CN107823113A - 一种含艾叶干细胞提取物的祛斑护肤品及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种祛斑护肤品,按重量份计,包含如下成分:艾叶干细胞提取物0.1~3份、党参提取物2~20份、蒲公英提取物10~100份和枸杞提取物5~50份;还包含如下成分:透明质酸钠10~60份、甘油30~70份、精油10~50份、丁二醇30~90份和去离子水1000~5000份。本发明提供的祛斑护肤品含有艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物,该四种天然提取物的搭配使用可起到互相调和以及祛斑的协同增效作用。本发明提供的祛斑护肤品还含有透明质酸钠、甘油和丁二醇等辅料,能够对皮肤起到保湿作用,提升皮肤光泽,并对护肤品祛斑功效的发挥具有辅助作用。本发明的祛斑护肤品对皮肤温和、无刺激、无副作用。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品领域,尤其涉及一种含艾叶干细胞提取物的祛斑护肤品及其制备方法。
背景技术
黄褐斑也称为肝斑和蝴蝶斑,为淡褐色或者黄褐色斑,边界较清晰,形状不规则,对称分布于眼眶附近、额部、眉弓、鼻部、两颊、唇及口周等处无自觉症状及全身不适,属于面部黑变病的一种症状,是发生在颜面的色素沉着斑。内分泌失调,遗传因素,紫外线辐射,化妆品应用不当,女性特殊生理期(经期、孕期)及精神压力等因素,使人体肌肤抗氧化能力明显下降,黑色素沉淀,肌肤变得暗黄粗糙、缺乏生机,继而产生黄褐斑,严重影响外在形象。
目前市场上用于祛斑的护肤品很多,但是见效的祛斑产品大多含有重金属,这类产品用于祛斑见效快,但是有副作用,会对人体健康造成危害,也会使人的皮肤二次受损,不能满足人们需求。
发明内容
本发明的目的是针对上述现有技术的缺点,提供一种含艾叶干细胞提取物的祛斑护肤品及其制备方法。
为达到其目的,本发明所采用的技术方案为:一种祛斑护肤品,按重量份计,包含如下成分:艾叶干细胞提取物0.1~3份、党参提取物2~20份、蒲公英提取物10~100份和枸杞提取物5~50份。
艾叶(拉丁学名:Artemisia argyi Levl.et Van.var.argyi c)为菊科植物,别名艾蒿、艾草等。艾叶富含维生素A、B、C和钙、铁元素,可保持皮肤水润并促进肌肤再生。艾叶还富含挥发油等活性成分,具有理气血、逐湿寒等功效,常被用于针灸。而且艾叶还具有抗过敏作用,可防止敏感性肌肤发生皮肤过敏。艾叶提取物可促进脸部血管的循环、疏通脸部经络,让淤积在脸部的黑色素通过血液循环逐渐排出体外,具有祛斑的作用。艾叶干细胞中所含有的活性成分较艾叶植株丰富,且艾叶干细胞还含有细胞生长所需的其它营养物质,且能被皮肤细胞迅速吸收。目前,还没见到将艾叶干细胞应用到化妆品中的报道,所以本发明首次从艾叶复原组织中提取分离较高生理活性的植物干细胞,并进行大规模生产,将其应用到化妆品中。
党参提取物提取于桔梗科植物党参(Codonopsis pilosula(Franch.)Nannf.)的根,本发明采用的党参提取物由湖北远成药业有限公司提供。党参提取物主要含有萜类、甾醇类、酚酸类、黄酮类等物质,具有免疫调节、抗氧化、细胞增殖及降脂等作用。
蒲公英提取物的提取来源为菊科植物蒲公英(Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.)植物的干燥全草,本发明采用的蒲公英提取物由西安金绿生物工程技术有限公司提供。蒲公英提取物含有生物类黄酮,具有较好的抗氧化性,能催化有害自由基,蒲公英提取物还含有维生素,具有美白和淡斑效果。
枸杞提取物的提取来源为茄科枸杞属枸杞子(Lycium chinense)的果实,本发明采用的枸杞提取物由西安赛奥生物技术有限公司提供。枸杞提取物富含丰富亚油酸、亚麻酸、油酸、维生素E、胡萝卜素等生物活性物质,具有增白、滋润、护肤、减少色素等作用。
通过实验验证,本发明将艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物搭配使用,使护肤品的祛斑功效得到显著提升。
优选地,所述的祛斑护肤品,按重量份计,还包含如下成分:透明质酸钠10~60份、甘油30~70份、精油10~50份、丁二醇30~90份和去离子水1000~5000份。
优选地,所述的祛斑护肤品,按重量份计,由如下成分组成:艾叶干细胞提取物0.1~3份、党参提取物2~20份、蒲公英提取物10~100份、枸杞提取物5~50份、透明质酸钠10~60份、甘油30~70份、精油10~50份、丁二醇30~90份和去离子水1000~5000份。
优选地,所述的祛斑护肤品,按重量份计,由如下成分组成:艾叶干细胞提取物1~3份、党参提取物8~20份、蒲公英提取物50~100份、枸杞提取物20~50份、透明质酸钠30~60份、甘油50~70份、精油20~50份、丁二醇50~90份和去离子水2500~5000份。
优选地,所述的祛斑护肤品,按重量份计,由如下成分组成:艾叶干细胞提取物1~3份、党参提取物10~20份、蒲公英提取物80~100份、枸杞提取物30~50份、透明质酸钠40~60份、甘油50~70份、精油30~50份、丁二醇60~90份和去离子水3000~5000份。
优选地,所述的祛斑护肤品,按重量份计,由如下成分组成:艾叶干细胞提取物3份、党参提取物15份、蒲公英提取物90、枸杞提取物40份、透明质酸钠50份、甘油60份、精油40份、丁二醇80份和去离子水4000份。
本发明所述的祛斑护肤品的制备方法为:将透明质酸钠溶于60~70℃的去离子水中,然后加入丁二醇、甘油搅拌均匀,形成基础混合物;然后将精油、艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物在35~45℃时加入基础混合物中,搅拌均匀,冷却至室温,即得所述祛斑护肤品。
在不碍于本发明祛斑护肤品所期望的功能的前提下,含有本发明祛斑护肤品的化妆品剂型还可以含有其它不同的已知和常规的化妆品辅助原料,这些化妆品辅助原料可在《已使用化妆品原料名称目录》找到,在此不做详述。
一种艾叶干细胞提取物的制备方法,包括如下步骤:
①取艾叶无菌苗含有静止中心的根组织,去掉根冠,从切口开始截取1mm长作为外植体;
②将外植体放入诱导培养基中培养,静止中心干细胞与其他根部组织细胞分离,获得静止中心干细胞;
③将所述静止中心干细胞转移到生长培养基,摇床培养获得单细胞;
④将所述单细胞接种于生长培养基进行扩大培养,获得艾叶干细胞;
⑤将所述艾叶干细胞冷冻、粉碎,即得艾叶干细胞提取物;
所述诱导培养基为含有NAA、BA和水解酪蛋白的MS固体培养基;
所述生长培养基为含有2,4-D、BA、水解酪蛋白和活性炭的MS液体培养基。
优选地,所述诱导培养基中,NAA的浓度为0.5mg/L、BA的浓度为2.0mg/L、水解酪蛋白的浓度为1.0mg/L。
优选地,所述诱导培养基的pH值为6.0。
优选地,本发明的诱导培养为暗培养,温度为25℃,时间为30天。
优选地,所述生长培养基中,2,4-D的浓度为2.0mg/L、BA的浓度为1.0mg/L、水解酪蛋白的浓度为1.0mg/L、活性炭的浓度为1.0mg/L。
优选地,所述生长培养基的pH值为6.0。
优选地,所述摇床培养的具体操作为:每小时用20W的白炽灯照射8min,摇床培养的温度为25℃;转速为150r/min;时间为10天。培养后用100目的不锈钢筛网过滤,除去细胞团和残渣,得到单细胞悬液。
优选地,所述扩大培养的具体操作为:将单细胞悬液转移至20L的生物反应器中进行大规模培养,生物反应器中添加5L生长培养基,培养7天后添加新鲜的生长培养基继续培养7天,获得艾叶干细胞。
优选地,将所述艾叶干细胞制成所述艾叶干细胞提取物的具体操作为:将获得的艾叶干细胞悬液用1um的过滤器过滤,滤掉培养基,收获截留的艾叶干细胞,并将艾叶干细胞放入-100℃超低温速冻2h,取出解冻40min,然后再放入-100℃超低温速冻,依次3次,最后一次解冻后将艾叶干细胞放入低温冷冻真空干燥机内进行真空冷冻干燥,然后高速粉碎成60目的冻干粉。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:本发明提供的祛斑护肤品含有艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物,该四种天然提取物的搭配使用可起到互相调和以及祛斑的协同增效作用。本发明提供的祛斑护肤品还含有透明质酸钠、甘油和丁二醇等辅料,能够对皮肤起到保湿作用,提升皮肤光泽,并对护肤品祛斑功效的发挥具有辅助作用。本发明的祛斑护肤品对皮肤温和、无刺激、无副作用。
具体实施方式
为更清楚地表述本发明的技术方案,下面结合具体实施例进一步说明,但不能用于限制本发明,此仅是本发明的部分实施例而已。
实施例1
本实施例1提供一种艾叶干细胞提取物的制备方法,其包括如下步骤:
①取艾叶无菌苗含有静止中心的根组织,去掉根冠,从切口开始截取1mm长作为外植体;
②将外植体放入pH6.0的诱导培养基中,在25℃下进行暗培养30天,静止中心干细胞与其他根部组织细胞分离,获得静止中心干细胞;所述诱导培养基为含有NAA、BA和水解酪蛋白的MS固体培养基;其中,NAA的浓度为0.5mg/L、BA的浓度为2.0mg/L、水解酪蛋白的浓度为1.0mg/L;
③将所述静止中心干细胞转移到pH6.0的生长培养基,在25℃下,摇床培养10天后用100目的不锈钢筛网过滤,除去细胞团和残渣,得到单细胞悬液;摇床培养期间,每小时用20W的白炽灯照射8min,摇床培养的转速为150r/min;所述生长培养基为含有2,4-D、BA、水解酪蛋白和活性炭的MS液体培养基;其中,2,4-D的浓度为2.0mg/L、BA的浓度为1.0mg/L、水解酪蛋白的浓度为1.0mg/L、活性炭的浓度为1.0mg/L;
④将单细胞悬液转移至20L的生物反应器中进行大规模培养,生物反应器中添加5L生长培养基,培养7天后添加新鲜的生长培养基继续培养7天,获得艾叶干细胞悬液;所述生长培养基与上述生长培养基的浓度和成分相同;
⑤将获得的艾叶干细胞悬液用1um的过滤器过滤,滤掉培养基,收获截留的艾叶干细胞,并将艾叶干细胞放入-100℃超低温速冻2h,取出解冻40min,然后再放入-100℃超低温速冻,依次3次,最后一次解冻后将艾叶干细胞放入低温冷冻真空干燥机内进行真空冷冻干燥,然后高速粉碎成60目的冻干粉。
实施例2
一种祛斑护肤品,按重量份计,其由如下成分组成:艾叶干细胞提取物0.3g、党参提取物1.5g、蒲公英提取物9g、枸杞提取物4g、透明质酸钠5g、甘油6g、精油4g、丁二醇8g和去离子水400g。
该祛斑护肤品的制备方法为:将透明质酸钠溶于65℃的去离子水中,然后加入丁二醇、甘油搅拌均匀,形成基础混合物;然后将精油、艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物在40℃时加入基础混合物中,搅拌均匀,冷却至室温即可。
实施例3
一种祛斑护肤品,按重量份计,其由如下成分组成:艾叶干细胞提取物0.2g、党参提取物2g、蒲公英提取物10g、枸杞提取物5g、透明质酸钠6g、甘油7g、精油5g、丁二醇9g和去离子水500g。
该祛斑护肤品的制备方法为:将透明质酸钠溶于70℃的去离子水中,然后加入丁二醇、甘油搅拌均匀,形成基础混合物;然后将精油、艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物在45℃时加入基础混合物中,搅拌均匀,冷却至室温即可。
实施例4
一种祛斑护肤品,按重量份计,其由如下成分组成:艾叶干细胞提取物0.1g、党参提取物1g、蒲公英提取物8g、枸杞提取物3g、透明质酸钠4g、甘油5g、精油3g、丁二醇6g和去离子水300g。
该祛斑护肤品的制备方法为:将透明质酸钠溶于65℃的去离子水中,然后加入丁二醇、甘油搅拌均匀,形成基础混合物;然后将精油、艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物在40℃时加入基础混合物中,搅拌均匀,冷却至室温即可。
实施例5
一种祛斑护肤品,按重量份计,其由如下成分组成:艾叶干细胞提取物0.1g、党参提取物0.8g、蒲公英提取物5g、枸杞提取物2g、透明质酸钠3g、甘油5g、精油2g、丁二醇5g和去离子水250g。
该祛斑护肤品的制备方法为:将透明质酸钠溶于62℃的去离子水中,然后加入丁二醇、甘油搅拌均匀,形成基础混合物;然后将精油、艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物在38℃时加入基础混合物中,搅拌均匀,冷却至室温即可。
实施例6
一种祛斑护肤品,按重量份计,其由如下成分组成:艾叶干细胞提取物0.05g、党参提取物0.5g、蒲公英提取物3g、枸杞提取物1g、透明质酸钠2g、甘油4g、精油1.5g、丁二醇4g和去离子水200g。
该祛斑护肤品的制备方法为:将透明质酸钠溶于60℃的去离子水中,然后加入丁二醇、甘油搅拌均匀,形成基础混合物;然后将精油、艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物在35℃时加入基础混合物中,搅拌均匀,冷却至室温即可。
实施例7
一种祛斑护肤品,按重量份计,其由如下成分组成:艾叶干细胞提取物0.01g、党参提取物0.2g、蒲公英提取物1g、枸杞提取物0.5g、透明质酸钠1g、甘油3g、精油1g、丁二醇3g和去离子水100g。
该祛斑护肤品的制备方法为:将透明质酸钠溶于60℃的去离子水中,然后加入丁二醇、甘油搅拌均匀,形成基础混合物;然后将精油、艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物在35℃时加入基础混合物中,搅拌均匀,冷却至室温即可。
对比例1
一种护肤品,按重量份计,其由如下成分组成:艾叶干细胞提取物0.3g、党参提取物2g、透明质酸钠5g、甘油6g、精油4g、丁二醇8g和去离子水300g。
该护肤品的制备方法为:将透明质酸钠溶于65℃的去离子水中,然后加入丁二醇、甘油搅拌均匀,形成基础混合物;然后将精油、艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物在40℃时加入基础混合物中,搅拌均匀,冷却至室温即可。
对比例2
一种护肤品,按重量份计,其由如下成分组成:蒲公英提取物10g、枸杞提取物5g、透明质酸钠5g、甘油6g、精油4g、丁二醇8g和去离子水350g。
该护肤品的制备方法为:将透明质酸钠溶于65℃的去离子水中,然后加入丁二醇、甘油搅拌均匀,形成基础混合物;然后将精油、艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物在40℃时加入基础混合物中,搅拌均匀,冷却至室温即可。
实验例
以实施例2~7制备的祛斑护肤品和对比例1~2制备的护肤品作为样品,分别进行下述的实验检测。
一、皮肤刺激性实验
随机抽选80名自愿受试者,均分成8组,其中6组分别试用实施例2~7制备的祛斑护肤品,剩下2组试用对比例1~2制备的护肤品。
试验方法:将样品涂敷于自愿受试者的手臂内侧皮肤,观察30min,再用清水洗净。经观察,所有自愿受试者的涂敷样品的皮肤均未见红肿,无皮疹,无水痘出现,也未发生瘙痒感。说明实施例2~7制备的祛斑护肤品和对比例1~2制备的护肤品对皮肤无刺激性,进一步说明本发明的祛斑护肤品对皮肤温和无刺激。
二、酪氨酸酶抑制性能实验
测试仪器与试剂
主要仪器:分光光度计SpectronicGENESYS-5,美国Thermo公司;
主要试剂:酪氨酸酶(美国sigma公司),其他试剂为常规试剂。
测试方法:将实施例2~7制备的祛斑护肤品和对比例1~2制备的护肤品分别配置成6%的样品液;在各试管中分别加入磷酸缓冲液(pH6.8,0.1mol/L)、样品液、酪氨酸溶液。置于37℃水浴中10min,然后加入酪氨酸酶,再于37℃水浴中反应10min,然后在475nm测吸光度值A,每个样液测量3次,求其平均值。
实验体系设计见表1,D1为空白对照,D2用于空白调零,E1为样品管,E2用于样品调零。样品分别为:实施例2、实施例3、实施例4、实施例5、实施例6、实施例7、对比例1和对比例2。
酪氨酸酶抑制率=(A空白对照-A样品)/A空白对照×100%
表1 酪氨酸酶抑制实验体系加样表
试剂 | D1/mL | D2/mL | E1/mL | E2/mL |
PBS | 2 | 2.5 | 1 | 1.5 |
样品 | 0 | 0 | 1 | 1 |
L-酪氨酸 | 1 | 1 | 1 | 1 |
酪氨酸酶溶液 | 0.5 | 0 | 0.5 | 0 |
测试结果见表2:
表2 酪氨酸酶抑制率测定结果
样品 | 酪氨酸酶抑制率(%) |
实施例2 | 94.6 |
实施例3 | 94.2 |
实施例4 | 90.3 |
实施例5 | 87.1 |
实施例6 | 80.5 |
实施例7 | 75.4 |
对比例1 | 40.9 |
对比例2 | 41.5 |
从表2的结果可看出,实施例2~7制备的祛斑护肤品对酪氨酸酶的抑制效果明显优于对比例1~2制备的护肤品,说明本发明的祛斑护肤品可有效抑制皮肤黑色素的形成,进一步说明:艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物四者的搭配使用,在美白皮肤方面具有协同增效作用。
三、祛斑功效实验
1、临床病例240例,其中轻、中、重度各80例(轻度:色斑为淡褐色,占面部面积30%以上;中度:色斑为黄褐色,占面部面积50%以下,或淡褐色占面部面积30~50%;重度:色斑为黑褐色、淡褐色或黄褐色占面部面积50%以上)。
2、使用方法:早晚清洁面部后,取适量样品均匀涂抹于面部,轻轻拍打吸收;斑印处可加量使用,并轻轻按摩3~5分钟,让肌肤充分吸收;晚上临睡前使用效果尤佳。
3、疗效标准:
(1)基本治愈
①肉眼视色斑面积消退大于90%,颜色基本消失,1米距离肉眼看不见明显的斑点;
②评分法计算治疗后下降指数大于等于0.8;
③色素沉着区域皮肤图像测量疗效评定单位ID值大于等于55。
(2)显效
①肉眼视色斑面积消退大于60%,颜色明显变淡;
②评分法计算治疗后下降指数大于等于0.5;
③色素沉着区域皮肤图像测量疗效评定单位ID值大于等于15。
(3)好转
①肉眼视色斑面积消退大于30%,颜色变淡;
②评分法计算治疗后下降指数大于等于0.3;
③色素沉着区域皮肤图像测量疗效评定单位ID值大于等于5。
(4)无效
①肉眼视色斑面积消退小于30%,颜色变化不明显;
②评分法计算治疗后下降指数大于等于0;
③色素沉着区域皮肤图像测量疗效评定单位ID值大于等于l。
Tips--评分法下降指数计算方法:
下降指数=(治疗前总积分一治疗后总积分)/治疗前总积分实验结果详见表3:
表3
表3的实验结果表明,实施例2总有效率为100%,实施例3总有效率为100%,实施例4总有效率为100%,实施例5总有效率为100%,实施例6总有效率为97%,实施例7总有效率为87%,对比例1总有效率为37%,对比例2总有效率为43%。由此可见,实施例2~7的祛斑护肤品的祛斑功效都明显优于对比例1和对比例2的护肤品,说明艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物四者的搭配使用,在祛斑方面具有协同增效作用。
综上,通过上述实验验证,本发明将艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物搭配使用,显著地提升了护肤品的祛斑效果。本发明的祛斑护肤品具有显著的祛斑功效,且对皮肤温和无刺激。
最后应当说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其限制。尽管参照上述实施例对本发明进行了详细的说明,所属领域的普通技术人员应当理解:依然可以对本发明的具体实施方式进行修改或者等同替换,而未脱离本发明精神和范围的任何修改或者等同替换,其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (10)
1.一种祛斑护肤品,其特征在于,按重量份计,包含如下成分:艾叶干细胞提取物0.1~3份、党参提取物2~20份、蒲公英提取物10~100份和枸杞提取物5~50份。
2.如权利要求1所述的祛斑护肤品,其特征在于,按重量份计,还包含如下成分:透明质酸钠10~60份、甘油30~70份、精油10~50份、丁二醇30~90份和去离子水1000~5000份。
3.如权利要求1或2所述的祛斑护肤品,其特征在于,按重量份计,由如下成分组成:艾叶干细胞提取物0.1~3份、党参提取物2~20份、蒲公英提取物10~100份、枸杞提取物5~50份、透明质酸钠10~60份、甘油30~70份、精油10~50份、丁二醇30~90份和去离子水1000~5000份。
4.如权利要求3所述的祛斑护肤品,其特征在于,按重量份计,由如下成分组成:艾叶干细胞提取物1~3份、党参提取物8~20份、蒲公英提取物50~100份、枸杞提取物20~50份、透明质酸钠30~60份、甘油50~70份、精油20~50份、丁二醇50~90份和去离子水2500~5000份。
5.如权利要求4所述的祛斑护肤品,其特征在于,按重量份计,由如下成分组成:艾叶干细胞提取物1~3份、党参提取物10~20份、蒲公英提取物80~100份、枸杞提取物30~50份、透明质酸钠40~60份、甘油50~70份、精油30~50份、丁二醇60~90份和去离子水3000~5000份。
6.如权利要求5所述的祛斑护肤品,其特征在于,按重量份计,由如下成分组成:艾叶干细胞提取物3份、党参提取物15份、蒲公英提取物90、枸杞提取物40份、透明质酸钠50份、甘油60份、精油40份、丁二醇80份和去离子水4000份。
7.一种祛斑护肤品的制备方法,其特征在于,将透明质酸钠溶于60~70℃的去离子水中,然后加入丁二醇、甘油搅拌均匀,形成基础混合物;然后将精油、艾叶干细胞提取物、党参提取物、蒲公英提取物和枸杞提取物在35~45℃时加入基础混合物中,搅拌均匀,冷却至室温,即得所述祛斑护肤品。
8.一种艾叶干细胞提取物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
①取艾叶无菌苗含有静止中心的根组织,去掉根冠,从切口开始截取1mm长作为外植体;
②将外植体放入诱导培养基中培养,静止中心干细胞与其他根部组织细胞分离,获得静止中心干细胞;
③将所述静止中心干细胞转移到生长培养基,摇床培养获得单细胞;
④将所述单细胞接种于生长培养基中进行扩大培养,获得艾叶干细胞;
⑤将艾叶干细胞冷冻、粉碎,即得艾叶干细胞提取物;
所述诱导培养基为含有NAA、BA和水解酪蛋白的MS固体培养基;
所述生长培养基为含有2,4-D、BA、水解酪蛋白和活性炭的MS液体培养基。
9.如权利要求8所述的制备方法,其特征在于,所述诱导培养基中,NAA的浓度为0.5mg/L、BA的浓度为2.0mg/L、水解酪蛋白的浓度为1.0mg/L。
10.如权利要求8所述的制备方法,其特征在于,所述生长培养基中,2,4-D的浓度为2.0mg/L、BA的浓度为1.0mg/L、水解酪蛋白的浓度为1.0mg/L、活性炭的浓度为1.0mg/L。
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