CN108743592A - B族维生素或ω脂肪酸在调节体内尿酸水平中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明的公开了B族维生素或ω脂肪酸在治疗高尿酸血症及与高尿酸血症相关的代谢性病症中的应用,克服了现有药物中的活性成分长期使用过程中对身体造成副作用的问题。所述应用为B族维生素或ω脂肪酸单独作为唯一活性成分单独给予需要降低尿酸的人或哺乳动物,或者B族维生素或ω脂肪酸与其他能够抑制尿酸生成速度的活性成分同时或者先后给予需要降低尿酸的人或哺乳动物。其还公开了一种治疗高尿酸血症及与高尿酸血症相关的代谢性病症的药物组合物,以B族维生素或ω脂肪酸为活性成分或主要活性成分。该药物组合物中B族维生素为水溶性维生素,长期服用也不会对人体产生严重的不良反应,且B族维生素广泛存在于日常的食物之中,易得,无毒副作用。
Description
技术领域:
本发明涉及健康保健技术领域,具体涉及一种含有B族维生素或ω脂肪酸,能够调节体内尿酸水平的药品或者保健品。
背景技术:
高尿酸血症是一种以血液中尿酸水平升高为主要特征的疾病,是导致痛风发生的基础。尿酸生成过多或排出减少均可引起高尿酸血症的发生。高尿酸血症的患病率受到许多因素的影响,如年龄、性别、不良的生活方式及饮食习惯等。近年来,随着我国经济持续发展,居民的生活水平不断提升,我国居民的膳食模式逐渐向西方膳食模式演变,肉类、海产品、啤酒等富含嘌呤的食物的摄入量不断增加,因此高尿酸血症的患病率也在不断的升高。高尿酸血症与痛风密不可分,并且是许多疾病的危险因素,如肥胖、高血压、血脂紊乱、胰岛素抵抗、肾功能不全等。
人体中的尿酸大部分来源于内源性嘌呤代谢,约占80%;少部分来源于富含嘌呤或者核蛋白的食物的分解。尿酸是嘌呤代谢的终产物。嘌呤代谢的主要场所是肝脏,肝脏中XOD、ADA是促进嘌呤代谢产生尿酸的两种重要的酶。
尿酸生成过多和(或)排泄障碍都可以导致高尿酸血症的发生。尿酸的排泄量受到肾脏肾小管的分泌和重吸收的双重影响。一般而言,80%~90%的痛风患者存在尿酸分泌不足的情况。尿酸在肾脏中的清除依赖于尿酸转运蛋白,目前已经发现有多种尿酸盐转运蛋白介导尿酸盐的重吸收或者分泌的过程。尿酸盐转运蛋白分为尿酸盐重吸收转运蛋白和尿酸盐排泄转运蛋白两类,如有机阴离子转运体1(OAT1)、尿酸盐阴离子转运体1(URAT1)等。OAT1主要在近端小管上皮细胞膜基底侧表达,它可以将尿酸从肾脏间质转运到小管上皮细胞,对尿酸盐的排泄起到重要作用。作为表达在肾脏刷状缘上的尿酸转运蛋白,URATl对于尿酸重吸收起着至关重要的作用。管腔内的尿酸通过URATI与细胞内阴离子,如乳酸盐和烟酸盐交换进行重吸收。因此对诸如URATl及OAT1等与尿酸在肾脏中转运相关的蛋白深入研究,有助于了解高尿酸血症形成的机制,并为治疗高尿酸血症提供可能的依据。
目前,临床上治疗高尿酸血症的方法以药物治疗为主,如使用促尿酸排泄药物(如丙磺舒、苯溴马隆)和抑制尿酸生成的药物(如别嘌呤醇)等。但药物治疗周期长切存在毒副作用,使高尿酸血症患者未能得到有效的治疗。
发明内容:
本发明的目的在于公开了B族维生素或ω脂肪酸在治疗高尿酸血症及与高尿酸血症相关的代谢性病症中的应用,克服了现有药物中的活性成分长期使用过程中对身体造成副作用的问题。
为了实现上述目的,本发明采用的技术方案为:B族维生素或ω脂肪酸在治疗高尿酸血症及与高尿酸血症相关的代谢性病症中的应用。
所述应用为B族维生素或ω脂肪酸单独作为唯一活性成分单独给予需要降低尿酸的人或哺乳动物,或者B族维生素或ω脂肪酸与其他能够抑制尿酸生成速度的活性成分同时或者先后给予需要降低尿酸的人或哺乳动物。
所述高尿酸病症相关的代谢病症包括痛风、痛风关节炎、痛风发作、尿酸性肾石病和痛风性肾病等。
一种治疗高尿酸血症及与高尿酸血症相关的代谢性病症的药物组合物,以B族维生素或ω脂肪酸为活性成分或主要活性成分。
所述药物组合物还包括可药用辅料。
所述B族维生素为维生素B2、维生素B6、维生素B12、叶酸中的一种或多种。
所述ω脂肪酸的用量为每人每天350mg-700mg。
所述ω脂肪酸具体为十二碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)中的一种或两种。
所述药物组合物为口服剂型或注射剂型,所述口服剂型包括但不限于片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、滴丸剂、口服液、糖浆剂、混悬剂;所述注射剂型包括但不限于注射液、注射用粉针剂。
本发明与现有技术相比具有以下有益效果:(1)B族维生素为水溶性维生素,长期服用也不会对人体产生严重的不良反应。(2)B族维生素广泛存在于我们日常的食物之中,较易获得,无毒副作用。
附图说明:
图1为实施例1中各组大鼠血清尿酸随干预时间的变化图。
图2为实施例1中各组大鼠肾脏OAT1表达情况。
图3为实施例1中各组大鼠肾脏RST表达情况。
图4为实施例1中各组大鼠肾脏病理切片光镜图。(HE染色,×200,其中,A:空白对照组;B:模型组;C:阳性对照组;D:维生素B2组;E:维生素B6组;F:维生素B2+B6组,箭头所指为炎性细胞)。
图5为实施例2中各组大鼠血清尿酸随干预时间的变化图。
图6为实施例2中各组大鼠肾脏OAT1表达情况。
图7为实施例2中各组大鼠肾脏RST表达情况。
图8为实施例2中各组大鼠肾脏病理切片光镜图。(HE染色,×200,其中,A:空白对照组(C组);B:模型组(HU组,箭头所指为炎性细胞);C:阳性对照组(AL组);G:ω脂肪酸低剂量组(ωL组);H:ω脂肪酸中剂量组(ωM组);I:ω脂肪酸高剂量组(ωH组,箭头所指为炎性细胞)。
具体实施方式:
下面结合具体实施例进一步描述本发明的具体技术方案。
实施例1:维生素B2、B6对大鼠高尿酸血症的影响
1.1实验动物分组及处理
采用随机数字表法将72只6周龄体质量为200±20g的雄性SD大鼠(购自山东省鲁抗制药有限公司,合格证为SCXK鲁20140007)按体重分为六组,分别为空白对照组(C组)、模型组(HU组)、阳性对照(AL)组、维生素B2(B2)组、维生素B6(B6)组、维生素B2+B6(BB)组,每组各12只。每6只大鼠同笼饲养,维持室温在25℃左右。C组大鼠给予普通颗粒饲料喂养(购于山东省鲁抗制药有限公司)。其余各组给予质量分数为20%酵母饲料喂养(按照普通饲料:酵母膏为1:4的比例配制酵母饲料,最终将饲料制成团状)。除空白对照组外,其余各组大鼠给予1g/(kg·d·bw)氧嗪酸钾灌胃;在此基础上,阳性对照组大鼠给予别嘌呤醇20mg/(kg·d·bw),B2组大鼠给予1.18mg/(kg·d·bw)VitB2灌胃、B6组大鼠给予23.73mg/(kg·d·bw)VitB6灌胃,维生素B2+B6组大鼠给予1.18mg/(kg·d·bw)VitB2+23.73mg/(kg·d·bw)VitB6灌胃;灌胃体积均为5ml/(kg·d·bw),所有大鼠均自由饮水(自来水)和进食。
1.2标本采集及处理
在干预第0、4、12周末,早晨8点,大鼠禁食12h后断尾取血1.0~1.5ml。室温静置30min以上,使用离心机在4℃条件下以3000r/min的转速离10min,留取血清,干预16周后,大鼠禁食12h,腹腔注射戊巴比妥钠麻醉处死,留取血清、摘取肝脏、肾脏。使用全自动生化分析仪来测定血清中血清尿酸(SUA)、血清尿素(Urea)、血清肌酐(SCr)水平。准确称取肝脏组织1g,加入9ml 0.9%生理盐水,在冰浴条件下,机械匀浆制成10%肝匀浆,将制得的肝匀浆3000r/min的转速离10min,取100μl上清液,利用比色法测定肝脏XOD活性,取50μl肝匀浆上清液,测定ADA活性。采用Western blotting检测大鼠肾脏有机阴离子转运子1(OAT1)、肾脏尿酸盐转运体(RST)的蛋白表达水平。同时观察肾脏组织学病理切片
1.3实验结果
1.3.1测定血清尿酸(SUA)、血清尿素(Urea)和血清肌酐(SCr)
尿素是蛋白质分解的代谢产物,主要通过肾脏进行排泄。当摄入食物及体内分解代谢处于相对平衡的时候,血清尿素的水平取决于肾脏的排泄能力。因此,尿素的浓度在一定程度上可反映肾脏的损伤程度,是常用的肾功能指标之一。血清肌酐主要通过肾脏排出,机体内血清肌酐的水平也是反映肾脏功能的重要指标之一。图1为不同时刻对大鼠血清尿酸的测定结果,可以看出,HU组大鼠SUA水平明显高于其他各组,说明建模成功。干预16周末,HU组、B2组、B6组、BB组大鼠SUA水平与C组相比显著升高,而与HU组相比,AL组、B2组、B6组、BB组大鼠血尿酸水平明显降低,说明维生素B2和维生素B6对高尿酸血症大鼠SUA水平有明显的改善作用。
表1为干预16周后,不同组大鼠的血清尿素和血清肌酐水平。对于血清尿素,与C组相比,HU组明显升高,B2组大鼠血清尿素水平明显降低,与HU组相比,B2组、B6组、BB组大鼠血清尿素水平明显降低。对于血清肌酐,与C组相比,HU组明显升高,与HU组相比,B2组、B6组、BB组大鼠血清肌酐水平明显降低。结果说明,维生素B2、维生素B6,以及两者连用,均可以调节体内尿酸的排泄。
表1各组大鼠Urea、SCr、XOD和ADA的表达情况
注:a:与C组相比,差异有统计学意义,p<0.05;b:与HU组相比,差异有统计学意义,p<0.05,下述均相同;c:与AL组相比,差异有统计学意义,p<0.05。
1.3.2测定黄嘌呤氧化酶(XOD)和腺苷脱氨酶(ADA)的表达
XOD可以催化次黄嘌呤生成黄嘌呤,同时产生超氧阴离子自由基,当有电子受体及显色剂存在的情况下,生成紫红色结合物,根据结合物的生成量可推算出XOD的活力。ADA催化腺嘌呤核苷水解产生氨,然后对氨进行显色,从而计算出ADA的活性。干预16周后,大鼠肝均浆XOD和ADA活力如表1所示。对于XOD的表达,与C组相比,HU组XOD和ADA活力明显升高,说明,食物中摄入嘌呤过多、内源性嘌呤生成过多、嘌呤代谢速度加快,表1中血清尿酸水平升高也说明这一点。B2组、B6组及BB组大鼠肝匀浆中XOD的活性较HU组明显降低,证明补充维生素B2、维生素B6及两者联合应用,可以通过降低XOD活性,从而达到降低尿酸生成的目的。对于ADA的表达,B2、B6组大鼠肝匀浆中ADA的活性较HU组显著降低,证明维生素B2、维生素B6可以通过降低ADA活性,从而降低血尿酸的生成。
1.3.3测定大鼠肾脏有机阴离子转运子1(OAT1)、肾脏尿酸盐转运体(RST)的蛋白表达水平
肾脏是尿酸主要的排泄器官。尿酸在肾脏中的清除依赖于尿酸转运蛋白。有机阴离子转运子1(organic anion transporter 1,OAT1)和肾脏尿酸盐转运体(RST)参与大鼠体内的尿酸的清除。大鼠体内的肾脏尿酸盐转运体(RST)通过控制尿酸重吸收能够控制尿酸的排泄,缺乏RST,尿酸的重吸收作用降低,血液中SUA增加。OAT1对尿酸盐的排泄也起重要作用,缺乏OAT1,尿酸的排泄能力降低。本实施例通过提取肾脏蛋白测定RST和OAT1的表达情况。各组大鼠肾脏OAT1表达情况如图2及表2所示。与C组相比,HU组、B2组、B6组和BB组大鼠肾脏OAT1的表达均降低。B2组、B6组和BB组OAT1的表达与HU组相比有升高的趋势。证明维生素B2、维生素B6以及两者联合应用,可以通过提高OAT1的活性,促进尿酸的排泄,从而达到降低血尿酸的目的。
各组大鼠肾脏RST表达情况如图3及表2所示。与C组相比,HU组、B2组、B6组和BB组大鼠肾脏RST的表达均升高。与HU组相比,B2组、B6组和BB组大鼠RST的表达分别降低了55.83%、55.83%和40.83%,表明维生素B2、维生素B6以及两者联合应用,可以降低RST的活性,进而降低重吸收作用,促进尿酸的排泄,从而降低SUA水平。
表2各组大鼠肾脏OAT1及RST相对表达情况(Mean±SD)
1.3.4观察大鼠肾脏病理切片
采用光镜观测细胞形态,结果如图4所示,结果表明,C组、AL组、B6组大鼠肾脏结构正常肾皮质中肾小球分布均匀,大小正常,肾小管无肿胀变性,无炎性细胞浸润。而HU组、B2组、BB组大鼠的肾脏可见不同程度的炎性细胞浸润,但无明显纤维化。其中HU组大鼠肾脏组织炎性细胞浸润的程度最高。
实施例2:ω脂肪酸对大鼠高尿酸血症的影响
2.1实验动物分组及处理
采用随机数字表法将72只6周龄体质量为200±20g的雄性SD大鼠(购自山东省鲁抗制药有限公司,合格证为SCXK鲁20140007)按体重分为六组,分别为空白对照组(C组)、氧嗪酸钾模型组(HU组)、阳性对照组(AL组)ω脂肪酸低剂量组(ωL组)、ω脂肪酸中剂量组(ωM组)、ω脂肪酸高剂量组(ωH组)。利用酵母饲料喂养与氧嗪酸钾灌胃建立大鼠高尿酸血症模型,酵母饲料的配置以及氧嗪酸钾的用药剂量同实施例1。在氧嗪酸钾灌胃后1h,分别给予ωL组、ωM组、ωH组36.75mg/kg·bw、73.5mg/kg·bw、147mg/kg·bw的ω脂肪酸灌胃。
2.2标本采集及处理(同实施例1)
2.3实验结果
2.3.1测定血清尿酸(SUA)、血清尿素(Urea)和血清肌酐(SCr)
如图5所示,干预16周后,C组、HU组、AL组、ωL组、ωM组及ωH组大鼠Urea水平分别达到了6.53mmol/L、7.10mmol/L、7.04mmol/L、6.01mmol/L、6.13mmol/L和6.58mmol/L。与C组相比,HU组Urea水平升高,与HU组相比,ωL组、ωM组大鼠Urea水平降低比较明显,而ωH组大鼠Urea水平变化不明显。如表3所示,干预16周后,与C组相比,HU组SCr水平升高,与HU组相比,ωL组、ωM组及ωH组大鼠SCr水平均降低,且ωL组、ωM组降低明显。
表3各组大鼠SCr变化情况(μmol/L)
注:a:与C组相比,差异有统计学意义,p<0.05;b:与HU组相比,差异有统计学意义,p<0.05;c:与AL组相比,差异有统计学意义,p<0.05;d:与ωH组相比,差异有统计学意义,p<0.05。下同。
2.3.3测定黄嘌呤氧化酶(XOD)和腺苷脱氨酶(ADA)的表达
如表3所示,干预16周后,HU组、ωM组和ωH组大鼠肝匀浆XOD活力显著高于C组,分别上升了27.36%、10.71、22.37%。与HU组相比,ωL组、ωM组及ωH组大鼠肝匀浆XOD活力均降低,但ωH组大鼠XOD水平降低不明显。干预16周后,与C组相比,HU组大鼠肝匀浆ADA活力明显升高。与HU组相比,ωL组、ωM组及ωH组大鼠ADA水平均降低,但ωM组及ωH组大鼠ADA水平没有恢复到正常水平。因此,中低剂量的ω脂肪酸能够通过调节尿酸的产生达到降低尿酸的目的。
2.3.4测定大鼠肾脏有机阴离子转运子1(OAT1)、肾脏尿酸盐转运体(RST)的蛋白表达水平
如图6及表4所示,与HU组相比,ωL组、ωM组及ωH组大鼠肾脏OAT1的表达均升高。ωL组和ωM组OAT1的表达与HU组相比有较明显的升高趋势。证明中低剂量ω脂肪酸,可以通过提高OAT1的活性,促进尿酸的排泄,从而达到降低血尿酸的目的。如图7及表5所示。与C组相比,其余各组大鼠肾脏RST的表达显著升高。而与HU组相比,AL组、ωL组、ωM组和ωH组表达水平并无明显差别。提示ω脂肪酸可能不是通过降低尿酸在肾脏中的重吸收而发挥作用的。
表4各组大鼠肾脏OAT1及RST相对表达情况(Mean±SD)
2.3.5观察大鼠肾脏病理切片
制备大鼠肾脏病理切片,采用光镜观测细胞形态,结果如图8所示,结果表明C组、AL组、ωL组及ωH组大鼠肾脏结构正常肾皮质中肾小球分布均匀,大小正常,肾小管无肿胀变性,无炎性细胞浸润。而HU组与ωH组大鼠的肾脏可见炎性细胞浸润,但无明显纤维化。两组炎性细胞浸润程度相同。
Claims (9)
1.B族维生素或ω脂肪酸在治疗高尿酸血症及与高尿酸血症相关的代谢性病症中的应用。
2.根据权利要求1所述的B族维生素或ω脂肪酸在治疗高尿酸血症及与高尿酸血症相关的代谢性病症中的应用,其特征在于,所述应用为B族维生素或ω脂肪酸单独作为唯一活性成分单独给予需要降低尿酸的人或哺乳动物,或者B族维生素或ω脂肪酸与其他能够抑制尿酸生成速度的活性成分同时或者先后给予需要降低尿酸的人或哺乳动物。
3.根据权利要求1所述的B族维生素或ω脂肪酸在治疗高尿酸血症及与高尿酸血症相关的代谢性病症中的应用,其特征在于,所述高尿酸病症相关的代谢病症包括痛风、痛风关节炎、痛风发作、尿酸性肾石病和痛风性肾病。
4.一种治疗高尿酸血症及与高尿酸血症相关的代谢性病症的药物组合物,其特征在于,以B族维生素或ω脂肪酸为活性成分或主要活性成分。
5.根据权利要求4所述的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物还包括可药用辅料。
6.根据权利要求5所述的药物组合物,其特征在于,所述B族维生素为维生素B2、维生素B6、维生素B12、叶酸中的一种或多种。
7.根据权利要求5所述的药物组合物,其特征在于,所述ω脂肪酸的用量为每人每天350mg-700mg。
8.根据权利要求7所述的药物组合物,其特征在于,所述ω脂肪酸为十二碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)中的一种或两种。
9.根据权利要求4所述的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物为口服剂型或注射剂型,所述口服剂型包括但不限于片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、滴丸剂、口服液、糖浆剂、混悬剂;所述注射剂型包括但不限于注射液、注射用粉针剂。
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CN108042627A (zh) * | 2017-12-28 | 2018-05-18 | 广东粤微食用菌技术有限公司 | 一种降高尿酸血症的组合物及其制备方法和用途 |
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2018
- 2018-08-24 CN CN201810970094.3A patent/CN108743592A/zh active Pending
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