CN107858397A - 一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法 - Google Patents

一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法 Download PDF

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农浚
樊兰艳
朱斌
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Abstract

本发明提供了一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法，包括如下步骤：菌悬液的制备、标准溶液的制备、供试品溶液的制备、阴性样品溶液的制备、培养与测定。本发明所述的一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法，具有良好的专属性和重复性，与液相色谱法相比，操作简单、实验成本低，便于推广和应用，二氯甲烷作为溶剂的溶解性强，乳膏基质会快速溶解至二氯甲烷中，排除了大部分乳膏基质的影响，硫酸新霉素含量测定结果可靠性强、准确度高。

Description

一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法
技术领域
本发明属于药物分析领域，尤其是涉及一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含 量的测定方法。
背景技术
曲咪新乳膏是一种皮肤用药，其对湿疹、接触性皮炎、神经性皮炎、脂 溢性皮炎、体癣、股癣以及手足癣等均有显著疗效，曲咪新乳膏所含硝酸咪 康唑为光谱抗真菌药，对某些革兰氏阳性细菌也有抗菌作用，醋酸曲安奈德 为糖皮质激素类药物，外用具有抗炎、抗过敏及止痒作用，硫酸新霉素对多 种革兰氏阳性及阴性细菌有效。硫酸新霉素为多组分氨基糖苷类抗生素，其 主要成分为新霉素B和新霉素C，对葡萄球菌属、棒状杆菌属有良好的抑菌 作用，对大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属等肠杆菌科细菌亦有良好作 用，现有的硫酸新霉素的含量测定方法操作复杂，测定时间长，成本高，测 定结果可重复性差，因此，发展一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素的快速准确的 含量测定方法迫在眉睫。
发明内容
有鉴于此，本发明旨在提出一种一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测 定方法，
为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：
一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法，包括如下步骤：
(1)菌悬液的制备
取金黄色葡萄球菌的营养琼脂斜面培养物，接种于营养琼脂斜面上，在 35℃～37℃培养20～22小时，用0.9％灭菌氯化钠溶液将菌苔洗下，备用；
(2)标准溶液的制备
精密称取含量为652u/mg硫酸新霉素标准品30～45mg至25ml容量瓶 中，用纯化水定容，得到标准溶液，精密量取标准溶液，用pH为7.8含3％ 氯化钠的磷酸盐缓冲液稀释成每1ml中含有硫酸新霉素5u和10u的溶液；
(3)供试品溶液的制备
精密称取1.2～2.5g曲咪新乳膏至分液漏斗中，加入25～45ml二氯甲烷， 振摇，然后加入10ml pH7.8含3％氯化钠的磷酸盐缓冲液，充分振摇分液漏 斗，静置分层，将下层放出到另一个分液漏斗中，上层溶液置于50ml的容 量瓶中，再向上述另一个分液漏斗中加入10ml pH7.8含3％氯化钠的磷酸盐 缓冲液，充分振摇分液漏斗，静置分层，将上层溶液置于50ml的容量瓶中， 定容为供试品溶液；
(4)阴性样品溶液的制备
取空白基质，按每10g含硝酸咪康唑100mg，醋酸曲安奈德10mg加 入硝酸咪康唑和醋酸曲安奈德制成硫酸新霉素阴性样品溶液。
(5)培养与测定
取直径约90mm，高16～17mm的平底双碟，分别注入加热融化的20mL 培养基Ⅱ，使在碟底内均匀摊布，放置水平台面上使凝固，作为底层，另取 培养基Ⅱ适量加热融化后，放冷至48～50℃，加入适量的金黄色葡萄球菌菌 悬液，摇匀，在每1双碟中分别加入5mL，使在底层上均匀摊布，作为菌层， 将菌层放置在水平台上冷却后，在每1双蝶中以等距离均匀安置不锈钢小管 4个，用陶瓦圆盖覆盖备用，再取不少于4个双碟，在每1个双碟中对角的 2个不锈钢小管中分别滴装高浓度及低浓度的标准品溶液，其余2个小管中 分别滴装相应的高低两种浓度的供试品溶液，高、低浓度的剂距为2：1，放 置35℃～37℃培养20～22小时，测定各个抑菌圈直径，照生物检定统计法 进行可靠性测验及效价计算。
进一步的，所述步骤(2)中硫酸新霉素标准品称取量为38.35mg。
进一步的，所述步骤(3)中曲咪新乳膏称取量为1.67g，加入二氯甲烷 的体积为30mL。
进一步的，所述步骤(3)中精密量取供试品溶液0.25mL、0.3mL、0.4mL、 0.5mL置5mL试管中稀释至刻度，制成浓度范围为5u/ml～10u/ml的供试品 待测液。
相对于现有技术，本发明所述的一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测 定方法具有以下优势：
(1)本发明所述的一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法，具 有良好的专属性和重复性，与液相色谱法相比，操作简单、实验成本低，便 于推广和应用；
(2)本发明所述的一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法，二 氯甲烷作为溶剂的溶解性强，，乳膏基质会快速溶解至二氯甲烷中，排除了 大部分乳膏基质的影响，硫酸新霉素含量测定结果可靠性强、准确度高。
具体实施方式
下面结合实施例来详细说明本发明。
实施例1
一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法，包括如下步骤：
(1)菌悬液的制备
取金黄色葡萄球菌的营养琼脂斜面培养物，接种于营养琼脂斜面上，在 35℃～37℃培养20～22小时，用0.9％灭菌氯化钠溶液将菌苔洗下，备用；
(2)标准溶液的制备
精密称取含量为652u/mg硫酸新霉素标准品38.35mg至25ml容量瓶中， 用纯化水定容，得到标准溶液，精密量取标准溶液，用pH为7.8含3％氯化 钠的磷酸盐缓冲液稀释成每1ml中含有硫酸新霉素5u和10u的溶液；
(3)供试品溶液的制备
精密称取1.67g曲咪新乳膏至分液漏斗中，加入30ml二氯甲烷，振摇， 然后加入10ml pH7.8含3％氯化钠的磷酸盐缓冲液，充分振摇分液漏斗，静 置分层，将下层放出到另一个分液漏斗中，上层溶液置于50ml的容量瓶中， 再向上述另一个分液漏斗中加入10mlpH7.8含3％氯化钠的磷酸盐缓冲液， 充分振摇分液漏斗，静置分层，将上层溶液置于50ml的容量瓶中，定容为 供试品溶液，精密量取供试品溶液0.25mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL置5mL试管中稀释至刻度，制成浓度范围为5u/ml～10u/ml的供试品待测液；
(4)阴性样品溶液的制备
取空白基质，按每10g含硝酸咪康唑100mg，醋酸曲安奈德10mg加 入硝酸咪康唑和醋酸曲安奈德制成硫酸新霉素阴性样品溶液。
(5)培养与测定
取直径约90mm，高16～17mm的平底双碟，分别注入加热融化的20mL 培养基Ⅱ，使在碟底内均匀摊布，放置水平台面上使凝固，作为底层，另取 培养基Ⅱ适量加热融化后，放冷至48～50℃，加入适量的金黄色葡萄球菌菌 悬液，摇匀，在每1双碟中分别加入5mL，使在底层上均匀摊布，作为菌层， 将菌层放置在水平台上冷却后，在每1双蝶中以等距离均匀安置不锈钢小管 4个，用陶瓦圆盖覆盖备用，再取不少于4个双碟，在每1个双碟中对角的 2个不锈钢小管中分别滴装高浓度及低浓度的标准品溶液，其余2个小管中 分别滴装相应的高低两种浓度的供试品溶液，高、低浓度的剂距为2：1，放 置35℃～37℃培养20～22小时，测定各个抑菌圈直径，照生物检定统计法 进行可靠性测验及效价计算。
干扰实验
取阴性样品溶液，按照含量测定项下的方法进行测定，国药三益的阴性 样品未产生抑菌圈，对测定结果无干扰，表明该方法专属性良好。
重复性试验
取厂家A的样品9份，按照含量测定项下的方法，重复试验9次，测定 效价值均在估计效价值的90％～110％,可信限均在5％以下，合并计算可信限 也在5％以下。
加样回收实验
取上述阴性样品约1.67g共9份，按标示量的80％，100％，120％精密 称取硫酸新霉素标准品各3份至空白基质中，制成模拟样品，置分液漏斗中， 按上述方法提取，制成每1ml含硫酸新霉素80u，100u，120u的溶液各3份， 摇匀，精密量取适量，用3％氯化钠的磷酸盐缓冲液(pH7.8)稀释成每1ml 约含硫酸新霉素4u和8u，5u和10u，6u和12u的溶液各3份，摇匀，分别 按样品含量测定的方法操作，得到测定浓度为含量测定项下浓度的80％， 100％，120％的结果，见表1。
表1厂家A硫酸新霉素加样回收实验结果
该结果表明该方法具有良好的重复性和回收率，结果可信度高。
样品的测定
取上述20个厂家的样品按上述提取方法进行测定，计算硫酸新霉素的 含量，结果见表2。
表2各厂家硫酸新霉素含量测定结果
生产厂家 含量(％)
厂家A 101.7299
厂家B 99.2015
厂家C 102.4816
厂家D 70.1279
厂家E 104.6811
厂家F 100.3524
厂家G 94.3199
厂家H 98.6458
厂家I 98.3597
厂家J 93.7221
厂家K 99.5767
厂家L 98.4240
厂家M 108.9770
厂家N 97.7593
厂家O 98.7840
厂家P 99.4066
厂家Q 98.3356
厂家R 84.2752
厂家S 99.4871
厂家T 94.9817
该结果表明此方法具有很好的专属性。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本 发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在 本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)菌悬液的制备
取金黄色葡萄球菌的营养琼脂斜面培养物，接种于营养琼脂斜面上，在35℃～37℃培养20～22小时，用0.9％灭菌氯化钠溶液将菌苔洗下，备用；
(2)标准溶液的制备
精密称取含量为652u/mg硫酸新霉素标准品30～45mg至25ml容量瓶中，用纯化水定容，得到标准溶液，精密量取标准溶液，用pH为7.8含3％氯化钠的磷酸盐缓冲液稀释成每1ml中含有硫酸新霉素5u和10u的溶液；
(3)供试品溶液的制备
精密称取1.2～2.5g曲咪新乳膏至分液漏斗中，加入25～45ml二氯甲烷，振摇，然后加入10ml pH7.8含3％氯化钠的磷酸盐缓冲液，充分振摇分液漏斗，静置分层，将下层放出到另一个分液漏斗中，上层溶液置于50ml的容量瓶中，再向上述另一个分液漏斗中加入10mlpH7.8含3％氯化钠的磷酸盐缓冲液，充分振摇分液漏斗，静置分层，将上层溶液置于50ml的容量瓶中，定容为供试品溶液；
(4)阴性样品溶液的制备
取空白基质，按每10g含硝酸咪康唑100mg，醋酸曲安奈德10mg加入硝酸咪康唑和醋酸曲安奈德制成硫酸新霉素阴性样品溶液；
(5)培养与测定
取直径约90mm，高16～17mm的平底双碟，分别注入加热融化的20mL培养基Ⅱ，使在碟底内均匀摊布，放置水平台面上使凝固，作为底层，另取培养基Ⅱ适量加热融化后，放冷至48～50℃，加入适量的金黄色葡萄球菌菌悬液，摇匀，在每1双碟中分别加入5mL，使在底层上均匀摊布，作为菌层，将菌层放置在水平台上冷却后，在每1双蝶中以等距离均匀安置不锈钢小管4个，用陶瓦圆盖覆盖备用，再取不少于4个双碟，在每1个双碟中对角的2个不锈钢小管中分别滴装高浓度及低浓度的标准品溶液，其余2个小管中分别滴装相应的高低两种浓度的供试品溶液，高、低浓度的剂距为2：1，放置35℃～37℃培养20～22小时，测定各个抑菌圈直径，照生物检定统计法进行可靠性测验及效价计算。
2.根据权利要求1所述的一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法，其特征在于：所述步骤(2)中硫酸新霉素标准品称取量为38.35mg。
3.根据权利要求1所述的一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法，其特征在于：所述步骤(3)中曲咪新乳膏称取量为1.67g，加入二氯甲烷的体积为30mL。
4.根据权利要求1所述的一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量的测定方法，其特征在于：所述步骤(3)中精密量取供试品溶液0.25mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL置5mL试管中稀释至刻度，制成浓度范围为5u/ml～10u/ml的供试品待测液。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108982421A (zh) * 2018-06-15 2018-12-11 集美大学 硫酸新霉素的分析检测方法
CN111024870A (zh) * 2019-11-28 2020-04-17 河北科技大学 硫酸新霉素组分及有关物质的检测方法
CN111157463A (zh) * 2018-11-08 2020-05-15 广州医药研究总院有限公司 血浆中乙酰螺旋霉素含量的检测方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101040837A (zh) * 2006-08-21 2007-09-26 沈阳药科大学 伊曲康唑乳膏剂及其制备方法
CN106053374A (zh) * 2016-08-22 2016-10-26 安徽华澳生物技术有限公司 硫酸新霉素紫外分光光度计检测方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101040837A (zh) * 2006-08-21 2007-09-26 沈阳药科大学 伊曲康唑乳膏剂及其制备方法
CN106053374A (zh) * 2016-08-22 2016-10-26 安徽华澳生物技术有限公司 硫酸新霉素紫外分光光度计检测方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NIKOLAOS C. MEGOULAS等: "Enhancement of evaporative light scattering detection in high-performance liquid chromatographic determination of neomycin based on highly volatile mobile phase, high-molecular-mass ion-pairing reagents and controlled peak shape", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A》 *
卢劲涛: "曲咪新乳膏中硫酸新霉素含量测定方法的建立", 《中国药师》 *
国家药典委员会编: "《中华人民共和国药典 2015年版 四部》", 30 June 2015, 中国医药科技出版社 *
国家药典委员会编: "《国家药品西药标准（化学药品地标升国标第二册）》", 30 June 2002, 化学工业出版社 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108982421A (zh) * 2018-06-15 2018-12-11 集美大学 硫酸新霉素的分析检测方法
CN108982421B (zh) * 2018-06-15 2021-12-17 集美大学 硫酸新霉素的分析检测方法
CN111157463A (zh) * 2018-11-08 2020-05-15 广州医药研究总院有限公司 血浆中乙酰螺旋霉素含量的检测方法
CN111024870A (zh) * 2019-11-28 2020-04-17 河北科技大学 硫酸新霉素组分及有关物质的检测方法
CN111024870B (zh) * 2019-11-28 2022-05-17 河北科技大学 硫酸新霉素组分及有关物质的检测方法

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