CN107429239A - 伽蓝菜属中的霉菌病抗性基因 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及能够为属于伽蓝菜属(Kalanchoe)的植物提供霉菌病抗性表型或霉菌病抗性的蛋白。本发明的霉菌病抗性优选地为针对其中Oidium kalanchoeae为致病性病原体的霉菌感染的抗性。本发明还涉及编码本发明的蛋白的核酸序列或cDNA序列和基因。本发明还涉及本发明的蛋白、核酸序列和基因用于选择霉菌病抗性伽蓝菜属植物诸如Oidium kalanchoeae抗性伽蓝菜属植物的用途,并涉及包含本发明的蛋白、本发明的cDNA的mRNA形式或本发明的基因的霉菌病抗性伽蓝菜属植物,诸如Oidium kalanchoeae抗性伽蓝菜属植物。具体地,本发明涉及与SEQ ID No.1的蛋白或与其具有80%序列同一性的蛋白相比包含在伽蓝菜属植物的硫酯酶或硫酯酶样蛋白中的一个或更多个氨基酸取代、缺失或插入的蛋白,其中一个或更多个氨基酸取代、缺失或插入在伽蓝菜属植物中提供与包含SEQ ID No.1或与其具有80%序列同一性的蛋白的伽蓝菜属植物相比增强的霉菌病抗性。

Description

伽蓝菜属中的霉菌病抗性基因
描述
本发明涉及能够为属于伽蓝菜属(Kalanchoe)的植物提供霉菌病(mildew)抗性表型或霉菌病抗性的蛋白。本发明的霉菌病抗性优选地为针对其中Oidium kalanchoeae为致病性病原体的霉菌感染的抗性。本发明还涉及编码本发明的蛋白的核酸序列或cDNA序列和基因。本发明还涉及本发明的蛋白、核酸序列和基因用于选择霉菌病抗性伽蓝菜属植物诸如Oidium kalanchoeae抗性伽蓝菜属植物的用途,并涉及包含本发明的蛋白、本发明的cDNA的mRNA形式或本发明的基因的霉菌病抗性伽蓝菜属植物,诸如Oidium kalanchoeae抗性伽蓝菜属植物。
伽蓝菜属为景天科(Crassulaceae)中具有约125个种的热带的、多肉开花植物的属。已知该属仅一个种起源于美洲,56个种起源于南非和东非,且60个种起源于马达加斯加(Madagascar)。伽蓝菜属植物也在东南亚和中国被发现。
属于伽蓝菜属的已知种为Kalanchoe adelae、Kalanchoe arborescens、Kalanchoe beauverdii、贝哈伽蓝(Kalanchoe beharensis)、Kalanchoe bentii、Kalanchoe blossfeldiana、Kalanchoe bouvetii、Kalanchoe bracteata、Kalanchoecampanulata、Kalanchoe crenata、Kalanchoe crundallii、Kalanchoe daigremontiana、Kalanchoe delagoensis、Kalanchoe dinklagei、锦毛伽蓝(Kalanchoe eriophylla)、Kalanchoe farinacea、Kalanchoe fedtschenkoi、费氏伽蓝菜(Kalanchoe figuereidoi)、Kalanchoe flammea、Kalanchoe gastonis、Kalanchoe glaucescens、Kalanchoegracilipes、Kalanchoe grandidieri、Kalanchoe grandiflora、Kalanchoehildebrantii、Kalanchoe jongmansii、Kalanchoe kewensis、Kalanchoe laciniata、Kalanchoe laetivirens、Kalanchoe lateritia、Kalanchoe laxiflora、Kalanchoelinearifolia、Kalanchoe longiflora、Kalanchoe luciae、Kalanchoe macrochlamys、Kalanchoe manginii、Kalanchoe marnieriana、斑点伽蓝菜(Kalanchoe marmorata)、Kalanchoe millottii、Kalanchoe miniata、Kalanchoe nyikae、Kalanchoe obtusa、Kalanchoe orgyalis、Kalanchoe peltata、Kalanchoe petitiana、Kalanchoe pinnata、Kalanchoe porphyrocalyx、Kalanchoe prolifera、Kalanchoe pubescens、Kalanchoepumila、Kalanchoe quartiniana、Kalanchoe rhombopilosa、Kalanchoe robusta、Kalanchoe rolandi、Kalanchoe rosei、Kalanchoe rotundifolia、Kalanchoeschizophylla、Kalanchoe serrata、Kalanchoe sexangularis、Kalanchoe streptantha、Kalanchoe suarezensis、Kalanchoe synsepala、Kalanchoe synsepala f.dissecta、Kalanchoe thyrsiflora、褐斑伽蓝(Kalanchoe tomentosa)、Kalanchoe tubiflora、Kalanchoe uniflora、Kalanchoe velutina和Kalanchoe viguieri。
大多数伽蓝菜属植物为灌木或多年生草本植物,而少数为一年生植物或两年生植物。最大的植物,来自马达加斯加的贝哈伽蓝,可以达到6米,但大多数种小于1米。伽蓝菜属植物特征为通过在花瓣内表面上生长新的细胞以迫使它们向外而打开伽蓝菜属植物的花,并且通过在花瓣的外表面生长新的细胞来使花瓣闭合。
伽蓝菜属植物通常被栽培为观赏性室内植物和岩石或多肉的园艺植物。伽蓝菜属植物因其易于繁殖、低的水分需求以及远超过营养生长的通常簇生的种类繁多的花色而受欢迎。落地生根亚属(section Bryophyllum)-以前作为独立的属-包含诸如“气生植物(Airplant)”Kalanchoe pinnata的种。在这些植物中,新的个体在沿着叶的锯齿(indent)处作为小植物(还称为球芽(bulbil)或胞芽(gemmae))无性发育。这些幼小植物最终会落下并生根。在该属的种中尚未发现雄性,该属确实开花并产生种子并且通常被称为千子母(theMother of Thousands)。
与其他景天科(诸如属奇峰锦属(Tylecodon)、银波锦属(Cotyledon)和天锦章属(Adromischus))一样,一些伽蓝菜属的种包含可引起特别是食草动物(grazing animal)的心脏中毒的蟾蜍二烯羟酸内酯(bufadienolide)强心苷类。这为南非卡鲁地区(Karooregion)中许多伽蓝菜属的种的原生范围内的特殊问题,在那里导致的动物疾病被称为子叶中毒病(krimpsiekte)(萎缩病(shrinking disease))或cotyledonosis。类似的中毒事件还发生在澳大利亚。
在传统医学中,伽蓝菜属的种已用于治疗疾病(ailment),诸如传染病、风湿和炎症。伽蓝菜属提取物还具有免疫抑制作用。在特立尼达拉岛和多巴哥岛已将Kalanchoepinnata记录为用作用于高血压的传统疗法。
霉菌病本身表现为由特别地在活的植物上产生的微小菌丝(真菌丝)构成的薄的、表面的、通常发白的生长物(growth)。在园艺中,霉菌病为通常由属于白粉菌目(Erysiphales)的真菌引起的疾病。名称‘霉菌病’也可以更通常地用于意指霉菌生长。在本领域中,霉菌病也被称为白粉病(powdery mildew),并且术语霉菌病和白粉病在本文中可互换使用。
伽蓝菜属特别地易感霉菌病。尽管霉菌病通常对植物的生长无害,但其确实引起植物变得不美观且无吸引力,并由此对植物育种者造成显著的经济损失。
伽蓝菜属中的霉菌感染(mildew infection)的主要症状为在叶片、芽、茎、新梢和花上存在白色滑石粉样生长物。霉菌病真菌偏好感染幼小的嫩叶,但也会感染较老的叶片。与霉菌病相关的其他症状包括叶片黄化、叶片枯死、叶片卷曲(leaf rolling)、叶片变形和叶片早落(premature leaf drop)。感染了霉菌的伽蓝菜属通常变得发育不良(stunted)。严重的霉菌感染最终可以覆盖整个植株。预防霉菌感染可通过栽培防治方法或杀真菌剂实现。
控制伽蓝菜属中的霉菌病的基于栽培的方法和杀真菌剂二者具有缺点。例如,基于栽培的方法对于伽蓝菜属植物的商业生长和栽培是不实用的,并且杀真菌剂的缺点通常为已知的,诸如其对环境的影响以及由于通过杀真菌剂的选择压力的抗性霉菌病病原体的发展。
考虑到霉菌感染的经济影响,在伽蓝菜属育种领域中,对霉菌病抗性伽蓝菜属植物且特别地抗霉菌病病原体Oidium kalanchoeae的伽蓝菜属植物存在持续需求。在本领域中,Oidium kalanchoeae也称为Oidium 或Oidium calanchoeae。
除了其他目的之外,本发明的一个目的为满足本领域的以上需求。
除了其他目的之外,以上目的由本发明通过提供编码提供霉菌病抗性的硫酯酶或硫酯酶样蛋白的霉菌病或白粉病抗性基因来满足。
具体地,除了其他目的之外以及根据第一个方面,以上目的由本发明通过提供蛋白来满足,所述蛋白与SEQ ID No.1的蛋白或与其具有80%序列同一性的蛋白相比包含在伽蓝菜属植物的硫酯酶或硫酯酶样蛋白中的一个或更多个氨基酸取代、缺失或插入,其中一个或更多个氨基酸取代、缺失或插入在伽蓝菜属植物中提供与包含SEQ ID No.1或与其具有80%序列同一性的蛋白的伽蓝菜属植物相比增强的霉菌病抗性。
本文描述的蛋白由于为鉴定的提供霉菌病抗性且特别地对霉菌病病原体Oidiumkalanchoeae的抗性的第一蛋白,可以被称为ROK-1蛋白。
不管编码基因是纯合还是杂合存在,观察到本发明增强的霉菌病抗性,且特别地本发明的对Oidium kalanchoeae的抗性。
在本发明的上下文中,包括80%至99%的序列同一性百分比,诸如81%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%或98%序列同一性百分比,条件是相应的蛋白在伽蓝菜属植物中提供霉菌病抗性。
如本文使用的,在合适的比对之后,序列同一性指示分别跨越SEQ ID No.1或SEQID No.3的全长,相同的氨基酸或核酸的百分比。
根据本发明的该方面的一个特别优选的实施方案,本发明的蛋白包含在SEQ IDNo.1的氨基酸1至50中的一个或更多个氨基酸取代、缺失或插入。本发明人已出乎意料地发现,通过修饰SEQ ID No.1的N末端区域,特别地提供了本发明的霉菌病抗性表型,诸如对霉菌病病原体Oidium kalanchoeae的抗性。本发明优选地涉及在SEQ ID No.1的位置22处和/或位置23处的氨基酸取代,更优选地在SEQ ID No.1的位置22处和/或位置23处的氨基酸苏氨酸的取代,最优选地在SEQ ID No.1的位置22处和/或位置23处氨基酸苏氨酸被氨基酸丙氨酸的取代。
根据本发明的又另一个特别优选的实施方案,本发明的蛋白的氨基酸序列为SEQID No.2中示出的氨基酸序列。
根据最优选的实施方案,根据本发明的蛋白包含氨基酸序列基序“PATAAEST”。相比之下,不提供霉菌病抗性的蛋白包含例如氨基酸序列基序“PATTTEST”。
根据本发明的该第一方面的一个优选的实施方案,本发明的伽蓝菜属植物选自由以下组成的组:Kalanchoe adelae、Kalanchoe arborescens、Kalanchoe beauverdii、贝哈伽蓝、Kalanchoe bentii、Kalanchoe blossfeldiana、Kalanchoe bouvetii、Kalanchoebracteata、Kalanchoe campanulata、Kalanchoe crenata、Kalanchoe crundallii、Kalanchoe daigremontiana、Kalanchoe delagoensis、Kalanchoe dinklagei、锦毛伽蓝、Kalanchoe farinacea、Kalanchoe fedtschenkoi、费氏伽蓝菜、Kalanchoe flammea、Kalanchoe gastonis、Kalanchoe glaucescens、Kalanchoe gracilipes、Kalanchoegrandidieri、Kalanchoe grandiflora、Kalanchoe hildebrantii、Kalanchoejongmansii、Kalanchoe kewensis、Kalanchoe laciniata、Kalanchoe laetivirens、Kalanchoe lateritia、Kalanchoe laxiflora、Kalanchoe linearifolia、Kalanchoelongiflora、Kalanchoe luciae、Kalanchoe macrochlamys、Kalanchoe manginii、Kalanchoe marnieriana、斑点伽蓝菜、Kalanchoe millottii、Kalanchoe miniata、Kalanchoe nyikae、Kalanchoe obtusa、Kalanchoe orgyalis、Kalanchoe peltata、Kalanchoe petitiana、Kalanchoe pinnata、Kalanchoe porphyrocalyx、Kalanchoeprolifera、Kalanchoe pubescens、Kalanchoe pumila、Kalanchoe quartiniana、Kalanchoe rhombopilosa、Kalanchoe robusta、Kalanchoe rolandi、Kalanchoe rosei、Kalanchoe rotundifolia、Kalanchoe schizophylla、Kalanchoe serrata、Kalanchoesexangularis、Kalanchoe streptantha、Kalanchoe suarezensis、Kalanchoe synsepala、Kalanchoe synsepala f.dissecta、Kalanchoe thyrsiflora、褐斑伽蓝、Kalanchoetubiflora、Kalanchoe uniflora、Kalanchoe velutina和Kalanchoe viguieri;优选地为选自由以下组成的组的观赏性开花伽蓝菜属植物:K.blossfeldiana、K.laciniata、K.rotundifolia、K.aromatica、K.pubescens、K.grandiflora、K.citrina、K.ambolensis、K.faustii、K.schumacherii、K.pritwitzii、K.flammea、K.figueredoi、K.rauhii、K.obtusa、K.pumila、斑点伽蓝菜(K.marmorata)、K.porphyrocalux、K.jongmansii、K.pinnata、K.diagremontiana、K.gracilipes、K.campanulata、K.latisepela、K.coccinea、K.fedtschenkoi、K.tubiflora、K.decumbens、K.manginii、K.orgyalis、K.crenata、褐斑伽蓝(K.tomentosa)及其杂交种。
根据第二方面,本发明涉及编码本发明的蛋白的核酸序列,优选地本发明的核酸序列具有在SEQ ID No.3的位置64处和/或位置67处的核酸取代,诸如A被G取代,更优选地本发明的核酸序列具有如在SEQ ID No.4或SEQ ID No.5或SEQ ID No.6中描绘的序列。
根据第三方面,本发明涉及能够被转录为本发明的核酸序列和本发明的蛋白的基因。因此,本发明包括能够在适当条件下作为用于转录mRNA的模板的基因,该mRNA随后被翻译为本发明的蛋白序列。
根据第四方面,本发明涉及本发明的蛋白、核酸序列或基因用于选择霉菌病抗性伽蓝菜属植物的用途。此类选择可以包括通过例如杂交、PCR、ELISA、限制性酶切分析或RNA/DNA印迹鉴定(优选地在发育早期阶段)霉菌病抗性伽蓝菜属植物,诸如Oidiumkalanchoeae抗性伽蓝菜属植物,由此促进现有和新的伽蓝菜属植物的育种过程。
本发明的用途优选地用于选择霉菌病抗性伽蓝菜属植物,所述伽蓝菜属植物选自由以下组成的组:Kalanchoe adelae、Kalanchoe arborescens、Kalanchoe beauverdii、贝哈伽蓝、Kalanchoe bentii、Kalanchoe blossfeldiana、Kalanchoe bouvetii、Kalanchoebracteata、Kalanchoe campanulata、Kalanchoe crenata、Kalanchoe crundallii、Kalanchoe daigremontiana、Kalanchoe delagoensis、Kalanchoe dinklagei、锦毛伽蓝、Kalanchoe farinacea、Kalanchoe fedtschenkoi、费氏伽蓝菜、Kalanchoe flammea、Kalanchoe gastonis、Kalanchoe glaucescens、Kalanchoe gracilipes、Kalanchoegrandidieri、Kalanchoe grandiflora、Kalanchoe hildebrantii、Kalanchoejongmansii、Kalanchoe kewensis、Kalanchoe laciniata、Kalanchoe laetivirens、Kalanchoe lateritia、Kalanchoe laxiflora、Kalanchoe linearifolia、Kalanchoelongiflora、Kalanchoe luciae、Kalanchoe macrochlamys、Kalanchoe manginii、Kalanchoe marnieriana、斑点伽蓝菜、Kalanchoe millottii、Kalanchoe miniata、Kalanchoe nyikae、Kalanchoe obtusa、Kalanchoe orgyalis、Kalanchoe peltata、Kalanchoe petitiana、Kalanchoe pinnata、Kalanchoe porphyrocalyx、Kalanchoeprolifera、Kalanchoe pubescens、Kalanchoe pumila、Kalanchoe quartiniana、Kalanchoe rhombopilosa、Kalanchoe robusta、Kalanchoe rolandi、Kalanchoe rosei、Kalanchoe rotundifolia、Kalanchoe schizophylla、Kalanchoe serrata、Kalanchoesexangularis、Kalanchoe streptantha、Kalanchoe suarezensis、Kalanchoe synsepala、Kalanchoe synsepala f.dissecta、Kalanchoe thyrsiflora、褐斑伽蓝、Kalanchoetubiflora、Kalanchoe uniflora、Kalanchoe velutina和Kalanchoe viguieri;更优选地用于选择选自由以下组成的组的观赏性开花伽蓝菜属植物:K.blossfeldiana、K.laciniata、K.rotundifolia、K.aromatica、K.pubescens、K.grandiflora、K.citrina、K.ambolensis、K.faustii、K.schumacherii、K.pritwitzii、K.flammea、K.figueredoi、K.rauhii、K.obtusa、K.pumila、斑点伽蓝菜、K.porphyrocalux、K.jongmansii、K.pinnata、K.diagremontiana、K.gracilipes、K.campanulata、K.latisepela、K.coccinea、K.fedtschenkoi、K.tubiflora、K.decumbens、K.manginii、K.orgyalis、K.crenata、褐斑伽蓝及其杂交种。
根据第五方面,本发明涉及植物、原生质体或植物部分,所述植物、原生质体或植物部分包含本发明的蛋白、本发明的核酸序列或本发明的基因。本发明的植物、原生质体或植物部分优选地选自或获自选自由以下组成的组的植物:Kalanchoe adelae、Kalanchoearborescens、Kalanchoe beauverdii、贝哈伽蓝、Kalanchoe bentii、Kalanchoeblossfeldiana、Kalanchoe bouvetii、Kalanchoe bracteata、Kalanchoe campanulata、Kalanchoe crenata、Kalanchoe crundallii、Kalanchoe daigremontiana、Kalanchoedelagoensis、Kalanchoe dinklagei、锦毛伽蓝、Kalanchoe farinacea、Kalanchoefedtschenkoi、费氏伽蓝菜、Kalanchoe flammea、Kalanchoe gastonis、Kalanchoeglaucescens、Kalanchoe gracilipes、Kalanchoe grandidieri、Kalanchoe grandiflora、Kalanchoe hildebrantii、Kalanchoe jongmansii、Kalanchoe kewensis、Kalanchoelaciniata、Kalanchoe laetivirens、Kalanchoe lateritia、Kalanchoe laxiflora、Kalanchoe linearifolia、Kalanchoe longiflora、Kalanchoe luciae、Kalanchoemacrochlamys、Kalanchoe manginii、Kalanchoe marnieriana、斑点伽蓝菜、Kalanchoemillottii、Kalanchoe miniata、Kalanchoe nyikae、Kalanchoe obtusa、Kalanchoeorgyalis、Kalanchoe peltata、Kalanchoe petitiana、Kalanchoe pinnata、Kalanchoeporphyrocalyx、Kalanchoe prolifera、Kalanchoe pubescens、Kalanchoe pumila、Kalanchoe quartiniana、Kalanchoe rhombopilosa、Kalanchoe robusta、Kalanchoerolandi、Kalanchoe rosei、Kalanchoe rotundifolia、Kalanchoe schizophylla、Kalanchoe serrata、Kalanchoe sexangularis、Kalanchoe streptantha、Kalanchoesuarezensis、Kalanchoe synsepala、Kalanchoe synsepala f.dissecta、Kalanchoethyrsiflora、褐斑伽蓝、Kalanchoe tubiflora、Kalanchoe uniflora、Kalanchoevelutina和Kalanchoe viguieri;优选地选自或获自选自由以下组成的组的观赏性开花伽蓝菜属植物:K.blossfeldiana、K.laciniata、K.rotundifolia、K.aromatica、K.pubescens、K.grandiflora、K.citrina、K.ambolensis、K.faustii、K.schumacherii、K.pritwitzii、K.flammea、K.figueredoi、K.rauhii、K.obtusa、K.pumila、斑点伽蓝菜、K.porphyrocalux、K.jongmansii、K.pinnata、K.diagremontiana、K.gracilipes、K.campanulata、K.latisepela、K.coccinea、K.fedtschenkoi、K.tubiflora、K.decumbens、K.manginii、K.orgyalis、K.crenata、褐斑伽蓝及其杂交种。
本发明将在下文实施例中进一步详述本发明特别优选的实施方案。在实施例中,对附图进行参考,其中:
图1:示出了根据本发明提供霉菌病抗性的硫酯酶蛋白(上部序列)和SEQ ID No.1的硫酯酶蛋白(底部序列)的比对。两个蛋白之间的共有序列在中间一行显示;
图2:示出了与在SEQ ID No.3的位置64(SNP_14)处和位置67(SNP_17)处发现的呈纯合和杂合形式的核苷酸序列相关的本发明霉菌病抗性的箱线图。对于位置67,示出了非编码核苷酸,即C/C;T/C和T/T,分别代替编码核苷酸G/G;A/G;A/A。
实施例
将Oidium kalanchoeae霉菌病抗性Kalanchoe blossfeldiana亲本植株(其代表性种子于2015年3月2日根据保藏号NCIMB 42379保藏在NCIMB Ferguson Building,Craibstone Estate,Bucksburn,Aberdeen AB21 9YA,United Kingdom)与霉菌病易感Kalanchoe blossfeldiana植株杂交并获得分离后代。通过用Oidium kalanchoeae感染约4周龄的植物来测定后代的Oidium kalanchoeae抗性。随后,将受感染的植物在以下条件下生长约4周:
温度:昼20℃/夜18℃;
相对湿度;昼60%/夜80%;
昼长:20个小时(具有在1000与2000lux之间的强度的人工光照)。
然后,以1至9的规格对植物的霉菌病易感性/抗性进行视觉评分,其中1表示完全地霉菌病易感,且9表示完全地霉菌病抗性(无可视感染)。
后代的分析表明,观察到的霉菌病抗性表型与编码硫酯酶蛋白或硫酯酶样蛋白的基因的编码序列的位置64和位置67处的两个核苷酸取代相关。如图1中描绘的,两个核苷酸取代导致硫酯酶蛋白或硫酯酶样蛋白的N-末端区域中的氨基酸取代。
将以上分离群体中的霉菌病表型的分析归纳于下文表1和图2中。
表1:本发明的霉菌病抗性表型的分离群体的分析,其中1表示最小霉菌病抗性或不存在霉菌病抗性,且9表示最大霉菌病抗性。
序列表
<110> 菲德斯有限公司
<120> 伽蓝菜属中的霉菌病抗性基因
<130> 4/2SX76/7
<150> EP15157519.8
<151> 2015-03-04
<160> 8
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 197
<212> PRT
<213> Kalanchoe blossfeldiana
<400> 1
Met Arg Ser Gly Thr Ile Cys Val Ile Asn Gly Lys Cys Gly Ser Ile
1 5 10 15
His Arg Pro Ala Thr Thr Thr Glu Ser Thr Ser Lys Lys Ser Asn Thr
20 25 30
Pro Leu Thr His Arg Ser Asn Ser Asp Arg Ser Leu Met Asp Leu Glu
35 40 45
Ala Val Lys Gln Leu Leu Glu Lys Gly Asp Ser Glu Ser Gln Gln Ala
50 55 60
Ile Asp Ser Met Arg Ser Arg Phe Phe Glu Pro Phe Met Met Ala Gly
65 70 75 80
Leu Lys Val Glu Arg Val Glu Pro Gly Arg Leu Ile Cys Ser Met Lys
85 90 95
Val Pro Ala Arg Leu Leu Asn Ala Gly Gly Phe Leu His Gly Gly Ala
100 105 110
Thr Ala Thr Leu Val Asp Leu Val Gly Ser Ala Ala Ile Phe Thr Ala
115 120 125
Gly Ala Thr Val Thr Gly Val Ser Val Glu Ile Ser Val Ser Tyr Leu
130 135 140
Asp Ala Ala Phe Glu Gly Glu Glu Val Glu Ile Glu Ala Arg Val Leu
145 150 155 160
Arg Val Gly Lys Ala Val Gly Val Val Ser Val Glu Ile Arg Lys Lys
165 170 175
Gly Ser Gly Lys Ile Val Ala Gln Gly Arg His Thr Lys Tyr Leu Ala
180 185 190
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195
<210> 2
<211> 197
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<213> Kalanchoe blossfeldiana
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100 105 110
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gaccggtctc tgatggatct ggaagcagtg aagcagttgc tggagaaggg agacagcgaa 180
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agggtgggga aggcggtggg ggtcgtcagc gttgagattc ggaagaaggg ragtgggaag 540
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1 5

Claims (18)

1.蛋白,所述蛋白与SEQ ID No.1的蛋白或与其具有80%序列同一性的蛋白相比包含在伽蓝菜属(Kalanchoe)植物的硫酯酶或硫酯酶样蛋白中的一个或更多个氨基酸取代、缺失或插入,所述一个或更多个氨基酸取代、缺失或插入在伽蓝菜属植物中提供与包含SEQID No.1或与其具有80%序列同一性的蛋白的伽蓝菜属植物相比增强的霉菌病抗性。
2.根据权利要求1所述的蛋白,其中所述一个或更多个氨基酸取代、缺失或插入包含在SEQ ID No.1的氨基酸1至50中。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的蛋白,其中所述一个或更多个氨基酸取代为在SEQ ID No.1的位置22和/或位置23处的取代。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的蛋白,其中所述一个或更多个氨基酸取代为在SEQ ID No.1的位置22处和/或位置23处的氨基酸苏氨酸的氨基酸取代。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的蛋白,其中所述一个或更多个氨基酸取代为在SEQ ID No.1的位置22处和/或位置23处的氨基酸苏氨酸至丙氨酸的氨基酸取代。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的蛋白,其中所述蛋白为SEQ ID No.2的蛋白。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的蛋白,所述蛋白包含氨基酸序列基序“PATAAEST”。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的蛋白,其中所述伽蓝菜属植物选自由以下组成的组:Kalanchoe adelae、Kalanchoe arborescens、Kalanchoe beauverdii、贝哈伽蓝(Kalanchoe beharensis)、Kalanchoe bentii、Kalanchoe blossfeldiana、Kalanchoebouvetii、Kalanchoe bracteata、Kalanchoe campanulata、Kalanchoe crenata、Kalanchoe crundallii、Kalanchoe daigremontiana、Kalanchoe delagoensis、Kalanchoedinklagei、锦毛伽蓝(Kalanchoe eriophylla)、Kalanchoe farinacea、Kalanchoefedtschenkoi、费氏伽蓝菜(Kalanchoe figuereidoi)、Kalanchoe flammea、Kalanchoegastonis、Kalanchoe glaucescens、Kalanchoe gracilipes、Kalanchoe grandidieri、Kalanchoe grandiflora、Kalanchoe hildebrantii、Kalanchoe jongmansii、Kalanchoekewensis、Kalanchoe laciniata、Kalanchoe laetivirens、Kalanchoe lateritia、Kalanchoe laxiflora、Kalanchoe linearifolia、Kalanchoe longiflora、Kalanchoeluciae、Kalanchoe macrochlamys、Kalanchoe manginii、Kalanchoe marnieriana、斑点伽蓝菜(Kalanchoe marmorata)、Kalanchoe millottii、Kalanchoe miniata、Kalanchoenyikae、Kalanchoe obtusa、Kalanchoe orgyalis、Kalanchoe peltata、Kalanchoepetitiana、Kalanchoe pinnata、Kalanchoe porphyrocalyx、Kalanchoe prolifera、Kalanchoe pubescens、Kalanchoe pumila、Kalanchoe quartiniana、Kalanchoerhombopilosa、Kalanchoe robusta、Kalanchoe rolandi、Kalanchoe rosei、Kalanchoerotundifolia、Kalanchoe schizophylla、Kalanchoe serrata、Kalanchoe sexangularis、Kalanchoestreptantha、Kalanchoe suarezensis、Kalanchoe synsepala、Kalanchoesynsepala f.dissecta、Kalanchoe thyrsiflora、褐斑伽蓝(Kalanchoe tomentosa)、Kalanchoe tubiflora、Kalanchoe uniflora、Kalanchoe velutina和Kalanchoeviguieri;优选地为选自由以下组成的组的观赏性开花伽蓝菜属植物:K.blossfeldiana、K.laciniata、K.rotundifolia、K.aromatica、K.pubescens、K.grandiflora、K.citrina、K.ambolensis、K.faustii、K.schumacherii、K.pritwitzii、K.flammea、K.figueredoi、K.rauhii、K.obtusa、K.pumila、斑点伽蓝菜(K.marmorata)、K.porphyrocalux、K.jongmansii、K.pinnata、K.diagremontiana、K.gracilipes、K.campanulata、K.latisepela、K.coccinea、K.fedtschenkoi、K.tubiflora、K.decumbens、K.manginii、K.orgyalis、K.crenata、褐斑伽蓝(K.tomentosa)及其杂交种。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的蛋白,其中所述霉菌病抗性为针对霉菌病病原体Oidium kalanchoeae的抗性。
10.核酸,所述核酸编码根据权利要求1至9中任一项所述的蛋白。
11.根据权利要求10所述的核酸,所述核酸具有在SEQ ID No.3的位置64处和/或位置67处的核酸取代。
12.根据权利要求10或权利要求11所述的核酸,所述核酸为SEQ ID No.4或SEQ IDNo.5或SEQ ID No.6的核酸序列。
13.基因,所述基因能够被转录为根据权利要求10至12中任一项所述的核酸序列或编码根据权利要求1至9中任一项所述的蛋白。
14.根据权利要求1至9中任一项所述的蛋白或根据权利要求10至12中任一项所述的核酸序列或根据权利要求13所述的基因用于选择霉菌病抗性伽蓝菜属植物,优选地Oidiumkalanchoeae抗性伽蓝菜属植物的用途。
15.根据权利要求14所述的用途,其中所述伽蓝菜属植物选自由以下组成的组:Kalanchoe adelae、Kalanchoe arborescens、Kalanchoe beauverdii、贝哈伽蓝、Kalanchoe bentii、Kalanchoe blossfeldiana、Kalanchoe bouvetii、Kalanchoebracteata、Kalanchoe campanulata、Kalanchoe crenata、Kalanchoe crundallii、Kalanchoe daigremontiana、Kalanchoe delagoensis、Kalanchoe dinklagei、锦毛伽蓝、Kalanchoe farinacea、Kalanchoe fedtschenkoi、费氏伽蓝菜、Kalanchoe flammea、Kalanchoe gastonis、Kalanchoe glaucescens、Kalanchoe gracilipes、Kalanchoegrandidieri、Kalanchoe grandiflora、Kalanchoe hildebrantii、Kalanchoejongmansii、Kalanchoe kewensis、Kalanchoe laciniata、Kalanchoe laetivirens、Kalanchoe lateritia、Kalanchoe laxiflora、Kalanchoe linearifolia、Kalanchoelongiflora、Kalanchoe luciae、Kalanchoe macrochlamys、Kalanchoe manginii、Kalanchoe marnieriana、斑点伽蓝菜、Kalanchoe millottii、Kalanchoe miniata、Kalanchoe nyikae、Kalanchoe obtusa、Kalanchoe orgyalis、Kalanchoe peltata、Kalanchoe petitiana、Kalanchoe pinnata、Kalanchoe porphyrocalyx、Kalanchoeprolifera、Kalanchoe pubescens、Kalanchoe pumila、Kalanchoe quartiniana、Kalanchoe rhombopilosa、Kalanchoe robusta、Kalanchoe rolandi、Kalanchoe rosei、Kalanchoe rotundifolia、Kalanchoe schizophylla、Kalanchoe serrata、Kalanchoesexangularis、Kalanchoe streptantha、Kalanchoe suarezensis、Kalanchoe synsepala、Kalanchoe synsepala f.dissecta、Kalanchoe thyrsiflora、褐斑伽蓝、Kalanchoetubiflora、Kalanchoe uniflora、Kalanchoe velutina和Kalanchoe viguieri;优选地为选自由以下组成的组的观赏性开花伽蓝菜属植物:K.blossfeldiana、K.laciniata、K.rotundifolia、K.aromatica、K.pubescens、K.grandiflora、K.citrina、K.ambolensis、K.faustii、K.schumacherii、K.pritwitzii、K.flammea、K.figueredoi、K.rauhii、K.obtusa、K.pumila、斑点伽蓝菜、K.porphyrocalux、K.jongmansii、K.pinnata、K.diagremontiana、K.gracilipes、K.campanulata、K.latisepela、K.coccinea、K.fedtschenkoi、K.tubiflora、K.decumbens、K.manginii、K.orgyalis、K.crenata、褐斑伽蓝及其杂交种。
16.植物、原生质体或植物部分,所述植物、原生质体或植物部分包含根据权利要求1至9中任一项所述的蛋白、根据权利要求10至12中任一项所述的核酸序列或根据权利要求13所述的基因,其中所述植物或者来源于所述原生质体或植物部分的植物抗霉菌病,优选地抗霉菌病病原体Oidium kalanchoeae。
17.根据权利要求16所述的植物、原生质体或植物部分,其中所述植物、原生质体或植物部分选自由以下组成的组:Kalanchoe adelae、Kalanchoe arborescens、Kalanchoebeauverdii、贝哈伽蓝、Kalanchoe bentii、Kalanchoe blossfeldiana、Kalanchoebouvetii、Kalanchoe bracteata、Kalanchoe campanulata、Kalanchoe crenata、Kalanchoe crundallii、Kalanchoe daigremontiana、Kalanchoe delagoensis、Kalanchoedinklagei、锦毛伽蓝、Kalanchoe farinacea、Kalanchoe fedtschenkoi、费氏伽蓝菜、Kalanchoe flammea、Kalanchoe gastonis、Kalanchoe glaucescens、Kalanchoegracilipes、Kalanchoe grandidieri、Kalanchoe grandiflora、Kalanchoehildebrantii、Kalanchoe jongmansii、Kalanchoe kewensis、Kalanchoe laciniata、Kalanchoe laetivirens、Kalanchoe lateritia、Kalanchoe laxiflora、Kalanchoelinearifolia、Kalanchoe longiflora、Kalanchoe luciae、Kalanchoe macrochlamys、Kalanchoe manginii、Kalanchoe marnieriana、斑点伽蓝菜、Kalanchoe millottii、Kalanchoe miniata、Kalanchoe nyikae、Kalanchoe obtusa、Kalanchoe orgyalis、Kalanchoe peltata、Kalanchoe petitiana、Kalanchoe pinnata、Kalanchoeporphyrocalyx、Kalanchoe prolifera、Kalanchoe pubescens、Kalanchoe pumila、Kalanchoe quartiniana、Kalanchoe rhombopilosa、Kalanchoe robusta、Kalanchoerolandi、Kalanchoe rosei、Kalanchoe rotundifolia、Kalanchoe schizophylla、Kalanchoe serrata、Kalanchoe sexangularis、Kalanchoe streptantha、Kalanchoesuarezensis、Kalanchoe synsepala、Kalanchoe synsepala f.dissecta、Kalanchoethyrsiflora、褐斑伽蓝、Kalanchoe tubiflora、Kalanchoe uniflora、Kalanchoevelutina和Kalanchoe viguieri;优选地为选自由以下组成的组的观赏性开花伽蓝菜属植物:K.blossfeldiana、K.laciniata、K.rotundifolia、K.aromatica、K.pubescens、K.grandiflora、K.citrina、K.ambolensis、K.faustii、K.schumacherii、K.pritwitzii、K.flammea、K.figueredoi、K.rauhii、K.obtusa、K.pumila、斑点伽蓝菜、K.porphyrocalux、K.jongmansii、K.pinnata、K.diagremontiana、K.gracilipes、K.campanulata、K.latisepela、K.coccinea、K.fedtschenkoi、K.tubiflora、K.decumbens、K.manginii、K.orgyalis、K.crenata、褐斑伽蓝及其杂交种。
18.根据权利要求1至9中任一项所述的蛋白或根据权利要求10至12中任一项所述的核酸序列或根据权利要求13所述的基因用于开发指示霉菌病抗性或与霉菌病抗性相关的分子标志物的用途,优选地所述抗性为针对病原体Oidium kalanchoeae的抗性。
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