CN107561296A - 一种测定凝血酶时间（tt）的试剂盒 - Google Patents
一种测定凝血酶时间（tt）的试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107561296A CN107561296A CN201710952439.8A CN201710952439A CN107561296A CN 107561296 A CN107561296 A CN 107561296A CN 201710952439 A CN201710952439 A CN 201710952439A CN 107561296 A CN107561296 A CN 107561296A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- reagent
- kit
- dextran
- thrombin
- stabilizer
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Abstract
本发明提供了一种测定凝血酶时间的试剂盒，包含凝血酶制剂、防腐剂、稳定剂和缓冲液。所述稳定剂为聚乙二醇6000、牛血清白蛋白、Triton X‑100和右旋糖酐的混合；其在试剂盒中的浓度分别为0.05‑0.1wt%，0.5‑2wt%，0.1‑0.5wt%和2‑4%。本发明的检测试剂盒的试剂为液体且稳定的试剂，避免了制备和使用过程中因冻干和复溶过程造成的试剂的瓶间差异，从而避免测定结果之间的较大差异。本发明的试剂无需冻干，即可保证试剂的稳定性，确保了开瓶后试剂的最优有效性持续至少一个周，避免了实验结果间的较大差异，同时节约了试剂的用量，开瓶即用，操作起来更加快捷简便。
Description
技术领域
本发明属于医学检验领域，具体涉及一种凝固法测定样本凝血酶时间（TT）的试剂盒。
背景技术
人体内血液中有两种物质来维持着人体的健康，一种是凝血物质，另一种是抗凝血的物质，两者的动态平衡是正常机体维持体内血液流动和防止血液流失的关键，凝血是血液由溶胶状态转变为凝胶状态的过程。当机体内抗凝物质缺乏或纤维蛋白溶解异常时会导致血栓的形成，随着当今社会人口老龄化进程的加快，各类血栓性疾病日益成为致病、致死及恶化人类生活质量的因素，尤其是心、脑血管血栓性疾病。血栓性疾病已经成为全球总死亡率的重要原因。因此，临床上对血栓和凝血的检查十分有必要，开发一种可靠的检测凝血的试剂盒具有重要意义。
凝血酶是一种在人体抗凝、促凝的凝血级联反应中有着重要作用的生物活性蛋白。凝血酶时间(TT)是一种快速检测凝血共同通路上纤维蛋白原变成纤维蛋白的方法，是检测凝血、抗凝及纤维蛋白原溶解系统功能的一个简便试验。TT延长：见于肝素增多或类肝素物质存在，SLE，肝病，肾病，低（无）纤维蛋白原血症，异常纤维蛋白原血症（纤维蛋白原机能不良血症），FDP增多，异常球蛋白血症或免疫球蛋白增多等疾病。TT缩短：极为罕见，主要见于某些异常蛋白血症或巨球蛋白血症时，此外血液中有钙离子存在或血液呈酸性等。
目前TT的测定均已运用半自动化或自动化的仪器，检测原理是待测血浆加入适量的凝血酶溶液，使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，血浆凝固所需时间即为待测血浆凝血酶时间（TT）。由于使用测定TT的试剂质量上的不同，使得同一个患者在不同医院测定的结果相差悬殊，造成检测结果的不一致，影响对疾病的正确、及时诊断。因此，TT试剂的质量成了获得准确结果及诊断的关键。因此，研制一种有效可靠、使用方便的凝血酶时间（TT）测定试剂无疑是必要的。
发明内容
针对目前测定凝血酶时间的试剂偏差大、使用不便等问题，本发明提供一种结果可靠、试剂稳定的测定凝血酶时间的试剂盒。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。
一种测定凝血酶时间（TT）的试剂盒，包含凝血酶制剂、防腐剂、稳定剂和缓冲液。
可选地，所述的凝血酶浓度为5-10 IU/mL；优选为牛凝血酶制剂。
可选地，防腐剂为叠氮化钠、硫柳汞、山梨酸钾和ProClin 300中的任一种。
可选地，防腐剂在试剂中的浓度为0.01-0.03wt%。
所述稳定剂至少含有右旋糖酐；可选地，所述右旋糖酐的平均分子量为小于10万，如右旋糖酐70、右旋糖酐40、右旋糖酐20或右旋糖酐10；优选为平均分子量为小于5万的右旋糖酐，如右旋糖酐40、右旋糖酐20或右旋糖酐10。
更为优选地，右旋糖酐在试剂盒中的浓度为2-4wt%。
优选地，稳定剂为聚乙二醇6000、牛血清白蛋白、Triton X-100和右旋糖酐的混合，在试剂盒中的浓度分别为0.05-0.1wt%，0.5-2wt%和0.1-0.5wt%；也可以用Tween 20或Tween 80代替Triton X-100。
可选地，缓冲液为Tris-HCl、Hepes、PBS或POS缓冲液；优选为Tris-HCl缓冲液；更优选地，Tris-HCl缓冲液浓度为10-50mM。
可选地，缓冲液的pH为6.0-8.0，优选为7.0-8.0。
作为优化，上述试剂盒，由牛凝血酶、ProClin 300、聚乙二醇6000、牛血清白蛋白、Triton X-100和右旋糖酐和Tris-HCl缓冲液组成。
本发明具有以下优点：
本发明的检测试剂盒的试剂为液体且稳定的试剂，右旋糖酐可与其他稳定剂协同增加酶的稳定性，降低不同时间测定的变异系数，同时避免了制备和使用过程中因冻干和复溶过程造成的试剂的瓶间差异，从而避免测定结果之间的较大差异。本发明的试剂无需冻干，即可保证试剂的稳定性，确保了开瓶后试剂的最优有效性持续至少一个周，避免了实验结果间的较大差异，同时节约了试剂的用量，开瓶即用，操作起来更加快捷简便。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受下述实施例的限制。
实施例1 测定凝血酶时间试剂盒的配制。
分别称取右旋糖酐20、聚乙二醇6000、Triton X-100、牛凝血酶、牛血清白蛋白和ProClin 300依次溶于pH为7.8的20mM的Tris-HCl缓冲液中，使各自浓度分别为3%、0.1%、0.3%、5 IU/mL、1%和0.02%，搅拌至完全溶解均匀即得。
实施例2 凝血酶时间（TT）测定。
采用实施例1的试剂盒与市售试剂以全自动血凝仪测定同样的血浆样本，仪器主要参数设定见表1；记录下凝血酶时间，本发明试剂与市售试剂重复性比较结果见表2。表2表明，本发明试剂与市售试剂相比，变异系数（CV）值较小，重复性好。
将实施例1的试剂和市售试剂同时开瓶，市售试剂为冻干粉复溶后使用，本发明试剂直接使用，在相同的凝血仪上做质控测试，记录随开瓶后日期的变化本发明试剂和市售试剂的质控结果，二者稳定性比较如表3。表3 表明，本发明的TT试剂连续测定8天结果仍较稳定，而市售试剂在第5天时就开始变化。这一结果对临床检验科来说非常重要，因为它可以减少浪费，从而降低成本。
表1 血凝仪参数设置
表2凝血酶时间（TT）测定结果
表3本发明试剂与市售试剂稳定性比较
Claims (10)
1.一种测定凝血酶时间（TT）的试剂盒，其特征在于，包含凝血酶制剂、防腐剂、稳定剂和缓冲液；所述稳定剂中含有右旋糖酐。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，右旋糖酐在试剂盒中的浓度为2-4wt%。
3. 根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，稳定剂为聚乙二醇6000、牛血清白蛋白、Triton X-100和右旋糖酐的混合。
4. 根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，聚乙二醇6000、牛血清白蛋白和TritonX-100在试剂盒中的浓度为0.05-0.1wt%，0.5-2wt%和0.1-0.5wt%。
5. 根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，防腐剂为ProClin 300。
6.根据权利要求1或3任一所述的试剂盒，其特征在于，防腐剂在试剂中的浓度为0.01-0.03wt%。
7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，缓冲液的pH为6.0-8.0。
8.根据权利要求1或7任一所述的试剂盒，其特征在于，缓冲液为Tris-HCl、Hepes、PBS或POS缓冲液。
9. 根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，凝血酶浓度为5-10 IU/mL。
10. 根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，试剂盒由牛凝血酶、ProClin 300、聚乙二醇6000、牛血清白蛋白、Triton X-100和右旋糖酐和Tris-HCl缓冲液组成。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710952439.8A CN107561296A (zh) | 2017-10-13 | 2017-10-13 | 一种测定凝血酶时间（tt）的试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710952439.8A CN107561296A (zh) | 2017-10-13 | 2017-10-13 | 一种测定凝血酶时间（tt）的试剂盒 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107561296A true CN107561296A (zh) | 2018-01-09 |
Family
ID=60985554
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710952439.8A Pending CN107561296A (zh) | 2017-10-13 | 2017-10-13 | 一种测定凝血酶时间（tt）的试剂盒 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107561296A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110208552A (zh) * | 2019-05-22 | 2019-09-06 | 深圳市国赛生物技术有限公司 | 凝血酶时间检测试剂及其制备方法 |
| CN114058675A (zh) * | 2020-08-04 | 2022-02-18 | 深圳市帝迈生物技术有限公司 | 稳定剂、凝血酶时间测试试剂及其制备方法、试剂盒 |
Citations (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DD297900A7 (de) * | 1987-07-22 | 1992-01-30 | Bezirkskrankenhaus Goerlitz Inst. F. Klin. Chemie U. Laboratoriumsdiagnostik,De | Verfahren zur stabilisierung von thrombin als trombinzeit-reagens |
| CN101371921A (zh) * | 2008-10-08 | 2009-02-25 | 余美伦 | 一种速溶冻干纤维蛋白原和凝血酶制剂组合物、制备方法及其用途 |
| CN101666806A (zh) * | 2008-09-07 | 2010-03-10 | 上海长岛生物技术有限公司 | 液体型凝血酶时间(tt)检测试剂的制备方法 |
| CN104519912A (zh) * | 2012-08-13 | 2015-04-15 | 诺和诺德A/S（股份有限公司） | 液体因子viii制剂 |
| CN104569446A (zh) * | 2015-02-04 | 2015-04-29 | 上海长岛生物技术有限公司 | 一种液体型凝血酶时间检测试剂及其制备方法 |
| CN105181978A (zh) * | 2015-09-23 | 2015-12-23 | 青岛古高生物科技有限公司 | 一种凝血酶时间测定试剂及其制备方法 |
| CN105250226A (zh) * | 2015-09-30 | 2016-01-20 | 武汉海特生物制药股份有限公司 | 一种猪凝血酶冻干粉的制备方法 |
| CN105353141A (zh) * | 2015-11-17 | 2016-02-24 | 北京美创新跃医疗器械有限公司 | 检测试剂及其应用及含有该试剂的试剂盒 |
| CN105866445A (zh) * | 2016-06-14 | 2016-08-17 | 青岛古高生物科技有限公司 | 一种液相凝血酶时间测定试剂及其制备方法 |
| CN106350500A (zh) * | 2016-09-30 | 2017-01-25 | 四川迈克生物科技股份有限公司 | 凝血酶溶液 |
| CN106350499A (zh) * | 2016-09-30 | 2017-01-25 | 四川迈克生物科技股份有限公司 | 凝血酶溶液的稳定剂 |
| CN106480007A (zh) * | 2016-09-30 | 2017-03-08 | 四川迈克生物科技股份有限公司 | 凝血酶溶液的稳定剂 |
| CN106645665A (zh) * | 2016-12-27 | 2017-05-10 | 北京赛科希德科技股份有限公司 | 一种凝血酶时间检测试剂 |
-
2017
- 2017-10-13 CN CN201710952439.8A patent/CN107561296A/zh active Pending
Patent Citations (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DD297900A7 (de) * | 1987-07-22 | 1992-01-30 | Bezirkskrankenhaus Goerlitz Inst. F. Klin. Chemie U. Laboratoriumsdiagnostik,De | Verfahren zur stabilisierung von thrombin als trombinzeit-reagens |
| CN101666806A (zh) * | 2008-09-07 | 2010-03-10 | 上海长岛生物技术有限公司 | 液体型凝血酶时间(tt)检测试剂的制备方法 |
| CN101371921A (zh) * | 2008-10-08 | 2009-02-25 | 余美伦 | 一种速溶冻干纤维蛋白原和凝血酶制剂组合物、制备方法及其用途 |
| CN104519912A (zh) * | 2012-08-13 | 2015-04-15 | 诺和诺德A/S（股份有限公司） | 液体因子viii制剂 |
| CN104569446A (zh) * | 2015-02-04 | 2015-04-29 | 上海长岛生物技术有限公司 | 一种液体型凝血酶时间检测试剂及其制备方法 |
| CN105181978A (zh) * | 2015-09-23 | 2015-12-23 | 青岛古高生物科技有限公司 | 一种凝血酶时间测定试剂及其制备方法 |
| CN105250226A (zh) * | 2015-09-30 | 2016-01-20 | 武汉海特生物制药股份有限公司 | 一种猪凝血酶冻干粉的制备方法 |
| CN105353141A (zh) * | 2015-11-17 | 2016-02-24 | 北京美创新跃医疗器械有限公司 | 检测试剂及其应用及含有该试剂的试剂盒 |
| CN105866445A (zh) * | 2016-06-14 | 2016-08-17 | 青岛古高生物科技有限公司 | 一种液相凝血酶时间测定试剂及其制备方法 |
| CN106350500A (zh) * | 2016-09-30 | 2017-01-25 | 四川迈克生物科技股份有限公司 | 凝血酶溶液 |
| CN106350499A (zh) * | 2016-09-30 | 2017-01-25 | 四川迈克生物科技股份有限公司 | 凝血酶溶液的稳定剂 |
| CN106480007A (zh) * | 2016-09-30 | 2017-03-08 | 四川迈克生物科技股份有限公司 | 凝血酶溶液的稳定剂 |
| CN106645665A (zh) * | 2016-12-27 | 2017-05-10 | 北京赛科希德科技股份有限公司 | 一种凝血酶时间检测试剂 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110208552A (zh) * | 2019-05-22 | 2019-09-06 | 深圳市国赛生物技术有限公司 | 凝血酶时间检测试剂及其制备方法 |
| CN114058675A (zh) * | 2020-08-04 | 2022-02-18 | 深圳市帝迈生物技术有限公司 | 稳定剂、凝血酶时间测试试剂及其制备方法、试剂盒 |
| CN114058675B (zh) * | 2020-08-04 | 2022-11-15 | 深圳市帝迈生物技术有限公司 | 稳定剂、凝血酶时间测试试剂及其制备方法、试剂盒 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105445478B (zh) | 活化部分凝血活酶时间测定试剂盒及其制备方法 | |
| CN107748267B (zh) | 一种测定活化部分凝血活酶时间（aptt）的试剂盒 | |
| JP3330685B2 (ja) | 液体トロンボプラスチン試薬 | |
| JP5123496B2 (ja) | 血液凝固試験の標準化のための方法 | |
| EP0706658B1 (en) | Calibrator for prothrombin time (pt) assays | |
| CN109541242B (zh) | 一种高岭土试剂质控品及其制备方法和应用 | |
| CN107356768A (zh) | 一种液体即用型凝血酶原时间检测试剂 | |
| EP0482088A4 (en) | Improved stable coagulation controls | |
| CN105651568A (zh) | 一种血细胞分析仪质控品的制备方法 | |
| CN107561296A (zh) | 一种测定凝血酶时间（tt）的试剂盒 | |
| CN105368915B (zh) | 凝血酶原时间测定试剂盒及其制备方法 | |
| US7294479B2 (en) | Compositions, kit and one-step method for monitoring compounds having anti-factor Xa and/or anti factor IIa activities | |
| CN106645665B (zh) | 一种凝血酶时间检测试剂 | |
| US4948724A (en) | Composition, kit and method for assaying heparin and a method for making the composition | |
| CN113234792A (zh) | 一种用于凝血检测的质控组合物 | |
| CN107991500A (zh) | 糖化血红蛋白检测试剂盒 | |
| EP0130708A1 (en) | Stabilized clinical control reagents | |
| CN105368916B (zh) | 一种凝血酶原时间测定试剂盒及其制备方法 | |
| WO2020059563A1 (ja) | 擬似便、およびこれを用いた便潜血検査の精度管理方法 | |
| CN106645751B (zh) | 一种纤维蛋白原含量检测试剂盒 | |
| EP0986394B1 (en) | Anti-coagulation of blood, blood plasma or synovial fluid products | |
| US4851336A (en) | Composition, kit, and method for assaying heparinano a method for making the composition | |
| EP0217768B1 (en) | Method and compositions for heparin assays | |
| Thode et al. | Sampling and storage of blood for determination of ionized calcium | |
| JP5425062B2 (ja) | Ｄ−マンニトールを含有する管理試料を用いるグリコアルブミン等の測定方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20180109 |