CN107536808B - 一种米铂冻干制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种米铂冻干制剂及其制备方法，所述冻干制剂在中间体溶液含水量较高的情况制备获得，倒置荧光显微镜观察形态成球型，与碘化油混合溶解时间更短，溶解后溶液不易分层，混合后初始粘度更低且放置后粘度随时间增加不明显，有利于药物经导管导入肝动脉，药物利用效率更高，给药剂量更准确。本发明提供的冻干制剂制备方法使得生产操作简单化，易于在GMP车间实现，显著降低生产成本。

Description

一种米铂冻干制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，更为具体的说是涉及一种脂溶性铂类金属络合物的冻干制剂及其制备方法。

背景技术

脂溶性铂类金属络合物米铂，化学名为顺[((1R，2R)-1，2-环己二胺-N，N)二(十四烷酰氧基)]合铂(II)及其水合物，结构式如下：

分子式：C₃₄H₆₈N₂O₄Pt·H₂O

分子量：782.01

米铂为白色至微黄色结晶性粉末，脂溶性铂类金属络合物；本品在氯仿、二氯甲烷中溶解，在乙醇中微溶，在甲醇中极微溶解，在水、乙腈中几乎不溶。

米铂是由日本住友制药株式会所研制开发的铂类抗癌药，冻干粉针剂规格为70mg/支，在治疗肝癌、恶性淋巴瘤、非小细胞肺癌、小细胞肺癌及表面膀胱癌方面效果显著。临床上已知，肝细胞癌的血液供应与正常肝组织不同，其肿瘤血液供应的90％以上来源于肝动脉，10％左右来源于门静脉；而正常肝组织血液供应80％以上来源于门静脉。在治疗肝癌时，将米铂用碘化油混悬后，经导管肝动脉灌注，大部分药物直接进入肿瘤血管，仅有小部分药物进入正常肝组织血管。如果药物颗粒太小，药物将通过肿瘤血窦或小动脉静脉吻合口栓塞其他器官，对其他器官产生毒性作用，也会降低肿瘤病灶局部血药浓度；相反，如果药物颗粒太大，药物则会在易混悬性、混悬后溶液的粘度、沉降稳定性方面表现较差的特性，不能符合临床要求。因此，药物颗粒的大小和粒径分布的均一性是影响肝癌治疗效果以及制剂性质的重要因素。

专利文献CN1571666A(公开日2005-01-26)公开了一种冻干米铂制剂的制备方法，该方法先将米铂溶解在叔丁醇中形成药物溶液，然后将药物溶液的含水量调节到较小的范围(1～6mg/mL)，再进行除菌过滤并冻干获得。

专利文献CN102106847A(公开日2011-06-29)公开了一种制备米铂注射用制剂的方法，该方法包括将米铂溶于亲脂性溶剂中，制备得到分散相；将分散相加入到与该分散相不互溶的连续相中形成乳剂，所述连续相由60～100％非水溶剂、0～20％乳化剂和0～20％水组成；除去分散相，得到细微颗粒在连续相中的混悬液；洗涤除去连续相；收集颗粒，干燥。其中亲脂性溶剂选自二氯甲烷、氯仿；非水溶剂选自甘油、液状聚乙二醇；乳化剂为聚乙烯醇。

专利文献CN103565756A(公开日2014-02-12)公开了一种米铂冻干制剂的制备方法，该方法将活性成分米铂采用混合溶剂叔丁醇和甲醇溶解，并冻干该溶液得到无菌注射用制剂。

专利文献CN104095821A(公开日2014-10-15)公开了一种米铂注射用冻干制剂的制备方法，该制备方法包括使用叔丁醇和环己烷配制米铂溶液，并冻干制得中心粒径分布为4～36μm的注射用冻干制剂。

在制剂的生产过程中，特别是药物溶液含水量很低的情况下，需要对生产设备、所用溶剂等进行一些特殊处理，使得生产工艺繁琐，生产成本显著增加，不利于工业化大生产。另外，多种溶剂的使用也带来了未知的风险和操作的不便利性，增加了冷冻干燥以使溶剂残留符合要求的难度。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足之处，提供一种米铂冻干制剂及其制备方法。

本发明的技术方案如下所述：

本发明提供了一种米铂冻干制剂，其由以下方法制备得到：(1)将米铂溶解于叔丁醇中；(2)加入注射用水使含水量为8～11mg/ml；(3)过滤、冷冻干燥制得所述制剂。

其中步骤(1)中，所述米铂为米铂无水物，优选地，所述米铂为米铂一水合物经干燥制得的米铂无水物；更优选地，所述米铂为米铂一水合物经40℃～50℃，真空度450Pa～750Pa下干燥24～36小时制得的米铂无水物。

在步骤(1)中，可在加热条件下溶解米铂。在本发明的一些实施方案中，溶解温度为30～40℃。在本发明的一些具体实施方案中，通过超声、高剪切或搅拌使米铂完全溶解于叔丁醇中，溶解温度为30～40℃。其中叔丁醇的用量为至少能够使米铂溶解完全。

步骤(1)中，米铂在叔丁醇中的浓度为3～5mg/ml，优选为3.5～4.5mg/ml，进一步优选为4.11mg/ml。

步骤(2)中，加入注射用水使米铂溶液的含水量优选为9～10mg/ml，进一步优选地，加入注射用水使米铂溶液的含水量为9.5mg/ml。本发明中所使用的“含水量”是以注射用水的质量(mg)与叔丁醇的体积(ml)的比值表示。

优选地，在步骤(3)中，采用微孔滤膜过滤步骤(2)所得溶液，进一步优选地，对步骤(2)所得溶液采用小于0.5μm孔径的微孔滤膜过滤。在本发明的一些实施方案中，采用0.22μm微孔滤膜过滤步骤(2)所得溶液。

本发明提供的冻干制剂是通过将过滤所得滤液分装于药用容器中进行冷冻干燥获得的。

优选地，每一药用容器中含有米铂60mg～80mg；更优选地，含有米铂70mg。

本发明中所述药用容器为带有弹性塞和卷边铝制盖的琥珀色或无色的玻璃药瓶或任何适用于即时使用系统的琥珀色或无色容器。本发明所述药用容器优选地为西林瓶。

步骤(3)中，所述冷冻干燥的方法优选包括以下步骤：(a)制品进箱后在-35℃～-25℃维持1～3小时；(b)降温至-45℃以下，控制真空在600～1000Pa，4～8min内升温至-5℃～-1℃，维持25～35小时；(c)4～8min内升温至40℃～45℃，停止真空控制，干燥15～30小时。

进一步优选地，所述冷冻干燥的方法在步骤(a)之前还包括在制品进箱前对冻干机进行制冷，使板层温度在进箱时达到-42℃～-38℃。

在本发明的一些实施方案中，所述冷冻干燥的方法包括以下步骤：在制品进箱前对冻干机进行制冷，使板层温度在进箱时达到-42℃～-38℃；制品进箱后在-35℃～-25℃维持1～3小时；对冷阱制冷，当降温至-45℃以下时，控制前箱真空在600～1000Pa，将冻干箱导热油温度在4～8min内升温至-5℃～-1℃，维持该真空度和该温度25～35小时；最后将冻干箱导热油温度在4～8min内升温至40℃～45℃，停止真空控制，维持该温度干燥15～30小时。

根据本发明制备的米铂冻干制剂，其进一步被混悬于药学上可接受的注射用油中，所述混悬液可以直接用于给药。优选地，所述注射用油为碘化油(例如，罂粟子油的脂肪乙酯的碘加成物)。

本发明进一步提供上述冻干制剂在制备用于治疗和/或辅助治疗实体肿瘤的药物中的用途。在一个实施方案中，所述的实体肿瘤选自肝癌、恶性淋巴瘤、非小细胞肺癌、小细胞肺癌或表面膀胱癌。在一个实施方案中，所述药物包含本发明所述的冻干制剂以及混悬介质。在一个实施方案中，所述混悬介质是注射用油。在进一步的实施方案中，所述的混悬介质是碘化油。

本发明还提供一种注射用混悬液，其包含本发明的冻干制剂以及混悬介质。在一个实施方案中，所述的混悬介质是注射用油。在进一步的实施方案中，所述的混悬介质是碘化油。

本发明又提供一种制备米铂冻干制剂的方法，包括以下步骤：(1)将米铂溶解于叔丁醇中，(2)加入注射用水使含水量为8～11mg/ml；(3)过滤、冷冻干燥制得所述冻干制剂。其中步骤(1)中，所述米铂为米铂无水物，优选地，所述米铂为米铂一水合物经干燥制得的米铂无水物；更优选地，所述米铂为米铂一水合物经40℃～50℃，真空度450Pa～750Pa下干燥24～36小时制得的米铂无水物。

在步骤(1)中，可在加热条件下溶解米铂。在本发明的一些实施方案中，溶解温度为30～40℃。在本发明的一些具体实施方案中，通过超声、高剪切或搅拌使米铂完全溶解于叔丁醇中，溶解温度为30～40℃。其中叔丁醇的用量为至少能够使米铂溶解完全。

步骤(1)中，米铂在叔丁醇中的浓度为3～5mg/ml，优选为3.5～4.5mg/ml，进一步优选为4.11mg/ml。

步骤(2)中，加入注射用水使米铂溶液的含水量优选为9～10mg/ml，进一步优选地，加入注射用水使米铂溶液的含水量为9.5mg/ml。

在步骤(3)中，优选采用微孔滤膜过滤步骤(2)所得溶液。在本发明的一些实施方案中，采用0.22μm微孔滤膜过滤步骤(2)所得溶液。将过滤所得滤液分装于药用容器中进行冷冻干燥，每一药用容器中含有米铂60mg～80mg；更优选地，含有米铂70mg。

步骤(3)中，所述冷冻干燥的方法优选包括以下步骤：(a)制品进箱后在-35℃～-25℃维持1～3小时；(b)降温至-45℃以下，控制真空在600～1000Pa，4～8min内升温至-5℃～-1℃，维持25～35小时；(c)4～8min内升温至40℃～45℃，停止真空控制，干燥15～30小时。进一步优选地，所述冷冻干燥的方法在步骤(a)之前还包括在制品进箱前对冻干机进行制冷，使板层温度在进箱时达到-42℃～-38℃。

本发明提供的米铂冻干制剂经倒置荧光显微镜观察形态成球型，与碘化油混合溶解时间更短，溶解后溶液在48h不分层，且混合后初始粘度更低，放置48h后粘度增加不明显，有利于药物经导管导入肝动脉，药物利用效率更高，给药剂量更准确。而且本发明提供的冻干制剂制备方法使得生产操作简单化，易于在GMP车间实现，显著降低生产成本。

附图说明

图1为米铂一水合物原料采用倒置荧光显微镜测定的表面形态；

图2为实施例2制备的米铂冻干制剂采用倒置荧光显微镜测定的表面形态；

图3为实施例2制备的米铂冻干制剂的粒径分布曲线图。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明，但本领域技术人员了解，下述实施例不是对本发明保护范围的限制。

除非有明确的说明，下面实施例和试验中所用的材料以及试验方法是本领域公知的。

实施例1

将由本公司原料药车间提供的米铂一水合物原料置于减压干燥器中，控制干燥器内的温度在40℃～50℃，真空度在450Pa～750Pa，干燥24小时(也可干燥28、32或者36小时)。取干燥产物适量，经检测为米铂无水物。

实施例2

量取叔丁醇加入配料罐中，溶液温度控制在30～40℃，再加入实施例1制得的米铂无水物，混合至药物溶解均匀，然后加入注射用水，用0.22μm滤膜过滤至澄明，取样测定中间体溶液米铂含量。计算装载量，将装载量的无菌溶液灌装于西林瓶中，半塞上丁基橡胶塞。

对灌装后的药液制品进行冻干。在进箱前对冻干机进行制冷，使板层温度在进箱时达到-40℃；进箱完成后，制品在-30℃维持2小时，而后对冷阱制冷，当达到-45℃以下时，控制前箱真空在600～1000Pa，将冻干箱导热油温度在5min内升温至-3℃，维持该真空度和该温度30小时；最后将冻干箱导热油温度在5min内升温至42℃，停止真空控制，继续维持该温度干燥30小时；压紧胶塞。

实施例3

量取叔丁醇加入配料罐中，溶液温度控制在30～40℃，再加入实施例1制得的米铂无水物，混合至药物溶解均匀，然后加入注射用水，用0.22μm滤膜过滤至澄明，取样测定中间体溶液米铂含量。计算装载量，将装载量的无菌溶液灌装于西林瓶中，半塞上丁基橡胶塞。

对灌装后的药液制品进行冻干。在进箱前对冻干机进行制冷，使板层温度在进箱时达到-40℃；进箱完成后，制品在-30℃维持2小时，而后对冷阱制冷，当达到-45℃以下时，控制前箱真空在600～1000Pa，将冻干箱导热油温度在5min内升温至-3℃，维持该真空度和该温度30小时；最后将冻干箱导热油温度在5min内升温至42℃，停止真空控制，继续维持该温度干燥24小时；压紧胶塞。

实施例4

量取叔丁醇加入配料罐中，溶液温度控制在30～40℃，再加入实施例1制得的米铂无水物，混合至药物溶解均匀，然后加入注射用水，用0.22μm滤膜过滤至澄明，取样测定中间体溶液米铂含量。计算装载量，将装载量的无菌溶液灌装于西林瓶中，半塞上丁基橡胶塞。

对灌装后的药液制品进行冻干。在进箱前对冻干机进行制冷，使板层温度在进箱时达到-40℃；进箱完成后，制品在-30℃维持2小时，而后对冷阱制冷，当达到-45℃以下时，控制前箱真空在600～1000Pa，将冻干箱导热油温度在5min内升温至-3℃，维持该真空度和该温度30小时；最后将冻干箱导热油温度在5min内升温至42℃，停止真空控制，继续维持该温度干燥15小时；压紧胶塞。

实施例5

按实施例2～4制备米铂冻干粉针剂，检查其外观，并按照如下所述的方法检测其含量和有关物质，结果如表1所示。

含量检测方法：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙醇(10∶90)为流动相；检测波长为220nm，流速0.8ml/min。理论板数按米铂峰计算不低于2000。取装量差异项下的内容物适量，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液，精密量取10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取米铂对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。

有关物质检测方法及仪器：取本品，加无水乙醇溶解并稀释制成每1ml中约含0.7mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照高效液相色谱法(中国药典2015版四部通则0512高效液相色谱法)试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-无水乙醇(80∶20)为流动相；检测波长为220nm。理论板数按米铂峰计算不低于2000。取对照溶液10μl，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10％～25％；再精密量取供试品溶液和对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留值时间的2.5倍，供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.2倍(0.2％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(1.0％)。

表1冻干制剂的外观、含量及有关物质

实施例6

将适量米铂一水合物原料、实施例2制备的米铂冻干制剂，加肉豆蔻酸异丙酯使分散均匀；滴加一滴于载玻片上，采用Olympus IX51S8F3型倒置荧光显微镜测定表面形态。结果分别如图1、图2所示。本发明所制得的米铂冻干制剂空隙疏松，易于临床配伍使用，微观形态学呈球状纳米粒，脂肪酸链完全把铂包裹，减少了铂直接暴露于血管带来的毒副作用，且球状结构有利于米铂的缓慢释放，达到缓释长效的目的。

实施例7

分别取实施例2～4制备的米铂冻干制剂1支，加入5ml肉豆蔻酸异丙酯混悬后，移入500ml肉豆蔻酸异丙酯溶液中，并用马尔文2000粒径测定仪检测样品粒径分布。结果如表2所示，图3为实施例2制备的冻干制剂的粒径分布曲线。本发明制备的米铂冻干制剂粒度分布更均匀，平均粒径更小，这样更有利于临床配伍后(由碘化油配伍)混悬液的稳定性保持。

表2冻干制剂粒径分布

实施例8

按如下所述的方法检测实施例2～4制备的冻干制剂混悬在碘化油中后48小时内的黏度以及沉降系数变化情况，结果如表3所示。

粘度检测方法：取本品10支，分别用注射器注入碘化油3.5ml，合并混悬液，按中国药典2015版四部通则0633黏度测定法进行测定。

沉降系数检测方法：取本品10支，分别用注射器注入碘化油3.5ml，合并混悬液，置于50ml具塞量筒中，密塞，用力振摇1分钟，记下混悬物的开始高度H₀，静置3小时，记下混悬物的最终高度H，按下式计算：沉降体积比＝H/H₀(中国药典2015版四部通则0123口服溶液剂、口服混悬剂和口服乳剂沉降体积比)。

表3米铂冻干制剂混悬后的稳定性

本发明冻干制剂的碘化油混悬液于25℃条件下放置48小时后，混悬液未发生分层，运动粘度无明显增加，进一步证实使用本发明的米铂冻干制剂临床配伍稳定性可以维持48小时以上，能够满足临床需求。

Claims (10)

1.一种制备米铂冻干制剂的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将米铂溶解于叔丁醇中；(2)加入注射用水使含水量为8～11mg/ml；(3)过滤、冷冻干燥制得所述制剂；

步骤(1)中，所述米铂为米铂无水物；

步骤(1)中，米铂在叔丁醇中的浓度为3～5mg/ml，溶解温度为30～40℃；

步骤(3)中，采用微孔滤膜过滤步骤(2)所得溶液；

步骤(3)中，所述冷冻干燥的方法包括以下步骤：(a)制品进箱后在-35～-25℃维持1～3小时；(b)降温至-45℃以下，控制真空在600～1000Pa，4～8min内升温至-5～-1℃，维持25～35小时；(c)4～8min内升温至40～45℃，停止真空控制，干燥15～30小时。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述米铂为米铂一水合物经干燥制得的米铂无水物。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述米铂为米铂一水合物经40℃～50℃，真空度450Pa～750Pa下干燥24～36小时制得的米铂无水物。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，米铂在叔丁醇中的浓度为3.5～4.5mg/ml。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，米铂在叔丁醇中的浓度为4.11mg/ml。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，加入注射用水使含水量为9～10mg/ml。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，加入注射用水使含水量为9.5mg/ml。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，采用0.22μm微孔滤膜过滤步骤(2)所得溶液；将过滤所得滤液分装于药用容器中进行冷冻干燥，每一药用容器中含有米铂60mg～80mg。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，采用0.22μm微孔滤膜过滤步骤(2)所得溶液；将过滤所得滤液分装于药用容器中进行冷冻干燥，每一药用容器中含有米铂70mg。

10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述冷冻干燥的方法在步骤(a)之前还包括在制品进箱前对冻干机进行制冷，使板层温度在进箱时达到-42℃～-38℃。

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