CN107418931A - 一种提高活率的细胞培养液 - Google Patents

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Abstract

一种提高活率的细胞培养液，它是以DMEM为基础培养液，同时再加入附加剂；所述附加剂包括丙二醇、胎牛血清、氯化钠、葡萄糖、氯化钾、甲硫氨酸、链霉素、碳酸钠、海藻酸钠、山梨醇、甘油、灭菌注射用水。本发明细胞培养液成分明确，可实现细胞快速扩增，配方方法简单，细胞贴壁速度快，形态好，细胞增殖迅速，活力旺盛，细胞存活率高，运输方便，使用方便，配置原材料简单易得，适合市场推广应用。

Description

一种提高活率的细胞培养液
技术领域
本发明属生物技术领域，具体涉及一种提高活率的细胞培养液。
背景技术
细胞培养是人工模拟细胞在生物体内生长的营养环境，是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。当为粉剂时，倾向性的称为培养基，将粉剂配制成液体后，多称为培养液，培养液中常常补加血清、抗生素等成分。
天然细胞培养基是人们早期采用的细胞培养基，直接取自于动物组织提取液或体液，如血浆凝块、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。虽营养价值高，但成分复杂，差异大、不稳定，重现性较差，同时来源也受到各种因素的限制。由于天然培养基的确切成分无法完全解析，导致重复性差，批间差异大，产品质量不稳定。目前市场上用于细胞培养的主要为各种合成培养基，即通过人为地加入一些营养物质(有机的和无机的)制备的合成培养基。
合成细胞培养基是用化学成分明确的试剂配制的培养基，组分稳定，主要包括糖类、必需氨基酸、维生素、无机盐类等。自1950年199细胞培养基问世以来，合成细胞培养基发展至今已有几十种，除了沿用半个世纪的基础合成细胞培养基之外，近年来还出现了营养成分更加丰富的低血清细胞培养基。
但目前市场上的培养基或培养液，均不同程度的还存在细胞成活率不够理想，增殖不够立项，成分复杂，培养液pH变化较大而影响细胞存活率，价格昂贵，不利于广泛应用的推广。
发明内容
本发明的目的在于提供一种提高活率的细胞培养液。
本发明的目的是通过如下技术措施实现的：
一种提高活率的细胞培养液，其特征在于，它是以DMEM为基础培养液，同时再加入附加剂；所述附加剂包括丙二醇、胎牛血清、氯化钠、葡萄糖、氯化钾、甲硫氨酸、链霉素、碳酸钠、海藻酸钠、山梨醇、甘油、灭菌注射用水。
进一步，一种提高活率的细胞培养液，其特征在于，所述细胞培养液包括下列重量配比的物质：DMEM 10～15份、丙二醇5～9份、胎牛血清3～8份、氯化钠8～12份、葡萄糖6～9份、氯化钾2～6份、甲硫氨酸6～11份、链霉素3～6份、碳酸钠7～12份、海藻酸钠2～6份、山梨醇1～5份、甘油3～8份、灭菌注射用水900～1500份。
进一步，一种提高活率的细胞培养液，其特征在于，所述培养液还需加入pH调节剂调节培养液的pH为6.8～7.2，所述链霉素为每份含链霉素10mg。
进一步，一种提高活率的细胞培养液，其特征在于，所述pH调节剂为0.1mol/L的磷酸溶液。
进一步，一种提高活率的细胞培养液，其特征在于，所述细胞培养液包括下列重量配比的物质：DMEM 12份、丙二醇8份、胎牛血清6份、氯化钠9份、葡萄糖7份、氯化钾3份、甲硫氨酸8份、链霉素5份、碳酸钠10份、海藻酸钠5份、山梨醇3份、甘油5份、灭菌注射用水1100份。
本发明具有如下的有益效果：
本发明细胞培养液成分明确，可实现细胞快速扩增，配方方法简单，细胞贴壁速度快，形态好，细胞增殖迅速，活力旺盛，细胞存活率高，运输方便，使用方便，配置原材料简单易得，适合市场推广应用。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行具体的描述，有必要在此指出的是以下实施例只用于对本发明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。
实施例1
一种提高活率的细胞培养液包括以下配比的各组分：
名称 用量
DMEM 12份
丙二醇 8份
胎牛血清 6份
氯化钠 9份
葡萄糖 7份
氯化钾 3份
甲硫氨酸 8份
链霉素 5份
碳酸钠 10份
海藻酸钠 5份
山梨醇 3份
甘油 5份
灭菌注射用水 1100份
制备方法：称取或量取配方量的物质，置于适宜容器中，搅拌10～15分钟使溶解，转速60～80转/分，溶解后，加0.1mol/L磷酸溶液调节溶液pH为7.0，用0.45微米的微孔滤膜抽滤，收集滤液，保存即得。
实验一：细胞存活率实验：
取实施例1制得的细胞培养液，将NK细胞接种于培养液中，在温度为37℃、5％二氧化碳饱和的培养箱中培养4天，每隔1天补加上述细胞培养液，记录观察细胞生长情况，实验结果表明，NK细胞由贴壁状态转为悬浮状态的少，对细胞的维持能力较强，细胞存活率较高。
实施例2
一种提高活率的细胞培养液包括以下配比的各组分：
名称 用量
DMEM 10份
丙二醇 5份
胎牛血清 3份
氯化钠 8份
葡萄糖 6份
氯化钾 2份
甲硫氨酸 6份
链霉素 3份
碳酸钠 7份
海藻酸钠 2份
山梨醇 1份
甘油 3份
灭菌注射用水 900份
制备方法：称取或量取配方量的物质，置于适宜容器中，搅拌10～15分钟使溶解，转速60～80转/分，溶解后，加0.1mol/L磷酸溶液调节溶液pH为6.8，用0.45微米的微孔滤膜抽滤，收集滤液，保存即得。
按实施例1的实验方法进行细胞存活率实验，实验结果表明，NK细胞由贴壁状态转为悬浮状态的少，对细胞的维持能力较强，细胞存活率较高。
实施例3
一种提高活率的细胞培养液包括以下配比的各组分：
名称 用量
DMEM 15份
丙二醇 9份
胎牛血清 8份
氯化钠 12份
葡萄糖 9份
氯化钾 6份
甲硫氨酸 11份
链霉素 6份
碳酸钠 12份
海藻酸钠 6份
山梨醇 5份
甘油 8份
灭菌注射用水 1300份
制备方法：称取或量取配方量的物质，置于适宜容器中，搅拌10～15分钟使溶解，转速60～80转/分，溶解后，加0.1mol/L磷酸溶液调节溶液pH为7.2，用0.45微米的微孔滤膜抽滤，收集滤液，保存即得。
按实施例1的实验方法进行细胞存活率实验，实验结果表明，NK细胞由贴壁状态转为悬浮状态的少，对细胞的维持能力较强，细胞存活率较高。

Claims (5)

1.一种提高活率的细胞培养液，其特征在于，它是以DMEM为基础培养液，同时再加入附加剂；所述附加剂包括丙二醇、胎牛血清、氯化钠、葡萄糖、氯化钾、甲硫氨酸、链霉素、碳酸钠、海藻酸钠、山梨醇、甘油、灭菌注射用水。
2.如权利要求1所述的一种提高活率的细胞培养液，其特征在于，所述细胞培养液包括下列重量配比的物质：DMEM 10~15份、丙二醇5~9份、胎牛血清3~8份、氯化钠8~12份、葡萄糖6~9份、氯化钾2~6份、甲硫氨酸6~11份、链霉素3~6份、碳酸钠7~12份、海藻酸钠2~6份、山梨醇1~5份、甘油3~8份、灭菌注射用水900~1500份。
3.如权利要求1或2所述的一种提高活率的细胞培养液，其特征在于，所述培养液还需加入pH调节剂调节培养液的pH为6.8~7.2，所述链霉素为每份含链霉素10mg。
4.如权利要求3所述的一种提高活率的细胞培养液，其特征在于，所述pH调节剂为0.1mol/L的磷酸溶液。
5.如权利要求4所述的一种提高活率的细胞培养液，其特征在于，所述细胞培养液包括下列重量配比的物质：DMEM 12份、丙二醇8份、胎牛血清6份、氯化钠9份、葡萄糖7份、氯化钾3份、甲硫氨酸8份、链霉素5份、碳酸钠10份、海藻酸钠5份、山梨醇3份、甘油5份、灭菌注射用水1100份。
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