CN110604223A - 桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，属于饲料添加剂领域。所述桑叶提取物的有效成分为桑叶黄酮和桑叶多酚。还公开了一种促水牛泌乳饲料按照重量份包括以下组分：玉米、木薯渣、豆粕、麦麸、棉粕、菜粕、食盐、小苏打、石粉、磷酸氢钙、椰子油、鱼油、L‑盐酸赖氨酸、预混料、糖蜜酵母、过瘤胃蛋白、过瘤胃脂肪和桑叶提取物。该泌乳饲料能够提高水牛的泌乳性能，而且水牛乳的乳蛋白含量显著提高。

Description

桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用
技术领域
本发明涉及饲料添加剂制备技术领域，具体涉及一种桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用。
背景技术
水牛是热带、亚热带地区特有的家畜，具有乳、肉、役的多种用途，有着较高的经济价值。相比婆罗门牛，水牛肉含有更多的瘦肉组分和更低的胆固醇含量，从健康的角度更有益于人们食用(Maria等，2015)，其中水牛奶又具有丰富的营养价值，能用于生产高品质的乳酪、干酪等(杨炳壮，2011)。南方地区夏季由于气候炎热，高温高湿，荷斯坦奶牛适应性差，水牛成为南方地区奶业发展的首选。但目前存在着奶水牛存栏量少、产奶总量小、单产水平低等一系列问题，研究如何进一步提高水牛生产性能成为重点。
水牛奶，与人们熟知的乳用牛(常见的是荷斯坦奶牛)产的奶不同。水牛奶被誉为“奶中之王”，它在安全性、营养价值、加工特性等方面具有其它畜乳不可比拟的优势。随着人们对水牛乳的不断认识和研究，世界水牛乳产业也迅猛发展，水牛奶的消费人群正逐渐增加，水牛奶已成为人类一种营养丰富食品。水牛奶的干物质含量是18.9％，比荷斯坦牛奶高大约5％；蛋白质和脂肪含量是荷斯坦牛奶的1.5倍。水牛奶乳化特性好，100千克的水牛奶可生产25公斤奶酪，而相同量的荷斯坦牛奶只能生产12.5公斤奶酪。此外，水牛奶矿物质含量和维生素含量也优于荷斯坦奶牛，铁和维生素A的含量是荷斯坦牛奶的约80倍，并被认为是最好的补钙、补磷食品之一。
但是，水牛奶产量较低，水牛奶及奶制品的价格远远高于奶牛奶。在我国水牛主产区广西，每公斤鲜水牛奶收购价为8-11元，而荷斯坦牛奶仅为3元～4元；在意大利，水牛奶的价格是荷斯坦牛奶的3倍，前者每公斤1美元，后者0.3美元，1公斤水牛奶酪25美元，价格接近荷斯坦牛奶奶酪的4倍。因此，提高水牛的泌乳量成为市场亟需。
水牛能够很好地适应泥泞沼泽地的湿热气候条件，因此在热带和亚热带地区能够长期存在。然而，由于气候变化导致的全球变暖，环境因素对水牛生长和生产效率的影响不容忽视。气候变量如温度，湿度和辐射的变化会对家畜物种的生长和生产带来潜在威胁。随着全球变暖趋势加剧，特别是热带亚热带地区在随后几十年内平均气温将会升高最快，高环境温度是对生活在热带和亚热带地区水牛生产力的主要约束。预计到2050年，温度将会再增加1～3℃，极端高温事件愈加频繁，气候变暖正逐渐成为热带与亚热带地区奶业发展的限制性因素(renaudeau等，2012)。水牛皮肤呈黑色，被毛稀疏，汗腺密度低，在高温环境下，泌乳量、生长速度和繁殖性能都受到了极大的限制(paula等，2012)。一般认为温湿指数(temperature humidity index；THI)超过78时水牛处于严重热应激状态，本课题组前期研究发现，广西南宁6-9月份THI平均值达80以上，水牛呼吸频率及体表温度均明显升高，瘤胃发酵模式改变，养分摄入量下降等热应激现象显著，对水牛的泌乳量有显著的影响。
桑树种植在我国历史悠久，桑叶主要用来养蚕，也可食用和入药。现代药学研究结果显示，桑叶具有多种药理活性，具有清除体内外活性氧(ROS)和螯合金属离子的功能，我国桑叶资源丰富，但利用十分有限，每年有大量桑叶被废弃。开发桑叶新用途，改善传统的桑叶利用结构，发挥桑叶的综合利用潜力，变废为宝，提高桑叶经济和社会效益，具有十分重要的意义。在饲料方面，兰翠英将桑叶粉加入到肉鸡日粮中，发现能够改善肌肉的风味；李有贵将桑叶粉加入到猪饲料中，发现能够提高猪的生长速度；郭建军将桑叶粉加入到牛精料中，发现增重明显。但是，在水牛领域，研究很少，尤其是对水牛泌乳的影响，更是空白，而且上述工作者将桑叶粉直接加入进行研究，并没有进一步研究其具体的有效成分，也一定程度上限制了其应用效果。
发明内容
本发明的发明目的是，针对上述问题，提供一种桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，将桑叶提取物作为添加剂添加到水牛饲料中，能够提高水牛的泌乳性能，而且水牛乳的乳蛋白含量显著提高。
为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：
一种桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，所述桑叶提取物的有效成分为桑叶黄酮和桑叶多酚。
优选的，按质量分数计，所述桑叶提取物含有效成分大于20％。
优选的，所述桑叶提取物中，桑叶黄酮和桑叶多酚的质量比为1～4∶1。
优选的，所述桑叶提取物中，桑叶黄酮和桑叶多酚的质量比为3∶1。
优选的，将所述桑叶提取物作为饲料添加剂制备促水牛泌乳饲料。
优选的，按照质量比，所述桑叶提取物在所述促水牛泌乳饲料中的含量为1％～30％。
优选的，所述促水牛泌乳饲料按照重量份包括以下组分：玉米10％～15％，木薯渣20％～30％，豆粕10％～20％，麦麸5％～15％，棉粕5％～10％，菜粕5％～10％，食盐0.1％～1％，小苏打0.1％～1％，石粉0.1％～0.5％，磷酸氢钙0.1％～1％，椰子油1％～3％，鱼油1％～3％，L-盐酸赖氨酸0.1％～0.5％，预混料0.5％～2％，糖蜜酵母1％～3％，过瘤胃蛋白1～5％，过瘤胃脂肪1～3g，桑叶提取物1％～30％。
优选的，所述预混料包括维生素类添加剂和矿物质类添加剂；所述维生素类添加剂包括维生素A、维生素C、维生素D3、维生素E和烟酸；所述矿物质类添加剂包括硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸锌和亚硒酸钠。
优选的，将所述促水牛泌乳饲料喂养水牛，每天喂养2～4次。
由于采用上述技术方案，本发明具有以下有益效果：
1.本发明的桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，将桑叶提取物作为添加剂添加到水牛饲料中，能够提高水牛的泌乳性能，而且水牛乳的乳蛋白含量显著提高。
桑叶提取物中的有效成分为桑叶黄酮和桑叶多酚。桑叶多酮桑叶黄酮能通过促进胃肠道消化酶活性，提高了氮的沉积、利用率和生物学价值，同时对促进瘤胃发酵和提高丁酸浓度表现出显著的作用，提高水牛抗应激能力和抗氧化能力。桑叶多酚能够与植物中的蛋白质结合，降低蛋白质在瘤胃中的溶解度和活性，避免被迅速分解，增加过瘤胃蛋白和氨基酸数量，从而提高蛋白质利用效率。桑叶多酚还能有效的防止水牛瘤胃胀气，
桑叶黄酮和桑叶多酚均含有苯环结构以及多元酚性羟基、多羟基，混合使用可产生协同增效作用，使两者的作用比单独使用显著增强。
2.本发明的桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，公开了一种促泌乳饲料，添加椰子油、L-盐酸赖氨酸、预混料、苜蓿粉、过瘤胃蛋白和过瘤胃脂肪与桑叶提取物协同作用，能够提供水牛生长所需的营养成分，促进其生长，并加快胃肠蠕动，加快营养吸收能力，提高机体应激能力和抗氧化能力，从而促进泌乳，提高产乳量和乳汁品质。
其中，椰子油和鱼油均含有大量的中短链脂肪酸，植物油脂和动物油脂搭配合理，脂肪酸成分营养均衡，而且油脂经过乳化后，脂肪颗粒变小，有利于水牛的消化吸收和脂肪利用，降低水牛对脂肪消化吸收的负担，可以提高水牛产奶性能和维持能量平衡。添加糖蜜酵母可与桑叶提取物共同作用，降低瘤胃丙酸浓度，提高瘤胃pH值，促进瘤胃微生物蛋白(MCP)的合成，促进蛋白吸收，提高水牛乳品质。
添加过瘤胃蛋白和过瘤胃脂肪，可增加小肠对营养的消化和吸收，降低泌乳高峰期奶牛的营养负平衡，提高产奶量和乳品质。因为泌乳期对营养的需求，现有泌乳期饲料一般增加精饲料喂量，降低粗饲料喂量，提高日粮营养浓度，从而增加泌乳高峰期奶牛营养的摄入，但饲喂过多精饲料会增加奶牛瘤胃酸毒症、真胃移位和瘤胃迟缓等的发病率，精饲料不足又会造成奶品质下降。本申请通过添加过瘤胃蛋白和过瘤胃脂肪，并搭配玉米、豆粕、麦麸和甘薯渣在不影响瘤胃的消化的情况下，提高水牛采食量和营养吸收。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种促水牛泌乳饲料，包括质量分数为5％的桑叶提取物和95％的基础日粮。
所述桑叶提取物的有效成分为桑叶黄酮和桑叶多酚。将桑叶黄酮和桑叶多酚按照质量比3∶1混合。所述桑叶黄酮和桑叶多酚采购于西安瑞尔丽生物工程有限公司，含量均为10％。
所述基础日粮，按照质量分数，包括以下组分：玉米15％，木薯渣30％，豆粕20％，麦麸15％，棉粕8％，菜粕10％，食盐0.5％，小苏打0.5％，石粉0.5％，磷酸氢钙0.5％。
制备方法：
将所述桑叶黄酮、桑叶多酚和基础日粮混合均匀，即得所述促水牛泌乳饲料。
使用方法：
将所述促水牛泌乳饲料喂养水牛，每天喂养3次。
实施例2
一种促水牛泌乳饲料，包括质量分数为10％的桑叶提取物和90％的基础日粮。
所述桑叶提取物的有效成分为桑叶黄酮和桑叶多酚。将桑叶黄酮和桑叶多酚按照质量比3∶1混合。所述桑叶黄酮和桑叶多酚采购于西安瑞尔丽生物工程有限公司，含量均为10％。
所述基础日粮，按照质量分数，包括以下组分：玉米15％，木薯渣30％，豆粕20％，麦麸15％，棉粕8％，菜粕10％，食盐0.5％，小苏打0.5％，石粉0.5％，磷酸氢钙0.5％。
制备方法和使用方法同实施例1。
实施例3
一种促水牛泌乳饲料，包括质量分数为20％的桑叶提取物和80％的基础日粮。
所述桑叶提取物的有效成分为桑叶黄酮和桑叶多酚。将桑叶黄酮和桑叶多酚按照质量比3∶1混合。所述桑叶黄酮和桑叶多酚采购于西安瑞尔丽生物工程有限公司，含量均为10％。
所述基础日粮，按照质量分数，包括以下组分：玉米15％，木薯渣30％，豆粕20％，麦麸15％，棉粕8％，菜粕10％，食盐0.5％，小苏打0.5％，石粉0.5％，磷酸氢钙0.5％。
制备方法和使用方法同实施例1。
实施例4
一种促水牛泌乳饲料，包括质量分数为30％的桑叶提取物和70％的基础日粮。
所述桑叶提取物的有效成分为桑叶黄酮和桑叶多酚。将桑叶黄酮和桑叶多酚按照质量比3∶1混合。所述桑叶黄酮和桑叶多酚采购于西安瑞尔丽生物工程有限公司，含量均为10％。
所述基础日粮，按照质量分数，包括以下组分：玉米15％，木薯渣30％，豆粕20％，麦麸15％，棉粕8％，菜粕10％，食盐0.5％，小苏打0.5％，石粉0.5％，磷酸氢钙0.5％。
制备方法和使用方法同实施例1。
实施例5
一种促水牛泌乳饲料，包括质量分数为10％的桑叶提取物和90％的基础日粮。
所述桑叶提取物的有效成分为桑叶黄酮和桑叶多酚。将桑叶黄酮和桑叶多酚按照质量比3∶1混合。所述桑叶黄酮和桑叶多酚采购于西安瑞尔丽生物工程有限公司。
所述基础日粮，按照质量分数，包括以下组分：玉米15％，木薯渣25％，豆粕15％，麦麸15％，棉粕8％，菜粕8％，食盐0.5％，小苏打0.3％，石粉0.2％，磷酸氢钙0.5％，椰子油2％，鱼油2％，L-盐酸赖氨酸0.5％，预混料1％，糖蜜酵母2％，过瘤胃蛋白3％，过瘤胃脂肪2g。
制备方法和使用方法同实施例2。
实施例6
一种促水牛泌乳饲料，包括质量分数为5％的桑叶提取物和90％的基础日粮。
所述桑叶提取物的有效成分为桑叶黄酮和桑叶多酚。
所述基础日粮，按照质量分数，包括以下组分：玉米15％，木薯渣30％，豆粕20％，麦麸15％，棉粕8％，菜粕10％，食盐0.5％，小苏打0.5％，石粉0.5％，磷酸氢钙0.5％。
制备方法：
S1.桑叶提取物提取
采用水提法提取，料液比1∶60，在100℃下采用60％乙醇提取3h，然后浓缩，干燥得桑叶提取物。
S2.混合
将所述桑叶提取物混合均匀，即得所述促水牛泌乳饲料。
使用方法：
将所述促水牛泌乳饲料喂养水牛，每天喂养3次。
实施例7
一种促水牛泌乳饲料，包括质量分数为5％的桑叶提取物和95％的基础日粮。
所述桑叶提取物的有效成分为桑叶黄酮和桑叶多酚。将桑叶黄酮和桑叶多酚按照质量比3∶1混合，其中，所述桑叶提取物含两者的有效成分大于50％。
所述基础日粮，按照质量分数，包括以下组分：玉米15％，木薯渣30％，豆粕20％，麦麸15％，棉粕8％，菜粕10％，食盐0.5％，小苏打0.5％，石粉0.5％，磷酸氢钙0.5％。
制备方法：
S1.桑叶黄酮提取
S11.取桑叶粉末，在25～40℃下采用pH 2～4的水提取至少两次，得到提取液；
S12.将所述提取液浓缩至原体积的1/2～1/3后用乙酸乙酯萃取至少两次，得到萃取液，
S13.将所述萃取液脱溶后用大孔吸附树脂D101柱层析分离，洗脱液为浓度70-90％乙醇溶液，收集乙醇洗脱液，得桑叶黄酮溶液，
S14.脱溶干燥后得到桑叶黄酮。纯度达到70％以上。
S2.桑叶多酚提取：
S21.取桑叶粉末，加入其8～10倍重量的乙醇磷酸溶液，超声-微波协同萃取2～3次，合并提取液，过滤，浓缩至原体积1/10～2/5的浓缩液，得桑叶多酚粗提液；
S22.取桑叶多酚粗提液经截留分子量为5万和8万Da的膜分离，得截留分子量为5～8万Da之间的桑叶多酚溶液；
S23.取桑叶多酚溶液，进行大孔吸附树脂柱层析得到洗脱液，将洗脱液在45～50℃浓缩至原体积的1/4～1/2后，冷冻干燥后得桑叶多酚。纯度达到90％以上。
S3.混合
桑叶黄酮、桑叶多酚和基础日粮混合均匀，即得所述促水牛泌乳饲料。
使用方法：
将所述促水牛泌乳饲料喂养水牛，每天喂养3次。
对比例1
一种促水牛泌乳饲料，包括质量分数为10％的桑叶提取物和95％的基础日粮。
所述桑叶提取物的有效成分为桑叶黄酮。所述桑叶黄酮采购于西安瑞尔丽生物工程有限公司，含量均为10％。其他同实施例3。
对比例2
一种促水牛泌乳饲料，包括质量分数为10％的桑叶提取物和95％的基础日粮。
所述桑叶提取物的有效成分为桑叶多酚。所述桑叶多酚采购于西安瑞尔丽生物工程有限公司，含量均为10％。其他同实施例3。
实验例：
一、试验动物及地点
试验于广西水牛所种畜场进行，选取泌乳量接近的泌乳奶水牛80头，随机分为8组，每组10只。试验周期5周，预饲期1周，正试期4周，工人饲喂，正常生产。
二、日粮
分别将实施例1-5、对比例1-2的促水牛泌乳饲料作为实验例饲养，同时，设立空白例喂养实施例1中的基础日粮。
三、监测指标
3.1.血液指标
在试验最后一周周五晨饲前颈静脉采集每头牛血液20ml，分装5ml至EDTA抗凝管用于血常规检测，分装15ml至3管不含抗凝剂真空采血管，用于收集血清。
血清收集：2500转/分离心10-15min，取血清分装至1.5ml灭菌离心管。
血清检测指标：一份血清用于抗氧化指标(SOD、MDA、AOC、GSH、CAT)；结果见表1。一份血清用于应激相关激素指标(PRL、E2、GH、T3、T4、GH)检测；一份血清用于HSP70和HSP90蛋白表达量检测，结果见表2。
表1抗氧化指标
同列肩标不同表示差异显著(P＜0.05)，同列肩标相同或无肩标表示差异不显著(P＞0.05)。下表同。
从表1可以看出，实施例1-4相对于空白例，添加桑叶提取物能够显著提高水牛的抗氧化能力。
结果表明：血清中SOD含量各组间差异不显著(P＞0.05)，CAT、AOC含量空白例均显著高于实施例(P＜0.05)，MDA含量空白例显著高于实施例1、实施例3、实施例4和实施例5(P＜0.05)，而GSH含量在实施例3、实施例4和实施例5显著低于空白例(P＜0.05)，表明添加桑叶提取物后能够有效降低奶水牛血清抗氧化水平，避免因氧化应激对牛奶产量与品质的负面影响。
其中，实施4、实施5比实施1和实施2显著提高，但是实施4和实施5相差不大，说明随着桑叶提取物含量的增加，有效降低奶水牛血清抗氧化水平，但是到达20％时，再增加，效果增加则不显著。
表2血清激素热应激蛋白指标
从表2可以看出，实施例1-4相对于空白例，添加桑叶提取物能够显著提高水牛抗应激能力。
结果表明：添加桑叶提取物后血清中HSP 90、PRL、GH含量显著升高(P＜0.05)，HSP70、T3、T4等激素含量在实施例3、4和5中显著高于空白例和实施例1、实施例2(P＜0.05)，实施例2、实施例3、实施例4、实施5血清E2含量显著高于空白例和实施例1(P＜0.05)。表明在添加桑叶提取物后热应激蛋白HSP 70和HSP 90含量有显著提高，能够提升水牛抗热应激能力，对水牛健康养殖具有重要意义。
其中，实施4、实施5比实施1和实施2显著提高，但是实施4和实施5相差不大，说明随着桑叶提取物含量的增加，提升水牛抗热应激能力增强，但是到达20％时，再增加，效果增加则不显著。
3.2泌乳性能
试验正式期期间每天记录每头牛产奶量，并且每周三分上午和下午两次采集新鲜奶样，用于检测乳成分(乳脂肪、乳蛋白、乳糖、总固形物)，结果见表3。
表3产奶量和乳成分
从表3可以看出，实施例1-4相对于空白例，添加桑叶提取物能够显著提高产奶量，且水牛乳的乳蛋白含量、乳脂肪含量和总固形物均有不同程度的提升，乳糖含量有所下降，乳品质有所提高。其中，提高桑叶提取物的含量有助于效果的提高，但是到达20％时，再增加，效果增加则不显著。
实施例2和实施例3相比，可以看出，本申请提供的抗泌乳饲料，添加椰子油、L-盐酸赖氨酸、预混料、苜蓿粉、过瘤胃蛋白和过瘤胃脂肪与桑叶提取物协同作用，相对于将桑叶提取物与基础日粮简单混合使用，效果更显著。
实施例6、实施例7和实施例3相比，可以看出，添加桑叶提取物，如果提取物中成分为单一的桑叶黄酮或者桑叶多糖，则泌乳量提升不高。可以看出桑叶黄酮和桑叶多酚均含有苯环结构以及多元酚性羟基、多羟基，混合使用可产生协同增效作用，使两者的作用比单独使用显著增强。
综上，将桑叶提取物作为添加剂添加到水牛饲料中，能够提高水牛的泌乳性能，而且水牛乳的乳蛋白含量显著提高。
上述说明是针对本发明较佳可行试验例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。

Claims (9)

1.桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，其特征在于，所述桑叶提取物的有效成分为桑叶黄酮和桑叶多酚。
2.根据权利要求1所述的桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，其特征在于，按质量分数计，所述桑叶提取物含有效成分大于20％。
3.根据权利要求1所述的桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，其特征在于，所述桑叶提取物中，桑叶黄酮和桑叶多酚的质量比为1～4∶1。
4.根据权利要求3所述的桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，其特征在于，所述桑叶提取物中，桑叶黄酮和桑叶多酚的质量比为3∶1。
5.根据任一权利要求1-4所述的桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，其特征在于，将所述桑叶提取物作为饲料添加剂制备促水牛泌乳饲料。
6.根据权利要求5所述的桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，其特征在于，按照质量比，所述桑叶提取物在所述促水牛泌乳饲料中的含量为1％～30％。
7.根据权利要求5所述的桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，其特征在于，所述促水牛泌乳饲料按照重量份包括以下组分：玉米10％～15％，木薯渣20％～30％，豆粕10％～20％，麦麸5％～15％，棉粕5％～10％，菜粕5％～10％，食盐0.1％～1％，小苏打0.1％～1％，石粉0.1％～0.5％，磷酸氢钙0.1％～1％，椰子油1％～3％，鱼油1％～3％，，L-盐酸赖氨酸0.1％～0.5％，预混料0.5％～2％，糖蜜酵母1％～3％，过瘤胃蛋白1～5％，过瘤胃脂肪1～3g，桑叶提取物1％～30％。
8.根据权利要求7所述的桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，其特征在于，所述预混料包括维生素类添加剂和矿物质类添加剂；所述维生素类添加剂包括维生素A、维生素C、维生素D3、维生素E和烟酸；所述矿物质类添加剂包括硫酸铜、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸锌和亚硒酸钠。
9.根据任一权利要求6-8所述的桑叶提取物在促进水牛泌乳中的应用，其特征在于，将所述促水牛泌乳饲料喂养水牛，每天喂养2～4次。
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