CN107677839A - 一种d‑二聚体和fdp复合质控品的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种D‑二聚体和FDP复合质控品的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：(1)将新鲜血液倒入预先放置了玻璃珠的玻璃容器内，然后水平摇晃；(2)将步骤(1)中得到的漂浮在血液上面的白色纤维蛋白原复溶；(3)用蛋白酶将步骤(2)得到的纤维蛋白原酶解，得到D‑二聚体和FDP复合母液；(4)将步骤(3)得到的复合母液用保护液进行稀释，使复合母液中的D‑二聚体和FDP达到目标浓度，获得D‑二聚体和FDP复合质控品。本发明所述制备方法操作简单，浓度准确、便于规模化生产，为临床医学上对D‑二聚体和FDP的检测提供了准确可靠的质控品。
Description
技术领域
本发明属于体外诊断试剂技术领域，涉及一种D-二聚体和FDP复合质控品的制备方法。
背景技术
在血凝检验中，经常需要测定D-二聚体、纤维蛋白和纤维蛋白原的降解产物(Fibringen and Fibrin Degradation Porducts，FDP)的含量。随着技术的发展，越来越多的血凝检测通过自动化的血凝分析仪完成，为了监控仪器的运行情况，需要用到D-二聚体和FDP的质控品。
从人血浆中直接分离D-二聚体或FDP来源有限、产量低，可从动物血浆中制备D-二聚体或FDP质控品解决来源问题。
单一的含有D-二聚体或FDP的质控品使用不便，且由于分别配制质控品的过程中的操作误差会影响质控品的准确度。目前，已有D-二聚体和FDP复合质控品的报道。CN104458367A公开了一种D-二聚体和FDP复合质控品及其制备方法。所述D-二聚体和FDP复合质控品的制备方法为：在钙离子存在的条件下，在血浆中加入凝血酶，使血浆完全凝固；捣碎凝固的血浆，加入酶溶液进行酶解反应以降解纤维蛋白，反应完全后，破坏酶活性以终止酶解反应，得到D-二聚体和FDP复合母液；用保护液D-二聚体和FDP复合母液进行稀释，使复合母液中D-二聚体和FDP达到目标浓度，获得复合质控品。所述制备方法虽然得到了D-二聚体和FDP复合质控品，但是由于在制备过程中极易产生固体颗粒，导致降解纤维蛋白的反应不彻底，形成较大的浪费；另外在捣碎血浆的时候，极易使纤维蛋白失活，进而降低复合质控品的品质。
目前，急需一种工艺简单，可以降低血浆的浪费并且不会降低复合质控品活性的制备方法。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供了一种D-二聚体和FDP复合质控品的制备方法，所述制备方法工艺简单，极大程度的提高纤维蛋白原的产率，减少浪费，并且在制备过程中极大程度的保持了纤维蛋白的活性，保证了复合质控品的质量。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
一方面，本发明提供了一种D-二聚体和FDP复合质控品的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
(1)将新鲜血液倒入预先放置了玻璃珠的玻璃容器内，然后水平摇晃；
(2)将步骤(1)中得到的漂浮在血液上面的白色纤维蛋白原复溶；
(3)用蛋白酶将步骤(2)得到的纤维蛋白原酶解，得到D-二聚体和FDP复合母液；
(4)将步骤(3)得到的复合母液用保护液进行稀释，使复合母液中的D-二聚体和FDP达到目标浓度，获得D-二聚体和FDP复合质控品。
本发明提供的如上所述的制备方法，可以提高从血液中获得的纤维蛋白原的产率，完全避免了因为血浆凝固成颗粒之后，蛋白酶降解纤维蛋白不完全造成的纤维蛋白的浪费的问题；并且在本发明中不包含“捣碎”这一过程，从而避免了在捣碎过程中，由于所用器具或者力度等问题造成纤维蛋白失活等问题，这样可以完全避免因为失活等问题造成的复合质控品品质下降，进而影响对血凝分析仪的检测等情况的发生。
在本发明中，步骤(1)中所述新鲜血液选自SPF实验动物心脏取血，所述SPF实验动物优选SPF实验兔。
优选地，步骤(1)中所述新鲜血液的加入量为所述玻璃容器的2/5-4/5(例如2/5、1/2、3/5、2/3、4/5等)，优选3/5。
在本发明中，步骤(1)中所述玻璃珠的直径为0.3-0.7cm(例如0.3cm、0.4cm、0.5cm、0.6cm、0.7cm等)，优选0.5cm。
优选地，所述玻璃珠的个数为25-35颗(例如25、27、28、30、33、35等)，优选30颗。
优选地，步骤(1)中所述玻璃容器为三角瓶，优选250mL的三角瓶。
在本发明中提到的水平摇晃可以是快速但是轻柔的摇晃，不要上下剧烈晃动。
在本发明中，步骤(2)中所述复溶选用无菌生理盐水作为溶剂。
采用本发明提供的步骤(1)和(2)得到的纤维蛋白没有经过血浆凝固、捣碎的过程，避免了蛋白酶降解纤维蛋白不完全以及捣碎导致的失活等问题，从而极大程度的提高了纤维蛋白的数量及质量，进而保证了利用本发明所述制备方法得到的D-二聚体和FDP复合质控品的品质。
在本发明中，步骤(3)中所述蛋白酶为中性蛋白酶。
优选地，步骤(3)所述蛋白酶的浓度为2000IU/mL；
优选地，相对于1mL步骤(2)复溶后的纤维蛋白原溶液，步骤(3)所述蛋白酶用量为50-200IU，例如50IU、60IU、77IU、85IU、100IU、123IU、198IU、200IU等。
在本发明中，步骤(3)中所述酶解的条件为35-38℃酶解10-15小时。
所述酶解的条件为35-38℃，例如35℃、36℃、37℃、38℃等；所述酶解的时间为10-15小时，例如10小时、11小时、12小时、13小时、14小时、15小时等。
优选地，步骤(3)还包括所述酶解后，对酶解反应的终止，终止条件为升温至50-100℃保持2-8小时。
所述终止条件为升温至50-100℃，例如50℃、60℃、71℃、86℃、99℃、100℃等；保持2-8小时，例如2小时、4小时、5小时、7小时、8小时等。
在本发明中，步骤(4)中还包括D-二聚体和FDP达到目标浓度后进行冻干的步骤。
在D-二聚体和FDP达到目标浓度后，可以根据需求来决定是否需要将其进行冻干，得到D-二聚体和FDP复合质控品。
本领域技术人员能够理解，质控品有高值、中值和低值之分，根据需要改变稀释比例，即可获得目标浓度的D-二聚体和FDP复合质控品。在本发明中，取步骤(3)所述复合母液，使用D-二聚体和FDP检测试剂盒对稀释后的复合母液进行测试，使D-二聚体和FDP达到目标浓度。
优选地，步骤(4)所述保护液的成分为：HEPES 1％-3％(w/v)、海藻糖0.1-1g/L、牛血清白蛋白20-50g/L和甘露醇10-30g/L。
在本发明中，所述保护液中的HEPES的浓度为1％-3％(w/v)，例如1％、2％、3％等。
在本发明中，所述保护液中的海藻糖的浓度为0.1-1g/L，例如0.1g/L、0.2g/L、0.4g/L、0.5g/L、0.7g/L、1g/L等。
在本发明中，所述保护液中的牛血清白蛋白的浓度为20-50g/L，例如20g/L、25g/L、30g/L、38g/L、42g/L、50g/L等。
在本发明中，所述保护液中的甘露醇的浓度为10-30g/L，例如10g/L、15g/L、20g/L、25g/L、28g/L、30g/L等。
优选地，步骤(4)中所述D-二聚体的目标浓度为0.1-5mg/L，例如0.1mg/L、0.2mg/L、0.8mg/L、1.9mg/L、2.6mg/L、3mg/L、4mg/L、5mg/L等。
优选地，步骤(4)中所述FDP的目标浓度为1-60mg/L，例如1mg/L、10mg/L、25mg/L、30mg/L、42mg/L、45mg/L、50mg/L、60mg/L等。
在本发明中，所述制备方法包括如下步骤：
(1)SPF实验动物心脏取血140-160mL倒入预先放置了25-35颗直径为0.3-0.7cm玻璃珠的三角瓶内，然后水平摇晃；
(2)将步骤(1)中得到的漂浮在血液上面的白色纤维蛋白原用无菌生理盐水复溶；
(3)用浓度为2000IU/mL的中性蛋白酶将步骤(2)得到的纤维蛋白原酶解，相对于1mL步骤(2)复溶后的纤维蛋白原溶液，所述蛋白酶用量为50-200IU，35-38℃酶解10-15小时，然后升温至50-100℃保持2-8小时终止酶解反应，得到D-二聚体和FDP复合母液；
(4)将步骤(3)得到的复合母液用成分为HEPES 1％-3％(w/v)、海藻糖0.1-1g/L、牛血清白蛋白20-50g/L和甘露醇10-30g/L的保护液进行稀释，获得浓度为0.1-5mg/L的D-二聚体和浓度为1-60mg/L的FDP的复合质控品，进行冻干。
在本发明中，所述制备方法包括如下步骤：
(1)SPF实验兔心脏取血150mL倒入预先放置了30颗直径为0.5cm玻璃珠的250mL三角瓶内，然后水平摇晃；
(2)将步骤(1)中得到的漂浮在血液上面的白色纤维蛋白原用无菌生理盐水复溶；
(3)用浓度为2000IU/mL的中性蛋白酶将步骤(2)得到的纤维蛋白原酶解，相对于1mL步骤(2)复溶后的纤维蛋白原溶液，步骤(3)所述蛋白酶用量为100IU，38℃酶解15小时，然后升温至100℃保持4小时终止酶解反应，得到D-二聚体和FDP复合母液；
(4)将步骤(3)得到的复合母液用成分为HEPES 2％(w/v)、海藻糖0.5g/L、牛血清白蛋白35g/L和甘露醇20g/L的保护液进行稀释，获得浓度为2.5mg/L的D-二聚体和浓度为30mg/L的FDP的复合质控品，进行冻干。
在本发明中，根据如上所述的制备方法制备得到的D-二聚体和FDP复合质控品。
利用本发明所述的方法得到的D-二聚体和FDP复合质控品检测血凝分析仪的运行情况，效果好，误差小；并且可以同时用于D-二聚体和FDP两个项目的检测。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
本发明提供的D-二聚体和FDP复合质控品的制备方法采用SPF实验动物作为原材料，成本低廉，易于获取；通过新鲜血液脱纤维过程获得纤维蛋白原，纯度高，稳定性好，活性高；可以一次性制备同时用于D-二聚体和FDP两个项目的测试的复合质控品，工艺简单易行；并且本发明提供的制备方法极大程度的避免了因为血浆凝固成颗粒之后，蛋白酶降解纤维蛋白不完全造成的纤维蛋白的浪费的问题；并且避免了在捣碎过程中纤维蛋白失活等问题，这样可以完全避免因为失活等问题造成的复合质控品品质下降，进而影响对血凝分析仪的监控等情况的发生；本发明提供的如上所述的制备方法极大程度的提高了纤维蛋白的数量及质量，进而保证了利用本发明所述制备方法得到的D-二聚体和FDP复合质控品的品质。
利用本发明所述制备方法得到的D-二聚体和FDP复合质控品冻干后复溶均一性好，十五分钟即可混合均匀，可代替进口产品同时用于D-二聚体和FDP的质量监控；检测血凝分析仪的运行情况的效果好，误差小。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
实施例1
本实施例中的D-二聚体和FDP复合质控品的制备方法如下：
(1)SPF实验兔心脏取血150mL倒入预先放置了30颗直径为0.5cm玻璃珠的250mL三角瓶内，水平摇晃。
(2)将步骤(1)中得到的漂浮在血液上面的白色纤维蛋白原用无菌生理盐水复溶。
(3)用浓度为2000IU/mL的中性蛋白酶将步骤(2)得到的纤维蛋白原酶解，相对于1mL步骤(2)复溶后的纤维蛋白原溶液，步骤(3)所述蛋白酶用量为50IU，38℃酶解10小时，然后升温至100℃保持2小时终止酶解反应，得到D-二聚体和FDP复合母液；
(4)将步骤(3)得到的复合母液用成分为HEPES 2％(w/v)、海藻糖0.5g/L、牛血清白蛋白35g/L和甘露醇20g/L的保护液进行稀释，获得浓度为3.5mg/L的D-二聚体和浓度为4.2mg/L的FDP的复合质控品。
实施例2
本实施例中的D-二聚体和FDP复合质控品的制备方法如下：
(1)SPF实验牛心脏取血200mL倒入预先放置了35颗直径为0.7cm玻璃珠的500mL三角瓶内，水平摇晃。
(2)将步骤(1)中得到的漂浮在血液上面的白色纤维蛋白原用无菌生理盐水复溶。
(3)用浓度为2000IU/mL的中性蛋白酶将步骤(2)得到的纤维蛋白原酶解，相对于1mL步骤(2)复溶后的纤维蛋白原溶液，步骤(3)所述蛋白酶用量为80IU，35℃酶解15小时，然后升温至50℃保持8小时终止酶解反应，得到D-二聚体和FDP复合母液。
(4)将步骤(3)得到的复合母液用成分为HEPES 1％(w/v)、海藻糖1g/L、牛血清白蛋白20g/L和甘露醇30g/L的保护液进行稀释，获得浓度为0.1mg/L的D-二聚体和浓度为1mg/L的FDP的复合质控品。
实施例3
本实施例中的D-二聚体和FDP复合质控品的制备方法如下：
(1)SPF实验鼠心脏取血120mL倒入预先放置了25颗直径为0.3cm玻璃珠的150mL三角瓶内，水平摇晃。
(2)将步骤(1)中得到的漂浮在血液上面的白色纤维蛋白原用无菌生理盐水复溶。
(3)用浓度为2000IU/mL的中性蛋白酶将步骤(2)得到的纤维蛋白原酶解，相对于1mL步骤(2)复溶后的纤维蛋白原溶液，步骤(3)所述蛋白酶用量为100IU，36℃酶解13小时，然后升温至70℃保持5小时终止酶解反应，得到D-二聚体和FDP复合母液；
(4)将步骤(3)得到的复合母液用成分为HEPES 3％(w/v)、海藻糖0.1g/L、牛血清白蛋白50g/L和甘露醇10g/L的保护液进行稀释，获得浓度为5mg/L的D-二聚体和浓度为60mg/L的FDP的复合质控品。
实施例4
本实施例中的D-二聚体和FDP复合质控品的制备方法如下：
(1)SPF实验兔心脏取血300mL倒入预先放置了35颗直径为0.5cm玻璃珠的500mL三角瓶内，水平摇晃。
(2)将步骤(1)中得到的漂浮在血液上面的白色纤维蛋白原用无菌生理盐水复溶。
(3)用浓度为2000IU/mL的中性蛋白酶将步骤(2)得到的纤维蛋白原酶解，相对于1mL步骤(2)复溶后的纤维蛋白原溶液，步骤(3)所述蛋白酶用量为200IU，37℃酶解12小时，然后升温至80℃保持4小时终止酶解反应，得到D-二聚体和FDP复合母液；
(4)将步骤(3)得到的复合母液用成分为HEPES 3％(w/v)、海藻糖1g/L、牛血清白蛋白50g/L和甘露醇30g/L的保护液进行稀释，获得浓度为5mg/L的D-二聚体和浓度为60mg/L的FDP的复合质控品。
实验例5
本实施例中的D-二聚体和FDP复合质控品的制备方法如下：
(1)SPF实验兔心脏取血150mL倒入预先放置了30颗直径为0.5cm玻璃珠的250mL三角瓶内，水平摇晃。
(2)将步骤(1)中得到的漂浮在血液上面的白色纤维蛋白原用无菌生理盐水复溶。
(3)用浓度为2000IU/mL的中性蛋白酶将步骤(2)得到的纤维蛋白原酶解，相对于1mL步骤(2)复溶后的纤维蛋白原溶液，步骤(3)所述蛋白酶用量为150IU，33℃酶解13小时，然后升温至70℃保持6小时终止酶解反应，得到D-二聚体和FDP复合母液；
(4)将步骤(3)得到的复合母液用成分为HEPES 3％(w/v)、海藻糖1g/L、牛血清白蛋白30g/L和甘露醇20g/L的保护液进行稀释，获得浓度为2.5mg/L的D-二聚体和浓度为30mg/L的FDP的复合质控品。
实验例1
值得注意的是，实验例1-4中所用的D-二聚体和FDP复合质控品均为已经进行过冻干处理的复合质控品，即在实验测试之前，均已按照本实验例提供的低温冻干的步骤进行冻干：取D-二聚体和FDP复合质控品20mL，按1mL每瓶进行分装，低温冻干。
本实验例用于测试复合质控品的溶解性检测，步骤如下：
随机抽取实施例1-5提供的复合质控品各一瓶，分别采用1mL去离子水溶解，间隔1分钟倒置轻微摇晃，15分钟后，观察各瓶中溶解情况。
观察到各瓶均在15分钟内溶解混合均匀，瓶中为淡黄色澄清透明液体。
实验例2
本实验例用于测试复合质控品的批间差检测，具体如下：
重复采用实施例1提供的制备方法5次，制备得到5组复合质控品，按制备的先后顺序依次记为1、2、3、4、5。
实施例1-1到实施例1-5中每组各随机选取一瓶复合质控品，分别采用1mL去离子水溶解，等到复合质控品完全溶解后，采用D-二聚体和FDP检测试剂盒进行测试。
检测结果如表1所示：
表1
由表1中的数据可以看出按实施例1提供的方法得到的复合质控品批间差在5％以内，符合要求。
同样对实施例2-5的方法同样进行如上所述批间差检测，同样可以得到批间差在5％以内，符合要求。
实验例3
本实验例用于对实施例1提供的D-二聚体和FDP复合质控品的开瓶稳定性进行测试，具体如下：
实施例1提供的复合质控品随机抽取一瓶，采用1mL去离子水溶解，等到复合质控品完全溶解后保存于2-8℃的环境中，采用D-二聚体和FDP检测试剂盒进行测试，从保存的第一天开始，选取每天中固定的时间进行测试，连续测试7天。
检测结果如表2：
表2
由表2的数据可以看出，实施例1中提供的D-二聚体和FDP复合质控品在开瓶后7天内变化不大，差异均在5％以内，符合要求。
同样对实施例2-5的方法同样进行如上所述开瓶稳定性测试，同样可以得出D-二聚体和FDP复合质控品在开瓶后7天内变化不大，差异均在5％以内，符合要求。
实验例4
本实验例用于对实施例1提供的D-二聚体和FDP复合质控品的长期稳定性进行测试，具体如下：
将实施例1提供的复合质控品密封保存于2-8℃的环境中，采用D-二聚体和FDP检测试剂盒进行测试，在测试之前，首先取1mL去离子水溶解复合质控品，等到复合质控品完全溶解后才可以进行测试；从保存的第一个月开始，选取每月中固定的时间进行测试，每次测试均为随机选取实施例1提供的复合质控品其中的一瓶，连续测试14个月。
测试结果如表3：
表3
由表中数据可知，实施例1中提供的D-二聚体和FDP复合质控品在14个月内可稳定保存，稳定性好。
同样对实施例2-5的方法同样进行如上所述长期稳定性测试，同样可以得出D-二聚体和FDP复合质控品在14个月内可稳定保存，稳定性好。
实验例1-4的结果表明，本发明制备的D-二聚体和FDP复合质控品，复溶快、均一性高、组分稳定，D-二聚体和FDP之间可以长期稳定共存，使用复合质控品会方便临床实验的日常质量监测；本发明提供的D-二聚体和FDP复合质控品用SPF实验动物血液制备，来源不受限制，便于规模化和标准化生产。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的D-二聚体和FDP复合质控品的制备方法，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (10)
1.一种D-二聚体和FDP复合质控品的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(1)将新鲜血液倒入预先放置了玻璃珠的玻璃容器内，然后水平摇晃；
(2)将步骤(1)中得到的漂浮在血液上面的白色纤维蛋白原复溶；
(3)用蛋白酶将步骤(2)得到的纤维蛋白原酶解，得到D-二聚体和FDP复合母液；
(4)将步骤(3)得到的复合母液用保护液进行稀释，使复合母液中的D-二聚体和FDP达到目标浓度，获得D-二聚体和FDP复合质控品。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述新鲜血液选自SPF实验动物心脏取血，所述SPF实验动物优选SPF实验兔；
优选地，步骤(1)中所述新鲜血液的加入量为所述玻璃容器的2/5-4/5，优选为所述玻璃容器的3/5。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述玻璃珠的直径为0.3-0.7cm，优选0.5cm；
优选地，所述玻璃珠的个数为25-35颗，优选30颗；
优选地，步骤(1)中所述玻璃容器为三角瓶，优选250mL的三角瓶。
4.根据权利要求1-3中的任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述复溶选用无菌生理盐水作为溶剂。
5.根据权利要求1-4中的任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述蛋白酶为中性蛋白酶；
优选地，步骤(3)所述蛋白酶的浓度为2000IU/mL；
优选地，相对于1mL步骤(2)复溶后的纤维蛋白原溶液，步骤(3)所述蛋白酶用量为50-200IU。
6.根据权利要求1-5中的任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述酶解的条件为35-38℃酶解10-15小时；
优选地，步骤(3)还包括所述酶解后，对酶解反应的终止，终止条件为升温至50-100℃保持2-8小时。
7.根据权利要求1-6中的任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中还包括D-二聚体和FDP达到目标浓度后进行冻干的步骤；
优选地，步骤(4)所述保护液的成分为：HEPES 1％-3％(w/v)、海藻糖0.1-1g/L、牛血清白蛋白20-50g/L和甘露醇10-30g/L；
优选地，步骤(4)中所述D-二聚体的目标浓度为0.1-5mg/L，所述FDP的目标浓度为1-60mg/L。
8.根据权利要求1-7中的任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(1)SPF实验动物心脏取血量为三角瓶的2/5-4/5，将血液倒入预先放置了25-35颗直径为0.3-0.7cm玻璃珠的三角瓶内，然后水平摇晃；
(2)将步骤(1)中得到的漂浮在血液上面的白色纤维蛋白原用无菌生理盐水复溶；
(3)用浓度为2000IU/mL的中性蛋白酶将步骤(2)得到的纤维蛋白原酶解，相对于1mL步骤(2)复溶后的纤维蛋白原溶液，所述蛋白酶用量为50-200IU，35-38℃酶解10-15小时，然后升温至50-100℃保持2-8小时终止酶解反应，得到D-二聚体和FDP复合母液；
(4)将步骤(3)得到的复合母液用成分为HEPES 1％-3％(w/v)、海藻糖0.1-1g/L、牛血清白蛋白20-50g/L和甘露醇10-30g/L的保护液进行稀释，获得浓度为0.1-5mg/L的D-二聚体和浓度为1-60mg/L的FDP的复合质控品，进行冻干。
9.根据权利要求1-8中的任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(1)SPF实验兔心脏取血150mL倒入预先放置了30颗直径为0.5cm玻璃珠的250mL三角瓶内，然后水平摇晃；
(2)将步骤(1)中得到的漂浮在血液上面的白色纤维蛋白原用无菌生理盐水复溶；
(3)用浓度为2000IU/mL的中性蛋白酶将步骤(2)得到的纤维蛋白原酶解，相对于1mL步骤(2)复溶后的纤维蛋白原溶液，所述蛋白酶用量为100IU，38℃酶解15小时，然后升温至100℃保持4小时终止酶解反应，得到D-二聚体和FDP复合母液；
(4)将步骤(3)得到的复合母液用成分为HEPES 2％(w/v)、海藻糖0.5g/L、牛血清白蛋白35g/L和甘露醇20g/L的保护液进行稀释，获得浓度为2.5mg/L的D-二聚体和浓度为30mg/L的FDP的复合质控品，进行冻干。
10.根据权利要求1-9中的任一项所述的制备方法制备得到的D-二聚体和FDP复合质控品。
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