喷剂对应的大鼠创面出血即喷即止，2～3h创面有所缩小，可见新生肉芽组织生成，伤后2～3d时，92％以上的创面愈合，在受伤至痊愈后未见明显细菌感染情况，且无脂肪液化现象发生，痊愈后创面平整无暗色。对比例1喷剂对应的大鼠创面12分钟出血逐渐停止，9h创面有所缩小，伤后13d时，90％以上的创面愈合，在受伤至痊愈后少量细菌感染情况，出现小面积脂肪液化，痊愈后创面处有明显疤痕。对比例2喷剂对应的大鼠创面12分钟出血逐渐停止，6h创面有所缩小，伤后10d时，90％以上的创面愈合，在受伤至痊愈后无细菌感染情况，出现小面积脂肪液化，痊愈后创面处有细微疤痕。

对比例3喷剂对应的大鼠创面4分钟出血逐渐停止，8h创面有所缩小，伤后11d时，90％以上的创面愈合，在受伤至痊愈后少量细菌感染情况，出现小面积脂肪液化，痊愈后创面处有细微疤痕。对比例4喷剂对应的大鼠创面5分钟出血逐渐停止，8h创面有所缩小，伤后10d时，90％以上的创面愈合，在受伤至痊愈后未见明显细菌感染情况，无脂肪液化现象发生，痊愈后创面处有细微疤痕。由此可见：本发明实施例1-7伤口喷剂较对比例1-3伤口喷剂的止血速度以及伤口恢复速率更快，创面恢复状况更好，愈合后的创面更加平整光洁。

免疫组织化学染色观察：大鼠创面贴合实施例1伤口喷剂3d后，对大鼠进行HE染色组织切片，切片中鼠真皮成纤维细胞大量分泌Ⅰ型胶原蛋白，胶原纤维排列紧密，染色呈褐色，Ⅰ型胶原蛋白与组织细胞交错分布，表明皮肤组织愈合良好，也即采用实施例1伤口喷剂能使鼠皮肤创面恢复状况良好。

另外还对实施例1-6的伤口喷剂进行了细胞毒性、急性试验、皮肤刺激以及致敏试验，结果：在细胞毒性试验中显示本发明喷剂无潜在的细胞毒性，在急性试验，皮肤刺激和皮肤致敏试验中均无不良反应。

综上所述，本发明低聚壳聚糖医用伤口护理膜对大部分致病菌具有良好的抗菌效果，同时具有很好的止血效果和生物相容性，且安全无毒，可以安全使用，提高了皮肤的抵抗力，促进皮肤的新陈代谢能力，能给伤口提供湿润、无菌的愈合环境，促进伤口的愈合。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (10)

1.一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，其特征在于，以重量份计，包括以下原料：低聚壳聚糖15～30份、聚谷氨酸5～15份、紫苏叶提取物1～5份、表皮生长因子仿生肽1～5份、超低粘度海藻酸钾0.2～5份、维生素C 1～10份、维生素K 1～10份、冰片1～5份、水60～90份。

2.根据权利要求1所述的一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，其特征在于，以重量份计，包括以下原料：低聚壳聚糖20份、聚谷氨酸8份、紫苏叶提取物3份、表皮生长因子仿生肽2份、超低粘度海藻酸钾3份、维生素C 5份、维生素K 5份、冰片2份、水85份。

3.根据权利要求1所述的一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，其特征在于，所述低聚壳聚糖的分子量在1000～2500Da之间，脱乙酰度优化为80～95％。

4.根据权利要求1所述的一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，其特征在于，所述超低粘度海藻酸钾的粘度为40～60cps。

5.根据权利要求1所述的一种低聚壳聚糖医用伤口护理膜，其特征在于，所述表皮生长因子仿生肽为至少含10个氨基酸的小分子多肽，分子量为1000～2000Da，并采用纳米技术进行包裹，平均粒径在120～150nm之间。

6.权利要求1～5任一所述低聚壳聚糖医用伤口护理膜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)按重量份称取各原料；(2)将低聚壳聚糖、聚谷氨酸、紫苏叶提取物加入部分水中，在温度为40℃～60℃下高速混合搅拌10～30min，再加入海藻酸钾，慢速搅拌30min～60min至均匀，备用；(3)将维生素C、维生素K加入剩余水中，高速搅拌2～5min至均匀，再加入表皮生长因子仿生肽，高速搅拌2～5min，混合均匀后，备用；(4)将步骤(2)制得的溶液和步骤(3)制得的溶液混合，并高速搅拌10～20min至均匀，调节pH值至5.5～7.5，然后分装，辐射灭菌后即得到所述医用伤口护理膜产品。

7.根据权利要求6所述低聚壳聚糖医用伤口护理膜的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述高速混合搅拌的搅拌速度150～500r/min。

8.根据权利要求6所述低聚壳聚糖医用伤口护理膜的制备方法，其特征在于，步骤(2)溶液的平均粒径在100nm～500nm之间。

9.根据权利要求6所述低聚壳聚糖医用伤口护理膜的制备方法，其特征在于，步骤(2)、(3)、(4)溶液制备过程中温度始终保持在40～60℃。

10.将权利要求1所述低聚壳聚糖医用伤口护理膜制成贴剂、喷雾剂或溶液剂。