CN107353205A - 瘤果黑种草籽中的酯类化合物及其制备方法和用途 - Google Patents
瘤果黑种草籽中的酯类化合物及其制备方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107353205A CN107353205A CN201710622006.6A CN201710622006A CN107353205A CN 107353205 A CN107353205 A CN 107353205A CN 201710622006 A CN201710622006 A CN 201710622006A CN 107353205 A CN107353205 A CN 107353205A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ester type
- nigella glandulifera
- type compound
- glandulifera freyn
- acetone
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 59
- 241001518085 Nigella glandulifera Species 0.000 title claims abstract description 51
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 title claims abstract description 48
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 90
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 19
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims abstract description 18
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims abstract description 8
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims abstract description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 96
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical class CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 63
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 25
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 24
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 claims description 16
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 12
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 11
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 8
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 8
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 5
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 5
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims 2
- 102000002727 Protein Tyrosine Phosphatase Human genes 0.000 claims 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 claims 1
- 108020000494 protein-tyrosine phosphatase Proteins 0.000 claims 1
- 102100033001 Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 1 Human genes 0.000 abstract description 10
- 108010015847 Non-Receptor Type 1 Protein Tyrosine Phosphatase Proteins 0.000 abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 abstract description 2
- -1 esters compound Chemical class 0.000 abstract description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract description 2
- 101001087394 Homo sapiens Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 1 Proteins 0.000 abstract 1
- 244000090896 Nigella sativa Species 0.000 description 9
- VNWKTOKETHGBQD-YPZZEJLDSA-N carbane Chemical compound [10CH4] VNWKTOKETHGBQD-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 9
- 102100028516 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase U Human genes 0.000 description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 6
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 6
- 235000008541 fennel flower Nutrition 0.000 description 5
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 4
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical class CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000016698 Nigella sativa Nutrition 0.000 description 3
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 3
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 3
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- SXKBTDJJEQQEGE-UHFFFAOYSA-N 3-(3,5-dibromo-4-hydroxy-benzoyl)-2-ethyl-benzofuran-6-sulfonic acid [4-(thiazol-2-ylsulfamoyl)-phenyl]-amide Chemical compound CCC=1OC2=CC(S(=O)(=O)NC=3C=CC(=CC=3)S(=O)(=O)NC=3SC=CN=3)=CC=C2C=1C(=O)C1=CC(Br)=C(O)C(Br)=C1 SXKBTDJJEQQEGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001269238 Data Species 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 235000007413 Nigella arvensis Nutrition 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000003801 protein tyrosine phosphatase 1B inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl Phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005666 Apolipoprotein A-I Human genes 0.000 description 1
- 108010059886 Apolipoprotein A-I Proteins 0.000 description 1
- 102000053028 CD36 Antigens Human genes 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 102100024295 Maltase-glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- 240000005912 Nigella damascena Species 0.000 description 1
- 235000008750 Nigella damascena Nutrition 0.000 description 1
- 241001529246 Platymiscium Species 0.000 description 1
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 1
- 108091005487 SCARB1 Proteins 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 description 1
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- VIYFPAMJCJLZKD-UHFFFAOYSA-L disodium;(4-nitrophenyl) phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][N+](=O)C1=CC=C(OP([O-])([O-])=O)C=C1 VIYFPAMJCJLZKD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000035619 diuresis Effects 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000016507 interphase Effects 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000001711 nigella sativa Substances 0.000 description 1
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000009938 salting Methods 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000035900 sweating Effects 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
- C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
- C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
- C07C69/732—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids of unsaturated hydroxy carboxylic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及一种瘤果黑种草籽中的酯类合物及其制备方法和用途，该方法以瘤果黑种草籽为原料，利用有机溶剂进行提取，丙酮超声溶解提取物、反复的正相硅胶柱层析法、正相薄层板分析法和半制备型高效液相色谱分离得到瘤果黑种草籽中酯类化合物，活性实验结果证明：该瘤果黑种草籽中的酯类化合物具有抑制蛋白质酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）酶活性的作用，可用于糖尿病治疗药物及保健品的开发。
Description
技术领域
本发明涉及一种瘤果黑种草籽中新的酯类化合物及其制备方法和用途，具体说是以瘤果黑种草籽为原料，制备分离得到一个具有抑制蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)活性的酯类化合物，及其在糖尿病治疗药物及保健品开发中的用途。
背景技术
瘤果黑种草属毛茛科黑种草属金莲花亚科植物，为多年生至一年生草本，少数为藤本或灌木，主要产于新疆，是新疆特有的植物资源，同时也是维吾尔医药常用药材。具有刺激消化、驱风止痛、补肾健脑、利尿、发汗和健胃以及平喘等作用，其作为药用植物，现已被收录于《中华人民共和国药典》、《中国药用植物志》、《维吾尔药志》。
黑种草属(Nigella)约有22种，药用植物除瘤果黑种草(NigellaglanduliferaFreyn)外，还包括果黑种草(Nigella sativa)和黑种草(Nigella damascenaL.)。目前，已经从黑种草属植物中分离得到的化合物种类有：皂苷类、生物碱类、黄酮类、苯丙素类、挥发油类、甾体类、酚类、多糖、饱和脂肪酸以及不饱和脂肪酸类。通过对黑种草属植物化学成分的研究，发现其具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗高血压、降血糖、改善血脂代谢、镇痛等多种药理活性。信学雷等通过对瘤果黑种草籽提取物组分的研究发现，某些提取物组分具有促进Apo-AI与SR-BI之间相互作用的功效，从而促进胆固醇的逆转运，达到降低血脂的作用；同时，以降糖活性为指导，分离纯化组分中的成分，证实了瘤果黑种草籽中存在具有抑制蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)、α-葡萄糖苷酶、蛋白非酶糖化活性的成分。
发明内容
本发明的目的是，提供一种瘤果黑种草籽中的酯类化合物及其制备方法和用途，该方法以瘤果黑种草籽为原料，利用有机溶剂进行提取，丙酮超声溶解提取物、反复的正相硅胶柱层析法、正相薄层板分析法和半制备型高效液相色谱分离得到瘤果黑种草籽中新的酯类化合物，活性实验结果证明，该瘤果黑种草籽中的酯类化合物具有抑制蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)酶活性的作用，可用于糖尿病治疗药物及保健品的开发。
本发明所述的一种瘤果黑种草籽中的酯类化合物，该化合物的结构为：
其中，该化合物的名称为：丁基(10E，12E)-9-羟基-十八碳-10,12-二烯酸酯。
所述瘤果黑种草籽中的酯类化合物的制备方法，按下列步骤进行：
a、将瘤果黑种草籽粉碎，用石油醚冷浸脱脂5次，脱脂后的残渣充分干燥，用体积浓度为50-100％的乙醇、甲醇或丙酮在室温下进行冷浸或渗漉提取，或加热回流提取，浓缩得总提物，再将浓缩物用丙酮超声溶解5-10次，滤去不溶物，收集丙酮部位，浓缩得丙酮部位；
b、将步骤a中得到的丙酮部位利用正相硅胶柱层析，以体积比为10:1，5:1，1:1的正己烷:乙酸乙酯为洗脱溶剂进行依次梯度洗脱，再用体积比为5:1，1:1，1:4正己烷:丙酮为洗脱溶剂进行梯度洗脱，收集正己烷:乙酸乙酯10:1和5:1的洗脱流分合并，得到含化合物(Ⅰ)的流分；
c、将步骤b中得到的得到含化合物(Ⅰ)的流分进行正相硅胶柱层析，以体积比为100:3，100:7，100:9，100:11，100:13，100:15，100:17，100:19，100:25的正己烷:乙酸乙酯为溶剂进行梯度洗脱，收集正己烷:乙酸乙酯体积比为100:7的洗脱流分，再将收集的流分用半制备型高效液相色谱进行分离，浓缩得到瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)，名称为：丁基(10E，12E)-9-羟基-十八碳-10,12-二烯酸酯。
所述的瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)作为抑制蛋白质酪氨酸磷酸酶1B的作用。
所述的瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)在制备治疗糖尿病药物中的用途。
所述的瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)在制备糖尿病保健品中的用途。
本发明所述的瘤果黑种草籽中的酯类化合物及其制备方法和用途，通过所述方法获得的瘤果黑种草籽中的酯类化合物，活性测定实验结果表明：所述瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)对蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)酶活性的抑制作用呈现为剂量依赖型。实验结果说明，该酯类化合物具有降糖活性。
本发明所述的瘤果黑种草籽中的酯类化合物，结构鉴定过程如下：
化合物(Ⅰ)名称：丁基(10E，12E)-9-羟基-十八碳-10,12-二烯酸酯，理化性质及光谱数据结果和结构鉴定：淡黄色液体，[α]D 20+3.0(c 0.1,MeOH)；UV(MeOH)λmax(logε)280(0.90)、223(1.72)和210(2.07)，HR-ESI(-)MS：[M-H]-351.2904：分子式：C22H40O3；1H-NMR(CD3OD，400MHz)，其1H和13C NMR数据归属见表1[400MHz(1H)，100MHz(13C)，溶剂：CD3OD]。
表1.化合物(Ⅰ)的1H和13C NMR数据[δ(ppm),J(Hz)]
附图说明
图1为本发明瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)的1H核磁共振谱图；
图2为本发明瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)的13C核磁共振谱图。
具体实施方式
实施例1
a、将2kg瘤果黑种草籽粉碎，用石油醚冷浸脱脂5次，脱脂后的残渣充分干燥，并分别用体积浓度为100％和50％乙醇，温度80℃加热回流提取，将提取液合并，浓缩，再将浓缩物用丙酮超声溶解5次，滤去不溶物，收集丙酮部位，浓缩得丙酮部位5.0g；
b、将步骤a中得到的丙酮部位利用正相硅胶柱层析，以体积比为10:1，5:1，1:1的正己烷:乙酸乙酯为洗脱溶剂进行依次梯度洗脱，再用体积比为5:1，1:1，1:4正己烷:丙酮为洗脱溶剂进行梯度洗脱，收集正己烷:乙酸乙酯10:1和5:1的洗脱流分合并，得到含化合物(Ⅰ)的流分；
c、将步骤b中得到的得到含化合物(Ⅰ)的流分进行正相硅胶柱层析，以体积比为100:3，100:7，100:9，100:11，100:13，100:15，100:17，100:19，100:25的正己烷:乙酸乙酯为溶剂进行梯度洗脱，收集正己烷:乙酸乙酯体积比为100:7的洗脱流分，再将收集的流分用半制备型高效液相色谱进行分离，分离条件：体积比为75:25的乙腈-H2O，流速3.5ml/min，收集保留时间为30分钟的流分，浓缩得到瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)，名称为：丁基(10E，12E)-9-羟基-十八碳-10,12-二烯酸酯。
实施例2
a、将2kg瘤果黑种草籽粉碎，用石油醚冷浸脱脂5次，脱脂后的残渣充分干燥，并用体积浓度为90％和60％乙醇室温下渗漉提取，将提取液合并，浓缩，再将浓缩物用丙酮超声溶解7次，滤去不溶物，收集丙酮部位，浓缩得丙酮部位4.8g；
b、将步骤a中得到的丙酮部位利用正相硅胶柱层析，以体积比为10:1，5:1，1:1的正己烷:乙酸乙酯为洗脱溶剂进行依次梯度洗脱，再用体积比为5:1，1:1，1:4正己烷:丙酮为洗脱溶剂进行梯度洗脱，收集正己烷:乙酸乙酯10:1和5:1的洗脱流分合并，得到含化合物(Ⅰ)的流分；
c、将步骤b中得到的得到含化合物(Ⅰ)的流分进行正相硅胶柱层析，以体积比为100:3，100:7，100:9，100:11，100:13，100:15，100:17，100:19，100:25的正己烷:乙酸乙酯为溶剂进行梯度洗脱，收集正己烷:乙酸乙酯体积比为100:7的洗脱流分，再将收集的流分用半制备型高效液相色谱进行分离，分离条件：体积比为75:25的乙腈-H2O，流速3.5ml/min，收集保留时间为30分钟的流分，浓缩得到瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)，名称为：丁基(10E，12E)-9-羟基-十八碳-10,12-二烯酸酯。
实施例3
a、将2kg瘤果黑种草籽粉碎，用石油醚冷浸脱脂5次，脱脂后的残渣充分干燥，并用体积浓度为100％和60％甲醇冷浸提取，将提取液合并，浓缩，再将浓缩物用丙酮超声溶解8次，滤去不溶物，收集丙酮部位，浓缩得丙酮部位5.1g；
b、将步骤a中得到的丙酮部位利用正相硅胶柱层析，以体积比为10:1，5:1，1:1的正己烷:乙酸乙酯为洗脱溶剂进行依次梯度洗脱，再用体积比为5:1，1:1，1:4正己烷:丙酮为洗脱溶剂进行梯度洗脱，根据薄层色谱法，收集正己烷:乙酸乙酯10:1和5:1的洗脱流分合并，得到含化合物(Ⅰ)的流分；
c、将步骤b中得到的得到含化合物(Ⅰ)的流分进行正相硅胶柱层析，以体积比为100:3，100:7，100:9，100:11，100:13，100:15，100:17，100:19，100:25的正己烷:乙酸乙酯为溶剂进行梯度洗脱，收集正己烷:乙酸乙酯体积比为100:7的洗脱流分，再将收集的流分用半制备型高效液相色谱进行分离，分离条件：体积比为75:25的乙腈-H2O，流速3.5ml/min，收集保留时间为30分钟的流分，浓缩得到瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)，名称为：丁基(10E，12E)-9-羟基-十八碳-10,12-二烯酸酯。
实施例4
a、将2kg瘤果黑种草籽粉碎，用石油醚冷浸脱脂5次，脱脂后的残渣充分干燥，并用体积浓度为90％和50％甲醇温度80℃加热回流提取，将提取液合并，浓缩，再将浓缩物用丙酮超声溶解10次，滤去不溶物，收集丙酮部位，浓缩得丙酮部位5.15g；
b、将步骤a中得到的丙酮部位利用正相硅胶柱层析，以体积比为10:1，5:1，1:1的正己烷:乙酸乙酯为洗脱溶剂进行依次梯度洗脱，再用体积比为5:1，1:1，1:4正己烷:丙酮为洗脱溶剂进行梯度洗脱，根据薄层色谱法，收集正己烷:乙酸乙酯10:1和5:1的洗脱流分合并，得到含化合物(Ⅰ)的流分；
c、将步骤b中得到的得到含化合物(Ⅰ)的流分进行正相硅胶柱层析，以体积比为100:3，100:7，100:9，100:11，100:13，100:15，100:17，100:19，100:25的正己烷:乙酸乙酯为溶剂进行梯度洗脱，收集正己烷:乙酸乙酯体积比为100:7的洗脱流分，再将收集的流分用半制备型高效液相色谱进行分离，分离条件：体积比为75:25的乙腈-H2O，流速3.5ml/min，收集保留时间为30分钟的流分，浓缩得到瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)，名称为：丁基(10E，12E)-9-羟基-十八碳-10,12-二烯酸酯。
实施例5
a、将2kg瘤果黑种草籽粉碎，用石油醚冷浸脱脂5次，脱脂后的残渣充分干燥，并用体积浓度为70％和50％的丙酮温度80℃加热回流提取，将提取液合并，浓缩，再将浓缩物用丙酮超声溶解10次，滤去不溶物，收集丙酮部位，浓缩得丙酮部位5.1g；
b、将步骤a中得到的丙酮部位利用正相硅胶柱层析，以体积比为10:1，5:1，1:1的正己烷:乙酸乙酯为洗脱溶剂进行依次梯度洗脱，再用体积比为5:1，1:1，1:4正己烷:丙酮为洗脱溶剂进行梯度洗脱，根据薄层色谱法，收集正己烷:乙酸乙酯10:1和5:1的洗脱流分合并，得到含化合物(Ⅰ)的流分；
c、将步骤b中得到的得到含化合物(Ⅰ)的流分进行正相硅胶柱层析，以体积比为100:3，100:7，100:9，100:11，100:13，100:15，100:17，100:19，100:25的正己烷:乙酸乙酯为溶剂进行梯度洗脱，收集正己烷:乙酸乙酯体积比为100:7的洗脱流分，再将收集的流分用半制备型高效液相色谱进行分离，分离条件：体积比为75:25的乙腈-H2O，流速3.5ml/min，收集保留时间为30分钟的流分，浓缩得到瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)，名称为：丁基(10E，12E)-9-羟基-十八碳-10,12-二烯酸酯。
实施例6
a、将2kg瘤果黑种草籽粉碎，用石油醚冷浸脱脂5次；脱脂后的残渣充分干燥，并用体积浓度为100％和60％丙酮室温渗漉提取，将提取液合并，浓缩，再将浓缩物用丙酮超声溶解10次，滤去不溶物，收集丙酮部位，浓缩得丙酮部位4.9g；
b、将步骤a中得到的丙酮部位利用正相硅胶柱层析，以体积比为10:1，5:1，1:1的正己烷:乙酸乙酯为洗脱溶剂进行依次梯度洗脱，再用体积比为5:1，1:1，1:4正己烷:丙酮为洗脱溶剂进行梯度洗脱，根据薄层色谱法，收集正己烷:乙酸乙酯10:1和5:1的洗脱流分合并，得到含化合物(Ⅰ)的流分；
c、将步骤b中得到的得到含化合物(Ⅰ)的流分进行正相硅胶柱层析，以体积比为100:3，100:7，100:9，100:11，100:13，100:15，100:17，100:19，100:25的正己烷:乙酸乙酯为溶剂进行梯度洗脱，收集正己烷:乙酸乙酯体积比为100:7的洗脱流分，再将收集的流分用半制备型高效液相色谱进行分离，分离条件：体积比为75:25的乙腈-H2O，流速3.5ml/min，收集保留时间为30分钟的流分，浓缩得到瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)，名称为：丁基(10E，12E)-9-羟基-十八碳-10,12-二烯酸酯。
实施例7
瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)抑制酪氨酸磷酸酶1B酶活性的测试：
1.筛选方法：对-硝基苯基磷酸二钠(pNPP)作为底物，以阳性药物3-(3,5-二溴-4-羟基-苯甲酰基)-2-乙基-苯并呋喃-6-磺酸基-(4-(噻唑-2-磺酸胺基)-苯胺为对照，利用酶标仪进行蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制剂的高通量筛选，根据蛋白酪氨酸磷酸酶1B水解产物的磷酸基团而产生颜色反应来测定蛋白酪氨酸磷酸酶1B的活性；
1.1蛋白酪氨酸磷酸酶1B工作液浓度的确定：
取0.5-1μL酶，用300μL磷酸缓冲液稀释并充分混匀；取179μL稀释好的酶液于96孔板，再加1μL二甲亚砜(溶剂空白)，震匀后放置5min；5min后，加入20μL底物-35mM对硝基苯磷酸二钠盐，充分震匀后室温避光反应30min；酶标仪(SpectraMax MD5，美国分子仪器公司)405nm处检测OD值，若OD值为0.8±0.1，此时的酶溶液浓度作为工作液浓度，若OD值在0.8±0.1范围之外，则根据OD微调酶的加入量；
1.2筛选步骤：
根据酶工作液浓度配制所需体积的酶工作液：取179μL蛋白酪氨酸磷酸酶1B酶工作液加入96孔板，再加1μL样品(或者二甲亚砜做空白)，震匀后反应5min，再过5min后，加入20μL对硝基苯磷酸二钠盐溶液，震匀后室温避光反应30min；酶标仪405nm处检测OD值，蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制实验设计如表2：
表2蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制实验设计
阳性对照化合物为：3-(3,5-二溴-4-羟基-苯甲酰基)-2-乙基-苯并呋喃-6-磺酸基-(4-(噻唑-2-磺酸胺基)-苯胺；
抑制率(％)＝[1-(样品组–样品空白组)/(酶活组–酶活空白组)]×100％；
表3瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B酶活性的实验结果
| 样品 | 半数抑制浓度(微摩尔) |
| 化合物(Ⅰ) | 7.38±0.14 |
| 蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制剂 | 1.81±0.02 |
由表3可知，瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)具有抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B酶活性的作用。
Claims (5)
1.一种瘤果黑种草籽中的酯类化合物，其特征在于该化合物的结构为：
（Ⅰ）
其中，该化合物的名称为：丁基（10E，12E）-9-羟基-十八碳-10,12-二烯酸酯。
2.根据权利要求1所述瘤果黑种草籽中的酯类化合物的制备方法，其特征在于按下列步骤进行：
a、将瘤果黑种草籽粉碎，用石油醚冷浸脱脂5次，脱脂后的残渣充分干燥，用体积浓度为50-100%的乙醇、甲醇或丙酮在室温下进行冷浸或渗漉提取，或加热回流提取，浓缩得总提物，再将浓缩物用丙酮超声溶解5-10次，滤去不溶物，收集丙酮部位，浓缩得丙酮部位；
b、将步骤a中得到的丙酮部位利用正相硅胶柱层析，以体积比为10:1，5:1，1:1的正己烷:乙酸乙酯为洗脱溶剂进行依次梯度洗脱，再用体积比为5:1，1:1，1:4正己烷:丙酮为洗脱溶剂进行梯度洗脱，收集正己烷:乙酸乙酯10:1和5:1的洗脱流分合并，得到含化合物(Ⅰ)的流分；
c、将步骤b中得到的得到含化合物(Ⅰ)的流分进行正相硅胶柱层析，以体积比为100:3，100:7，100:9，100:11，100:13，100:15，100:17，100:19，100:25的正己烷:乙酸乙酯为溶剂进行梯度洗脱，收集正己烷:乙酸乙酯体积比为100:7的洗脱流分，再将收集的流分用半制备型高效液相色谱进行分离，浓缩得到瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)，名称为：丁基（10E，12E）-9-羟基-十八碳-10,12-二烯酸酯。
3.根据权利要求1 所述的瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)在抑制蛋白质酪氨酸磷酸酶1B中的作用。
4.根据权利要求1 所述的瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)在制备治疗糖尿病药物中的用途。
5.根据权利要求1 所述的瘤果黑种草籽中的酯类化合物(Ⅰ)在制备糖尿病保健品中的用途。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710622006.6A CN107353205B (zh) | 2017-07-27 | 2017-07-27 | 瘤果黑种草籽中的酯类化合物及其制备方法和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710622006.6A CN107353205B (zh) | 2017-07-27 | 2017-07-27 | 瘤果黑种草籽中的酯类化合物及其制备方法和用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107353205A true CN107353205A (zh) | 2017-11-17 |
| CN107353205B CN107353205B (zh) | 2020-02-07 |
Family
ID=60285040
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710622006.6A Active CN107353205B (zh) | 2017-07-27 | 2017-07-27 | 瘤果黑种草籽中的酯类化合物及其制备方法和用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107353205B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109721880A (zh) * | 2018-11-22 | 2019-05-07 | 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） | 一种防霉耐腐木塑复合材料及其制备方法 |
| CN111019010A (zh) * | 2019-12-31 | 2020-04-17 | 河南大学 | Nigella sativa种籽多糖、提取方法和制备治疗2型糖尿病药物的应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004005550A2 (en) * | 2002-07-04 | 2004-01-15 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Method of screening for antidiabetic agents |
-
2017
- 2017-07-27 CN CN201710622006.6A patent/CN107353205B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004005550A2 (en) * | 2002-07-04 | 2004-01-15 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Method of screening for antidiabetic agents |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| HARUYA TAKAHASHI ET AL.: "Rice Koji Extract Enhances Lipid Metabolism through Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Alpha (PPARα) Activation in Mouse Liver", 《J. AGRIC. FOOD CHEM.》 * |
| HIROSHI YOKOI ET AL.: "Peroxisome proliferator-activated receptor γ ligands isolated from adlay seed (Coix lacryma-jobi L. var. ma-yuen stapf.)", 《BIOL. PHARM. BULL.》 * |
| XIXI LIU ET AL.: "A new fatty acid ester from Nigella sativa var. hispidula Boiss showing potent antiprotein tyrosine phosphatase 1B activity", 《NATURAL PRODUCT RESEARCH》 * |
| 刘定权等: "中国南海总状蕨藻的脂肪酸类化学成分和生物活性研究", 《中国海洋药物》 * |
| 阿依古丽·塔什波拉提等: "黑种草籽油的超临界CO2萃取及其GC-MS分析", 《精细化工》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109721880A (zh) * | 2018-11-22 | 2019-05-07 | 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） | 一种防霉耐腐木塑复合材料及其制备方法 |
| CN109721880B (zh) * | 2018-11-22 | 2021-10-26 | 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） | 一种防霉耐腐木塑复合材料及其制备方法 |
| CN111019010A (zh) * | 2019-12-31 | 2020-04-17 | 河南大学 | Nigella sativa种籽多糖、提取方法和制备治疗2型糖尿病药物的应用 |
| CN111019010B (zh) * | 2019-12-31 | 2021-10-29 | 河南大学 | Nigella sativa种籽多糖、提取方法和制备治疗2型糖尿病药物的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107353205B (zh) | 2020-02-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Beveridge et al. | Phytosterol content in American ginseng seed oil | |
| Singh et al. | Phytomedicinal importance of Saraca asoca (Ashoka): an exciting past, an emerging present and a promising future | |
| Guo et al. | Characterization of triterpenic acids in fruits of Ziziphus species by HPLC-ELSD-MS | |
| Sonkamble et al. | Antidiabetic potential and identification of phytochemicals from Tinospora cordifolia | |
| JP2006512330A (ja) | 竹からの抽出のトリテルペノイドサポゲニン化合物の製法と用途 | |
| US9173912B2 (en) | Cistus extract containing enriched secondary plant ingredients | |
| Piyaviriyakul et al. | HPTLC simultaneous quantification of triterpene acids for quality control of Plantago major L. and evaluation of their cytotoxic and antioxidant activities | |
| WO2012100612A1 (zh) | 苦丁茶冬青叶的提取方法、总皂苷及其用途 | |
| CN102058678A (zh) | 一种治疗脂肪肝的药物或保健食品组合物 | |
| Gafner et al. | Evaluation of the efficiency of three different solvent systems to extract triterpene saponins from roots of Panax quinquefolius using high-performance liquid chromatography | |
| Puniani et al. | Ethnopharmacology of Souroubea sympetala and Souroubea gilgii (Marcgraviaceae) and identification of betulinic acid as an anxiolytic principle | |
| Chen et al. | Phytochemical analysis, UPLC-ESI-Orbitrap-MS analysis, biological activity, and toxicity of extracts from Tripleurospermum limosum (Maxim.) Pobed | |
| Yuliani et al. | Optimization of genistein and daidzein extraction from a tempeh-fermented product of soybean | |
| CN107353205A (zh) | 瘤果黑种草籽中的酯类化合物及其制备方法和用途 | |
| CN106728210A (zh) | 一种广陈皮多甲氧基黄酮有效部位及在治疗高脂血症中的应用 | |
| CN103554209B (zh) | 从三七中制备人参皂苷Rg1的方法 | |
| CN109942385B (zh) | 芭蕉根中三个新化合物及提取分离方法 | |
| CN107298642A (zh) | 一种6‑姜烯酚的提取纯化方法 | |
| Charles Dorni et al. | UHPLC–Q-ToF-MS-guided enrichment and purification of triterpenoids from Centella asiatica (L.) extract with macroporous resin | |
| Mgbeje et al. | Evaluation of phytochemical composition of n-hexane fractions of Heinsia crinita crude leave extracts using gas chromatography-mass spectroscopy (GC-MS). World J | |
| CN109709249A (zh) | 一种基于玄参多活性成分检测的综合质量评价方法 | |
| CN101768081A (zh) | 一种脂肪酸合成酶抑制剂及其应用 | |
| CN101323605A (zh) | 异苯并呋喃酮类化合物的制备方法 | |
| Song et al. | A metabolomics approach to identify factors influencing their activity relative to oleanolic acid contents in Korean mistletoe types | |
| Ismail et al. | Solvent partition for terpenoid rich fraction from crude extract of Eurycoma longifolia |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |