CN107502582A - 一种有机物料腐熟剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物农药技术领域,尤其涉及一种有机物料腐熟剂及其制备方法,由种子液和同罐发酵的发酵培养基制成,所述种子液由以下重量百分比的菌种组成:巴氏醋杆菌2‑5%,枯草芽孢杆菌8‑12%,地衣芽孢杆菌8‑12%,解淀粉芽孢杆菌3‑7%,纳豆芽孢杆菌8‑12%,嗜热侧孢霉13‑17%,光合细菌3‑7%,嗜热诺卡氏放线菌4‑8%,康宁木霉3‑7%,酿酒酵母菌2‑5%,植物乳杆菌5‑8%,台湾根霉3‑7%,米曲2‑5%,黑曲霉1‑3%,巨大芽孢杆菌8‑12%;该工艺包括前期菌种培养、同罐发酵和固体粉剂制备步骤,该腐熟剂中含有菌剂种类较多,菌种相互配合,使物料的降解效果好,该制备方法工序简单,操作方便易实现,生产成本低,避免菌种相互拮抗,使腐熟效果佳,实用性强。
Description
技术领域
本发明涉及生物农药技术领域,尤其涉及一种有机物料腐熟剂及其制备方法。
背景技术
市场上目前有很多腐熟剂,腐熟剂中含有的菌剂种类简单,一般只含有5-7类菌剂,且菌剂之间容易相互发生反应,不利于有机物料中病原菌的杀灭,不利于对物料进行腐熟,效果不佳,且现有的腐熟剂的生产工艺是将单个菌发酵罐培养,然后进行单个固体培养,按比例混合勾兑、晾干、粉碎和包装,按以上方法生产处的腐熟剂,由于为单个菌勾兑的产品,本身相互拮抗,撒到有机物料中后,互相发生反应,相互“残杀”,使有机物料降解不完全,发酵周期长,最后营养累积低等缺点,且生产工艺繁杂,生产成本高,含菌量较低等不足。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中存在的腐熟剂效果不佳、生产工艺繁杂等缺陷,而提供一种有机物料腐熟剂及其制备方法,该腐熟剂中含有菌剂种类较多,菌种相互配合,使物料的降解效果好,该制备方法工序简单,操作方便易实现,生产成本低,避免菌种相互拮抗,使腐熟效果佳,实用性强。
本发明的技术方案是这样实现的:一种有机物料腐熟剂,由种子液和同罐发酵的发酵培养基制成,所述种子液由以下重量百分比的菌种组成:巴氏醋杆菌2-5%,枯草芽孢杆菌8-12%,地衣芽孢杆菌8-12%,解淀粉芽孢杆菌3-7%,纳豆芽孢杆菌8-12%,嗜热侧孢霉13-17%,光合细菌3-7%,嗜热诺卡氏放线菌4-8%,康宁木霉3-7%,酿酒酵母菌2-5%,植物乳杆菌5-8%,台湾根霉3-7%,米曲2-5%,黑曲霉1-3%,巨大芽孢杆菌8-12%;所述发酵培养基由以下重量百分比的组分组成:糖蜜1-1.5%,葡萄糖0.6-1%,玉米淀粉1.4-1.8%,豆粕粉1.2-1.8%,硫酸镁0.01-0.05%,木醋酸1.2-1.8%,尿素0.1-0.15%,磷酸二氢钾0.02-0.06%,蛋白胨0.08-0.12%,酵母粉0.03-0.07%,余量为水。
优选的,由种子液和同罐发酵的发酵培养基组成,所述种子液由以下重量百分比的菌种组成:巴氏醋杆菌3-4%,枯草芽孢杆菌9-11%,地衣芽孢杆菌9-11%,解淀粉芽孢杆菌4-6%,纳豆芽孢杆菌9-11%,嗜热侧孢霉14-16%,光合细菌4-6%,嗜热诺卡氏放线菌5-7%,康宁木霉4-6%,酿酒酵母菌3-4%,植物乳杆菌6-7%,台湾根霉4-6%,米曲3-4%,黑曲霉2-3%,巨大芽孢杆菌9-11%;所述发酵培养基由以下重量百分比的组分组成:糖蜜1.1-1.3%,葡萄糖0.7-0.9%,玉米淀粉1.5-1.7%,豆粕粉1.4-1.6%,硫酸镁0.02-0.04%,木醋酸1.3-1.6%,尿素0.11-0.13%,磷酸二氢钾0.03-0.05%,蛋白胨0.09-0.11%,酵母粉0.04-0.06%,余量为水。
优选的,由种子液和同罐发酵的发酵培养基组成,所述种子液由以下重量百分比的菌种组成:巴氏醋杆菌3%,枯草芽孢杆菌10%,地衣芽孢杆菌10%,解淀粉芽孢杆菌5%,纳豆芽孢杆菌10%,嗜热侧孢霉15%,光合细菌5%,嗜热诺卡氏放线菌6%,康宁木霉5%,酿酒酵母菌3%,植物乳杆菌7%,台湾根霉5%,米曲4%,黑曲霉2%,巨大芽孢杆菌10%;所述发酵培养基由以下重量百分比的组分组成:糖蜜1.2%,葡萄糖0.8%,玉米淀粉1.6%,豆粕粉1.5%,硫酸镁0.03%,木醋酸1.5%,尿素0.12%,磷酸二氢钾0.04%,蛋白胨0.1%,酵母粉0.05%,余量为水。
优选的,在所述发酵培养基中还加入微量元素营养液,所述微量元素营养液占发酵培养基总体积的0.05-0.07%。
优选的,所述发酵培养基的pH为6.8-7.2。
一种有机物料腐熟剂的制备方法,包括以下步骤:
步骤一:前期菌种培养
(1)、斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、巴氏醋杆菌、纳豆芽孢杆菌、光合细菌、植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在30℃-34℃之间,培养2-3天,备用,将嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉在土豆蔗糖琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在40℃-45℃之间,培养3-4天,备用,将酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉在马铃薯综合琼脂培养基中分别进行斜面培养,培养温度28℃-30℃,培养时间3-4天,备用;
(2)、种子培养:将(1)中分别培养好的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌、光合细菌、纳豆芽孢杆菌、巴氏醋杆菌的斜面试管母种,在无菌条件下分别接种于三角瓶液体牛肉膏蛋白胨培养基中进行培养,温度设定在30℃-32℃,在180-220r/min摇床中培养1-2天,备用,将培养好的嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉斜面试管母种,在无菌条件下接种于土豆蔗蔗糖液体三角瓶培养基中进行培养,温度设定在40℃-45℃之间,培养2-3天,备用,将分别培养好的酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉的斜面试管母种,在无菌条件下接种于三角瓶马铃薯综合培养基中进行培养,设定温度在28℃-30℃之间,培养时间2-3天,备用;
步骤二:同罐发酵
(1)制备种子液:按以下重量百分比称取步骤一中种子培养后得到的菌种:巴氏醋杆菌2-5%,枯草芽孢杆菌8-12%,地衣芽孢杆菌8-12%,解淀粉芽孢杆菌3-7%,纳豆芽孢杆菌8-12%,嗜热侧孢霉13-17%,光合细菌3-7%,嗜热诺卡氏放线菌4-8%,康宁木霉3-7%,酿酒酵母菌2-5%,植物乳杆菌5-8%,台湾根霉3-7%,米曲2-5%,黑曲霉1-3%,巨大芽孢杆菌8-12%;
制备发酵培养基:将发酵罐在80-100℃下烘干灭菌处理30-50min,然后按照以下重量百分向发酵罐中置入原料:糖蜜1-1.5%,葡萄糖0.6-1%,玉米淀粉1.4-1.8%,豆粕粉1.2-1.8%,硫酸镁0.01-0.05%,木醋酸1.2-1.8%,尿素0.1-0.15%,磷酸二氢钾0.02-0.06%,蛋白胨0.08-0.12%,酵母粉0.03-0.07%,余量为水,再向发酵罐中滴入占发酵培养基总体积0.05-0.07%的微量元素营养液,在110-130℃环境下对发酵培养基进行灭菌处理30-90min,最后将发酵培养基冷却至25-35℃,备用;
发酵培养基的pH为6.8-7.2,向发酵培养基中加入培养好的三角瓶种子液,在无菌条件下进行接种,接种量为8-12%,培养温度为28-32℃,转速150-200r/min,通气量1:0.5-0.8,发酵培养36-72小时,待75-85%芽孢形成即得液体菌剂;
步骤三:固体粉剂制备
将步骤二中得到的液体菌剂与灭过菌的固体培养基在无菌搅拌机中搅拌均匀,然后送入无菌自动控温培养室,浅盘固体发酵,料温控制在30℃-40℃之间,每隔0.5-1小时翻料一次,控制料温不超过45℃,培养3-4天,低温烘干,烘干时最高温度不超过50℃,水分的重量比例达到6-10%,然后粉碎、检测、称重、包装、入库, 成品中含菌量为10亿/克以上。
本发明具有以下积极效果和优点:
1、本发明为多菌同罐复合发酵培养,配比设计巧妙,发酵培养基性能优异,有益菌互不拮抗,和谐生长,含菌量高达100亿/克以上,每发酵一吨有机物料,只需要50-100克腐熟剂。
2、由于本发明的菌种种类较多,互不拮抗,各种菌的活性高,产的蛋白酶、纤维素酶和淀粉酶都高于其他同类产品,在发酵有机物料时,发酵速率高,物料起温快,有效杀灭有害病原菌和杂草种子等有害物质。
3、本腐熟剂中的中温真菌和丝状真菌和放线菌具有钝化重金属的作用,并对鸡粪中的抗生素具有降解作用,使生产处的有机肥完全达标。
4、用本发明的腐熟剂生产有机肥,在发酵后期肥堆中出现大量的白菌丝,是特意留下的一株高温放线菌和一株嗜热真菌,具有防治植物根黑腐病的作用,其含菌量可达15亿/克以上。
5、本发明的腐熟剂适合与畜禽粪便、植物秸秆、污泥除臭和城市垃圾的降解发酵。
具体实施方式
为了加深对本发明的理解,下面将结合实施例对本发明作进一步详述。
实施例1:一种有机物料高效腐熟剂,由种子液和同罐发酵的发酵培养基制成,种子液由以下重量百分比的菌种组成:巴氏醋杆菌5%,枯草芽孢杆菌8%,地衣芽孢杆菌12%,解淀粉芽孢杆菌3%,纳豆芽孢杆菌8%,嗜热侧孢霉13%,光合细菌7%,嗜热诺卡氏放线菌8%,康宁木霉7%,酿酒酵母菌2%,植物乳杆菌8%,台湾根霉3%,米曲5%,黑曲霉3%,巨大芽孢杆菌8%;发酵培养基由以下重量百分比的组分组成:糖蜜1%,葡萄糖0.6%,玉米淀粉1.8%,豆粕粉1.2%,硫酸镁0.01%,木醋酸1.8%,尿素0.1%,磷酸二氢钾0.06%,蛋白胨0.08%,酵母粉0.07%,余量为水,加入占发酵培养基总体积0.05%的微量元素营养液,发酵培养基的pH值为6.8。
一种有机物料腐熟剂的制备方法,包括以下步骤:
步骤一:前期菌种培养
(1)、斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、巴氏醋杆菌、纳豆芽孢杆菌、光合细菌、植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在30℃,培养2天,备用,将嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉在土豆蔗糖琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在40℃,培养3天,备用,将酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉在马铃薯综合琼脂培养基中分别进行斜面培养,培养温度28℃,培养时间3天,备用;
(2)、种子培养:将(1)中分别培养好的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌、光合细菌、纳豆芽孢杆菌、巴氏醋杆菌的斜面试管母种,在无菌条件下分别接种于三角瓶液体牛肉膏蛋白胨培养基中进行培养,温度设定在30℃,在180r/min摇床中培养1天,备用,将培养好的嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉斜面试管母种,在无菌条件下接种于土豆蔗蔗糖液体三角瓶培养基中进行培养,温度设定在40℃,培养2天,备用,将分别培养好的酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉的斜面试管母种,在无菌条件下接种于三角瓶马铃薯综合培养基中进行培养,设定温度在28℃,培养时间2天,备用;
步骤二:同罐发酵
(1)制备种子液:按以下重量百分比称取步骤一中种子培养后得到的菌种::巴氏醋杆菌5%,枯草芽孢杆菌8%,地衣芽孢杆菌12%,解淀粉芽孢杆菌3%,纳豆芽孢杆菌8%,嗜热侧孢霉13%,光合细菌7%,嗜热诺卡氏放线菌8%,康宁木霉7%,酿酒酵母菌2%,植物乳杆菌8%,台湾根霉3%,米曲5%,黑曲霉3%,巨大芽孢杆菌8%;
制备发酵培养基:将发酵罐在80-100℃下烘干灭菌处理30-50min,然后按照以下重量百分向发酵罐中置入原料:糖蜜1%,葡萄糖0.6%,玉米淀粉1.8%,豆粕粉1.2%,硫酸镁0.01%,木醋酸1.8%,尿素0.1%,磷酸二氢钾0.06%,蛋白胨0.08%,酵母粉0.07%,余量为水,再向发酵罐中滴入占发酵培养基总体积0.05%的微量元素营养液,在110℃环境下对发酵培养基进行灭菌处理30min,最后将发酵培养基冷却至25℃,备用;
发酵培养基的pH为6.8,向发酵培养基中加入培养好的三角瓶种子液,在无菌条件下进行接种,接种量为8%,培养温度为28℃,转速150r/min,通气量1:0.5,发酵培养36小时,待75%芽孢形成即得液体菌剂;
步骤三:固体粉剂制备
将步骤二中得到的液体菌剂与灭过菌的固体培养基在无菌搅拌机中搅拌均匀,然后送入无菌自动控温培养室,浅盘固体发酵,料温控制在30℃,每隔0.5小时翻料一次,控制料温不超过45℃,培养3天,低温烘干,烘干时最高温度不超过50℃,水分的重量比例达到6%,然后粉碎、检测、称重、包装、入库, 成品中含菌量为10亿/克以上。
实施例2:一种有机物料腐熟剂,由种子液和同罐发酵的发酵培养基制成,所述种子液由以下重量百分比的菌种组成:巴氏醋杆菌2%,枯草芽孢杆菌12%,地衣芽孢杆菌8%,解淀粉芽孢杆菌7%,纳豆芽孢杆菌12%,嗜热侧孢霉17%,光合细菌3%,嗜热诺卡氏放线菌4%,康宁木霉3%,酿酒酵母菌5%,植物乳杆菌5%,台湾根霉7%,米曲2%,黑曲霉3%,巨大芽孢杆菌10%;所述发酵培养基由以下重量百分比的组分组成:糖蜜1.5%,葡萄糖1%,玉米淀粉1.4%,豆粕粉1.8%,硫酸镁0.05%,木醋酸1.2%,尿素0.15%,磷酸二氢钾0.02%,蛋白胨0.12%,酵母粉0.03%,余量为水,加入占发酵培养基总体积0.07%的微量元素营养液,发酵培养基的pH值为7.2。
一种有机物料腐熟剂的制备方法,包括以下步骤:
步骤一:前期菌种培养
(1)、斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、巴氏醋杆菌、纳豆芽孢杆菌、光合细菌、植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在34℃,培养3天,备用,将嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉在土豆蔗糖琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在45℃,培养4天,备用,将酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉在马铃薯综合琼脂培养基中分别进行斜面培养,培养温度30℃,培养时间4天,备用;
(2)、种子培养:将(1)中分别培养好的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌、光合细菌、纳豆芽孢杆菌、巴氏醋杆菌的斜面试管母种,在无菌条件下分别接种于三角瓶液体牛肉膏蛋白胨培养基中进行培养,温度设定在32℃,在220r/min摇床中培养2天,备用,将培养好的嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉斜面试管母种,在无菌条件下接种于土豆蔗蔗糖液体三角瓶培养基中进行培养,温度设定在45℃,培养3天,备用,将分别培养好的酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉的斜面试管母种,在无菌条件下接种于三角瓶马铃薯综合培养基中进行培养,设定温度在30℃,培养时间3天,备用;
步骤二:同罐发酵
(1)制备种子液:按以下重量百分比称取步骤一中种子培养后得到的菌种:巴氏醋杆菌2%,枯草芽孢杆菌12%,地衣芽孢杆菌8%,解淀粉芽孢杆菌7%,纳豆芽孢杆菌12%,嗜热侧孢霉17%,光合细菌3%,嗜热诺卡氏放线菌4%,康宁木霉3%,酿酒酵母菌5%,植物乳杆菌5%,台湾根霉7%,米曲2%,黑曲霉3%,巨大芽孢杆菌10%;
制备发酵培养基:将发酵罐在100℃下烘干灭菌处理50min,然后按照以下重量百分向发酵罐中置入原料:糖蜜1.5%,葡萄糖1%,玉米淀粉1.4%,豆粕粉1.8%,硫酸镁0.05%,木醋酸1.2%,尿素0.15%,磷酸二氢钾0.02%,蛋白胨0.12%,酵母粉0.03%,余量为水,再向发酵罐中滴入占发酵培养基总体积0.07%的微量元素营养液,在130℃环境下对发酵培养基进行灭菌处理90min,最后将发酵培养基冷却至35℃,备用;
发酵培养基的pH为7.2,向发酵培养基中加入培养好的三角瓶种子液,在无菌条件下进行接种,接种量为12%,培养温度为32℃,转速200r/min,通气量1: 0.8,发酵培养72小时,待85%芽孢形成即得液体菌剂;
步骤三:固体粉剂制备
将步骤二中得到的液体菌剂与灭过菌的固体培养基在无菌搅拌机中搅拌均匀,然后送入无菌自动控温培养室,浅盘固体发酵,料温控制在40℃,每隔1小时翻料一次,控制料温不超过45℃,培养4天,低温烘干,烘干时最高温度不超过50℃,水分的重量比例达到10%,然后粉碎、检测、称重、包装、入库, 成品中含菌量为10亿/克以上。
实施例3:一种有机物料高效腐熟剂,由种子液和同罐发酵的发酵培养基组成,种子液由以下重量百分比的菌种组成:巴氏醋杆菌3%,枯草芽孢杆菌9%,地衣芽孢杆菌9%,解淀粉芽孢杆菌4%,纳豆芽孢杆菌9%,嗜热侧孢霉14%,光合细菌4%,嗜热诺卡氏放线菌7%,康宁木霉6%,酿酒酵母菌4%,植物乳杆菌7%,台湾根霉6%,米曲4%,黑曲霉3%,巨大芽孢杆菌11%;发酵培养基由以下重量百分比的组分组成:糖蜜1.1%,葡萄糖0.7%,玉米淀粉1.5%,豆粕粉1.4%,硫酸镁0.02%,木醋酸1.3%,尿素0.11%,磷酸二氢钾0.03%,蛋白胨0.09%,酵母粉0.04%,余量为水,加入占发酵培养基总体积0.07%的微量元素营养液,发酵培养基的pH值为6.8。
一种有机物料腐熟剂的制备方法,包括以下步骤:
步骤一:前期菌种培养
(1)、斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、巴氏醋杆菌、纳豆芽孢杆菌、光合细菌、植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在30℃,培养3天,备用,将嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉在土豆蔗糖琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在40℃,培养4天,备用,将酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉在马铃薯综合琼脂培养基中分别进行斜面培养,培养温度28℃,培养时间4天,备用;
(2)、种子培养:将(1)中分别培养好的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌、光合细菌、纳豆芽孢杆菌、巴氏醋杆菌的斜面试管母种,在无菌条件下分别接种于三角瓶液体牛肉膏蛋白胨培养基中进行培养,温度设定在30℃,在220r/min摇床中培养1天,备用,将培养好的嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉斜面试管母种,在无菌条件下接种于土豆蔗蔗糖液体三角瓶培养基中进行培养,温度设定在45℃,培养2天,备用,将分别培养好的酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉的斜面试管母种,在无菌条件下接种于三角瓶马铃薯综合培养基中进行培养,设定温度在28℃,培养时间3天,备用;
步骤二:同罐发酵
(1)制备种子液:按以下重量百分比称取步骤一中种子培养后得到的菌种:巴氏醋杆菌3%,枯草芽孢杆菌9%,地衣芽孢杆菌9%,解淀粉芽孢杆菌4%,纳豆芽孢杆菌9%,嗜热侧孢霉14%,光合细菌4%,嗜热诺卡氏放线菌7%,康宁木霉6%,酿酒酵母菌4%,植物乳杆菌7%,台湾根霉6%,米曲4%,黑曲霉3%,巨大芽孢杆菌11%;
制备发酵培养基:将发酵罐在80℃下烘干灭菌处理50min,然后按照以下重量百分向发酵罐中置入原料:糖蜜1.1%,葡萄糖0.7%,玉米淀粉1.5%,豆粕粉1.4%,硫酸镁0.02%,木醋酸1.3%,尿素0.11%,磷酸二氢钾0.03%,蛋白胨0.09%,酵母粉0.04%,余量为水,再向发酵罐中滴入占发酵培养基总体积0.05%的微量元素营养液,在130℃环境下对发酵培养基进行灭菌处理30min,最后将发酵培养基冷却至35℃,备用;
发酵培养基的pH为6.8,向发酵培养基中加入培养好的三角瓶种子液,在无菌条件下进行接种,接种量为12%,培养温度为28℃,转速200r/min,通气量1:0.5,发酵培养72小时,待75%芽孢形成即得液体菌剂;
步骤三:固体粉剂制备
将步骤二中得到的液体菌剂与灭过菌的固体培养基在无菌搅拌机中搅拌均匀,然后送入无菌自动控温培养室,浅盘固体发酵,料温控制在30℃,每隔1小时翻料一次,控制料温不超过45℃,培养3天,低温烘干,烘干时最高温度不超过50℃,水分的重量比例达到10%,然后粉碎、检测、称重、包装、入库, 成品中含菌量为10亿/克以上。
实施例4:一种有机物料高效腐熟剂,由种子液和同罐发酵的发酵培养基组成,种子液由以下重量百分比的菌种组成:巴氏醋杆菌4%,枯草芽孢杆菌11%,地衣芽孢杆菌11%,解淀粉芽孢杆菌6%,纳豆芽孢杆菌11%,嗜热侧孢霉16%,光合细菌6%,嗜热诺卡氏放线菌5%,康宁木霉4%,酿酒酵母菌3%,植物乳杆菌6%,台湾根霉4%,米曲3%,黑曲霉2%,巨大芽孢杆菌9%;发酵培养基由以下重量百分比的组分组成:糖蜜1.3%,葡萄糖0.9%,玉米淀粉1.7%,豆粕粉1.6%,硫酸镁0.04%,木醋酸1.6%,尿素0.13%,磷酸二氢钾0.05%,蛋白胨0.11%,酵母粉0.06%,余量为水,加入占发酵培养基总体积0.05%的微量元素营养液,发酵培养基的pH值为7.2。
一种有机物料腐熟剂的制备方法,包括以下步骤:
步骤一:前期菌种培养
(1)、斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、巴氏醋杆菌、纳豆芽孢杆菌、光合细菌、植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在34℃,培养2天,备用,将嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉在土豆蔗糖琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在45℃,培养3天,备用,将酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉在马铃薯综合琼脂培养基中分别进行斜面培养,培养温度30℃,培养时间3天,备用;
(2)、种子培养:将(1)中分别培养好的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌、光合细菌、纳豆芽孢杆菌、巴氏醋杆菌的斜面试管母种,在无菌条件下分别接种于三角瓶液体牛肉膏蛋白胨培养基中进行培养,温度设定在2℃,在180r/min摇床中培养2天,备用,将培养好的嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉斜面试管母种,在无菌条件下接种于土豆蔗蔗糖液体三角瓶培养基中进行培养,温度设定在45℃,培养2天,备用,将分别培养好的酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉的斜面试管母种,在无菌条件下接种于三角瓶马铃薯综合培养基中进行培养,设定温度在30℃,培养时间2天,备用;
步骤二:同罐发酵
(1)制备种子液:按以下重量百分比称取步骤一中种子培养后得到的菌种:巴氏醋杆菌4%,枯草芽孢杆菌11%,地衣芽孢杆菌11%,解淀粉芽孢杆菌6%,纳豆芽孢杆菌11%,嗜热侧孢霉16%,光合细菌6%,嗜热诺卡氏放线菌5%,康宁木霉4%,酿酒酵母菌3%,植物乳杆菌6%,台湾根霉4%,米曲3%,黑曲霉2%,巨大芽孢杆菌9%;
制备发酵培养基:将发酵罐在100℃下烘干灭菌处理30min,然后按照以下重量百分向发酵罐中置入原料:糖蜜1.3%,葡萄糖0.9%,玉米淀粉1.7%,豆粕粉1.6%,硫酸镁0.04%,木醋酸1.6%,尿素0.13%,磷酸二氢钾0.05%,蛋白胨0.11%,酵母粉0.06%,余量为水,再向发酵罐中滴入占发酵培养基总体积0.07%的微量元素营养液,在110℃环境下对发酵培养基进行灭菌处理90min,最后将发酵培养基冷却至25℃,备用;
发酵培养基的pH为7.2,向发酵培养基中加入培养好的三角瓶种子液,在无菌条件下进行接种,接种量为8%,培养温度为32℃,转速150r/min,通气量1: 0.8,发酵培养36小时,待85%芽孢形成即得液体菌剂;
步骤三:固体粉剂制备
将步骤二中得到的液体菌剂与灭过菌的固体培养基在无菌搅拌机中搅拌均匀,然后送入无菌自动控温培养室,浅盘固体发酵,料温控制在30℃,每隔1小时翻料一次,控制料温不超过45℃,培养3天,低温烘干,烘干时最高温度不超过50℃,水分的重量比例达到6%,然后粉碎、检测、称重、包装、入库, 成品中含菌量为10亿/克以上。
实施例5:一种有机物料高效腐熟剂,由种子液和同罐发酵的发酵培养基组成,种子液由以下重量百分比的菌种组成:巴氏醋杆菌3%,枯草芽孢杆菌10%,地衣芽孢杆菌10%,解淀粉芽孢杆菌5%,纳豆芽孢杆菌10%,嗜热侧孢霉15%,光合细菌5%,嗜热诺卡氏放线菌6%,康宁木霉5%,酿酒酵母菌3%,植物乳杆菌7%,台湾根霉5%,米曲4%,黑曲霉2%,巨大芽孢杆菌10%;发酵培养基由以下重量百分比的组分组成:糖蜜1.2%,葡萄糖0.8%,玉米淀粉1.6%,豆粕粉1.5%,硫酸镁0.03%,木醋酸1.5%,尿素0.12%,磷酸二氢钾0.04%,蛋白胨0.1%,酵母粉0.05%,余量为水,加入占发酵培养基总体积0.06%的微量元素营养液,发酵培养基的pH值为7.0。
一种有机物料腐熟剂的制备方法,包括以下步骤:
步骤一:前期菌种培养
(1)、斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、巴氏醋杆菌、纳豆芽孢杆菌、光合细菌、植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在32℃,培养3天,备用,将嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉在土豆蔗糖琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在42℃,培养3天,备用,将酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉在马铃薯综合琼脂培养基中分别进行斜面培养,培养温度29℃,培养时间4天,备用;
(2)、种子培养:将(1)中分别培养好的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌、光合细菌、纳豆芽孢杆菌、巴氏醋杆菌的斜面试管母种,在无菌条件下分别接种于三角瓶液体牛肉膏蛋白胨培养基中进行培养,温度设定在31℃,在200r/min摇床中培养1.5天,备用,将培养好的嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉斜面试管母种,在无菌条件下接种于土豆蔗蔗糖液体三角瓶培养基中进行培养,温度设定在42℃,培养2.5天,备用,将分别培养好的酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉的斜面试管母种,在无菌条件下接种于三角瓶马铃薯综合培养基中进行培养,设定温度在29℃,培养时间2.5天,备用;
步骤二:同罐发酵
(1)制备种子液:按以下重量百分比称取步骤一中种子培养后得到的菌种:巴氏醋杆菌3%,枯草芽孢杆菌10%,地衣芽孢杆菌10%,解淀粉芽孢杆菌5%,纳豆芽孢杆菌10%,嗜热侧孢霉15%,光合细菌5%,嗜热诺卡氏放线菌6%,康宁木霉5%,酿酒酵母菌3%,植物乳杆菌7%,台湾根霉5%,米曲4%,黑曲霉2%,巨大芽孢杆菌10%;
制备发酵培养基:将发酵罐在90℃下烘干灭菌处理40min,然后按照以下重量百分向发酵罐中置入原料:糖蜜1.2%,葡萄糖0.8%,玉米淀粉1.6%,豆粕粉1.5%,硫酸镁0.03%,木醋酸1.5%,尿素0.12%,磷酸二氢钾0.04%,蛋白胨0.1%,酵母粉0.05%,余量为水,再向发酵罐中滴入占发酵培养基总体积0.06%的微量元素营养液,在120℃环境下对发酵培养基进行灭菌处理60min,最后将发酵培养基冷却至30℃,备用;
将发酵培养基中加入5ml微量元素液,发酵培养基的pH为7.0,向发酵培养基中加入培养好的三角瓶种子液,在无菌条件下进行接种,接种量为10%,培养温度为30℃,转速180r/min,通气量1:0.6,发酵培养48小时,待80%芽孢形成即得液体菌剂;
步骤三:固体粉剂制备
将步骤二中得到的液体菌剂与灭过菌的固体培养基在无菌搅拌机中搅拌均匀,然后送入无菌自动控温培养室,浅盘固体发酵,料温控制在35℃,每隔1小时翻料一次,控制料温不超过45℃,培养3.5天,低温烘干,烘干时最高温度不超过50℃,水分的重量比例达到8%,然后粉碎、检测、称重、包装、入库, 成品中含菌量为10亿/克以上。
以上实施例中,实施例5为最佳实施例。
Claims (6)
1.一种有机物料腐熟剂,其特征在于:由种子液和同罐发酵的发酵培养基制成,所述种子液由以下重量百分比的菌种组成:巴氏醋杆菌2-5%,枯草芽孢杆菌8-12%,地衣芽孢杆菌8-12%,解淀粉芽孢杆菌3-7%,纳豆芽孢杆菌8-12%,嗜热侧孢霉13-17%,光合细菌3-7%,嗜热诺卡氏放线菌4-8%,康宁木霉3-7%,酿酒酵母菌2-5%,植物乳杆菌5-8%,台湾根霉3-7%,米曲2-5%,黑曲霉1-3%,巨大芽孢杆菌8-12%;所述发酵培养基由以下重量百分比的组分组成:糖蜜1-1.5%,葡萄糖0.6-1%,玉米淀粉1.4-1.8%,豆粕粉1.2-1.8%,硫酸镁0.01-0.05%,木醋酸1.2-1.8%,尿素0.1-0.15%,磷酸二氢钾0.02-0.06%,蛋白胨0.08-0.12%,酵母粉0.03-0.07%,余量为水。
2.根据权利要求1所述的一种有机物料腐熟剂,其特征在于:由种子液和同罐发酵的发酵培养基组成,所述种子液由以下重量百分比的菌种组成:巴氏醋杆菌3-4%,枯草芽孢杆菌9-11%,地衣芽孢杆菌9-11%,解淀粉芽孢杆菌4-6%,纳豆芽孢杆菌9-11%,嗜热侧孢霉14-16%,光合细菌4-6%,嗜热诺卡氏放线菌5-7%,康宁木霉4-6%,酿酒酵母菌3-4%,植物乳杆菌6-7%,台湾根霉4-6%,米曲3-4%,黑曲霉2-3%,巨大芽孢杆菌9-11%;所述发酵培养基由以下重量百分比的组分组成:糖蜜1.1-1.3%,葡萄糖0.7-0.9%,玉米淀粉1.5-1.7%,豆粕粉1.4-1.6%,硫酸镁0.02-0.04%,木醋酸1.3-1.6%,尿素0.11-0.13%,磷酸二氢钾0.03-0.05%,蛋白胨0.09-0.11%,酵母粉0.04-0.06%,余量为水。
3.根据权利要求1所述的一种有机物料腐熟剂,其特征在于:由种子液和同罐发酵的发酵培养基组成,所述种子液由以下重量百分比的菌种组成:巴氏醋杆菌3%,枯草芽孢杆菌10%,地衣芽孢杆菌10%,解淀粉芽孢杆菌5%,纳豆芽孢杆菌10%,嗜热侧孢霉15%,光合细菌5%,嗜热诺卡氏放线菌6%,康宁木霉5%,酿酒酵母菌3%,植物乳杆菌7%,台湾根霉5%,米曲4%,黑曲霉2%,巨大芽孢杆菌10%;所述发酵培养基由以下重量百分比的组分组成:糖蜜1.2%,葡萄糖0.8%,玉米淀粉1.6%,豆粕粉1.5%,硫酸镁0.03%,木醋酸1.5%,尿素0.12%,磷酸二氢钾0.04%,蛋白胨0.1%,酵母粉0.05%,余量为水。
4.根据权利要求1-3任一项所述的一种有机物料腐熟剂,其特征在于:在所述发酵培养基中还加入微量元素营养液,所述微量元素营养液占发酵培养基总体积的0.05-0.07%。
5.根据权利要求1-3任一项所述的一种有机物料腐熟剂,其特征在于:所述发酵培养基的pH为6.8-7.2。
6.一种制备根据权利要求1所述的一种有机物料腐熟剂的方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一:前期菌种培养
(1)、斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、巴氏醋杆菌、纳豆芽孢杆菌、光合细菌、植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在30℃-34℃之间,培养2-3天,备用,将嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉在土豆蔗糖琼脂培养基中分别进行斜面培养,温度设定在40℃-45℃之间,培养3-4天,备用,将酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉在马铃薯综合琼脂培养基中分别进行斜面培养,培养温度28℃-30℃,培养时间3-4天,备用;
(2)、种子培养:将(1)中分别培养好的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌、光合细菌、纳豆芽孢杆菌、巴氏醋杆菌的斜面试管母种,在无菌条件下分别接种于三角瓶液体牛肉膏蛋白胨培养基中进行培养,温度设定在30℃-32℃,在180-220r/min摇床中培养1-2天,备用,将培养好的嗜热侧孢霉、嗜热诺卡氏放线菌、康宁木霉斜面试管母种,在无菌条件下接种于土豆蔗蔗糖液体三角瓶培养基中进行培养,温度设定在40℃-45℃之间,培养2-3天,备用,将分别培养好的酿酒酵母菌、台湾根霉、米曲、黑曲霉的斜面试管母种,在无菌条件下接种于三角瓶马铃薯综合培养基中进行培养,设定温度在28℃-30℃之间,培养时间2-3天,备用;
步骤二:同罐发酵
(1)制备种子液:按以下重量百分比称取步骤一中种子培养后得到的菌种:巴氏醋杆菌2-5%,枯草芽孢杆菌8-12%,地衣芽孢杆菌8-12%,解淀粉芽孢杆菌3-7%,纳豆芽孢杆菌8-12%,嗜热侧孢霉13-17%,光合细菌3-7%,嗜热诺卡氏放线菌4-8%,康宁木霉3-7%,酿酒酵母菌2-5%,植物乳杆菌5-8%,台湾根霉3-7%,米曲2-5%,黑曲霉1-3%,巨大芽孢杆菌8-12%;
制备发酵培养基:将发酵罐在80-100℃下烘干灭菌处理30-50min,然后按照以下重量百分向发酵罐中置入原料:糖蜜1-1.5%,葡萄糖0.6-1%,玉米淀粉1.4-1.8%,豆粕粉1.2-1.8%,硫酸镁0.01-0.05%,木醋酸1.2-1.8%,尿素0.1-0.15%,磷酸二氢钾0.02-0.06%,蛋白胨0.08-0.12%,酵母粉0.03-0.07%,余量为水,再向发酵罐中滴入占发酵培养基总体积0.05-0.07%的微量元素营养液,在110-130℃环境下对发酵培养基进行灭菌处理30-90min,最后将发酵培养基冷却至25-35℃,备用;
发酵培养基的pH为6.8-7.2,向发酵培养基中加入培养好的三角瓶种子液,在无菌条件下进行接种,接种量为8-12%,培养温度为28-32℃,转速150-200r/min,通气量1:0.5-0.8,发酵培养36-72小时,待75-85%芽孢形成即得液体菌剂;
步骤三:固体粉剂制备
将步骤二中得到的液体菌剂与灭过菌的固体培养基在无菌搅拌机中搅拌均匀,然后送入无菌自动控温培养室,浅盘固体发酵,料温控制在30℃-40℃之间,每隔0.5-1小时翻料一次,控制料温不超过45℃,培养3-4天,低温烘干,烘干时最高温度不超过50℃,水分的重量比例达到6-10%,然后粉碎、检测、称重、包装、入库, 成品中含菌量为10亿/克以上。
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