CN107475251B - 一种裂解液及其在保存组织或细胞、提取rna中的应用 - Google Patents

一种裂解液及其在保存组织或细胞、提取rna中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN107475251B
CN107475251B CN201710848152.0A CN201710848152A CN107475251B CN 107475251 B CN107475251 B CN 107475251B CN 201710848152 A CN201710848152 A CN 201710848152A CN 107475251 B CN107475251 B CN 107475251B
Authority
CN
China
Prior art keywords
lysate
rna
lysis solution
extraction
tissue
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201710848152.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107475251A (zh
Inventor
赵梓亦
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
CHENGDU DAOSHENG BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd.
Original Assignee
Chengdu Daosheng Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chengdu Daosheng Biotechnology Co ltd filed Critical Chengdu Daosheng Biotechnology Co ltd
Priority to CN201710848152.0A priority Critical patent/CN107475251B/zh
Publication of CN107475251A publication Critical patent/CN107475251A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107475251B publication Critical patent/CN107475251B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1003—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明公开了一种裂解液及其在保存组织或细胞、提取RNA中的应用，包括裂解液A和裂解液B，裂解液A包括异硫氰酸胍2‑4mol/L、氯化钠5‑10mmol/L、氯化钾10‑15mmol/L、氯化镁5‑10mmol/L，裂解液B包括异硫氰酸胍2‑4mol/L、亚精胺1‑5mmol/L、水饱和苯酚30‑40vt％、硫氰酸铵0.4‑0.5mol/L、甘油7‑8vt％，乙酸钠0.1‑0.5mol/L，SDS 0.2‑0.5wt％。本发明裂解液A可用于保存组织或细胞，当采用裂解液A和裂解液B提取RNA时，不需要对组织或细胞进行清洗，显著提高提取效率，并且各组分协同作用，提取的RNA纯度高、收率高，可实现实验室快速、低廉、高质量、规模化提取动物RNA的目的。

Description

一种裂解液及其在保存组织或细胞、提取RNA中的应用
技术领域
本发明属于生物制剂技术领域，具体涉及一种裂解液及其在保存组织或细胞、提取RNA中的应用。
背景技术
提取核糖核酸(RNA)是分子生物学实验、临床分子诊断中经常需要进行的技术。所得RNA应用广泛，包括基因诊断、生物芯片分析、基因表达分析等。
组织块的保存方式直接影响以动物组织块为样品的RNA提取，主要的保存方式有液氮保存和RNA later溶液保存(RNAlaterTM Stabilization Solution)。但RNA later溶液与TRIzol、硅胶柱和磁珠法的化学成分不兼容，RNA later溶液中含有异硫氰酸铵，当组织块从RNA later溶液中取出用于提取RNA时，若未将组织块上带有的RNA later溶液清洗干净，则RNA later溶液中的异硫氰酸铵会与裂解液中的酚、SDS结合或反应生成沉淀，导致裂解液成分和浓度改变，裂解不彻底，降低RNA的纯度和收率。因此，采用RNA later溶液保存的组织或细胞在提取前通常需要进行反复地清洗，浪费时间和人力，降低提取效率。
目前，RNA的提取通常采用TRIzol法、硅胶柱和磁珠法等，但这些方法普遍存在RNA收率低、杂质污染严重的问题，不能满足后续基因诊断、生物芯片分析、基因表达分析等实验的质量要求。
此外，组织块的破碎过程也极大的影响着RNA的质量。常用组织块的破碎方法包括液氮研磨法、匀浆法(手工匀浆、机器匀浆、超声匀浆)和反复冻融法。液氮研磨法需要的组织块较大，且较难将组织块彻底打碎；匀浆法较难彻底抑制内源性RNA酶活性，容易造成内源性降解；反复冻融法的缺点也是难以彻底裂解大块组织，且内源性RNA酶活性难以抑制。因此，对动物源性组织块的RNA提取存在操作复杂、破碎不完全、内源性RNA活性难于抑制等困难，造成RNA的提取质量及产量难以保障。
发明内容
本发明的目的在于：针对上述现有提取RNA的裂解液与RNA later溶液成分不兼容，导致组织或细胞在提取RNA前需反复清洗，使得提取效率低下的问题，本发明提供一种裂解液及其在保存组织或细胞、提取RNA中的应用。
本发明采用的技术方案如下：
一种裂解液，包括裂解液A，所述裂解液A包括异硫氰酸胍2-4mol/L、氯化钠5-10mmol/L、氯化钾10-15mmol/L、氯化镁5-10mmol/L，裂解液A的pH为7-7.5。
所述裂解液A在保存组织或细胞中的应用。裂解液A的主要成分为异硫氰酸胍，异硫氰酸胍属于解偶剂，是一类强力的蛋白质变性剂，可溶解蛋白质并使蛋白质二级结构消失，导致细胞结构降解，核蛋白迅速与核酸分离。当采用裂解液A保存组织或细胞时，由于异硫氰酸胍浓度较低，可起到轻微的裂解作用，使得组织或细胞在由氯化钠、氯化钾和氯化镁组成的等渗体系中被异硫氰酸胍轻微裂解后于表面形成乳化膜，乳化膜可对组织或细胞起到保护作用，因此，可取代传统的RNA later溶液。
一种裂解液，包括裂解液B和所述裂解液A，所述裂解液B包括异硫氰酸胍2-4mol/L、亚精胺1-5mmol/L、水饱和苯酚30-40vt％、硫氰酸铵0.4-0.5mol/L、甘油7-8vt％，乙酸钠0.1-0.5mol/L，SDS 0.2-0.5wt％，裂解液B的pH为7-7.5。
进一步地，裂解液B还包括质量分数为0.01‰的溴酚蓝。
所述裂解液在提取RNA中的应用。在提取RNA时，同时使用裂解液A和裂解液B，裂解液B中的水饱和苯酚可裂解细胞，使细胞中的蛋白、核酸物质解聚得到释放，并且，异硫氰酸胍的浓度显著上升，可促进裂解，使得细胞裂解完全。此外，苯酚虽可有效地变性蛋白质，但不能完全抑制RNA酶活性，而异硫氰酸胍还可辅助抑制内源和外源RNA酶活性，减少RNA降解。裂解液A中的氯化钠、氯化钾和氯化镁还可促进RNA溶解，有利于提高RNA的收率。而裂解液B中的亚精胺可结合并沉淀DNA，硫氰酸铵可使蛋白脱水沉淀，去除蛋白污染，乙酸钠则可溶解多糖类物质，SDS作为阴离子表面活性剂，可使RNA离析，同时可作为蛋白质增溶剂，这些组分之间协同作用，使得由该裂解液提取的RNA纯度高、收率高，且蛋白污染低，可用于后续基因诊断、生物芯片分析、基因表达分析等实验。
所述裂解液提取RNA的方法为：
(1)取裂解液A保存的组织或细胞，加入所述裂解液A和裂解液B，颠倒混匀，获得混合物；
(2)从组织中提取RNA时，将步骤(1)得到的混合物进行超声破碎，从细胞中提取RNA时，直接进行下述步骤(4)中的操作；
(3)将超声破碎后的混合物颠倒混匀；
(4)在步骤(3)的混合物中，加入氯仿，混匀后离心，取上层液体；
(5)在步骤(4)获得的上层液体中加入异丙醇，混匀后离心，弃去液体，获得沉淀物；
(6)向上述沉淀物中加入乙醇溶液，混匀后离心，弃去液体；
(7)待步骤(6)中的乙醇挥发后加入ddH2O溶解；
进一步地，步骤(1)中，裂解液A和裂解液B的总质量为组织或细胞质量的100-150倍。
进一步地，步骤(2)中，超声功率为100-125W，超声时间为3-6s。
进一步地，步骤(4)中，氯仿的体积为混合物体积的0.2-0.3倍。
进一步地，步骤(5)中，异丙醇与上层液体的体积比为1：1。
进一步地，步骤(6)中，乙醇溶液的浓度为75vt％，乙醇溶液与异丙醇的体积比为1.2：1。
进一步地，离心的时间为1-5min，离心力为10000-12000g。
进一步地，步骤(7)中，ddH2O的体积为10-50μL。
本发明采用超声破碎组织，速率快，不仅避免了组织破碎不完全、内源性RNA酶的干扰，而且大大缩短提取时间，进一步提高了RNA的提取效率。本发明由于加入了溴酚蓝，在步骤(4)的离心过程中，溴酚蓝随DNA和蛋白质下沉，可用于指示RNA离析是否完成。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
1.本发明的裂解液A可取代传统RNA later溶液，用于保存组织或细胞，因此，当采用裂解液A和裂解液B提取RNA时，不需要对组织或细胞进行清洗，省去了使用RNA later溶液保存时的清洗操作，简化了操作步骤，显著提高提取效率；
2.本发明裂解液中的各组分配比设计合理，相互之间协同作用，使得提取的RNA纯度高、收率高，且蛋白污染低；
3.本发明采用超声破碎组织，速率快，不仅避免了组织破碎不完全、内源性RNA酶的干扰，而且大大缩短提取时间，进一步提高了RNA的提取效率；
4.本发明裂解液A、裂解液B性质均较稳定，不易受季节、湿度等条件影响，并能充分配合使用，可实现实验室快速、低廉、高质量、规模化提取动物RNA的目的。
附图说明
图1为不同处理方法对大鼠肝脏组织提取RNA的1％琼脂糖电泳检测效果图；其中，0：Ladder，1：肝脏放入裂解液A 4h，2：肝脏放入RNA later 4h，3：肝脏放入裂解液A 8h，4：肝脏放入RNA later 8h，5：肝脏放入裂解液A 24h，6：肝脏放入RNA later 24h，7：肝脏放入裂解液A 48h，8：肝脏放入RNA later 48h；采用裂解液A保存的大鼠肝脏组织使用本发明裂解液提取RNA，采用RNA later保存的大鼠肝脏组织使用TRIzol提取RNA；
图2为大鼠不同组织采用不同裂解液提取RNA的1％琼脂糖电泳检测效果图；其中0：Ladder，1：心脏+本发明裂解液，2：心脏+TRIzol，3：肝脏+本发明裂解液，4：肝脏+TRIzol，5：脾脏+本发明裂解液，6：脾脏+TRIzol，7：肺脏+本发明裂解液，8：肺脏+TRIzol，9：肾脏+本发明裂解液，10：肾脏+TRIzol，11：坐骨神经+本发明裂解液，12：坐骨神经+TRIzol；
图3为PANC-1细胞采用不同裂解液提取RNA的1％琼脂糖电泳检测效果图；其中0：Ladder，1、2、3：Panc-1+本发明裂解液，4、5、6：Panc-1+TRIzol。
具体实施方式
本说明书中公开的所有特征，除了互相排斥的特征和/或步骤以外，均可以以任何方式组合。
实施例1
(1)取8个1.5ml EP管，每个EP管加入4mg大鼠肝脏组织，对每个EP管进行编号，其中，1、3、5、7号EP管分别加入250ul裂解液A，于室温下分别保存4h、8h、24h、48h，2、4、6、8号EP管分别加入250ul RNA later溶液，于室温下分别保存4h、8h、24h、48h；
(2)向上述1、3、5、7号EP管中分别加入750ul裂解液B；弃去上述2、4、6、8号EP管中的RNA later溶液，加入1×PBS洗涤3次后弃液，再分别加入1ml的TRIzol溶液；
(3)将上述1-8号EP管颠倒混匀后进行超声破碎裂解，超声时间为5s，频率为20kHz，功率为100W；
(4)将超声后的EP管颠倒几次，使其中的混合物混匀；
(5)在步骤(4)处理后的EP管中分别加入200ul氯仿，剧烈颠倒混匀30s后，在10000g的离心力下离心1min，取上层液体；
(6)将步骤(5)获得的上层液体分别倒入另一批对应编号的干净EP管中，然后分别加入500ul异丙醇，缓慢颠倒混匀50s后，在10000g的离心力下离心1min，弃去液体，获得沉淀物；
(7)向上述沉淀物中分别加入600ul 75vt％乙醇溶液，缓慢颠倒混匀30s后，在10000g的离心力下离心2min，弃去液体；
(8)将步骤(7)的EP管置于空气中干燥5min后加入40ul ddH2O溶解；
(9)将步骤(8)获得的RNA进行微量紫外分光光度计测定OD值以及琼脂糖凝胶电泳检测，检测结果见表1和图1，结果表明，由裂解液A保存的组织采用本发明裂解液提取的RNA杂质污染低，其收量高于RNA later保存后采用TRIzol提取的RNA的收量，长时间(48h)保存后，效果更为明显。
表1 实施例1提取的RNA的核酸蛋白检测结果
Figure BDA0001412591820000051
实施例2
(1)取12个1.5ml EP管，对每个EP管进行编号，其中，1、3、5、7、9、11号EP管分别加入250ul裂解液A和750ul裂解液B，2、4、6、8、10、12号EP管分别加入1ml TRIzol；
(2)向上述1、2号EP管中分别放入4mg大鼠心脏组织，3、4号EP管中分别放入3mg大鼠肝脏组织，5、6号EP管中分别放入5mg大鼠脾脏组织，7、8号EP管中分别放入4mg大鼠肺脏组织，9、10号EP管中分别放入5mg大鼠肾脏组织，11、12号EP管中分别放入3mg大鼠坐骨神经组织；
(3)将上述1-12号EP管颠倒混匀后进行超声破碎裂解，超声时间为5s，频率为20kHz，功率125W；
(4)将超声后的EP管颠倒几次，使其中的混合物混匀；
(5)在步骤(4)处理后的EP管中分别加入200ul氯仿，剧烈颠倒混匀30s后，在10000g的离心力下离心1min，取上层液体；
(6)将步骤(5)获得的上层液体分别倒入另一批对应编号的干净EP管中，然后分别加入500ul异丙醇，缓慢颠倒混匀50s后，在10000g的离心力下离心1min，弃去液体，获得沉淀物；
(7)向上述沉淀物中分别加入600ul 75vt％乙醇溶液，缓慢颠倒混匀30s后，在10000g的离心力下离心2min，弃去液体；
(8)将步骤(7)的EP管置于空气中干燥5min后加入40ul ddH2O溶解；
(9)将步骤(8)获得的RNA进行微量紫外分光光度计测定OD值以及琼脂糖凝胶电泳检测，检测结果见表2和图2，结果表明，对于大鼠不同部位的组织，采用本发明裂解液提取的RNA的电泳条带亮度高，且清晰、完整，RNA的杂质污染低，其纯度和收量均高于采用TRIzol提取的RNA的纯度和收量。
表2 实施例2提取的RNA的核酸蛋白检测结果
Figure BDA0001412591820000061
实施例3
(1)取6个1.5ml EP管，每个EP管加入约106个Panc-1细胞，对每个EP管进行编号，其中，1、2、3号EP管分别加入250ul裂解液A和750ul裂解液B，4、5、6号EP管分别加入1mlTRIzol；将上述EP管颠倒几次，使其中的混合物混匀；
(2)在上述EP管中分别加入200ul氯仿，剧烈颠倒混匀10s后，在10000g的离心力下离心1min，取上层液体；
(3)将步骤(2)获得的上层液体分别倒入另一批对应编号的干净EP管中，然后分别加入500ul异丙醇，缓慢颠倒混匀50s后，在10000g的离心力下离心1min，弃去液体，获得沉淀物；
(4)向上述沉淀物中分别加入600ul 75vt％乙醇溶液，缓慢颠倒混匀30s后，在10000g的离心力下离心1min，弃去液体；
(5)将步骤(4)的EP管置于空气中干燥5min后加入40ul ddH2O溶解；
(6)将步骤(5)获得的RNA进行微量紫外分光光度计测定OD值以及琼脂糖凝胶电泳检测，检测结果见表3和图3，结果表明，Panc-1细胞采用本发明裂解液提取的RNA的电泳条带完整、清晰、特异性好，并且纯度高、收量高，优于TRIzol。
表3 实施例3提取的RNA的核酸蛋白检测结果
Figure BDA0001412591820000062
如上所述即为本发明的实施例。本发明不局限于上述实施方式，任何人应该得知在本发明的启示下做出的结构变化，凡是与本发明具有相同或相近的技术方案，均落入本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.裂解液在提取RNA中的应用，其特征在于，提取方法为：
(1)取裂解液A保存的组织或细胞，加入所述裂解液A和裂解液B，颠倒混匀，获得混合物；
(2)从组织中提取RNA时，将步骤(1)得到的混合物进行超声破碎，从细胞中提取RNA时，直接进行下述步骤(4)中的操作；
(3)将超声破碎后的混合物颠倒混匀；
(4)在步骤(3)的混合物中，加入氯仿，混匀后离心，取上层液体；
(5)在步骤(4)获得的上层液体中加入异丙醇，混匀后离心，弃去液体，获得沉淀物；
(6)向上述沉淀物中加入乙醇溶液，混匀后离心，弃去液体；
(7)待步骤(6)中的乙醇挥发后加入ddH2O溶解；
其中，所述裂解液A包括异硫氰酸胍2-4mol/L、氯 化钠5-10mmol/L、氯化钾10-15mmol/L、氯化镁5-10mmol/L；
所述裂解液B包括异硫氰酸胍2-4mol/L、亚精胺1-5mmol/L、水饱和苯酚30-40vt％、硫氰酸铵0.4-0.5mol/L、甘油7- 8vt％，乙酸钠0.1-0.5mol/L，SDS 0.2-0.5wt％，0.01‰的溴酚蓝，裂解液A和裂解液B的pH均为7-7.5。
2.根据权利要求1所述裂解液在提取RNA中的应用，其特征在于，所述步骤(1)中，裂解液A和裂解液B的总质量为组织或细胞质量的100-150倍。
3.根据权利要求1所述裂解液在提取RNA中的应用，其特征在于，所述步骤(2)中，超声功率为100-125W，超声时间为3-6s。
4.根据权利要求1所述裂解液在提取RNA中的应用，其特征在于，所述步骤(4)中，氯仿的体积为混合物体积的0.2-0.3倍。
5.根据权利要求1所述裂解液在提取RNA中的应用，其特征在于，所述步骤(5)中，异丙醇与上层液体的体积比为1：1。
CN201710848152.0A 2017-09-19 2017-09-19 一种裂解液及其在保存组织或细胞、提取rna中的应用 Active CN107475251B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710848152.0A CN107475251B (zh) 2017-09-19 2017-09-19 一种裂解液及其在保存组织或细胞、提取rna中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710848152.0A CN107475251B (zh) 2017-09-19 2017-09-19 一种裂解液及其在保存组织或细胞、提取rna中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107475251A CN107475251A (zh) 2017-12-15
CN107475251B true CN107475251B (zh) 2021-02-02

Family

ID=60585814

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710848152.0A Active CN107475251B (zh) 2017-09-19 2017-09-19 一种裂解液及其在保存组织或细胞、提取rna中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107475251B (zh)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109234270A (zh) * 2018-09-30 2019-01-18 苏州新赛美生物科技有限公司 一种rna提取溶液和rna提取溶液制备方法及rna试剂提取方法
CN110229777B (zh) * 2019-01-03 2021-02-23 杭州百凌生物科技有限公司 一种用于批量制备微量细胞裂解液的保存方法及其应用
CN109609498A (zh) * 2019-01-28 2019-04-12 温州医科大学附属第医院 一种动物组织rna的样品保存液及其保存方法
CN109609499B (zh) * 2019-02-01 2020-12-01 成都导胜生物技术有限公司 一种提取液及其在提取rna中的应用
CN109593756B (zh) * 2019-02-01 2020-10-09 成都导胜生物技术有限公司 一种提取液及其在保存组织或细胞、提取rna中的应用
CN109609501B (zh) * 2019-02-01 2021-03-16 成都导胜生物技术有限公司 利用基于超声原理的动植物组织消融仪快速提取rna、dna或蛋白质的方法
CN109609502B (zh) * 2019-02-01 2020-10-02 成都导胜生物技术有限公司 一种rna提取方法
CN109609500B (zh) * 2019-02-01 2020-10-09 成都导胜生物技术有限公司 利用基于超声原理的动植物组织消融仪快速提取rna的方法
CN109735533A (zh) * 2019-02-01 2019-05-10 成都导胜生物技术有限公司 一种生物组织中rna、dna或蛋白质的快速提取的方法
CN111057704B (zh) * 2019-12-31 2022-07-05 广州市金圻睿生物科技有限责任公司 一种石蜡切片样本dna提取的脱蜡裂解结合液、试剂盒及方法
CN113913494A (zh) * 2021-09-14 2022-01-11 苏州锐讯生物科技有限公司 快速便捷提取体液中病毒dna的试剂盒及提取方法
CN114698628B (zh) * 2022-03-01 2024-01-12 中山大学附属第六医院 一种组织库标本冷冻保存液及其应用
CN114908081A (zh) * 2022-04-29 2022-08-16 杭州新景生物试剂开发有限公司 一种核酸提取试剂及其试剂盒以及快速萃取分离纯化核酸的方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6204375B1 (en) * 1998-07-31 2001-03-20 Ambion, Inc. Methods and reagents for preserving RNA in cell and tissue samples

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Preservation of Nucleic Acid Integrity in Guanidine Thiocyanate Lysates of Whole Blood;A. V. Kravchenko et al;《Russian Journal of Bioorganic Chemistry》;20061231;第32卷(第6期);547-551 *
罗汉果果实RNA的提取及SgDHAR 基因的克隆与表达;韦荣昌等;《药学学报》;20141231;第49卷(第1期);115-123 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN107475251A (zh) 2017-12-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107475251B (zh) 一种裂解液及其在保存组织或细胞、提取rna中的应用
US8367817B2 (en) Reagents for isolation of purified RNA
EP2539449B9 (en) Process for parallel isolation and/or purification of rna and dna
JP5824141B2 (ja) 生体試料よりｒｎａを分離精製する方法
US20060188892A1 (en) Enzymatic digestion of tissue
CN103097532B (zh) 高产量分离包括小靶核酸在内的靶核酸的方法
JP6768700B2 (ja) 組織材料を破壊するための組成物および方法
KR20070097430A (ko) 안정화 시약으로부터 핵산을 정제하기 위한 조성물 및 방법
JP6440616B2 (ja) 高収量で小型ｒｎａを含むｒｎａを単離するための方法
CN106244583A (zh) 一种磁珠法核酸提取方法
CN107058295B (zh) 一种全血dna快速提取方法
CN109504678A (zh) 基于磁珠法进行核酸提取的试剂盒及应用
CN108949747A (zh) 一种提取rna的试剂盒及应用方法
US20100331534A1 (en) nucleic acid purification method
EP3135769A1 (en) Kits and methods for extracting rna
WO2020156049A1 (zh) 一种提取液及其在保存组织或细胞、提取rna中的应用
CN112795623A (zh) 一种病毒核酸提取裂解液、试剂盒及方法
CN104212796A (zh) 一种鱼类精巢组织总rna的提取方法
CN107058297B (zh) 一种离液剂以及使用该离液剂提取基因组dna的方法
CN109609499B (zh) 一种提取液及其在提取rna中的应用
CN105821031A (zh) 一种二氯甲烷法提取dna的原理
CN112831495B (zh) 一种富含几丁质的动物基因组dna的提取方法
CN104313013A (zh) 一种鱼类肌肉组织总rna的提取方法
CN109609502B (zh) 一种rna提取方法
CN113980956A (zh) 呼吸道病原微生物宏基因组去除宿主核酸提取方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20181025

Address after: 636600 76 Wenxing Road, Nanjiang Town, Nanjiang County, Bazhong, Sichuan

Applicant after: Jiang Hua

Address before: 610000 No. 1, No. 2, purple Rui Road, high tech Zone, Chengdu, Sichuan Province, 2.

Applicant before: Chengdu Bosen Biological Technology Co. Ltd.

TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20200409

Address after: 610000 9, 3 building 200, Tianfu five street, hi tech Zone, Chengdu, Sichuan.

Applicant after: CHENGDU DAOSHENG BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd.

Address before: 636600 76 Wenxing Road, Nanjiang Town, Nanjiang County, Bazhong, Sichuan

Applicant before: Jiang Hua

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant