CN105277402A - 一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂 - Google Patents
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Abstract
一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂，涉及痰液粘液蛋白的赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键的酶切，尤其是加速其断裂而达到快速液化。解决细菌培养用痰液快速液化这一公认难题。用于痰液的快速液化，有利于痰液细菌半定量分离培养鉴定。对痰液不稀释，对细菌不杀灭，制剂保质期长。
Description
技术领域
涉及痰液粘液蛋白的赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键的酶切，尤其是加速其断裂而达到快速液化。
背景技术
细菌培养所用痰液的快速液化为公认的难题。目前所用方法是1%胰酶液消化法，该法不足之处：一是消化时间长，要60-90分钟，个别痰液需再延长时间;二是对痰液有稀释，影响结果的真实性；三是制剂保质期短，只有2周。
发明内容
痰液快速液化剂，1.只需5-20分钟液化痰液，对少部分高浓稠、高粘滞痰液也能在35分钟内使之液化；2.不稀释标本，结果真实；3.保质期长，可有效使用18个月。
实施办法
痰液快速液化剂由占总量2/3的胰蛋白酶和占总量1/3的糜蛋白酶组成。
作用原理
胰蛋白酶断裂粘液蛋白的赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键，糜蛋白酶与胰蛋白作用类似，作用较强。
制作所需器材
一次性使用的男用取样管。
灭菌挖耳勺，独立包装，高压灭菌器125℃灭菌。
高压灭菌器，有化学指示剂和生物指示剂。
冰箱、无菌箱、细菌鉴定系统、封口设备等。
所需原料
胰蛋白酶：活力单位1:250。检菌，明确可能检出的菌种，含菌量以半定量Ⅲ区无菌落出现为准，变形杆菌不得检出。
糜蛋白酶：活力单位1000单位/毫克，应为无菌制剂，如果有菌则应明确菌种，并含菌量以半定量Ⅲ区无菌落出现为准，变形杆菌不得检出。
干燥剂袋，2克/袋，无菌。
制作方法
将约10毫克的胰蛋白酶和约5毫克糜蛋白酶在无菌操作的条件下装入男用取样管中，用带有拭子的管塞塞紧管口，不去掉拭子，同干燥剂袋一同放入无菌袋中，封口，2-8℃保存。
使用方法
将痰液快速液化剂倾倒于待检的痰液标本中，用所带的拭子搅动约30秒，使之充分混匀，放37℃温箱，5-20分钟观察，已液化者分区划线接种，做痰液半定量培养，难液化者延长液化时间至35分钟左右。
Claims (6)
1.一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂，其特征在于，是由下述重量百分比的原料组成：（1）.糜蛋白酶约30%；（2）.胰蛋白酶约70%。
2.一种如权利要求1所述的一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂，其特征在于，其制作步骤如下：
（1）.将所需器具试管架、挖耳勺进行125℃高压灭菌，备用；
（2）.将约10毫克的糜蛋白酶和约5毫克的糜蛋白酶装入男用无菌取样管中，塞上管塞，连同干燥剂袋一同封入无菌袋中，放2℃－8℃保存。
3.一种如权利要求1所述的一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂，其特征在于，其使用方法如下：将痰液快速液化剂倾倒于待检痰液中，用所带拭子搅动约30秒，使充分混匀，放37℃温箱中，10－20分钟后观察，少数高粘稠痰液需放35分钟左右，观察液化，已液化者进行分区划线，做半定量培养。
4.一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂的制作方法，其特征在于：所述的步骤（1）中，试管架、挖耳勺要经过独立包装，然后进行125℃高压灭菌，冷却后放2℃－8℃保存。
5.一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂的制作方法，其特征在于：所述的步骤（2）中，所使用的男用无菌取样管是带有无菌拭子的具塞无菌管，从原料加入至封口过程是在无菌厨中进行的；所选用的胰蛋白酶和糜蛋白酶以无菌制剂为好，如果有菌，则要鉴定，并且含菌量以半定量Ⅲ区不得有菌生长。
6.一种利于细菌分离培养的痰液快速液化剂的制作方法，其特征在于：所述的步骤（2）中，所选用的胰蛋白酶和糜蛋白酶为粉剂，要求糜蛋白酶活力不少于1000单位/mg,胰蛋白酶活力为1:250或更高。
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