CN107353323B - Al18F标记的PSMA靶向抑制剂及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种新型的Al18F标记的PSMA靶向抑制剂及其制备方法与应用。所述Al18F标记的PSMA靶向抑制剂为Al18F‑NODA‑PSMA，将其作为前列腺癌PET分子探针，稳定性好，显像效果好，有利于早期前列腺癌的诊断与准确分期，并可以为前列腺癌的复发、局部及远处转移进行诊断。经进一步临床前动物水平研究证实，其有望应用于临床，成为理想的前列腺癌PET分子探针。

Description

Al18F标记的PSMA靶向抑制剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及核医学领域，具体地说，涉及一种Al18F标记的PSMA 靶向抑制剂及其制备方法与应用。
背景技术
随着人口老龄化进程的加剧，前列腺癌的发病率已位列我国男性恶性肿瘤发病率的第六位，如何早期地对前列腺癌进行精确检测已成为临床上亟需解决的问题。核医学显像可以在分子和细胞水平无创、可视化、定性/定量监测并参与肿瘤发生、发展过程中的生理和病理过程，已成为临床上肿瘤检测的重要手段。正电子发射计算机断层显像(PositronEmission Tomography，PET)具有灵敏度和分辨率高的优点，在肿瘤的早期诊疗方面显现出明显的优势。随着PET/CT和 PET/MRI等融合影像技术的发展，核医学检查可以同时提供解剖学和功能学信息，对提高患者治愈率及生活质量具有重要的意义。
目前临床上使用最广泛的PET示踪剂为18F-FDG，但其是一种非特异性显像剂，在前列腺癌的诊断方面存在很多不足，因此亟需研发特异性示踪剂对前列腺癌进行显像，以最大限度发挥PET显像的优势。
PSMA(Prostate Specific Membrane Antigen，前列腺特异性膜抗原)作为特异性的靶点最初被7E-11所识别并定义，其在前列腺癌细胞中高度表达，在前列腺癌晚期PSMA呈高表达，在前列腺癌转移灶的细胞中也具有特异性的高度表达，且其表达程度与肿瘤分化程度、转移倾向及激素治疗敏感性等方面均显著性相关。因此靶向PSMA的特异性前列腺癌分子探针已成为研究的一大热点。目前北京肿瘤医院核医学科正在开展68Ga-DKFZ-PSMA-617的临床研究工作，已对超过 70例患者进行了68Ga-DKFZ-PSMA-617显像。研究表明其能有有效地对前列腺癌原发及转移病灶进行探测。
尽管68Ga标记的PSMA在临床试验中已经取得了一定的成果，但是仍存在改进的空间，这主要是考虑到68Ga这种核素需要通过68Ge/68Ga发生器制备，产量有限，单次制备的68Ga-DKFZ-PSMA-617 最多可供2名患者使用。18F通过医用加速器制备，我国医用加速器的装机数量远高于68Ge/68Ga发生器的数目；加速器单次可生产18F的量>4000mCi，18F的半衰期较长(109.7分钟)，因此制备的量可供超过10名患者使用，甚至实现局部地区的配送；更重要的是18F空间分辨率较68Ga更高。以上因素都表明有必要发展一种更有利于临床推广应用的18F标记的PSMA靶向抑制剂用于前列腺癌显像。事实上，美国 FDA已批准18F-DCFBC用于复发性前列腺癌的临床Ⅱ期研究，18F-DCFPyL也已经进入临床Ⅰ期研究。
Al18F的标记方法是近年来发展起来的一种18F标记的新方法，具有很多优点，如标记时间更短，能从1-2小时缩短至30分钟以内；标记率更高；稳定性更好，不易出现脱氟现象。NODA是一种有效的为双功能螯合剂，其空腔大小适中，恰好能与Al18F螯合。本发明结合肿瘤分子探针的研究热点及18F标记的新进展，设计了含有NODA的前列腺膜抗原抑制剂NODA-PSMA，采用Al18F标记以探求其作为前列腺癌显像剂的潜力，具有非常重要的科学研究和应用开发价值。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于结合前列腺特异性膜抗原 (PSMA)的配体及其应用。
本发明的另一目的是提供一种新型的Al18F标记的PSMA靶向抑制剂及其制备方法与应用。
为了实现本发明目的，本发明首先提供一种用于结合前列腺特异性膜抗原的新型配体，所述配体是基于前列腺特异性膜抗原的膜外段区域设计的，结构为：Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran，其中，Glu为谷氨酸，Urea为尿素，Lys为赖氨酸，Gla(Nal)为3-(2-萘基)-D-丙氨酸，Tran 为氨甲环酸。
本发明还提供一种用于结合前列腺特异性膜抗原的配体缀合物，其结构如下：Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA。其中，NODA为双功能螯合剂，参见Radiofluorinationusing aluminum-fluoride(Al18F)[J], EJNMMI Research,2013,3:36。
本发明还提供一种靶向PSMA的肿瘤显像剂或治疗药物，其含有上述配体缀合物。
本发明还提供所述配体缀合物在制备靶向PSMA的肿瘤显像剂或治疗药物中的应用。
本发明还提供一种Al18F标记的PSMA靶向抑制剂，其为Al18F标记的Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA。
本发明还提供所述Al18F标记的PSMA靶向抑制剂在制备PET/CT 分子诊断显像剂中的应用。
本发明Al18F标记的PSMA靶向抑制剂可以按照如下步骤制备得到：
S1、树脂的溶胀
向1g 2-氯三苯甲基氯树脂中加入15mL DMF，溶胀30分钟；
S2、反应产物C的制备
①将DMF和DCM按等体积混合，作为溶剂将3e.q. Fmoc-2-Nal-OH(N-Fmoc-3-(2-萘基)-D-丙氨酸)配制成15g/mL的溶液，加入到上述溶胀的树脂中，再加入10e.q.DIEA(N,N-二异丙基乙胺)，N2保护条件下反应30分钟，甲醇密封30分钟，得到反应液A；
②将反应液A过滤，收集滤渣，向15g滤渣中加入1mL 20％的哌啶溶液，以脱去Fmoc保护基，分别吹泄反应管底部5分钟和15分钟得到反应产物B；
③监测上述反应，方法如下：取十几粒树脂，用乙醇洗3次后依次加入0.10mL 25％的茚三酮乙醇溶液，0.05mL20％的酚醛乙醇溶液和0.05mL吡啶，加热至105℃反应5分钟，变深蓝色为阳性反应；
④按照每克10ml的用量，将反应产物B依次用DCM(二氯甲烷)、 MeOH(甲醇)和DMF(N,N-二甲基甲酰胺)各洗涤两次；然后向反应产物B中加入3e.q.Fmoc-Tranexamic Acid(Fmoc保护的氨甲环酸) 的乙醇溶液，3e.q.HBTU(四甲基脲六氟磷酸盐)和2ml DIEA，加入DMF溶解后，按照每克15ml的量加入DCM，反应30分钟，按照③的方法监测反应，得到反应产物C；按照每克10ml的用量，将反应产物C依次用DCM、MeOH和DMF各洗涤两次；
S3、中间体1的制备①将反应产物C过滤，收集滤渣，向15g滤渣中加入1mL 20％的哌啶溶液，以脱去Fmoc保护基，分别吹泄反应管底部5分钟和15分钟，监测反应得到反应产物D；
按照每克10ml的用量，将反应产物D依次用DCM(二氯甲烷)、 MeOH(甲醇)和DMF(N,N-二甲基甲酰胺)各洗涤两次；然后向反应产物D中加入3e.q.NODA-bis(tbu)ester的乙醇溶液，3e.q.HBTU(四甲基脲六氟磷酸盐)和2ml DIEA，加入DMF溶解后，按照每克15ml 的量加入DCM，反应30分钟，监测反应，得到反应产物E；按照每克 10ml的用量，将反应产物E依次用DCM、MeOH和DMF各洗涤两次；
②反应结束后将反应产物E从树脂上解离，具体方法为：将负载有反应产物E的树脂溶于三氟乙醇和DCM按3:7体积比混合的溶液中，冰浴下反应120分钟，过滤，收集滤液，旋转蒸发除去溶剂得到中间体1；
S4、中间体2的制备
向50mL 1.2e.q.CDI(N,N′-羰基二咪唑)的THF溶液中滴加1e.q. H2N-Glu(PMB)-OPMB的THF溶液，温度控制在20℃以下，搅拌过夜，反应结束后旋转蒸发除去溶剂；收集残渣，向残渣中加入丙酮和水按 5:1体积比混合的溶液中，搅拌30分钟，过滤，干燥滤渣得到中间体2；
S5、中间体3的制备
向1e.q.中间体2的THF溶液中滴加1e.q.H2N-Lys(Boc)-OPMB的THF溶液，混合液在65℃下回流过夜，反应结束后除去溶剂，残渣用乙酸乙酯稀释并分别用水、10％柠檬酸溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥有机相30分钟后，过滤，浓缩得到中间体3；
S6、中间体4的制备
向中间体3的乙醇和乙酸乙酯溶液中加入2e.q.TsOH(对甲苯磺酸)，温度控制在5℃以下，搅拌2小时；反应结束后加入乙酸乙酯稀释，分别用饱和NaHCO3溶液、10％柠檬酸溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥有机相30分钟，过滤，浓缩得到中间体4；
S7、Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA的制备
向1.0e.q.中间体1、0.2e.q.DMAP(4-二甲氨基吡啶)和1.0e.q. 中间体4的DCM溶液中加入DCC(二环己基碳二亚胺)的DCM溶液，温度控制在5℃以下，混合液搅拌30分钟后，在室温条件下搅拌过夜，反应结束后，除去溶剂得到中间体5；将中间体5溶于TFA(三氟乙酸)、 EDT、TIS和水的混合液(TFA:EDT:TIS:H2O＝95:2:2:1)中，搅拌2小时；N2吹干溶剂后用乙醚洗涤5次，干燥得到粗产物；粗产物用HPLC 纯化，纯化后冷冻干燥，即得Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA。
粗产物用HPLC纯化，采用Kromasil 100-5C18柱，20mm×250mm， 10micron，UV＝220nm，流速＝15mL/min，流动相：A：H2O(0.1％ TFA)，B：乙腈(0.1％TFA)，B 20％-34％(0-40min)，tR＝25.180min。纯化后冷冻干燥得到白色粉末。MS：[M+H]+(m/z＝941.8)。
S8、Al18F标记的PSMA靶向抑制剂的制备(即Al18F标记的 Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA)的制备
以0.1mM,pH4.0的醋酸缓冲液为溶剂，配制2mM AlCl3溶液；取 0.1mM,pH4.0的醋酸缓冲液0.1mL，AlCl3溶液6μL，加入50-120MBq 18F-(0.1mL)室温放置5分钟，再加入5μLGlu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA溶液，110℃下反应10分钟，得到目标化合物，即Al18F标记的PSMA靶向抑制剂；其中， Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA溶液的浓度为4mmol/mL，以0.1M, pH 4.0的NaAc缓冲液为溶剂；
S9、用Sep-pak C18Column Light分离纯化所述目标化合物，使目标化合物的放射性化学纯度大于99％。
步骤S9中，使用前Sep-pak C18Column Light需用无水乙醇和高纯水活化，并用生理盐水洗脱放射性杂质，最后用乙醇洗脱出目标化合物，即Al18F标记的Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA (Al18F-NODA-PSMA)。
Al18F-NODA-PSMA的体外稳定性分析结果显示，其在0.9％NaCl 溶液中放置2小时后仍能保持良好的稳定性，Radio-HPLC检测其放化纯度保持在95％以上。在2％人血清白蛋白溶液中放置1小时后仍能保持良好的稳定性，Radio-HPLC检测其放化纯度保持在95％以上。
脂水分配系数实验结果显示logP＝-2.87±0.01，表明 Al18F-NODA-PSMA是一种亲水性物质。
Al18F-NODA-PSMA在正常Kunming雌性小鼠体内的生物分布实验结果表明，其在肾脏中迅速富集并主要通过尿路排泄，在非靶组织和器官中摄取低且代谢快。
本发明提供的新型核素标记的前列腺特异性膜抗原靶向抑制剂，性质稳定，显像效果好，对PSMA有高的亲和力和功能活性，有利于早期前列腺癌的诊断与准确分期，经进一步临床前动物实验研究证实，其有望成为具有良好应用前景的前列腺癌显像剂。
附图说明
图1为本发明实施例2中Al18F-NODA-PSMA的HPLC图。
图2为本发明实施例3中Al18F-NODA-PSMA在生理盐水中室温放置2小时后的HPLC图。
图3为本发明实施例3中Al18F-NODA-PSMA在HAS溶液中37℃孵育1小时后的HPLC图。
图4为本发明实施例5中LNCaP模型鼠注射Al18F-NODA-PSMA后 90min的micro-PET显像图。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。
实施例1 NODA-PSMA(即Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA) 的制备
S1、树脂的溶胀
向1g 2-氯三苯甲基氯树脂中加入15mL DMF，溶胀30分钟。
S2、反应产物C的制备
①将DMF和DCM按等体积混合，作为溶剂将3e.q. Fmoc-2-Nal-OH(N-Fmoc-3-(2-萘基)-D-丙氨酸)配制成15g/mL的溶液，加入到上述溶胀的树脂中，再加入10e.q.DIEA(N,N-二异丙基乙胺)，N2保护条件下反应30分钟，甲醇密封30分钟，得到反应液A；
②将反应液A过滤，收集滤渣，向15g滤渣中加入1mL 20％的哌啶溶液，以脱去Fmoc保护基，分别吹泄反应管底部5分钟和15分钟得到反应产物B；
③监测上述反应，方法如下：取十几粒树脂，用乙醇洗3次后依次加入0.10mL25％的茚三酮乙醇溶液，0.05mL20％的酚醛乙醇溶液和0.05mL吡啶，加热至105℃反应5分钟，变深蓝色为阳性反应；
④按照每克10ml的用量，将反应产物B依次用DCM(二氯甲烷)、 MeOH(甲醇)和DMF(N,N-二甲基甲酰胺)各洗涤两次；然后向反应产物B中加入3e.q.Fmoc-Tranexamic Acid(Fmoc保护的氨甲环酸) 的乙醇溶液，3e.q.HBTU(四甲基脲六氟磷酸盐)和2ml DIEA，加入DMF溶解后，按照每克15ml的量加入DCM，反应30分钟，按照③的方法监测反应，得到反应产物C；按照每克10ml的用量，将反应产物C依次用DCM、MeOH和DMF各洗涤两次。
S3、中间体1的制备
①将反应产物C过滤，收集滤渣，向15g滤渣中加入1mL 20％的哌啶溶液，以脱去Fmoc保护基，分别吹泄反应管5分钟和15分钟，监测反应得到反应产物D；
按照每克10ml的用量，将反应产物D依次用DCM(二氯甲烷)、 MeOH(甲醇)和DMF(N,N-二甲基甲酰胺)各洗涤两次；然后向反应产物D中加入3e.q.NODA-bis(tbu)ester的乙醇溶液，3e.q.HBTU(四甲基脲六氟磷酸盐)和2ml DIEA，加入DMF溶解后，按照每克15ml 的量加入DCM，反应30分钟，监测反应，得到反应产物E；按照每克 10ml的用量，将反应产物E依次用DCM、MeOH和DMF各洗涤两次；
②反应结束后将反应产物E从树脂上解离，具体方法为：将负载有反应产物E的树脂溶于三氟乙醇和DCM按3:7体积比混合的溶液中，冰浴下反应120分钟，过滤，收集滤液，旋转蒸发除去溶剂得到中间体1。
S4、中间体2的制备
向50mL 1.2e.q.CDI(N,N′-羰基二咪唑)的THF溶液中滴加1e.q. H2N-Glu(PMB)-OPMB的THF溶液，温度控制在20℃以下，搅拌过夜，反应结束后旋转蒸发除去溶剂；收集残渣，向残渣中加入丙酮和水按 5:1体积比混合的溶液中，搅拌30分钟，过滤，干燥滤渣得到中间体2。
S5、中间体3的制备
向1e.q.中间体2的THF溶液中滴加1e.q.H2N-Lys(Boc)-OPMB的 THF溶液，混合液在65℃下回流过夜，反应结束后除去溶剂，残渣用乙酸乙酯稀释并分别用水、10％柠檬酸溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥有机相30分钟后，过滤，浓缩得到中间体3。
S6、中间体4的制备
向中间体3的乙醇和乙酸乙酯溶液中加入2e.q.TsOH(对甲苯磺酸)，温度控制在5℃以下，搅拌2小时；反应结束后加入乙酸乙酯稀释，分别用饱和NaHCO3溶液、10％柠檬酸溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥有机相30分钟，过滤，浓缩得到中间体4。
S7、Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA的制备
向1.0e.q.中间体1、0.2e.q.DMAP(4-二甲氨基吡啶)和1.0e.q. 中间体4的DCM溶液中加入DCC(二环己基碳二亚胺)的DCM溶液，温度控制在5℃以下，混合液搅拌30分钟后，在室温条件下搅拌过夜，反应结束后，除去溶剂得到中间体5；将中间体5溶于TFA(三氟乙酸)、 EDT、TIS和水的混合液(TFA:EDT:TIS:H2O＝95:2:2:1)中，搅拌2小时；N2吹干溶剂后用乙醚洗涤5次，干燥得到粗产物；粗产物用HPLC 纯化，纯化后冷冻干燥，即得Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA。
粗产物用HPLC纯化，采用Kromasil 100-5C18柱，20mm×250mm， 10micron，UV＝220nm，流速＝15mL/min，流动相：A：H2O(0.1％ TFA)，B：乙腈(0.1％TFA)，B:20％-34％(0-40min)，tR＝25.180min。纯化后冷冻干燥得到白色粉末。MS：[M+H]+(m/z＝941.8)。
实施例2 Al18F标记的PSMA靶向抑制剂(即Al18F-NODA-PSMA) 的制备
以0.1mM,pH4.0的醋酸缓冲液为溶剂，配制2mM AlCl3溶液；取 0.1mM,pH4.0的醋酸缓冲液0.1mL，AlCl3溶液6μL，加入50-120MBq 18F-(0.1mL)室温放置5分钟，再加入5μLGlu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA溶液，110℃下反应10分钟，得到目标化合物。用Sep-pak C18Column Light分离纯化所述目标化合物，使目标化合物的放射性化学纯度大于99％。使用前Sep-pak柱需用10mL 无水乙醇和10mL高纯水活化，并用3mL生理盐水洗脱出放射性杂质，然后再用0.5mL乙醇洗脱出目标化合物Al18F-NODA-PSMA，95℃条件下N2吹干待用。
用Radio-HPLC测定标记率及放射化学纯度。分析条件： YMC-Pack ODS-A column，1.0mL/min；0.1％TFA Water(A)，0.1％ TFA Acetontrile(B)；0-10min(B)：15％-60％。图1结果显示经Sep-Pak C18Light柱纯化后Al18F-NODA-PSMA放射化学纯度大于99％。
实施例3 Al18F-NODA-PSMA标记化合物的体外稳定性分析
取20μL(1.3MBq)分离样品Al18F-NODA-PSMA加入到1mL生理盐水中，室温孵育5分钟、30分钟、1小时和2小时后取出适量溶液进行Radio-HPLC检测。结果表明Al18F-NODA-PSMA在室温中放置2小时后仍具有较高的放射化学纯度，孵育2小时后的HPLC检测结果见图2。
取20μL(1.3MBq)分离样品Al18F-NODA-PSMA加入到1mL 2％的人血清白蛋白(HAS)溶液中，于37℃孵育5分钟、30分钟和1小时后取出适量溶液进行Radio-HPLC检测。结果表明， Al18F-NODA-PSMA在HSA中37℃条件下孵育1小时后仍具有较高的放射化学纯度，孵育1小时后的HPLC结果见图3。
实施例4 Al18F-NODA-PSMA在正常小鼠体内的生物分布实验
取12只正常的Kunming雌性小鼠，分别通过尾静脉注射0.2mL Al18F-NODA-PSMA(18.5MBq)，分别于注射后50分钟、30分钟、60 分钟和120分钟后断颈处死，取其心、肝、肺、肾、脾、胃、肌肉、骨、血、大肠、小肠等有关组织和器官，擦净后称重，并用γ-Counter 测其放射性计数，每个时相3只小鼠。计算各组织的每克百分注射剂量(％ID/g)，结果见表1。
表1 Al18F-NODA-PSMA在正常小鼠体内的生物分布(ID％/g,x±SD,n＝3)
Figure BDA0001302323520000101
Figure BDA0001302323520000111
结果表明，Al18F-NODA-PSMA在血液中快速清除，迅速经肾脏通过尿路代谢出体内，在其他非靶器官如肝、肺、骨、肠等中的摄取较低且代谢快，具有良好的代谢性质。
实施例5 Al18F-NODA-PSMA在肿瘤小鼠体内的micro-PET显像实验
取右上肢腋下种植人PSMA高表达的LNCaP细胞的SCID裸鼠(十周龄)，肿瘤直径约1.0cm，通过尾静脉注射0.2mL Al18F-NODA-PSMA标记化合物(约18.5MBq)，于注射后90分钟进行 micro-PET显像。显像前将裸鼠在Summit AS-1-000-7小动物麻醉系统中用混有3％(体积分数)异氟烷的氧气麻醉，显像过程中维持含1％ (体积分数)异氟烷的氧气麻醉，显像时间为25分钟。结果见图4。
可见，在LNCaP模型鼠中，肿瘤部位有明显的放射性浓集，而且除肾脏和膀胱外，其他器官并没有明显的药物摄取。其在体内的代谢情况与在正常小鼠体内的生物分布结果一致。
本发明提供的新型前列腺特异性膜抗原靶向抑制剂，为正电子核素18F标记的放射性示踪剂Al18F-NODA-PSMA，可将其作为前列腺癌 PET分子探针，稳定性好，显像效果好，有利于早期前列腺癌的诊断与准确分期，并可以为前列腺癌的复发、局部及远处转移进行诊断。经进一步临床前动物水平研究证实，其有望应用于临床，成为理想的前列腺癌PET分子探针。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (5)

1.Al18F标记的PSMA靶向抑制剂，其特征在于，其为Al18F标记的用于结合前列腺特异性膜抗原的配体缀合物；
其中，用于结合前列腺特异性膜抗原的配体缀合物的结构如下：Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA，其中，Glu为谷氨酸，Urea为尿素，Lys为赖氨酸，Gla(Nal)为3-(2-萘基)-D-丙氨酸，Tran为氨甲环酸，NODA为双功能螯合剂。
2.权利要求1所述Al18F标记的PSMA靶向抑制剂在制备PET/CT分子诊断显像剂中的应用。
3.权利要求1所述Al18F标记的PSMA靶向抑制剂在制备靶向PSMA的肿瘤显像剂或治疗药物中的应用。
4.权利要求1所述Al18F标记的PSMA靶向抑制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、树脂的溶胀
向1g 2-氯三苯甲基氯树脂中加入15mL DMF，溶胀30分钟；
S2、反应产物C的制备
①将DMF和DCM按等体积混合，作为溶剂将3e.q.Fmoc-2-Nal-OH配制成15g/mL的溶液，加入到上述溶胀的树脂中，再加入10e.q.DIEA，N2保护条件下反应30分钟，甲醇密封30分钟，得到反应液A；
②将反应液A过滤，收集滤渣，向15g滤渣中加入1mL 20％的哌啶溶液，以脱去Fmoc保护基，分别吹泄反应管底部5分钟和15分钟得到反应产物B；
③监测上述反应，方法如下：取十几粒树脂，用乙醇洗3次后依次加入0.10mL 25％的茚三酮乙醇溶液，0.05mL20％的酚醛乙醇溶液和0.05mL吡啶，加热至105℃反应5分钟，变深蓝色为阳性反应；
④按照每克10ml的用量，将反应产物B依次用DCM、MeOH和DMF各洗涤两次；然后向反应产物B中加入3e.q.Fmoc-Tranexamic Acid的乙醇溶液，3e.q.HBTU和2mlDIEA，加入DMF溶解后，按照每克15ml的量加入DCM，反应30分钟，按照③的方法监测反应，得到反应产物C；按照每克10ml的用量，将反应产物C依次用DCM、MeOH和DMF各洗涤两次；
S3、中间体1的制备
①将反应产物C过滤，收集滤渣，向15g滤渣中加入1mL 20％的哌啶溶液，以脱去Fmoc保护基，分别吹泄反应管底部5分钟和15分钟，监测反应得到反应产物D；
按照每克10ml的用量，将反应产物D依次用DCM、MeOH和DMF各洗涤两次；然后向反应产物D中加入3e.q.NODA-bis(tbu)ester的乙醇溶液，3e.q.HBTU和2mlDIEA，加入DMF溶解后，按照每克15ml的量加入DCM，反应30分钟，监测反应，得到反应产物E；按照每克10ml的用量，将反应产物E依次用DCM、MeOH和DMF各洗涤两次；
②反应结束后将反应产物E从树脂上解离，具体方法为：将负载有反应产物E的树脂溶于三氟乙醇和DCM按3:7体积比混合的溶液中，冰浴下反应120分钟，过滤，收集滤液，旋转蒸发除去溶剂得到中间体1；
S4、中间体2的制备
向50mL 1.2 e.q.CDI的THF溶液中滴加1e.q.H2N-Glu(PMB)-OPMB的THF溶液，温度控制在20℃以下，搅拌过夜，反应结束后旋转蒸发除去溶剂；收集残渣，向残渣中加入丙酮和水按5:1体积比混合的溶液中，搅拌30分钟，过滤，干燥滤渣得到中间体2；
S5、中间体3的制备
向1e.q.中间体2的THF溶液中滴加1e.q.H2N-Lys(Boc)-OPMB的THF溶液，混合液在65℃下回流过夜，反应结束后除去溶剂，残渣用乙酸乙酯稀释并分别用水、10％柠檬酸溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥有机相30分钟后，过滤，浓缩得到中间体3；
S6、中间体4的制备
向中间体3的乙醇和乙酸乙酯溶液中加入2e.q.TsOH，温度控制在5℃以下，搅拌2小时；反应结束后加入乙酸乙酯稀释，分别用饱和NaHCO3溶液、10％柠檬酸溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥有机相30分钟，过滤，浓缩得到中间体4；
S7、Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA的制备
向1e.q.中间体1、0.2e.q.DMAP和1e.q.中间体4的DCM溶液中加入DCC的DCM溶液，温度控制在5℃以下，混合液搅拌30分钟后，在室温条件下搅拌过夜，反应结束后，除去溶剂得到中间体5；将中间体5溶于TFA、EDT、TIS和水的混合液中，搅拌2小时；N2吹干溶剂后用乙醚洗涤5次，干燥得到粗产物；粗产物用HPLC纯化，纯化后冷冻干燥，即得Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA；其中，TFA、EDT、TIS和水的混合液是由TFA、EDT、TIS和水按95:2:2:1体积比混合而成；
S8、Al18F标记的PSMA靶向抑制剂的制备
以0.1mM,pH4.0的醋酸缓冲液为溶剂，配制2mM AlCl3溶液；取0.1mM,pH4.0的醋酸缓冲液0.1mL，AlCl3溶液6μL，加入50-120MBq18F-0.1mL，室温放置5分钟，再加入5μL Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA溶液，110℃下反应10分钟，得到目标化合物，即Al18F标记的PSMA靶向抑制剂；其中，Glu-Urea-Lys-Gla(Nal)-Tran-NODA溶液的浓度为4mmol/mL，以0.1M,pH4.0的NaAc缓冲液为溶剂；
S9、用Sep-pak C18 Column Light分离纯化所述目标化合物，使目标化合物的放射性化学纯度大于99％。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤S9中，使用前Sep-pak C18 ColumnLight需用无水乙醇和高纯水活化，并用生理盐水洗脱放射性杂质，最后用乙醇洗脱出目标化合物。
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