CN107674844A - 一种新型甲基杆菌mr1及其应用 - Google Patents

一种新型甲基杆菌mr1及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一株甲基菌(Methylobacterium zatmanni strain)MR1,其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC M 2017322,本发明的甲基菌是以甲醛驯化海藻酸钠包埋的活性污泥为材料,用甲基菌的无机盐培养基分离而得的一种甲基营养型细菌,能在以甲醛为唯一碳源的培养基中生长,其在固体培养基上对甲醛的抗性高达30mM,在添加5mM甲醇和2‑15 mM甲醛的液体培养基中正常生长,对培养基中高浓度的甲醛有较高的去除率。MR1还能在以乙酸钠、苹果酸钠或柠檬酸钠为唯一碳源的无机盐培养基中生长,其中以苹果酸钠为碳源时生长最好。在含有乙酸钠或苹果酸钠或柠檬酸钠培养基中生长时可去除添加的苯系物,去除率达100%。

Description

一种新型甲基杆菌MR1及其应用
技术领域
本发明属于环境微生物领域,具体的说,涉及一株具有特殊甲醛代谢途径的新型甲基杆菌,其可应用于甲醛及苯系物污染的去除。
背景技术
甲醛(HCHO)是一种普遍存在于室内环境的空气污染物,经过装修的各种场所、许多工厂和药品试剂储存库中都发现存在甲醛污染,同时它也作为一个内源代谢物产生于所有生物中,在生物体内甲醛可通过5,10-亚甲基四氢叶酸自发解离产生;此外,各种脱甲基化反应也会产生低浓度的甲醛。在长期的进化过程中,几乎所有生物体内都产生甲醛解毒机制,用以阻止甲醛的致命以及突变作用。
苯系物为苯及衍生物的总称,是一类芳香族有机化合物,环境污染的苯系物来源工业生产、汽车尾气、装修装饰材料(如油漆、板材、装饰材料等)、办公设备(如复印机、打印机、传真机、电脑等)、人为活动(如吸烟、烹饪、燃香等)等。苯、甲苯、乙苯、二甲苯四类为环境污染苯系物的代表性物质。这些苯系物具有神经毒性,因此对人体健康能够产生直接危害,引起神经衰弱、头痛、失眠、眩晕、下肢疲惫等症状,长期接触可以导致人体患上贫血症和白血病。此外,苯系物还能破坏DNA,因此也具有遗传毒性。
甲基营养菌是一群能够利用一碳化合物作为碳源和能源生长的微生物。由于一碳化合物是有机物,所以甲基营养菌是一些化能异养菌。对甲基营养菌代谢一碳化合物的研究表明,这类微生物体内同时具有氧化甲醛为甲酸然后产生CO2的甲醛降解途径和同化甲醛为细胞组成成分的同化途径,因此有大量研究考察这类微生物去除甲醛污染的能力和效果。恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)是一种对溶剂有抗性的细菌,有编码甲醛脱氢酶和甲酸脱氢酶的基因,所以P. putida有氧化甲醛产生甲酸和CO2的能力。有些研究用恶臭假单胞菌来制备生物反应器,结果表明生物反应器对室内甲醛污染有一定的净化作用。
至今在甲基营养型细菌中发现的甲醛同化途径包括核酮糖单磷酸途径(RuMP)、丝氨酸途径及核酮糖单磷酸环状氧化途径。在兼性甲基营养型细菌中甲醛同化通过丝氨酸途径完成,在该途径中HCHO首先通过非酶促反应和四氢叶酸结合生成5,10-亚甲基四氢叶酸,然后由丝氨酸羟甲基转移酶催化5,l0-亚甲基四氢叶酸和甘氨酸缩合形成丝氨酸(Ser),同时释放四氢叶酸。Ser经过一系列的转化反应生成磷酸烯醇式丙酮酸(PEP),PEP又经过羧化作用形成苹果酸(Mal)。苹果酸分解生成2个C2化合物,C2化合物转化为乙醛酸(Ox),而后在丝氨酸-乙醛酸氨基转移酶的作用下,从乙醛酸产生甘氨酸(Gly),完成丝氨酸途径的整个循环。RuMP途径存在于很多甲基营养型和非甲基营养细菌中,在该途径中HCHO首先与5-磷酸核酮糖(Ru5P)缩合产生6-磷酸己酮糖(Hu6P),这一步由6-磷酸己酮糖合成酶(HPS)催化完成;Hu6P在6-磷酸己酮糖异构酶(PHI)作用下异构化生成F6P,F6P随后裂解形成1,6-二磷酸果糖(FBP),FBP再裂解形成二个C3化合物:3-磷酸甘油醛(GAP)和磷酸二羟丙酮(DHAP)。DHAP之后被用于细胞组成成分的合成,而GAP则通过一系列反应再生固定HCHO的受体Ru5P。
在以甲醇为碳源生长的甲基营养型酵母菌中,甲醇首先被乙醇氧化酶氧化为HCHO,HCHO是甲醇代谢的一个关键性中间产物,它处于甲醇同化和异化途径的分支点上,一部分HCHO可以在非酶催化条件下与还原型谷胱甘肽反应生成S-羟甲基谷胱甘肽,S-羟甲基谷胱甘肽在依赖谷胱甘肽的HCHO脱氢酶(FALDH)、S-甲酸水解酶(FGH)和依赖NADH的甲酸脱氢酶(FDH)等一系列酶的作用下最终氧化生成CO2。此外,有研究结果证实由乙醇脱氢酶催化甲酸和甲醇合成甲酸甲酯的途径也参与HCHO的解毒作用。还一部分HCHO通过木酮糖单磷酸途径(XuMP)同化,在XuMP途径中HCHO在二羟丙酮合成酶(DAS)的作用下直接和5-磷酸木酮糖(Xu5P)结合生成三磷酸甘油醛(GAP)和二羟丙酮(DHA)。DHA对酵母细胞来说是有毒的,在酵母菌中二羟丙酮激酶(DAK)参与二羟丙酮的脱毒作用,DAK催化的反应使二羟丙酮磷酸化,形成无毒性的磷酸二羟丙酮(DHAP)。这两个反应的产物GAP和DHAP随后通过醛缩酶催化的反应形成1,6-二磷酸果糖(FBP),FBP去磷酸化形成6-磷酸果糖(F6P),F6P的一部分用于再生HCHO的受体Xu5P,另一部分通过其他途径用于细胞组分的合成。
甲醇在甲基营养酵母中可以诱导与甲醇代谢相关酶蛋白基因启动子的活性。巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)是一种常见的甲基营养型酵母菌,其甲醇氧化酶(AOX)定位于过氧化物酶体中,以甲醇作碳源时AOX蛋白表达量增至细胞总蛋白的35%-40%,因此基因工程操作中常利用AOX启动子控制外源基因编码蛋白在甲醇酵母中的表达。目前已用甲醇诱导基因的强启动子在毕赤酵母(Pichia pastoris)、多形汉森酵母和假丝酵母(Candida boidinii)中建立了高效的异源基因表达系统,这些表达系统在学术研究和工业领域中有广泛的应用。通过突变体和酶学特性分析证实了DAS是甲基营养酵母甲醇同化作用的关键酶,已从假丝酵母中克隆到编码DAS的基因,DAS酶蛋白是个含有焦磷酸硫胺素的同型二聚体,在细胞质中经历二聚体化后被运送到过氧化物酶体中。
活性污泥中有丰富的微生物,有些微生物因为具有甲醛代谢途径,因此很多研究结果利用驯化的活性污泥制备生物反应器,分析结果说明这类生物反应器能去除并降解空气中污染的甲醛和其他有机物,但是活性污泥中的微生物种类很多,组成不明确,可能含有一些致病菌。此外,由于活性污泥的成分复杂,在高温和高湿条件下其所含的有机物可能会导致霉菌的繁殖和生长。
发明内容
针对以上技术问题,本发明的目的在于提供一株具有特殊甲醛代谢途径的新型甲基菌,可应用于甲醛及苯系物污染的去除,为净化甲醛和苯系物污染提供新的微生物资源。
为达到上述目的,本发明提供如下技术方案:
一株新型甲基菌MR1(Methylobacterium zatmanni strain MR1),该菌株在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO :M 2017322,保藏日期:2017年6月9日,地址为:湖北省武汉市武昌区武汉大学,该菌株的16S rRNA基因序列如 SEQ ID NO.1 所示。
本发明还公开了新型甲基菌MR1具有的两种甲醛同化途径,即丝氨酸途径和乙醛酸途径。
本发明还公开了新型甲基菌MR1在净化高浓度甲醛污染中作为生物资源的应用。
本发明还公开了新型甲基菌MR1在降解苯系物中作为生物资源的应用。
本发明还公开了新型甲基菌MR1在乙酸钠或苹果酸钠或柠檬酸钠为碳源时,在降解苯系物中作为生物资源的应用。
本发明的新型甲基菌MR1的获得步骤为:首先用海藻酸盐和海绵包埋从河道中收集的活性污泥,利用污染高浓度甲醛的空气驯化活性污泥中的微生物,然后利用甲基菌的无机盐培养基分离生长快且对甲醛抗性强的甲基菌。
本发明的有益效果:
1、本发明的新型甲基菌MR1是以首先用海藻酸盐和海绵包埋河道中收集的活性污泥,利用污染高浓度甲醛的空气驯化活性污泥中的微生物,然后利用甲基菌的无机盐培养基分离生长快且对甲醛抗性强的甲基菌,其具有特殊甲醛同化途径且可以净化甲醛并能去除污染的苯系物。
2、本发明的MR1主要通过丝氨酸途径和乙醛酸途径同化H13CHO,将甲醛代谢转化为丝氨酸、甘氨酸、苹果酸、乙醛酸、磷酸烯醇式丙酮酸、柠檬酸、异柠檬酸等无毒和无副作用的有机酸和氨基酸。MR1还能在以乙酸钠、苹果酸钠或柠檬酸钠为唯一碳源的无机盐培养基中生长,其中以苹果酸钠为碳源时生长最好。在含有乙酸钠或苹果酸钠或柠檬酸钠培养基中生长时可去除添加的苯系物,去除率达100%。
附图说明
图1:菌株MR1与甲基菌(Methylobacterium zatmanni strain DSM 5688)16SrRNA基因序列的同源性比对;
图2:固体培养基上添加不同浓度甲醛对MR1、假丝酵母和恶臭假单胞菌生长的影响;
图3:液体培养基中添加不同浓度甲醛对MR1、假丝酵母和恶臭假单胞菌生长的影响;
图4:MR1对不同浓度甲醛的去除效率;
图5:MR1、假丝酵母和恶臭假单胞菌对不同浓度甲醛去除率的比较;
图6:恶臭假单胞菌和假丝酵母代谢甲醛的途径分析;
图7:甲基菌MR1代谢甲醛的途径分析。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例和附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1菌株的筛选、鉴定及检测
为了克服现有技术的缺陷,本发明首先用海藻酸盐和海绵包埋河道中收集的活性污泥,利用污染高浓度甲醛的空气驯化活性污泥中的微生物,然后利用甲基菌的无机盐培养基分离生长快且对甲醛抗性强的甲基菌,其具体筛选步骤为:
1、活性污泥的包埋及微生物的驯化
采集河道的污泥与水混合,用纱布过滤去除碎石等大颗粒杂物,然后与2%的海藻酸钠(1:1)混合,浸泡海绵并移除多余液体混合物,随后放入有4%的CaCl2溶液中进行固化包埋。将包埋污泥的海绵卷成柱状放入塑料收纳箱中进行驯化处理,收纳箱底部安装一个小型离心风扇,人工制备的甲醛气体通过离心风扇吹入海绵中,甲醛浓度从起始的1mg/m3逐天递增至最终的15mg/m3,连续熏蒸处理15天,在整个驯化期间,海绵基质中的含水量保持在25-40%。
2、驯化微生物的分离
驯化处理结束后,取塑料箱中不同高度和位置的海绵,剪5cm左右的一段,剪碎后置于装有200ml液体甲基菌的无机盐培养基(1升含有KH2PO4 5g,K2HPO4 1g,(NH4) 2SO4 2.6g,MgSO4·7H2O 0.2g,CaCl2 0.01g,FeSO4·7H2O 0.001g,酵母膏 1.6g(0.16%),固体培养基加1.5%琼脂)中,使用5mM甲醇作为碳源,28℃下摇床振荡培养7天。经过7天培养出的菌体离心去掉上清,然后用500μl无菌水悬浮,涂在添加2mM甲醛为唯一碳源的固体培养基上。于28℃的培养箱内培养,获得单菌落做后续的鉴定。
3、形态学观察和分子生物学鉴定
对固体培养基形成的单菌落进行形态学观察,用接种环挑取少量菌体,放入载玻片的水珠中,使用结晶紫和番红染色,在显微镜下观察,结果发现分离菌是细菌,能以甲醛为唯一碳源生长,菌株的菌落呈圆形,菌落颜色为红色,菌落表面光滑湿润,液体培养基培养的菌液无异味。16SrRNA测序数据如SEQ ID NO.1 所示。分析结果显示该分离菌与甲基菌(Methylobacterium zatmanni strain DSM 5688)同源性达到 99%(图1),因此将其称为甲基菌MR1。
实施例2 MR1对甲醛的抗性、去除甲醛的效果及代谢转化甲醛的途径分析
1.MR1对甲醛的抗性分析
在添加和没有添加酵母膏的固体培养基分别加入4 mM、8 mM、12 mM和20 mM的甲醛,将MR1的菌液1%(v/v)接种于含有5mM甲醇和酵母膏的液体培养基中,28℃摇床培养,待OD600达到0.5时各取1μl、2μl、3μl、4μl、5μl、6μl、7μl、8μl、9μl菌液点于含有不同浓度甲醛的固体培养基上,28℃温箱中培养48小时后观察其生长状况。结果说明菌株MR1在含有酵母膏和没有酵母膏的无机培养基中生长状况无显著差异,说明MR1的生长不依赖酵母膏。在30mM甲醛胁迫下依然可以生长,说明MR1菌株对甲醛的抗性很高,可达到30mM。
在没有添加酵母膏的甲醇固体培养基上分别加入4 mM、6 mM、8 mM和10 mM的甲醛,将MR1、甲基营养型酵母菌假丝酵母(Candida boidinii)、恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)菌液(OD600为 0.5)各取2μl、4μl、6μl、8μl、10μl点于含有甲醛的固体培养基上,28℃温箱中培养2-3天后观察生长状况(图2所示)。结果说明三种菌株在含有4 mM甲醛的培养基中都能生长,在添加6 mM、8 mM和10 mM甲醛的培养基中假丝酵母菌不能生长,而MR1和恶臭假单胞菌能生长,这说明MR1的甲醛抗性与恶臭假单胞菌相当,但强于假丝酵母。
在添加甲醇的液体培养基中接入MR1、假丝酵母菌、恶臭假单胞菌,待每种菌的OD600为 0.4-0.5时分别加入2 mM、4 mM、6 mM、8 mM、10 mM、15 mM甲醛,28℃摇床中培养,在12、24、36、48、60、72、84和96小时测定菌体的OD600,观察每种菌体的生长状况(图3)。结果说明在12-24h菌株MR1在所有培养基中的生长速度迅速增加,在随后的36-96h维持相同的生长速率,而假丝酵母菌与恶臭假单胞菌仅有微小的生长速率,说明这两种菌株的生长速率显著低于MR1,在72-96h假丝酵母菌的生长速率增加的幅度稍大于恶臭假单胞菌,在24-96h内MR1的生长均显著快于假丝酵母与恶臭假单胞菌。这证明在添加甲醛的液体培养基中MR1比假丝酵母菌与恶臭假单胞菌有更好的生长优势。
2. MR1去除甲醛的效果分析
在不含酵母膏的液体培养基中分别添加4 mM、8 mM、10 mM、15mM和20 mM的甲醛和5mM甲醇,然后接种OD600为0.5的MR1菌液1%(v/v),28℃摇床培养,在8h、12h、24h、36h、48h、60h、72h取1毫升菌液,离心后取上清,使用Nash法测剩余甲醛浓度,用不加菌液但含有相同浓度甲醛的溶液检测处理系统甲醛的挥发量,甲醛去除率按照公式:100%(处理液起始甲醛)-处理液剩余甲醛%-挥发甲醛%计算。结果说明菌株MR1去除甲醛效果很好,处理72h后对于4和8mM甲醛溶液除率能达到90%以上(图4),对10 mM甲醛除率约为80%(图4),对15和20mM甲醛除率约为50%和40%(图4)。
在添加甲醇的培养基中接入MR1、假丝酵母菌、恶臭假单胞菌菌液,待每种菌的OD600为 0.4-0.5时分别加入2 mM、4 mM、6 mM、8 mM、10 mM、15 mM的甲醛,28℃摇床中培养,处理96小时后测定处理液残留甲醛的浓度(OD410),比较三种菌株的甲醛去除效率。结果说明假丝酵母菌对2 mM甲醛的去除效率好于MR1和恶臭假单胞菌(图5),对4-15mM甲醛的去除效率恶臭假单胞菌低于MR1和假丝酵母(图5),对于2-6mM低浓度甲醛的去除效率假丝酵母高于MR1(图5),对8-15mM高浓度甲醛MR1的去除效率大于假丝酵母(图5)。
3. MR1代谢转化甲醛的途径分析
挑选恶臭假单胞菌和假丝酵母单菌落在含5mM甲醇的无机盐液体培养液(500ml)中分别扩大培养2-3天,4000rpm 4°离心10min,收集2克鲜重菌体,加入4mM H13CHO(4 mM甲醛处理)溶液(100ml)处理24小时,离心收集菌体,加入3毫升无菌水悬浮,超声波处理10min破碎细胞,同时用不加甲醛培养液处理的相同鲜重菌体作为对照(CK)。超声波破碎之后95°加热5分钟使酶失活,12000rpm 4°离心10min,收集上清后离心浓缩干燥,加入500μl无菌水溶解,加甲酰胺做内参,13C-NMR核磁共振检测分析甲醛代谢产物(图6)。结果说明假丝酵母的代谢产物种类较多,其甲醛代谢谱中有很强的甲酸信号峰,说明甲醛氧化途径在甲醛代谢和脱毒过程中发挥作用。代谢产物中的糖类物质包括葡萄糖(Gluc)、果糖(Fruc)及这两种糖的磷酸化产物(G6P和F6P),这说明有部分甲醛被同化为糖类物质,推测应该是Xu5P途径在甲醛同化过程中发挥作用,产生的糖类物质随后进入其他代谢途径被转化为有机酸如乙酸(Ac)、丙酮酸(PA)和氨基酸如丙氨酸(Ala)。此外,甲醛同化产物中还有些信号峰未鉴定归属的代谢产物U1-U6。恶臭假单胞菌的甲醛代谢产物种类很少,其代谢谱中甲酸的信号峰最强,说明甲醛氧化是其甲醛代谢和脱毒的主要途径。此外还有乙酸(Ac)、丙酮酸(PA)和丙氨酸(Ala)及未知产物U1和U2,但是这些代谢产物的信号峰很弱,说明甲醛同化在恶臭假单胞菌甲醛代谢和脱毒过程中发挥的作用很有限。
在含有5mM甲醇的无机盐培养基中培养MR1,离心收集菌体细胞2g,在不含甲醇的无机盐培养基中加入4mM H13CHO溶液(100ml)处理2 h和24 h,以不处理样品作为对照(CK)检测MR1菌体细胞的背景13C信号水平。处理结束后离心收集菌体细胞,加入3mL 10mM磷酸钾缓冲液(KPB,pH7.4),超声破碎抽提可溶性代谢产物,沸水浴加热处理3min使酶失活,12000rpm 4℃离心30min,收集上清液经真空冷冻干燥后,用0.6mL无菌水溶解,12000rpm离心3min,取0.5mL上清装入核磁管,加入适量去离子甲酰胺作为核磁共振分析的内参,在布鲁克核磁共振仪(DRX 500-MHz)上进行13C-NMR分析MR1甲基菌的甲醛代谢谱(图7)。H13CHO标记样品中化学位移参照内参的共振峰(166.85ppm),13C-NMR谱中的共振峰通过和已知化合物的13C-NMR 谱进行比较鉴定其归属。13C-NMR数据分析结果发现MR1处理液中含有甲酸(H13COOH),说明MR1可将H13CHO氧化为H13COOH。在MR1的H13CHO代谢谱中观察到4mM H13CHO处理2 h导致很多内源性的代谢产物信号峰降低,说明短时间的甲醛胁迫会消耗这些内源性的代谢产物,4mM H13CHO处理24h 后这些内源性的代谢产物信号峰恢复到接近处理前的水平,说明H13CHO代谢产生这些内源性的代谢产物。此外,H13CHO代谢产物中还有一些与假丝酵母相同的未知产物U1-U6。对代谢产物信号峰进行归属后发现H13CHO代谢谱中有很多丝氨酸途径的代谢产物包括丝氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、苹果酸(Mal)、乙醛酸(Ox)和磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)及乙醛酸途径的代谢产物如柠檬酸(Cit)和异柠檬酸(Icit),这证实甲基菌MR1主要通过丝氨酸途径和乙醛酸途径同化H13CHO,将甲醛代谢转化为无毒性的有机酸和氨基酸,这两种代谢途径在MR1的甲醛代谢和脱毒中发挥重要作用,甲基菌MR1具有与恶臭假单胞菌和假丝酵母不同的甲醛代谢机制。
实施例3 MR1对苯系物和其他有机污染物的耐受性及去除苯系物的效果分析
1. MR1对苯系物和其他有机污染物的耐受性分析
在含有5mM甲醇的固体培养基中分别添加浓度为4 mM、8 mM、12 mM和20 mM乙醇、异丙醇、二甲苯、苯、甲苯做成平板。取OD600为0.5的MR1菌液1μl、2μl、3μl、4μl、5μl、6μl、7μl、8μl、9μl点于固体平板上,28℃温箱中培养48小时后观察其生长状况。结果说明乙醛、乙醇、异丙醇的存在对MR1菌株的生长没有明显影响,它对乙醛、乙醇、异丙醇的耐受性可达20mM,但在含有异丙醇的平板上生长状况较差。在添加二甲苯、苯、甲苯的平板上能生长,对二甲苯、苯、甲苯的抗性达到20mM,但在添加甲苯的平板上生长状况较差。
2. MR1去除苯系物的效果分析
在含有5mM甲醇的液体培养基(50ml)中分别添加0.5 mM、1 mM、2 mM和3 mM的苯、甲苯、二甲苯,接种OD600为0.5的MR1菌液100μl。 28℃振荡培养,在24、48、72小时测定其OD600值,结果说明MR1能在含有苯系物培养基中生长。12000rp离心15min取上清用高效液相色谱法测定培养基中剩余苯系物含量。结果说明MR1在24h内能完全去除培养基中污染的低浓度苯系物,去除率达到100%。此外,在液体培养基中添加5mM乙酸钠或苹果酸钠或柠檬酸钠为碳源时生长速度比甲醇为碳源的快,其中以苹果酸钠为碳源生长最快,能在含有乙酸钠或苹果酸钠或柠檬酸钠为碳源的培养基中生长时去除添加的苯系物。
最终,以上实施例和附图仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管通过上述实施例已经对本发明进行了详细的描述,但本领域技术人员应当理解,可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变,而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。
序列表
<110> 云南万魁生物科技有限公司
<120> 一种新型甲基菌MR1及其应用
<141> 2017-07-26
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1418
<212> DNA
<213> Methylobacterium zatmanni strain DSM
<400> 1
gctcgcgctc cagcagtcac ggagagggac ttgctccttg attcgcggcg gacgggtgag 60
taatgcctag aatctgcctg gtagtggggg acaacgtttc gaaaggaacg ctaataccgc 120
atacgtccta cgggagaaag caggggacct tcgggccttg cgctatcaga tgagcctagg 180
tcggattagc tatttggtgg ggtaatggct caccaaggcg acgatccgta tctggtctga 240
gaggatgatc agtcacactg gaactgagac acggtccaga ctcctacggg aggcagcagt 300
ggggaatatt ggacaatggg cgaaagcctg atccagccat gccgcgtgtg tgaagaaggt 360
cttcggattg taaagcactt taagttggga ggaagggcag taagctaata ccttgctgtt 420
ttgacgttac cgacagaata agcaccggct aactctgtgc cagcagccgc ggtaatacag 480
agggtgcaag cgttaatcgg aattactggg cgtaaagcgc gcgtaggtgg ttcgttaagt 540
tggatgtgaa agccccgggc tcaacctggg aactgcatcc gaaactggcg atctagagta 600
cggtagaggg tggtggaatt tcctgtgtag cggtgaaatg cgtatatata ggaaggaaca 660
ccagtggcga aggcgaccac ctggactgat actgacactg aggtgcaaaa gcgtggggag 720
caaacaggat tagataccct ggtagtccac gccgtaaacg atgtcaacta gccgttggaa 780
tccttgagat tttagtggcg cagctaacgc attaagttga ccgcctgggg agtacggccg 840
caaggttaaa actcaaatga attgacgggg gcccgcacaa gcggtggagc atgtggttta 900
attcgaagca acgcgaagac ccttaccagc ccttgacatg cagagaactt tccagagatg 960
gattggtgcc ttcgggaact ctgacccagg tgctgcatgg ctgtcgtcag ctcgtgtcgt 1020
gagatgttgg gttaagtccc gtaacgagcg caaccctcgt ccttagttac cagcacgtta 1080
tggtgggcac tctaaggaga ctgccggtga caaaccggag gaaggtgggg atgacgtcaa 1140
gtcatcatgg cccttacggc ctgggctaca cacgtgctac aatggtcggt acagagggtt 1200
gccaagccgc gaggtggagc taatctcaca aaaccgatcg tagtccggat cgcagtctgc 1260
aactcgactg cgtgaagtcg gaatcgctag taatcgcgaa tcagaatgtc gcggtgaata 1320
cgttcccggg tccttgtaca caccgcccgt cacaccatgg gagtgggttg caccagaagt 1380
agtagttaac cttcgggagg gcggtacacg gtatcgga 1418

Claims (5)

1.一种新型甲基菌MR1,其特征在于:该菌株在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO :M 2017322,该菌株的16S rRNA基因序列如 SEQ ID NO.1 所示。
2.如权利要求1所述的新型甲基菌MR1,其特征在于:该菌株具有丝氨酸途径和乙醛酸途径两种甲醛同化途径。
3.如权利要求1所述的新型甲基菌MR1,其特征在于:所述的新型甲基菌MR1在净化高浓度甲醛污染中作为生物资源的应用。
4.如权利要求1所述的新型甲基菌MR1,其特征在于:所述的新型甲基菌MR1在降解苯系物中作为生物资源的应用。
5.如权利要求4所述的新型甲基菌MR1,其特征在于:所述的新型甲基菌MR1在乙酸钠或苹果酸钠或柠檬酸钠为碳源时,在降解苯系物中作为生物资源的应用。
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