CN107722077A - 一类二氢卟吩半乳糖苷类化合物及其制备方法与应用 - Google Patents

一类二氢卟吩半乳糖苷类化合物及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一类二氢卟吩半乳糖苷类化合物及其制备方法与应用，属于化学医药技术领域。本发明所述的二氢卟吩半乳糖苷类化合物，通过选择性的与半乳凝素结合，提高了光、声敏剂对肿瘤细胞的靶向作用。体外抗肿瘤活性评价显示，同作为对照的二氢卟吩e6相比，本发明所述的二氢卟吩半乳糖苷类化合物对人肝癌细胞Hep G2具有较高的光活性及声活性。可用于肿瘤治疗的光动力学治疗、声动力学治疗方法中光敏剂和声敏剂的制备。本发明制备工艺简单，反应条件易于控制，利于生产。

Description

一类二氢卟吩半乳糖苷类化合物及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于化学医药技术领域，涉及一类二氢卟吩半乳糖苷类化合物及其 制备方法与应用。
背景技术
光动力治疗(Photodynamic therapy,PDT)是一种新型肿瘤治疗技术。它是 利用光敏剂在有氧气存在的环境中，通过可见光照射发生光化学反应，产生单 线态氧(1O2)以及超氧自由基，它们可以高效地杀死肿瘤病变细胞。光动力治 疗在治疗面积较大、生长部位较深的肿瘤时，具有非常明显的优势[1,2]。其突出 特点主要表现在：1)组织选择性好，能特异性地杀死肿瘤细胞；2)毒副作用 低，光敏剂未经光照不会发生光敏化反应；3)适用多种肿瘤，如皮肤癌、口腔 癌、食管癌、肺癌、膀胱癌以及生殖器肿瘤等；4)治疗周期短，一般在光照48-72 小时后出现疗效；5)保护重要器官功能及形态等。光敏剂、可见光和氧气是光动力学治疗的三大要素。声动力学治疗(Sonodynamic therapy,SDT)，则是在光动 力学治疗(Photodynamic therapy,PDT)的基础上发展起来的一种可用于恶性、 深度肿瘤临床治疗的新方法。利用声敏剂分子可在肿瘤细胞内富集，采用超声 激发取代光动力学治疗的光激发，产生具有细胞毒性的单线态氧和形成超声空 化等作用，导致肿瘤细胞凋亡或死亡。很多光敏型化合物也具有声敏作用，光 敏剂可以作为声敏剂而使用。姚建忠等报道(二氢卟吩e6的合成及其光敏化力 和肿瘤光生物活性，中国医药工业杂志，2000,31(5)：215-217)二氢卟吩e6 对小鼠S180肉瘤的光动力疗效均优于参比药物血卟啉衍生物(HPD)。新型光敏 剂和声敏剂的开发推动了光、声动力学疗法的发展。根据结构的不同，光、声 敏剂已发展了三代。第一代与第二代光敏剂虽然已有利用，但也存在很多缺陷： 红光治疗区最大吸收波长处的吸光系数小，而使630nm激光杀伤肿瘤深度不够； 对肿瘤细胞选择性较差，而且富集能力及滞留时间有限等缺点。为了提高光、 声敏剂对于肿瘤部位的生物识别能力，提高了药物对靶器官的选择性，研究者 将一些生物功能性基团包括多脂质体、氨基酸、多糖、腺病毒、抗体等，与光 敏剂结合形成第三代的光、声敏剂。张帆等报道(“二氢卟吩类化合物的合成及 活性研究”，张帆，大连理工大学硕士学位论文，2015)将氨基酸引入到二氢卟 吩e6中，以提高化合物的光、声敏活性；也有将抗体引入到光敏剂中，以提高 分子的选择性的报道。
在药物化学研究中，靶向药物将药物靶向运输至药物作用部位可以最大限 度地发挥药物的治疗效果并减弱药物的全身毒性。糖分子具有非常好的生物相 容性以及特异性受体识别能力，这使得碳水化合物成为一种非常好的潜在靶向 配体。
例如德国科学家Otto Warburg观察到相比于正常组织，肿瘤组织会消耗更多 的葡萄糖，有氧糖酵解占很高的比重。这种现象被称作Warburg效应，被看作癌 症的标志[3]。大部分肿瘤细胞会过量表达一种或多种葡萄糖转运蛋白亚型 (GLUT-1/GLUT-3等)以维持其正常的生长。因此有研究者将葡萄糖引入到已 有的光敏剂中来提高光敏剂分子对于肿瘤细胞的靶向性。陈高建等(一种络合 卟啉含糖光敏剂及其制备方法，2013，公告号：CN103285403B)报道一种络合 卟啉的含糖聚合物可作为光敏剂使用，但是由于产物是聚合物，非单一产物， 给进一步的药物开发带来较大困难，同时人工合成卟啉最大吸收波长较短； Mikhail A.Grin等(1,3-dipolar cycloaddition in the synthesisofglycoconjugates of natural chlorins and bacteriochlorins，Mikhail A.Grin,etal,Journal of Porphyrins and Phthalocyanines,2009,13:336–345)利用点击化学反应，对卟吩骨架进行糖 基化，但该方法较复杂，需要提前对配位中心进行保护。
同样半乳凝素是一类对β-半乳糖有特殊亲和力并在糖识别域有着显著序列 相似性的凝集素家族。半乳凝素能识别并结合β-半乳糖基糖缀合物，它们共有 一种具有1或2个135氨基酸序列的一级结构同源性糖识别域(CRD)。半乳凝素 在肿瘤发生过程主要在三个方面起作用：肿瘤细胞转化、细胞周期调控和肿瘤 细胞凋亡。多种半乳凝素在这些生理过程中占主导地位。半乳凝素-1、半乳凝素 -3和半乳凝素-8可以结合整联蛋白或其他细胞表面蛋白来影响细胞转移和侵袭。 半乳凝素-3也可以重构与细胞铺展相关的细胞骨架——微丝蛋白，进而影响细胞 自身的活动性(intrinsic motility)。半乳凝素-3还可以促进内皮细胞转移进而促 进新血管再生。
二氢卟吩e6源自天然产物，具有较长的吸收波长(660nm)，易于得到，是 较理想的光敏剂骨架。因此，通过简便方法，对二氢卟吩e6进行半乳糖苷化， 将是提高化合物对肿瘤组织的选择性，增强治疗活性的有效策略之一。
发明内容
本发明通过合成一类二氢卟吩半乳糖苷类化合物，得到了活性更好的，可 用于光、声动力学治疗的抗肿瘤化合物。本发明合成的化合物结构单一，合成 方法简便，条件易于控制，原料易得，有利于生产。
本发明的技术方案：
一种二氢卟吩半乳糖苷类化合物，所述的二氢卟吩半乳糖苷类化合物具有 如下通式I：
其中：
①：R1选自
其中，当R4为Ac时，R2＝R3选自OH和甲氧基，
当R4为H时，R2＝R3为OH；
②：R2选自
其中，当R4为Ac时，R1＝R3选自OH和甲氧基，
当R4为H时，R1＝R3为OH；
③：R3选自
其中当R4为Ac时，R1＝R2选自OH和甲氧基，
当R4为H时，R1＝R2为OH；
④：R1＝R2＝R3选自 R4选自H和Ac；
⑤：n为1～5中任一整数。
一种二氢卟吩半乳糖苷类化合物的制备方法，步骤如下：
①：以化合物1为原料，溶解DMF，浓度为0.1M；N2保护，在0～5℃，依次 加入EDCI、1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或 2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐、三乙胺，化合物1：EDCI： 1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙 酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐：三乙胺的摩尔比为1：1～2：1～2：1～2， 在室温下反应2～20h，得到化合物2；将化合物2溶解于溶解DMF，浓度为0.1 M，加入碘甲烷和无水碳酸钾，化合物2：碘甲烷：无水碳酸钾的摩尔比为1：2～10：2～10，反应1～6小时，得到化合物3；将化合物3溶解于甲醇，浓度为0.1M，加入甲醇钠，浓度为0.5～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物4； 反应式如下：
②：以甲基化叶绿酸a为原料，溶解于CHCl3，浓度为0.1M，依次加入EDCI、 1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙 酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐、三乙胺，甲基化叶绿酸a：EDCI：1,3,4,6- 四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基 -beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐：三乙胺的摩尔比为1：1～2：1～2：1～2，在 室温下反应2～20h，得到化合物5；将化合物5溶解于甲醇，浓度为0.1M，加 入甲醇钠，浓度为0.1～0.2M，得到化合物6；将化合物6溶解于甲醇，浓度为 0.1M，加入甲醇钠，浓度为0.5～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物7； 反应式如下：
③：将化合物8溶于DMF，浓度为0.1M，依次加入EDCI、1,3,4,6-四-O-乙酰基 -2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半 乳糖基胺盐酸盐、三乙胺，化合物1：EDCI：1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐： 三乙胺的摩尔比为1：1～2：1～2：1～2，在室温下反应2～20h，得到化合物 9；将化合物9溶解于甲醇，浓度为0.1M，加入甲醇钠，浓度为0.5～4M，在 室温下反应2～10h，得到化合物10；反应式如下：
④：将化合物11溶于DMF，浓度为0.1M，依次加入HBTU、1,3,4,6-四-O-乙酰 基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃 半乳糖基胺盐酸盐、N，N-二异丙基乙胺，化合物11：HBTU：1,3,4,6-四-O-乙 酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡 喃半乳糖基胺盐酸盐：N，N-二异丙基乙胺的摩尔比为1：1～2：1～2：1～2， 在室温下反应2～20h，得到化合物12；将化合物12溶解于甲醇，浓度为0.1M， 加入甲醇钠，浓度为1～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物13，结构式 中的脂肪直链二胺的直链碳的个数为2～6，反应式如下：
⑤：将化合物14溶于DMF，浓度为0.1M，依次加入HBTU、1,3,4,6-四-O-乙酰 基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃 半乳糖基胺盐酸盐、N，N-二异丙基乙胺，化合物14：HBTU：11,3,4,6-四-O- 乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D- 吡喃半乳糖基胺盐酸盐：N，N-二异丙基乙胺的摩尔比为1：1～2：1～2：1～ 2，在室温下反应2～20h，得到化合物15；将化合物15溶解于甲醇，浓度为 0.1M，加入甲醇钠，浓度为1～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物16， 结构式中的脂肪直链二胺的直链碳的个数为2～6，反应式如下：
⑥：将化合物17溶于DMF，浓度为0.1M，依次加入HBTU、11,3,4,6-四-O-乙 酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡 喃半乳糖基胺盐酸盐、N，N-二异丙基乙胺，化合物17：HBTU：1,3,4,6-四-O- 乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D- 吡喃半乳糖基胺盐酸盐：N，N-二异丙基乙胺的摩尔比为1：1～2：1～2：1～ 2，在室温下反应2～20h，得到化合物18；将化合物18溶解于甲醇，浓度为 0.1M，加入甲醇钠，浓度为1～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物19， 结构式中的脂肪直链二胺的直链碳的个数为2～6，反应式如下：
⑦：将化合物1溶于DMF，浓度为0.1M，依次加入HBTU、1,3,4,6-四-O-乙酰 基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃 半乳糖基胺盐酸盐、N，N-二异丙基乙胺，化合物1：HBTU：1,3,4,6-四-O-乙酰 基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃 半乳糖基胺盐酸盐：N，N-二异丙基乙胺的摩尔比为1：3～6：3～6：3～6、在 室温下反应2～20h，得到化合物20；将化合物20溶解于甲醇，浓度为0.1M， 加入甲醇钠，浓度为1～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物21，反应式 如下：
⑧：将化合物22溶于DMF，浓度为0.1M，依次加入HBTU、1,3,4,6-四-O-乙酰 基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃 半乳糖基胺盐酸盐、N，N-二异丙基乙胺，化合物22：HBTU：1,3,4,6-四-O-乙 酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡 喃半乳糖基胺盐酸盐：N，N-二异丙基乙胺的摩尔比为1：3～6：3～6：3～6， 在室温下反应2～20h，得到化合物23；将化合物23溶解于甲醇，浓度为0.1M， 加入甲醇钠，浓度为1～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物24，反应式 如下：
二氢卟吩半乳糖苷类化合物用于制备抗肿瘤药物或作为活性部分制备靶向 性抗肿瘤药物。
本发明所述的二氢卟吩半乳糖苷类化合物，通过选择性的与半乳凝素结合， 提高了光、声敏剂对肿瘤细胞的靶向作用。体外抗肿瘤活性评价显示，同作为 对照的二氢卟吩e6相比，本发明所述的二氢卟吩半乳糖苷类化合物对人肝癌细 胞Hep G2具有较高的光活性及声活性。可用于肿瘤治疗的光动力学治疗、声动 力学治疗方法中光敏剂和声敏剂的制备。本发明制备工艺简单，反应条件易于 控制，利于生产。
具体实施方式
下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明， 但不以任何方式限制本发明。
实施例1
合成化合物3b
化合物1(CHC)(100.0mg)溶解于DMF(1.7ml)中。N2保护，冰浴搅拌。 加入EDCI(38.5mg)，冰浴继续搅拌，移除冰浴。室温下搅拌2.5h，将1,3,4,6- 四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐(83.3mg)，溶解于DMF (1ml)中，加三乙胺40μl，充分混合。将其加入反应液中，室温下搅拌，TLC 监测反应终止。二氯甲烷50ml稀释反应液，柠檬酸水溶液萃取(25mL×3)。有 机相干燥，过滤，浓缩滤液。柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝9:1)， 得中间产物2b(57.8mg)；将化合物2b溶解于DMF(0.6ml),加入碘甲烷(31 μl)，碳酸钾(150mg)，混合溶液在室温下反应6h，反应结束后，二氯甲烷萃 取(25mL×3)，有机相干燥，浓缩，柱层析，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝19:1)， 得到化合物3b(44.0mg)。化合物3b：1H-NMR(DMSO-d6,400MHz,ppm)δ:9.77 (s,1H,10-H),9.67(s,1H,5-H),9.11(s,1H,20-H),8.45(dd,1H,J＝11.6,17.6Hz, 31-H),6.42(d,1H,J＝17.6Hz,32a-H),6.13(d,1H,J＝11.6Hz,32b-H),5.51(d,1H,J ＝18Hz,151a-H),5.44(d,1H,J＝8.8Hz,5’-H),5.12(d,1H,J＝18Hz 151b-H),4.93(t, 1H,J＝9.6Hz,10Hz,2’-H),4.76(dd,1H,J＝9.6Hz,9.6Hz,3’-H),4.62(q,1H,J＝7.2 Hz,18-H),4.18(m,1H,17-H),4.15(dd,1H,J＝8.8Hz,9.6Hz,4’-H),4.08(dd,1H,J ＝4.4Hz,12.8Hz,6’a-H),3.85(dd,1H,J＝2.4Hz,12.8Hz,6’b-H),3.76(q,2H,J＝7.6Hz, 81-H),3.65(m,1H,1’-H),3.58(s,3H,121-H),3.50(s,3H,21-H),3.26(s,3H,71-H), 2.27(m,1H,171a-H),2.40(m,1H,172a-H),2.26(m,1H,172b-H),2.09,2.00,1.95,1.80(each s,3H,-COCH3),1.72(m,1H,171b-H),1.68(t,3H,J＝7.2Hz,181-H),1.65 (d,3H,J＝7.6Hz,82-H),-1.61(s,1H,N-H),-1.92(s,1H,N-H).ESI-HRMS for C48H55N5O14:(calculated)925.3742；(found)926.3814[M+H]+.
合成化合物4b
将化合物3b(50mg)溶解于1.0ml甲醇中，加入50％甲醇钠甲醇溶液(40μl)， 室温搅拌，TLC监测反应终止。旋转蒸发仪浓缩除甲醇，加入少量水淬灭甲醇 钠。加入5％柠檬酸溶液，调整pH为5，二氯甲烷萃取(25mL×3)，取有机相， 干燥。柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝7:1)，得产物化合物4b(29mg)， 产率66.0％。化合物4b：1H-NMR(DMSO-d6,400MHz,ppm)δ:9.75(s,1H,10-H), 9.73(s,1H,5-H),9.13(s,1H,20-H),8.30(dd,1H,J＝12,18Hz,31-H),6.43(d,1H, J＝18.0Hz,32a-H),6.15(d,1H,J＝11.6Hz,32b-H),5.71(d,1H,J＝18Hz,151a-H), 5.51(d,1H,J＝18Hz 151b-H),5.15(d,1H,J＝8.4Hz,5’-H),4.96(t,1H,J＝9.6Hz, 2’-H),4.73(q,1H,J＝9.6Hz,17-H),4.63(m,2H,18,3’-H),3.80(d,1H,J＝8.4Hz,7’ -H),3.70(q,1H,J＝7.2Hz,4’-H),3.58(s,3H,121-H),3.53(s,3H,21-H),3.35(d,1H, J＝11.2Hz,1’-H),3.31(q,2H,J＝7.2Hz,81-H),3.19(s,3H,71-H),2.65(m,2H,172-H),2.25(m,2H,171-H),1.72(t,3H,J＝7.2Hz,181-H),1.69(d,3H,J＝8.8Hz,82-H), -1.79(s,1H,N-H),-2.20(s,1H,N-H).ESI-HRMS for C40H47N5O10: (calculated)757.3319；(found)758.3377[M+H]+.
实施例2
合成化合物6b
将甲基化叶绿酸a(100.0mg)溶解于CHCl3(1.8ml)中，N2保护，冰浴搅拌。 加入EDCI(38.5mg)，冰浴继续搅拌，移除冰浴。室温下搅拌2.5h，将1,3,4,6- 四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐(83.1mg)，溶解于DMF (1ml)中，加三乙胺40μl，充分混合。将其加入反应液中，室温下搅拌，TLC 监测反应终止。二氯甲烷50ml稀释反应液，柠檬酸水溶液萃取(25mL×3)。有 机相干燥，过滤，浓缩滤液。柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝9:1)， 得中间产物5b(55.1mg)；将化合物5b溶解于甲醇(0.6ml)，加入1倍量(摩 尔比)甲醇钠，混合溶液在室温下反应6h，反应结束后，二氯甲烷萃取(25mL×3)， 有机相干燥，浓缩，柱层析，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝19:1)，得到化合物 6b(47.0mg)。化合物6b：1H-NMR(DMSO-d6,400MHz,ppm)δ:9.74(s,1H,10-H), 9.66(s,1H,5-H),9.12(s,1H,20-H),8.44(dd,1H,J＝11.6,17.6Hz,31-H),6.42(d, 1H,J＝17.6Hz,32a-H),6.13(d,1H,J＝11.6Hz,32b-H),5.51(d,1H,J＝18Hz, 151a-H),5.44(d,1H,J＝8.8Hz,5’-H),5.12(d,1H,J＝18Hz 151b-H),4.93(t,1H, J＝9.6Hz,10Hz,2’-H),4.76(dd,1H,J＝9.6Hz,9.6Hz,3’-H),4.61(q,1H,J＝7.2Hz, 18-H),4.18(m,1H,17-H),4.15(dd,1H,J＝8.8Hz,9.6Hz,4’-H),4.08(dd,1H,J ＝4.4Hz,12.8Hz,6’a-H),3.84(dd,1H,J＝2.4Hz,12.8Hz,6’b-H),3.76(q,2H,J＝7.6Hz, 81-H),3.65(m,1H,1’-H),3.56(s,3H,121-H),3.50(s,3H,21-H),3.26(s,3H,71-H), 2.27(m,1H,171a-H),2.40(m,1H,172a-H),2.26(m,1H,172b-H),2.09,2.00,1.95,1.80(each s,3H,-COCH3),1.72(m,1H,171b-H),1.68(t,3H,J＝7.2Hz,181-H),1.65 (d,3H,J＝7.6Hz,82-H),-1.61(s,1H,N-H),-1.92(s,1H,N-H).ESI-HRMS for C48H55N5O14:(calculated)925.3742；(found)926.3821[M+H]+.
合成化合物7b
将化合物6b(44mg)溶解于1.0ml甲醇中，加入50％甲醇钠甲醇溶液(40μl)， 室温搅拌，TLC监测反应终止。旋转蒸发仪浓缩除甲醇，加入少量水淬灭甲醇 钠。加入5％柠檬酸溶液，调整pH为5，二氯甲烷萃取(25mL×3)，取有机相， 干燥。柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝7:1)，得产物化合物7b(24mg)， 产率64.0％。化合物7b：1H-NMR(DMSO-d6,400MHz,ppm)δ:9.74(s,1H,10-H), 9.71(s,1H,5-H),9.15(s,1H,20-H),8.31(dd,1H,J＝12,18Hz,31-H),6.42(d,1H, J＝18.0Hz,32a-H),6.15(d,1H,J＝11.6Hz,32b-H),5.71(d,1H,J＝18Hz,151a-H), 5.51(d,1H,J＝18Hz 151b-H),5.15(d,1H,J＝8.4Hz,5’-H),4.96(t,1H,J＝9.6Hz, 2’-H),4.73(q,1H,J＝9.6Hz,17-H),4.63(m,2H,18,3’-H),3.80(d,1H,J＝8.4Hz,7’ -H),3.70(q,1H,J＝7.2Hz,4’-H),3.58(s,3H,121-H),3.53(s,3H,21-H),3.35(d,1H, J＝11.2Hz,1’-H),3.31(q,2H,J＝7.2Hz,81-H),3.19(s,3H,71-H),2.65(m,2H,172-H),2.25(m,2H,171-H),1.72(t,3H,J＝7.2Hz,181-H),1.69(d,3H,J＝8.8Hz,82-H), -1.79(s,1H,N-H),-2.20(s,1H,N-H).ESI-HRMS for C40H47N5O10: (calculated)757.3320；(found)758.3398[M+H]+.
实施例3
化合物11的合成
将化合物1(100mg)溶解于5％H2SO4/MeOH溶液(2ml)中，N2保护，室温 搅拌，TLC监测反应终止。旋转蒸发仪浓缩除甲醇。二氯甲烷(25ml)稀释反 应液，去离子水、碳酸氢钠水溶液、饱和NaCl水溶洗各一次(25ml)。有机相 干燥，过滤，浓缩滤液。柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝19:1)，得 产96.2mg，产率97％。化合物8：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.64(1H,s,10-H), 9.50(1H,s,5-H),8.72(1H,s,20-H),8.01(1H,dd,J＝17.6,11.6Hz,31-H),6.32(1H, dd,J＝17.6Hz,1.2Hz,32a-H),6.12(1H,dd,J＝11.6,1.2Hz,32b-H),5.51(1H,d,J＝ 18Hz,151a-H),5.26(1H,d,J＝18Hz,151b-H),4.46(1H,q,J＝7.6Hz,18-H),4.12(1H,d,J＝7.2Hz,17-H),3.82(3H,s,121-H),3.74(2H,dd,J＝7.6Hz,81-H),3.72(3H, s,21-H),3.70(3H,s,174-H),3.62(3H,s,153-H),3.25(3H,s,71-H),2.55(1H,m, 172a-H),2.19(1H,m,171a-H),2.16(1H,m,172b-H),1.87(1H,m,171b-H),1.79(3H, d,J＝7.6Hz,181-H),1.68(3H,t,J＝7.6Hz,82-H),-1.29(1H,s,N-H),-1.81(1H,s, N-H).ESI-MS forC36H40N4O6:(calculated)624.2942；(found)625.3065[M+H]+.
将化合物8(97mg)溶解于DMF(1ml)中，加入HBTU(82.3mg)，N2保护，室温搅拌。将β-Ala-tertbutyl ester(39.4mg)和DIEA(34μl)溶于二氯 甲烷(1ml)中，加入反应液中。TLC监测反应终止。二氯甲烷(25ml)稀释 反应液，水溶液、饱和NaCl水溶液洗各一次(25ml)。有机相中干燥，过滤， 浓缩滤液。柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝50:1)，得中间体8s(80.5 mg)，产率69％。1H-NMR(CDCl3,400MHz,ppm)δ:9.63(s,1H,10-H),9.56(s,1H, 5-H),8.78(s,1H,20-H),7.99(dd,1H,J＝11.6,17.6Hz,31-H),6.27(d,1H,J＝17.6Hz,32a-H),6.05(d,1H,J＝11.6Hz,32b-H),5.52(d,1H,J＝18Hz,151a-H),5.27 (d,1H,J＝18Hz,151b-H),4.45(q,1H,J＝6.8Hz,18-H),4.37(d,1H,J＝7.6Hz,17-H), 4.04(q,2H,J＝7.2Hz,81-H),3.77(s,3H,121-H),3.73(m,2H,133-H),3.60(s,3H, 21-H),3.49(s,3H,71-H),3.43(s,3H,175-H),3.26(s,3H,154-H),2.82(m,2H,134- H),2.53(m,1H,171a-H),2.17(m,1H,172-H),1.82(m,1H,171b-H),1.70(d 3H,J ＝6.8Hz,181-H),1.69(t,3H,J＝7.2Hz,82-H),1.47(s,9H,-O(CH)3),-1.60(1H,s, N-H),-1.80(1H,s,N-H).ESI-MS for C43H53N5O7:(calculated) 751.3945；(found)752.4030[M+H]+.
将中间体8s(80mg)溶解于1.4ml的二氯甲烷，在冰水浴下，加入三氟乙 酸(0.14ml)，N2保护，室温搅拌，TLC监测反应终止。旋转蒸发仪浓缩除三氟 乙酸，得产物11(79mg)，产率99％。1H-NMR(CDCl3,400MHz,ppm)δ:9.76(s, 1H,10-H),9.67(s,1H,5-H),9.04(s,1H,20-H),7.81(dd,1H,J＝11.6,17.6Hz, 31-H),6.14(d,1H,J＝17.6Hz,32a-H),6.05(d,1H,J＝11.6Hz,32b-H),5.10(d,1H,J ＝18Hz,151a-H),4.95(d,1H,J＝18Hz,151b-H),4.54(q,1H,J＝6.8Hz,18-H),4.40(d, 1H,J＝9.6Hz,17-H),3.71(q,2H,J＝7.2Hz,81-H),3.67(s,3H,121-H),3.57(s,3H, 21-H),3.42(s,3H,71-H),3.30(m,2H,133-H),3.18(s,3H,175-H),3.14(s,3H, 154-H),2.61(m,1H,171a-H),2.29(m,2H,133-H),2.21(m,1H,172-H),1.76(d,3H, J＝6.8Hz,181-H),1.67(m,1H,171b-H),1.49(t,3H,J＝7.2Hz,82-H).ESI-MS for C43H53N5O7:(calculated)695.3319；(found)696.3387[M+H]+.
合成化合物12b
将化合物11(77mg)溶解于1.2mlDMF溶液中，加入HBTU(56mg)， N2保护，室温搅拌2h。将1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖 盐酸盐(61.0mg)和DIEA(34μl)充分溶于1ml二氯甲烷中，加入到反应液。TLC监测反应终止。二氯甲烷(25ml)稀释反应液，水溶液、饱和NaCl洗各 一次(25ml)。有机相干燥，过滤，浓缩滤液。柱层析分离，洗脱条件为(二氯 甲烷/甲醇＝9:1)，得产物12b(101.7mg)，产率89％。化合物12b：1H-NMR(CDCl3, 400MHz,ppm)δ:9.66(s,1H,10-H),9.60(s,1H,5-H),8.81(s,1H,20-H),8.05(dd,1H,J＝11.6,18Hz,31-H),7.09(d,1H,J＝8.8Hz,5-H),6.33(d,1H,J＝18Hz,32a-H), 6.12(d,1H,J＝11.6Hz,32b-H),5.74(d,1H,J＝7.2Hz,2’-H),5.53(d,1H,J＝18Hz, 151a-H),5.34(d,1H,J＝18Hz 151b-H),5.03(dd,1H,J＝9.6,9.6Hz,3’-H),4.84(dd, 1H,J＝9.6,9.6Hz,4’-H),4.48(q,1H,J＝7.2Hz,18-H),4.42(m,1H,17-H),4.00(m, 1H,7’-H and 1’-H),3.78(s,3H,121-H),3.75(q,2H,J＝7.2Hz,81-H),3.68(s,3H, 21-H),3.61(s,2H,133-H),3.54(s,3H,71-H),3.48(s,3H,175-H),3.29(s,3H,154-H), 3.06(m,1H,172a-H),2.86(m,1H,172b-H),2.65(m,2H,171-H),1.74(d,3H,J＝ 7.2Hz,181-H),1.71(t,3H,82-H),1.92,1.81,1.72,1.62(each s,3H,-COCH3),-1.56 (s,1H,N-H),-1.72(s,1H,N-H).ESI-HRMSfor C53H64N6O15: (calculated)1024.4430；(found)1025.4490[M+H]+.
合成化合物13b
将化合物12b(100mg)溶解于1.0ml甲醇中，加入50％甲醇钠甲醇溶液(40μl)， 室温搅拌，TLC监测反应终止。旋转蒸发仪浓缩除甲醇，加入少量水淬灭甲醇 钠。5％柠檬酸溶液，调整pH为5，二氯甲烷萃取(25mL×3)，取有机相，干 燥。柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝7:1)，得产物化合物13b(48.9mg)， 产率60％。化合物13b：1H-NMR(CDCl3,400MHz,ppm)δ:9.66(s,1H,10-H),9.60 (s,1H,5-H),8.81(s,1H,20-H),8.05(dd,1H,J＝11.5,17.7Hz,31-H),7.09(d,1H, J＝17.8Hz,5-H),6.33(t,1H,32a-H),6.12(d,1H,J＝12.6Hz,32b-H),5.74(t,1H, J＝9.6Hz,2-H),5.53(d,1H,J＝11.5Hz,151a-H),5.34(d,1H,J＝8.6Hz 151b-H), 5.03(t,1H,J＝9.6Hz,3-H),4.84(t,1H,J＝7.2Hz,4-H),4.48(q,1H,J＝9.2Hz,17-H), 4.42(dd,1H,J＝4.4,8.8Hz,18-H),4.03(t,1H,J＝7.2Hz,1-H),4.00(m,2H,7-H), 3.78(s,3H,121-H),3.75(q,2H,J＝7.4Hz,81-H),3.68(s,3H,21-H),3.61(s,2H,133-H),3.54(s,3H,71-H),3.48(s,3H,175-H),3.29(s,3H,154-H),3.06(m,1H, 172a-H),2.86(m,1H,172b-H),2.65(m,2H,171-H),1.92(s,3H,181-H),1.81(s,3H, 82-H),-1.56(s,1H,N-H),-1.72(s,1H,N-H).ESI-HRMS for C43H52N6O11: (calculated)828.3694；(found)829.3745[M+H]+.
实施例4
合成化合物15b
将化合物14(85.2mg)(化合物14按文献[5]合成)，溶解于1.3ml DMF溶 液中，加入HBTU(58.1mg)，N2保护，室温搅拌2h。将1,3,4,6-四-O-乙酰基-2- 氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐(61.0mg)和DIEA(36μl)充分溶于1 ml二氯甲烷中，加入到反应液。TLC监测反应终止。二氯甲烷(25ml)稀释反 应液，水溶液、饱和NaCl洗各一次(25ml)。有机相干燥，过滤，浓缩滤液。 柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝9:1)，得产物15b(99.2mg)，产率 87％。化合物15b：1H-NMR(CDCl3,400MHz,ppm)δ:9.65(s,1H,10-H),9.59(s, 1H,5-H),8.82(s,1H,20-H),8.04(dd,1H,J＝11.6,18Hz,31-H),7.08(d,1H, J＝8.8Hz,5-H),6.32(d,1H,J＝18Hz,32a-H),6.11(d,1H,J＝11.6Hz,32b-H),5.73(d, 1H,J＝7.2Hz,2’-H),5.52(d,1H,J＝18Hz,151a-H),5.32(d,1H,J＝18Hz 151b-H), 5.01(dd,1H,J＝9.6,9.6Hz,3’-H),4.81(dd,1H,J＝9.6,9.6Hz,4’-H),4.45(q,1H,J＝ 7.2Hz,18-H),4.40(m,1H,17-H),4.02(m,1H,7’-H and 1’-H),3.78(s,3H,121-H), 3.75(q,2H,J＝7.2Hz,81-H),3.68(s,3H,21-H),3.61(s,2H,133-H),3.54(s,3H, 71-H),3.48(s,3H,175-H),3.29(s,3H,154-H),3.06(m,1H,172a-H),2.86(m,1H, 172b-H),2.65(m,2H,171-H),1.74(d,3H,J＝7.2Hz,181-H),1.71(t,3H,82-H), 1.92,1.81,1.72,1.58(each s,3H,-COCH3),-1.54(s,1H,N-H),-1.70(s,1H, N-H).ESI-HRMS for C53H64N6O15:(calculated)1024.4430；(found)1025.4501 [M+H]+.
合成化合物16b
将化合物15b(100mg)溶解于1.0ml甲醇中，加入50％甲醇钠甲醇溶液(40μl)， 室温搅拌，TLC监测反应终止。旋转蒸发仪浓缩除甲醇，加入少量水淬灭甲醇 钠。5％柠檬酸溶液，调整pH为5，二氯甲烷萃取(25mL×3)，取有机相，干 燥。柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝7:1)，得产物化合物16b(53.8mg)， 产率63.0％。化合物16b：1H-NMR(CDCl3,400MHz,ppm)δ:9.65(s,1H,10-H), 9.61(s,1H,5-H),8.83(s,1H,20-H),8.08(dd,1H,J＝11.5,17.7Hz,31-H),7.06(d, 1H,J＝17.8Hz,5-H),6.35(t,1H,32a-H),6.12(d,1H,J＝12.6Hz,32b-H),5.74(t,1H, J＝9.6Hz,2-H),5.53(d,1H,J＝11.5Hz,151a-H),5.34(d,1H,J＝8.6Hz 151b-H), 5.03(t,1H,J＝9.6Hz,3-H),4.84(t,1H,J＝7.2Hz,4-H),4.46(q,1H,J＝9.2Hz,17-H), 4.42(dd,1H,J＝4.4,8.8Hz,18-H),4.03(t,1H,J＝7.2Hz,1-H),4.01(m,2H,7-H), 3.78(s,3H,121-H),3.75(q,2H,J＝7.4Hz,81-H),3.68(s,3H,21-H),3.61(s,2H,133-H),3.54(s,3H,71-H),3.48(s,3H,175-H),3.29(s,3H,154-H),3.06(m,1H, 172a-H),2.86(m,1H,172b-H),2.63(m,2H,171-H),1.92(s,3H,181-H),1.81(s,3H, 82-H),-1.57(s,1H,N-H),-1.71(s,1H,N-H).ESI-HRMS for C43H52N6O11: (calculated)828.3694；(found)829.3776[M+H]+.
实施例5
合成化合物18b
将化合物17(75mg)(化合物17按文献[4]的方法合成)溶解于1.2ml DMF 溶液中，加入HBTU(55mg)，N2保护，室温搅拌2h。将1,3,4,6-四-O-乙酰基 -2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐(60.1mg)和DIEA(35μl)充分溶于 1ml二氯甲烷中，加入到反应液。TLC监测反应终止。二氯甲烷(25ml)稀释 反应液，水溶液、饱和NaCl洗各一次(25ml)。有机相干燥，过滤，浓缩滤液。 柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝9:1)，得产物18b(91.7mg)，产率 83％。化合物12b：1H-NMR(CDCl3,400MHz,ppm)δ:9.64(s,1H,10-H),9.58(s, 1H,5-H),8.80(s,1H,20-H),8.06(dd,1H,J＝11.6,18Hz,31-H),7.08(d,1H, J＝8.8Hz,5-H),6.31(d,1H,J＝18Hz,32a-H),6.12(d,1H,J＝11.6Hz,32b-H),5.74(d, 1H,J＝7.2Hz,2’-H),5.53(d,1H,J＝18Hz,151a-H),5.34(d,1H,J＝18Hz 151b-H), 5.03(dd,1H,J＝9.6,9.6Hz,3’-H),4.84(dd,1H,J＝9.6,9.6Hz,4’-H),4.48(q,1H,J＝ 7.2Hz,18-H),4.42(m,1H,17-H),4.00(m,1H,7’-H and 1’-H),3.78(s,3H,121-H), 3.75(q,2H,J＝7.2Hz,81-H),3.68(s,3H,21-H),3.61(s,2H,133-H),3.54(s,3H, 71-H),3.48(s,3H,175-H),3.29(s,3H,154-H),3.06(m,1H,172a-H),2.86(m,1H, 172b-H),2.65(m,2H,171-H),1.74(d,3H,J＝7.2Hz,181-H),1.71(t,3H,82-H), 1.92,1.81,1.72,1.62(each s,3H,-COCH3),-1.58(s,1H,N-H),-1.74(s,1H, N-H).ESI-HRMS for C53H64N6O15:(calculated)1024.4430；(found)1025.4502[M+H]+. 合成化合物19b
将化合物18b(100mg)溶解于1.0ml甲醇中，加入50％甲醇钠甲醇溶液(40μl)， 室温搅拌，TLC监测反应终止。旋转蒸发仪浓缩除甲醇，加入少量水淬灭甲醇 钠。5％柠檬酸溶液，调整pH为5，二氯甲烷萃取(25mL×3)，取有机相，干 燥。柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝7:1)，得产物化合物19b(43.1mg)， 产率56.0％。化合物19b：1H-NMR(CDCl3,400MHz,ppm)δ:9.64(s,1H,10-H), 9.61(s,1H,5-H),8.80(s,1H,20-H),8.03(dd,1H,J＝11.5,17.7Hz,31-H),7.07(d, 1H,J＝17.8Hz,5-H),6.31(t,1H,32a-H),6.10(d,1H,J＝12.6Hz,32b-H),5.72(t,1H, J＝9.6Hz,2-H),5.51(d,1H,J＝11.5Hz,151a-H),5.32(d,1H,J＝8.6Hz 151b-H), 5.01(t,1H,J＝9.6Hz,3-H),4.82(t,1H,J＝7.2Hz,4-H),4.48(q,1H,J＝9.2Hz,17-H), 4.42(dd,1H,J＝4.4,8.8Hz,18-H),4.03(t,1H,J＝7.2Hz,1-H),4.00(m,2H,7-H), 3.78(s,3H,121-H),3.75(q,2H,J＝7.4Hz,81-H),3.68(s,3H,21-H),3.61(s,2H,133-H),3.54(s,3H,71-H),3.48(s,3H,175-H),3.29(s,3H,154-H),3.06(m,1H, 172a-H),2.84(m,1H,172b-H),2.66(m,2H,171-H),1.92(s,3H,181-H),1.81(s,3H, 82-H),-1.52(s,1H,N-H),-1.74(s,1H,N-H).ESI-HRMS for C43H52N6O11: (calculated)828.3694；(found)829.3767[M+H]+.
实施例6
合成化合物23b
将化合物22(86mg)(化合物22按文献[4]的方法合成)溶解于1.4ml DMF 溶液中，加入HBTU(61mg)，N2保护，室温搅拌2h。将1,3,4,6-四-O-乙酰基 -2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐(63.5mg)和DIEA(38μl)充分溶于 1ml二氯甲烷中，加入到反应液。TLC监测反应终止。二氯甲烷(25ml)稀释 反应液，水溶液、饱和NaCl洗各一次(25ml)。有机相干燥，过滤，浓缩滤液。 柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝9:1)，得产物18b(100.7mg)，产率 83％。化合物23b：1H-NMR(CDCl3,400MHz,ppm)δ:9.66(s,1H,10-H),9.60(s, 1H,5-H),8.82(s,1H,20-H),8.06(dd,1H,J＝11.6,18Hz,31-H),7.06(d,1H, J＝8.8Hz,5-H),6.33(d,1H,J＝18Hz,32a-H),6.12(d,1H,J＝11.6Hz,32b-H),5.74(d, 1H,J＝7.2Hz,2’-H),5.53(d,1H,J＝18Hz,151a-H),5.34(d,1H,J＝18Hz 151b-H), 5.03(dd,1H,J＝9.6,9.6Hz,3’-H),4.82(dd,1H,J＝9.6,9.6Hz,4’-H),4.48(q,1H,J＝ 7.2Hz,18-H),4.42(m,1H,17-H),4.00(m,1H,7’-H and 1’-H),3.78(s,3H,121-H), 3.75(q,2H,J＝7.2Hz,81-H),3.68(s,3H,21-H),3.61(s,2H,133-H),3.54(s,3H, 71-H),3.48(s,3H,175-H),3.31(s,3H,154-H),3.04(m,1H,172a-H),2.83(m,1H, 172b-H),2.62(m,2H,171-H),1.74(d,3H,J＝7.2Hz,181-H),1.72(t,3H,82-H), 1.92,1.81,1.72,1.62(each s,3H,-COCH3),-1.60(s,1H,N-H),-1.70(s,1H, N-H).ESI-HRMS for C61H84N10O21:(calculated)1292.5812；(found)1293.4512 [M+H]+.
合成化合物24b
将化合物23b(100mg)溶解于1.0ml甲醇中，加入50％甲醇钠甲醇溶液(40μl)， 室温搅拌，TLC监测反应终止。旋转蒸发仪浓缩除甲醇，加入少量水淬灭甲醇 钠。5％柠檬酸溶液，调整pH为5，二氯甲烷萃取(25mL×3)，取有机相，干 燥。柱层析分离，洗脱条件为(二氯甲烷/甲醇＝7:1)，得产物化合物24b(48.2mg)， 产率58.0％。化合物24b：1H-NMR(CDCl3,400MHz,ppm)δ:9.65(s,1H,10-H), 9.59(s,1H,5-H),8.76(s,1H,20-H),8.01(dd,1H,J＝11.5,17.7Hz,31-H),7.07(d, 1H,J＝17.8Hz,5-H),6.31(t,1H,32a-H),6.10(d,1H,J＝12.6Hz,32b-H),5.72(t,1H, J＝9.6Hz,2-H),5.48(d,1H,J＝11.5Hz,151a-H),5.32(d,1H,J＝8.6Hz 151b-H), 5.01(t,1H,J＝9.6Hz,3-H),4.82(t,1H,J＝7.2Hz,4-H),4.48(q,1H,J＝9.2Hz,17-H), 4.42(dd,1H,J＝4.4,8.8Hz,18-H),4.03(t,1H,J＝7.2Hz,1-H),4.00(m,2H,7-H), 3.78(s,3H,121-H),3.75(q,2H,J＝7.4Hz,81-H),3.68(s,3H,21-H),3.61(s,2H,133-H),3.54(s,3H,71-H),3.48(s,3H,175-H),3.29(s,3H,154-H),3.06(m,1H, 172a-H),2.84(m,1H,172b-H),2.62(m,2H,171-H),1.87(s,3H,181-H),1.78(s,3H, 82-H),-1.50(s,1H,N-H),-1.71(s,1H,N-H).ESI-HRMS for C85H108N10O33: (calculated)1796.7080；(found)1797.6932[M+H]+.
应用例:
光动力活性：
将化合物3b,4b,7b,10b,12b,13b,16b,19b,23b,24b,Chlorin e6，用DMSO溶解，-4℃ 保存；使用时，用细胞培养液稀释至DMSO的最终浓度＜0.1％。
将处于对数生长期的HepG2肝癌细胞，以5×103个/空接种于96孔板中，每孔 加入细胞悬液100μL，培养24h后，加入100μL药液，终浓度分别为100μmol/L、 30μmol/L、10μmol/L、1μmol/L、0.1μmol/L、0.01μmol/L的待测化合物，设置空 白组(含培养液，无细胞)、对照组(培养细胞不加药)，细胞在37℃培养箱(5％ CO2)中孵育24h后，进行光毒性实验。培养板距离光源高度为20cm，光强1.7 J/cm2，波长660nmLED，时间2min，再放入37℃培养箱(5％CO2)中孵育24h 后，每孔加入浓度为5mg/mL的MTT溶液20μL，继续培养4h，吸走上清液， 加入100μLDMSO。酶标仪测定570nm波长下各孔的吸光度(OD值)，计算IC50。 结果见表1。
声动力活性：
同光活性评价操作的区别在于：将加入药液的96孔板置于底部发超声的装置上，加入脱气水，使悬浮于水面上，距超声发声探头2cm，超声激发(2MHz，2W) 2min，再放入37℃培养箱(5％CO2)中孵育24h后，每孔加入浓度为5mg/mL 的MTT溶液20μL，继续培养4h，吸走上清液，加入100μLDMSO。酶标仪测 定570nm波长下各孔的吸光度(OD值)，计算IC50。结果见表2。
暗毒性活性：
同光活性评价操作的区别在于：将加入药液的96孔板置于暗室中2min，再 放入37℃培养箱(5％CO2)中孵育24h后，每孔加入浓度为5mg/mL的MTT溶 液20μL，继续培养4h，吸走上清液，加入100μLDMSO。酶标仪测定570nm 波长下各孔的吸光度(OD值)，计算IC50。
表1目标化合物对HepG2肝癌细胞的体外光活性与暗毒性
表2目标化合物对HepG2肝癌细胞的体外声动力活性与暗毒性
分子对接：
蛋白结合能力采用DS2.5软件中的FlexibleDocking模块的计算机模拟方法 进行验证。设计的化合物与半乳凝素-1蛋白的对接构象RMSD值如表3所示。 半乳凝素-1的活性腔为半开放式，因此在半乳凝素-1的对接实验中未出现配体 无法进入活性腔的情况，大部分化合物的对接构象RMSD值小于2，说明大部 分化合物均能与半乳凝素-1很好地结合。
表3.化合物与Ga1ectin-1蛋白对接模拟结果

Claims (3)

1.一种二氢卟吩半乳糖苷类化合物，其特征在于，所述的二氢卟吩半乳糖苷类化合物具有如下通式I：
其中：
①：R1选自
其中，当R4为Ac时，R2＝R3选自OH和甲氧基，
当R4为H时，R2＝R3为OH；
②：R2选自
其中，当R4为Ac时，R1＝R3选自OH和甲氧基，
当R4为H时，R1＝R3为OH；
③：R3选自
其中当R4为Ac时，R1＝R2选自OH和甲氧基，
当R4为H时，R1＝R2为OH；
④：R1＝R2＝R3选自
R4选自H和Ac；
⑤：n为1～5中任一整数。
2.一种二氢卟吩半乳糖苷类化合物的制备方法，其特征在于，步骤如下：
①：以化合物1为原料，溶解DMF，浓度为0.1M；N2保护，在0～5℃，依次加入EDCI、1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐、三乙胺，化合物1：EDCI：1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐：三乙胺的摩尔比为1：1～2：1～2：1～2，在室温下反应2～20h，得到化合物2；将化合物2溶解于溶解DMF，浓度为0.1M，加入碘甲烷和无水碳酸钾，化合物2：碘甲烷：无水碳酸钾的摩尔比为1：2～10：2～10，反应1～6小时，得到化合物3；将化合物3溶解于甲醇，浓度为0.1M，加入甲醇钠，浓度为0.5～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物4；反应式如下：
②：以甲基化叶绿酸a为原料，溶解于CHCl3，浓度为0.1M，依次加入EDCI、1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐、三乙胺，甲基化叶绿酸a：EDCI：1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐：三乙胺的摩尔比为1：1～2：1～2：1～2，在室温下反应2～20h，得到化合物5；将化合物5溶解于甲醇，浓度为0.1M，加入甲醇钠，浓度为0.1～0.2M，得到化合物6；将化合物6溶解于甲醇，浓度为0.1M，加入甲醇钠，浓度为0.5～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物7；反应式如下：
③：将化合物8溶于DMF，浓度为0.1M，依次加入EDCI、1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐、三乙胺，化合物1：EDCI：1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐：三乙胺的摩尔比为1：1～2：1～2：1～2，在室温下反应2～20h，得到化合物9；将化合物9溶解于甲醇，浓度为0.1M，加入甲醇钠，浓度为0.5～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物10；反应式如下：
④：将化合物11溶于DMF，浓度为0.1M，依次加入HBTU、1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐、N，N-二异丙基乙胺，化合物11：HBTU：1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐：N，N-二异丙基乙胺的摩尔比为1：1～2：1～2：1～2，在室温下反应2～20h，得到化合物12；将化合物12溶解于甲醇，浓度为0.1M，加入甲醇钠，浓度为1～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物13，结构式中的脂肪直链二胺的直链碳的个数为2～6，反应式如下：
⑤：将化合物14溶于DMF，浓度为0.1M，依次加入HBTU、1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐、N，N-二异丙基乙胺，化合物14：HBTU：11,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐：N，N-二异丙基乙胺的摩尔比为1：1～2：1～2：1～2，在室温下反应2～20h，得到化合物15；将化合物15溶解于甲醇，浓度为0.1M，加入甲醇钠，浓度为1～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物16，结构式中的脂肪直链二胺的直链碳的个数为2～6，反应式如下：
⑥：将化合物17溶于DMF，浓度为0.1M，依次加入HBTU、11,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐、N，N-二异丙基乙胺，化合物17：HBTU：1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐：N，N-二异丙基乙胺的摩尔比为1：1～2：1～2：1～2，在室温下反应2～20h，得到化合物18；将化合物18溶解于甲醇，浓度为0.1M，加入甲醇钠，浓度为1～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物19，结构式中的脂肪直链二胺的直链碳的个数为2～6，反应式如下：
⑦：将化合物1溶于DMF，浓度为0.1M，依次加入HBTU、1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐、N，N-二异丙基乙胺，化合物1：HBTU：1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐：N，N-二异丙基乙胺的摩尔比为1：3～6：3～6：3～6、在室温下反应2～20h，得到化合物20；将化合物20溶解于甲醇，浓度为0.1M，加入甲醇钠，浓度为1～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物21，反应式如下：
⑧：将化合物22溶于DMF，浓度为0.1M，依次加入HBTU、1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐、N，N-二异丙基乙胺，化合物22：HBTU：1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-氨基-2-脱氧-beta-D-吡喃半乳糖盐酸盐或2,3,4,6-四-O-乙酰基-beta-D-吡喃半乳糖基胺盐酸盐：N，N-二异丙基乙胺的摩尔比为1：3～6：3～6：3～6，在室温下反应2～20h，得到化合物23；将化合物23溶解于甲醇，浓度为0.1M，加入甲醇钠，浓度为1～4M，在室温下反应2～10h，得到化合物24，反应式如下：
3.二氢卟吩半乳糖苷类化合物用于制备抗肿瘤药物或作为活性部分制备靶向性抗肿瘤药物。
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