CN107691430B - 一种红细胞保存液 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种红细胞保存液，含有以下浓度的原料：双糖10.0‑40.0g/L，氯化钠1.0‑3.0g/L，EDTA‑Na2 3.0‑10.0g/L，甘氨酸5.0‑10.0g/L，KH2PO4 0.1‑0.3g/L，Na2HPO4·12H2O 5‑10g/L，磺胺30‑90mg/L，甲氧苄啶10‑30mg/L，抗氧化剂0.15‑1.3g/L，pH为7.5‑8.5，渗透压为240‑380mosm。本发明的红细胞保存液能明显降低红细胞保存时的溶血率，延长红细胞保存时间，在2‑8℃保存可达120天，并能避免红细胞体外保存时的聚集现象。
Description
技术领域
本发明涉及生化试剂制备技术领域，具体地说，涉及一种用于体外保存红细胞的保存液及其用途。
背景技术
输血前的血型血清学实验是保证输血安全最基础也是最为重要的实验项目。血型血清学实验离不开抗原抗体反应。目前，血型血清学中所用到的抗体试剂由于生产纯化便利，早已大量商品化、标准化。而作为反应体系中另外一个必不可少的成分则是红细胞，其作为试剂所面临的问题就要复杂得多。首先红细胞原料必须来自于人体，无法用其他来源的物质替代，其次红细胞寿命较短，在体内平均寿命为120天。因此试剂红细胞的生产和保存一直是实验室研究人员普遍关注的问题，尤其针对一些稀有血型红细胞，在人群中出现频率低，且不易鉴定，不易收集。再加上不能长时间保存，对血型血清学相关实验的顺利开展都有很大的制约作用。
红细胞液态保存时,血液中氧的亲和性逐渐增长而携氧量减少。细胞死亡的信号来自于细胞膜的改变，如:累积的损害使膜脆性增加；抗原暴露后结合免疫球蛋白,使红细胞被巨噬细胞吞噬。红细胞体外保存常见的方式分为两种，一种是冷藏保存，常用的温度为2～8℃，一种是冰冻保存(-20℃，或-80℃)，目前市面上售卖的商品化红细胞试剂基本上都是添加保存液后于2～8℃低温冷藏保存。低温冷藏保存的优越性主要在于减慢了红细胞代谢，有利于延长保存时间。而且由于血液成分非常有利于微生物生长繁殖，低温保存也可以有效抑制微生物的生长，从而减轻了由于微生物污染生长代谢导致的红细胞破坏。然而冰冻保存由于操作较为复杂，且冻存过程和复融过程均较容易破坏红细胞，目前应用受限。
目前，市面上售卖的商品化红细胞试剂盒的主要生产厂家有上海血液生物医药有限责任公司、江阴力博医药生物技术有限公司、长春博迅生物技术有限责任公司；国外厂家有：强生(上海)医疗器材有限公司/Ortho-Clinical Diagnostics、伯乐生命医学产品(上海)有限公司/DiaMed GmbH等，其生产的商品化红细胞试剂盒效期基本上为2～3个月，且在保存的后期，溶血均较严重，配套微柱凝胶卡使用时，容易出现假阳性、柱印记等结果干扰实验人员的判读。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能够降低红细胞溶血率并延长红细胞体外保存时间的红细胞保存液。
为了实现本发明目的，本发明提供一种红细胞保存液，含有以下浓度的原料：双糖10.0-40.0g/L，电解质盐1.0-3.0g/L，抗凝剂3.0-10.0g/L，氨基酸5.0-10.0g/L，pH值缓冲剂5.1-10.3g/L，抗菌剂30-120mg/L，抗氧化剂0.15-1.3g/L。
所述双糖为海藻糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖中的一种或多种。
优选地，所述双糖为海藻糖和蔗糖。
所述电解质盐为氯化钠；所述抗凝剂为EDTA-Na2；所述氨基酸为甘氨酸；所述pH值缓冲剂KH2PO4和Na2HPO4·12H2O；所述抗氧化剂为维生素C和谷胱甘肽；所述抗菌剂为磺胺和甲氧苄啶。
具体地，本发明提供的红细胞保存液，含有以下浓度的原料：海藻糖10.0-20.0g/L，蔗糖5.0-10.0g/L，氯化钠1.0-3.0g/L，EDTA-Na2 3.0-10.0g/L，甘氨酸5.0-10.0g/L，KH2PO4 0.1-0.3g/L，Na2HPO4·12H2O 5-10g/L，磺胺30-90mg/L，甲氧苄啶10-30mg/L，维生素C 0.15-0.45g/L，谷胱甘肽0.3-0.8g/L。pH为7.5-8.5。
进一步地，本发明的红细胞保存液含有以下浓度的原料：海藻糖15.0-20.0g/L，蔗糖5.0-8.0g/L，氯化钠1.5-2.5g/L，EDTA-Na2 6.0-10.0g/L，甘氨酸5.0-8.0g/L，KH2PO40.2-0.3g/L，Na2HPO4·12H2O 8-10g/L，磺胺50-70mg/L，甲氧苄啶10-20mg/L，维生素C0.25-0.35g/L，谷胱甘肽0.4-0.6g/L，pH为7.5-8.5。
优选地，本发明的红细胞保存液含有以下浓度的原料：海藻糖20.0g/L，蔗糖5.0g/L，氯化钠1.5-2.5g/L，EDTA-Na2 6.0-10.0g/L，甘氨酸5.0-8.0g/L，KH2PO4 0.2-0.3g/L，Na2HPO4·12H2O 8-10g/L，磺胺50-70mg/L，甲氧苄啶10-20mg/L，维生素C 0.25-0.35g/L，谷胱甘肽0.4-0.6g/L，pH为7.5-8.5。
更优选地，本发明的红细胞保存液含有以下浓度的原料：海藻糖20.0g/L，蔗糖5.0g/L，氯化钠2.0g/L，EDTA-Na2 10.0g/L，甘氨酸6.0g/L，KH2PO40.3g/L，Na2HPO4·12H2O10g/L，磺胺60mg/L，甲氧苄啶15mg/L，维生素C 0.3g/L，谷胱甘肽0.5g/L，pH为7.5-8.5。
本发明的上述红细胞保存液，其渗透压为360±20mosm。
本发明提供了上述红细胞保存液在体外保存红细胞中的应用。
相比已有的技术，本发明的红细胞保存液有以下优点和效果：
1、现有技术中，商品化红细胞试剂盒的保存液基本上均采用葡萄糖作为能量体系为红细胞体外保存供能，从而维持红细胞的正常结构和功能，而葡萄糖作为单糖，在应用时由于高温灭菌会导致葡萄糖发生美拉德反应，其产生的物质会破坏红细胞进而造成红细胞溶血率较高，一般在保持红细胞1个月后，溶血率普通大于3％。而本发明采用海藻糖+蔗糖联合使用作为红细胞膜的保护剂，海藻糖是一种非还原性二糖，分子式是：C12H22O11.2H2O，不能直接作为红细胞的能源物质。而蔗糖对红细胞低温冷藏时有保护作用，本发明通过实验发现，添加海藻糖和蔗糖的保存液在低温保存红细胞时，能明显降低红细胞的溶血率，减少红细胞的低温伤害。本发明采用海藻糖加蔗糖联合使用保存红细胞，其体外保存红细胞的性能明显优于单独使用葡萄糖。
2、本发明的红细胞保存液中添加了大量的EDTA-Na2，申请人通过试验发现保存液中EDTA-Na2浓度增加后，能有效的解决红细胞体外保存的聚集现象，且添加EDTA-Na2的保存液保存的红细胞配套微柱凝胶卡使用时，能显著的减少红细胞和血浆中的蛋白非特异性的聚集引起的假阳性和柱印记。
3、现有的商品化红细胞试剂中pH偏酸性，申请人发现偏酸性的保存液体外保存红细胞，会加速红细胞溶血，且随着保存时间的延长，红细胞的颜色逐渐变成暗紫色，可能是由于pH偏酸，使红细胞内的氧合血红蛋白易于解离而释放氧气，氧离曲线右移导致氧合血红蛋白减少，去氧血红蛋白增加，从而使红细胞的颜色发生变化。而本发明的红细胞保存液，其pH偏弱碱性，为7.50-8.50，不仅能使保存红细胞体外保存时能持续保持红细胞原有的鲜艳颜色，还能降低红细胞的溶血率，延长红细胞体外保存的时间。
4、本发明的红细胞保存液添加维生素C和谷胱甘肽联合使用发挥抗氧化作用，二者联合使用效果明显优于单独使用的效果的相加，能明显减轻红细胞体外储存的氧化损伤，降低溶血率，延长红细胞体外保存的时间。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
以下实施例按照下表1配方配制基础体系(pH为6.7±0.1，其为红细胞体外保存的一些基础成分，主要为红细胞的保存提供适宜的离子强度和缓冲体系)，在基础体系的基础上，进行各主要成分种类和浓度的筛选(糖类、抗凝剂、pH、抗氧化剂)。
表1
| 原料名称 | 最优浓度 | 适合范围 |
| 氯化钠 | 2.0g/L | 1.0～3.0g/L |
| 甘氨酸 | 6.0g/L | 5.0～10.0g/L |
| KH<sub>2</sub>PO<sub>4</sub> | 0.3g/L | 0.1～0.3g/L |
| Na<sub>2</sub>HPO<sub>4</sub>.12H<sub>2</sub>O | 10.0g/L | 5.0～10.0g/L |
| 磺胺 | 60mg/L | 30～90mg/L |
| 甲氧苄啶 | 15mg/L | 10～30mg/L |
表2
筛选组分时主要观察实验指标：
1、外观检查：在自然光下以矫正视力目视检查。标准：红细胞悬液静置分层后，上层为保存液，其应清晰透明，无杂质和悬浮物。混匀后为红细胞悬液，其颜色应呈鲜红色，且无红细胞聚集。若红细胞溶血后，游离的血红蛋白释放入保存液中，从而使保存液的颜色变成红色，溶血的程度越严重，保存液的颜色越深。
2、镜检：将红细胞悬液混匀后，吸取适量均匀的涂抹到玻片上，在显微镜下观察红细胞的形态(10×，20×)。
标准：正常情况下，红细胞单个散在分布，呈双凹圆盘状。随着保存时间的延长，红细胞的形态发生改变，逐渐变为锯齿状，边缘有很多棘突。在保存后期，红细胞的形态变为球形，很容易发生溶血。
3、溶血率检查：取保存液0.5mL置于试管内，1000g离心5min，分离上清液待用。将Hb标准应用液，取0.02mL置于标准管内，取保存液上清液各0.02mL置于测定管内，取蒸馏水0.02mL置于空白管内。于标准管、测定管、空白管内先加入2g/L邻-甲联苯胺溶液1mL，再加入1g/L过氧化氢溶液1mL，充分混匀，放置10分钟。于标准管、测定管、空白管内加入10％醋酸溶液10mL，充分混合，放置10分钟。于分光光度计435nm进行比色，以空白管调零，读取各管吸光度。结果计算，溶血率计算方式如下：
备注：①标准管浓度，即Hb标准应用液浓度＝血球仪测定浓度÷1000
②3350(mg/L)为1％的红细胞悬液的血红蛋白浓度。
③标准：溶血率<5％。
4、特异性检查：用试管法进行检测，在4只试管内分别添加100μL抗A、抗B、抗D、抗H抗体，再添加100μL浓度为1％的红细胞悬液，1000g离心60S，观察凝集强度。
标准：保存液保存的A1细胞与抗A发生凝集反应，与抗B不发生凝集反应；保存液保存的B细胞与抗B发生凝集反应，与抗A并不发生凝集反应；保存液保存的AB细胞与抗A、抗B均发生凝集反应；保存液保存的O细胞与抗H发生凝集反应，与抗A、抗B不发生凝集反应，保存液保存的Rh阳性红细胞与抗D(IgM)发生凝集反应。
5、灵敏度检查：用试管法进行检测，在4只试管内分别添加100μL抗A、抗B、抗D、抗H抗体，再添加100μL浓度为1％的红细胞悬液，1000g离心60S，观察凝集强度。
标准：保存液保存的A1细胞与抗A反应的凝集强度≥3+；保存液保存的B细胞与抗B反应的凝集强度≥3+；保存液保存的AB细胞与抗A、抗B反应的凝集强度均≥3+；保存液保存的O细胞与抗H反应的凝集强度≥3+；保存液保存的Rh阳性红细胞与抗D(IgM)反应的凝集强度≥3+。
6、重复性检查：用试管法进行检测，取10支试管分别添加100μL抗A抗体、再取10支试管分别添加抗B抗体，再添加100μL浓度为1％的红细胞悬液，1000g离心60S，观察凝集强度
标准：保存液保存的同一红细胞，分别让其和相应抗体发生凝集反应，重复检测10次，要求阳性结果之间凝集强度差异不超过1+，阴性结果均无凝集、溶血和不易分辨的现象。
实施例1红细胞保存液中糖类的筛选与确定
(1)糖类的选择糖类是红细胞保存过程中必不可少的组分，其为红细胞体外代谢提供能量，对红细胞形态的维持和生理功能均有很大作用。本实验的筛选方案如表3所示，是在表1基础配方的基础上，添加了糖类，未加抗凝剂和其他组分。
表3
| 方案 | 组分 | 浓度 |
| 方案1 | 葡萄糖 | 20g/L |
| 方案2 | 海藻糖 | 20g/L |
| 方案3 | 蔗糖 | 20g/L |
| 方案4 | 葡萄糖+海藻糖 | 10g/L+10g/L |
| 方案5 | 海藻糖+蔗糖 | 10g/L+10g/L |
| 方案6 | 蔗糖+葡萄糖 | 10g/L+10g/L |
试验结果见表4。可以发现在分别用葡萄糖、海藻糖、蔗糖单独保存红细胞时，保存效果方面，海藻糖优于葡萄糖优于蔗糖。两两混合保存时，(海藻糖+蔗糖)组合优于(海藻糖+葡萄糖)组合优于(葡萄糖+蔗糖)组合。综合比较，海藻糖+蔗糖保存红细胞的效果最好。
表4
备注：本实验保存了A型RhD阳性红细胞、B型RhD阴性性红细胞。
(2)海藻糖+蔗糖组合的最适浓度的筛选，筛选方案如表5所示。
表5
| 方案 | 组分 | 浓度 |
| 方案1 | 海藻糖+蔗糖 | 5g/L+20g/L |
| 方案2 | 海藻糖+蔗糖 | 10g/L+10g/L |
| 方案3 | 海藻糖+蔗糖 | 20g/L+5g/L |
实验结果见表6。结果发现，当用海藻糖+蔗糖组合保存红细胞时，海藻糖的比例大于蔗糖，保存效果较好。海藻糖的适宜浓度范围为10～20g/L，最优浓度为20g/L，蔗糖的适宜浓度范围为5～10g/L,最优浓度为5g/L。
从以上实验结果还观察到，红细胞普遍出现不同程度的凝集，这可能与保存液中没有添加抗凝剂相关。且随着红细胞保存时间的延长，红细胞的颜色逐渐变暗，这是由于红细胞中去氧血红蛋白增加所致。后续应设计实验调整配方，改良红细胞保存的外观。
表6
实施例2抗凝剂的筛选与确定
(1)抗凝剂的筛选添加抗凝剂的作用主要是防止红细胞非特异性的聚集，在试验中，申请人发现在红细胞保存液中适当的增大抗凝剂的使用量，用于微柱凝胶法进行输血前检查项目时(血型检测、不规则抗体筛查、交叉配血)，能有效减少柱印记、散在红细胞凝集、拖尾等干扰实验结果判读的现象。本实验的筛选方案如下表7所示。
表7
| 方案 | 组分 | 浓度 |
| 方案1 | 肝素 | 5g/L |
| 方案2 | 枸橼酸钠 | 5g/L |
| 方案3 | EDTA-Na<sub>2</sub> | 5g/L |
实验结果如表8。实验发现在添加肝素、枸橼酸钠、EDTA-Na2后均能解决红细胞在保存过程中的聚集现象，但是添加肝素和枸橼酸钠保存红细胞，其溶血的速度明显比EDTA-Na2的速度快。故本发明选择EDTA-Na2作为红细胞保存液的抗凝剂，后续进行浓度的筛选。
表8
(2)EDTA-Na2浓度的筛选
表9不同EDTA-Na2浓度下红细胞各检测指标情况
通过实验发现保存液中添加EDTA-Na2能明显的改善红细胞的聚集情况，但是随着其浓度的增高，红细胞溶血加重，故EDTA-Na2保存液中适宜的添加浓度范围为3g～10g/L，最优浓度为10g/L。
实施例3红细胞保存液pH值的筛选与确定
pH值对红细胞体外保存影响较大，其不仅影响红细胞的代谢，还直接影响氧离曲线，发明人发现偏酸性的保存液体外保存红细胞，会加速红细胞溶血，且随着保存时间的延长，红细胞的颜色逐渐变成暗紫色，可能是由于pH较低，使红细胞内的氧合血红蛋白易于解离而释放氧气，氧离曲线右移导致氧合血红蛋白减少，去氧血红蛋白增加，从而使红细胞的颜色发生变化。本实施例的筛选方案及实验结果如表10所示。
表10
通过实验可以发现，红细胞保存液pH值偏酸性时，随着保存时间的延长，保存液中出现很多气泡，红细胞的色泽变暗，且随着pH值的升高，气泡逐渐减少，红细胞的色泽变得鲜艳。故适当把红细胞保存液的pH提高，不仅能减缓氧合血红蛋白的减少，明显改善红细胞的外观，同时还能降低红细胞的溶血率。本发明将红细胞保存液的pH范围设置在8.0±0.5。
实施例4抗氧化剂筛选实验
(1)抗氧化剂的筛选与浓度确定
红细胞储存时会发生储存损伤，而储存损伤最主要的机制是氧化应激反应，通过在红细胞保存液中添加抗氧化剂抑制细胞内的氧化应激反应来改善红细胞体外储存的质量。筛选方案如表11所示。
表11
实验结果见表12。
表12
通过实验组和对照组的比较，发现在保存液中添加抗氧化剂后，能明显改善红细胞体外保存的形态，降低溶血率。通过对比几种抗氧化剂，谷胱甘肽+维生素联合使用时的效果最好，由于谷胱甘肽和维生素C有协同作用，当还原型谷胱甘肽被氧化成氧化性谷胱甘肽时，维生素C能迅速的将被氧化的谷胱甘肽还原，让其继续发挥抗氧化作用。
从本实验结果来看，超氧化物歧化酶(SOD)的效果不佳，故最终选择谷胱甘肽+维生素C联合使用作为红细胞保存液的抗氧化剂。
(2)抗氧化剂组合浓度的筛选，方案见表13。
表13
| 方案 | 组分 | 浓度 |
| 方案1 | 谷胱甘肽+维生素C | 0.1g/L+0.05g/L |
| 方案2 | 谷胱甘肽+维生素C | 0.3g/L+0.15g/L |
| 方案3 | 谷胱甘肽+维生素C | 0.5g/L+0.3g/L |
| 方案4 | 谷胱甘肽+维生素C | 0.8g/L+0.45g/L |
| 方案5 | 谷胱甘肽+维生素C | 1.0g/L+0.6g/L |
实验结果见表14，结果说明保存液中添加谷胱甘肽的浓度在0.3g/L～0.8g/L，维生素C的浓度在0.15g/L～0.45g/L，保存效果较好。
表14
实施例5本发明红细胞保存液的配制
将上述实施例1-4筛选确定的结果进行组配，本发明红细胞保存液的最佳配方见表15，观察其作为整体组分的效果。
表15
性状观察：溶解完全后液体应为无色或浅黄色澄明液体，无不溶性杂质；
pH测定：待溶解完全后，加入NaOH调整溶液的pH值到8.0±0.5；
渗透压测定：待完全溶解后，按渗透压仪标准操作程序测定渗透压值，渗透压标准范围为360±20mosm；
过滤分装：配制完成后，立即用蠕动泵和过滤器将pH、渗透压测定合格的上述溶液，在洁净工作区中进行过滤除菌，然后按包装规格进行分装，即为红细胞保存液。实验结果如表16-表20所示。
表16
表17
表18
表19
表20
根据实验结果观察，表15配方的红细胞保存液保存红细胞的时间延长到120天，保存期间其性能优于单独筛选的各个组分在红细胞保存中的效果。
实施例6不同厂家红细胞保存液性能比较
材料：Maccura，实施例5制得的红细胞保存液；上海血液生物医药有限责任公司：红细胞稀释液，批号0916011；DiaMed GmbH：稀释液2号，批号05761.76.20。三种液体在保存红细胞时，保存条件一致，均为2-8℃冷藏保存30、60、90、120、150天进行以下实验。
(1)静置分层后外观
表21
从实验结果来看，上海血液生物医药有限责任公司生产的红细胞稀释液保存的红细胞最先出现溶血而使外观检查不合格，其次是DiaMed GmbH的稀释液保存的红细胞出现溶血；Maccura的保存液保存红细胞的外观能达到上述两个厂家的标准，且性能优于两个厂家。
(2)特异性
表22
备注：A(RhD+)为A型RhD抗原阳性细胞；B(RhD+)为B型RhD抗原阳性细胞；O(RhD-)为O型RhD抗原阴性细胞。
从实验结果来看，特异性方面，Maccura和DiaMed GmbH保存液保存红细胞到5个月，性能符合要求。上海血液的保存液保存的红细胞后期会出现假阳性，特异性不符合要求。
(3)灵敏度
表23
从实验结果来看，上海血液生物医药有限责任公司的稀释液保存的红细胞灵敏度检查最先出现不合格，可能是由于该保存液里缺少保护红细胞膜的物质，使红细胞膜抗原在保存过程中发生破坏，从而使灵敏度下降，并出现假阳性。其次是DiaMed GmbH的稀释液保存的红细胞灵敏度下降，且出现假阳性；本发明实施例5制得的保存液保存红细胞的灵敏度在第5月时仍然合格，其性能优于上述两个厂家。
(4)溶血率，结果见表24。
表24
从表24来看，在红细胞保存的不同时期，上海血液生物医药有限责任公司的稀释液保存的红细胞溶血率均高于DiaMed GmbH和Maccura，最先出现检测不合格的情况。其次是DiaMed GmbH的稀释液出现溶血率检测不合格的情况；本发明实施例5制得的保存液保存红细胞的溶血率检查能达到上述两个厂家的标准，且性能优于上述两个厂家。
(5)重复性
表25
从实验结果来看，上海血液的红细胞保存液保存的红细胞在第120天检测时由于出现假阳性而使重复性检测不合格，随后DiaMed GmbH的保存液也出现重复性检测不合格的情况。本发明实施例5制得的红细胞保存液在保存期第5月时，红细胞的重复性检测仍符合要求，其性能优于上海血液和DiaMed GmbH。可见本发明制得的红细胞保存液与商品化红细胞保存液相比，能明显降低红细胞保存时的溶血率，延长红细胞保存时间，在2-8℃保存可达120天，并能避免红细胞体外保存时的聚集现象，市场应用前景良好。
Claims (8)
1.一种红细胞保存液，其特征在于，含有以下浓度的原料：海藻糖10.0-20.0g/L，蔗糖5.0-10.0g/L，电解质盐1.0-3.0g/L，抗凝剂3.0-10.0g/L，氨基酸5.0-10.0g/L，pH值缓冲剂5.1-10.3g/L，抗菌剂30-120mg/L，抗氧化剂0.15-1.3g/L；所述抗氧化剂为维生素C和谷胱甘肽。
2.根据权利要求1所述的红细胞保存液，其特征在于，所述电解质盐为氯化钠；所述抗凝剂为EDTA-Na2；所述氨基酸为甘氨酸；所述pH值缓冲剂为KH2PO4和Na2HPO4·12H2O；所述抗菌剂为磺胺和甲氧苄啶。
3.根据权利要求2所述的红细胞保存液，其特征在于，含有以下浓度的原料：海藻糖10.0-20.0g/L，蔗糖5.0-10.0g/L，氯化钠1.0-3.0g/L，EDTA-Na2 3.0-10.0g/L，甘氨酸5.0-10.0g/L，KH2PO4 0.1-0.3g/L，Na2HPO4·12H2O 5-10g/L，磺胺30-90mg/L，甲氧苄啶10-30mg/L，维生素C 0.15-0.45g/L，谷胱甘肽0.3-0.8g/L。
4.根据权利要求1-3任一所述的红细胞保存液，其特征在于，含有以下浓度的原料：海藻糖15.0-20.0g/L，蔗糖5.0-8.0g/L，氯化钠1.5-2.5g/L，EDTA-Na2 6.0-10.0g/L，甘氨酸5.0-8.0g/L，KH2PO4 0.2-0.3g/L，Na2HPO4·12H2O 8-10g/L，磺胺50-70mg/L，甲氧苄啶10-20mg/L，维生素C 0.25-0.35g/L，谷胱甘肽0.4-0.6g/L，pH为7.5-8.5。
5.根据权利要求1-3任一所述的红细胞保存液，其特征在于，含有以下浓度的原料：海藻糖20.0g/L，蔗糖5.0g/L，氯化钠1.5-2.5g/L，EDTA-Na2 6.0-10.0g/L，甘氨酸5.0-8.0g/L，KH2PO4 0.2-0.3g/L，Na2HPO4·12H2O 8-10g/L，磺胺50-70mg/L，甲氧苄啶10-20mg/L，维生素C 0.25-0.35g/L，谷胱甘肽0.4-0.6g/L，pH为7.5-8.5。
6.根据权利要求5所述的红细胞保存液，其特征在于，含有以下浓度的原料：海藻糖20.0g/L，蔗糖5.0g/L，氯化钠2.0g/L，EDTA-Na2 10.0g/L，甘氨酸6.0g/L，KH2PO4 0.3g/L，Na2HPO4·12H2O 10g/L，磺胺60mg/L，甲氧苄啶15mg/L，维生素C 0.3g/L，谷胱甘肽0.5g/L，pH为7.5-8.5。
7.根据权利要求1-6任一所述的红细胞保存液，其特征在于，其渗透压为360±20mosm。
8.权利要求1-7任一所述的红细胞保存液在体外保存红细胞中的应用。
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