CN107384809A - 一株灵芝菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一株灵芝菌株,保藏编号CGMCC No.3982,该菌种采用菌丝体作为诱变材料,同时使得到的菌种菌丝体产量高,同时适合灵芝液体发酵工程技术,发酵产物主要营养及有效药物成分含量高,其中灵芝多糖16%以上、灵芝有机锗5.6~5.8%,含C在28以下的萜烯类化合物占5.5~5.6%,小分子蛋白(LZ‑8)占16.2~16.6%,腺苷3.4~3.6%,甘露醇4.5~4.6%,均高于现有野生灵芝菌的灵芝多糖7.5%、灵芝有机锗1.3%,含C在28以下的萜烯类化合物占2.1%,小分子蛋白(LZ‑8)占6.2%,腺苷0.5%,甘露醇1.6%的含量实现灵芝制品的规模化生产。

Description

一株灵芝菌及其应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域,具体涉及一株灵芝菌种及其应用。
背景技术
灵芝隶属担子菌纲、多孔菌目、多孔菌科、灵芝属,是一种药用价值很高的名贵真菌,含有多种药用活性成分,如灵芝多糖、灵芝多肽、三萜类、16种氨基酸(其中含有七种人体必需氨基酸)、蛋白质、甾类、甘露醇、香豆精苷、生物碱、有机酸(主含延胡索酸),以及微量元素Ge、P、Fe、Ca、Mn、Zn、等。在抗肿瘤、保肝解毒、防治心血管疾病、防治高血脂、防治中风、抗衰老、抗神经衰弱的各个方面都有明显的医疗功效。从自然界采集的野生灵芝菌种菌丝体产量低,在沉没发酵过程中菌丝体产量低,发酵产物主要营养成分含量少,不能满足工业化大规模生产灵芝制品对菌种的特殊要求。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的在于提供一株灵芝菌种,该菌种采用菌丝体作为诱变材料,同时使得到的菌种菌丝体产量高,同时适合灵芝沉没发酵工程技术,实现灵芝制品的规模化生产。为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
本发明提供了一株灵芝菌株,保藏编号为CGMCCNo.3982。
本发明还提供了一种采用上述灵芝菌株液体发酵生产方法,包括以下步骤:
1)将灵芝菌株接种到马铃薯培养基中活化,得菌丝体;
2)将所述步骤1)得到的菌丝体接种到马铃薯培养液中培养,得菌悬液;
3)将所述步骤2)得到的菌悬液接种到发酵培养液中发酵,得液体发酵产物;
所述发酵培养液包括以下组分:(NH4)2HPO4 0.75~0.85g/L、KH2PO4 0.45~0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.015~0.055g/L、NaCl 0.9~1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.025~0.035g/L、蔗糖0.25~0.35g/L、葡萄糖0.9~1.1g/L、蚕蛹粉0.18~2.2g/L和余量的水。
优选的,所述步骤1)中马铃薯培养基包括(NH4)2HPO4 0.75~0.85g/L、KH2PO4 0.45~0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.015~0.055g/L、NaCl 0.9~1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.025~0.035g/L、蔗糖0.25~0.35g/L、葡萄糖0.9~1.1g/L、蚕蛹粉1.8~2.2g/L、琼脂1.6~2g/L和余量的水。
优选的,所述步骤1)活化的条件为:温度24~26℃,时间110~130h。
优选的,所述步骤2)中马铃薯培养液包括:(NH4)2HPO4 0.75~0.85g/L、KH2PO40.45~0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.015~0.055g/L、NaCl 0.9~1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.025~0.035g/L、蔗糖0.25~0.35g/L、葡萄糖0.9~1.1g/L、蚕蛹粉1.8~2.2g/L、梅树下的土壤0.45~0.55g/L、梅树叶和梅树枝9~11g/L和余量的水。
优选的,所述步骤2)培养的条件为:温度24~35℃,时间5~7d,摇床转速180~220r/min。
优选的,所述步骤3)发酵条件为:温度26~30℃,时间5~7d,搅拌速度170~190r/min。
本发明还提供了一种含有上述技术所述发酵生产方法得到的液体发酵产物。
本发明还提供了一种含有上述技术方案所述液体发酵产物在预防或治疗微生物感染和/或寄生虫寄生的药品中的应用。
本发明还提供了一种含有上述技术方案所述液体发酵产物在制备保健品中的应用。
本发明提供了一株灵芝菌,保藏编号为CGMCCNo.3982,本申请提供的灵芝菌株遗传性状稳定,菌丝体产量高,本申请得到的菌丝体重量在12g左右,较野生的原始灵芝菌丝体的产量提高了80~120倍。
进一步的,本申请采用上述灵芝菌株进行液体发酵生产,液体发酵产物主要营养及有效药物成分含量高,按质量百分比计,其中灵芝多糖16%以上、灵芝有机锗5.6~5.8%,含C在28以下的萜烯类化合物占5.5~5.6%,小分子蛋白(LZ-8)占16.2~16.6%,腺苷3.4~3.6%,甘露醇4.5~4.6%,均高于现有野生灵芝菌丝体的灵芝多糖7.5%、灵芝有机锗1.3%,含C在28以下的萜烯类化合物占2.1%,小分子蛋白(LZ-8)占6.2%,腺苷0.5%,甘露醇1.6%的含量。
生物保藏说明
灵芝(Ganoderma lucidum),保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物所,保藏机构简称:CGMCC,保藏日期为2010年7月2日生物保藏编号为CGMCC No.3982,菌株编号:G2。
具体实施方式
本发明提供了一株灵芝菌株,保藏编号为CGMCCNo.3982。所述菌株保藏在国家微生物保藏管理中心。
本发明还提供了一种采用上述灵芝菌株液体发酵生产方法,包括以下步骤:
1)将保藏编号为CGMCCNo.3982的灵芝菌株接种到马铃薯培养基中活化,得菌丝体;
2)将所述步骤1)得到的菌丝体接种到马铃薯培养液中培养,得菌悬液;
3)将所述步骤2)得到的菌悬液接种到发酵培养液中发酵,得液体发酵产物;
所述发酵培养液包括以下组分:(NH4)2HPO4 0.75~0.85g/L、KH2PO4 0.45~0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.015~0.055g/L、NaCl 0.9~1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.025~0.035g/L、蔗糖0.25~0.35g/L、葡萄糖0.9~1.1g/L、蚕蛹粉1.8~2.2g/L和余量的水。
在本发明中,将灵芝菌株接种到马铃薯培养基中活化,得菌丝体。优选的,所述马铃薯培养基为马铃薯斜面培养基。优选的,所述接种的接种量为10%~15%,更优选为12~14%,最优选为13%。优选的,所述接种在无菌条件下进行。优选的,所述马铃薯培养基包括:(NH4)2HPO4 0.75~0.85g/L、KH2PO4 0.45~0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.015~0.055g/L、NaCl 0.9~1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.025~0.035g/L、蔗糖0.25~0.35g/L、葡萄糖0.9~1.1g/L、蚕蛹粉1.8~2.2g/L、琼脂1.6~2g/L和余量的水,更优选为:(NH4)2HPO4 0.78~0.82g/L、KH2PO4 0.48~0.52g/L、MgSO4.7H2O 0.025~0.045g/L、NaCl 0.95~1.05g/L、FeSO4.7H2O0.028~0.032g/L、蔗糖0.28~0.32g/L、葡萄糖0.95~1.05g/L、蚕蛹粉1.9~2.1g/L、琼脂1.7~1.9g/L和余量的水,最优选为:(NH4)2HPO4 0.80g/L、KH2PO4 0.50g/L、MgSO4.7H2O0.30g/L、NaCl 1.0g/L、FeSO4.7H2O 0.030g/L、蔗糖0.30g/L、葡萄糖1.00g/L、蚕蛹粉2.0g/L、琼脂1.8g/L和余量的水。优选的,所述活化的条件为:温度24~26℃,时间110~130h;更优选为24.5~25.5℃,时间115~125h;最优选为25℃,时间120h。
在本发明中,所述马铃薯培养基优选经120~130℃灭菌25~35min后使用。在本发明中,所述灭菌温度更优选为121℃;所述灭菌时间更优选为30min。本发明对培养基灭菌的设备没有特殊的限定,采用本领域技术人员熟知的灭菌设备即可。
本发明对上述马铃薯培养基的组分的来源没有特殊限定,采用本领域技术人员常规配制培养基的药品即可。
在本发明中,将得到的菌丝体接种到马铃薯培养液中培养,得菌悬液。优选的,所述接种方式为在含有上述菌丝体的马铃薯斜面培养基加入8~12ml无菌水经旋涡混合器混合,得含有菌丝体的无菌水,将得到的含有菌丝体的无菌水接种到马铃薯培养液中。优选的,所述接种在无菌条件下进行。优选的,所述旋涡混合的转速为80~120r/min,时间20~40s;更优选为95~105r/min,时间25~35s;最优选为100r/min,时间30s。优选的,所述接种的接种量为:含有菌丝体的无菌水与马铃薯培养液的体积比为1:27~34,更优选为1:29~31,最优选为1:30。
优选的,所述马铃薯培养液包括(NH4)2HPO4 0.75~0.85g/L、KH2PO4 0.45~0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.015~0.055g/L、NaCl 0.9~1.1g/L、FeSO4.7H2O0.025~0.035g/L、蔗糖0.25~0.35g/L、葡萄糖0.9~1.1g/L、蚕蛹粉1.8~2.2g/L、梅树下的土壤0.45~0.55g/L、梅树叶和梅树枝9~11g/L和余量的水,更优选为:(NH4)2HPO40.78~0.82g/L、KH2PO40.48~0.52g/L、MgSO4.7H2O 0.025~0.045g/L、NaCl 0.95~1.05g/L、FeSO4.7H2O 0.028~0.032g/L、蔗糖0.28~0.32g/L、葡萄糖0.95~1.05g/L、蚕蛹粉1.9~2.1g/L、梅树下的土壤0.48~0.52g/L、梅树叶和梅树枝9.5~10.5g/L和余量的水,最优选为:(NH4)2HPO4 0.80g/L、KH2PO4 0.50g/L、MgSO4.7H2O 0.030g/L、NaCl 1.0g/L、FeSO4.7H2O 0.030g/L、蔗糖0.30g/L、葡萄糖1.0g/L、蚕蛹粉2.0g/L、梅树下的土壤0.50g/L、梅树叶和梅树枝10g/L和余量的水。优选的,所述培养的条件为:温度24~35℃,时间5~7d,摇床转速180~220r/min;更优选为:温度28~32℃,时间5.5~6.5d,摇床转速190~210r/min;最优选为:温度30℃,时间6d,摇床转速200r/min。
在本发明中,所述马铃薯培养液优选经120~130℃灭菌25~35min后使用。在本发明中,所述灭菌温度更优选为121℃;所述灭菌时间更优选为30min。本发明对培养基灭菌的设备没有特殊的限定,采用本领域技术人员熟知的灭菌设备即可。
本发明对上述马铃薯培养液的组分的来源没有特殊限定,采用本领域技术人员常规配制培养液的药品即可。
在本发明中,将得到的菌悬液接种到发酵培养基中发酵,得液体发酵产物。优选的,所述接种的接种量为10~15%;更优选为12~14%;最优选为13%。优选的,所述发酵培养基包括(NH4)2HPO4 0.75~0.85g/L、KH2PO4 0.45~0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.015~0.055g/L、NaCl 0.9~1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.025~0.035g/L、蔗糖0.25~0.35g/L、葡萄糖0.9~1.1g/L、蚕蛹粉1.8~2.2g/L和余量的水;更优选为(NH4)2HPO4 0.78~0.82g/L、KH2PO40.48~0.52g/L、MgSO4.7H2O 0.025~0.040g/L、NaCl 0.95~1.05g/L、FeSO4.7H2O 0.028~0.032g/L、蔗糖0.28~0.32g/L、葡萄糖0.95~1.05g/L、蚕蛹粉1.9~2.1g/L余量的水;最优选为:(NH4)2HPO4 0.80g/L、KH2PO4 0.50g/L、MgSO4.7H2O 0.030g/L、NaCl 1.0g/L、FeSO4.7H2O 0.030g/L、蔗糖0.30g/L、葡萄糖1.0g/L、蚕蛹粉2.0g/L和余量的水。
优选的,所述发酵的条件为:温度26~30℃,时间5~7d,搅拌转速170~190r/min;更优选为:温度27~29℃,时间5.5~6.5d,搅拌转速175~185r/min;最优选为:温度28℃,时间6d,搅拌转速180r/min。
在本发明中,所述发酵培养基优选经120~130℃灭菌25~35min后使用。在本发明中,所述灭菌温度更优选为121℃;所述灭菌时间更优选为30min。本发明对发酵培养基灭菌的设备没有特殊的限定,采用本领域技术人员熟知的灭菌设备即可。
本发明对上述发酵培养基的组分的来源没有特殊限定,采用本领域技术人员常规配制培养基的药品即可。
本发明还提供了一种含有上述技术所述发酵生产方法得到的液体发酵产物。按质量百分比计,所述液体发酵产物富含灵芝多糖16%以上、灵芝有机锗5.6~5.8%,含C在28以下的萜烯类化合物占5.5~5.6%,小分子蛋白(LZ-8)占16.2~16.6%,腺苷3.4~3.6%,甘露醇4.5~4.6%。
本发明还提供了一种含有上述技术方案所述液体发酵产物在制备预防或治疗微生物感染和/或寄生虫寄生的药品中的应用。所述微生物为细菌、真菌、病毒、衣原体和支原体;所述寄生虫为蛔虫。已完成中试的药品:诺蒙达鼻炎爽康,为治疗呼吸系统的药物。
本发明还提供了一种含有上述技术方案所述液体发酵产物在制备保健品中的应用。本发明提供的保健品主要用于增强免疫功能、调整血压、净化血液、降低血粘度,促进细胞活化、防止动脉硬化、提高代谢水平、改善睡眠、抗过敏、益智安神、滋阴壮阳、培元固本、抗衰老、益寿延年。
本发明提供了一株灵芝菌,保藏编号为CGMCCNo.3982,本申请提供的灵芝菌株遗传性状稳定,菌丝体产量高,菌丝体重量在12g左右,较野生的原始灵芝菌丝体的产量提高了80~120倍。
进一步的,本申请采用上述灵芝菌株进行液体发酵生产,液体发酵产物主要营养及有效药物成分含量高,其中灵芝多糖16%以上、灵芝有机锗5.6~5.8%,含C在28以下的萜烯类化合物占5.5~5.6%,小分子蛋白(LZ-8)占16.2~16.6%,腺苷3.4~3.6%,甘露醇4.5~4.6%,均高于现有野生灵芝菌丝体的灵芝多糖7.5%、灵芝有机锗1.3%,含C在28以下的萜烯类化合物占2.1%,小分子蛋白(LZ-8)占6.2%,腺苷0.5%,甘露醇1.6%的含量。
得到的液体发酵产物可以应用到预防或治疗微生物感染和/或寄生虫寄生的药品及保健品中。
下面将结合本发明中的实施例,对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
将藏编号为CGMCC No.3982灵芝菌株按10%的接种量接种到马铃薯斜面培养基中在24℃培养130h进行活化得菌丝体。所述马铃薯斜面培养基包括(NH4)2HPO4 0.75g/L、KH2PO40.55g/L、MgSO4.7H2O 0.055g/L、NaCl 1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.025g/L、蔗糖0.25g/L、葡萄糖1.1g/L、蚕蛹粉1.8g/L、琼脂2g/L和余量的水,在130℃灭菌35min。在含有上述菌丝体的马铃薯斜面培养基加入11ml无菌水经旋涡混合器在转速为80r/min下旋涡40s进行混合,得含有菌丝体的无菌水,将得到的含有菌丝体的无菌水接种到300ml马铃薯培养液中,在180r/min摇床转速,35℃下培养6d得菌悬液。所述马铃薯液体培养液包括:(NH4)2HPO40.75g/L、KH2PO4 0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.015g/L、NaCl 1.0g/L、FeSO4.7H2O 0.035g/L、蔗糖0.30g/L、葡萄糖0.95g/L、蚕蛹粉1.8g/L、梅树下的土壤0.45g/L、梅树叶和梅树枝11g/L和余量的水,在120℃灭菌35min。将得到的菌悬液接种到发酵培养液中,接种量为10%,在搅拌转速185r/min,27℃下发酵7d得到发酵产物。所述发酵培养液包括(NH4)2HPO4 0.85g/L、KH2PO4 0.45g/L、MgSO4.7H2O 0.015g/L、NaCl 1.05g/L、FeSO4.7H2O 0.035g/L、蔗糖0.32g/L、葡萄糖1.1g/L、蚕蛹粉1.8g/L,在121℃灭菌30min。
实施例2
将藏编号为CGMCC No.3982灵芝菌株按15%的接种量接种到马铃薯斜面培养基中在26℃培养110h进行活化得菌丝体。所述马铃薯斜面培养基包括(NH4)2HPO4 0.85g/L、KH2PO4 0.48g/L、MgSO4.7H2O 0.015g/L、NaCl 0.9g/L、FeSO4.7H2O 0.035g/L、蔗糖0.25~0.35g/L、葡萄糖0.95g/L、蚕蛹粉2.2g/L、琼脂1.6g/L和余量的水,在125℃灭菌35min。在含有上述菌丝体的马铃薯斜面培养基加入9ml无菌水经旋涡混合器在转速为120r/min下旋涡25s进行混合,得含有菌丝体的无菌水,将得到的含有菌丝体的无菌水接种到300ml马铃薯培养液中,在220r/min摇床转速,28℃下培养5d得菌悬液。所述马铃薯液体培养液包括:(NH4)2HPO4 0.85g/L、KH2PO4 0.45g/L、MgSO4.7H2O 0.015~0.040g/L、NaCl 0.9g/L、FeSO4.7H2O 0.025~0.030g/L、蔗糖0.25g/L、葡萄糖0.9g/L、蚕蛹粉2.2g/L、梅树下的土壤0.52g/L、梅树叶和梅树枝9g/L和余量的水,在121℃灭菌30min。将得到的菌悬液接种到发酵培养液中,接种量为15%,在搅拌转速170r/min,26℃下发酵5d得到发酵产物。所述发酵培养液包括(NH4)2HPO4 0.75g/L、KH2PO4 0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.055g/L、NaCl 1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.028g/L、蔗糖0.25g/L、葡萄糖0.95g/L、蚕蛹粉2.1g/L和余量的水,在130℃灭菌25min。
实施例3
将藏编号为CGMCC No.3982灵芝菌株按13%的接种量接种到马铃薯斜面培养基中在25.5℃培养125h进行活化得菌丝体。所述马铃薯斜面培养基包括(NH4)2HPO4 0.82g/L、KH2PO4 0.45g/L、MgSO4.7H2O 0.045g/L、NaCl 0.9g/L、FeSO4.7H2O 0.030g/L、蔗糖0.35g/L、葡萄糖0.9g/L、蚕蛹粉2.0g/L、琼脂1.9g/L和余量的水,在121℃灭菌25min。在含有上述菌丝体的马铃薯斜面培养基加入10ml无菌水经旋涡混合器在转速为90r/min下旋涡20s进行混合,得含有菌丝体的无菌水,将得到的含有菌丝体的无菌水接种到300ml马铃薯培养液中,在210r/min摇床转速,24℃下培养7d得菌悬液。所述马铃薯液体培养液包括(NH4)2HPO40.78g/L、KH2PO4 0.5g/L、MgSO4.7H2O 0.055g/L、NaCl 1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.025g/L、蔗糖0.35g/L、葡萄糖1.1g/L、蚕蛹粉1.9g/L、梅树下的土壤0.55g/L、梅树叶和梅树枝10.5g/L和余量的水,在130℃灭菌35min。将得到的菌悬液接种到发酵培养液中,接种量为14%,在搅拌转速190r/min,30℃下发酵6.5d得到发酵产物。所述发酵培养液包括(NH4)2HPO4 0.82g/L、KH2PO4 0.48/g/L、MgSO4.7H2O 0.040g/L、NaCl 0.9g/L、FeSO4.7H2O 0.025g/L、蔗糖0.35g/L、葡萄糖0.9g/L、蚕蛹粉2.2g/L和余量的水,在120℃灭菌35min。
实施例4
将藏编号为CGMCC No.3982灵芝菌株按13%的接种量接种到马铃薯斜面培养基中在25℃培养125h进行活化得菌丝体。所述马铃薯斜面培养基包括最优选为:(NH4)2HPO40.80g/L、KH2PO4 0.50g/L、MgSO4.7H2O 0.30g/L、NaCl 1.0g/L、FeSO4.7H2O 0.030g/L、蔗糖0.30g/L、葡萄糖1.00g/L、蚕蛹粉2.0g/L、琼脂1.8g/L和余量的水,在121℃灭菌30min。在含有上述菌丝体的马铃薯斜面培养基加入10ml无菌水经旋涡混合器在转速为100r/min下旋涡30s进行混合,得含有菌丝体的无菌水,将得到的含有菌丝体的无菌水接种到300ml马铃薯培养液中,在200r/min摇床转速,30℃下培养6d得菌悬液。所述马铃薯液体培养液包括:(NH4)2HPO4 0.75~0.85g/L、KH2PO4 0.45~0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.015~0.055g/L、NaCl0.9~1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.025~0.035g/L、蔗糖0.25~0.35g/L、葡萄糖0.9~1.1g/L、蚕蛹粉1.8~2.2g/L、梅树下的土壤0.45~0.55g/L、梅树叶和梅树枝9~11g/L和余量的水,在121℃灭菌30min。将得到的菌悬液接种到发酵培养液中,接种量为13%,在搅拌转速180r/min,28℃下发酵6d得到发酵产物。所述发酵培养液包括(NH4)2HPO4 0.80g/L、KH2PO40.50g/L、MgSO4.7H2O 0.030g/L、NaCl 1.0g/L、FeSO4.7H2O 0.030g/L、蔗糖0.30g/L、葡萄糖1.0g/L、蚕蛹粉2.0g/L和余量的水,在121℃灭菌30min。
实施例5
分别选取实施例1~4制备得到的灵芝菌丝体作为实验组,以野生灵芝菌种作为对照组,对照组除菌株不同外,发酵生产方法的条件与实施例4相同。测定本申请制备得到的灵芝菌丝体产量及发酵产物主要营养成分。具体结果如表1和表2所示。
表1灵芝菌丝体产量
表2发酵产物主要营养成分
由表1和2可以看出,本申请提供的灵芝菌株菌丝体产量高,本申请得到的菌丝体重量在12~18g,较野生的原始灵芝菌丝体的产量提高了80~120倍。
液体发酵产物主要营养及有效药物成分含量高,其中灵芝多糖16%以上、灵芝有机锗5.6~5.8%,含C在28以下的萜烯类化合物占5.5~5.6%,小分子蛋白(LZ-8)占16.2~16.6%,腺苷3.4~3.6%,甘露醇4.5~4.6%,均高于现有野生灵芝菌丝体的灵芝多糖7.5%、灵芝有机锗1.3%,含C在28以下的萜烯类化合物占2.1%,小分子蛋白(LZ-8)占6.2%,腺苷0.5%,甘露醇1.6%的含量。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一株灵芝菌株,其特征在于,保藏编号为CGMCC No.3982。
2.一种灵芝菌液体发酵生产方法,包括以下步骤:
1)将权利要求1所述的灵芝菌株接种到马铃薯培养基中活化,得菌丝体;
2)将所述步骤1)得到的菌丝体接种到马铃薯培养液中培养,得菌悬液;
3)将所述步骤2)得到的菌悬液接种到发酵培养液中发酵,得液体发酵产物;
所述发酵培养液包括以下组分:(NH4)2HPO4 0.75~0.85g/L、KH2PO4 0.45~0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.015~0.055g/L、NaCl 0.9~1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.025~0.035g/L、蔗糖0.25~0.35g/L、葡萄糖0.9~1.1g/L、蚕蛹粉1.8~2.2g/L和余量的水。
3.根据权利要求2所述的发酵生产方法,其特征在于,所述步骤1)中马铃薯培养基包括:(NH4)2HPO4 0.75~0.85g/L、KH2PO4 0.45~0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.015~0.055g/L、NaCl 0.9~1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.025~0.035g/L、蔗糖0.25~0.35g/L、葡萄糖0.9~1.1g/L、蚕蛹粉1.8~2.2g/L、琼脂1.6~2g/L和余量的水。
4.根据权利要求2或3所述的发酵生产方法,其特征在于,所述步骤1)活化的条件为:温度24~26℃,时间110~130h。
5.根据权利要求2所述的发酵生产方法,其特征在于,所述步骤2)中马铃薯培养液包括:(NH4)2HPO4 0.75~0.85g/L、KH2PO4 0.45~0.55g/L、MgSO4.7H2O 0.015~0.055g/L、NaCl 0.9~1.1g/L、FeSO4.7H2O 0.025~0.035g/L、蔗糖0.25~0.35g/L、葡萄糖0.9~1.1g/L、蚕蛹粉1.8~2.2g/L、梅树下的土壤0.45~0.55g/L、梅树叶和梅树枝9~11g/L和余量的水。
6.根据权利要求2或5所述的发酵生产方法,其特征在于,所述步骤2)培养的条件为:温度24~35℃,时间5~7d,摇床转速180~220r/min。
7.根据权利要求2所述的发酵生产方法,其特征在于,所述步骤3)发酵条件为:温度26~30℃,时间5~7d,搅拌速度170~190r/min。
8.权利要求2~7任意一项所述方法得到的液体发酵产物。
9.权利要求8所述液体发酵产物在制备预防或治疗微生物感染和/或寄生虫寄生的药品中的应用。
10.权利要求8所述的液体发酵产物在制备保健品中的应用。
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