CN107684626A - 介孔二氧化硅‑6‑巯基嘌呤‑顺铂纳米粒, 其制备, 活性和应用 - Google Patents
介孔二氧化硅‑6‑巯基嘌呤‑顺铂纳米粒, 其制备, 活性和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107684626A CN107684626A CN201610635754.3A CN201610635754A CN107684626A CN 107684626 A CN107684626 A CN 107684626A CN 201610635754 A CN201610635754 A CN 201610635754A CN 107684626 A CN107684626 A CN 107684626A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cddp
- msns
- mesoporous silicon
- ismipur
- mouse
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 36
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 title abstract description 13
- 229910052814 silicon oxide Inorganic materials 0.000 title abstract description 4
- 229940117820 purinethol Drugs 0.000 title abstract 2
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 title description 4
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 title description 3
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims abstract description 25
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims abstract description 15
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Substances [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 claims abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 6
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- BOTDANWDWHJENH-UHFFFAOYSA-N Tetraethyl orthosilicate Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)OCC BOTDANWDWHJENH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000010703 silicon Substances 0.000 claims description 4
- UUEWCQRISZBELL-UHFFFAOYSA-N 3-trimethoxysilylpropane-1-thiol Chemical class CO[Si](OC)(OC)CCCS UUEWCQRISZBELL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 abstract description 41
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 14
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 abstract description 5
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 5
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 13
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 10
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 10
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 7
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 description 2
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 description 2
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002389 environmental scanning electron microscopy Methods 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010019851 Hepatotoxicity Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000009096 combination chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000004442 gravimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 231100000304 hepatotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007686 hepatotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 1
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000005543 nano-size silicon particle Substances 0.000 description 1
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 238000000643 oven drying Methods 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- 102000014898 transaminase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N 0.000 description 1
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
- A61K31/52—Purines, e.g. adenine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种纳米级别的介孔二氧化硅‑6巯基嘌呤(6MP)/顺铂(CDDP)的纳米递送体系(MSNS‑6MP/CDDP)。公开了它的制备方法，即在介孔二氧化硅上修饰巯基，通过二硫键连接6MP形成连接6MP的介孔二氧化硅纳米粒(MSNS‑6MP)，在孔道内载入CDDP，形成连接6MP、装载CDDP的介孔二氧化硅纳米粒；公开了它的纳米结构；公开了它抑制S180小鼠肿瘤生长的作用，与常规6MP和CDDP联合应用相比，MSNS‑6MP/CDDP显著延长S180小鼠的生存时间，提高了疗效并降低了全身毒性反应。因而本发明公开了它在制备肿瘤治疗药物中的应用，有良好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种介孔二氧化硅-6-巯基嘌呤(6MP)/顺铂(CDDP)纳米粒(MSNN-6MP/CDDP)。涉及它的制备方法，即在介孔二氧化硅纳米粒表面修饰巯基制备巯基功能化的介孔二氧化硅纳米粒(MSNN)，接着MSNN的巯基和6MP共价结合形成了6-巯基嘌呤-巯基修饰的介孔二氧化硅纳米粒(MSNN-6MP)，最后往MSNN-6MP的纳米孔道加载顺铂，制得纳米级别的介孔二氧化硅-6-巯基嘌呤/顺铂纳米粒(MSNN-6MP/CDDP)。涉及它的抗肿瘤作用。与常规6MP和CDDP联合应用相比，MSNN-6MP/CDDP显著延长S180小鼠的生存时间，提高了疗效并降低了CDDP的全身毒性反应。因而本发明公开了MSNN-6MP/CDDP在制备6MP与CDDP联用的抗肿瘤药物中的应用。本发明的MSNN-6MP/CDDP有良好的临床应用前景。本发明属于生物医药领域。
背景技术
CDDP是最早作为抗肿瘤药物使用的铂络合物，目前仍然是肿瘤化疗效的一线药，应用广泛，作用确切。不过CDDP有严重的肝毒性、心脏毒性和肾毒性。正是这些毒性使CDDP的临床疗效受到限制。为了提高CDDP治疗的癌症病人的生存率和治愈率并降低全身毒性反应，设计了多种联合化疗方案。例如CDDP与gemcitabine联合治疗、CDDP与vinorelbine联合治疗、CDDP与多烯紫杉醇联合治疗等。可是，这些联合治疗方案都没有能够达到提高CDDP治疗的癌症病人的生存率和治愈率并降低全身毒性的目标。
发明人认识到，将药物载入递送载体后常常可以降低毒性反应。为此，发明人进行了长期探索。发明人发现，用巯基修饰介孔二氧化硅纳米粒表面制得巯基化介孔二氧化硅纳米粒(MSNN)之后，便可将MSNN的巯基和6-巯基嘌呤共价结合，形成6-巯基嘌呤共价修饰的MSNN的纳米粒(MSNN-6MP)。MSNN-6MP纳米粒表面有无数孔，往这些孔中加CDDP便可制得加载CDDP的MSNN-6MP纳米粒(MSNN-6MP/CDDP)。发明人还发现，在荷S180瘤的小鼠模型上，由MSNN-6MP/CDDP代表的联合治疗比CDDP加6MP的常规联合治疗有三个优越性。第一个优越性是，MSNN-6MP/CDDP可明显提高S180小鼠的生存期，而CDDP加6MP的常规联合治疗不能。第二个优越性是，MSNN-6MP/CDDP可明显提高S180小鼠的治愈率，而CDDP加6MP的常规联合治疗不能。第三个优越性是， MSNN-6MP/CDDP可明显降低S180小鼠的全身毒性，而CDDP加6MP的常规联合治疗不能。根据这些发现,发明人提出了本发明。
发明内容
本发明的第一个内容是提供一种包载顺铂的共价连接6-巯基嘌呤的介孔二氧化硅纳米粒。
本发明的第二个内容是提供一种共价连接6-巯基嘌呤的介孔二氧化硅纳米粒。
本发明的第三个内容是提供制备共价连接6-巯基嘌呤的介孔二氧化硅纳米粒和包载顺铂的共价连接6-巯基嘌呤的介孔二氧化硅纳米粒的方法，该方法包括：
(1)从十六烷基三甲基溴化铵、正硅酸四乙酯和3-巯丙基三甲氧基硅烷制备MSNN；
(2)6-巯基嘌呤和MSNN偶联制备MSNN-6MP；
(3)用MSNN-6MP包载CDDP制备介孔二氧化硅-6-巯基嘌呤-顺铂的纳米粒。
本发明的第四个内容是提供MSNS-6MP和MSNS-6MP/CDDP纳米粒的制备方法。
本发明的第五个内容是提供MSNS-6MP和MSNS-6MP/CDDP的纳米结构。
本发明的第六个内容是评价MSNS-6MP和MSNS-6MP/CDDP抑制肿瘤生长的作用。
附图说明
图1.MSNS-6MP/CDDP的制备技术路线。MPTMS＝tetraethoxy-silane-3-(trimethoxysilypropane)-1-thiol，CDDP＝cisplatin,6MP＝6-mercaptopurine，TEOS＝tetraethylorthosilicate，MSNS＝巯基修饰的MSN，MSNS-6MP＝6MP共价修饰的MSNS，MSNS-6MP/CDDP＝CDDP装载在MSNS-6MP的孔道中。
图2.MSNS、MSNS-6MP和MSNS-6MP/CDDP的透射电镜图。
图3.MSNS、MSNS-6MP和MSNS-6MP/CDDP的扫描电镜图。
图4.S180荷瘤小鼠用CMCNa、MSNS-6MP和MSNS-6MP/CDDP治疗7天并观察13天的瘤重，n＝12。
图5.S180荷瘤小鼠用CMCNa、CDDP、6MP+CDDP、MSNS-6MP和MSNS-6MP/CDDP治疗7天并观察13天的肿瘤体积，n＝12。
图6.S180荷瘤小鼠用CMCNa、CDDP、6MP+CDDP、MSNS-6MP和MSNS-6MP/CDDP治疗7天并观察13天的生存率。
图7.CMCNa、CDDP、6MP+CDDP、MSNS-6MP/CDDP治疗小鼠的血浆谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)和肌酐(Cr)水平。
具体实施方式
为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。
实施例1制备MSNS-6MP
1.制备MSNS
将1g十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)溶于480mL蒸馏水中，在磁力搅拌下加入3.5mL氢氧化钠(2mol/L)，油浴加热，当烧瓶内温度达到80℃后稳定1h，剧烈搅拌至溶液澄清透明，快速加入5mL正硅酸四乙酯(TEOS)和1mL 3-巯丙基三甲氧基硅烷(MPTMS)，继续在80℃剧烈搅拌下反应2h，随后反应混合物经过蒸馏水和乙醇分别洗涤三次，70℃真空干燥24h，用甲醇350mL(加浓盐酸7mL)回流24h，去除表面活性剂模板，再次用蒸馏水和乙醇分别洗涤三次，70℃真空干燥24h，得到1.2g表面巯基功能化的介孔二氧化硅纳米粒(MSNS)。
2.制备MSNS-6MP
将275mg碘溶于10mL DMSO，使成I2-DMSO溶液。将68mg 6MP溶于2mL DMSO中，冰浴下往里逐滴加入I2-DMSO溶液，紫外分光光度计监测反应，6MP单体峰全部变为二聚体之后，加入1.00g MSNS，避光反应过夜。产物转入离心管，DMSO和无水乙醇反复离心洗涤，用紫外分光光度计检测上清液，至上清中无6MP单体及二聚体残留，即未连接的过量6MP被全部除去，37℃真空干燥沉淀至恒重，得900mg 6MP共价连接的介孔二氧化硅纳米粒(MSNS-6MP)。
实施例2制备MSNS-6MP/CDDP
将40mg CDDP溶于5mL生理盐水中，加入300mg MSNS-6MP，避光，超声振摇30min，37℃磁力搅拌过夜，37℃烘箱干燥，抽滤，生理盐水洗去表面附着的CDDP，37℃真空干燥至恒重，反复3次，得330mg MSNS-6MP/CDDP。重量分析表明，300mg MSNS-6MP/CDDP含30mg CDDP。
实施例3测定MSNS、MSNS-6MP和MSNS-6MP/CDDP的纳米结构
1.测定方法制备MSNS、MSNS-6MP和MSNS-6MP/CDDP的乙醇悬浮液，浓度均为500μg/mL。分别取200μL悬浮液滴加在扫描电镜玻璃片表面，37℃下烘干，在扫描电镜(S-4800，HITACHI，日本)下观察，记录扫描电镜图片。分别取50μL悬浮液，滴加在透射电镜铜网表面，37℃下烘干，在透射电镜(JEM-1230，JEOL，日本)下观察，记录透射电镜图片。
2.测定结果从图2中的透射电镜图像可以看出MSNS、MSNS-6MP和MSNS-6MP/CDDP都是直径在100nm左右的规则球，表面分布有规则孔道。从图3的扫描电镜图像可以看出，MSNS、MSNS-6MP和MSNS-6MP/CDDP均呈较规则球形，直径在100nm左右。
实施例4评价MSNS-6MP、CDDP和MSNS-6MP/CDDP等抑制肿瘤生长活性
1.实验分组雄性ICR小鼠，体重20±2g，从北京维通利华动物实验技术有限公司购买。共分为5组，分别是CMCNa组、CDDP组、6MP+CDDP组、MSNS-6MP组和MSNS-6MP/CDDP组。每组12只小鼠，共60只小鼠。
2.给药剂量CMCNa组的剂量为0.2mL/只、CDDP组的给药剂量为5mg/kg、6MP+CDDP组的给药剂量为1mg/kg 6MP和5mg/kg CDDP、MSNS-6MP组的给药剂量为50mg/kg、MSNS-6MP/CDDP组的给药剂量为50mg/kg。均腹腔注射。
3.荷S180腹水瘤小鼠模型取1×107个/mL S180细胞悬液接种于健康雄性ICR小鼠皮下，0.2mL/只，小鼠接种瘤液后饲养7天至瘤体积(瘤体积＝长×宽2/2)为0.5cm3左右，将全部小鼠随机分为5组，并编号。测量体重，开始给药，每天1次，连续给药7天。
4.测定瘤重每组小鼠连续给药7天后，再饲养6天。于第13天小鼠称体重、接受乙醚麻醉、脱颈椎处死、解剖小鼠取瘤称重。数据统计均采用t检验和方差分析，以(mean±SD,g)表示，结果见图4。
5.测定瘤体积每组连续给药7天后，再饲养6天。于第13天小鼠称体重、接受乙醚麻醉、脱颈椎处死、解剖小鼠取瘤测量体积。给药过程中，隔天用游标卡尺体外测量小鼠瘤长宽，计算肿瘤体积(瘤体积＝长×宽2/2)。结果见图5。
6.测定结果瘤重是动物实验中反映药物抗肿瘤效果的主要评价指标，从图4中可看出MSNS-6MP组小鼠的瘤重明显小于CMCNa组小鼠的瘤重，MSNS-6MP/CDDP组小鼠的瘤重明显小于MSNS-6MP组小鼠的瘤重。结果表明，虽然MSNS-6MP组有较好的抗肿瘤效果，但是载入CDDP后的MSNS-6MP/CDDP的抗肿瘤效果更好。
从图5瘤体积结果可见，整个实验过程中，各组肿瘤均处于持续增长状态，CMCNa组的增长速度明显快于各给药组。CDDP和6MP+CDDP治疗的S180小鼠第八天开始大量死亡，因此只能测得第七天的瘤体积。前5天各给药组小鼠肿瘤的生长速度较缓慢，第5天开始速生长。第7天时，CDDP组，CDDP+6MP组和MSNS-6MP/CDDP组小鼠瘤体积没有明显差异。第13天CMCNa组小鼠的瘤体积远远大于MSNS-6MP治疗组小鼠的瘤体积，而MSNS-6MP组小鼠的瘤体积明显大于MSNS-6MP/CDDP组小鼠的瘤体积。结果表明，虽然MSNS-6MP组有较好的抗肿瘤效果，但是载入CDDP后的MSNS-6MP/CDDP的抗肿瘤效果更好。
实施例5评价MSNS-6MP、CDDP和MSNS-6MP/CDDP等的全身毒性
1.生存期分析给药期间观察小鼠的存活情况，记录各组每只小鼠的生存时间，结果见图6。
2.测定血浆谷丙转氨酶，谷草转氨酶和肌酐
S180小鼠连续给药7天后，继续观察6天，于第13天小鼠摘眼球取血，用3.8％柠檬酸钠抗凝，每1mL血液加抗凝剂100μL，血液离心(4000rpm，10min)后取上清即为血浆，采用谷丙转氨酶(GPT)试剂盒、谷草转氨酶(GOT)试剂盒和肌酐(Cr)试剂盒(南京建成生物工程研究所)检测，按照标准曲线计算血浆中谷丙转氨酶，谷草转氨酶和肌酐的含量，考察毒性反应，结果见图7。
3.测定结果小鼠生存结果见图6。CDDP给药第7天小鼠生存率为91.7％，第8天生存率为50.0％，第9天生存率33.3％，第10天生存率为16.7％。6MP+CDDP给药第8天小鼠生存率为58.3％，第9天生存率为41.7％，第10天生存率为25.0％，第11天生存率为16.67％。CMCNa组、MSNS-6MP组和MSNS-6MP/CDDP组小鼠第13天的生存率均为100％。说明CDDP加载到MSNS-6MP上可极大地降低全身毒性。小鼠血浆生化结果见图7。6MP+CDDP组小鼠的血浆GOT、GPT和Cr水平均明显高于CMCNa组小鼠的血浆GOT、GPT和Cr水平。而MSNS-6MP/CDDP组小鼠的血浆GOT、GPT和Cr水平与CMCNa组小鼠的血浆GOT、GPT和Cr水平无显著性差异。可见，CDDP加载到MSNS-6MP上可极大地降低肝、肾和心脏毒性。
Claims (4)
1.一种共价连接6-巯基嘌呤的介孔二氧化硅纳米粒。
2.一种包载顺铂的共价连接6-巯基嘌呤的介孔二氧化硅纳米粒。
3.制备权利要求1的共价连接6-巯基嘌呤的介孔二氧化硅纳米粒和权利要求2的包载顺铂的共价连接6-巯基嘌呤的介孔二氧化硅纳米粒的方法，该方法包括：
(1)从十六烷基三甲基溴化铵、正硅酸四乙酯和3-巯丙基三甲氧基硅烷制备MSNN；
(2)6-巯基嘌呤和MSNN偶联制备MSNN-6MP；
(3)用MSNN-6MP包载CDDP制备介孔二氧化硅-6-巯基嘌呤-顺铂的纳米粒。
4.权利要求1的共价连接6-巯基嘌呤的介孔二氧化硅纳米粒和权利要求2的包载顺铂的共价连接6-巯基嘌呤的介孔二氧化硅纳米粒在制备抗肿瘤药物中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610635754.3A CN107684626A (zh) | 2016-08-05 | 2016-08-05 | 介孔二氧化硅‑6‑巯基嘌呤‑顺铂纳米粒, 其制备, 活性和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610635754.3A CN107684626A (zh) | 2016-08-05 | 2016-08-05 | 介孔二氧化硅‑6‑巯基嘌呤‑顺铂纳米粒, 其制备, 活性和应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107684626A true CN107684626A (zh) | 2018-02-13 |
Family
ID=61151702
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610635754.3A Pending CN107684626A (zh) | 2016-08-05 | 2016-08-05 | 介孔二氧化硅‑6‑巯基嘌呤‑顺铂纳米粒, 其制备, 活性和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107684626A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114748641A (zh) * | 2022-04-22 | 2022-07-15 | 南方医科大学南方医院 | 一种硅纳米复合物的制备方法及其在增强胃癌细胞天然免疫应答中的应用 |
-
2016
- 2016-08-05 CN CN201610635754.3A patent/CN107684626A/zh active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114748641A (zh) * | 2022-04-22 | 2022-07-15 | 南方医科大学南方医院 | 一种硅纳米复合物的制备方法及其在增强胃癌细胞天然免疫应答中的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ding et al. | A multimodal Metal-Organic framework based on unsaturated metal site for enhancing antitumor cytotoxicity through Chemo-Photodynamic therapy | |
| Xie et al. | Hybrid nanoparticles for drug delivery and bioimaging: mesoporous silica nanoparticles functionalized with carboxyl groups and a near-infrared fluorescent dye | |
| CN105056233B (zh) | 具有近红外光热和体内荧光成像特性的多功能介孔二氧化硅纳米粒及其制备方法和应用 | |
| CN104434806B (zh) | 一种具有高载药量及主动靶向效应的脂质混合plga纳米粒 | |
| CN105193831B (zh) | 一种负载吲哚菁绿的自组装多功能纳米靶向系统的制备方法及其应用 | |
| CN104758930B (zh) | 一种基于磁性氧化石墨烯原位凝胶的制备方法及其应用 | |
| CN106821985B (zh) | 一种适配体修饰的携氧载药多功能脂质体复合物 | |
| Zhang et al. | Size effect of mesoporous organosilica nanoparticles on tumor penetration and accumulation | |
| Zhang et al. | Redox-and light-responsive alginate nanoparticles as effective drug carriers for combinational anticancer therapy | |
| CN103213967B (zh) | 一种磁性水溶性碳纳米管及其制备方法和应用 | |
| CN105641696B (zh) | 一种金钆复合纳米材料、制备方法及其用途 | |
| CN106039326A (zh) | 一种锆‑卟啉金属有机框架材料的纳米抗癌探针的制备方法 | |
| CN102319436A (zh) | 叶酸修饰的o-羧甲基壳聚糖-脱氧胆酸复合物及其制备方法与应用 | |
| CN106832059A (zh) | 一种具有肿瘤靶向性的厄洛替尼‑Cy7‑壳聚糖聚合物 | |
| CN104548109B (zh) | 生物医学组合物 | |
| CN102898543B (zh) | 一种水溶性碳纳米管及其应用 | |
| Yuan et al. | Systemic delivery of micelles loading with paclitaxel using N-succinyl-palmitoyl-chitosan decorated with cRGDyK peptide to inhibit non-small-cell lung cancer | |
| Gao et al. | AuNRs@ MIL-101-based stimuli-responsive nanoplatform with supramolecular gates for image-guided chemo-photothermal therapy | |
| CN104368003B (zh) | 一种透明质酸修饰的Au掺杂二氧化钛纳米管的制备方法及其应用 | |
| CN107737348A (zh) | 一种肺癌靶向自组装纳米粒的制备方法 | |
| Zeng et al. | Reduction/pH-responsive disassemblable MOF-microbial nanohybrid for targeted tumor penetration and synergistic therapy | |
| CN104940945A (zh) | 一种透明质酸修饰的中空介孔硫化铜复合物及其制备方法与应用 | |
| CN105012271A (zh) | 一种共担载阿霉素和trail的白蛋白纳米粒靶向制剂及制备方法 | |
| Hu et al. | Biodegradable polydopamine and tetrasulfide bond co-doped hollowed mesoporous silica nanospheres as GSH-triggered nanosystem for synergistic chemo-photothermal therapy of breast cancer | |
| CN113171342A (zh) | 一种基于透明质酸的肿瘤靶向纳米胶束及其制备和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20180213 |