CN107441547B - 一种创伤修复材料及其制备方法和用途 - Google Patents

一种创伤修复材料及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种创面修复材料,它是包含羊膜粉末和氯化壳聚糖的水凝胶。本发明还公开了创面修复材料的制备方法和用途。本发明将羊膜与氯化壳聚糖组合形成的创伤修复材料对创面的修复效果优良,其效果明显优于市售改性甲壳素凝胶,为临床创面修复提供了一种新的选择,临床应用前景良好。

Description

一种创伤修复材料及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及一种创伤修复材料及其制备方法和用途。
背景技术
创伤修复材料,是指人体受伤后在伤口部位涂覆或覆盖修复材料后能够促进伤口愈合的材料。创伤的愈合是指机体因外界原因皮肤等组织出现断裂或缺损后的愈合过程,包括各组织的再生和肉芽组织增生、瘢痕组织形成的复杂过程,是各种过程的协同作用。而创伤修复材料就是为促进这一过程的出现的,这种材料能够从时间上减少人体的痛苦并在一定程度上减少瘢痕的形成,使其得到了人们的极大关注。
目前市面上用得较多的创伤修复材料主要分为天然生物材料(自体组织、异体组织和异种组织)、人工生物材料(动物性、植物性、金属材料等)和复合生物材料三种。近年来,人工生物材料作为创伤修复材料逐渐淡出视线。天然生物材料及复合生物材料由于其自身修复上的优势在低温生物保存技术改进和提高后有着充分广阔的前景。壳聚糖又名壳多糖、脱乙酰甲壳素、几丁聚糖等。化学名为聚2-氨基-2-脱氧-β-葡萄糖,是地球上含量仅低于纤维素的天然多糖,主要存在于植物,海洋无脊椎动物,昆虫,真菌细胞壁和微生物中,来源广泛,它不仅具有良好的物理机械性能,还有很好的生物相容性和降解性,无毒性,可以用于创面修复。但是壳聚糖本身的修复能力并不佳。
目前,已有报道通过对壳聚糖改性,或者制备成为凝胶制剂的方式来提高修复效果的报道,如,市售药物安尔舒就是用改性甲壳素制备的药物,但是其修复效果仍然不尽人意。
发明内容
为了解决上述问题,本发明提供了一种包含壳聚糖和羊膜成分的复合创伤修复材料。
本发明种创面修复材料,它是包含羊膜粉末和氯化壳聚糖的水凝胶。
优选地,它包括如下成分:羊膜粉末0.5~4重量份、氯化壳聚糖10~30重量份、水200体积份。
重量份与体积份的比是g:mL。
优选地,所述创面修复材料包括如下成分:羊膜粉末2重量份、氯化壳聚糖20重量份、水200体积份。
优选地,所述羊膜粉末的粒径为600-900um。
优选地,所述羊膜粉末按照如下方法制备:
(1)取羊膜,水洗,剪成块状,去除羊膜上的肌层和浆膜层;
(2)水洗晾干,放入胰蛋白酶溶液中,消化6~12h;
(3)水洗后冻干,冻干的温度是-80℃~-40℃;(4)粉碎。
优选地,步骤(2)中,所述胰蛋白酶的浓度是0.1mg/mL~0.5mg/mL。进一步优选地,所述胰蛋白酶的浓度是0.2mg/mL。
优选地,步骤(3)中,所述消化的时间时8h。
优选地,它还包括甘油、醋酸和胃蛋白酶,它们用量分别为3~10体积份、0.01~10体积份、0.01~1重量份。
进一步优选地,所述甘油、醋酸和胃蛋白酶的用量分别6体积份、4体积份、0.04重量份。
本发明还提供了一种制备前述修复材料的方法,其特征在于:步骤如下:
a、按照前述配比,取原料;
b、将醋酸和胃蛋白酶溶于水中,再加入羊膜,混匀,形成溶胶;
c、将氯化壳聚糖溶解在水中,形成溶液;
d、将羊膜溶胶和氯化壳聚糖溶液等体积混合,混匀后再加入甘油,再混匀,即得到水凝胶状创伤修复材料。
本发明还提供了前述修复材料在制备创伤修复药物中的用途。
本发明将羊膜与氯化壳聚糖组合形成的创伤修复材料对创面的修复效果优良,其效果明显优于市售改性甲壳素凝胶,为临床创面修复提供了一种新的选择,临床应用前景良好。
下面通过具体实施方式对本发明做进一步详细说明,但是并不是对本发明的限制,根据本发明的上述内容,按照本领域的普通技术知识和惯用手段,在不脱离本发明上述基本技术思想前提下,还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
附图说明
图1术后3天的修复效果图(左图为实验组,右图为对照组);
图2术后6天的修复效果图(左图为实验组,右图为对照组);
图3术后19天的修复效果图(左图为实验组,右图为对照组);
图4术后27天的修复效果图(左图为实验组,右图为对照组);
图5术后19天的兔耳创伤修复实验HE染色结果(左图为实验组,右图为对照组)。
具体实施方式
原料:
羊膜,选择肝炎病毒抗体、梅毒抗体及人免疫缺陷病毒抗体均为阴性的剖腹产的产妇,无菌操作下取胎膜,钝性分离去除绒毛膜组织,保留羊膜层。
氯化氯化壳聚糖(浙江金壳生物化学有限公司,中国)
胰蛋白酶(Gibco公司,美国)
胃蛋白酶(Sigma公司,美国)
实施例1本发明复合修复材料的制备
1、制备方法
羊膜的制备:
将羊膜从新鲜的胎盘上分离下来,水洗,剪成块状;
刮除附着在羊膜上的肌层和浆膜层;
水洗晾干后,放入胰蛋白酶溶液(浓度为2mg/mL)中,4℃消化6h;
蒸馏水清洗干净后冻干,冻干的温度为-40℃;
用球磨机粉碎,得羊膜粉末(粉碎后的粉末粒径为600-900um);
在100mL去离子水中加入4mL醋酸和0.04g胃蛋白酶,混匀,再加入2g羊膜粉末,混匀,形成溶胶;
同时将20g氯化壳聚糖溶解在100mL去离子水中,形成溶液。
将羊膜溶胶和氯化壳聚糖溶液等体积混合,混匀后再加入5mL的甘油,再混匀,即得到水凝胶状创伤修复材料。
实施例2本发明复合修复材料的制备
1、制备方法
羊膜的制备:
将羊膜从新鲜的胎盘上分离下来,水洗,剪成块状;
刮除附着在羊膜上的肌层和浆膜层;
水洗晾干后,放入胰蛋白酶溶液(浓度为1mg/mL)中,4℃消化8h;
蒸馏水清洗干净后冻干,冻干的温度为-60℃;
用球磨机粉碎,得羊膜粉末(粉碎后的粉末粒径为600-900um);
在100mL去离子水中加入0.01mL醋酸和0.01g胃蛋白酶,混匀,再加入0.5g羊膜粉末,混匀,形成溶胶;
同时将10g氯化壳聚糖溶解在100mL去离子水中,形成溶液;
将羊膜溶胶和氯化壳聚糖溶液等体积混合,混匀后再加入2mL的甘油,再混匀,即得到水凝胶状创伤修复材料。
实施例3本发明复合修复材料的制备
1、制备方法
羊膜的制备:
将羊膜从新鲜的胎盘上分离下来,水洗,剪成块状;
刮除附着在羊膜上的肌层和浆膜层;
水洗晾干后,放入胰蛋白酶溶液(浓度为5mg/mL)中,4℃消化12h;
蒸馏水清洗干净后冻干,冻干的温度为-80℃;
用球磨机粉碎,得羊膜粉末(粉碎后的粉末粒径为600-900um);
在100mL去离子水中加入10mL醋酸和0.1g胃蛋白酶,混匀,再加入4g羊膜粉末,混匀,形成溶胶;
同时将30g氯化壳聚糖溶解在100mL去离子水中,形成溶液。
将羊膜溶胶和氯化壳聚糖溶液等体积混合,混匀后再加入8mL的甘油,再混匀,即得到水凝胶状创伤修复材料。
以下用实验例的方式来证明本发明的有益效果:
实验例1本发明水凝胶产品的疗效
1、实验方法
由四川大学动物实验中心提供的健康新西兰大白兔耳缘静脉注射麻醉,避开血管,钝性分离,使兔耳腹侧形成1×1cm2全层皮肤缺损,纱布止血,每侧可分别形成外上,外下,内侧3处,左侧为实验组,右侧为对照组,形成缺损后,碘伏灭菌。
缺损部位均匀涂上相应促愈合药物0.1g:实验组,涂覆本发明实施例1制备的复合修复材料;对照组涂覆市售安尔舒药膏。
2、实验结果
实验结果如表1和图1~图5所示:
表1实施例1兔耳修复情况
Figure BDA0001004246840000051
可以看出,与对照组相比,本发明水凝胶组,缺损部位愈合的时间更早,愈合的效果更佳,如:本发明水凝胶组,在第6天就开始愈合,而对照组在第10天才开始愈合;本发明在第19天就愈合良好,对照组第27天的愈合效果与本发明第19天的愈合效果相当。
图5可以看说明实验组(左)与对照组(右)均可观察到少量的炎性细胞,表皮厚度不均,角质层增厚,表皮真皮连接境界清楚。而实验组相对而言炎性细胞较少,增生的胶原纤维排列较对照组更为整齐,角质层厚度也较对照组薄。
实验结果说明,本发明水凝胶对创面的修复效果明显优于市售药品安尔舒。
发明人在之前的研究发现,直接使用羊膜溶于水形成的溶胶,涂覆于创面,修复效果不佳,而本发明将羊膜与氯化壳聚糖组合使用后,其效果却比市售经过改良的壳聚糖药物(安尔舒:改性甲壳素凝胶)的效果还要好,而且成本低廉,取得了完全意料不到的技术效果。
综上,本发明将羊膜与氯化壳聚糖组合形成的创伤修复材料对创面的修复效果优良,其效果明显优于市售改性甲壳素凝胶,而且成本低廉,为临床创面修复提供了一种新的选择,临床应用前景良好。

Claims (11)

1.一种创面修复材料,其特征在于:它是包含羊膜粉末和氯化壳聚糖的水凝胶;所述创面修复材料包括如下成分:羊膜粉末0.5~4重量份、氯化壳聚糖10~30重量份、水200体积份。
2.根据权利要求1所述的创面修复材料,其特征在于:它包括如下成分:
羊膜粉末2重量份、氯化壳聚糖20重量份、水200体积份。
3.根据权利要求1或2所述的修复材料,其特征在于:所述羊膜粉末的粒径为600-900μm。
4.根据权利要求1或2所述的修复材料,其特征在于:所述羊膜粉末按照如下方法制备:
(1)取羊膜,水洗,剪成块状,去除羊膜上的肌层和浆膜层;
(2)水洗晾干,放入胰蛋白酶溶液中,消化6~12h;
(3)水洗后冻干,冻干的温度是-80℃~-40℃;
(4)粉碎。
5.根据权利要求4所述的修复材料 ,其特征在于:步骤(2)中,所述胰蛋白酶的浓度是1mg/mL~5mg/mL。
6.根据权利要求5所述的修复材料 ,其特征在于:所述胰蛋白酶的浓度是2mg/mL。
7.根据权利要求4所述的修复材料 ,其特征在于:步骤(2)中,所述消化的时间时8h。
8.根据权利要求1或2所述的修复材料,其特征在于:它还包括甘油、醋酸和胃蛋白酶,它们用量分别为2~8体积份、0.01~10体积份、0.01~1重量份。
9.根据权利要求8所述的修复材料,其特征在于:所述甘油、醋酸和胃蛋白酶的用量分别为5体积份、4体积份、0.04重量份。
10.一种制备权利要求1~9任意一项所述修复材料的方法,其特征在于:步骤如下:
a、按照权利要求1~9任意一项所述配比,取原料;
b、将胃蛋白酶溶于醋酸水溶液中,再加入羊膜,混匀,形成溶胶;
c、将氯化壳聚糖溶解在水中,形成溶液;
d、将羊膜溶胶和氯化壳聚糖溶液等体积混合,混匀后再加入甘油,再混匀,即得到水凝胶状创伤修复材料。
11.权利要求1~9任意一项所述修复材料在制备创伤修复药物中的用途。
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