CN107865216B - 一种桑叶生物饲料及其制备方法和用途 - Google Patents

一种桑叶生物饲料及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及饲料及其加工技术领域，特别涉及一种桑叶生物饲料及其制备方法和用途，本发明的桑叶生物饲料包括如下原料：桑叶酵素、苜蓿酵素、松针酵素、仙人掌提取物、益母草提取物、维生素、螺旋藻、茶籽提取物、马铃薯淀粉和豆粕，申请对原料的桑叶、苜蓿、松针进行益生菌的活化预处理制得桑叶酵素、苜蓿酵素和松针酵素与其余原料复配后，能有效改善饲料口感，丰富饲料营养，能有效提高生物饲料的营养物质含量，提高乳汁品质，从而改善母羊身体素质，加快母羊幼崽生长。

Description

一种桑叶生物饲料及其制备方法和用途
【技术领域】
本发明涉及饲料及其加工技术领域，特别涉及一种桑叶生物饲料及其制备方法和用途。
【背景技术】
桑叶(学名:Folium Mori)，是桑科植物桑的干燥叶，是蚕的日常食物，又名家桑、荆桑、桑椹树、黄桑叶等；桑叶广泛种植在我国南北各地，桑叶嫩爽，含有丰富的蛋白质、氨基酸和微量元素，广泛应用于饲料中，目前，桑叶应用于饲料多是采用将桑叶直接当做青饲料直接被动物嚼食，桑叶直接被动物嚼食之后大部分营养成分都没有被动物体吸收，而且，其中的营养成分也不能完全释放，特别是在妊娠期和哺乳期的母羊，母羊在妊娠期，子宫增大会挤压母羊内脏，羊胃空间也会变小，母羊进食时如果得不到丰富的营养补充，提高乳汁产量，将会影响母羊、胎儿、幼崽的生长，因此，如果能有效提高饲料的营养物质含量，提高乳汁品质，将能有效提高母牛的身体素质，加快母羊幼崽生长。
【发明内容】
鉴于上述内容，有必要进行桑叶饲料的研究，生产出一种能有效提高饲料的营养物质含量，提高乳汁品质，将能有效提高母牛的身体素质，加快母羊幼崽生长。
为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：
一种桑叶生物饲料，所述生物饲料包括如下重量份的原料：40份-50份的桑叶酵素、15份-25份的苜蓿酵素、10份-20份的松针酵素、5份-10份的仙人掌提取物、5份-10份的益母草提取物、2份-5份的维生素、2份-5份的螺旋藻、2份-5份的茶籽提取物、20份-30份的马铃薯淀粉和20份-30份的豆粕。
进一步的，所述桑叶酵素的制备方法为：将新鲜的桑叶捣碎，然后按照5mg/g-10mg/g的添加量向桑叶中添加食盐，搅拌均匀后，按照3mg/g-6mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅰ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到桑叶酵素；所述发酵时间为25d-35d，温度为25℃-30℃，湿度为10％-20％；所述益生菌混合物Ⅰ由如下重量份的成分组成：20份-27份酶活力为1000U/g-1500U/g的纤维素酶、10份-17份酶活力为1000U/g-1500U/g的果胶酶、40份-50份活化后的酵母菌Ⅰ、10份-20份活化后的米曲霉Ⅰ。
进一步的，所述酵母菌Ⅰ、米曲霉Ⅰ的活化方法为：将酵母菌Ⅰ、米曲霉Ⅰ菌株分别置于活化培养基Ⅰ中培养，并监测培养基Ⅰ中酒精的含量，当培养基中酒精的含量达到10mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中酒精的含量达到10mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/3T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为20mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为桑叶汁。
进一步的，所述苜蓿酵素的制备方法为：将新鲜的苜蓿捣碎，然后按照3mg/g-7mg/g的添加量向苜蓿中添加NaOH，搅拌均匀后，按照5mg/g-10mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅱ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到苜蓿酵素；所述发酵时间为20d-30d，温度为22℃-28℃，湿度为10％-15％；所述益生菌混合物Ⅱ由如下重量份的成分组成：10份-17份酶活力为800U/g-1000U/g的纤维素酶、5份-7份酶活力为800U/g-1000U/g的果胶酶、30份-40份活化后的植物乳杆菌Ⅰ、10份-20份活化后的米曲霉Ⅱ。
进一步的，所述植物乳杆菌Ⅰ、米曲霉Ⅱ的活化方法为：将植物乳杆菌Ⅰ、米曲霉Ⅱ菌株分别置于活化培养基Ⅱ中培养，并监测培养基Ⅱ中乳酸的含量，当培养基中乳酸的含量达到30mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中乳酸的含量达到30mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/4T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为30mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为15mg/mL的酵母膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为苜蓿汁。
进一步的，所述松针酵素的制备方法为：将新鲜的松针捣碎，然后向松针中添加5mg/g-10mg/g的氯化镁和7mg/g-9mg/g酶活力为800U/g-1000U/g的纤维素酶，搅拌均匀后，按照5mg/g-10mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅲ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到松针酵素；所述发酵时间为20d-25d，温度为22℃-30℃，湿度为7％-17％；所述益生菌混合物Ⅲ由如下重量份的成分组成：20份-27份酶活力为1000U/g-1500U/g的糖化酶、10份-17份酶活力为1000U/g-1500U/g的果胶酶、20份-30份活化后的乳球菌、25份-35份活化后的植物乳杆菌Ⅱ和15份-25份活化后的米曲霉Ⅱ。
进一步的，所述乳球菌、植物乳杆菌Ⅱ和米曲霉Ⅱ的活化方法为：将乳球菌、植物乳杆菌Ⅱ和米曲霉Ⅱ菌株分别置于活化培养基Ⅲ中培养，并监测培养基Ⅲ中乳酸的含量，当培养基中乳酸的含量达到25mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中乳酸的含量达到25mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/2T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为20mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为15mg/mL的酵母膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为松针汁。
本发明还提供一种制备桑叶生物饲料的方法，该方法包括如下步骤：
(1)按所述重量比称取各原料，将马铃薯淀粉和豆粕混合均匀得到基料；将仙人掌提取物、益母草提取物、茶籽提取物、维生素和螺旋藻得到益生素；将桑叶酵素、苜蓿酵素和松针酵素混合得到混合酵素；
(2)将步骤(1)的基料填装到发酵室内进行厌氧发酵，发酵3d-5d后向基料中添加混合酵素继续发酵15d-20d，之后再向混合物中添加益生素发酵10d-15d得到发酵饲料；所述厌氧发酵的发酵温度为22℃-25℃，湿度为10％-15％；
(3)将步骤(2)的发酵饲料在温度为50℃-60℃的条件下进行烘干、干燥，直至含水率为5％-10％得到所述桑叶生物饲料。
本发明的桑叶生物饲料应用于饲喂妊娠期和哺乳期的母羊。
本发明具有如下有益效果：
1、本发明的桑叶生物饲料由桑叶酵素、苜蓿酵素、松针酵素、仙人掌提取物、益母草提取物、维生素、螺旋藻、茶籽提取物、马铃薯淀粉和豆粕；其中桑叶酵素由桑叶发酵制得，桑叶中含有丰富的蛋白质和微量元素，桑叶经过益生菌活化、发酵后能使桑叶中的蛋白质富集，并且还能促进氨基酸、维生素等小分子物质的释放，但是，桑叶生长期较慢，而且价格较贵、培育较为困难；因此，生物饲料中还添加苜蓿，苜蓿酵素由苜蓿发酵制得，苜蓿产量高，而且草质优良，各种畜禽均喜食，含有丰富的营养物质、蛋白质，能有效克服桑叶成本高的问题；生物饲料中还添加松针酵素，松针能有效保护母羊的卵巢和子宫，能起到有效保胎作用，促进乳汁分泌；仙人掌提取物中含有丰富的维生素、仙人掌多糖和总黄酮能有效提高母羊的免疫力，这些物质是高度活性物质，参与生物化学过程，有效提高生物体的免疫力，降低亚硝酸铵的富集能力；益母草提取物中含有丰富的维生素C和生物碱能有效清除母羊体内自由基，并能有效起到保护母羊子宫的作用；茶籽提取物中含有丰富的不饱和脂肪酸，能有效提高母羊免疫力，降低母羊乳汁的脂肪含量；桑叶生物饲料中的桑叶酵素、苜蓿酵素、松针酵素在发酵之后会有独特香气，能起到诱食作用，但是，各原料在发酵过程中，会产生大量的亚硝酸铵物质，这些物质对动物体有致癌作用，同时，如果母羊食用过多也会容易造成中毒现象，为了有效分解亚硝酸铵类物质，申请人发现，可以向其中添加马铃薯淀粉和松针提取物，马铃薯淀粉和松针提取物中还有丰富的维生素C能有效有效地阻断亚硝酰胺类(NAD)合成，抑制或降低亚硝基化合物的生成。本申请的桑叶、松针、苜蓿均通过益生菌进行发酵处理，本申请的益生菌均通过驯化进行处理，驯化过程均使用特殊培养基进行驯化，培养基中添加了桑叶汁、松针汁和苜蓿汁能有效适应桑叶、松针和苜蓿的发酵过程，能快速分解桑叶、松针和苜蓿；同时，这些益生菌经过发酵后，能有效进入母羊体内，从而起到调节母羊肠胃作用。
【具体实施方式】
本说明书中公开的所有特征，或公开的所有方法或过程中的步骤，除了互相排斥的特征和/或步骤以外，均可以以任何方式组合。
本说明书(包括任何附加权利要求、摘要)中公开的任一特征，除非特别叙述，每个特征只是一系列等效或类似特征中的一个例子而已。
实施例1：
一种桑叶生物饲料，所述生物饲料包括如下重量份的原料：40份的桑叶酵素、15份的苜蓿酵素、10份的松针酵素、5份的仙人掌提取物、5份的益母草提取物、2份的维生素、2份的螺旋藻、2份的茶籽提取物、20份的马铃薯淀粉和20份的豆粕。
本实施例的桑叶酵素制备方法为：将新鲜的桑叶捣碎，然后按照5mg/g的添加量向桑叶中添加食盐，搅拌均匀后，按照3mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅰ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到桑叶酵素；所述发酵时间为25d，温度为25℃，湿度为10％；所述益生菌混合物Ⅰ由如下重量份的成分组成：20份酶活力为1000U/g的纤维素酶、10份酶活力为1000U/g的果胶酶、40份活化后的酵母菌Ⅰ、10份活化后的米曲霉Ⅰ。其中，酵母菌Ⅰ、米曲霉Ⅰ的活化方法为：将酵母菌Ⅰ、米曲霉Ⅰ菌株分别置于活化培养基Ⅰ中培养，并监测培养基Ⅰ中酒精的含量，当培养基中酒精的含量达到10mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中酒精的含量达到10mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/3T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为20mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为桑叶汁。
本实施例的苜蓿酵素制备方法为：将新鲜的苜蓿捣碎，然后按照3mg/g的添加量向苜蓿中添加NaOH，搅拌均匀后，按照5mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅱ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到苜蓿酵素；所述发酵时间为20d，温度为22℃，湿度为10％；所述益生菌混合物Ⅱ由如下重量份的成分组成：10份酶活力为800U/g的纤维素酶、5份酶活力为800U/g的果胶酶、30份-40份活化后的植物乳杆菌Ⅰ、10份活化后的米曲霉Ⅱ。其中，植物乳杆菌Ⅰ、米曲霉Ⅱ的活化方法为：将植物乳杆菌Ⅰ、米曲霉Ⅱ菌株分别置于活化培养基Ⅱ中培养，并监测培养基Ⅱ中乳酸的含量，当培养基中乳酸的含量达到30mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中乳酸的含量达到30mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/4T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为30mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为15mg/mL的酵母膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为苜蓿汁。
本实施例的松针酵素制备方法为：将新鲜的松针捣碎，然后向松针中添加5mg/g的氯化镁和7mg/g酶活力为800U/g的纤维素酶，搅拌均匀后，按照5mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅲ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到松针酵素；所述发酵时间为20d，温度为22℃，湿度为7％；所述益生菌混合物Ⅲ由如下重量份的成分组成：20份-酶活力为1000U/g的糖化酶、10份酶活力为1000U/g的果胶酶、20份活化后的乳球菌、25份活化后的植物乳杆菌Ⅱ和15份活化后的米曲霉Ⅱ。其中，乳球菌、植物乳杆菌Ⅱ和米曲霉Ⅱ的活化方法为：将乳球菌、植物乳杆菌Ⅱ和米曲霉Ⅱ菌株分别置于活化培养基Ⅲ中培养，并监测培养基Ⅲ中乳酸的含量，当培养基中乳酸的含量达到25mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中乳酸的含量达到25mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/2T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为20mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为15mg/mL的酵母膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为松针汁。
其中，仙人掌提取物的提取方法为：将新鲜仙人掌取刺、捣碎，然后与体积百分数为75％的乙醇溶液按照质量比为1:3进行混合，然后将混合物放入-5℃的冰柜中静置17h，再将混合物放在超声提取器中进行超声提取，提取温度为70℃，提取时间为30min，提取功率为1000w，之后再将混合物放入115℃的回流提取器中进行回流提取12h，过滤去除滤渣，将滤液进行旋转蒸发浓缩、干燥直至含水率为5％得到仙人掌提取物；提取物中维生素含量为134.98mg/g；仙人掌多糖的含量为98.08mg/g；总黄酮含量为153.97mg/g。
其中，益母草提取物的提取方法为：将新鲜益母草捣碎，然后与体积百分数为15％的丙酮溶液按照质量比为1:4进行混合，然后将混合物放入-3℃的冰柜中静置24h，然后将混合物放入105℃的回流提取器中进行回流提取20h，过滤去除滤渣，将滤液进行旋转蒸发浓缩、干燥直至含水率为4％得到益母草提取物；提取物中维生素C含量为128.06mg/g；生物碱的含量为263.76mg/g。
其中，茶籽提取物的提取方法为：将含水率为5％的茶籽进行粉碎，然后与体积百分数为75％的乙醇溶液按照质量比为1:3进行混合，然后将混合物放入微波提取器中进行微波预处理，微波预处理的频率为2250MHZ,功率为1000W，处理时间为180s；微波处理后将茶籽粉放置在萃取釜中进行CO2的超临界萃取，所述超临界萃取的流量为50L/min，萃取压力为50MPa，萃取温度为50℃、解析温度40℃，萃取时间为6h；萃取物进入分离罐进行离心分离得到茶籽提取物；茶籽提取物的主要成分为茶籽精油，茶籽精油中不饱和脂肪酸含量为92.08％。
本实施例桑叶生物饲料的方法包括如下步骤：
(1)按所述重量比称取各原料，将马铃薯淀粉和豆粕混合均匀得到基料；将仙人掌提取物、益母草提取物、茶籽提取物、维生素和螺旋藻得到益生素；将桑叶酵素、苜蓿酵素和松针酵素混合得到混合酵素；
(2)将步骤(1)的基料填装到发酵室内进行厌氧发酵，发酵3d后向基料中添加混合酵素继续发酵15d，之后再向混合物中添加益生素发酵10d得到发酵饲料；所述厌氧发酵的发酵温度为22℃，湿度为10％；
(3)将步骤(2)的发酵饲料在温度为50℃的条件下进行烘干、干燥，直至含水率为5％得到所述桑叶生物饲料。
本实施例的桑叶生物饲料应用于饲喂妊娠期和哺乳期的母羊。
本实施例培养基中桑叶汁的加工方法为：将桑叶与水按照质量比为2:1混合、破碎后过滤去除滤渣制得。
本实施例培养基中苜蓿汁的加工方法为：将桑叶与水按照质量比为4:1混合、破碎后过滤去除滤渣制得。
本实施例培养基中松针汁的加工方法为：将桑叶与水按照质量比为3:1混合、破碎后过滤去除滤渣制得。
实施例2：
一种桑叶生物饲料，所述生物饲料包括如下重量份的原料：50份的桑叶酵素、25份的苜蓿酵素、20份的松针酵素、10份的仙人掌提取物、10份的益母草提取物、5份的维生素、5份的螺旋藻、5份的茶籽提取物、30份的马铃薯淀粉和30份的豆粕。
本实施例的桑叶酵素制备方法为：将新鲜的桑叶捣碎，然后按照10mg/g的添加量向桑叶中添加食盐，搅拌均匀后，按照6mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅰ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到桑叶酵素；所述发酵时间为35d，温度为30℃，湿度为20％；所述益生菌混合物Ⅰ由如下重量份的成分组成：27份酶活力为1500U/g的纤维素酶、17份酶活力为1500U/g的果胶酶、50份活化后的酵母菌Ⅰ、20份活化后的米曲霉Ⅰ。其中，酵母菌Ⅰ、米曲霉Ⅰ的活化方法为：将酵母菌Ⅰ、米曲霉Ⅰ菌株分别置于活化培养基Ⅰ中培养，并监测培养基Ⅰ中酒精的含量，当培养基中酒精的含量达到10mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中酒精的含量达到10mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/3T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为20mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为桑叶汁。
本实施例的苜蓿酵素制备方法为：将新鲜的苜蓿捣碎，然后按照7mg/g的添加量向苜蓿中添加NaOH，搅拌均匀后，按照10mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅱ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到苜蓿酵素；所述发酵时间为30d，温度为28℃，湿度为15％；所述益生菌混合物Ⅱ由如下重量份的成分组成：17份酶活力为1000U/g的纤维素酶、7份酶活力为1000U/g的果胶酶、40份活化后的植物乳杆菌Ⅰ、20份活化后的米曲霉Ⅱ。其中，植物乳杆菌Ⅰ、米曲霉Ⅱ的活化方法为：将植物乳杆菌Ⅰ、米曲霉Ⅱ菌株分别置于活化培养基Ⅱ中培养，并监测培养基Ⅱ中乳酸的含量，当培养基中乳酸的含量达到30mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中乳酸的含量达到30mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/4T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为30mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为15mg/mL的酵母膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为苜蓿汁。
本实施例的松针酵素制备方法为：将新鲜的松针捣碎，然后向松针中添加10mg/g的氯化镁和9mg/g酶活力为1000U/g的纤维素酶，搅拌均匀后，按照10mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅲ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到松针酵素；所述发酵时间为25d，温度为30℃，湿度为17％；所述益生菌混合物Ⅲ由如下重量份的成分组成：27份酶活力为1500U/g的糖化酶、17份酶活力为1500U/g的果胶酶、30份活化后的乳球菌、35份活化后的植物乳杆菌Ⅱ和25份活化后的米曲霉Ⅱ。其中，乳球菌、植物乳杆菌Ⅱ和米曲霉Ⅱ的活化方法为：将乳球菌、植物乳杆菌Ⅱ和米曲霉Ⅱ菌株分别置于活化培养基Ⅲ中培养，并监测培养基Ⅲ中乳酸的含量，当培养基中乳酸的含量达到25mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中乳酸的含量达到25mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/2T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为20mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为15mg/mL的酵母膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为松针汁。
(本实施例中仙人掌提取物、益母草提取物、茶籽提取物的提取方法与实施例1完全一致。)
本实施例桑叶生物饲料的方法包括如下步骤：
(1)按所述重量比称取各原料，将马铃薯淀粉和豆粕混合均匀得到基料；将仙人掌提取物、益母草提取物、茶籽提取物、维生素和螺旋藻得到益生素；将桑叶酵素、苜蓿酵素和松针酵素混合得到混合酵素；
(2)将步骤(1)的基料填装到发酵室内进行厌氧发酵，发酵5d后向基料中添加混合酵素继续发酵20d，之后再向混合物中添加益生素发酵15d得到发酵饲料；所述厌氧发酵的发酵温度为25℃，湿度为15％；
(3)将步骤(2)的发酵饲料在温度为60℃的条件下进行烘干、干燥，直至含水率为10％得到所述桑叶生物饲料。
本实施例的桑叶生物饲料应用于饲喂妊娠期和哺乳期的母羊。
本实施例培养基中桑叶汁的加工方法为：将桑叶与水按照质量比为2:1混合、破碎后过滤去除滤渣制得。
本实施例培养基中苜蓿汁的加工方法为：将桑叶与水按照质量比为4:1混合、破碎后过滤去除滤渣制得。
本实施例培养基中松针汁的加工方法为：将桑叶与水按照质量比为3:1混合、破碎后过滤去除滤渣制得。
实施例3：
一种桑叶生物饲料，所述生物饲料包括如下重量份的原料：45份的桑叶酵素、20份的苜蓿酵素、15份的松针酵素、7份的仙人掌提取物、8份的益母草提取物、7份的维生素、3份的螺旋藻、3份的茶籽提取物、25份的马铃薯淀粉和22份的豆粕。
本实施例的桑叶酵素制备方法为：将新鲜的桑叶捣碎，然后按照7mg/g的添加量向桑叶中添加食盐，搅拌均匀后，按照5mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅰ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到桑叶酵素；所述发酵时间为30d，温度为27℃，湿度为15％；所述益生菌混合物Ⅰ由如下重量份的成分组成：22份酶活力为1200U/g的纤维素酶、13份酶活力为1200U/g的果胶酶、45份活化后的酵母菌Ⅰ、15份活化后的米曲霉Ⅰ。其中，酵母菌Ⅰ、米曲霉Ⅰ的活化方法为：将酵母菌Ⅰ、米曲霉Ⅰ菌株分别置于活化培养基Ⅰ中培养，并监测培养基Ⅰ中酒精的含量，当培养基中酒精的含量达到10mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中酒精的含量达到10mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/3T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为20mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为桑叶汁。
本实施例的苜蓿酵素制备方法为：将新鲜的苜蓿捣碎，然后按照5mg/g的添加量向苜蓿中添加NaOH，搅拌均匀后，按照7mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅱ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到苜蓿酵素；所述发酵时间为25d，温度为25℃，湿度为12％；所述益生菌混合物Ⅱ由如下重量份的成分组成：12份酶活力为900U/g的纤维素酶、6份酶活力为900U/g的果胶酶、35份活化后的植物乳杆菌Ⅰ、15份活化后的米曲霉Ⅱ。其中，植物乳杆菌Ⅰ、米曲霉Ⅱ的活化方法为：将植物乳杆菌Ⅰ、米曲霉Ⅱ菌株分别置于活化培养基Ⅱ中培养，并监测培养基Ⅱ中乳酸的含量，当培养基中乳酸的含量达到30mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中乳酸的含量达到30mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/4T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为30mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为15mg/mL的酵母膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为苜蓿汁。
本实施例的松针酵素制备方法为：将新鲜的松针捣碎，然后向松针中添加7mg/g的氯化镁和8mg/g酶活力为900U/g的纤维素酶，搅拌均匀后，按照7mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅲ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到松针酵素；所述发酵时间为22d，温度为25℃，湿度为12％；所述益生菌混合物Ⅲ由如下重量份的成分组成：23份酶活力为1200U/g的糖化酶、13份酶活力为1200U/g的果胶酶、25份活化后的乳球菌、30份活化后的植物乳杆菌Ⅱ和20份活化后的米曲霉Ⅱ。其中，乳球菌、植物乳杆菌Ⅱ和米曲霉Ⅱ的活化方法为：将乳球菌、植物乳杆菌Ⅱ和米曲霉Ⅱ菌株分别置于活化培养基Ⅲ中培养，并监测培养基Ⅲ中乳酸的含量，当培养基中乳酸的含量达到25mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中乳酸的含量达到25mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/2T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为20mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为15mg/mL的酵母膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为松针汁。
(本实施例中仙人掌提取物、益母草提取物、茶籽提取物的提取方法与实施例1完全一致。)
本实施例桑叶生物饲料的方法包括如下步骤：
(1)按所述重量比称取各原料，将马铃薯淀粉和豆粕混合均匀得到基料；将仙人掌提取物、益母草提取物、茶籽提取物、维生素和螺旋藻得到益生素；将桑叶酵素、苜蓿酵素和松针酵素混合得到混合酵素；
(2)将步骤(1)的基料填装到发酵室内进行厌氧发酵，发酵4d后向基料中添加混合酵素继续发酵18d，之后再向混合物中添加益生素发酵12d得到发酵饲料；所述厌氧发酵的发酵温度为23℃，湿度为12％；
(3)将步骤(2)的发酵饲料在温度为55℃的条件下进行烘干、干燥，直至含水率为7％得到所述桑叶生物饲料。
本实施例的桑叶生物饲料应用于饲喂妊娠期和哺乳期的母羊。
本实施例培养基中桑叶汁的加工方法为：将桑叶与水按照质量比为2:1混合、破碎后过滤去除滤渣制得。
本实施例培养基中苜蓿汁的加工方法为：将桑叶与水按照质量比为4:1混合、破碎后过滤去除滤渣制得。
本实施例培养基中松针汁的加工方法为：将桑叶与水按照质量比为3:1混合、破碎后过滤去除滤渣制得。
对照组1：
本对照组的其它参数、方法与实施例1完全一致，但是桑叶生物饲料中不含桑叶酵素，即桑叶生物饲料的组成为：15份的苜蓿酵素、10份的松针酵素、5份的仙人掌提取物、5份的益母草提取物、2份的维生素、2份的螺旋藻、2份的茶籽提取物、20份的马铃薯淀粉和20份的豆粕。
对照组2：
本对照组的其它参数、方法与实施例1完全一致，但是桑叶生物饲料中不含苜蓿酵素，即桑叶生物饲料的组成为：40份的桑叶酵素、10份的松针酵素、5份的仙人掌提取物、5份的益母草提取物、2份的维生素、2份的螺旋藻、2份的茶籽提取物、20份的马铃薯淀粉和20份的豆粕。
对照组3：
本对照组的其它参数、方法与实施例1完全一致，但是桑叶生物饲料中不含松针酵素，即桑叶生物饲料的组成为：40份的桑叶酵素、15份的苜蓿酵素、5份的仙人掌提取物、5份的益母草提取物、2份的维生素、2份的螺旋藻、2份的茶籽提取物、20份的马铃薯淀粉和20份的豆粕。
对照组4：
本对照组的其它参数、方法与实施例1完全一致，但是桑叶生物饲料中不含仙人掌提取物，即桑叶生物饲料的组成为：40份的桑叶酵素、15份的苜蓿酵素、10份的松针酵素、5份的益母草提取物、2份的维生素、2份的螺旋藻、2份的茶籽提取物、20份的马铃薯淀粉和20份的豆粕。
对照组5：
本对照组的其它参数、方法与实施例1完全一致，但是桑叶生物饲料中不含益母草提取物，即桑叶生物饲料的组成为：40份的桑叶酵素、15份的苜蓿酵素、10份的松针酵素、5份的仙人掌提取物、2份的维生素、2份的螺旋藻、2份的茶籽提取物、20份的马铃薯淀粉和20份的豆粕。
对照组6：
本对照组的其它参数、方法与实施例1完全一致，但是桑叶生物饲料中不含茶籽提取物，即桑叶生物饲料的组成为：40份的桑叶酵素、15份的苜蓿酵素、10份的松针酵素、5份的仙人掌提取物、5份的益母草提取物、2份的维生素、2份的螺旋藻、20份的马铃薯淀粉和20份的豆粕。
对照组7：
本对照组的其它参数、方法与实施例1完全一致，但是桑叶生物饲料中的桑叶酵素、苜蓿酵素、松针酵素所使用益生菌均没有使用本申请的活化方式进行活化；而是直接使用市售的益生菌。
对照组8：
本对照组的其它参数、方法与实施例1完全一致，但是桑叶生物饲料中直接使用植物进行发酵，而未经过原料预处理，即：使用40份的桑叶、15份的苜蓿、10份的松针、5份的仙人掌、5份的益母草、2份的维生素、2份的螺旋藻、2份的茶籽、20份的马铃薯淀粉和20份的豆粕直接进行混合进行发酵制得。
测试试验：
测定实施例1-3和对照组1-8的桑叶生物饲料的蛋白质、有效活菌数、维生素C、蛋氨酸和赖氨酸，具体如表1所示：
表1
Figure BDA0001470195260000131
Figure BDA0001470195260000141
由上表可知，实施例1-3的蛋白质明显高于对照组1-8，其中对照组8最低，说明本申请的桑叶酵素、苜蓿酵素、松针酵素能有效提高桑叶生物饲料的蛋白质含量；实施例1-3的有效活菌数含量、维生素C、缬氨酸、赖氨酸明显高于对照组1-3和对照组7-8与对照组4-5相当，说明申请中仙人掌提取物、益母草提取物、茶籽提取物对桑叶生物饲料的有效活菌数含量、维生素C、缬氨酸、赖氨酸含量影响不大；对照组8的蛋白质含量、有效活菌数含量、维生素C含量、缬氨酸含量、赖氨酸含量最低，说明本申请原料预处理是有效提高蛋白质含量、有效活菌数含量、维生素C含量、缬氨酸含量和赖氨酸含量的最有效手段。
饲养试验：母羊妊娠期和哺乳期喂养试验
妊娠期：指的是母羊发情开始至生产结束。
哺乳期：指的是母羊生产开始至断奶。
将妊娠期和哺乳期的母羊均分成10组，每组10头，在同等条件下进行养殖，仅饲料配方不同，养殖过程做好记录，当母羊断奶后结束本实验的喂养，记录结果见表12：
实验期饲料配方：
生长期草鱼饲料配方如下：
试验组1：青饲料50％、麸皮10％、实施例1的桑叶生物饲料40％；
试验组2：青饲料50％、麸皮10％、对照组1的桑叶生物饲料40％；
试验组3：青饲料50％、麸皮10％、对照组2的桑叶生物饲料40％；
试验组4：青饲料50％、麸皮10％、对照组3的桑叶生物饲料40％；
试验组5：青饲料50％、麸皮10％、对照组4的桑叶生物饲料40％；
试验组6：青饲料50％、麸皮10％、对照组5的桑叶生物饲料40％；
试验组7：青饲料50％、麸皮10％、对照组6的桑叶生物饲料40％；
试验组8：青饲料50％、麸皮10％、对照组7的桑叶生物饲料40％；
试验组9：青饲料50％、麸皮10％、对照组8的桑叶生物饲料40％；
对照组：青饲料70％、麸皮30％；
测试试验组1-9和对照组中母羊乳汁中的蛋白含量、脂肪含量、总氨基酸含量和哺乳期羊仔的日均增重量，具体见表2
表2
Figure BDA0001470195260000151
由上表可知，试验组1乳汁的蛋白质含量、总氨基酸含量，羊仔日均增重量明显高于试验组2-9和对照组；其中，试验组9和对照组乳汁的蛋白质含量、总氨基酸含量，羊仔日均增重量最低；试验组1乳汁的脂肪含量明显低于试验组2-9和对照组；其中，试验组9和对照组乳汁的脂肪含量最高；说明，本申请的桑叶生物饲料可明显提高乳汁的蛋白质含量和总氨基酸含量，降低乳汁中的脂肪含量，羊仔食用本申请的；而且其中成分缺一不可；试验组9乳汁蛋白质、脂肪和总氨基酸含量与对照组相近，说明本申请原料预处理是有效提高乳汁蛋白质和总氨基酸含量，降低脂肪含量。
综上所述，使用本发明生产的桑叶生物饲料，能有效提高饲料中的蛋白质、有效活菌数、维生素C、蛋氨酸和赖氨酸含量；提高乳汁的蛋白质和总氨基酸含量，降低乳汁的脂肪含量，更适合妊娠期、哺乳期的母羊，能加快羊仔生长。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (2)

1.一种桑叶生物饲料，其特征在于，所述生物饲料包括如下重量份的原料：40份-50份的桑叶酵素、15份-25份的苜蓿酵素、10份-20份的松针酵素、5份-10份的仙人掌提取物、5份-10份的益母草提取物、2份-5份的维生素、2份-5份的螺旋藻、2份-5份的茶籽提取物、20份-30份的马铃薯淀粉和20份-30份的豆粕；
所述桑叶酵素的制备方法为：将新鲜的桑叶捣碎，然后按照5mg/g-10mg/g的添加量向桑叶中添加食盐，搅拌均匀后，按照3mg/g-6mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅰ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到桑叶酵素；所述发酵时间为25d-35d，温度为25℃-30℃，湿度为10％-20％；所述益生菌混合物Ⅰ由如下重量份的成分组成：20份-27份酶活力为1000U/g-1500U/g的纤维素酶、10份-17份酶活力为1000U/g-1500U/g的果胶酶、40份-50份活化后的酵母菌Ⅰ、10份-20份活化后的米曲霉Ⅰ；
所述酵母菌Ⅰ、米曲霉Ⅰ的活化方法为：将酵母菌Ⅰ、米曲霉Ⅰ菌株分别置于活化培养基Ⅰ中培养，并监测培养基Ⅰ中酒精的含量，当培养基中酒精的含量达到10mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中酒精的含量达到10mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/3T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为20mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为桑叶汁；
所述苜蓿酵素的制备方法为：将新鲜的苜蓿捣碎，然后按照3mg/g-7mg/g的添加量向苜蓿中添加NaOH，搅拌均匀后，按照5mg/g-10mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅱ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到苜蓿酵素；所述发酵时间为20d-30d，温度为22℃-28℃，湿度为10％-15％；所述益生菌混合物Ⅱ由如下重量份的成分组成：10份-17份酶活力为800U/g-1000U/g的纤维素酶、5份-7份酶活力为800U/g-1000U/g的果胶酶、30份-40份活化后的植物乳杆菌Ⅰ、10份-20份活化后的米曲霉Ⅱ；
所述植物乳杆菌Ⅰ、米曲霉Ⅱ的活化方法为：将植物乳杆菌Ⅰ、米曲霉Ⅱ菌株分别置于活化培养基Ⅱ中培养，并监测培养基Ⅱ中乳酸的含量，当培养基中乳酸的含量达到30mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中乳酸的含量达到30mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/4T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为30mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为15mg/mL的酵母膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为苜蓿汁；
所述松针酵素的制备方法为：将新鲜的松针捣碎，然后向松针中添加5mg/g-10mg/g的氯化镁和7mg/g-9mg/g酶活力为800U/g-1000U/g的纤维素酶，搅拌均匀后，按照5mg/g-10mg/g的添加量添加活化后的益生菌混合物Ⅲ，混合均匀后将混合物放入发酵罐中进行密闭发酵得到松针酵素；所述发酵时间为20d-25d，温度为22℃-30℃，湿度为7％-17％；所述益生菌混合物Ⅲ由如下重量份的成分组成：20份-27份酶活力为1000U/g-1500U/g的糖化酶、10份-17份酶活力为1000U/g-1500U/g的果胶酶、20份-30份活化后的乳球菌、25份-35份活化后的植物乳杆菌Ⅱ和15份-25份活化后的米曲霉Ⅱ；
所述乳球菌、植物乳杆菌Ⅱ和米曲霉Ⅱ的活化方法为：将乳球菌、植物乳杆菌Ⅱ和米曲霉Ⅱ菌株分别置于活化培养基Ⅲ中培养，并监测培养基Ⅲ中乳酸的含量，当培养基中乳酸的含量达到25mg/mL时结束第一期培养，并将培养时间记为T1；第一期培养结束后进行第二期培养，挑选出第一期培养结束后的菌株并置于相同配方的培养中培养，并重复第一期培养过程，当培养基中乳酸的含量达到25mg/mL时结束第二期培养，并将培养时间记为T2；如此重复进行n期培养，当Tn＝1/2T1时，完成活化过程；所述活化培养基Ⅰ的由如下成分组成：质量浓度为20mg/mL的纤维素、质量浓度为5mg/mL的葡萄糖、质量浓度为20mg/mL的牛肉膏、质量浓度为15mg/mL的酵母膏、质量浓度为10mg/mL的蛋白胨、质量浓度为10mg/mL的琼脂、其余为松针汁；
所述桑叶生物饲料应用于饲喂妊娠期和哺乳期的母羊。
2.一种制备权利要求1所述的桑叶生物饲料的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
(1)按所述重量比称取各原料，将马铃薯淀粉和豆粕混合均匀得到基料；将仙人掌提取物、益母草提取物、茶籽提取物、维生素和螺旋藻得到益生素；将桑叶酵素、苜蓿酵素和松针酵素混合得到混合酵素；
(2)将步骤(1)的基料填装到发酵室内进行厌氧发酵，发酵3d-5d后向基料中添加混合酵素继续发酵15d-20d，之后再向混合物中添加益生素发酵10d-15d得到发酵饲料；所述厌氧发酵的发酵温度为22℃-25℃，湿度为10％-15％；
(3)将步骤(2)的发酵饲料在温度为50℃-60℃的条件下进行烘干、干燥，直至含水率为5％-10％得到所述桑叶生物饲料。
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