CN1076613A - 榄香烯乳注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种抗癌新药榄香烯乳注射液及其 制备方法。该药物含有抗癌药温莪术挥发油中分离 出的榄香烯以及精制大豆磷脂、胆固醇和磷酸盐缓冲 液。将上述原辅料恒温水浴加热，投入组织捣碎机高 速搅拌制成初乳，再转入高压乳匀机或胶体磨内反复 乳化合格后，通过垂熔玻璃滤器过滤，灌装于安瓿内， 经灭菌消毒即可。它抗癌效果确切，毒副作用小，应 用范围广，其制备工艺简便，原料来源充足、易得，制 成品性能稳定，有利于临床应用。

Description

本发明涉及一种抗癌新药，特别是一种适用于静脉注射的脂质体剂型的榄香烯乳注射液及其制备方法。

榄香烯化学名1-甲基-1-乙烯基-2，4-二异丙烯基环己烷，拉丁名ELEMENUM，是从中药温莪术（Curcuma  Wenyujin）挥发油（莪术油）中分离的抗癌有效部位。榄香烯主要有效成分为β-榄香烯，并含有δ-、γ-榄香烯及少量其它萜类化合物。由于莪术油制剂治疗子宫颈癌的疗效，已在临床中得到验证，所以莪术油作为抗癌药已经载入一九七七年版的《中华人民共和国药典》。但是因莪术油注射剂只能用于局部瘤体给药方法治疗子宫颈癌，疗程较长，操作不便，应用范围较窄，无法有效治疗各种瘤和进行区域性给药，同时也因莪术油注射剂的稳定性较差，故其不利于临床应用。

本发明的目的是提供一种榄香烯乳注射液及其制备方法，它抗癌效果确切，毒副作用小，除可局部瘤体给药，区域性给药，还可静脉注射，故可明显扩大临床应用范围，其制备工艺简便，原料来源充足、易得，制成品性能稳定，有利于临床应用。

本发明的目的是这样实现的：该制剂各组分百分比（g/ml）含量分别为榄香烯0.4-1.5%、精制大豆磷脂1-4.5%、胆固醇0.5-2.25%、余量为磷酸盐缓冲液。

该制剂的制备方法是：先将按量称取的榄香烯、胆固醇、精制大豆磷脂装入容器内，在75-85℃恒温水浴上加热，使其完全混溶成澄明溶液，然后加入占磷酸盐缓冲液总量3-4%的同温度的磷酸盐缓冲液，投入组织捣碎机内进行高速搅拌制成初乳后，加入余下的磷酸盐缓冲液，再转入高压乳匀机或胶体磨内反复乳化2-3次，直至置显微镜下检查粒度合格后，通过垂熔玻璃滤器过滤，灌封于5ml安瓶内，于100℃40分钟灭菌，即得榄香烯乳注射液。

由于本发明中的榄香烯是从中药抗癌药温莪术挥发油（莪术油）中，采用真空精密分馏法或柱层析法制得的有效抗癌活性成分，其中β-榄香烯约占55%，γ-榄香烯和δ-榄香烯约占30%，还有少量其它萜类化合物，莪术油中的这些有效成分经临床验证确有明显的抗癌效果，且毒副作用小，所以榄香烯乳注射液的抗癌效果更佳，它克服了莪术油剂只能局部瘤体给药的限制，可供静脉注射用，全身用药可增强机体的免疫功能。考虑到临床静脉用药的特点，选择了天然辅料大豆磷脂、胆固醇为复合乳化剂，使高度疏水性物质榄香烯分散于水相中，制成脂质体剂型的抗癌新药-榄香烯乳注射液。

本发明的制备方法简便，原辅料易得，制成品由于其在乳化过程中形成特殊的类细胞膜-脂质膜，与癌细胞有较强的亲和力，且能增加药物对细胞的通透性，有利于药物与癌细胞的接触，所以显著提高药物在癌细胞部位的浓度和杀伤癌细胞的作用。药物制成脂质体后，增加了稳定性，降低了毒性和刺激性，减少剂量和减轻变态反应。所用的原料榄香烯是采用常规的真空精密分馏法或柱层析法，从市售莪术油中分离出的抗癌有效成分。所用辅料大豆磷脂常用作静脉乳乳化剂，可使乳剂油滴分散为约1μm，在体内能较好地被代谢，并从肾脏排出。加入胆固醇能增强乳剂的稳定性，提高药物的贮存期。大量试验证明，榄香烯选用大豆磷脂与胆固醇作为复合乳化剂比单纯大豆磷脂作乳化剂更优越，使形成的乳剂粒度均匀，刺激性小，有利于机体用药。磷酸盐缓冲液的配制更容易。因此，本发明的制备方法极易推广应用。采用本发明的药物可治疗子宫颈癌、脑瘤、消化道恶性肿瘤、恶性胸腔积液、恶性腹腔积液和白血病及其它肿瘤。其最大特点是在有效抗肿瘤剂量时，对人体正常细胞无任何损伤，尤其对造血系统、免疫功能具有保护作用，在放疗、化疗或肿瘤本身造成机体造血及免疫机能低下时，该药物还能起到保护作用和提高造血及免疫功能之效果，与现有抗癌药相比，疗效确切，毒副作用甚低，治疗量长期服用对血相、心、肝、脾、肾等功能无任何影响，有利于临床应用。

以下结合实施方法对本发明作进一步说明。

实施方法一

首先采用常规分离方法，从市售莪术油中分离榄香烯：

1、真空精密分馏法

取莪术油1000-1500克，置加热釜中进行真空精密分馏，分馏塔高1.2-1.5米，不锈钢网卷制的填料，理论塔板数不少于40，真空度1-3mmHg，控制回流比4∶1，收集90-93℃的馏出物，经气相色谱检测达到药用标准即可。

2、硅胶柱层析法

取莪术油80-100克，置装有5000克硅胶制备柱中进行柱层析，石油醚洗脱或用醋酸乙酯∶石油醚＝1-5∶95-99来洗脱，流速30-50ml/分，分步收集，气相色谱检测，合并含榄香烯的收集液，回收乙醚得榄香烯。

然后选用精制大豆磷脂（本例选上海油脂一厂产品），应符合药用磷脂质量标准;胆固醇（市售）应符合美国药典（USP21版）标准;磷酸盐缓冲液的制备过程如下：取无水磷酸二氢钠0.6-1份、无水磷酸氢二钠0.5-0.8份、蒸馏水998-999份，混匀备用。应符合《中华人民共和国药典》九0年版的质量标准规定。磷酸盐缓冲液优先选用以下的配制方法：取无水磷酸二氢钠0.8克、无水磷酸氢二钠0.628克，蒸馏水加至1000ml即成。最后按量称取上述原辅料：榄香烯5克、精制大豆磷脂15克、胆固醇7.5克，装入容器内，在80℃恒温水浴上加热，使其完全混溶成澄明的溶液，加入34ml同温度的磷酸盐缓冲液，投入组织捣碎机内进行高速搅拌制成初乳后，再加入磷酸盐缓冲液至1000ml，转入高压乳匀机或胶体磨内反复乳化2-3次，直至置显微镜下检查粒度合格（在20个视野内，最大颗粒不超过15μm）后，通过垂熔玻璃滤器过滤，灌封于5ml安瓶内，于100℃40分钟灭菌，即得榄香烯乳注射液。

实施方法二

所用原辅料的制备同实施方法一，最后按量称取榄香烯6克、精制大豆磷脂18克、胆固醇6克，装入容器内，在80℃恒温水浴上加热，使其完全混溶成澄明的溶液，加入40ml同温度的磷酸盐缓冲液，投入组织捣碎机内进行高速搅拌制成初乳后，再加入磷酸盐缓冲液至1000ml，转入高压乳匀机或胶体磨内反复乳化2-3次，直至置显微镜下检查粒度合格（在20个视野内，最大颗粒不超过15μm）后，通过垂熔玻璃滤器过滤，灌封于5ml安瓶内，于100℃40分钟灭菌，即得榄香烯乳注射液。

实施方法三

所用原辅料的制备同实施方法一，最后按量称取榄香烯10克、精制大豆磷脂30克、胆固醇15克，装入容器内，在80℃恒温水浴上加热，使其完全混溶成澄明的溶液，加入67ml同温度的磷酸盐缓冲液，投入组织捣碎机内进行高速搅拌制成初乳后，再加入磷酸盐缓冲液至1000ml，转入高压乳匀机或胶体磨内反复乳化2-3次，直至置显微镜下检查粒度合格（在20个视野内，最大颗粒不超过15μm）后，通过垂熔玻璃滤器过滤，灌封于5ml安瓶内，于100℃40分钟灭菌，即得榄香烯乳注射液。

榄香烯乳注射液为乳白色均匀乳状液体，PH4.0-6.5，室温下一年内粒度变化不大，粒度不超过2μm的占90%以上，保存期不低于1年半。每安瓶5ml。静脉滴注，以5mg/kg剂量溶于250ml-500ml的5%葡萄糖内缓慢滴注，也可瘤体局部用药或与其它抗癌药物联合应用。未经稀释不可直接血管内注射，不能用生理盐水或其它含电解质盐类的溶剂稀释。

毒性试验

小鼠由尾部静脉缓慢注射1.5%榄香烯乳注射液，测得半数致死量LD50＝270.07±18.93mg/kg。未中毒现象出现的小鼠，观察七天饮食正常，尿便无异常，第八天处死活鼠，解剖后肉眼未见心、肝、肾等脏器有明显改变。

临床观察

试用临床29例，其中子宫颈癌27例，阴道癌2例。发病年令29-71岁，其中以56-65岁居多，为14例，占56.1%。综合的疗效统计数字是：临床近期治愈18例（子宫颈癌16例，阴道癌2例），为62%;显效3例为10%;有效4例为14%，总有效率为86%。

Claims (5)

1、一种榄香烯乳注射液，其特征是各组分百分比(g/ml)含量分别为榄香烯0.4-1.5%、精制大豆磷脂1-4.5%、胆固醇0.5-2.25%、余量为磷酸盐缓冲液。

2、一种榄香烯乳注射液的制备方法，其特征是将如下百分比（g/ml）含量的组分：榄香烯0.4-1.5%、精制大豆磷脂1-4.5%、胆固醇0.5-2.25%、余量为磷酸盐缓冲液，先将按量称取的榄香烯、胆固醇、精制大豆磷脂装入容器内，在75-88℃恒温水浴上加热，使其完全混溶成澄明的溶液，然后加入占磷酸盐缓冲液总量3-4%同温度的磷酸盐缓冲液，投入组织捣碎机内进行高速搅拌制成初乳后，加入余下的磷酸盐缓冲液，再转入高压乳匀机或胶体磨内反复乳化2-3次，直至置显微镜下检查粒度合格后，通过垂熔玻璃滤器过滤，灌封于5ml安瓶内，于100℃40分钟灭菌，即得榄香烯乳注射液。

3、根据权利要求1所述的制备方法，其特征是所述榄香烯的制备过程如下：取莪术油1000-1500克，置加热釜中进行真空精密分馏，分馏塔高1.2-1.5米，不锈钢网卷制的填料，理论塔板数不少于40，真空度1-3mmHg，控制回流比4∶1，收集90-93℃的馏出物，经气相色谱检测达到药用标准即可。

4、根据权利要求1所述的制备方法，其特征是所述榄香烯的制备过程如下：取莪术油80-100克，置装有5000克硅胶制备柱中进行柱层析，石油醚洗脱或用醋酸乙酯∶石油醚＝1-5∶95-99来洗脱，流速30-50ml/分，分步收集，气相色谱检测，合并含榄香烯的收集液，回收乙醚得榄香烯。

5、根据权利要求1所述的制备方法，其特征是所述磷酸盐缓冲液的制备过程如下：取无水磷酸二氢钠0.6-1份、无水磷酸氢二钠0.5-0.8份、蒸馏水998-999份，混匀备用。