CN107535356A - 一种海南黄花梨树种苗繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种海南黄花梨树种苗繁殖方法，以优良海南黄花梨的成年树嫩芽为外植体，经过不定芽的诱导、丛生芽繁殖、生根壮苗和移栽等各阶段，选择适合海南黄花梨树从生芽诱导、繁殖、生根、移栽等各培养阶段的培养基配方和培养条件，实现海南黄花梨种苗的组织培养快速繁殖，繁育出优质的海南黄花梨种苗满足市场的需要，也有利于海南黄花梨野生资源的保护和持续利用，利用本发明得到的种苗粗壮，成活率高。
Description
技术领域
本发明属于植物种植领域，具体涉及一种海南黄花梨树种苗繁殖方法。
背景技术
海南黄花梨分布于柬埔寨、缅旬、老挝、泰国、越南及我国东南、西南等地，是一种名贵的木材树种，我国近几年引种栽培。木材制作高挡家具，价格昂贵，原料需求量越来越大，然而无限制的采挖使海南黄花梨野生资源遭到了严重的破坏，海南黄花梨树已被列为IUCN红色濒危物种名录，列为极濒危物种，并被列入《野生动植物濒危物种国际贸易公约》（CITES）附录II的保护范畴。人工栽培海南黄花梨树是解决海南黄花梨紧缺的最有效的方法，但在引种栽培过程中已碰到种苗紧张的问题。海南黄花梨常用的繁殖方法为播种繁殖与扦插繁殖。但海南黄花梨自然状态下每 5~10年才结一次种，要获得大量种子比较困难。发芽率会明显降低。而采用扦插繁殖速度慢，对母株会产生较大伤害，也难以采摘。
发明内容
本发明的目的是提供一种实现海南黄花梨种苗的繁殖方法，繁育出优质的海南黄花梨种苗满足市场的需要，也有利于海南黄花梨野生资源的保护和持续利用。本繁殖方法具有快速广谱，方法易行，操作方便，成活率高的一种海南黄花梨树种苗繁殖方法。
本发明的技术解决方案是这样的：一种海南黄花梨树种苗繁殖方法，其特征在于其工艺步骤：
步骤1，外植体的消毒和不定芽诱导：在生长季节，选取生长旺盛优良的海南黄花梨成年树的嫩芽、幼嫩茎节作为外植体，经消毒无菌水洗净后，接种到不定芽诱导培养基中培养，培养温度29℃，光照度2100lx，光照18小时/天，直至形成不定芽，不定芽诱导培养基每升含有：6-苄基嘌呤1.1mg、蔗糖32克和常量的琼脂，余量为改良的MS培养基，pH6.2，改良的MS培养基是将原MS培养基中的硝酸铵改为1200毫克/升。
步骤2，继代增殖：将诱导出的不定芽切割后再继代培养于继代培养基上，进行继代增殖，培养温度29℃，光照度2100lx，光照18小时/天，继代增殖得到的不定芽能用于生根培养或者继续继代增殖，继代培养基每升含有：6-苄基嘌呤0.06～0.2毫克、椰子汁16毫升、蔗糖32克和常量的琼脂，余量为改良的MS培养基，pH6.2，改良的MS培养基是将原MS培养基中的硝酸铵改为1100毫克/升。
步骤3，生根培养：当继代增殖的不定芽芽高4cm时，切下接种到生根培养基上进行生根培养，培养温度29℃，光照度2600lx，光照18小时/天，生根培养基每升含有：IBA0.5～1.5毫克、蔗糖22克和常量的琼脂，余量为1/2MS培养基，pH6.2。
步骤4，试管苗移栽：当生根培养得到试管苗长至6cm高时，在自然光照下炼苗11天，然后洗掉试管苗根部培养基，栽入园土：泥炭土：蛭石按体积比3：3：1混合的基质中，浇水遮荫，保温保湿，由此得到海南黄花梨的种苗。
消毒无菌水洗净为先在体积分数75%酒精中浸泡31秒，再用质量分数0.1%升汞溶液消毒 11min，无菌水冲洗6次。
本发明以优良海南黄花梨的成年树嫩芽、幼嫩茎节或半木质化茎节为外植体，经过不定芽的诱导、丛生芽繁殖、生根壮苗和移栽等各阶段，选择适合海南黄花梨丛生芽诱导、繁殖、生 根、移栽等各培养阶段的培养基配方和培养条件，实现海南黄花梨种苗的组织培养快速繁殖，繁育出优质的海南黄花梨种苗满足市场的需要，也有利于海南黄花梨野生资源的保护和持续利 用。本发明的技术易撑握，方法规范，简单实惠，经济效益高，繁殖快，批量大，成活率高，成材快，质地坚硬，可做高档家私和装饰品。
具体实施方式
下面实施例对本发明进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1，以海南黄花梨成年树的幼嫩顶芽为外植体的组织培养：
1. 外植体的消毒和不定芽诱导：在生长季节，选取生长旺盛优良的海南黄花梨成年树的幼嫩顶芽为外植体，先在体积分数70%酒精中浸泡15秒，再用质量分数0.1%升汞溶液消毒6分钟，无菌水冲洗6次，再接种到不定芽诱导培养基中培养，培养温度25℃，光照度1600lx，光照11小时/天，消毒成功率35%，25天后再转入新的不定芽诱导培养基中进行相同的培养，再培养30天左右能在外植体上形成不定芽，不定芽诱导培养基每升含有：6-苄基 嘌呤0.5mg、蔗糖21克、琼脂7g，余量为改良的MS培养基，pH6.0，改良的MS 培养基是将原MS培养基中的硝酸铵改为900毫克/升；其配制方法是将6-苄基嘌呤、蔗糖和琼脂加入到改良的MS培养基中，调pH值，灭菌消毒后备用。
2．继代增殖：将诱导出的不定芽切割后再继代培养于继代培养基中，在培养温度25℃，光照度1600，光照11小时/天条件下进行继代增殖，一般31天为1个继代增殖周期。每1个继代增殖周期后的增殖倍数为4倍。继代增殖得到的不定芽能用于生根培养或者继续继代增 殖，继代培养基每升含有：6-苄基嘌呤0.06毫克、椰子汁6毫升、蔗糖21克、琼脂7g，余量为改良的MS培养基，pH6.0，改良的MS培养基是将原MS培养基中的硝酸铵改为900毫克/升；其配制方法是将6-苄基嘌呤、椰子汁、蔗糖和琼脂加入到改良的MS培养基中，再调pH值，灭菌备用。
3．生根培养：当继代增殖的不定芽芽高约4厘米高时，切下接种到生根培养基中进行生根培养，培养条件：培养温度25℃，光照度1900lx，光照11小时/天，所述的生根培养基每升含有：IBA0.5毫克、蔗糖16克、琼脂7g，余量为1/2MS培养基，pH6.0，其配制方法为将IBA、蔗糖和琼脂溶于1/2MS培养基中，调pH值，灭菌消毒备用。不定芽能正常生根，培养31天时生根率可达61%，每株苗有根数3条。
4．试管苗移栽：当生根培养得到的试管苗长至6厘米高时，在自然光照下炼苗7天。然后打开瓶塞，用镊子把试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入园土：泥炭土：蛭石=2：2：1（v/v/v）混合的基质中，注意浇水、遮荫、保温和保湿，由此得到海南黄花梨的种苗，成活率可达80%。
实施例2：以海南黄花梨成年树的幼嫩茎节为外植体的组织培养:
1．外植体的消毒和不定芽诱导：在生长季节，选取生长旺盛优良的海南黄花梨成年树的幼嫩茎节为外植体，先在体积分数75%酒精中浸泡18秒，再用质量分数0.1%升汞溶液消毒9分钟，无菌水冲洗5次，接种到不定芽诱导培养基中，培养温度25℃，光照度1900lx，光照15小时/天，26天后再转入新的不定芽诱导培养基，再培养27天左右能在外植体上形成不定芽，不定芽诱导培养基每升含有：6-苄基嘌呤0.76mg、蔗糖26克、琼脂7g，余量为改良的MS培养基，pH6.0，改良的MS培养基是将原MS培养基中的硝酸铵改为 950毫克/升。
2．继代增殖：将诱导出的不定芽切割后再继代培养于继代培养基上，培养温度24℃，光照度1600lx，光照13小时/天，一般32天为1个继代增殖周期。每1个继代增殖周期后的增殖倍数为2倍。继代增殖得到的不定芽能用于生根培养或者继续继代增殖。继代培养基每升含有：6-苄基嘌呤0.08毫克、椰子汁9毫升、蔗糖65克、琼脂8g，余量为改良的MS培养基，pH5.8，改良的MS培养基是将原MS培养基中的硝酸铵改为850 毫克/升。
3．生根培养：当继代增殖的不定芽芽高约5厘米高时，切下接种到生根培养基进行生根培养，培养温度24℃，光照度1900lx，光照13小时/天，生根培养基每升含有：IBA1毫克、蔗糖19克、琼脂9g，余量为1/2MS培养基，pH5.8；能正常生根，培养29天时生根率可达75%，每株苗有根数6条。
4．试管苗移栽：当生根培养得到的试管苗长至3.5厘米高时，在自然光照下炼苗6天。然后打开瓶塞，用镊子把试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入园土：泥炭土：蛭石=3：2：1（v/v/v）混合的基质中，注意浇水、遮荫、保温和保湿，由此得到海南黄花梨的种苗，成活率可达86%。
Claims (2)
1.一种海南黄花梨树种苗繁殖方法，其特征在于其工艺步骤：
步骤1，外植体的消毒和不定芽诱导：在生长季节，选取生长旺盛优良的海南黄花梨成年树的嫩芽、幼嫩茎节作为外植体，经消毒无菌水洗净后，接种到不定芽诱导培养基中培养，培养温度29℃，光照度2100lx， 光照18小时/天，直至形成不定芽，不定芽诱导培养基每升含有：6-苄基嘌呤1.1mg、蔗糖32克和常量的琼脂，余量为改良的MS培养基，pH6.2，改良的MS培养基是将原MS培养基中的硝酸铵改为1300毫克/升；
步骤2，继代增殖：将诱导出的不定芽切割后再继代培养于继代培养基上，进行继代增殖， 培养温度29℃，光照度2100lx，光照18小时/天，继代增殖得到的不定芽能用于生根培养或者继续继代增殖，继代培养基每升含有：6-苄基嘌呤0.06～0.2毫克、椰子汁16毫升、蔗糖32克和常量的琼脂，余量为改良的MS培养基，pH6.2，改良的MS培养基是将原MS培养基中的硝酸铵改为1100毫克/升；
步骤3，生根培养：当继代增殖的不定芽芽高4cm时，切下接种到生根培养基上进行生根培养，培养温度29℃，光照度2600lx，光照18小时/天，生根培养基每升含有：IBA0.5～1.5毫克、蔗糖22克和常量的琼脂，余量为1/2MS培养基，pH6.2；
步骤4，试管苗移栽：当生根培养得到试管苗长至6cm高时，在自然光照下炼苗11天，然后洗掉试管苗根部培养基，栽入园土：泥炭土：蛭石按体积比3：3：1混合的基质中，浇水遮荫，保温保湿，由此得到海南黄花梨的种苗。
2.根据权利要求1所述的一种海南黄花梨树种苗繁殖方法，其特征在于，所述的消毒无菌水洗净为先在体积分数75%酒精中浸泡31秒，再用质量分数0.1%升汞溶液消毒 11min，无菌水冲洗6次。
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|---|---|---|---|---|
| CN109197522A (zh) * | 2018-09-19 | 2019-01-15 | 海南大学 | 一种促进降香黄檀幼苗生长和根系发育的育苗基质和应用 |
| CN109757375A (zh) * | 2019-02-26 | 2019-05-17 | 中国林业科学研究院热带林业研究所 | 一种降香黄檀的组培苗继代增殖培养基 |
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| CN103348920A (zh) * | 2013-07-25 | 2013-10-16 | 中国科学院华南植物园 | 一种奇楠沉香优质种苗快速繁殖方法 |
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