CN107574211A - 一种利用黑曲霉脱苦大豆肽的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种利用黑曲霉脱苦大豆肽的方法，该方法采用黑曲霉发酵麸皮产生外切蛋白酶：酸性蛋白酶，进而对大豆肽进行脱苦。并对影响脱苦的各项因素：加酶量、酶解pH、酶解温度、酶解时间及酶配比等进行优化。大豆肽的分子量由脱苦前的89.3%降低到89.17%，脱苦后的苦味值可达到0.822，口感得到明显提升，有较高的应用价值。

Description

一种利用黑曲霉脱苦大豆肽的方法
技术领域
本发明涉及一种微生物发酵技术，特别涉及一种利用黑曲霉脱苦大豆肽的方法。
背景技术
虽然说酶解法对大豆肽进行脱苦已经取得了良好的效果，但是考虑到蛋白酶价格比较贵，如果应用于大规模的生产，其成本必然会非常高，所以选择通过微生物发酵产生蛋白酶，然后进行脱苦也是一个很好的途径。
本发明采用黑曲霉通过麸皮发酵后能够产生外切蛋白酶：酸性蛋白酶，所以能用来脱苦大豆肽，效果良好。
发明内容
本发明的目的是提供一种黑曲霉脱苦大豆肽的方法，脱苦前后大豆肽分子量的变化较小，而苦味值明显下降。
为实现上述的目的，本发明采用的技术方案为：
步骤1：将黑曲霉先通过活化培养及活化后，再进行扩大培养，得到生长旺盛的菌种，然后通过扩大培养得到液体发酵液；
步骤2：将步骤1中的液体发酵也以1:1.5的料液比加至固体黑曲霉产酶发酵培养基中，30.0℃培养72.0h；
步骤3：将步骤2中发酵后的固体培养基浸泡于无菌水中，用纱布过滤后得到黑曲霉酸性蛋白液；
步骤4：用缓冲液调节浓度为10%的大豆肽溶液pH值至6.0；
步骤5：将步骤3得到的酸性蛋白液加入到步骤4得到的大豆肽溶液中，采用1:10的加酶量，35.0℃水浴酶解2.0h，得到脱苦后的大豆肽产品。
本发明采用黑曲霉对大豆肽进行脱苦，蛋白酶作用于苦味氨基酸的部位，使肽链缩短了，脱苦前后多肽含量变化为0.13%，能够降低4～5个苦味值，苦味值可达到0.822，脱苦效果十分明显，具有很高的应用价值。
附图说明
无。
具体实施方式
为了使本发明的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
我们采用本发明公开的方法，进行以下操作：
（1）将实验室保存的黑曲霉先通过活化培养及活化后，再进行扩大培养，得到生长旺盛的菌种，然后通过扩大培养得到液体发酵液；
（2）将步骤1中的液体发酵也以1:1.5的料液比加至固体黑曲霉产酶发酵培养基中，30.0℃培养72.0h；
（3）将步骤2中发酵后的固体培养基浸泡于无菌水中，用纱布过滤后得到黑曲霉酸性蛋白液；
（4）用缓冲液调节浓度为10%的大豆肽溶液pH值至6.0；
（5）将步骤3得到的酸性蛋白液加入到步骤4得到的大豆肽溶液中，采用1:10的加酶量，35.0℃水浴酶解2.0h，得到脱苦后的大豆肽样品。
脱苦后的大豆肽中产生了一些中坚分子量的小肽，肽链缩短了，脱苦前大豆肽中多肽含量为89.3%，黑曲霉脱苦后大豆肽中多肽含量为89.17%，损失了0.13%。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的思想和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种利用复合酶脱苦大豆肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：将黑曲霉先通过活化培养及活化后，再进行扩大培养，得到生长旺盛的菌种，然后通过扩大培养得到液体发酵液；
步骤2：将步骤1中的液体发酵也以1:1.5的料液比加至固体黑曲霉产酶发酵培养基中，30.0℃培养72.0h；
步骤3：将步骤2中发酵后的固体培养基浸泡于无菌水中，用纱布过滤后得到黑曲霉酸性蛋白液；
步骤4：用缓冲液调节浓度为10%的大豆肽溶液pH值至6.0；
步骤5：将步骤3得到的酸性蛋白液加入到步骤4得到的大豆肽溶液中，采用1:10的加酶量，35.0℃水浴酶解2.0h，得到脱苦后的大豆肽产品。
2.如权利要求1中所述的利用复合酶脱苦大豆肽的方法，其特征包括：步骤2中液体发酵也以1:1.5的料液比加至固体黑曲霉产酶发酵培养基中，30.0℃培养72.0h。
3.如权利要求1中所述的利用复合酶脱苦大豆肽的方法，其特征包括：步骤3中的发酵后的固体培养基浸泡于无菌水中，用纱布过滤后得到黑曲霉酸性蛋白液。
4.如权利要求1中所述的利用复合酶脱苦大豆肽的方法，其特征包括：步骤4中的用缓冲液调节浓度为10%的大豆肽溶液pH值至6.0。
5.如权利要求1中所述的利用复合酶脱苦大豆肽的方法，其特征包括：将步骤3得到的酸性蛋白液加入到步骤4得到的大豆肽溶液中，采用1:10的加酶量，35.0℃水浴酶解2.0h，得到脱苦后的大豆肽产品。
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