CN107475339A - 一种肉类多肽提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于涉及多肽提取领域,提出一种肉类多肽提取方法,用于解决现有技术中蛋白质水解度过低的问题,其具体包括如下步骤:步骤1:将肉类绞碎后置入含有多糖的酶溶解罐中进行酶解,酶解温度为36‑38℃,酶解时间为3‑5h,酶解罐中蒸馏水和肉类的重量比为10‑15:1;每100kg的蒸馏水中添加6‑8g多糖;所述的多糖由β葡聚糖、甘露寡糖组成,β葡聚糖、甘露寡糖的重量比为1:1‑3;酶解所用的酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶组成;步骤2:步骤1结束后,将酶解液置于水浴中灭酶、冷却、离心,取上清液减压干燥得到多肽粉末。该方法能够有效的提高酶解效率,提高蛋白质的水解度。

Description

一种肉类多肽提取方法
技术领域
本发明涉及多肽提取领域,特别是一种肉类多肽提取方法。
背景技术
多肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,它也是蛋白质水解的中间产物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。通常由三个或三个以上氨基酸分子脱水缩合而成的化合物都可以成为叫多肽。
CN 201410139788.4公开了一种多肽鸡肉调料及其制备方法,涉及一种多肽鸡肉调料,该调料的组分为:多肽鸡肉酶解液、氧化鸡脂、酵母抽取物、还原糖、食用氨基酸、香辛料、食盐、维生素E和双乙酸钠;所述的多肽鸡肉酶解液的制备方法如下:鸡肉清洗、去杂、切块、粉碎,加水预煮45~60分钟、冷却至50~55℃,添加中性蛋白酶与风味蛋白酶组成的复合酶;在50~55℃条件下水解,在95~100℃、10~20分钟条件下钝化酶,分离去渣,加热浓缩。
CN 201510893574.0公开了一种羊肉多肽的制备方法,其包括以下步骤:(1)羊肉破碎;(2)脱膻;(3)蒸煮;(4)酶解;(5)浓缩干燥,即得。其特征在于,步骤(2)采用物理方式脱膻,步骤(4)中所用的酶为胃蛋白酶和胰蛋白酶。
CN 201310236326.X公开了一种乌贼内脏酶解制备高抗氧化活性多肽的方法,将乌贼内脏组织捣碎,按1:3-5(m/v)的料液比加水匀浆,调节pH值至7.0-8.0,加入胰蛋白酶在温度35℃-45℃下水解5-7h得酶解液,灭酶,离心,取上清液,经超滤杯截取分子量≤5KD的多肽,冷冻干燥后,得高抗氧化活性多肽。
通过动物内脏或者肌肉提取多肽是较为常用的一种多肽的提取方式,其能够有效的提高人体免疫力,但是传统的提取方式存在的问题在于提取效率低,单次提取所耗费的肉或者内脏多,经济效率低下。
本领域技术技术人员注意到pH值对酶解效率的影响,因此测试了不同pH值对酶解效率的影响,但是本领域技术人员并未深究如何细化控制pH值来进一步优化酶解效率。
发明内容
本发明旨在提供一种蛋白质水解度高的肉类多肽的提取方法。
其具体方案为:一种肉类多肽提取方法,包括如下步骤:
步骤1:将肉类绞碎后置入含有多糖的酶溶解罐中进行酶解,酶解温度为36-38℃,酶解时间为3-5h,酶解罐中蒸馏水和肉类的重量比为10-15:1;每100kg的蒸馏水中添加6-8g多糖;所述的多糖由β葡聚糖、甘露寡糖组成,β葡聚糖、甘露寡糖的重量比为1:1-3;
酶解所用的酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶组成;
步骤2:步骤1结束后,将酶解液置于水浴中灭酶、冷却、离心,取上清液减压干燥得到多肽粉末;
其中,在步骤1中,酶解前0.5-1小时的pH值维持在6.3-7.2之间,最后0.5-1小时的pH值维持在7.8-8.5之间,中间时间的pH值维持在7.2-7.8之间。
在上述的肉类多肽提取方法中,所述的步骤1中绞碎的肉类进入到酶解罐中酶解前在37℃的恒温水浴中静置1-2h。
在上述的肉类多肽提取方法中,所述的酶的加入顺序为胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶,加入间隔至少为1h。
在上述的肉类多肽提取方法中,所述的胃蛋白酶、胰蛋白酶的用量均为2000-3000U/g肉类。
在上述的肉类多肽提取方法中,所述的木瓜蛋白酶的用量为4000-5000U/g肉类。
在上述的肉类多肽提取方法中,所述的步骤2中的水浴为沸水水浴;冷却至酶解液至常温。
在上述的肉类多肽提取方法中,所述的肉类中脂肪含量低于10wt%。
在上述的肉类多肽提取方法中,所述的酶解时,胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶逐次加入。
在上述的肉类多肽提取方法中,所述的胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶加入的时间间隔不低于1h。
本发明的有益效果在于:
本发明在水解液中加入多糖,提高酶活性,同时需要配合体系的pH值进一步调配使pH值处于一个持续性上升的阶段,使不同酶解阶段的活性得到最大的释放,进而达到提高水解度的目的,并且本方案采用胃蛋白酶和胰蛋白酶结合,可以有效的提高肉类蛋白质前期分解的速度,提高多肽产率。
具体实施方式
下面结合具体实施方式,对本发明的技术方案作进一步的详细说明,但不构成对本发明的任何限制。
为了更加清楚的对本发明进行说明,列举如下实施例来说明本发明的优越性。
实施例1
一种肉类多肽提取方法,包括如下步骤:
步骤1:将牛肉绞碎后在37℃的恒温水浴中静置1-2h,然后置入含有多糖的酶溶解罐中进行酶解,酶解温度为37℃,酶解时间为3h,酶解第1个小时的pH值维持在6.3-7.2之间,酶解第2个小时的pH值维持在7.2-7.8之间,酶解第3个小时的pH值维持在7.8-8.5之间,酶解罐中蒸馏水和肉类的重量比为10:1;每100kg的蒸馏水中添加7g多糖;所述的多糖由β葡聚糖、甘露寡糖组成,β葡聚糖、甘露寡糖的重量比为1:2;
酶解所用的酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶组成;
酶加入顺利为首先加入3000U/g肉类当量的胃蛋白酶,1h后加入2000U/g肉类当量的胰蛋白酶,最后1h后加入4500U/g肉类当量的木瓜蛋白酶;
步骤2:步骤1结束后,将酶解液置于沸水浴中灭酶、冷却至常温、离心,取上清液减压干燥得到多肽粉末。
实施例2
一种肉类多肽提取方法,包括如下步骤:
步骤1:将猪肉绞碎后在37℃的恒温水浴中静置1-2h,然后置入含有多糖的酶溶解罐中进行酶解,酶解温度为37.5℃,酶解时间为4h,酶解第1个小时的pH值维持在6.3-7.2之间,酶解第2-3.5个小时的pH值维持在7.2-7.8之间,酶解第3.5-4个小时的pH值维持在7.8-8.5之间,酶解罐中蒸馏水和肉类的重量比为15:1;每100kg的蒸馏水中添加6g多糖;所述的多糖由β葡聚糖、甘露寡糖组成,β葡聚糖、甘露寡糖的重量比为1:1;
酶解所用的酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶组成;
酶加入顺利为首先加入2000U/g肉类当量的胃蛋白酶,1.5h后加入3000U/g肉类当量的胰蛋白酶,最后1.5h后加入4000U/g肉类当量的木瓜蛋白酶;
步骤2:步骤1结束后,将酶解液置于沸水浴中灭酶、冷却至常温、离心,取上清液减压干燥得到多肽粉末。
实施例3
一种肉类多肽提取方法,包括如下步骤:
步骤1:将羊肉绞碎后在37℃的恒温水浴中静置1-2h,然后置入含有多糖的酶溶解罐中进行酶解,酶解温度为36.5℃,酶解时间为5h,酶解第0.5个小时的pH值维持在6.3-7.2之间,酶解第0.5-4个小时的pH值维持在7.2-7.8之间,酶解第5个小时的pH值维持在7.8-8.5之间,酶解罐中蒸馏水和肉类的重量比为12:1;每100kg的蒸馏水中添加8g多糖;所述的多糖由β葡聚糖、甘露寡糖组成,β葡聚糖、甘露寡糖的重量比为1:3;
酶解所用的酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶组成;
酶加入顺利为首先加入2500U/g肉类当量的胃蛋白酶,1.5h后加入2500U/g肉类当量的胰蛋白酶,最后2h后加入5000U/g肉类当量的木瓜蛋白酶;
步骤2:步骤1结束后,将酶解液置于沸水浴中灭酶、冷却至常温、离心,取上清液减压干燥得到多肽粉末。
实施例4
一种肉类多肽提取方法,包括如下步骤:
步骤1:将鳄鱼肉绞碎后在38℃的恒温水浴中静置1-2h,然后置入含有多糖的酶溶解罐中进行酶解,酶解温度为38℃,酶解时间为4h,酶解第0.5个小时的pH值维持在6.3-7.2之间,酶解第0.5-3个小时的pH值维持在7.2-7.8之间,酶解第4个小时的pH值维持在7.8-8.5之间,酶解罐中蒸馏水和鳄鱼肉的重量比为14:1;每100kg的蒸馏水中添加7g多糖;所述的多糖由β葡聚糖、甘露寡糖组成,β葡聚糖、甘露寡糖的重量比为1:2;
酶解所用的酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶组成;
酶加入顺利为首先加入2500U/g肉类当量的胃蛋白酶,1h后加入2500U/g肉类当量的胰蛋白酶,最后1h后加入5000U/g肉类当量的木瓜蛋白酶;
步骤2:步骤1结束后,将酶解液置于沸水浴中灭酶、冷却至常温、离心,取上清液减压干燥得到多肽粉末。
实施例5
一种肉类多肽提取方法,包括如下步骤:
步骤1:将鸡腿肉绞碎后在37℃的恒温水浴中静置2h,然后置入含有多糖的酶溶解罐中进行酶解,酶解温度为36℃,酶解时间为5h,酶解第1个小时的pH值维持在6.3-7.2之间,酶解第1-4个小时的pH值维持在7.2-7.8之间,酶解第5个小时的pH值维持在7.8-8.5之间,酶解罐中蒸馏水和鸡腿肉的重量比为12:1;每100kg的蒸馏水中添加8g多糖;所述的多糖由β葡聚糖、甘露寡糖组成,β葡聚糖、甘露寡糖的重量比为1:3;
酶解所用的酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶组成;
酶加入顺利为首先加入3000U/g肉类当量的胃蛋白酶,1h后加入2000U/g肉类当量的胰蛋白酶,最后1h后加入4000U/g肉类当量的木瓜蛋白酶;
步骤2:步骤1结束后,将酶解液置于沸水浴中灭酶、冷却至常温、离心,取上清液减压干燥得到多肽粉末。
对比例1
与实施例1大体相同,不同的是其酶解液中不含多糖。
对比例2
与实施例1大体相同,不同的是其酶解液中仅含有胰蛋白酶和木瓜蛋白酶,酶加入顺序为首先加入5000U/g肉类当量的胰蛋白酶,最后1h后加入4500U/g肉类当量的木瓜蛋白酶,在酶解过程中,体系pH值维持在6.3-7.2之间。
收集实施例1、对比例1和对比例2的酶解后的多肽粉末,计算水解度。
水解度的测定方法
水解后生成的NH2基的量由氨基氮的测定法即双指示剂甲醛滴定法测得N1,样品总氮量由微量凯氏定氮法测定得到N2;
水解度为N1/N2*100%。
实施例1的水解度为27.1%,对比例1的水解度为20.3%;对比例2的水解度为22.5%。
由此可见,在配合精密控制的pH体系的前提下,多糖能够有效的促进酶的活跃性,并且胃蛋白酶和胰蛋白酶具有较好的协同作用,提高酶解效率。
进一步地,酶的加入顺序如果经过合理安排,其能够进一步提高水解效率,首先加入胃蛋白酶,然后加入胰蛋白酶,最后加入木瓜蛋白酶;在加工过程中发现,胃蛋白酶的酶解效率是最高的,首先通过胃蛋白酶进行酶解,实现肉块蛋白质的快速分解,然后通过胰蛋白酶和胃蛋白酶协同进行深度酶解,最后通过木瓜蛋白酶对肉类中胃蛋白酶和胰蛋白酶难于分解的粗肌肉纤维进行酶解,在木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶的协同作用下,可以达到最优的酶解效果。
以上所述的仅为本发明的较佳实施例,凡在本发明的精神和原则范围内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种肉类多肽提取方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:将肉类绞碎后置入含有多糖的酶溶解罐中进行酶解,酶解温度为36-38℃,酶解时间为3-5h,酶解罐中蒸馏水和肉类的重量比为10-15:1;每100kg的蒸馏水中添加6-8g多糖;所述的多糖由β葡聚糖、甘露寡糖组成,β葡聚糖、甘露寡糖的重量比为1:1-3;
酶解所用的酶由胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶组成;
步骤2:步骤1结束后,将酶解液置于水浴中灭酶、冷却、离心,取上清液减压干燥得到多肽粉末;
其中,在步骤1中,酶解前0.5-1小时的pH值维持在6.3-7.2之间,最后0.5-1小时的pH值维持在7.8-8.5之间,中间时间的pH值维持在7.2-7.8之间。
2.根据权利要求1所述的肉类多肽提取方法,其特征在于,所述的步骤1中绞碎的肉类进入到酶解罐中酶解前在37℃的恒温水浴中静置1-2h。
3.根据权利要求2所述的肉类多肽提取方法,其特征在于,所述的酶的加入顺序为胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶,加入间隔至少为1h。
4.根据权利要求1所述的肉类多肽提取方法,其特征在于,所述的胃蛋白酶、胰蛋白酶的用量均为2000-3000U/g肉类。
5.根据权利要求4所述的肉类多肽提取方法,其特征在于,所述的木瓜蛋白酶的用量为4000-5000U/g肉类。
6.根据权利要求1所述的肉类多肽提取方法,其特征在于,所述的步骤2中的水浴为沸水水浴;冷却至酶解液至常温。
7.根据权利要求1所述的肉类多肽提取方法,其特征在于,所述的肉类中脂肪含量低于10wt%。
8.根据权利要求1所述的肉类多肽提取方法,其特征在于,所述的酶解时,胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶逐次加入。
9.根据权利要求1所述的肉类多肽提取方法,其特征在于,所述的胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶加入的时间间隔不低于1h。
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