CN107625970B - 一种声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统 - Google Patents
一种声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107625970B CN107625970B CN201710690846.6A CN201710690846A CN107625970B CN 107625970 B CN107625970 B CN 107625970B CN 201710690846 A CN201710690846 A CN 201710690846A CN 107625970 B CN107625970 B CN 107625970B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- microbubble
- inflammatory cell
- cd11b
- atherogenic
- biomimetic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明公开了一种声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统。其中炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体，所述微泡复合体包括相互连接的CD11b靶向微泡和炎性细胞。本发明利用修饰的微泡表面基团与活化的炎性细胞表面的CD11b分子连接，成功构建微泡‑CD11b‑炎性细胞复合体，既可以确保微泡通过炎性细胞表面特有的CD11b分子与血液中的炎性细胞结合，同时保留了炎性细胞与血管内皮粘附和迁移的作用位点，并采用声辐射力增加该复合体在局部的浓度和靶向粘附效应，实现了对于动脉粥样硬化部位内皮炎性活动的活体显示，进而模拟炎性细胞致动脉粥样硬化的病理生理过程，极具仿生意义。
Description
技术领域
本发明属于医学影像领域，具体涉及一种声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向的系统及方法。
背景技术
心脑血管病已成为危害我国居民健康的头号杀手，近年研究证实动脉粥样硬化斑块破裂和继发血栓形成是急性心脑血管事件的重要原因，早期识别和干预动脉粥样硬化成为21世纪我国提高人民健康水平的重要内容。
动脉粥样硬化是累及全身的系统性炎性病变，现有研究表明，从早期的脂质条纹伊始，就有包括单核细胞、中性粒细胞、巨噬细胞等在内的炎症细胞参与其中。受损的动脉内皮藉由表达增加的黏附分子和配体靶点，趋化、吸附血液循环中的炎性细胞并促进后者进入内皮下间隙，吞噬脂质转变为泡沫细胞。可见，血液循环中的炎性细胞和内皮的粘附，是整个动脉粥样硬化始动和发展的关键环节。CD11a、CD11b、CD11c是CD11家族成员，是炎性细胞(如：中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞和自然杀伤细胞)表面的特异性分化抗原，CD11a、CD11c与动脉粥样硬化间的关系已有研究证实，对炎性细胞与内皮细胞的粘附和向内皮下的迁移和动脉粥样硬化过程具有关键作用。在正常情况下CD11b在中性粒细胞表面低水平表达，到受到TNF-α、IL-1等炎性因子的刺激时，迅速易位至细胞膜，在细胞膜表面大量表达，可认为是单核细胞、中性粒细胞活化的标志。然而迄今为止关于血液循环中炎性细胞与动脉粥样硬化发生、进展的时间前瞻性研究鲜有报道，其中原因之一是无法对炎性细胞的粘附和迁移过程进行动态观察。
近年来随着超声分子生物学的发展，超声微泡(microbubble，MB)，即超声对比剂，具有安全性高、能增强超声散射强度和产生丰富的谐波信号的特点，极大提高了疾病诊断的敏感性；而经MB表面修饰的靶向MB更可藉由主动靶向增强诊断的特异性。以MB为主体的复合体，可同时实现抗体、小分子蛋白、多肽、寡核苷酸等负载，兼具干预疾病过程的治疗作用。MB作为一种血池显像剂，在流场中表现为明显的轴流效应，在血管中心部位聚集最多，且流速最快，而越靠近血管壁MB数量越少，流速也越低。但只有靠近管壁的MB，其表面的负载物才能与管壁或管壁的靶标结合，因此目前单纯依靠MB在流场中的运动和MB表面负载物的主动靶标结合力所实现的对比成像和靶向治疗效果较差，达不到预期的诊断和治疗目的。
发明内容
为了解决上述问题，本发明创造性地提出利用修饰的微泡表面基团与活化的炎性细胞表面的CD11b分子连接，成功构建微泡-CD11b-炎性细胞复合体，既可以确保微泡通过炎性细胞表面特有的CD11b分子与血液中的炎性细胞结合，同时保留了炎性细胞与血管内皮粘附和迁移的作用位点，并采用声辐射力增加该复合体在局部的浓度和靶向粘附效应，实现了对于动脉粥样硬化部位内皮炎性活动的活体显示，进而模拟炎性细胞致动脉粥样硬化的病理生理过程，极具仿生意义。
为了实现上述目的，具体的，本发明涉及以下技术方案：
本发明的第一个方面，公开了一种炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体，所述微泡复合体包括相互连接的CD11b靶向微泡和炎性细胞；
所述CD11b靶向微泡包括脂质外壳和气体内芯，所述脂质外壳的外表面连接有CD11b配体；
所述CD11b靶向微泡粒径为1-2μm；
所述CD11b配体包括寡核苷酸链、肽段、多克隆抗体、单克隆抗体、天然抗体片段、重组抗体片段和多特异性抗体中的任意一种；优选的，所述CD11b配体为单克隆抗体，CD11b单克隆抗体可通过市售购得，来源广泛，同时分子量相对较小，与脂质外壳连接特异性强；
所述脂质外壳由二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE)-聚乙二醇2000及生物素化的DSPE-聚乙二醇2000混合制成；
所述气体内芯为生物惰性气体，进一步优选为全氟丙烷气体(C3F8)；
所述炎性细胞包括中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞或自然杀伤细胞(NK细胞)中的一种或多种；进一步优选的，所述炎性细胞为中性粒细胞；
本发明的第二方面，公开了一种炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体的制备方法，包括如下步骤：
S1.以二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE)-聚乙二醇2000及生物素化的DSPE-聚乙二醇2000为膜材，通过薄膜-水化法制备得到超声微泡造影剂；
S2.向超声微泡造影剂通入生物惰性气体，振荡制备超声脂质微泡；
S3.将超声脂质微泡与CD11b配体通过生物素-链霉素反应连接制备CD11b靶向微泡；
S4.CD11b靶向微泡与炎性细胞通过抗原抗体反应构建炎性细胞-CD11b-微泡复合体即炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体。
其中，步骤S1中超声微泡造影剂的具体制备方法为：
S11.将二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE)-聚乙二醇2000及生物素化的DSPE-聚乙二醇2000按质量比7：1～3：1溶于氯仿中制成悬浮液，将所述悬浮液充分混匀，在干燥氮气(N2)作用下形成磷脂薄膜；
S12.在磷脂薄膜中加入水化液，在摇床中恒温水化，后置于水浴式超声振荡器中震荡至均一且通明的液体即得超声微泡造影剂；
所述水化液优选为pH7.4的0.1M Tris缓冲液；
所述摇床设定温度为50～70℃(优选为65℃)，水化时间为0.5～2h；
步骤S2中生物惰性气体优选为全氟丙烷气体(C3F8)；
步骤S3中还包括有链霉亲和素，具体的，所述CD11b配体经过生物素修饰形成生物素化CD11b配体，链霉亲和素一端与生物素化的DSPE-聚乙二醇2000连接，一端与生物素化的CD11b配体连接，通过生物素-链霉素反应，形成生物素-链霉亲和素-生物素结构，此种结构稳定性好；
步骤S4中所述炎性细胞包括中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞或自然杀伤细胞(NK细胞)中的一种或多种；进一步优选的，所述炎性细胞为中性粒细胞；
本发明的第三方面，公开了上述炎性细胞-CD11b-微泡复合体在声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统中的应用。
所述应用中包括超声辐射力发生装置，所述超声辐射力发生装置包括任意波形发生器、射频功率放大器和聚焦超声探头；
所述应用中超声设置参数为：聚焦超声探头2.25MHz，焦距4.25cm，焦点面积1.00mm2，输出电压100mvpp，RF 50-70％，峰值负压为0.11MPa-0.28Mpa；需要说明的是，由于动脉粥样硬化斑块位于高剪切应力的血流状态下，本发明通过上述超声参数的设置，有效改变靶向超声微泡在动脉中的轴向分布特征，引导微泡-CD11b-炎性细胞复合体向成像目标(动脉)的管壁贴近并停留，从而有助于实现动脉系统的靶向超声分子成像。
本发明有益技术效果：
本发明利用修饰的微泡表面基团与活化的炎性细胞表面的CD11b分子连接，构建微泡-CD11b-炎性细胞复合体，既可以确保微泡通过炎性细胞表面特有的CD11b分子与血液中的炎性细胞结合，同时又保留了炎性细胞与血管内皮粘附和迁移的作用位点，实现了对于动脉粥样硬化部位内皮炎性活动的活体显示，并可动态观察炎性细胞迁移至内皮下的情况；
通过调节聚焦超声的各项参数，从而使所产生的声辐射力处于生物安全范围内，推动静态和动态流场中微泡向管壁聚集，极大增强微泡复合体与管壁靶标的靶向结合，实现在体循环流场条件下操控微泡的空间分布，强化图像对比增强效果和微泡复合体所负载药物的局部富集，同时采用声辐射力增加该复合体在局部的浓度和靶向粘附效应；
同时，由于所采用的炎性细胞取自同种属，故而模拟了炎性细胞致动脉粥样硬化的病理生理过程，具有仿生意义，为进一步研究血液循环中炎性细胞与动脉粥样硬化发生、进展之关系奠定基础。
附图说明
图1为炎性细胞-CD11b-微泡复合体结构示意图；其中，1-CD11b靶向微泡；2-炎性细胞；3-动脉粥样硬化部位；
图2为声辐射力产生系统及体外实验装置；
图3为ApoE-/-小鼠实施例强化效果图。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
正如背景技术所介绍的，今为止关于血液循环中炎性细胞与动脉粥样硬化发生、进展的时间前瞻性研究鲜有报道，其中原因之一是无法对炎性细胞的粘附和迁移过程进行动态观察；
有鉴于此，本发明的一种具体实施方式中，提供一种炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体，所述微泡复合体包括相互连接的CD11b靶向微泡和炎性细胞；
所述CD11b靶向微泡包括脂质外壳和气体内芯，所述脂质外壳的外表面连接有CD11b配体；
所述CD11b靶向微泡粒径为1-2μm；发明人在试验研究中意外发现，CD11b靶向微泡粒径影响甚大，由于本实验中是将CD11b靶向微泡和炎性细胞进行抗原抗体反应进行连接同时在血管内迁移运动，因此二者的连接紧密性直接影响试验效果，发明人发现，靶向微泡粒径过大，不仅降低靶向微泡和炎性细胞静态连接率，同时在迁移运动状态下CD11b靶向微泡与炎性细胞也更易分离；而进一步减小微泡粒径，不仅增加制备难度，同时发明人发现，尽管静态连接率较本发明优选范围有所提高，但是在CD11b靶向微泡和炎性细胞迁移运动中，二者连接率则远低于本申请CD11b靶向微泡与炎性细胞的连接率；
所述CD11b配体包括寡核苷酸链、多肽、多克隆抗体、单克隆抗体、天然抗体片段、重组抗体片段和多特异性抗体中的任意一种；优选的，所述CD11b配体为单克隆抗体，CD11b单克隆抗体可通过市售购得，来源广泛，同时分子量相对较小，与脂质外壳连接特异性强；
所述脂质外壳由二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE)-聚乙二醇2000及生物素化的DSPE-聚乙二醇2000混合制成；
所述气体内芯为生物惰性气体，优选为全氟丙烷气体(C3F8)；
所述炎性细胞包括中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞或自然杀伤细胞(NK细胞)中的一种或多种；优选的，所述炎性细胞为中性粒细胞；
本发明的又一具体实施方式中，提供一种炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体的制备方法，包括如下步骤：
S1.以二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE)-聚乙二醇2000及生物素化的DSPE-聚乙二醇2000为膜材，通过薄膜-水化法制备得到超声微泡造影剂；
S2.向超声微泡造影剂通入生物惰性气体，振荡制备超声脂质微泡；
S3.将超声脂质微泡与CD11b配体通过生物素-链霉素反应连接制备CD11b靶向微泡；
S4.CD11b靶向微泡与炎性细胞通过抗原抗体反应构建炎性细胞-CD11b-微泡复合体即炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体。
其中，步骤S1中超声微泡造影剂的具体制备方法为：
S11.将二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE)-聚乙二醇2000及生物素化的DSPE-聚乙二醇2000按质量比7：2：1溶于氯仿中制成悬浮液，将所述悬浮液于65℃恒温水浴下充分混匀，在干燥氮气(N2)作用下形成磷脂薄膜，边用氮气吹，边用振荡器震荡，使氯仿充分挥发并形成均匀的薄膜，后真空机(功率250W,转速1400r/min)抽滤3小时以上，进一步确保氯仿挥发充分，以防止氯仿的残留；
S12.在磷脂薄膜中加入水化液，在65℃摇床中恒温水化1h，后置于水浴式超声振荡器中震荡至均一且通明的液体即得超声微泡造影剂；
步骤S2中生物惰性气体优选为全氟丙烷气体(C3F8)，具体的，将超声微泡造影剂分装于洁净的西林瓶中并密封保存；以全氟丙烷等惰性气体置换瓶中的空气，使用三通管进行换气操作。将换完气的西林瓶置于银汞调和器(1.5A,36W)中震荡60秒钟，而后采用离心法(400g，3min)去除多余的尚未结合的脂质，即可制得超声脂质微泡；
步骤S3中还包括有链霉亲和素，具体的，所述CD11b配体经过生物素修饰形成生物素化CD11b配体，链霉亲和素一端与生物素化的DSPE-聚乙二醇2000连接，一端与生物素化的CD11b配体连接，通过生物素-链霉素反应，形成生物素-链霉亲和素-生物素结构，此种结构稳定性好；
步骤S4中所述炎性细胞包括中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞或自然杀伤细胞(NK细胞)中的一种或多种；进一步优选的，所述炎性细胞为中性粒细胞；
本发明的又一具体实施方式中，公开了上述炎性细胞-CD11b-微泡复合体在声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统中的应用；
所述应用中包括超声辐射力发生装置，所述超声辐射力发生装置包括任意波形发生器、射频功率放大器和聚焦超声探头；
所述应用中超声设置参数为：聚焦超声探头2.25MHz，焦距4.25cm，焦点面积1.00mm2，输出电压100mvpp，RF 50-70％，峰值负压为0.11MPa-0.28Mpa；
本发明的又一具体实施方式中，所述炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体可再负载干预动脉粥样硬化炎性活动的蛋白、多肽或寡核苷酸，从而同时实现对导致斑块不稳定的特定环节的靶向干预，实现对不稳定斑块的靶向治疗。
以下通过实施例对本发明做进一步解释说明，但不构成对本发明的限制。
实施例1
如图2所示，为一个声辐射力产生系统，包括：自由波形转换器，射频功率放大器，以及聚焦超声探头和连接线。实验步骤如下：
步骤101，连接任意波形发生器，射频功率放大器和探头(聚焦探头，2.25MHz)
步骤102，根据实验，我们利用2.25MHz的聚焦超声探头(焦距4.25cm)放入定制试验水槽中，焦距4.25cm，焦点面积1.00mm2，调节数值，2.25MHz，100mvpp，RF50-80％，峰值负压为0.11MPa-1.36Mpa。
步骤103，按照上述方法制备超声脂质微泡。微泡经过马尔文粒径测量，平均直径为1-2微米。
步骤104，静止流体系统，将微泡注入流体管或平行板中中，注满后静止。
步骤105，连接微泡流体系统(流动腔或平行板，电子微流泵)，放入高速显微镜下，调节微流泵数值，设置流速。
步骤106，启动聚焦超声探头生成声辐射力。
本实施例中，峰值负压在0.11～1.36MPa情况下，均能保持机械指数处于生物安全范围内(表1)。以峰值负压0.55MPa为例，机械指数为0.36，在静止流体中，探头开启当时恰好能使微泡瞬间大量贴于对侧管壁。微泡流速为100ml/h时，即刻可见微泡由轴流变为边流，大量聚集贴服于对侧管壁；流速为300ml/h时，6秒钟微泡即可贴服于对侧管壁(表2)。
表1静止条件下不同声辐射力参数对微泡贴壁的效果比较
| 峰值负压(Mpa) | 机械指数MI | 微泡能否到达对侧管壁 |
| 0.11 | 0.17 | 不能 |
| 0.17 | 0.11 | 不能 |
| 0.28 | 0.18 | 能 |
| 0.52 | 0.34 | 能 |
| 0.55 | 0.36 | 能 |
| 1.36 | 0.90 | 能 |
表2不同流速流体状态下固定参数声辐射力微泡贴壁效果比较(0.55Mpa)
本发明超声辐射力推动微泡位移的所具有的特性如下：
1、具有良好的生物安全性，使用低频超声探头，对细胞和组织没有损伤，安全性高。
2、效果明显，不管是在静止流体还是在流动状态下，即可见微泡大量贴附于对侧管壁。
3、可以大幅度提高超声诊断的灵敏性。
4、可以提高靶向微泡的靶向效能。
5、操作简单，连接稳固，实用性强。
实施例2
以percoll密度梯度分离ApoE-/-小鼠外周血中中性粒细胞。按上述方法以二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE)-聚乙二醇及生物素化的DSPE-聚乙二醇利用薄膜水化法制备全氟丙烷脂质微泡，微泡粒径1-2微米。利用利用生物素-链霉素反应将CD11b配体与微泡连接，再经由抗原抗体反应构建中性粒细胞-CD11b-微泡复合体，如图1所示。
将该复合体经尾静脉弹丸式注射入高脂喂养12周的ApoE-/-小鼠，16MHz小动物超声探头至于体表，扫查主动脉弓部位。2.25MHz的聚焦超声探头用于产生声辐射力，置于成像探头旁。在尾静脉注射后，在超声图像中可以看到微泡产生的血池强化，即刻释放声辐射力，其参数设定为：焦距4.25cm，焦点面积1.00mm2，输出电压100mvpp，RF 50-70％，峰值负压为0.11MPa-0.28Mpa。声辐射力持续10秒后停止，可观察局部的超声强化效果明显增强。
根据非靶向微泡、靶向微泡及靶向微泡加声辐射力的对比可见，靶向微泡可在动脉粥样硬化部位产生特异性强化，而通过特定的声辐射力调控可更加促进这种强化和信号增强。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体在制造声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统中的应用，其特征在于，所述微泡复合体包括相互连接的CD11b靶向微泡和炎性细胞；
所述CD11b靶向微泡包括脂质外壳和气体内芯，所述脂质外壳的外表面连接有CD11b配体；
所述应用中包括超声辐射力发生装置，所述超声辐射力发生装置包括任意波形发生器、射频功率放大器和低频超声探头；
所述应用中超声设置参数为：聚焦超声探头2.25MHz，焦距4.25cm，焦点面积1.00mm2，输出电压100mvpp，RF 50-70%，峰值负压为 0.11MPa-0.28Mpa；
所述CD11b靶向微泡粒径为1-2μm；
炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体的制备方法包括如下步骤：
S1. 以二硬脂酰基磷脂酰胆碱（DSPC）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺（DSPE）-聚乙二醇2000及生物素化的DSPE-聚乙二醇2000为膜材，通过薄膜-水化法制备得到超声微泡造影剂；
步骤S1中超声微泡造影剂的具体制备方法为：
S11. 将二硬脂酰基磷脂酰胆碱（DSPC）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺（DSPE）-聚乙二醇2000及生物素化的DSPE-聚乙二醇2000按质量比7：2：1溶于氯仿中制成悬浮液，将所述悬浮液充分混匀，在干燥氮气（N2）作用下形成磷脂薄膜；
S12. 在磷脂薄膜中加入水化液，在摇床中恒温水化，后置于水浴式超声振荡器中震荡至均一且通明的液体即得超声微泡造影剂；
S2. 向超声微泡造影剂通入生物惰性气体，振荡制备超声脂质微泡；
S3. 将超声脂质微泡与CD11b配体通过生物素-链霉素反应连接制备CD11b靶向微泡；
S4. CD11b靶向微泡与炎性细胞通过抗原抗体反应构建炎性细胞-CD11b-微泡复合体即炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体；
所述炎性细胞为ApoE-/-小鼠外周血中中性粒细胞。
2.如权利要求1所述的一种炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体在制造声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统中的应用，其特征在于，
所述CD11b配体包括多克隆抗体、单克隆抗体、天然抗体片段、重组抗体片段和多特异性抗体中的任意一种。
3.如权利要求2所述的一种炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体在制造声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统中的应用，其特征在于，所述CD11b配体为单克隆抗体。
4.如权利要求1所述的一种炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体在制造声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统中的应用，其特征在于，所述气体内芯为全氟丙烷气体(C3F8)。
5.如权利要求1所述的一种炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体在制造声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统中的应用，其特征在于，其中，所述水化液为pH7.4的0.1M Tris缓冲液；
所述摇床设定温度为50~70℃，水化时间为0.5~2h。
6.如权利要求5所述的一种炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体在制造声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统中的应用，其特征在于，所述摇床设定温度为65℃。
7.如权利要求1所述的一种炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体在制造声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统中的应用，其特征在于，所述CD11b配体经过生物素修饰形成生物素化CD11b配体，链霉亲和素一端与生物素化的DSPE-聚乙二醇2000连接，一端与生物素化的CD11b配体连接，通过生物素-链霉素反应，形成生物素-链霉亲和素-生物素结构。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710690846.6A CN107625970B (zh) | 2017-08-14 | 2017-08-14 | 一种声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710690846.6A CN107625970B (zh) | 2017-08-14 | 2017-08-14 | 一种声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107625970A CN107625970A (zh) | 2018-01-26 |
| CN107625970B true CN107625970B (zh) | 2021-03-19 |
Family
ID=61099927
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710690846.6A Active CN107625970B (zh) | 2017-08-14 | 2017-08-14 | 一种声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107625970B (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11698364B2 (en) | 2018-06-27 | 2023-07-11 | University Of Washington | Real-time cell-surface marker detection |
| CN108635596B (zh) * | 2018-08-07 | 2021-06-01 | 广东省第二人民医院（广东省卫生应急医院） | 一种用于干细胞超声示踪的超声造影剂及其制备方法 |
| CN109908370B (zh) * | 2019-04-10 | 2020-02-07 | 山东大学齐鲁医院 | 一种靶向肿瘤相关成纤维细胞的携载阿霉素的脂质纳米级超声造影剂及其制备方法 |
| CN111569092B (zh) * | 2020-06-03 | 2022-05-24 | 华中科技大学同济医学院附属协和医院 | 一种以巨噬细胞为载体的载药超声造影剂的制备方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101780284A (zh) * | 2009-01-15 | 2010-07-21 | 南方医科大学南方医院 | 磁性分子靶向超声造影剂微球及其制备方法 |
| CN103768602A (zh) * | 2013-12-30 | 2014-05-07 | 浙江工业大学 | 一种靶向炎症的复合物、其制备方法及应用 |
| CN104225609A (zh) * | 2014-09-20 | 2014-12-24 | 中国药科大学 | 一种炎症靶向的中性粒细胞递药系统及其应用 |
| CN105535968A (zh) * | 2015-12-11 | 2016-05-04 | 中国科学院深圳先进技术研究院 | 一种基于声场操控的纳米粒子靶向递送方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102138889A (zh) * | 2011-03-25 | 2011-08-03 | 中国科学院深圳先进技术研究院 | 靶向载药超声微泡及其制备方法 |
-
2017
- 2017-08-14 CN CN201710690846.6A patent/CN107625970B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101780284A (zh) * | 2009-01-15 | 2010-07-21 | 南方医科大学南方医院 | 磁性分子靶向超声造影剂微球及其制备方法 |
| CN103768602A (zh) * | 2013-12-30 | 2014-05-07 | 浙江工业大学 | 一种靶向炎症的复合物、其制备方法及应用 |
| CN104225609A (zh) * | 2014-09-20 | 2014-12-24 | 中国药科大学 | 一种炎症靶向的中性粒细胞递药系统及其应用 |
| CN105535968A (zh) * | 2015-12-11 | 2016-05-04 | 中国科学院深圳先进技术研究院 | 一种基于声场操控的纳米粒子靶向递送方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107625970A (zh) | 2018-01-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107625970B (zh) | 一种声辐射力强化炎性细胞致动脉粥样硬化仿生微泡复合体富集与靶向系统 | |
| Ramasubramanian et al. | Engineering extracellular vesicles as nanotherapeutics for regenerative medicine | |
| ES2740633T3 (es) | Sistema para el tratamiento y la formación de imágenes utilizando energía ultrasónica y microburbujas | |
| He et al. | Mussel-inspired conductive nanofibrous membranes repair myocardial infarction by enhancing cardiac function and revascularization | |
| Miller | Overview of experimental studies of biological effects of medical ultrasound caused by gas body activation and inertial cavitation | |
| Noh et al. | Magnetic nanoparticle-embedded hydrogel sheet with a groove pattern for wound healing application | |
| CN105617410B (zh) | 一种双靶向超声造影剂及其制备方法 | |
| CN107893050A (zh) | 一种细胞外囊泡及其制备方法和用途 | |
| CN102138889A (zh) | 靶向载药超声微泡及其制备方法 | |
| JP2015033637A (ja) | 三次元組織構造体 | |
| CN101780284B (zh) | 磁性分子靶向超声造影剂微球及其制备方法 | |
| Deng et al. | Improving the efficacy of therapeutic angiogenesis by UTMD-mediated Ang-1 gene delivery to the infarcted myocardium | |
| US20020009706A1 (en) | Method for loading cells with an agent | |
| US10265424B2 (en) | Molecular imaging contrast agents and uses thereof | |
| CN111330025A (zh) | 一种仿生微泡超声造影剂及制备方法 | |
| Ramírez-Wong et al. | Uptake of long protein-polyelectrolyte nanotubes by dendritic cells | |
| CN105999311B (zh) | 用于诊断跟腱炎的靶向显影剂及其制备方法 | |
| Zheng et al. | Convenient tumor 3D spheroid arrays manufacturing via acoustic excited bubbles for in situ drug screening | |
| Ou et al. | Graphene-based material-mediated immunomodulation in tissue engineering and regeneration: mechanism and significance | |
| Tang et al. | Controlled drug release from ultrasound-visualized elastic eccentric microcapsules using different resonant modes | |
| WO2019153529A1 (zh) | 一种靶向微泡及其制备方法和用途 | |
| CN105232463A (zh) | 一种具有人肺组织主动靶向性的甲强龙免疫纳米脂质体及其制备方法 | |
| CN110974844B (zh) | 一种负载no的靶向微泡及其制备方法和应用 | |
| Kang et al. | A maleimide-based in-vitro model for ultrasound targeted imaging | |
| US20080200862A1 (en) | Method To Administer Stem Cells In Combination With One Or More Acoustically Active Materials And Ultrasound Energy |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |