CN107854717A - 创伤敷料、用于制造创伤敷料的方法和设备以及其储存和用途 - Google Patents

Abstract

本申请涉及创伤敷料、用于制造创伤敷料的方法和设备以及其储存和用途。一种创伤敷料由全血制备，其中全血在活体外被凝结以形成凝结的血液的片材，该凝结的血液的片材被施用至多种皮肤损伤上的皮肤上。

Description

创伤敷料、用于制造创伤敷料的方法和设备以及其储存和 用途

本申请是申请号为201080009823.0，申请日为2010年1月27日，发明名称为“创伤敷料、用于制造创伤敷料的方法和设备以及其储存和用途”的申请的分案申请。

发明领域

本发明涉及创伤敷料，而且涉及用于生产和/或使用敷料的方法和设备、敷料的储存以及敷料的用途。

发明背景

皮肤是哺乳动物身体的最大的器官并且具有多种关键的功能。在某些情况下，皮肤被外伤(例如裂伤、擦伤、烧伤或穿刺)或被溃疡(例如糖尿病足溃疡)破坏。皮肤中不愈合的或自发地复发的破裂被称为慢性创伤(Fowler(1990)在Chronic wounds:an overview(慢性创伤：综述)。在：Krasner D，编辑.Chronic wound care:a clinical source bookfor healthcare professionals(慢性创伤护理：卫生保健人员的临床原始资料).King ofPrussia,PA:Health Management Publications,Inc；.第12-8页以及Singh等人(2004)Asian J Surg 27:326-32)。

约1％至2％的个体将在他们的一生中受到腿部溃疡影响，并且这一数字将有可能随着人口老龄化而增加(Rees和Hirshberg(1999).Adv Wound Care 1999；12:4-7和CallamM.(1992)Phlebology 7：S6-S12)。全球的创伤护理开支达到高至130至150亿美元每年(Walmsley(2002)在：Clinica reports(临床报告).London:PJB Publications,Ltd.)。

遭受慢性创伤的患者群体包括但不限于糖尿病患者、老年患者和具有循环系统问题的患者。此外，慢性创伤可以作为急性外伤的结果或作为手术后症状而出现。

慢性创伤可以在尺寸、深度和愈合的阶段上不同。创伤可以含有坏死组织、感染、疤或渗出液(脓的、蜡的)。

慢性创伤可以通过它们的原因，例如压力、糖尿病、缺血、静脉和撕裂，和/或通过创伤本身的性质，例如其深度和/或愈合的阶段和/或排液和/或感染，被分类。烧伤是另一种难以治疗的创伤类型。

常规的烧伤治疗典型地依赖于局部抗菌素膏(例如磺胺嘧啶银)和随后的非粘附敷料和纱布。还已经提出了基于培养的细胞移植物和/或分离的血液产品的生物敷料的使用。根据不同的烧伤管理策略，敷料更换的频率可以每天两次至每周约一次地变化。

已经提出了许多非常规的烧伤治疗策略。以下是某些技术非穷举的概述。

WO/2001/021195描述了包含预制的纤维蛋白的敷料，其中纤维蛋白作为被烧伤的皮肤表面的非粘合性的覆盖物并且作为被包埋在纤维蛋白凝块内的药物化合物的递送载体。

J.Travis(Science News Online 155(25)；6月19日，1999)描述了由MartinMacPhee在罗克维尔，马里兰州的American Red Cross'Holland Laboratory(美国红十字会的霍兰实验室)生产的纤维蛋白绷带。绷带采用由被凝血酶、纤维蛋白原和从人类血液提纯的因子13饱和的生物可降解材料制造的布。绷带在它们变湿之前是脆性的，并且然后它们变为柔性的。

US 2002/0146446描述了外科医疗敷料，其使用在主要由明胶-纤连蛋白-硫酸乙酰肝素组成的复合材料上生长的两种细胞外基质的夹层物。用于生长两种细胞类型(形成第二细胞外基质的真皮成纤维细胞和真皮微血管内皮细胞)的培养基是从用于形成第一细胞外基质的人类脐带内皮状细胞获得的条件培养基(CM)。在组织培养中的所有细胞都被分离，使它们的分泌的无细胞基质留下并且保持完整。这种CM还可以中和在商业上用于将被培养的上皮片材(“被培养的上皮自体移植物”(CEA))从形成片材的人类表皮细胞在其上生长的基质分离的酶DISPASE。CEA在临床上用于创伤和烧伤管理。

Henderson L等人公开了表面皮肤烧伤通过自体血小板凝胶敷料的愈合。(Ear,Nose&Throat Journal，2003)。

US 3723244描述了通过离心纤维蛋白的水分散体生产片材形式的纤维蛋白的方法，其中单体的纤维蛋白分子通过聚合被结合以形成纤维蛋白的链。离心步骤是在具有用于将在其中经受离心加速度的颗粒拦截的壁的容器中并且是以将由聚合得到的纤维蛋白的链在所述壁上制粒的速度进行，使得被制粒的链互相连结以形成片材，该片材被从壁回收。水分散体可以是血浆并且所得到的纤维蛋白片材被描述为可用作用于烧伤的敷料。

US 6521265描述了促进流血创伤的愈合的方法，包括将在水的存在下水合以产生Fe⁺⁺⁺和氧的基本上无水的高铁酸盐的化合物，与不可溶的阳离子交换材料组合地，与一定量的水性介质混合，以形成可散布的糊剂，水性介质例如从创伤直接取得的全血与去离子水；氯化钠水溶液；溶解于水的明胶；水性羧基羟丙基甲基纤维素(methacel)；以及水性碳水化合物溶液。糊剂在短工作时间内被施用于创伤以促进血液凝结。根据说明书，氧的存在显著地减少了在创伤处的细菌、病毒和真菌的水平，因为保护层在创伤上形成。

US 4347841描述了用于烧伤创伤的生物敷料，其通过从经受溶血的红细胞浓缩物除去游离血红蛋白而形成。敷料含有基质、亚细胞元件和来自人类红血球浓缩物的被除去血红蛋白的沉淀蛋白质，并且可以被以具有，如果期望的话，合适的支持物的粉状或层状的形式使用。

US 2007/0275461和US 2004/0171145描述了从具有血小板的血浆和人类成纤维细胞获得的人造真皮。具有血小板的血浆从通过轻离心的来自患者的分离全血获得，并且人类成纤维细胞从皮肤活体解剖获得。凝结通过加入钙获得。人造真皮被描述为提供被接种在其表面上的角化细胞的迅速生长，以构建可以容易地被移植的人造皮肤。大面积的人造真皮被描述为从小的皮肤活体解剖和最小量的具有血小板的血浆获得。人造皮肤被描述为可用于治疗主要的烧伤、慢性皮肤溃疡，或被作为用于基因疗法的载体与转基因细胞共同使用。

US 2004/0124564描述了用于用于医疗应用的被化学改性的纤维蛋白-原纤蛋白质(FFP)复合片材的制备的工艺以及通过其制备的FFP复合材料。根据说明书，FFP片材具有作为在包括烧伤创伤的多种外部创伤的治疗中的敷料助剂(dressing aid)的潜在用途。

提纯的或分离的血液组分在其他的医学过程中的用途也被描述。以下是某些技术的非穷举的概述。

Khalafi等人(Ew J Cardiothorac Surg 2008；34:360-364.)描述了应用富血小板血浆和贫血小板血浆以显著地减少冠状动脉旁路移植术中胸部创伤感染、胸腔引流以及腿部创伤引流的发生。

Medtronic,Inc.,Minneapolis,MV；USA生产用于处理自体血液以将富血小板血浆浓缩为用于在手术中改进组织愈合的自体血小板凝胶的装置。

某些可商购获得的创伤护理产品使用从血液分离的血液组分和/或因子。

例如，多种生长因子已经被发现在创伤愈合过程中起作用，包括血小板源生长因子(PDGF)、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、转化生长因子和胰岛素样生长因子。多种基于分离血液或血源性生长因子的创伤愈合技术可商购获得。

一种可商购获得的技术采用重组DNA技术产生提纯的生长因子。REGANEX^TM Gel(由Systagenix Wound Management制造)是一种局部用凝胶，含有活性成分贝卡普勒明，贝卡普勒明具有与人类血小板源生长因子(PDGF)的活性相似的活性。这种重组生长因子通过DNA重组技术通过将血小板源生长因子(PDGF)的B链的基因插入酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)中而产生。

另一种可商购获得的技术采用富血小板血浆(PRP)。PRP通过离心从全血分离。自体的PRP含有被活化的生长因子细胞因子和趋化因子的混合物，其具有减少的对免疫响应的潜力。PRP向凝血酶和氯化钙的溶液的暴露导致来自纤维蛋白原的纤维蛋白的聚合，产生血小板凝胶，血小板凝胶然后可以被施用于创伤。PRP向创伤提供促进血管生成和调节细胞生长和新组织的形成的生长因子、趋化因子和细胞因子。AutoloGel^TM(由Cytomedix,Inc.制造)和(由SafeBlood Technologies制造)是可以在床边制备以用于即时的施用的两种自体血源性产品。AutoloGel^TM和二者已经专门在市场上销售用于创伤愈合。

另一种可商购获得的技术采用具有增强创伤愈合的止血和胶粘性质的纤维蛋白胶或密封剂。工业的纤维蛋白胶从汇集的同源人类供体产生。TISSEEL^TM(由Baxter制造)是可商购获得的纤维蛋白密封剂的实例。这种产品的行为据称模拟创伤闭合的生理过程的关键特征。该产品含有高度浓缩的纤维蛋白原抑肽酶溶液，其除了别的成分之外含有凝血因子XIII，并且凝血酶和氯化钙的溶液被施用于创伤区域，在创伤区域混合物凝聚。凝血因子XIII的存在使纤维蛋白交联，这给予凝结块额外的弹性。

发明概述

本发明的宽泛的方面涉及使用凝结的血液治疗皮肤损伤。形成凝结的血液，以致其可以被施用至皮肤损伤上。

术语“全血”应当被理解为是指(i)从静脉循环或动脉循环取得的血液；(ii)除了抗凝剂或其他化学物质或生物物质的加入或一种或多种血液组分(例如血浆的一部分)的除去之外，尚未被改性的血液，其中这样的改性不影响其总体的物理的或化学的特性；或(iii)含有其所有组分的血液，例如红血细胞和白血细胞、血小板以及更多的，特别是凝块形成所需要的所有组分。应当注意，术语“全血”不一定意指被用作凝结的血液的源的血液与从个体抽取的血液相同。有时，被抽取的血液可以经受诸如透析、通过柱等的程序，以在被用于根据本发明治疗皮肤损伤之前除去某些组分，例如不期望的组分(实例是在使用非自体的血液的情况下除去某些免疫原性组分或抗血清组分)。此外，根据本发明的某些示例性实施方案，全血被一种或多种添加剂补充。添加剂包括但不限于影响凝聚的添加剂、改变物理性质的添加剂和医学活性添加剂。

根据本发明可治疗的皮肤损伤包括其中皮肤缺损或其中疗法尤其靶向皮肤再生长的所有类型的皮肤损伤。这些包括不流血的创伤(例如烧伤和溃疡)和流血的创伤(例如擦伤)二者。

影响凝聚的添加剂包括但不限于抗凝剂、抗-抗凝剂(anti-anticoagulant)和/或促凝剂(例如带负电荷的磷脂(PL)和表面接触剂如高岭土)。为了避免不受控制的血液凝结，一种或多种抗凝剂(例如EDTA)可以在从个体抽取时立即被加入血液中。实际上，抗凝剂通常被包含在收集血液的试管或其他容器中。此外，储存在血库中的血液通常包含一种或多种抗凝剂。根据本发明的某些示例性实施方案，为了对抗全血制剂中的抗凝剂，加入抗-抗凝剂以允许血液凝结。例如，Ca²⁺离子可以被用于抵消EDTA的活性。这些离子可以作为可溶性钙盐的溶液被加入。由于被加入一单位的全血的抗凝剂的类型和量通常是已知的，所以可以选择合适的抗-抗凝剂以及计算合适的使用量。

改变物理性质的添加剂包括但不限于稀释剂(例如盐水溶液)、硬化剂(例如矿物质)、增塑剂和增弹剂。

医学活性添加剂包括但不限于抗生素、防腐剂、止痛剂、生长因子、细胞因子、酶、激素、细胞、抗炎剂和如可以由创伤护理领域的普通技术人员设想的许多其他的添加剂。

医学活性添加剂和改变物理性质的添加剂的使用在US 2004/0147024、US5610148和US 5629287中描述，其相关的内容以引用方式并入本文。

如本文公开的敷料的某些示例性实施方案是基于以下的认识：血液凝块天然地具有使其成为对覆盖创伤并促进愈合的有效敷料的物理性质、化学性质和功能性质。不希望被理论束缚地，相信凝结的全血必须必然满足创伤敷料的所有基本要求。可选择地，通过使用自体的血液凝块(来自从患者提取的全血的凝块)，免疫响应的任何可能都被大大地减小。可选择地，当使用同源的血液凝块(即来自从不同的个体提取的全血的凝块，例如从血库获得的)时，免疫响应的可能可以通过血清学分型被减小。

本发明的某些实施方案的一个方面涉及凝结的全血的层或片材在支持结构上的形成。根据本发明的某些示例性实施方案，支持结构被内嵌在凝结的全血内。可选择地或另外地，支持结构在凝块的外部。根据本发明的某些示例性实施方案，支持结构辅助凝结的全血从一个位置向另一个位置转移和/或有助于在凝结期间收缩行为的变化和/或有助于所得到的全血凝块的物理性质的变化(例如增加的强度)。支持结构的实例是纤维材料的衬垫例如纱布。

本发明的某些实施方案的一个方面涉及来自全血的源的多个无菌全血凝块的同时形成。根据本发明的某些示例性实施方案，凝块以具有期望厚度的片材形成。可选择地，多个片材具有共同的厚度。可选择地，片材在支持结构上形成。

本发明的某些实施方案的一个方面涉及包含抗凝剂和足以允许凝结的抗-抗凝剂的凝结的全血的无菌片材。根据本发明的某些示例性实施方案，凝结的血液的无菌片材被在储存和/或运输期间保持无菌的包装或包裹物中提供。此外，血液凝块通常形成为片材，本发明不限于被形成为这样的具体形式的血液凝块。

本发明的某些实施方案的一个方面涉及凝结的全血向受试者的皮肤表面施用。根据本发明的多种示例性实施方案，凝结的全血可以作为湿敷料或干敷料的一部分施用。根据本发明的某些示例性实施方案，皮肤表面包括创伤(例如溃疡或裂伤)和/或被烧伤的皮肤表面。

可选择地，凝结的全血与上文和下文描述的内部的和/或外部的支持物一起施用。根据本发明的某些示例性实施方案，凝结的全血被常规的敷料覆盖。如在本说明书和所附的权利要求中使用的术语“常规的敷料”是指包括一个或多个层的覆盖物，每个层独立地选自非粘合性层、吸收层(例如纱布和/或无纺布或相似的筛网)和粘合性层(例如胶带)。

本发明的某些实施方案的一个方面涉及从单位的凝结的全血制备的敷料的储库。根据本发明的某些示例性实施方案，敷料通过与单位对应的唯一识别符而编排目录。可选择地，唯一识别符被用于将受试者与一个或多个特定的生物敷料匹配。

可选择地，匹配信息被提供为与在计算机的存储器中的查阅表中的所述唯一识别符相关联的机器可读数据。机器可读数据包括但不限于与血型相关的数据、交叉配血数据、HLA单元型数据和其他遗传数据。可选择地或另外地，匹配信息被提供为从所述全血单位中的每个储备的未凝结的血液的等份，从所述全血单位中的每个用于制备多个所述板中的每个，每个相关联的等份通过所述唯一识别符被编排目录。如本文使用的“血型”是指任何抗原和/或抗体特征，并且不限于A；B；AB；O和Rh^+/-。

本发明的某些实施方案的一个方面涉及将从供体或血库获得的一定量(例如一单位)的全血散布在例如50-10,000cm²的区域上并且允许血液形成凝块。根据本发明的某些示例性实施方案，血液的无菌性在凝结期间被保持。如可以被容易地理解的，上文提出的面积度量是示例性的并且它们可以是更小的或更大的。有时，在所得到的血液凝块片材的强度和面积之间可以有权衡，其中较大的面积产生较不稳固的凝块。根据本发明的某些示例性实施方案，支持层贡献强度，允许血液在更大的面积上散布。通常，血液的厚度在凝块形成期间通过血浆在凝块形成期间和/或之后从凝块泌出或渗出而被减小。例如，全血的3mm层在体外(in vitro)在1天之后产生具有约1.2mm的厚度的凝块。根据本发明的某些示例性实施方案，在散布之前加入凝聚引发剂。可选择地，选择凝聚引发剂以中和在血液中的抗凝剂的活性。

本发明的某些实施方案的一个方面涉及未分开的(un-fractionated)全血在创伤血液敷料的制造中的用途。

本发明的某些实施方案的一个方面涉及向需要治疗的皮肤区域施用全血以在其上形成血液凝块。根据本发明的某些示例性实施方案，区域被吸收层覆盖。可选择地，吸收层包括筛网，例如纱布和/或无纺布。可选择地，凝块在形成之后被覆盖。根据本发明的某些示例性实施方案，治疗烧伤的皮肤。可选择地，在施用期间维持血液的无菌性。

本发明的某些实施方案的一个方面涉及从凝结的全血块体切割凝结的全血的切片或片材。如在本说明书和所附的权利要求中使用的术语“块体”应当被宽泛地解释使得其包括所有三维形状。

如在本说明书和所附的权利要求中使用的，形容词“可除去”表示所描述的对象已经被设计为允许被普通的使用者不经过度的努力地除去。可除去包括不使用工具被除去的物品以及需要使用工具(例如剪刀、刀或开具)的物品二者。在本发明的某些示例性实施方案中，用于除去的工具设置有以具有被附接的“钥匙”的沙丁鱼罐头的方式的匹配它们的除去零件。

根据本发明的实施方案，提供用于凝结全血并且将其形成为凝块以用于治疗皮肤损伤的装置。该装置具有用于接收血液的血液贮器(receptacle)，贮器以使得在形成的血液凝块上赋予期望的最终形状(例如平面)的方式成形。

根据本发明的某些示例性实施方案，提供用于在活体外(ex-vivo)凝结全血的装置，该装置包括：(a)入口，其包括与装置的内部流体连通的通道；(b)样品贮器，其适合于散布提供在其中的样品以产生均一的层；以及(c)至少一个支持结构，其被铺展在贮器中使得在所述结构上形成均一的层。其可选择地还包括(d)覆盖贮器并且适合于保持层的无菌性的可除去覆盖物。

可选择地，支持结构包括外层。

可选择地，支持结构适合于变为内嵌在层中。

可选择地，层由附着于在材料上形成的血液凝块的所述材料构建。

可选择地，支持结构包括选自由尼龙、聚氨酯、棉、纤维素、硅和橡胶组成的组的至少一种材料。

可选择地，贮器由选自由玻璃、纤维素、聚苯乙烯、聚氨酯、聚氯乙烯、聚碳酸酯和橡胶组成的组的至少一种材料构建。

可选择地，贮器含有足以导致包含样品的血液的凝聚的量的抗-抗凝剂。

可选择地，装置的内部在真空压力下。

根据本发明的某些示例性实施方案，提供用于在活体外凝结全血的装置，该装置包括：(a)至少一个入口，其包括与装置的内部流体连通的通道；(b)多个样品贮器，其互相连接以允许从共用源同时流入，贮器中的每个适合于散布在其中提供的样品以产生均一的层，例如片材；(c)无菌性保护器，其适合于使在贮器中的每个中的层保持无菌性。

可选择地，装置包括支持结构，该支持结构被铺展在贮器中的每个中使得在支持结构上形成层。

可选择地，支持结构包括外层，外层由附着于在材料上形成的血液凝块的所述材料构建。

可选择地，支持结构包括被内嵌在层中的筛网。

可选择地，互相连接以选自由并联和串联组成的组的至少一种构型。

可选择地，贮器被以堆叠布置。

可选择地，贮器中的一个的除去不影响在任何其他贮器中的层的无菌性。

可选择地，无菌性保护器包括与贮器中的至少某些缔合的覆盖物。

可选择地，贮器中的至少某些作为贮器中的另一个的无菌性保护器。

可选择地，装置还包括在装置的内部和周围环境之间提供流体连通的排出阀。

可选择地，装置的内部被设置为在真空下。

可选择地，贮器中的每个容纳足以导致包含样品的血液的凝聚的量的抗-抗凝剂。

本发明还提供包括为了制备根据本发明的基于血液凝块的敷料所需要的部件中的一个或多个的药盒或组件。这样的部件包括以下中的一个或多个：一个或多个血液抽取装置；一个或多个血液收集贮器；一个或多个板、托盘或其他合适的贮器，它们用于接收血液并且在其上形成凝块；用于形成的血液凝块的一个或多个支持基质；抗凝剂，其可选择地已经被包括在血液抽取装置或血液收集装置中；抗凝抑制剂(在本说明书中还被称为抗-抗凝剂)，用于诱导凝块形成。药盒或组件可选择地还包括根据本发明使用的说明书。

根据本发明的某些示例性实施方案，提供药盒或组件，包括：(a)无菌托盘或板，意图用于接收全血；(b)抗凝剂材料，其被分散遍及板或被包括在容器中并且意图用于在血液被引入托盘或板之前或之后加入托盘或板中；以及(c)抗凝抑制剂，其在即使存在抗凝剂的情况下也允许凝块的形成。可选择地，抗凝剂包括选自由EDTA(乙二胺四乙酸)、EGTA(乙二醇四乙酸)、柠檬酸盐、肝素和草酸盐组成的组的至少一种物质。

可选择地，抗凝抑制剂选自Ca²⁺、Mg²⁺、高岭土、带负电荷的磷脂(PL)和硫酸鱼精蛋白。

可选择地，药盒或组件被在环境温度下提供。

可选择地，药盒或组件被在冷冻下提供。

根据本发明的某些示例性实施方案，提供治疗的方法，包括：(a)制备凝结的全血片材；并且(b)将该片材施用于需要其的受试者的皮肤区域。

可选择地，方法包括将支持基质附着至凝结的血液片材上。

可选择地，方法包括将筛网内嵌在凝结的血液片材内。

可选择地，基质具有对选自由气体和液体组成的组的至少一项功能上显著的渗透性。

可选择地，基质由选自由尼龙、聚氨酯、硅和橡胶组成的组的至少一种材料构建。

可选择地，片材是至少1mm厚或至少2mm厚或至少3mm厚。

可选择地，方法包括使用常规的敷料覆盖片材。

可选择地，方法包括从凝结的血液片材的形成直到使用使其保持无菌性。

根据本发明的某些示例性实施方案，提供生物敷料的储库，该储库包括：(a)多个凝结的全血的无菌片材，板中的每个通过指示片材所来源的全血单位的唯一识别符编排目录；(b)全血单位的每个的交叉相容性信息(cross compatibility information)；以及(c)冷冻元件，其用于多个板的冷藏。

可选择地，交叉相容性信息被提供为与在计算机的存储器中的查阅表中的唯一识别符相关联的机器可读数据。

可选择地，交叉相容性信息被提供为从全血单位中的每个储备的未凝结的血液的等份，从所述全血单位的每个制备多个板的每个，每个相关联的等份通过唯一识别符被编排目录。

可选择地，凝结的全血的无菌板中的至少某些包括与板接触的外支持结构。

可选择地，凝结的全血的无菌板中的至少某些包括内嵌在板中的筛网。

根据本发明的某些示例性实施方案，提供生产生物敷料的方法，包括：a)散布一单位的全血以覆盖一定区域，同时保持无菌性；并且b)允许血液形成凝块，凝块典型地以片材的形式。

可选择地，方法包括在散布之前加入凝聚引发剂。

可选择地，选择凝聚引发剂以中和在单位中的抗凝剂的活性。

可选择地，散布是在被防止全血和贮器之间接触的层所覆盖的贮器中发生。

可选择地，散布在变为内嵌在凝块中的筛网上。

可选择地，基质附着于凝块并且有助于其可转移性。

可选择地，基质由选自由尼龙、聚氨酯、纺织织物、无纺布、硅、橡胶和有机硅组成的组的至少一种材料构建。

本发明的某些示例性实施方案涉及未分开的全血在创伤敷料的制造和/或制备中的用途。

根据本发明的某些示例性实施方案，提供治疗的方法，包括：(a)提供适合于覆盖需要治疗的受试者的皮肤区域的吸收基质；(b)允许一定量的全血在所述基质上凝结以在其上形成凝结的全血的片材；并且(c)将含有凝结的血液的敷料施用在皮肤损伤上。

可选择地，血液包括来自受试者的自体的血液。

可选择地，基质包括筛网。

可选择地，筛网包括纱布。

可选择地，方法包括使用气体渗透性材料覆盖片材。

可选择地，皮肤的区域包括不流血的创伤(例如烧伤的区域或溃疡)。

可选择地，方法包括使用常规的敷料覆盖片材。

可选择地，方法包括在施用期间保持血液的无菌性。

根据本发明的某些示例性实施方案，提供用于制备凝结的全血的板的方法，该方法包括：(a)在切割设备中提供凝结的全血的块体；(b)逐渐地推进块体；(c)从块体切割切片；并且(d)交替地重复(b)和(c)。

在本发明的某些示例性实施方案中，提供制备创伤敷料的方法，包括：(a)收集一定体积的血液；并且(b)在活体外凝结血液以形成凝块。

可选择地，方法包括切割凝块的一部分至适合于包扎特定的创伤的尺寸。

可选择地，方法包括提供所述凝块在其上形成的支持结构。

在本发明的某些示例性实施方案中，提供用于创伤敷料的制备的药盒，包括：(a)无菌容器，其适合于接收一定体积的血液；(b)足以防止所述一定体积的血液凝结的抗凝剂；(c)足以使所述一定体积的血液在抗凝剂的存在下凝结的抗-抗凝剂；以及(d)托盘，其适合于散布所述一定体积的血液至期望的厚度。

可选择地，托盘容纳支持结构，所述凝块形成在所述支持结构上。

在本发明的某些示例性实施方案中，提供用于制备待施用至皮肤损伤上的敷料的药盒或组件，包括用于处理一定体积的液体全血以形成凝结的血液的片材的一个或多个硬件部件(hardware component)。

可选择地，片材具有被限定的厚度。

可选择地，药盒或组件包括以下中的一个或多个：一个或多个血液抽取装置；一个或多个血液收集贮器；一个或多个贮器，其用于接收血液并且在该一个或多个贮器上形成凝块；用于形成的血液凝块的一个或多个支持基质；抗凝剂，其可选择地已经被包括在血液抽取装置或血液收集装置中；以及抗凝抑制剂，其用于诱导凝块形成。

在本发明的某些示例性实施方案中，提供用于创伤敷料的制备的药盒，该药盒包括：(a)无菌容器，其适合于接收一定体积的血液；(b)抗凝剂；(c)抗-抗凝剂；(d)托盘，其用于接收和散布所述一定体积的血液至期望的厚度并且用于使全血在其中凝结；以及(e)形成包含凝块的创伤敷料。

本申请提供了以下内容：

1).一种用于制备待施用至皮肤损伤上的敷料的药盒或组件，包括用于处理一定体积的液体全血以形成凝结的血液的片材的一个或多个硬件部件。

2).根据1)所述的药盒，其中所述片材具有被限定的厚度。

3).根据1)或2)所述的药盒或组件，包括以下中的一个或多个：

一个或多个血液抽取装置；

一个或多个血液收集贮器；

用于接收所述血液并且在其上形成凝块的一个或多个贮器；

用于所形成的血液凝块的一个或多个支持基质；

抗凝剂，其可选择地已经被包括在所述血液抽取装置或血液收集装置中；以及

抗-抗凝剂，其用于诱导凝块形成。

4).一种用于制备创伤敷料的药盒，所述药盒包括：

(a)无菌容器，其适合于接收一定体积的血液；

(b)抗凝剂；

(c)抗-抗凝剂；

(d)托盘，其用于接收和散布所述一定体积的血液至期望的厚度并且用于使全血在其中凝结；以及

(e)形成包含所述凝块的创伤敷料。

5).根据4)所述的药盒，其中所述托盘容纳支持结构，所述凝块形成在所述支持结构上。

6).根据3)-5)中任一项所述的药盒或组件，其中所述抗凝剂包括选自由EDTA(乙二胺四乙酸)、EGTA(乙二醇四乙酸)、柠檬酸盐、肝素和草酸盐组成的组的至少一种物质。

7).根据3)-6)中任一项所述的药盒或组件，其中所述抗-抗凝剂选自Ca²⁺、Mg²⁺、高岭土、带负电荷的磷脂(PL)和硫酸鱼精蛋白。

8).一种制备创伤敷料的方法，所述方法包括：

(a)收集一定体积的血液；

(b)在活体外凝结所述血液以形成凝块；并且

(c)形成包含所述凝块的创伤敷料。

9).根据8)所述的方法，包括切割所述凝块的一部分至适合于包扎特定的创伤的尺寸。

10).根据8)所述的方法，包括提供支持结构，所述凝块在所述支持结构上形成。

11).全血在制造创伤敷料中的用途。

12).全血在制备创伤敷料中的用途。

13).一种治疗的方法，包括：

(a)制备凝结的全血的片材；以及

(b)将所述片材施用于需要其的受试者的皮肤的区域。

14).根据13)所述的方法，包括将支持基质与所述片材缔合。

15).根据13)或14)所述的方法，包括将筛网内嵌在所述片材内。

16).根据13)至15)中任一项所述的方法，其中所述皮肤的区域包括创伤。

17).根据13)至16)中任一项所述的方法，包括使用常规的敷料覆盖所述片材。

18).一种生产生物敷料的方法，包括

a)散布一单位的全血以覆盖一定区域；并且

b)允许所述血液凝结以由此形成凝结的血液片材。

19).根据18)所述的方法，包括在所述散布之前加入凝聚引发剂。

20).根据19)所述的方法，其中所述凝聚引发剂被选择以中和在所述单位中的抗凝剂的活性。

21).根据18)至20)中任一项所述的方法，其中所述散布是在变为内嵌在所述凝块中的筛网上。

22).根据18)至20)中任一项所述的方法，其中所述凝块被附着于支持基质。

23).一种生物敷料的储库，所述储库包括：

(a)多个凝结的全血的无菌片材；以及

(b)所述片材中的每个的交叉相容性信息。

24).一种用于在活体外凝结全血的装置，所述装置包括：

(a)入口，其包括与所述装置的内部流体连通的通道；

(b)样品贮器，其适合于散布其中提供的样品以产生均一的层；以及

(c)至少一个支持结构，其被铺展在所述贮器中使得所述均一的层形成在所述结构上。

25).根据24)所述的装置，其中所述支持结构适合于变为全部地或部分地内嵌在所述层中。

26).根据24)或25)所述的装置，其中所述支持结构由附着于在材料上形成的血液凝块的所述材料构建。

27).根据24)至26)中任一项所述的装置，其中所述贮器容纳足以导致包含所述样品的血液的凝聚的量的抗-抗凝剂。

28).一种用于在活体外凝结全血的装置，所述装置包括：

(a)至少一个入口，其包括与所述装置的内部流体连通的通道；

(b)多个样品贮器，其互相连接以允许从共用源同时流入，所述贮器中的每个适合于散布在其中提供的样品以产生均一的片材；

(c)无菌性保护器，其适合于使在所述贮器中的每个中的所述片材保持无菌性。

29).根据28)所述的装置，包括支持结构，其被铺展在所述贮器中的每个中使得所述片材形成在所述支持结构上。

30).根据29)所述的装置，其中所述支持结构包括外层，所述外层由附着于在材料上形成的血液凝块的所述材料构建。

31).根据28)或29)所述的装置，其中所述支持结构包括内嵌在所述片材中的筛网。

32).一种治疗的方法，包括：

(a)提供适合于覆盖需要治疗的受试者的皮肤的区域的吸收基质；

(b)允许一定量的全血凝结至所述覆盖物上以在其上形成凝结的全血的片材，以由此形成含有凝结的血液的敷料；并且

(c)将所述含有凝结的血液的敷料施用在皮肤损伤上。

33).根据32)所述的方法，其中所述血液是自体的。

34).根据32)-33)中任一项所述的方法，其中所述基质包括筛网。

35).根据34)所述的方法，其中所述筛网包括纱布。

36).根据32)至35)中任一项所述的方法，其用于不流血的创伤的治疗。

37).根据32)至36)中任一项所述的方法，包括使用常规的敷料覆盖所述含有凝结的血液的敷料。

38).一种用于制备凝结的全血的片材的方法，所述方法包括：

(a)提供凝结的全血的块体；并且

(b)从所述块体切割片材。

39).全血在用于制备用于皮肤损伤的敷料上的用途。

40).根据39)所述的用途，其中所述血液被凝结以形成凝结的血液的片材。

41).根据38)或39)所述的用途，其中所述凝结的血液的片材被制造为与支持结构缔合。

除非另有定义，否则本文所使用的所有技术和科学术语都具有与本发明所属领域的普通技术人员普遍地理解的含义相同的含义。虽然下文描述了合适的方法和材料，但是在本发明的实施中可以使用与本文所描述的方法和材料相似的或等效的方法和材料。如果有矛盾之处，那么将以本专利说明书，包括定义，为准。所有材料、方法和实例都仅是例证性的并且不意图作为限制。

如本文使用的，术语“包括”和“包含”或其语法上的变化形式将被视为表示含有所提出的特征、整体、行为或部件，而不排除加入一个或多个另外的特征、整体、行为或部件或其组。该术语比术语“由……组成”以及“基本上由……组成”更宽泛并且包含术语“由……组成”以及“基本上由……组成”，如由美国专利商标局的专利审查程序手册(Manual ofPatent Examination Procedure)定义的。

短语“基本上由……组成”或其语法上的变化形式当在本文中使用时将被视为表示所提出的特征、整体、步骤或部件，但是不排除加入一个或多个另外的特征、整体、步骤、部件或其组，但是仅在所述另外的特征、整体、步骤、部件或其组不实质上改变所要求保护的组成、装置或方法的基本的和新颖的特征时。

术语“方法”是指用于实现给定的任务的方式、手段、技术和程序，其包括但不限于建筑和/或计算机科学的技术人员已知的那些方式、手段、技术和程序，或由建筑和/或计算机科学的技术人员容易地从已知的方式、手段、技术和程序开发的那些方式、手段、技术和程序。

被典型地作为粉末或晶体供应的化学品(例如EDTA和钙盐)的百分比(％)是W/V(重量/体积)，除非另有说明。被典型地作为液体供应的化学品(例如柠檬酸盐溶液和/或稀释剂)的百分比(％)是V/V(体积/体积)，除非另有说明。

附图简述

为了理解本发明以及为了了解本发明可以如何在实际中被实施，现在将参照附图仅以非限制性的实例的方式描述实施方案。在附图中，在多于一个图中出现的相同的和相似的结构、元件或其零件通常在它们出现的各图中用相同的或相似的参考数字标记。图中所示的部件和特征的尺寸主要为了表示的方便和清楚而选择，并且不一定是按比例的。附图是：

图1A是根据本发明的示例性实施方案治疗的患者的示意图；

图1B是图示了根据本发明的某些示例性实施方案的示例性的治疗方法的简化的流程图；

图1C是图示了示例性的治疗方法对现有的治疗模式的适应的简化的流程图；

图2是图示了根据本发明的某些示例性实施方案的另一个示例性的治疗方法的简化的流程图；

图3是图示了根据本发明的某些示例性实施方案的制品的示意图；

图4是根据本发明的某些示例性实施方案的凝块储库的示意图；

图5是图示了根据本发明的某些示例性实施方案的示例性的制造方法的简化的流程图；

图6A和6B是图示了用于根据本发明的某些示例性实施方案的凝块形成的在两个不同的操作状态中的设备的示意图；

图7是图示了用于根据本发明的某些示例性实施方案的凝块形成的另一个设备的示意图；

图8是图示了用于根据本发明的某些示例性实施方案的凝块形成的另一个设备的示意图；

图9是图示了根据本发明的某些示例性实施方案的制备凝结的全血的板的示例性方法的简化的流程图；

图10是根据本发明的示例性实施方案的在贮器中的凝结的全血的示例性片材的照片；

图11是根据本发明的示例性实施方案的具有由支持结构支持的内嵌的支持结构的凝结的全血的示例性片材的照片；

图12是具有内嵌的支持结构的凝结的全血的示例性片材的照片，描绘了液体从板的排出；

图13是根据本发明的示例性实施方案的凝结的全血的示例性片材的照片；

图14是图示了根据本发明的示例性实施方案的图13的片材被施用于皮肤表面的照片；

图15是图示了在图13的片材被施用于图14中的皮肤表面之后的液体从图13的片材渗出的照片；以及

图16A、16B和16C是图示了根据本发明的示例性实施方案的完全干燥的片材对皮肤的附着(图16A)以及其通过剥离除去(图16B和16C)的一系列照片。

图17A、17B、18A、18B、19A、19B、20A、20B、21A、21B、22A、22B、23A和23B是图示了在治疗之前(每个图中的画面A)和在使用根据本发明的示例性实施方案的创伤敷料的治疗之后(每个图中的画面B)的创伤的一系列照片。

示例性实施方案的详细描述

本发明的实施方案涉及含有抗凝剂和抗-抗凝剂的凝结的全血、凝结的全血的制备和/或凝结的全血在医学治疗中的用途和/或创伤敷料的制备和/或用作创伤敷料的凝结的全血的的储存和/或用于凝结的全血的制备的设备和/或全血施用于皮肤以用于原位凝块形成。

特别地，本发明的某些实施方案可以被用于烧伤和/或其他皮肤损伤(例如慢性溃疡)。

根据本发明的多种示例性实施方案的生物创伤敷料的制备和用途和/或用于生产它们的设备和/或用于储存它们的储库和/或依赖于它们的医学治疗的方法的原理可以参照附图和所附的描述被更好地理解。

在详细地解释本发明的至少一个实施方案之前，将理解，本发明的应用不被限制于在以下的描述中提出的或由实例举例说明的细节。本发明能够具有其他的实施方案或能够以多种方式实践或实施。此外，将理解，本文采用的措辞和术语是为了描述的目的并且不应当被认为作为限制。

综述：

图1A描绘了本发明的示例性实施方案100，其中受试者的皮肤表面110的一部分被凝结的全血的板120覆盖，该凝结的全血的板120是为了此目的专门制备的。根据本发明的多种示例性实施方案，板120可以被设置为与支持结构130接合和/或被常规的敷料140覆盖。选择受试者的皮肤表面110板120覆盖的部分，是因为其需要治疗(例如烧伤的皮肤表面)。

被布置在皮肤表面110上的板120形成生物敷料，生物敷料是被预先制备的或被允许在治疗区域原位形成。下文描述的各种实施方案被这样的构思所统一，即不流血的创伤(例如溃疡和/或烧伤)丧失了由凝结的血液形成的结疤的自然愈合的益处。

示例性的治疗方法：

图1B是大体上被描绘为102的治疗方法的简化的流程图。所描绘的示例性的方法102包括制备122一个或多个凝结的全血的板并将板施用132于需要其的受试者的皮肤的区域(例如烧伤区域或溃疡区域)。

在本发明的某些示例性实施方案中，支持层被附着142于片材。可选择地，附着142可以在制备122期间或之后发生。在本发明的某些示例性实施方案中，支持层被构建为气体可渗透的和/或液体不可渗透的。

可选择地或另外地，方法102包括将筛网内嵌152在板内。典型地，内嵌通过使液体全血与筛网接触并且允许血液在筛网上凝结而实现。适合于该目的的筛网包括但不限于织物筛网(例如纱布或粗棉布或无纺布)。可选择地，筛网含有棉纤维和/或纤维素。

可选择地或另外地，方法102包括使用常规的敷料覆盖162片材。常规的敷料可以起以下作用：将板保持在原位和/或保持片材完整和/或吸收从片材流出的渗出液和/或防止不需要的接触力(例如来自穿衣服和/或脱衣服的)。可选择地，常规的敷料以与片材自身相同的频率或比片材自身大的频率更换。

在本发明的某些示例性实施方案中，从其形成直到被施用于皮肤表面为止，保持片材的无菌性。无菌性可以通过本领域中已知的任何手段被保持。

根据本发明的多种示例性实施方案，片材通过将全血散布在具有1mm、可选择地2mm、可选择地3mm的厚度或具有中间的或更大或更小的厚度的层中而制备。凝结的血液的片材通常将具有比液体血液的最初的层小的厚度。

示例性的使用方案

图1C是图示了示例性的治疗方法102对现有的湿治疗模式170和干治疗模式180的适应的简化的流程图104。

在本发明的某些示例性实施方案中，应用湿治疗模式170并且片材在制备124之后保持潮湿124。然后潮湿的片材被施用132于需要治疗的皮肤的区域。可选择地，片材用潮湿的敷料覆盖134和/或用保湿的阻挡物覆盖136。

在本发明的某些示例性实施方案中，应用干治疗模式180并且片材在制备124之后被干燥126。然后干燥的片材被施用132于需要治疗的皮肤的区域。可选择地，片材用吸收性敷料覆盖133，吸收性敷料可以可选择地被更换135使得流体继续从片材被抽出。

可选择地，采用湿治疗模式170和干治疗模式180的混合。在本发明的某些示例性实施方案中，片材保持潮湿l24，被施用132并且被吸收性敷料覆盖133。在本发明的某些示例性实施方案中，片材被干燥126，被施用132并且被潮湿的敷料覆盖136。

另外的示例性的治疗方法：

图2是大体上被描绘为200的另一个治疗方法的简化的流程图。所描绘的示例性的方法200包括将吸收性覆盖物施用210于需要治疗的受试者的皮肤的区域(例如烧伤区域)。可选择地，吸收性覆盖物的边缘被掩盖。可选择地，吸收性覆盖物包括筛网，例如纱布或粗棉布。可选择地，筛网含有棉纤维和/或纤维素。

所描绘的方法200包括将全血施用220于吸收性覆盖物并且允许230全血凝结以形成凝结的全血的片材。如果可选择的；已经采用掩盖，那么其可以起到将施用的血液优先地向施用的吸收性覆盖物引导的作用。

在本发明的某些示例性实施方案中，方法200包括使用气体可渗透的材料(例如尼龙和/或棉和/或聚氨酯)覆盖片材。

在本发明的某些示例性实施方案中，方法200包括如上文对于方法102描述地使用常规的敷料覆盖片材，和/或在施用220期间保持血液的无菌性。

示例性的制品：

图3是大体上被描绘为300的以横截面察看的制品的示意图。所描绘的示例性的制品包括凝结的全血的无菌片材120。片材120包括被分散遍及片材的抗凝剂材料以及即使在抗凝剂的存在下足以允许片材的形成的量的抗凝抑制剂。适合于在本发明的多种实施方案中使用的抗凝剂和抑制剂在下文描述。

片材120被提供在包装材料350中。所描绘的示例性的包装材料350包括允许片材120在不使用工具的情况下被除去的可撕开密封物355。包装材料350可以作为封套、收缩包装、泡罩包装、密封桶、瓶、罐或本领域已知的任何其他的包装形式被提供。

根据本发明的多种示例性实施方案，制品300可以在环境温度下提供或在冷冻下提供。合适的冷冻温度包括12、8、4、0、-20、-70和-170摄氏度以及中间的温度。

根据本发明的多种示例性实施方案，片材120可以包括内支持物(例如筛网330)和/或外支持物340。可选择地，这些支持物可以用于帮助片材120从包装材料350的移出和/或片材120向期望的治疗位置的转移和/或片材120在期望的位置的放置。

可选择地或另外地，内支持物(例如筛网330)和/或外支持物340可以有助于片材120的结构性质。结构性质包括拉伸强度、压缩强度和弹性。

示例性的储存设施：

图4是大体上被描绘为400的储存设施的示意图。所描绘的示例性的储存设施400作为生物敷料的储库。设施400包括多个凝结的全血的无菌片材120，每个片材通过指示片材所来源于的全血单位的唯一识别符(被描绘为条形码450)而编排目录。在所描绘的示例性实施方案中，板120在储存容器410中以5个的组被储存。在所描绘的实施方案中，从单一单位的全血制备的5个片材被共同地储存，并且可选择地被处理为单一的库存项目或5个分别的库存项目。单一的储存容器410在小插图中被详细地描绘。在本发明的其他的实施方案中，片材120被单独地储存和编排目录。

储存设施400包括容纳片材120的冷冻隔室440。在所描绘的实施方案中，在隔室440中描绘了8个容器410，使得总共40个片材被储存。这一简化的表示仅是为了表达的清楚。在实际中，储存的片材120的数量将可能以千计、以万计或甚至以十万计。

可选择地，储存的片材的储存温度和数量是互相相关的。例如，较低的储存温度可以有助于片材120的较长的“保存期”，片材120的较长的“保存期”进而有助于在片材必须被丢弃之前积聚较大数量的片材的能力。

可选择地，较大数量的片材的储存有助于找到对需要治疗的受试者的合适的匹配的更大的可能性。

所描绘的示例性的储存设施400包括形成片材120的全血单位中的每个的交叉相容性信息。

在本发明的某些示例性实施方案中，交叉相容性信息被提供为与在计算机470的存储器474中的查阅表中的所述唯一识别符(例如条形码450)相关联的机器可读数据。可选择地，用户通过合适的用户界面(例如键盘472)输入来自需要治疗的受试者的交叉相容性信息并且被示出可以找到合适的片材120的冷冻隔室440的位置列表(例如在显示器480上)。在这种情况下，合适的片材是基于一组标记物的“理论上合适的”。可选择地，条形码读出器(未示出)被用于验证特定的容器410中的片材120的身份。

可选择地或另外地，交叉相容性信息被提供为从用于制备片材120中的每个的所述全血单位中的每个储备的未凝结的血液的等份430。等份430可以与唯一识别符450相关联。在所描绘的实施方案中，关联是由在与相应的片材120相同的容器410中的储存导致的物理关联。根据这些实施方案，在实践中，交叉相容性通过将来自潜在的接受者的未凝结的血液与从等份430抽出的样品混合而被检查，如本领域已知的。

可选择地，在实践中，理论上合适的片材在实际用于受试者之前被检查。

可选择地，至少某些片材120被设置在与片材接触的外支持结构上和/或片材120中的至少某些包括内支持结构(例如内嵌在片材120中的筛网)。

示例性的制造方法：

图5是大体上被描绘为500的生产生物敷料的方法的简化的流程图。所描绘的示例性的方法500包括散布510一标准单位的全血以覆盖至少0.02(例如0.1或更多)平方米的面积，同时保持520无菌性并且允许530血液形成凝块。根据本发明的多种示例性实施方案，面积可以是0.15、0.2平方米或更大的或中间的面积。

在本发明的某些示例性实施方案中，方法500包括在散布510之前将凝聚引发剂加入全血中。根据本发明的多种示例性实施方案，凝聚引发剂被选择以中和在所述单位的全血中的抗凝剂的活性。

可选择地，散布510在用防止全血和贮器之间的接触的支持层覆盖的贮器中发生，如将在下文更详细地描述的。可选择地，支持层是气体可渗透的和/或液体不可渗透的。

在本发明的某些示例性实施方案中，散布510被在变为内嵌在凝块中的筛网上进行。

总之，本发明的示例性实施方案包含未分开的全血在创伤敷料的制造中的任何用途。

用于凝块生产的示例性的设备：

图6A和6B是图示了用于根据本发明的某些示例性实施方案以大体上被描绘为600和601的两个不同的操作状态在活体外凝结全血的装置的示意图。

在图6A中，装置被描绘为在被完全组装的操作状态600中，其中该装置通过连接器612连接于外血液源610。所描绘的示例性的装置包括入口614和样品贮器650，入口614包括与装置的内部流体连通的通道，样品贮器650适合于散布提供在其中的样品以产生均一的层620。适应可以包括例如选择合适的构建材料以将血液表面张力保持在促进散布的值。可选择地或另外地，接触血液的表面可以被表面活性剂处理和/或被形成促进散布的结构。在本发明的某些示例性实施方案中，贮器650容纳足以导致被引入贮器中的血液凝聚的量的抗-抗凝剂。

所描绘的示例性实施方案包括至少一个支持结构640，该至少一个支持结构640被铺展在贮器650中使得均一的层620形成在结构640上。支持结构640被描绘为附着于在其上形成的血液凝块的外层。可选择地，层是气体可渗透的和/或液体不可渗透的。

可选择地，空间642被设置在贮器650和层640之间以用于液体的积聚。

可选择地或另外地，支持结构640包括被内嵌在层620中的筛网以及从其形成的凝块片材120。

在所描绘的实施方案中，适合于保持层620的无菌性的可除去覆盖物630覆盖贮器650。

在本发明的某些示例性实施方案中，装置的内部在真空压力下。根据本发明的多种示例性实施方案，当计算将施加的真空的量时，考虑装置的内部容积和/或相关的期望的填充容积和/或材料的柔性。可选择地，施加的真空使装置塌缩或部分地塌缩。

用于同时生产多个凝块的示例性的设备：

图7是图示了大体上被描绘为700的用于在活体外凝结全血以同时形成多个片材的装置的示意图。所描绘的示例性的装置700包括入口710和多个样品贮器750(描绘了五个，虽然可以采用其他数量的贮器)，入口710包括与装置的内部流体连通的通道，多个样品贮器750互相连接以允许从共用源同时流入。贮器750中的每个适合于散布提供在其中的样品以产生如上文描述的均一的层。

所描绘的示例性的装置700包括无菌性保护器730，无菌性保护器730适合于保持在被堆叠的贮器750中的每个中的层的无菌性。在所描绘的实施方案中，贮器750被配置为抽屉，使得一个贮器750的除去不影响在任何其他贮器750中的所述层的无菌性。因此，贮器750中的至少某些作为贮器750中的另一个的无菌性保护器。

可选择地或另外地，无菌性保护器730包括与贮器750中的至少某些缔合的覆盖物。

在本发明的某些示例性实施方案中，壳体720的内部被设置为在真空下。

图8是图示了大体上被描绘为800的用于在活体外凝结全血以同时形成多重片材的装置的示意图。所描绘的示例性的装置800包括提供与壳体820的内部流体连通的入口810。

壳体820的内部被隔离物840划分为多个样品贮器，该多个样品贮器互相连接以允许从共用源同时流入。在所描绘的实施方案中，互相连接是以并联的，虽然隔离物的交替的布置可以被使用以提供以串联的贮器。在本发明的另外的实施方案中，串联/并联组合也是可能的。

贮器中的每个适合于散布提供在其中的样品以产生如上文描述的均一的层。

壳体821的覆盖物820作为适合于保持在贮器中的每个中的层的无菌性的无菌性保护器。

在使用期间，全血通过入口810被装载并且行进通过内腔830，在此处，全血与隔离物840之间的空间流体连通。

在所描绘的示例性实施方案中，隔离物840作为被铺展在贮器中的外支持结构。液体全血层形成在支持结构840中的每个上，支持结构840作为血液凝块在其上形成时血液凝块所附着的外层。

在所描绘的示例性实施方案中，筛网层330被设置在空间840之间。筛网层330作为被内嵌在液体全血的层以及从液体全血的层形成的血液凝块中的内支持结构。

在所描绘的示例性实施方案中，装置800包括在壳体820的内部和周围环境之间提供流体连通的出口阀811。可选择地，阀811允许气体在装置被血液填充时离开装置。在本发明的某些示例性实施方案中，阀811是单向的和/或是过滤器使得其不损害无菌性。

在本发明的某些示例性实施方案中，壳体820的内部被设置为在真空下。

在图7和8中描绘的装置中，每个贮器可以可选择地容纳足以导致被引入其中的血液的凝聚的量的抗-抗凝剂。

从块体产生凝结的血液的片材的示例性的方法：

图9是图示了根据本发明的某些示例性实施方案制备凝结的全血的片材的示例性的方法900的简化的流程图。所描绘的示例性的方法900包括在切割设备中提供凝结的全血的块体并且逐渐地推进920块体。在逐渐的推进之后，块体被切割930以形成切片，切片成为如上文描述的“片材”。推进920和切割930可以被逐渐地重复940以产生另外的片材。

片材厚度可以通过调整推进920的增量被控制。

可选择地，待切割的块体被冻结以增加硬度。

在本发明的某些示例性实施方案中，相对小的体积的血液(例如10ml、20ml、30ml、40ml或50ml或中间的体积)在可用的容器(例如试管或注射器管)中收集和凝结。可选择地，使用任何可用的工具(例如解剖刀或剃须刀片)从该凝块切下切片或片材的形式的片。在本发明的某些示例性实施方案中，切割是在有标记的表面(例如方格纸)上进行，以保持切片的厚度相对均一。这种类型的方法可以被采用以治疗具有小尺寸(例如1、2、3、4或5平方厘米)的溃疡。

示例性的材料：

在本发明的某些示例性实施方案中，外支持层(例如340和/或640)可以由包括但不限于尼龙、聚氨酯、棉、硅和橡胶的一种或多种材料构建。可选择地，材料被选择为是气体可渗透的和/或水不可渗透的。

在本发明的某些示例性实施方案中，形成片材的贮器(例如650和/或750)可以由包括但不限于玻璃、聚氨酯、聚氯乙烯、聚碳酸酯、纤维素、聚苯乙烯和橡胶的一种或多种材料构建。

通常，用于上文描述的凝结装置的构建的材料将被选择为低成本的、轻重量的和可杀菌的。这些因素全部有助于“单次使用的”或“一次性的”医疗产品的生产的可行性。

在本发明的某些示例性实施方案中，内支持物(例如330)被作为筛网提供。适合于该目的的筛网包括但不限于织物筛网(例如棉纱布或粗棉布)。在本发明的其他的示例性实施方案中，无纺布代替筛网。在本发明的其他的示例性实施方案中，内支持物被作为其他类型的基质或支架提供。可选择地，筛网包含棉纤维和/或纤维素。

示例性的尺寸：

在本发明的某些示例性实施方案中，贮器被制成约15×20cm的尺寸。如果3mm深的液体全血的层被放置在具有该尺寸的贮器中，那么一标准单位的全血填充5个贮器。5个贮器的总计的面积是0.15平方米，这相当于普通人的皮肤表面的10％。如图7中所描绘的布置的五个贮器的组可以被制备为具有约5至8cm的总高度以及约16×21cm或更小的覆盖区。

如果更大的覆盖区域是期望的，那么可以采用更薄的全血的层和/或更大数量的贮器。可选择地，多于0.15平方米的覆盖涉及多于1单位的全血的使用。

在本发明的其他的示例性实施方案例如溃疡中，较小的覆盖面积是足够的。可选择地，收集小体积的血液(例如3cc、5cc、10cc、20cc或30cc或更小的或中间的体积)足以制备覆盖溃疡的凝块。在本发明的某些示例性实施方案中，采用相应地较小的凝结托盘和/或较薄的凝块。

示例性的抗凝剂和抗凝抑制剂：

适合于在本发明的内容中使用的抗凝剂包括但不限于EDTA(乙二胺四乙酸)、EGTA(乙二醇四乙酸)、柠檬酸盐(柠檬酸钠或酸性柠檬酸盐葡萄糖)、肝素和草酸盐。

适合于在本发明的内容中使用的抗凝抑制剂包括但不限于Ca²⁺、Mg²⁺、高岭土、带负电荷的磷脂(PL)和硫酸鱼精蛋白。表1汇总了其中可以控制凝结时间以获得期望的工作窗口(working window)(例如用于片材120的制备)的示例性的方式。

表1：示例性的体外凝结时间

测试材料	凝结时间
		全血	4-8分钟
全血+EDTA或柠檬酸盐	无限
		含柠檬酸盐的全血+Ca++	2-4分钟
含柠檬酸盐的全血+PL(带负电荷的磷脂)+Ca++	60-85秒
		含柠檬酸盐的全血+高岭土+PL+Ca++	21-32秒(aPTT)
含柠檬酸盐的全血+促凝血酶原激酶+Ca++	11-12秒(PT)

在本发明的某些示例性实施方案中，具有被加入的抗凝剂的全血从血库获得，并且足够的抗凝抑制剂被加入以获得2至8分钟、可选择地4至8分钟的凝结时间。该时间被认为足以允许液体单位的血液在贮器中的分布以用于后续的在其中凝结，如上文描述的。

另外的示例性的方法

在本发明的某些示例性实施方案中，制备创伤敷料的方法包括收集一定体积的血液并且在活体外凝结血液以形成凝块。可选择地，所收集的体积是小的(例如5ml、10ml、15ml或20ml或中间的体积或更小的体积)。在本发明的某些示例性实施方案中，待收集的体积在考察待治疗的创伤的面积后确定。可选择地，方法包括切割凝块的一部分至适合于包扎特定的创伤的尺寸和/或形状。切割可以是例如使用剪刀。可选择地，方法包括提供所述凝块在其上形成的支持结构。支持结构可以是如上文描述的内支持结构和/或外支持结构。

示例性的药盒：

本发明的某些示例性实施方案涉及用于制备包含凝结的全血的创伤敷料的药盒。可选择地，药盒包括适合于接收一定体积的血液以及足以防止所述一定体积的血液凝结的抗凝剂的无菌的或可杀菌的容器。容器可以是例如注射器、袋或试管(例如真空填充的试管)。

在本发明的某些示例性实施方案中，抗凝剂被提供在容器中。可选择地，药盒包括足以在抗凝剂的存在下使所述一定体积的血液凝结的抗-抗凝剂。抗-抗凝剂向具有抗凝剂的血液的加入打开了凝结发生的时间窗口(window of time)。在该时间窗口期间，血液被转移至适合于散布所述一定体积的血液至期望的厚度的托盘。合适的厚度包括1mm、2mm、3mm、4mm且至5mm以及中间的厚度或更大的厚度。

可选择地，托盘容纳支持结构，所述凝块形成在支持结构上。支持结构可以是如上文描述的内支持结构和/或外支持结构。

这种类型的药盒可以被个人和/或被执业医师使用。可选择地，使用者一次制备若干敷料并且储存它们的某些或全部以备将来使用。

示例性的优点：

根据本发明的多种示例性实施方案，使用如上文描述的凝结的全血片材120促进创伤愈合和/或减少感染的发生和/或有助于清创频率的减小和/或减少伤疤。这些优点被认为在不流血的创伤中，例如在烧伤和慢性溃疡(例如糖尿病足溃疡)中被最显著地实现。这些优点被认为是至少在某种程度上可得到的，与用于片材120的血液源无关。

示例性的血液源

根据本发明的多种示例性实施方案，用于形成片材120的血液可以是自体的血液、从血库接收的同源的全血或汇集的同源的全血或汇集的异源的全血。在医学实践中被普遍接受的是，健康的个人可以约每6至8周捐献1单位的全血，而没有不良影响。可选择地，单个人可以以较高频率捐献较小的量的血液。

在本发明的某些示例性实施方案中，需要治疗的受试者(例如具有超过他们的身体表面的8％的烧伤的烧伤受害者)捐献一单位的全血，这一单位的全血随后被用于使用如上文描述的方法和/或装置形成片材120。这种治疗策略可以有助于减小与在供血者和被治疗的受试者之间的不相容性相关联的风险。然而，关于多少皮肤表面可以使用自体捐献治疗和/或后续的自体捐献是否将可用于继续治疗，存在实际的限制。这些因素将进而每个都被片材120的厚度影响，如在下文更详细地描述的。

在本发明的某些示例性实施方案中，使用如上文描述的方法和/或装置从同源的(例如人类)血液制备的片材120治疗需要治疗的受试者(例如具有超过他们的身体表面的16％的烧伤的烧伤受害者)。这种治疗策略可略微地增加与在供血者和被治疗的受试者之间的不相容性相关联的风险。然而，其在多少皮肤表面可以被治疗和/或用于继续治疗的另外的片材的可用性方面受更少的限制。

在本发明的其他的示例性实施方案中，来自许多单位的同源的(例如人类的)血液被汇集以形成大体积，大体积随后被用于形成片材120以治疗需要治疗的受试者，如上文描述的。这种治疗策略非常易于工业规模放大并且减少了与交叉相容性筛选相关联的时间和劳动。然而，与在供血者和被治疗的受试者之间的不相容性相关联的风险的程度仍然有待评估。这种治疗策略在多少皮肤表面可以被治疗和/或用于继续治疗的另外的片材的可用性方面是几乎不受限制的。可能的是，大量不同类型的血液在凝结以形成片材120之前的汇集可以导致“全适供血者”状况，因为抗体和抗原在凝块形成之前彼此结合和中和。

在本发明的其他的示例性实施方案中，来自许多单位的异源的(例如猪或马的)血液被汇集以形成大体积，大体积随后被用于形成片材120以治疗需要治疗的受试者，如上文描述的。可选择地或另外地，人类的血液库(a pool of human blood)可以通过与异源的血液混合而被扩充。这种治疗策略也非常易于工业规模放大并且减少了与交叉相容性筛选相关联的时间和劳动。然而，与在来源于一种或多种异源的物种的凝块和被治疗的受试者之间的不相容性相关联的风险的程度仍然有待评估。这种治疗策略在多少皮肤表面可以被治疗和/或用于继续治疗的另外的片材的可用性方面也是几乎不受限制的。如同被汇集的同源的血液一样，可能的是，来自多种无关的物种的血液(例如猪、羊和马和犬的血液)在凝结以形成片材120之前的汇集可以导致“全适供血者”条件，因为抗体和抗原在凝块形成之前彼此结合和中和。

对片材厚度作为治疗限制的解释

在本发明的某些示例性实施方案中，一单位的全血被散布在0.1平方米或更多的面积上并且被允许凝结，如上文描述的。可以被覆盖的面积取决于在凝结之后的期望的凝块厚度。表2在初始层厚度和所得到的凝块厚度方面汇总了来自一标准单位的全血的示例性的覆盖面积(％总身体面积)。

表2：作为液体全血层厚度的函数的％身体表面覆盖度

实例	液体血液厚度(mm)	凝块厚度(mm)	总面积(M2)	身体表面％
					1	3	1.2	0.15	10
2	2	0.8	0.23	15
					3	1.5	0.6	0.30	20
4	1	0.4	0.45	30
					5	0.5	0.2	0.90	60

在表2中的汇总表明，在可以被一单位的全血覆盖的身体表面的多少和用于制备片材12的全血层的初始厚度之间存在线性关系。在本发明的某些示例性实施方案中，内支持层(例如筛网330)和/或外支持层(例如130和/或640)和/或常规的敷料(例如140)对液体血液厚度的减小和/或凝块厚度的减小起作用，它们是与疗效相一致的。

在烧伤治疗的上下文中，较大的覆盖区域的实现可以是关键的。在溃疡治疗的上下文中，大覆盖区域是较不重要的，虽然仍然存在覆盖区域和厚度之间的关系。

概要

预期的是，在本专利的有效期期间，新的抗凝剂和他们的相应的抑制剂以及聚合物塑料将被开发，并且本发明的范围意图事先包括所有这样的新的技术。

如本文所使用的，术语“约”是指？10％。

虽然已经结合本发明的具体的实施方案描述了本发明，但是显然地，许多替代形式、修改和变化形式对本领域的技术人员将是明显的。因此，意图是包含落入所附权利要求的精神和宽范围内的所有这样的替代形式、修改和变化形式。

特别地，已经利用了多种数字指示符。应当理解，这些数字指示符可以基于被并入本发明的多种工程原理、材料、意图的用途和设计而更进一步地变化。此外，被归于本发明的示例性实施方案的并且被作为单一的单元描绘的部件和/或行为可以被分为子单元。相反地，被归于本发明的示例性实施方案的并且被作为子单元/分别的行为描绘的部件和/或行为可以被组合为具有所描述/所描绘的功能的单一的单元/行为。

可选择地或另外地，用于描述方法的特征可以被用于表征创伤敷料、设备或药盒或制品，而用于描述创伤敷料、设备或药盒或制品的特征可以被用于表征方法。

应当进一步理解，上文描述的分别的特征可以所有可能的组合和子组合而组合，以产生本发明的另外的实施方案。上文给出的实例仅为了阐述的目的被提供，并且不意图限制本发明的范围，本发明的范围仅被下文的权利要求限定。特别地，本发明已经在慢性溃疡和/或烧伤治疗的上下文中被描述，但是还可以用于治疗其他类型的皮肤创伤。

在本说明书中提到的所有公布、专利和专利申请都在本文中以其整体以引用方式并入本说明书中，并入的程度如同每个分别的公布、专利和专利申请都被特别地和分别地指示为以引用方式并入本文。此外，在本申请中对任何参考文献的引用或确定都不应当被解释为承认这样的参考文献可作为本发明的现有技术。

如本文所使用的术语“包括”和“具有”和它们的词形变化意指“包括但不一定限于”。

通过对下文的不意图作为限制的实施例的考察，本发明的另外的目的、优点和新颖的特征将对本领域的普通技术人员变得明显。此外，如上文描述的并且如在权利要求部分中要求保护的本发明的多种实施方案和方面在下文的实施例中找到实验上的支持。

实施例

现在参考下文的实施例，这些实施例与上文的描述共同地以非限制性的方式阐述了本发明。

材料和方法

下文的材料和方法用于进行在下文的实施例中描述的实验：

凝结托盘由为了实验的目的裁剪的1cm×12cm×8cm尺寸的一次性塑料饮食服务片材构建。在实际操作中，可以采用其他的尺寸和/或材料。在本发明的某些示例性实施方案中，采用生物相容的和/或可杀菌的塑料聚合物。

Saran rap(聚偏二氯乙烯[PVDC]，由S.C.Johnson&Son.；美国制造)被用于覆盖凝结托盘以减少凝块粘附于托盘的趋向。

外科纱布(24×20目，由M.Feingresh&Co.Ltd制造)被用于作为示例性的内嵌的支持结构。双层的棉纱布被切割为9cm×13cm或更大的，以用于所描述的凝结托盘。

葡萄糖酸钙(B.Braun Melsungen AG；德国)是指10ml安瓿的10％的含有葡萄糖酸钙H₂O 940mg；D-蔗糖酸钙4H₂O 50mg和注射用水。每1mL提供0.23mol Ca++。

高岭土(Imerys Minerals；Australia PTY)被作为粉末使用。

血液使用可商购获得的献血袋从人类志愿者收集，该献血袋包含柠檬酸盐抗凝剂。对于无柠檬酸盐的对照，血液被收集在一次性注射器中。标示体积被放置在杯中并且通过漩涡与如下文提出的抗凝抑制剂混合，然后被立即倾入凝结托盘中。

献血袋是无菌非致热性单次使用的输液组件(MacoPharma；法国)，容纳63ml免疫球蛋白CPDAl(对1L的配方：一水柠檬酸3.27g；二水柠檬酸钠26.3g；二水磷酸一钠2.51g；一水右旋糖酐31.9g；盐酸腺嘌呤0.349g并加水至1000ml[pH 5.6+-0.3；285mmol Na/L])。

实施例1：

促凝剂和抗凝剂对凝块形成的影响

为了鉴定基于柠檬酸盐的抗凝剂和其拮抗剂对凝块形成的影响，测试多种组合。无柠檬酸的全血(托盘2)作为阴性对照。没有拮抗剂的含柠檬酸盐的全血(托盘1)作为阳性对照。在表3中详细示出了托盘3、4、5和6的实验组合。将拮抗剂成分通过漩涡在塑料杯中简单地混合，并且倾倒在被置于内衬有Saran wrap的凝结托盘中的预切割的外科纱布上，至4mm的深度。图10是在凝结托盘中的示例性的凝块的照片1000，其中内嵌的支持结构在葡萄糖酸钙的加入7分钟之后从边缘突出。在该时间点，在托盘3、4、5和6之间没有视觉上可察觉的差异。

表3：实验性的促凝剂/抗凝剂组合

托盘	血液体积(ml)	含柠檬酸盐	葡萄糖酸钙(ml)	高岭土
					1	44	是	无	无
2	44	否	无	无
					3	40	是	4	无
4	40	是	8	无
					5	40	是	4	20mg
6	40	是	8	40mg

在凝块形成之后，将每个凝块借助于其内嵌的支持结构转移至更大角度的托盘。图11是正在被转移的凝块中的一个的照片1100。观察凝块的颜色和质地。表征流出的流体的体积和外观。阴性对照托盘1保持未凝结并且不涉及进一步的操作和/或观察。

图12是在有角度托盘中的代表性的凝块的照片1200。流体渗出液在若干托盘中清楚可见。

在从葡萄糖酸钙(以及高岭土，如果适用的话)被加入至含柠檬酸盐的血液中的时间12分钟之后：

托盘2容纳暗红色的、柔软的并且比最初的4mm液体深度薄的凝块。约10ml-13ml的红色流体渗出液被收集在有角度托盘中并且凝结。

托盘3容纳较浅暗红色且更致密并且比最初的4mm液体深度更厚的凝块。约0.5ml的红色流体渗出并且未凝结。

托盘4相似于托盘3。

托盘5相似于托盘3和4，但是凝块比托盘3和4更致密并且更厚。具有比托盘3和4更小体积的红色流体。

托盘6容纳比在其他的托盘中观察到的更暗、更坚硬并且更厚的凝块。具有比所有其他的托盘少的渗出的红色流体，并且流体的颜色比在其他的托盘中观察到的浅。

在从葡萄糖酸钙(以及高岭土，如果适用的话)被加入至含柠檬酸盐的血液中的时间23分钟之后，将每个凝块借助于其内嵌的支持结构转移至洁净的更大角度的托盘。所有凝块都可容易地从它们的托盘除去并且在转移期间保持它们的形状。

托盘2容纳不坚硬的并且厚度为约2mm或更小的暗红色的凝块。该凝块以约1ml/5分钟的速率继续渗出红色流体。该凝块展示相对于内嵌的支持结构的轴向平移，表明不足的粘附程度。

托盘3、4、5和6的凝块是比托盘2浅的红色并且非常致密并且比最初的4mm液体深度厚。少量的淡红色流体继续渗出。

托盘6容纳在形状保持性、厚度保持、刚性和流体截留方面具有最好的表现的凝块。

在37分钟之后，将每个凝块借助于其内嵌的支持结构转移至秤，以进行称量。托盘3、4、5和6的含柠檬酸盐的凝块的重量比托盘2的阳性对照凝块高约30％。

基于这些观察，8cc葡萄糖酸钙相对于超过4cc葡萄糖酸钙看起来并不改进凝块性质。

任一量的高岭土看起来都改进凝块性质。

在本实验中，新鲜的全血凝块(托盘2)的性质被判断为劣于含柠檬酸盐的凝聚的全血凝块。

在抗凝剂拮抗剂的加入之后约42分钟：

图13是托盘6的凝块的照片1300。将该凝块放置在标准的冻结器中(-20℃)持续5天，取出并且放置在大腿的皮肤上，并且使用医用粘合剂固定在原位，并且使用几层棉覆盖。

图14是托盘3的凝块的照片1400，托盘3的凝块随后被放置在大腿的皮肤上并且通过被胶带保持的几层纱布固定在原位并且通过被另外的胶带保持的几层棉覆盖。

将所有其他的凝块在露天干燥。

对凝结的全血作为创伤敷料材料的初步测试在下文的实施例2和3中描述。

本实施例中呈现的结果表明，内嵌的支持结构在维持凝块的完整性和/或形状中和/或在帮助转移和/或操控中是有用的。

本实施例说明，制备以期望的尺寸和形状用于如上文描述的本发明的多种示例性实施方案的凝结的全血的片材是可行的。

实施例2：

新凝结的血液的片材在创伤敷料的制备中的示例性的用途

为了评价使用凝结的全血的片材作为创伤敷料的部分的可能性，将来自托盘3的凝块放置在大腿的皮肤上(图14)并且使用被胶带固定在原位的几层外科纱布且然后是几层棉所覆盖。

在12小时之后，除去棉。图15是示出了来自凝块的渗出液已经渗透覆盖凝块的外科纱布的照片1500。看上去，渗透入覆盖纱布中的凝块渗出液使这种材料成为凝块层的一部分。

本实施例说明凝结的全血良好地附着于无损伤的皮肤。无损伤的皮肤被用作用于不流血的创伤(例如烧伤和/或溃疡)的模型，因此该结果证实了使用凝结的全血作为用于不流血的创伤的敷料的可行性。可选择地，根据本发明的示例性实施方案的敷料还可以被施用于流血的创伤。

实施例3：

血液凝块施用于无损伤的皮肤表面的效果

在实施例2之后，将凝块手动地从其已经被施用于的无损伤的皮肤表面除去。图16A是示出了附着于皮肤的被干燥的凝块的照片1600。图16B是从皮肤剥离被干燥的凝块的照片1602。图16C是示出了被干燥的凝块从皮肤的除去未导致可察觉的刺激的照片1604。除去是通过剥离并且轻柔地拉动而手动进行的，如在图16C中看到的。

凝块在本阶段是薄的并且完全干燥的。在凝块中观察到以洞的形式的小缺陷。洞看上去相应于内支持结构(纱布)已经被损坏或撕破的地点。

本实施例说明在烧伤治疗的上下文中使用凝结的全血的片材提供了常规方法的替代方案。可选择地，凝结的全血的片材有助于创伤清创的减少。

实施例4：

被冻结的凝结的血液的片材在创伤敷料的制备中的示例性的用途

为了表明凝块可以被预先制备并且储存以便后来用作创伤敷料，将来自托盘6的凝块(图13)冻结储存5天，然后在室温解冻。使用凝块制备如实施例3中的创伤敷料。结果与实施例3中的实质上相同。

本实施例说明血液凝块在它们根据本发明的示例性实施方案用作创伤敷料之前的储存是可行的。

实施例5：

对空气干燥的血液凝块的附加的观察

为了评价在环境条件下储存凝结的全血的可能性，将来自托盘2、4和5的凝块在露天干燥25小时。与用绷带包扎的凝块比较，空气干燥的凝块更厚，虽然它们变为完全干燥的。这些凝块的特点是非常暗的红色且没有缺陷(洞)。这些凝块是无气味的。

实施例5说明将凝结的全血在环境温度储存至少1天是可行的。没有气味表示没有腐烂。不清楚的是，洞的不存在是由操作的减少还是其他因素导致的。

通常空气干燥的凝块比被作为绷带施用的那些(实施例3和4)更厚并且保持更多的血液成分。

实施例6：

对人类受试者中的实际的创伤的治疗

为了证实凝结的全血可以被有效地用作创伤敷料，征集具有多种类型的实际创伤的人类受试者并且使用基本上如上文所述制备的敷料治疗。

在2009年6月至2009年12月之间，对送往Shoham老年医学医疗中心(ShohamGeriatric Medical Center)(Pardes-Hanna；以色列)的缓和医疗部和护理部的连续的患者筛选以进行征集。所有潜在的受试者对它们的创伤已经接受了使用先前被接受的护理治疗标准的治疗。本研究被机构审查委员会(Institution review board)批准。来自6位患者(2位男性和4位女性)的具有病原学阶段2-3的总数为7个的创伤根据本发明的示例性实施方案被凝结的全血敷料包扎。在加入本研究中之前，受试者或他们的法定监护人签署知情同意书。征集标准是年龄18-100岁，创伤阶段2-3和知情同意。排除标准是大于8cm乘8cm的创伤、癌症的创伤、不能提供每周30cc血液以及由在过去2周内的血液培养确定而被证实的脓血症。所有正在进行的对创伤的局部的护理治疗都在根据本发明的示例性实施方案开始治疗之前被停止。创伤特征在表4中汇总。分型分期是根据之前公布的标准(NPUAPpressure ulcer staging(NPUAP压迫性溃疡分期)2007,[npuap.org]；.Prevention andtreatment of skin tears(皮肤撕裂的预防和治疗)K.Leblanc等人，Wound Care Canada，第6卷，第1号，2008)。

表4：创伤特征

创伤	年龄/性别	类型/病原学	部位	尺寸cm2	阶段
						1	93/女性	撕裂创伤	左小腿	28.1	3
2	88/女性	静脉曲张性溃疡和瘘	右足背部	3.12	NA
						3	88/女性	静脉曲张性溃疡	左上足部	1.6	NA
4	48/女性	压迫性溃疡	右踵	3.61	3
						5	32/男性	切断指尖	中指	0.89	3
6	90/男性	压迫性溃疡	左踵	4.7	3
						7	65/女性	外伤创伤	右胫骨	2.8	2

使用根据本发明的示例性实施方案的药盒制备基于凝结的全血的敷料。示例性的药盒容纳3种尺寸的无菌单次使用凝结托盘，即小的(14.5cm²)、中等的(26.4cm²)和大的(64cm²)。每个凝结托盘装配有穿过托盘的底部伸展的医疗棉纱布。如上文解释的，纱布在凝块形成时变为内嵌在凝块中。可选择地，纱布有助于敷料的强度和/或简化敷料向创伤的转移和/或使修整成型更容易。

对于每次创伤治疗来说，创伤尺寸通过测量在创伤边缘上的两个点之间的最大长度来测定。根据所测定的尺寸，选择合适的托盘(例如由护士选择)。凝结托盘被选择为大于创伤，以确保凝结的全血敷料将覆盖整个创伤区域并且超出围绕创伤的无损伤的皮肤的至少0.5cm。对CPDAl、全血和活化凝聚的钙和高岭土混合物的量的具体的指导作为对于三种尺寸(小的、中等的和大的)中的每一种的凝结托盘的药盒的一部分而提供。示例性的量是CPDAl(1.5ml、2ml和4ml)、待抽取的全血的量(10ml、13ml和30ml)以及凝聚活化剂钙和高岭土混合物的量(2ml、2.5ml和5ml)。

可选择地，根据已接受的程序，例如使用无菌盐水洗涤和/或清创(取决于创伤类型和/或阶段)，进行创伤床的准备用于包扎。患者和创伤的目前的和以前的临床状态被记录，并且创伤在将单次使用的直尺保持为紧邻创伤边缘时被拍照，作为监测治疗进展的手段。

注射器(20ml或50ml注射器，根据所选择的托盘)被合适的量的CPDAl填充并且被用于从患者抽取静脉血。血液抽取和操控根据医院预防指南进行。

同时，将5ml葡萄糖酸钙(B.Braun，德国)在无菌小瓶中与35mg的无菌高岭土白色粉末(Merck)混合。使用容纳血液/抗凝剂混合物的注射器从小瓶抽取期望的量(如上文描述的)的活化凝聚的混合物。温和地混合注射器的内容物10秒，以诱导凝聚。

此时，将凝聚血液转移入预选择的凝结托盘中，并且将托盘放置在平坦的水平表面上。然后，护士等待(例如约10分钟)包含凝结的全血的片材的敷料形成。在此阶段，凝结托盘被使用无菌的手套打开并且基于凝结的全血的敷料被转移至创伤，放置在创伤上，使得内嵌的垫面向上。然后，通过使用非粘合性垫、然后使用纱布覆盖根据本发明的示例性实施方案的敷料而将该敷料附于创伤，并且然后通过弹性绷带或通过使用Band Aid^TM(Johnson&Johnson，萨默维尔，新泽西州)包裹敷料。

在初始的治疗之后，实施包括两个类型的出诊的跟踪程序。在第一“监测”类型的出诊中，不将示例性的基于全血凝块的敷料从创伤除去。在第二“再施用”出诊中，除去示例性的基于全血凝块的敷料，并且如上文描述制造和应用新的基于全血凝块的敷料。

监测出诊每2天进行一次。在这些过程中，不除去根据本发明的示例性实施方案的敷料，而是仅除去在凝块上方的纱布垫。出诊包括对根据本发明的示例性实施方案的敷料的暴露表面的目视检查，以记录凝块向创伤的附着；对创伤外周的目视检查，以检查不良事件；以及嗅觉检查，以监测可能的感染。

有规律的再施用出诊被排定为每6至8天一次，取决于工作人员可用性。敷料更换被预先排定，以记录下部的创伤愈合过程。在两个被治疗的外伤创伤中，将凝结的全血敷料保留在创伤上，直到其自然地掉落。这些创伤不是慢性溃疡。再施用出诊包括记录、拍照(对现有的敷料和正在被治疗的创伤)以及根据本发明的示例性实施方案的基于凝结的全血的敷料的除去和更换。再施用出诊还包括根据标准程序使用纱布和盐水来准备创伤床。

在本研究中，治疗持续，直到创伤的完全的愈合，或直到创伤在没有另外的侵入性程序的情况下就不能够进一步改善的临床确定，所述另外的侵入性程序例如对瘘的手术，一种不在老年医学中心中进行的程序。

所有药盒部件和材料都作为具有规则的和预测量的材料的无菌单次使用物品被供应。整个药盒是一次性的并且根据医院规章被丢弃。在研究的自始至终，进行测量以防止凝块变得潮湿(例如使用诸如CLING-FILM^TM或SARAN WRAP^TM的塑料包裹来包裹四肢并且特别地使用专用的防水性胶粘剂垫在沐浴期间保护创伤)。

在愈合过程期间，使用数字照相机(Cannon Power Shot A590)，使用闪光灯，以距创伤50cm的被限定的距离，面向创伤的前部，对创伤拍照。在每个照片中，一次性的参考标尺被置于紧邻创伤边缘。标尺包括日期、患者号和创伤研究号，如被研究人员填写的。

使用NIH图像分析软件“ImageJ”(National Institute of Health，贝塞斯达，马里兰州，美国)分析创伤图片，该软件在http://rsb.info.nih.gov/ij/download.html可供下载。该软件是不受版权限制的。根据本发明的其他的示例性实施方案，采用商业图像分析软件产品代替Image J。

在这种情况下，图像分析包括：

a.测量在图片参考标尺中存在的10mm中的像素的数量。

b.描绘创伤边缘并且记录图像的自动像素面积输出。

c.重复步骤b三次。

d.计算3个分别的描绘的平均像素面积。

e.通过所测量的每10mm的像素将像素面积转换为mm²面积。

f.记录对于照相的具体日期的患者CRF的最终结果。

可选择地，其他的图像分析策略可以代替本策略。

表5示出了使用根据本发明的示例性实施方案的凝结的全血敷料包扎创伤的临床结果。七个创伤中的五个全部愈合并且其余的两个大于80％愈合。七个创伤中的五个在使用根据本发明的示例性实施方案的敷料的治疗开始时中度地至重度地渗出。在所有渗出的创伤中，渗出液的通过基于凝结的全血的敷料的抽取和其向覆盖垫中的吸收率被记录。这表明根据本发明的示例性实施方案的敷料不是闭塞的。平均地，每8.8天进行一次敷料施用。下文提出了多种情况。

图18图示了在治疗之前(图18A)和在治疗之后(图18B)的血管创伤的情况，其中血管创伤被诊断为具有紧邻需要外科手术的主创伤的1cm的渗出的瘘。照片表明，主创伤显示出完全的和良好的愈合，而渗出的瘘未完全地愈合，虽然其被相同的根据本发明的示例性实施方案的敷料覆盖相同的时间。因此包括瘘的总创伤被计算为仅80％愈合。

图19图示了在治疗之前(图19A)的在左上足上的静脉曲张性溃疡的情况，其通过使用根据本发明的示例性实施方案的敷料的11天的治疗被完全地治愈(图19B)。

图20A描绘了压迫性溃疡，其中治疗在82％闭合之后被停止(图20B)，这是由于在创伤不被根据本发明的示例性实施方案的敷料包扎时由在创伤上的反复出现的定向压力导致的创伤的再打开。

两个外伤创伤，即在一位93岁妇女的左胫骨裂伤(撕裂创伤)(图17A治疗前)和在一位34岁男性中的右手中指指尖切断(图21A治疗前)的情况，具有根据本发明的示例性实施方案的敷料的单一的施用，其持续21天(裂伤)和19天(切断)，直到敷料掉落，不需要进一步的包扎而实现愈合(分别见图17B和21B)。

在患有糖尿病的患者中的溃疡有两种情况，一个是在左踵上的压迫性溃疡(图22A治疗前)以及另一个是在右胫骨上的外伤创伤(图23A)，在糖尿病患者中的溃疡的愈合相似于在非糖尿病患者中的愈合(分别见图22B和23B)。

表5：治疗结果

创伤	尺寸(cm2)治疗前	尺寸(cm2)治疗后	天数(施用)*	附图
					1	28.1	0	21(1)	17
2	3.12	0.71	61(7)	18
					3	1.09	0	11(1)	19
4	3.61	0.64	36(5)	20
					5	0.89	0	19(1)	21
6	4.7	0	49(7)	22
					7	2.8	0	7(1)	23

*使用凝结的全血敷料包扎的天数(敷料施用的数量)

在本实施例中示出的结果清楚地表明，护理提供者可以有效地和安全地制备根据本发明的示例性实施方案的凝结的全血敷料，可选择地所述制备是从在护理点提供的并且容纳与敷料的制备相关联的预测量的部件和/或工具的药盒。

可选择地或另外地，在本实施例中示出的结果清楚地表明，使用包含自体的血液凝块的敷料包扎创伤对于在多种病原学的慢性创伤中的使用来说是安全的。在研究期间未观察到创伤愈合的延迟并且未观察到不良事件(例如脓血症和/或炎症)。在表5中汇总的结果表明，根据本发明的示例性实施方案的敷料相对于之前可用的护理敷料的标准实际上加速了创伤愈合。

可选择地或另外地，在本实施例中示出的结果清楚地表明，对于用根据本发明的示例性实施方案的凝结的全血敷料治疗的7个创伤来说，该敷料促进了愈合。

Claims (13)

1.一种制备用于施用于需要其的受试者的皮肤的区域的创伤敷料的方法，所述方法包括：

(a)提供包含抗凝剂的一定体积的血液；

(b)向所述一定体积的血液中添加抗-抗凝剂；并且

(c)允许将所述一定体积的血液在活体外凝结在支持结构上，从而获得包含凝结的血液的创伤敷料，所述凝结的血液至少部分地内嵌在所述支持结构中。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述血液是全血。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述支持结构是纱布。

4.如权利要求1或2所述的方法，其中所述抗-抗凝剂是高岭土。

5.如权利要求1或2所述的方法，其中所述支持结构是在托盘、板上或在贮器中并且所述创伤敷料在所述托盘、板上或在所述贮器中形成。

6.如权利要求1所述的方法，包括切割所述创伤敷料的一部分至适合于包扎创伤的尺寸。

7.一种用于制备施用于需要其的受试者的皮肤的区域的创伤敷料的药盒，所述药盒包括：

(a)抗凝剂；

(b)抗-抗凝剂；以及

(c)所述抗凝剂和所述抗-抗凝剂的使用说明书，以及用于将所述创伤敷料施用于需要其的受试者的皮肤的区域的说明书，所述抗凝剂和所述抗-抗凝剂用于制备包含凝结的血液和支持结构的创伤敷料。

8.如权利要求7所述的药盒，包括所述支持结构。

9.如权利要求7或8所述的药盒，包括以下中的一个或多个:

a.血液抽取装置；

b.血液收集贮器；以及

c.在其上形成所述创伤敷料的托盘、板或贮器。

10.如权利要求7或8所述的药盒，其中所述抗-抗凝剂是高岭土。

11.如权利要求7或8所述的药盒，其中所述支持结构是纱布。

12.如权利要求7或8所述的药盒，其中所述说明书包括：向一定体积的血液中添加所述抗-抗凝剂，并且允许将所述一定体积的血液凝结在支持结构上，从而获得包含所述凝结的血液的创伤敷料，所述凝结的血液至少部分地内嵌在所述支持结构中。

13.一种生物敷料的储库，所述储库包括：

(a)多个无菌创伤敷料，所述多个无菌创伤敷料根据权利要求1至6中任一项的方法制备；以及

(b)所述创伤敷料中的每个的交叉相容性信息。