CN107475136A - 一种平菇专用母种培养基及其制备方法与应用 - Google Patents

一种平菇专用母种培养基及其制备方法与应用 Download PDF

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张海兰
宫志远
姚强
杨鹏
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    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
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Abstract

本发明涉及一种平菇专用母种培养基及其制备方法与应用。培养基配方如下：脱脂牡丹籽粕20～100g，琼脂18～20g，水1000ml。本发明利用脱脂牡丹籽粕为原料制备平菇专用母种培养基，该培养基适合平菇菌丝生长，在菌丝生长速度、长势、生物量、前处理时间、原料成本等方面均有明显优势，为平菇母种生产开辟了新的原料途径，简化了生产工艺，降低了母种培养基生产的经济、时间成本。

Description

一种平菇专用母种培养基及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及一种平菇专用母种培养基及其制备方法与应用，属于食用菌栽培技术领域。
背景技术
食用菌产业是循环、高效、生态的现代农业产业，是典型的设施农业。目前我国食用菌年产量占世界总产量的75％以上，在我国农业经济中其年产值仅次于粮、油、菜、果，居第五位，成为农业经济中的一项重要产业。2015年全国食用菌总产量3476.15万吨，其中平菇590.18万吨，占16.98％，是继香菇、木耳之后的第三大菇种，也是消费者接受度最高的菇种之一。平菇的一般生产工艺为：保存菌种首先在母种培养基上活化扩大，然后接种到原种培养基生产原种，原种长好后再接种至栽培种培养基生产栽培种，栽培种接种至培养料上进行出菇生产。因此母种培养是平菇生产的第一步，是决定生产成败的关键步骤。目前食用菌母种培养基多采用PDA培养基(土豆200g煮汁、葡萄糖20g、琼脂20g，水1000ml)或加富PDA培养基(土豆200g煮汁、葡萄糖20g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g、酵母浸粉2g、棉籽壳50g煮汁、麦麸20g煮汁，琼脂20g，水1000ml)，即在PDA培养基中添加多种营养成分，以促进菌丝生长，但该培养基制作过程繁琐，成本较高。
油用牡丹(Paeonia suffruticosa Andr)属毛茛科芍药属灌木，是一种新兴的木本油料作物，具有高产出、高含油率、高品质、低成本的优势。目前，油用牡丹籽主要用于榨油，牡丹油被称为“液体黄金”，油用牡丹籽榨油后的固体渣粕，称为脱脂牡丹籽粕，牡丹籽粕中含有多种蛋白质、维生素等多种营养成分，但是，目前利用渠道较少，主要是废弃。为了寻找牡丹籽粕的高效利用途径，对其进行了研究开发。
中国专利文献CN104824681A(申请号201510178375.1)和中国专利文献CN104844683A(申请号201510178401.0)分别公开了一种从油用牡丹籽粕中提取膳食纤维的方法和一种从牡丹籽粕中提取牡丹皂素的方法，提高了油用牡丹资源废弃物的综合开发利用价值。中国专利文献CN104311295A(申请号201410537240.5)公开了一种含有牡丹籽外壳的食用菌栽培基质及其制备方法，该栽培基质由秸秆、牡丹籽外壳、牡丹籽粕、麸皮、茶渣、柴胡药渣、磷酸二氢钾、石膏、沸石和高岭土制备而成，提高了食用菌的品质和产量。
中国专利文献CN105296368A(申请号201510908895.3)公开了通过来自细小微胞藻中的delta-6脱饱和酶基因MpFADS6，提供了异源表达MpFADS6基因的重组高山被孢霉菌株M.alpina-MpFADS6，本发明还提供了所述重组高山被孢霉菌株在生产EPA的用途，并通过添加1％牡丹籽油或50g/L牡丹籽粕汁的培养基中有效提高EPA产量，对产油真菌高山被孢霉的脂肪酸合成中的代谢调控基础理论研究及PUFAs的生产具有重要的意义。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供了一种平菇专用母种培养基及其制备方法与应用。该方法为降低食用菌的栽培成本、拓宽原料来源，提高工作效率，解决牡丹籽粕的低效利用及对环境的污染问题提供了新的途径。
本发明的技术方案如下：
一种平菇专用母种培养基，每升原料组分如下：
脱脂牡丹籽粕粉20～100g，琼脂18～20g，水定容至1L。
本发明优选的，所述平菇专用母种培养基，每升原料组分如下：
脱脂牡丹籽粕粉30～80g，琼脂18～20g，水定容至1L。
本发明进一步优选的，所述平菇专用母种培养基，每升含有脱脂牡丹籽粕粉35g、40g、45g、50g、55g、60g、65g、70g、75g。
本发明进一步优选的，所述平菇专用母种培养基，每升原料组分如下：
脱脂牡丹籽粕粉50g，琼脂20g，水定容至1L。
上述食用菌母种培养基的制备方法，包括如下步骤：
(1)制备脱脂牡丹籽粕粉；
(2)按比例取步骤(1)制得的脱脂牡丹籽粕粉加入水及琼脂，煮沸3～5分钟，加水定容至所需体积，灭菌，即得。
根据本发明优选的，所述步骤(1)中，制备脂牡丹籽粕粉的步骤如下：
取脱脂牡丹籽粕，经干燥至含水量不超过5wt％，粉碎后过40目筛，制得脱脂牡丹籽粕粉。
根据本发明优选的，所述步骤(2)中，灭菌条件如下：在温度121℃、蒸汽压力1.05kg/cm2的条件下，灭菌20分钟。
上述平菇专用母种培养基在培养平菇母种时应用。
有益效果
1、本发明利用脱脂牡丹籽粕为原料制备平菇专用母种培养基，可以加快菌丝生长速度，增加菌丝生长量，缩短生产周期；
2、本发明中脱脂牡丹籽粕通过平菇的转化利用，提高了利用效率，变废为宝，增加了收入，解决了环境污染问题；
3、本发明成分简单，操作方便，成本低廉，易于实现，具有非常显著的经济效益，降低了食用菌母种生产成本。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步说明，实施例中未详加说明的接种、发菌等均按本领域平菇母种制备的现有技术。
实施例中使用的脱脂牡丹籽粕购自菏泽尧舜牡丹生物科技有限公司公司，该脱脂牡丹籽粕来源于当年生油用牡丹籽榨油后剩余的固体渣粕。
实施例中，脱脂牡丹籽粕粉经晾晒干燥至含水量不超过5wt％，并粉碎后过40目筛制得。
实施例1
一种平菇专用母种培养基，每升原料组分如下：
脱脂牡丹籽粕20g，琼脂20g，水定容至1L。
上述平菇母种培养基的制备方法，步骤如下：
(1)取脱脂牡丹籽粕，经干燥至含水量不超过5wt％，粉碎后过40目筛，制得脱脂牡丹籽粕粉；
(2)按比例取脱脂牡丹籽粕20g、琼脂20g加入水中，煮沸5分钟，加水定容至1L，分装试管或者锥形瓶，加塞、包扎，在温度121℃、蒸汽压力1.05kg/cm2的条件下，灭菌20分钟，即得。
实施例2
一种平菇专用母种培养基，每升原料组分如下：
脱脂牡丹籽粕50g，琼脂20g，水定容至1L。
制备步骤同实施例1。
实施例3
一种平菇专用母种培养基，每升原料组分如下：
脱脂牡丹籽粕100g，琼脂18g，水定容至1L。
制备步骤同实施例1。
对比例1
PDA培养基：土豆200g煮汁、葡萄糖20g，琼脂20g，加水定容至1000ml，常规分装、灭菌。
对比例2：
加富PDA培养基：土豆200g煮汁、葡萄糖20g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g、酵母浸粉2g、棉籽壳50g煮汁、麦麸20g煮汁，琼脂20g，加水定容至1000ml，常规分装、灭菌。
对比例3
一种平菇菇母种培养基，每升原料组分如下：
脱脂油菜籽粕粉50g，琼脂20g，水定容至1L。
制备步骤同实施例1。
对比例4
一种平菇母种培养基，每升原料组分如下：
琼脂20g，脱脂牡丹籽粕汁1L。
上述平菇母种培养基的制备方法，步骤如下：
按照中国专利文献CN105296368A(申请号201510908895.3)中说明书第[0038]段的记载制备方法制备脱脂牡丹籽粕汁：
取50g脱脂牡丹籽粕，粉碎后过筛置于1L水中煮沸，沉淀，用4层纱布过滤，得脱脂牡丹籽粕汁。
取上述比例的琼脂、脱脂牡丹籽粕汁混合，煮沸20分钟，分装试管或者锥形瓶，加塞、包扎，在温度121℃、蒸汽压力1.05kg/cm2的条件下，灭菌20分钟，即得。
对比例5
按照中国专利文献CN104311295A(申请号201410537240.5)中实施例2的组分经干燥粉碎后混合，制备成混合基料；按照如下比例制备培养基，每升原料组分如下：
混合基料50g，加水1L，煮沸30分钟，用4层纱布过滤，滤汁加入琼脂20g，水定容至1L。
制备步骤同实施例1。
对比例6
按照中国专利文献CN104311295A(申请号201410537240.5)中实施例2的组分经干燥粉碎后，制备成基料粉末；按照如下比例制备培养基，每升原料组分如下：
基料粉末100g，加水1L，煮沸30分钟，用4层纱布过滤，滤汁加入琼脂20g，水定容至1L。
制备步骤同实施例1。
实验例
将上述实施例与对比例制备的培养基趁热倒至直径90mm的培养皿中制成培养基平板，将保藏的平菇菌种转接到上述培养基平板上，置于25℃恒温培养箱中培养，观察各培养基上菌丝长势及形态，测定菌丝日均生长速度。
表1不同培养基培养的平菇菌丝生长比较
注：++++菌丝长势旺盛，菌落致密，+++菌丝长势较旺盛，菌落茂密，++菌丝长势一般，菌落稀疏。
由表1可以看出平菇菌丝在实施例2培养基上菌丝生长速度最快，其次是对比例2；在实施例2、3培养基上平菇菌丝生长最为旺盛、致密，其次是实施例1与对比例1～3，菌丝生长较旺盛，在对比例4、5、6上菌丝生长速度比较慢，且菌丝长势差，菌落稀疏。综合考虑菌丝生长速度、长势、生物量、前处理时间、原料成本等因素，实施例2、3的供试培养基具有明显的优势，其中，实施例2与其它配方相比有较大的成本、时间优势，为最优配方。

Claims (8)

1.一种平菇专用母种培养基，每升原料组分如下：
脱脂牡丹籽粕粉20～100g，琼脂18～20g，水定容至1L。
2.如权利要求1所述的一种平菇专用母种培养基，其特征在于，每升原料组分如下：
脱脂牡丹籽粕粉30～80g，琼脂18～20g，水定容至1L。
3.如权利要求1所述的一种平菇专用母种培养基，其特征在于，每升含有脱脂牡丹籽粕粉35g、40g、45g、50g、55g、60g、65g、70g、75g。
4.如权利要求1所述的一种平菇专用母种培养基，其特征在于，每升原料组分如下：
脱脂牡丹籽粕50g，琼脂20g，水定容至1L。
5.如权利要求1所述的一种平菇专用母种培养基的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)制备脱脂牡丹籽粕粉；
(2)按比例取步骤(1)制得的脱脂牡丹籽粕粉加入水及琼脂，煮沸3～5分钟，加水定容至所需体积，灭菌，即得。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，制备脂牡丹籽粕粉的步骤如下：
取脱脂牡丹籽粕，经干燥至含水量不超过5wt％，粉碎后过40目筛，制得脱脂牡丹籽粕粉。
7.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，灭菌条件如下：在温度121℃、蒸汽压力1.05kg/cm2的条件下，灭菌20分钟。
8.权利要求1所述的平菇专用母种培养基在培养平菇母种时应用。
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