CN107648219A - 一种降低血清尿酸值的药品或保健品及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种降低血清尿酸值的药品或保健品，属于药品或保健品技术领域，所述降低血清尿酸值的药品或保健品包含表没食子儿茶素没食子酸酯，L‑抗坏血酸、柠檬酸、糊精、淀粉、魔芋粉、硬脂酸镁和滑石粉中的一种或多种。同时本发明还提供了所述药品或保健品片剂、冲剂、软胶囊的制备方法，所述制备方法步骤简单，制备成本低，降低血清尿酸值效果好。本发明解决当今痛风或高尿酸血症类药物副作用大等一系列问题，同时，本发明使用的原料为食品级原来，副作用低，食用安全，降低小鼠血清尿酸值显著，具有很广泛的市场前景。
Description
技术领域
本发明属于药品或保健品技术领域，具体涉及一种降低血清尿酸值的药品或保健品及制备方法。
背景技术
表没食子儿茶素没食子酸酯，即EGCG，是从绿茶中提取的一种水溶性成份，是儿茶素中含量最高的组分，占绿茶毛重的9%-13%。因为具有特殊的立体化学结构，EGCG具有非常强的抗氧化活性，在酸性条件（Ph值为2.0~4.0）下不易被氧化。大量研究显示EGCG对前列腺癌、皮肤癌、胃癌、食道癌、直肠癌、乳腺癌、肝癌、肺癌等大多数人体癌症有抑制作用。EGCG能抑制癌细胞生长周期、能诱导癌细胞凋亡。
尿酸是嘌呤分解代谢的最终产物。由肾脏随尿液排出体外。血液中尿酸经肾小球过滤后，大部分由肾小管重吸收。尿酸是血浆中非蛋白氮类重要成分之一，在严重肾脏损害时，血中尿酸可显著升高。而轻度受损时变化不大。故血尿酸测定是诊断肾重度受损的敏感指标。别嘌呤醇（allopurinol）：是结构上环绕于黄嘌呤的化合物，其在嘌呤环上第七位是C，第八位是N，对黄嘌呤氧化酶有很强的抑制作用，常用来治疗痛风。
高尿酸血症是其病变发展的一个重要阶段。通常高尿酸血症被认为是痛风的标志, 据统计约有 5% ~ 12% 的高尿酸血症最终可发展为痛风。尿酸是大多数动物体内嘌呤代谢的终产物，当动物体内尿酸生成增多和（或）尿酸排泄与分解减少导致尿酸蓄积即可能发生高尿酸血症。约90%的原发性高尿酸血症是因尿酸排泄减少所致，其中肾脏尿酸盐转运体起到重要作用。
发明内容
为了解决传统降低动物体血清尿酸药品具有各种副作用的技术问题，本发明提供了一种有效成分为EGCG的降低血清尿酸值的药品或保健品，所述降低血清尿酸值的药品或保健品包含EGCG药品或保健品。
所述降低血清尿酸值的药品或保健品中包含EGCG干粉。其中，药品或保健品为片剂、冲剂、胶囊和软胶囊。
进一步，所述EGCG干粉的含量在3~50%。
所述药品或保健品中，还包括L-抗坏血酸或柠檬酸和糊精或淀粉或魔芋粉。
本发明还提供了所述药品或保健品的配方，具体如下：
配方一：EGCG：2~98%，L-抗坏血酸：2~48%，糊精：0~96%，硬脂酸镁：0~2%，滑石粉：0~2%；
配方二：EGCG：2~50%，柠檬酸：2~40%，淀粉：10~96%，硬脂酸镁：0~2%，滑石粉：0~2%；
配方三：EGCG：2~50%，柠檬酸：2~40%，魔芋粉：10~95%，硬脂酸镁：0~2%，滑石粉：0~2%。
本发明提供了一种降低血清尿酸值的药品或保健品片剂的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
①按照配方称取EGCG和L-抗坏血酸，混合，用超纯水溶解，并超声处理0.5~2小时，得到混合液Ⅰ，其中，所述超声功率为150~550w；
②按照配方称取糊精，并加入到混合液Ⅰ，继续超声处理0.5~1.5小时，得到混合液，其中，所述超声功率为150~550w；
③将混合液Ⅱ置于-24~-16℃的条件下预冻1~2 h，并采用冷冻干燥设备，在-90~-30℃的条件下冷冻干燥成粉末状，得到EGCG混合干粉；
④采用压片机对EGCG混合干粉压片处理，得到本发明所述的降低血清尿酸值的药品或保健品片剂。
进一步，所述L-抗坏血酸或为柠檬酸，糊精或为淀粉或为魔芋粉。
进一步，所述降低血清尿酸值的药品或保健品还可以为冲剂，其制备方法为：将权利要求6所述的EGCG混合干粉置于流化喷雾制粒设备的流化室内，利用气流使悬浮呈流化态，再喷入润湿剂或黏合剂液体，使粉末凝结成粒,最后进行整粒，形成冲剂。
进一步，所述降低血清尿酸值的药品或保健品还可以为软胶囊，其制备方法为：将明胶放入蒸馏水中浸泡使其膨胀，待明胶溶化后将权利要求6所述的混合液一并加入，搅拌混合均匀形成囊材胶液，50~80℃加热处理制成软胶片，利用轧囊机压制成为软胶囊。
有益效果
其一， 研究发现，肾小管上皮细胞顶端膜和基底膜上的多个转运蛋白与尿酸的重吸收和分泌有关。其中尿酸转运体URAT1和GLUT9参与了尿酸的重吸收。URAT1和GLUT9分别表达于肾近端小管上皮细胞的顶端膜与基底膜，URAT1将尿酸从小管液中摄入小管细胞内，再经GLUT9泵出小管细胞基底膜，进入细胞间质和外周血管。URAT1基因突变将导致转运体功能减退或丧失而表现出肾性低尿酸血症，提示URAT1是影响血尿酸水平的一个重要的转运蛋白。EGCG对高尿酸血症小鼠肾脏URAT1的基因表达均有明显影响，提示其促尿酸排泄作用的靶点是URAT1。
GLUT9主要表达于肾脏和肝脏。新近研究显示GLUT9与尿酸的转运密切相关，是一种高能尿酸转运体。该转运体以电压依赖的方式将尿酸从小管细胞内转运至细胞间质和外周血管中。本实验结果显示EGCG药品或保健品明显对GLUT9的mRNA水平有下调趋势。通过小鼠模型可知，本发明提出的EGCG药品或保健品降低尿酸的能力接近注射别嘌呤醇的效果。
其二，本发明采用从天然物质中提取降低血清尿酸值的EGCG做原料，制备了一种全新的降低血清尿酸值的药品或保健品，其制备方法简单，成本低，效果好。由此可见，本发明具有很好的市场前景。解决当今痛风或高尿酸血症类药物副作用大等一系列问题。
附图说明
图1：20~500 mg/kg EGCG剂量组的小鼠血清尿酸平均值的柱状图。
图2：10~50 mg/kg EGCG剂量组的小鼠血清尿酸平均值的柱状图。
图3：不同药品组的小鼠血清尿酸平均值的柱状图。
具体实施方式
下面结合具体实施例子进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明，而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域的技术人员对本发明各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所规定的范围。
本发明的实施例中，实验动物：SPF级KM小鼠36只，25±2g，购于济南鹏悦实验动物繁育有限公司，实验动物生产许可证号：SCXK(鲁)2014-0007。试验前适应环境一周，常规分笼饲养。整个实验过程自由摄食和饮水。
试剂与材料：酵母膏，购于北京奥博星生物技术责任有限公司；氧嗪酸钾，购于南京都莱生物技术有限公司；别嘌呤醇片，购于上海信谊万象药业股份有限公司；尿酸、肌酐、尿素氮、XOD试剂盒，购于南京建成生物工程研究所。HiScriptⅡ1st Strand cDNASynthesis Kit 和SYBR Green Master Mix Kit购于Vazyme Biotech Co., Ltd.
其它试剂均为分析纯，实验用水为纯水。
实施例1
为了验证本发明的EGCG药品或保健品具有降低血清尿酸值的功能，申请人将买来的EGCG在-90~-30℃的条件下冷冻干燥成粉末状，得到EGCG干粉，并做了如下实验：
将36只小鼠称重后随机分为空白对照组、高尿酸血症模型组、别嘌呤醇组、EGCG剂量20mg/kg组、EGCG剂量100 mg/kg组、EGCG剂量500 mg/kg组，每组6只小鼠。每天灌胃前一晚禁食，定时灌胃给药。空白组和高尿酸模型组每天灌胃生理盐水，别嘌呤醇组的给药剂量是5mg/kg/d，即每天注射5 mg/kg的别嘌呤醇纯品，用于阳性对照本发明EGCG药品或保健品的效果。EGCG剂量20 mg/kg组、EGCG剂量100 mg/kg组、EGCG剂量500 mg/kg组每天灌胃给药，连续7天。每日称量小鼠体重，并根据体重调整灌胃量。第7天，除空白组外，其它4组小鼠腹腔注射氧嗪酸钾300 mg/kg并灌胃10 g/kg酵母膏建立高尿酸小鼠模型；造模1h后，给药组分别灌胃EGCG剂量20 mg/kg、EGCG剂量100 mg/kg、EGCG剂量500 mg/kg，别嘌呤醇组腹腔注射别嘌呤醇。
各组小鼠末次给药1h后，水合氯醛麻醉，摘眼球取血。血样室温静置30 min后， 4℃ 3000 r/min离心10 min，分离血清，采用磷钨酸法测定血清中尿酸(UA)水平。6只小鼠平均尿酸水平如表1所示，其柱状图见图1。
表1：20~500mg/kg EGCG剂量组的小鼠血清尿酸平均值表
高尿酸血症模型组与空白组相比血尿酸浓度升高极明显（p<0.01），说明用氧嗪酸钾和酵母膏联合造模成功。而EGCG 20 mg/kg组极明显降低血尿酸水平（均p<0.05），EGCG 100mg/kg组明显降低血尿酸水平（均p<0.05），EGCG 500 mg/kg组降低血尿酸水平（均p<0.05），别嘌呤醇组降尿酸水平作用极显著（p<0.001），说明别嘌呤醇对降尿酸有极好的疗效。本发明通过喂食EGCG剂量20 mg/kg、100 mg/kg、500 mg/kg发现剂量为20 mg/kg~100 mg/kg接近公知的降低尿酸的别嘌呤醇水平。剂量为500 mg/kg也有一定的降低尿酸的作用，但小鼠有少许损伤。可见本发明提出的EGCG在剂量20 mg/kg~100 mg/kg具有降低血清尿酸的作用。
为了验证本发明的EGCG药品或保健品具有降低血清尿酸值的功能，申请人做了如下实验：
将36只小鼠称重后随机分为空白对照组、高尿酸血症模型组、别嘌呤醇组、EGCG剂量10mg/kg组、EGCG剂量20 mg/kg组、EGCG剂量50 mg/kg组，每组6只小鼠。每天灌胃前一晚禁食，定时灌胃给药。空白组和高尿酸模型组每天灌胃生理盐水，别嘌呤醇组的给药剂量是5 mg/kg/d，即每天注射5 mg/kg的别嘌呤醇纯品，用于阳性对照本发明EGCG药品或保健品的效果。EGCG剂量10 mg/kg组、EGCG剂量20 mg/kg组、EGCG剂量50 mg/kg组每天灌胃给药，连续7天。每日称量小鼠体重，并根据体重调整灌胃量。第7天，除空白组外，其它4组小鼠腹腔注射氧嗪酸钾300 mg/kg并灌胃10 g/kg酵母膏建立高尿酸小鼠模型；造模1h后，给药组分别灌胃EGCG剂量10 mg/kg、EGCG剂量20 mg/kg、EGCG剂量50 mg/kg，别嘌呤醇组腹腔注射别嘌呤醇。
各组小鼠末次给药1h后，水合氯醛麻醉，摘眼球取血。血样室温静置30min后，4℃
3000 r/min离心10 min，分离血清，采用磷钨酸法测定血清中尿酸(UA)水平。6只小鼠平均尿酸水平如表2所示，其柱状图见图2。
表2：10~50mg/kg EGCG剂量组的小鼠血清尿酸平均值表
高尿酸血症模型组与空白组相比血尿酸浓度升高极明显（p<0.01），说明用氧嗪酸钾和酵母膏联合造模成功。而EGCG 20 mg/kg组极明显降低血尿酸水平（均p<0.05），EGCG 50mg/kg组明显降低血尿酸水平（均p<0.05），EGCG 10 mg/kg组降低血尿酸水平（均p<0.05），别嘌呤醇组降尿酸水平作用极显著（p<0.001），说明别嘌呤醇对降尿酸有极好的疗效。本发明通过喂食EGCG剂量10 mg/kg、20 mg/kg、50 mg/kg发现剂量为20 mg/kg、50 mg/kg接近公知的降低尿酸的别嘌呤醇水平，剂量为10 mg/kg也有一定的降低尿酸的作用，可见本发明提出的EGCG 10 mg/kg~100 mg/kg具有降低血清尿酸的作用。
实施例2
本实施例提供了一种降低血清尿酸值的药品或保健品片剂及制备方法，其中，所述降低血清尿酸值的药品或保健品片剂的配方为：EGCG：30%，L-抗坏血酸：30%，糊精40%。
所述降低血清尿酸值的药品或保健品的制备方法如下：
1、按照配方称取EGCG和L-抗坏血酸，混合，用超纯水溶解，并超声0.5~2小时，得到混合液Ⅰ；
2、按照配方称取糊精，并加入到混合液Ⅰ，继续超声处理0.5~1.5小时，得到混合液；
3、将混合液Ⅱ置于-24~-16℃的条件下预冻1~2 h，并采用冷冻干燥设备，在-90~-30℃的条件下冷冻干燥成粉末状，得到EGCG混合干粉，即为本发明降低血清尿酸值的药品或保健品的主要成分；
4、采用压片机对EGCG混合干粉压片处理，得到本发明所述的降低血清尿酸值的药品或保健品。
为了验证本发明的EGCG药品或保健品具有降低血清尿酸值的功能，申请人做了如下实验：
将36只小鼠称重后随机分为空白对照组、高尿酸血症模型组、别嘌呤醇组、EGCG组、EGCG与L-抗坏血酸和糊精组、L-抗坏血酸和糊精组，其中L-抗坏血酸和糊精干粉的制备方法与本实施例相同，EGCG干粉、EGCG干粉与L-抗坏血酸和糊精组、L-抗坏血酸和糊精组的喂药剂量分别是20 mg/kg/d，60 mg/kg/d，40 mg/kg/d，保证其中有效成分EGCG剂量是20 mg/kg/d，每组6只小鼠。每天灌胃前一晚禁食，定时灌胃给药。空白组和高尿酸模型组每天灌胃生理盐水，别嘌呤醇组的给药剂量是5 mg/kg/d，即每天注射5 mg/kg的别嘌呤醇纯品，用于阳性对照本发明EGCG药品或保健品的效果。EGCG干粉、EGCG与L-抗坏血酸和糊精药品或保健品、L-抗坏血酸和糊精每天灌胃给药，连续7天。每日称量小鼠体重，并根据体重调整灌胃量。第7天，除空白组外，其它4组小鼠腹腔注射氧嗪酸钾300 mg/kg并灌胃10 g/kg酵母膏建立高尿酸小鼠模型；造模1h后，给药组分别灌胃EGCG干粉、EGCG与L-抗坏血酸和糊精药品或保健品、L-抗坏血酸和糊精，别嘌呤醇组腹腔注射别嘌呤醇。
各组小鼠末次给药1h后，水合氯醛麻醉，摘眼球取血。血样室温静置30 min后， 4℃ 3000 r/min离心10 min，分离血清，采用磷钨酸法测定血清中尿酸(UA)水平。6只小鼠平均尿酸水平如表3所示，其柱状图见图3。
表3：不同药物组的小鼠血清尿酸平均值表
| 组别 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 空白组(mg/L) | 31.62 | 28.11 | 30.54 | 32.16 | 31.89 | 30.54 |
| 高尿酸血症模型组(mg/L) | 41.62 | 40.54 | 41.35 | 44.59 | 40.00 | 40.27 |
| 别嘌呤醇组(mg/L) | 22.43 | 27.03 | 26.76 | 27.57 | 26.49 | 23.78 |
| EGCG干粉组(mg/L) | 36.17 | 39.36 | 36.97 | 38.30 | 34.04 | 36.70 |
| EGCG与L-抗坏血酸和糊精混合干粉组(mg/L) | 27.93 | 34.04 | 36.17 | 36.17 | 33.51 | 35.37 |
| L-抗坏血酸和糊精混合干粉组(mg/L) | 38.56 | 39.63 | 45.48 | 35.64 | 38.83 | 38.30 |
高尿酸血症模型组与空白组相比血尿酸浓度升高极明显（p<0.01），说明用氧嗪酸钾和酵母膏联合造模成功。而EGCG干粉组明显降低血尿酸水平（均p<0.05），EGCG与L-抗坏血酸和糊精药品或保健品组极明显降低血尿酸水平（均p<0.001）别嘌呤醇组降尿酸水平作用极显著（p<0.001），说明别嘌呤醇对降尿酸有极好的疗效。本发明通过喂食EGCG干粉，EGCG与L-抗坏血酸和糊精药品或保健品接近公知的降低尿酸的别嘌呤醇水平，可见本发明提出的EGCG药品或保健品具有降低血清尿酸的作用。
实施例3
申请人还提供了其他几种降低血清尿酸值的药品或保健品片剂的配方，其具体组分如下：
配方一：EGCG：35%，L-抗坏血酸：40%，糊精：8%，淀粉：15%，硬脂酸镁：2%；
配方二：EGCG：40%，L-抗坏血酸：35%，糊精：8%，淀粉：15%，滑石粉：2%；
配方三：EGCG：45%，L-抗坏血酸：35%，糊精：8%，淀粉：10%，滑石粉：1%，硬脂酸镁：1%；
配方四：EGCG：50%，L-抗坏血酸：30%，糊精：8%，魔芋粉：10%，硬脂酸镁：2%；
配方五：EGCG：35%，柠檬酸：40%，糊精：8%，淀粉：15%，滑石粉：2%；
配方六：EGCG：40%，柠檬酸：35%，糊精：8%，淀粉：15%，滑石粉：1%，硬脂酸镁：1%；
配方七：EGCG：45%，柠檬酸：35%，糊精：8%，淀粉：10%，滑石粉：1.5%，硬脂酸镁：0.5%；
配方八：EGCG：50%，柠檬酸：30%，糊精：8%，魔芋粉：10%，滑石粉：0.5%，硬脂酸镁：1.5%；
配方九：EGCG：98%，硬脂酸镁：2%；
配方十：EGCG：50%，L-抗坏血酸：48%，滑石粉：2%；
实施例4
申请人提供几种降低血清尿酸值的药品或保健品冲剂的配方，其制备方法为：将实施例2得到的EGCG混合干粉置于流化喷雾制粒设备的流化室内，利用气流使悬浮呈流化态，再喷入润湿剂或黏合剂液体，使粉末凝结成粒, 最后进行整粒，形成冲剂。
其具体组分如下：
配方一：EGCG：3%，L-抗坏血酸：2%，糊精：95%；
配方二：EGCG：2%，L-抗坏血酸：2%，糊精：96%；
配方三：EGCG：3%，柠檬酸：2%，淀粉：95%；
配方四：EGCG：2%，柠檬酸：2%，糊精：96%；
配方五：EGCG：3%，L-抗坏血酸：2%，魔芋粉：95%；
实施例5
申请人提供降低血清尿酸值的药品或保健品软胶囊，其制备方法为：将明胶放入蒸馏水中浸泡使其膨胀，待明胶溶化后将实施例2得到的混合液一并加入，搅拌混合均匀形成囊材胶液，50~80℃加热处理制成软胶片，利用轧囊机压制成为软胶囊。其配方同实施例2和实施例3。
实施例6
申请人提供降低血清尿酸值的药品或保健品胶囊，其制备方法为：将实施例2得到的EGCG混合干粉置于胶囊内，密封，得到降低血清尿酸值的药品或保健品胶囊。
Claims (10)
1.一种降低血清尿酸值的药品或保健品，其特征在于：所述降低血清尿酸值的药品或保健品中包含EGCG干粉。
2.根据权利要求1所述的降低血清尿酸值的药品或保健品，其特征在于：药品或保健品为片剂、冲剂、胶囊和软胶囊。
3.根据权利要求1所述的降低血清尿酸值的药品或保健品，其特征在于：所述EGCG干粉的含量在3~50%。
4.根据权利要求1所述的降低血清尿酸值的药品或保健品，其特征在于：所述药品或保健品中，至少还包括L-抗坏血酸、柠檬酸、糊精、淀粉、魔芋粉、硬脂酸镁和滑石粉中的一种或多种。
5.根据权利要求4所述的降低血清尿酸值的药品或保健品，其特征在于：所述药品或保健品的配方为：
配方一：EGCG：2~98%，L-抗坏血酸：2~48%，糊精：0~96%，硬脂酸镁：0~2%，滑石粉：0~2%；
配方二：EGCG：2~50%，柠檬酸：2~40%，淀粉：10~96%，硬脂酸镁：0~2%，滑石粉：0~2%；
配方三：EGCG：2~50%，柠檬酸：2~40%，魔芋粉：10~95%，硬脂酸镁：0~2%，滑石粉：0~2%。
6.一种权利要求5所述的降低血清尿酸值的药品或保健品片剂的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括如下步骤：
①按照配方称取EGCG和L-抗坏血酸，混合，用超纯水溶解，并超声处理0.5~2小时，得到混合液Ⅰ，其中，所述超声功率为150~550w；
②按照配方称取糊精，并加入到混合液Ⅰ，继续超声处理0.5~1.5小时，得到混合液，其
中，所述超声功率为150~550w；
③将混合液Ⅱ置于-24~-16℃的条件下预冻1~2 h，并采用冷冻干燥设备，在-90~-30℃的条件下冷冻干燥成粉末状，得到EGCG混合干粉；
④采用压片机对EGCG混合干粉压片处理，得到本发明所述的降低血清尿酸值的药品或保健品片剂。
7.根据权利要求5所述的降低血清尿酸值的药品或保健品的制备方法，其特征在于：所述L-抗坏血酸或为柠檬酸，糊精或为淀粉或为魔芋粉；在压片机压片处理过程中，还可以添加硬脂酸镁和滑石粉。
8.一种权利要求2所述的降低血清尿酸值的药品或保健品冲剂的制备方法，其特征在于：所述降低血清尿酸值的药品或保健品为冲剂，其制备方法为：将权利要求6所述的EGCG混合干粉置于流化喷雾制粒设备的流化室内，利用气流使悬浮呈流化态，再喷入润湿剂或黏合剂液体，使粉末凝结成粒,最后进行整粒，形成冲剂。
9.一种权利要求2所述的降低血清尿酸值的药品或保健品软胶囊的制备方法，其特征
在于：所述降低血清尿酸值的药品或保健品为软胶囊，其制备方法为：将明胶放入蒸馏水中
浸泡使其膨胀，待明胶溶化后将权利要求6所述的混合液一并加入，搅拌混合均匀形成囊
材胶液，50~80℃加热处理制成软胶片，利用轧囊机压制成为软胶囊。
10.一种EGCG的新用途：其特征在于：所述EGCG用于降低动物血清的尿酸值。
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