CN109593679A - 一种纳米硒微生物菌剂及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

一种纳米硒微生物菌剂制备方法与应用，属于微生态调节剂在种植中应用的生物材料技术领域。该生物菌剂包括纳米硒水溶液30~60%，红糖5~30%，腐殖酸5~30%，地衣芽孢杆菌5~30%，枯草芽孢杆菌5~25%。将菌种分别经过一级菌种培养，二、三级发酵，使发酵液中菌数达到2×10⁸个/mL，同时对酵母硒进行纳米微化理混合发酵后通过菌种啄食即得纳米硒微生物菌剂。本产品经长期实地验证，配方合理，功效稳定，能够促进植物生长，提高植物产品产量，提高成活率，防病抗病，提高养分吸收率，改善产品品质，增加植物作物含硒量，增加作物附加价值。

Description

一种纳米硒微生物菌剂及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及纳米硒微生物菌剂及其制备方法与应用，属于植物生物调节剂在农作物种植中应用的生物材料技术领域。

背景技术

微生物菌剂最初的作用是土壤改良剂，以增加土壤中的有益菌群和对土壤中的有害物质进行分解，便于植物作物吸收营养，提升产品品质。

随着农药化肥的过度使用，农产品的终止密度的增加，各种种植疾病的发生越来越频繁，大部分地区的作物处于减产据产态，同时产品的质量无法保证，不能生产对人有益的健康食品，在社会发展如此高速，人民经济水平大幅度提升的，对食品质量要求愈高的当下，很难不为未来的农产品发展方向担忧。

富硒农产品在这种历史背景下应运而生，为种植业的持续发展提供了一条有效、可靠的途径。采用生物工程技术复合发酵，利用多种微生物相互作用，通过纳米化生物酵素硒达到安全无害的富硒产品。

发明内容

本发明所要解决的问题是采用多种菌种制备复合微生物菌剂，利用该复合微生物菌剂制成饲料级复合微生物添加剂应用在畜禽养殖业。进入畜禽动物体内，形成优势种群，参与肠道微生物的平衡，提高动物的饲料利用率和生长速度，提高动物机体非特异性免疫功能，防病抗病。

本发明的技术解决方案如下：1、纳米硒微生物菌剂，采用 地衣芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌，制备菌种；所述菌种的质量百分比如下：地衣芽孢杆菌5~30%，枯草芽孢杆菌5~25%。

地衣芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌的菌种来源购买于河北沧州兴业生物技术有限公司，单位地址：河北省沧县河北沧州兴济镇工业园，联系电话：15200830432。

所述的纳米硒微生物菌剂的制备方法，所述纳米硒微生物菌剂的制备步骤如下：

1.接种：将所述各菌种接于斜面培养基上。地衣芽孢杆菌27～37℃，培养时间为6～48h；枯草芽孢杆菌培养温度为27～37℃，培养时间为6～48h；

2.一级菌种培养：将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的50mL锥形瓶中，培养基pH为6.0～8.0，锥形瓶放入摇床振荡，温度为30℃，振荡24～48h；采用血球计数板计数，菌液中菌种数量分别达到10⁸个/mL；

3.二级发酵：将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的1000mL锥形瓶中，培养基pH3~6，放入摇床振荡，温度为30℃，振荡48～72h；使菌种数量分别达到10⁸个/mL以上，将各菌种按所述菌种的质量百分比混合；

4.三级发酵：将混合后的菌液接种于盛有菌剂培养基的发酵罐中，复合菌剂培养基pH5~6，接种量为1～5%，30℃下培养4～7天，使发酵液中菌数达到2～10×10⁸个/mL，同时加入纳米硒水溶液，红糖，腐殖酸经过培养时间为6～48h发酵即得到所述纳米硒微生物菌剂。

所述液体培养基配方为：

（1） 地衣芽孢杆菌采用的液体培养基配方为：玉米浆0.45g,蛋白胨1.50g,豆饼粉浸汁为1：15,葡萄糖1.50g。,起始pH值7.5。

（2）枯草芽孢杆菌采用的液体培养基配方为：牛肉膏 5g、蛋白胨10g、Nacl 3g、pH7.0。

所述纳米硒水溶液浓度为20-30mg/kg，硒直径为30-60nm；制作方式为：以含量3000ppm的酵素硒通过微分子纳米化处理得到。

所述腐植酸有机质含量45%以上。

三级发酵中所述复合菌剂培养基为：蜂蜜1～5g/100mL、蔗糖2～10g/100mL、蛋白胨0.1～0.5g/100mL、Nacl 0.5～2g/100mL其余为蒸馏水。

所述纳米硒微生物菌剂在植物种植种作为生物调节剂。

本发明的有益效果是：纳米硒微生物菌剂采用纳米硒水溶液30~60%，红糖5~30%，腐殖酸5~30%，地衣芽孢杆菌5~30%，枯草芽孢杆菌5~25%。以上菌种分别经过一级菌种培养，二、三级发酵，使发酵液中菌数达到2×10⁸个/mL，同时对酵母硒进行纳米微化理混合发酵后通过菌种啄食即得纳米硒微生物菌剂。本产品经长期实地验证，配方合理，功效稳定，能够促进植物生长，提高植物产品产量，提高成活率，防病抗病，提高养分吸收率，改善产品品质，增加植物作物含硒量，增加作物附加价值。

具体实施方式

实施例1：

本发明采用 地衣芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌，纳米硒水溶液，红糖，腐殖酸，制备菌种；所述菌种和基质的质量和其他成分百分比如下：地衣芽孢杆菌20%，枯草芽孢杆菌20%，纳米硒水溶液35%，红糖10%，腐殖酸15%。

采用本发明制备的纳米硒微生物菌剂在樱桃种植中应用效果试验：

1.试验材料：

供试樱桃：秦皇岛山海关大樱桃

2.试验方法：

试验设两个试验棚，每个试验棚30棵樱桃树分为两种，实验组喂施用纳米硒微生物菌剂，另一组对照。

第一个试验棚，每日一次菌剂添加。

第二个试验棚，每日分早、午、晚三次菌剂添加。

3.试验时间为90天。15天预试期，正式试验期为75天。

4.试验结果：

试验前10天试验组比对照组富硒量提高8%。后15天平均比对照组提高17.3%，樱桃含硒量著明显提高，产品品质提升显著，产品价值大大提高。

实施例2：

本发明采用 地衣芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌，纳米硒水溶液，红糖，腐殖酸，制备菌种；所述菌种和基质的质量和其他成分百分比如下：地衣芽孢杆菌10%，枯草芽孢杆菌20%，纳米硒水溶液40%，红糖15%，腐殖酸15%。

采用本发明制备的纳米硒微生物菌剂在油桃种植中应用效果试验：

1.试验材料：

供试樱桃：大连瓦房店油桃

2.试验方法：

试验设两个试验棚，每个试验棚40棵油桃树分为两种，实验组喂施用纳米硒微生物菌剂，另一组对照。

第一个试验棚，每日一次菌剂添加。

第二个试验棚，每日分早、午、晚三次菌剂添加。

3.试验时间为90天。15天预试期，正式试验期为75天。

4.试验结果：

试验前10天试验组比对照组富硒量提高6%。后15天平均比对照组提高10.7%，油桃含硒量著明显提高，产品品质提升显著，产品价值大大提高。

实施例3常用配方表

按照上述配方表和制备方法得到的纳米硒微生物菌剂，菌数含量达到2×10⁸个/mL，硒含量10mg/kg。采用实施例2中第二个试验棚中油桃的种植方法，试验90天后，油桃的富硒量上表所示。

Claims (5)

1.一种纳米硒微生物菌剂，其特征在于：所述生物菌剂中菌种和基质的质量百分比如下：地衣芽孢杆菌5~30%，枯草芽孢杆菌5~25%，纳米硒水溶液30~60%，红糖5~30%，腐殖酸5~30%；所述纳米硒水溶液浓度为20-30mg/kg。

2.根据权利要求1所述的一种纳米硒微生物菌剂，其特征在于：所述纳米硒水溶液以含量3000ppm的酵素硒通过微分子纳米化处理得到；所述腐植酸有机质含量45%以上。

3.根据权利要求1所述的一种纳米硒微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述纳米硒微生物菌剂的制备步骤如下：

接种：将所述各菌种接于斜面培养基上；地衣芽孢杆菌27～37℃，培养时间为6～48h；枯草芽孢杆菌培养温度为27～37℃，培养时间为6～48h；

一级菌种培养：将地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的菌种分别接种于地衣芽孢杆菌培养基和枯草芽孢杆菌培养基的50mL锥形瓶中，培养基pH为6.0～8.0，锥形瓶放入摇床振荡，温度为30℃，振荡24～48h；采用血球计数板计数，菌液中菌种数量分别达到10⁸个/mL；

二级发酵：将所述菌种分别接种于盛有液体培养基的1000mL锥形瓶中，培养基pH3~6，放入摇床振荡，温度为30℃，振荡48～72h；使菌种数量分别达到10⁸个/mL以上，将各菌种按所述菌种的质量百分比混合；

三级发酵：将混合后的菌液接种于盛有菌剂培养基的发酵罐中，复合菌剂培养基pH5~6，接种量为1～5%，30℃下培养4～7天，使发酵液中菌数达到2～10×10⁸个/mL，同时加入纳米硒水溶液，红糖，腐殖酸的经过培养时间为6～48h发酵即得到所述纳米硒微生物菌剂。

4.根据权利要求3所述的一种纳米硒微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述液体培养基配方为：

（1）地衣芽孢杆菌培养基配方为：玉米浆0.45g,蛋白胨1.50g,豆饼粉浸汁为豆饼粉与水按质量比为1：15混合，葡萄糖1.50g；起始pH值7.5；

（2）枯草芽孢杆菌培养基配方为：牛肉膏 5g、蛋白胨10g、Nacl 3g；培养基的pH 7.0；

（3）三级发酵中所述复合菌剂培养基为：糖蜜1～5g/100mL、蔗糖2～10g/100mL、蛋白胨0.1～0.5g/100mL、Nacl 0.5～2g/100mL，其余为蒸馏水。

5.根据权利要求1所述的一种纳米硒微生物菌剂的应用，其特征在于：所述纳米硒微生物菌剂在植物种植中作为生物调节剂。