CN107334097B - 一种海参浸提膏的制备方法和应用 - Google Patents
一种海参浸提膏的制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种海参浸提膏的制备方法和应用，属于海参加工方法技术领域。所述海参浸提膏是由干制光参经复水、酶解、浸渍和浓缩制备而成；所述浸渍为：将酶解海参磨浆后，放入高压反应釜，按海参与去离子水的添加比1∶2.5‑1∶6加入去离子水，控制温度90‑120℃，压力0.15‑0.25MPa，间歇式微波辅助浸提3h，微波功率1000W，频率8000MHz，微波周期频率10s/5min。本发明制备海参浸提膏的方法可以减少发泡过程中的营养的损失，保留海参中大多数的营养功能成分，加工过程中脱除重金属等有害成分，使海参的营养达到最大化，使低值海参得到了高值化利用。
Description
技术领域
本发明属于海参加工方法技术领域，具体涉及一种海参浸提膏的制备方法和应用。
背景技术
海参素有海中人参之称，是珍贵的食品和名贵的海洋生物，具有较高的保健价值。海参富含蛋白质、氨基酸、脂肪酸、维生素以及多种常量元素和微量元素，其中人体必需氨基酸含量远高于其他同类海产品；海参同时含有多肽、多糖等多种生理活性物质。
海参品种繁多，据资料记载，全世界约有1100多种海参。据海参背面是否有圆锥肉刺状的疣足分为“刺参类”和“光参类”两大类。其中“刺参类”主要是刺参科的种类，以北方刺参最佳。“光参类”主要有海参科、瓜参科和芋参科的种类，主产于南方，海参属食、药两用，是世界上少有的高蛋白、低脂肪、低糖，因此，海参常被用来制作干海参、海参粉、口服液、药品和保健品等高附加值的产品，即食海参最受消费者的青睐。但由于海参加工方法不同,会导致海参产品营养成分的变化。
光参是我国南海普通的食用海参，蛋白质含量丰富，营养价值与刺参不相上下，但因体壁较硬，腥味较重，品质较差，食用质量较差，市场价格与刺参相比差几十倍。光身之所以腥味重，主要是因为其体内大量的泥沙和污浊残留，及其体外包裹着外层表皮，处理起来非常麻烦，所以鲜食品质不佳，按现有水产品加工技术条件难以改善光参食用品质，以致企业无法加工利用营养较丰富廉价的光参，有些企业仅将其加工成蛋白饲料，甚至以废弃物丢掉，造成资源浪费，加工利用率低，其附加值无法体现。
发明内容
本发明的目的在于提供一种海参浸提膏的制备方法，以及利用该方法制备的浸提物制备保健食品的方法。
为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：
一种海参浸提液，是由干制光参经复水、酶解和浸渍制备而成。
在上述方案的基础上，所述浸渍为：将酶解海参磨浆后，放入高压反应釜，按海参与去离子水的添加比1∶2.5-1∶6加入去离子水，控制温度90-120℃，压力0.15-0.25MPa，间歇式微波辅助浸提3h，微波功率1000W，频率8000MHz，微波周期频率10s/5min。
在上述方案的基础上，所述的复水为超声波、热处理、超声波的三段复水法，步骤如下：
a.将淡干海参于20-30℃去离子水中浸泡，同时辅以超声波，超声波功率400-600W、发射频率为10-15KHz、脉冲周期频率为5-8次/s，维持pH 6-7，处理15-30min，获得第一段复水后的海参；
b.将第一段复水后的海参于低压反应釜中，70℃、-0.8MPa的条件下，维持pH 6-7，热处理30min后取出，获得第二段复水后的海参；
c.将第二段复水后的海参重新置于超声波反应釜中，超声波功率800-1000W、发射频率25-40KHz、脉冲周期频率为8-12次/s，控制温度30-40℃，压力-0.6MPa，维持pH 6-7，处理12h。
在上述方案的基础上，所述的酶解为：将复水后的海参置于超声低压反应釜中，按照体积分数0.01％-0.1％的量加入木瓜蛋白酶与中性蛋白酶按1∶1.5比例混合的复合蛋白酶，超声波功率500W、发射频率为15KHz、脉冲周期频率为6-10次/s，30-40℃，维持pH 6-7，-0.6MPa条件下，处理15min，除去表皮及清理内脏残留。
一种海参浸提膏，由上述方法制备的海参浸提液经四次浓缩制备而成；所述的浓缩为：第一次浓缩设置条件为40～60℃，-0.9～-0.8MPa，浓缩至干重为1.5～2％；第二次浓缩条件为60～80℃，-0.9～-0.8MPa；第三次浓缩条件为60～80℃，-0.9～-0.8MPa；第二次和第三次浓缩后海参液干重为8～15％；第四次浓缩条件为40～60℃，-0.9～-0.8MPa，浓缩至水分含量为60％-80％，冷凝即成膏状，即得。
在上述方案的基础上，所述海参浸提膏的应用于制备即食海参营养制品；所述即食海参营养制品包括即食海参果冻、即食海参营养棒。
一种即食海参果冻，由上述海参浸提膏、大枣浸膏、枸杞浸膏、奇亚籽、异麦芽糖酮糖醇、亚麻籽油、葵花籽油、蜂蜜和玫瑰浸膏按1000∶200∶20∶1∶150∶1∶1∶10∶1的质量比制备而成。
在上述方案的基础上，所述即食海参果冻的制备方法，步骤如下：准确称量各组分并混合搅匀后，于70℃，-0.08MPa，浓缩至水分含量占50％-70％，出料，在模具中冷却成型，即得海参果冻。
本发明即食海参果冻的组方原理如下：
海参性咸、温，入心、肾二经。补肾益精，养血淘燥。治精血亏损，虚弱劳怯，阳痿，梦遗，小便频数，肠燥便艰。《随息居饮食谱》："滋阴，补血，健阳，润燥，调经，养胎，利产。
红枣，又名大枣。特点是维生素含量非常高，有“天然维生素丸”的美誉，具有滋阴补阳，补血之功效。
枸杞，甘，平。归肝、肾经。主要功能：滋补肝肾，益精明目。用于虚劳精亏，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，阳萎遗精，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明。
玫瑰：甘、微苦，温。归肝、脾经。行气解郁，活血，止痛，本品又入血分，具有和血散瘀作用，用于肝胃气痛，食少呕恶，月经不调，以及损伤瘀血等症。
蜂蜜：味甘，性平；归脾、胃、肺、大肠经。调补脾胃、缓急止痛、润肺止咳、润肠通便、润肤生肌、解毒。主脘腹虚痛；肺燥咳嗽；肠燥便秘；目赤；口疮；溃疡不敛。
亚麻籽油和葵花籽油：富含欧米伽-3脂肪酸，研究证明，欧密茄-3脂肪酸有降血脂，预防心脑血管疾病、有益肠道、保护视力、提高认知力，是大脑细胞的营养剂。
该配方制成的海参果冻，从体质上可以养血活血、补肾益精、滋阴健阳；功能上可以抗氧化、延缓皮肤衰老，清除自由基等功效。
一种即食海参营养棒，由上述海参浸提膏、白砂糖、大枣、核桃、当归浸提液、党参浸提液、黄芪浸提液和黑芝麻按1000∶1000∶1000∶1000∶1∶1∶1∶1000的质量比制备而成。
在上述方案的基础上，所述即食海参营养棒的制备方法，步骤如下：
海参浸提膏置于敞口搅拌加热器中，加入白砂糖熬制至挂旗，加入大枣切片、烘干核桃、当归浸提液、党参浸提液和黄芪浸提液，熬至略成型后，加入黑芝麻，搅拌并熬至水分含量20％后取出，置于模具中冷却成型，置于冷风干燥箱中，干燥至水分含量15％后包装，杀菌，得到即食海参营养棒。
本发明即食海参营养棒的组方原理如下：
海参：《纲目拾遗》云，海参生百脉血；《本草求原》云：海参润五脏，滋精利水。因此海参有补肾益精、滋阴健阳，补血润燥、调经祛劳、养胎利产等阴阳双补功效。能提高男性内分泌能力，提高女性的新陈代谢，促进性激素分泌能力，提高性功能的功效。
当归：宋代陈承《本草别说》云：“使气血各有所归。恐当归之名，必因此出也。”当归味甘；辛；苦；性温；归肝；心；脾经。有补血；活血；调经止痛；润燥滑肠的功效。主治血虚诸证；月经不调；经闭；痛经；症瘕结聚；崩漏；虚寒腹痛；痿痹；肌肤麻木；肠燥便难；赤痢后重；痈疽疮疡的功效。
党参：性平，味甘、微酸。归脾、肺经。有补中益气，健脾益肺。用于脾肺虚弱，气短心悸，食少便溏，虚喘咳嗽，内热消渴的功效。
黄芪：黄芪补气、既能升补脾气，又能益肺固表。党参补气，只能健脾补气，无固表之力，但党参还能益气生津，黄芪则无生津之效。黄芪兼能利水，党参无利水作用。
本发明的即食海参营养棒将本发明制备的海参膏与当归、党参、黄芪配伍，可以补气血，生津利水，补元气，开声音，助筋力，辅以核桃、大枣、黑芝麻，帮助健脾、益精、治疗中气不足。
本发明的有益效果
本发明提供一种干制光参加工的高营养浓缩海参浸膏，与现有的海参干制品相比，其可以减少发泡过程中的营养的损失，保留海参中大多数的营养功能成分，加工过程中脱除重金属等有害成分，使海参达到营养最大化，使低值海参得到了高值化利用；与胶囊、口服液相比，其营养的充足性和有效吸收率远远高于以上两种产品；与市面上其他海参制品相比，其营养价值得到了极大的保留，是海参的浓缩精制品。
复水：高温或者长时间泡发，会导致海参自溶，营养成分流失，蛋白变性，其蛋白变性温度是40℃；由于温度越高，处理时间越长，海参中的营养物质流失越严重，本发明的三段复水，能使海参在短时间内吸水率最大且得率最高；由于海参中酸性粘多糖不溶于水与弱酸，但溶于弱碱，因此，三段复水pH控制在6-7。
酶解：因为酶添加量越大，海参的去皮的速度越快，同时海参肉同步酶解，海参有效成分损失的越多，为了节省酶解的时间，同时能够最大程度的除去海参外皮与内脏残留，采用超声波辅助酶解，本发明的酶解方法可以除去表皮及内脏表面，该部位铅和砷富积最严重，酶解之后砷与铅等重金属的含量均下降约90％，使海参呈现光滑、柔软的状态。
浸渍：水量越多，海参浸提的越彻底，但水量过多会延长后期浓缩时间，会导致过多的设备耗损和电力耗损，因此，选择海参与去离子水的最佳添加比为1∶2.5-1∶6；在pH在7-8时，蛋白及酸性粘多糖得率最大，且浸提液的粘度最大；浸提过程温度选择90-120℃，温度过低会降低功效成分溶出的速率，过高的温度长时间浸提会加速蛋白的次级水解，产生过多的挥发性碱性物质，降低浸膏的质量。因此控制温度90-120℃，压力0.15-0.25MPa，间歇式微波辅助浸提可以降低浸提的时间和次数，可微波功率1000W，频率8000MHz，微波周期频率10s/5min，浸提2-3h，可以使海参中80％以上的胶原蛋白溶出。浸提后的海参浆液自然沉降后离心得到上层澄清的浸提液。
具体实施方式
在本发明中所使用的术语，除非有另外说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。
下面结合具体实施例，并参照数据进一步详细的描述本发明。以下实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。
实施例1
一种海参的复水方法：为超声波、热处理、超声波的三段复水法。
具体方法如下：
a.将淡干光参于30℃去离子水中浸泡，同时辅以超声波，超声波功率500W、发射频率为15KHz、脉冲周期频率为8次/s，维持pH 6-7，处理30min，获得第一段复水后的海参；
b.将第一段复水后的海参于低压反应釜中，70℃、-0.8MPa的条件下，维持pH 6-7，热处理30min后取出，获得第二段复水后的海参；
c.将第二段复水后的海参重新置于超声波反应釜中，超声波功率800W、发射频率40KHz、脉冲周期频率为12次/s，控制温度30℃，压力-0.6MPa，维持pH 6-7，处理12h。
实施例2
一种海参的复水方法：为超声波、热处理、超声波的三段复水法。
具体方法如下：
a.将淡干光参于20℃去离子水中浸泡，同时辅以超声波，超声波功率400W、发射频率为10KHz、脉冲周期频率为5次/s，维持pH 6-7，处理15min，获得第一段复水后的海参；
b.将第一段复水后的海参于低压反应釜中，70℃、-0.8MPa的条件下，维持pH 6-7，热处理30min后取出，获得第二段复水后的海参；
c.将第二段复水后的海参重新置于超声波反应釜中，超声波功率900W、发射频率25KHz、脉冲周期频率为8次/s，控制温度35℃，压力-0.6MPa，维持pH 6-7，处理12h。
实施例3
一种海参的复水方法：为超声波、热处理、超声波的三段复水法。
具体方法如下：
a.将淡干光参于25℃去离子水中浸泡，同时辅以超声波，超声波功率600W、发射频率为13KHz、脉冲周期频率为7次/s，维持pH 6-7，处理23min，获得第一段复水后的海参；
b.将第一段复水后的海参于低压反应釜中，70℃、-0.8MPa的条件下，维持pH 6-7，热处理30min后取出，获得第二段复水后的海参；
c.将第二段复水后的海参重新置于超声波反应釜中，超声波功率1000W、发射频率35KHz、脉冲周期频率为10次/s，控制温度40℃，压力-0.6MPa，维持pH 6-7，处理12h。
一、复水效果试验：
1.1试验设计
取大小重量相近的100只干制低值光参，随机分为5组，每组20只，分别进行如下处理：
传统法：采用传统加热方法复水(即煮沸法)，记为传统法组；
超声波法：采用超声波辅助复水，超声波功率500W、发射频率为25KHz、复水2h，记为超声波组；
三段复水法：分别采用本发明实施例1、2、3的复水方法，分别记为实施例1组、实施例2组和实施例3组。
1.2指标测定
1.2.2海参复水比
海参复水前分别用分析天平称量个体的质量并做好标记，复水后，用纱布擦净海参表面多于的水分，用分析天平称量复水后的质量，海参复水比＝复水后海参质量(g)/复水前海参质量(g)。
1.2.2海参持水率
取复水后1g海参样品置于离心管中，在4℃、3000r/min条件下离心10min后，于分析天平上称量离心后的海参质量(g)，海参的持水率(％)＝离心后海参质量(g)/1(g)×100％。
1.2.3营养成分含量
水分含量测定：参照GB 5009.3-2010《食品中水分的测定方法》中的直接干燥法；
脂肪含量测定：参照GB/T 5009.6-2003《食品中脂肪的测定方法》的索氏抽提法；
蛋白含量测定：参照GB 5009.5-2010《食品中蛋白质的测定方法》中的凯氏定氮法；
总糖含量测定：参照GB/T9695.31-2008《肉制品总糖含量测定》；
灰分测定：参照GB 5009.4-2010《食品中灰分的测定方法》。
1.3数据分析
所有采集数据采用Excel软件进行前期处理，然后用SPSS19.0进行统计分析，LSD进行多重比较，结果采用平均值±标准差表示。
1.4试验结果
1.4.1海参复水比和持水率
不同复水方法对海参复水比和持水率的影响如表1所示：
表1不同复水方法对海参复水比和持水率的影响
| 组别 | 复水比 | 持水率％ |
| 传统法组 | 5.5：1 | 78.6％ |
| 超声波组 | 5.6：1 | 79.8％ |
| 实施例1组 | 6.8：1 | 87.7％ |
| 实施例2组 | 6.4：1 | 82.2％ |
| 实施例3组 | 6.5：1 | 85.1％ |
由表1可知，采用本发明三段复水方法的海参复水比显著高于传统法和超声波组，实施例1组高于实施例2、3的复水比，但相差不大；采用本发明三段复水方法的海参持水率显著高于传统法和超声波组，实施例1组高于实施例2、3的持水率；由此可见，本发明的三段复水方法能够显著提高海参的复水效果，实施例1组的效果最优。
1.4.2营养成分含量
不同复水方法对海参营养成分的影响如表2所示：
表2不同复水方法对海参营养成分的影响(g/kg)
| 组别 | 水分 | 蛋白质 | 粗脂肪 | 总糖 | 灰分 |
| 传统法组 | 866.15±19.2 | 50±2.2 | 1.3±0.4 | 5.1±0.7 | 15.5±1.1 |
| 超声波组 | 868.48±18.7 | 52±2.1 | 1.5±0.2 | 8.5±0.5 | 14.4±0.9 |
| 实施例1组 | 891.79±17.6 | 57±1.8 | 1.9±0.4 | 11.7±0.9 | 4.1±1.1 |
| 实施例2组 | 884.86±16.9 | 56±2.3 | 1.6±0.5 | 11.6±0.8 | 4.4±0.8 |
| 实施例3组 | 886.67±18.4 | 56±2.0 | 1.8±0.3 | 11.7±0.4 | 4.2±0.9 |
由表2可知，本发明的三段复水法与对照组和超声波组相比，可以显著提高海参的水分含量、蛋白含量和总糖含量；显著降低灰分含量；对粗脂肪的含量影响不大；可见本发明的三段复水法能够很好的保持海参的营养成分，实施例1组的效果最优。
实施例4
一种海参浸提膏的制备方法：是由干制低值光参经复水、酶解、浸渍和浓缩制备而成。
具体方法如下：
(1)复水
a.将淡干光参于30℃去离子水中浸泡，同时辅以超声波，超声波功率500W、发射频率为15KHz、脉冲周期频率为8次/s，维持pH 6-7，处理30min，获得第一段复水后的海参；
b.将第一段复水后的海参于低压反应釜中，70℃、-0.8MPa的条件下，维持pH 6-7，热处理30min后取出，获得第二段复水后的海参；
c.将第二段复水后的海参重新置于超声波反应釜中，超声波功率800W、发射频率40KHz、脉冲周期频率为12次/s，控制温度30℃，压力-0.6MPa，维持pH 6-7，处理12h。
(2)酶解
将复水后的海参置于超声低压反应釜中，按照体积分数0.07％的量加入复合蛋白酶，超声波功率500W、发射频率为15KHz、脉冲周期频率为8次/s，30℃，维持pH 6-7，-0.6MPa条件下，处理15min，除去表皮及清理内脏残留。
(3)浸渍
将酶解海参磨浆后，放入高压反应釜，按海参与去离子水的添加比1∶4.5加入去离子水，控制温度115℃，压力0.2MPa，间歇式微波辅助浸提3h，微波功率1000W，频率8000MHz，微波周期频率10s/5min。
(4)浓缩
第一次浓缩设置条件为60℃，-0.9MPa，浓缩至干重为1.5～2％；第二次浓缩条件为80℃，-0.8MPa；第三次浓缩条件为80℃，-0.8MPa；第二次和第三次浓缩后海参液干重为8～15％；第四次浓缩条件为60℃，-0.9MPa，浓缩至水分含量为60％-80％，冷凝即成膏状。
实施例5
一种海参浸提膏的制备方法：是由干制低值光参经复水、酶解、浸渍和浓缩制备而成。
具体方法如下：
(1)复水
a.将淡干光参于30℃去离子水中浸泡，同时辅以超声波，超声波功率500W、发射频率为15KHz、脉冲周期频率为8次/s，维持pH 6-7，处理30min，获得第一段复水后的海参；
b.将第一段复水后的海参于低压反应釜中，70℃、-0.8MPa的条件下，维持pH 6-7，热处理30min后取出，获得第二段复水后的海参；
c.将第二段复水后的海参重新置于超声波反应釜中，超声波功率800W、发射频率40KHz、脉冲周期频率为12次/s，控制温度30℃，压力-0.6MPa，维持pH 6-7，处理12h。
(2)酶解
将复水后的海参置于超声低压反应釜中，按照体积分数0.01％的量加入复合蛋白酶，超声波功率500W、发射频率为15KHz、脉冲周期频率为6次/s，35℃，维持pH 6-7，-0.6MPa条件下，处理15min，除去表皮及清理内脏残留。
(3)浸渍
将酶解海参磨浆后，放入高压反应釜，按海参与去离子水的添加比1∶2.5加入去离子水，控制温度90℃，压力0.15MPa，间歇式微波辅助浸提3h，微波功率1000W，频率8000MHz，微波周期频率10s/5min。
(4)浓缩
第一次浓缩设置条件为40℃，-0.9MPa，浓缩至干重为1.5～2％；第二次浓缩条件为60℃，-0.8MPa；第三次浓缩条件为60℃，-0.8MPa；第二次和第三次浓缩后海参液干重为8～15％；第四次浓缩条件为40℃，-0.9MPa，浓缩至水分含量为60％-80％，冷凝即成膏状。
实施例6
一种海参浸提膏的制备方法：是由干制低值光参经复水、酶解、浸渍和浓缩制备而成。
具体方法如下：
(1)复水
a.将淡干光参于30℃去离子水中浸泡，同时辅以超声波，超声波功率500W、发射频率为15KHz、脉冲周期频率为8次/s，维持pH 6-7，处理30min，获得第一段复水后的海参；
b.将第一段复水后的海参于低压反应釜中，70℃、-0.8MPa的条件下，维持pH 6-7，热处理30min后取出，获得第二段复水后的海参；
c.将第二段复水后的海参重新置于超声波反应釜中，超声波功率800W、发射频率40KHz、脉冲周期频率为12次/s，控制温度30℃，压力-0.6MPa，维持pH 6-7，处理12h。
(2)酶解
将复水后的海参置于超声低压反应釜中，按照体积分数0.1％的量加入复合蛋白酶，超声波功率500W、发射频率为15KHz、脉冲周期频率为10次/s，40℃，维持pH 6-7，-0.6MPa条件下，处理15min，除去表皮及清理内脏残留。
(3)浸渍
将酶解海参磨浆后，放入高压反应釜，按海参与去离子水的添加比1∶6加入去离子水，控制温度120℃，压力0.25MPa，间歇式微波辅助浸提3h，微波功率1000W，频率8000MHz，微波周期频率10s/5min。
(4)浓缩
第一次浓缩设置条件为50℃，-0.8MPa，浓缩至干重为1.5～2％；第二次浓缩条件为70℃，-0.9MPa；第三次浓缩条件为70℃，-0.9MPa；第二次和第三次浓缩后海参液干重为8～15％；第四次浓缩条件为50℃，-0.8MPa，浓缩至水分含量为60％-80％，冷凝即成膏状。
二、营养成分分析试验
2.1试验分组
取大小重量相近的240只干制低值光参，随机分为8组，每组30只，分别进行如下处理：
2.1.1实施例4制备的海参浸提膏，记为试验组1；
2.1.2实施例5制备的海参浸提膏，记为试验组2；
2.1.3实施例6制备的海参浸提膏，记为试验组3；
2.1.4实施例4制备方法中，将步骤(1)复水的方法采用传统方法复水方法(即煮沸法)，制备的海参浸提膏，记为对照组1；
2.1.5实施例4制备方法中，在酶解时去除超声波条件，制备的海参浸提膏，记为对照组2；
2.1.6用传统木瓜蛋白酶酶解法替代实施例4中的酶解法，制备的海参浸提膏，记为对照组3；
2.1.7实施例4制备方法中，在浸渍时去除微波辅助条件，制备的海参浸提膏，记为对照组4；
2.1.8实施例4制备方法中，不酶解直接浸提、过滤并浓缩得到的海参浸提膏，记为对照组5。
2.2指标测定
2.2.1海参膏得率测定
海参膏得率(％)＝海参膏干重/海参干重×100％；
2.2.2胶原蛋白含量测定
胶原蛋白测定原理：胶原蛋白水解后释放出游离氨基酸，其中的羟脯氨酸经氯胺T氧化后，可与对二甲基氨基苯甲醛生成红色化合物，颜色越深，说明羟脯氨酸含量越高。在560nm下测定吸光值，可以计算得到羟脯氨酸含量。胶原蛋白中有7％的羟脯氨酸，由此可计算得到胶原蛋白含量。
试剂配制：
缓冲溶液(pH 6.0)：柠檬酸5.0g、醋酸1.2mL、醋酸钠12g、氢氧化钠3.4g，蒸馏水定容至100mL；
氯胺T溶液：氯胺T 1.4g、异丙醇30mL、蒸馏水20mL、缓冲溶液50mL，混合均匀；
高氯酸溶液：取27mL高氯酸，蒸馏水定容到100mL；
发色剂：10g对二甲基氨基苯甲醛溶于35mL60％高氯酸溶液中，边摇晃便加入65mL异丙醇。
羟脯氨酸标准溶液配制：用蒸馏水配制浓度梯度为：2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μg/mL的羟脯氨酸标准溶液。
1.样品预处理：取一定量的样品与安培瓶中，加2mL 6mol/L盐酸，封管，130℃水解4h，水解液充分移至100mL容量瓶中，滴入一滴0.02％甲基红试剂，以2mol/L NaOH中和至pH6，用蒸馏水定容至100mL。
2.羟脯氨酸含量测定：取2mL样品处理液和羟脯氨酸标准溶液于试管中，分别加入1mL氯胺T溶液，混合均匀，室温下放置20±2min，分别加入1mL发色剂，充分混合，于60℃下水浴15min，取出，冷却，560nm下测定吸光度值，绘制标准曲线，计算样品中羟脯氨酸含量，由羟脯氨酸含量计算得到胶原蛋白含量。
2.2.3海参多糖含量测定
利用直接分光光度法(“直接分光光度法测定海参多糖的含量”，郭小鹏，韩伟，食品科技，2011年，第36卷，第10期，252-255页)测定不同海参膏中海参多糖的含量。
2.2.4皂苷含量的测定
利用紫外-可见分光光度计比色法(“不同种类市售海参的总皂苷含量测定”，高子阳，王瑞等，中国实验方剂学杂志，2014年，第20卷，第15期，89-92页)测定不同海参膏中海参皂苷的含量。
2.2.5重金属元素含量测定
准确称量0.5g样品加入10mL混酸(HNO3∶HClO4＝4∶1)，封口静置过夜，然后在电炉上小心消化至冒出白色浓烟，消化液为无色透明或淡黄色近干时，加适量超纯水赶酸，冷却后，用超纯水定容至50mL，Agilent 7500a型电感耦合等离子体质谱仪测定重金属元素含量。每个样品取6个平行。
2.3数据处理
所有采集数据采用Excel软件进行前期处理，然后用SPSS19.0进行统计分析，LSD进行多重比较，结果采用平均值±标准差表示。
2.4试验结果
2.4.1不同海参膏中水分、胶原蛋白、海参多糖和皂苷的含量如表3所示：
表3不同海参膏中水分、胶原蛋白、海参多糖、皂苷的含量及得率(％)
| 组别 | 水分 | 胶原蛋白 | 海参多糖 | 皂苷 | 得率 |
| 试验组1 | 61.5 | 55.8 | 10.2 | 0.30 | 61.8 |
| 试验组2 | 63.4 | 52.1 | 9.1 | 0.26 | 60.9 |
| 试验组3 | 61.9 | 54.5 | 9.5 | 0.28 | 61.5 |
| 对照组1 | 70.6 | 48.4 | 8.7 | 0.23 | 52.4 |
| 对照组2 | 70.1 | 47.1 | 8.1 | 0.21 | 52.3 |
| 对照组3 | 67.7 | 50.8 | 9.0 | 0.25 | 58.6 |
| 对照组4 | 78.2 | 40.9 | 7.2 | 0.19 | 40.6 |
| 对照组5 | 79.3 | 38.5 | 6.9 | 0.18 | 40.4 |
由表3可知，使用实施例4～6方法提取的海参膏水分含量少，胶原蛋白、海参多糖和皂苷的含量显著高于对照组；对照组3胶原蛋白、海参多糖和皂苷的含量显著高于其他对照组；对照组4和5的胶原蛋白、海参多糖和皂苷的含量显著低于其他各组；试验组1-3的得率显著高于对照组；对照组3的得率显著高于其他对照组；对照组1和2的得率相差不大，显著高于对照组4、5，对照组4、5的得率、营养成分相差不大，但对照组5能耗多，浓缩后味道差。可见本发明的海参浸提膏的制备方法能够使海参中的营养成分很好的释放，并充分的提取出来，而且得率高，制备过程能耗低，实施例4组的效果最优。
2.4.2不同海参膏中重金属元素含量如表4所示：
表4不同海参膏中重金属元素含量(mg/kg)
| 组别 | 砷(As) | 铅(Pb) | 铬(Cr) | 镉(Cd) |
| 试验组1 | 0.21 | 0.08 | 0.22 | 0.10 |
| 试验组2 | 0.22 | 0.08 | 0.23 | 0.11 |
| 试验组3 | 0.22 | 0.09 | 0.23 | 0.10 |
| 对照组1 | 0.28 | 0.14 | 0.38 | 0.15 |
| 对照组2 | 0.69 | 0.58 | 0.98 | 0.19 |
| 对照组3 | 0.27 | 0.12 | 0.34 | 0.14 |
| 对照组4 | 0.35 | 0.31 | 0.25 | 0.13 |
| 对照组5 | 1.61 | 0.78 | 0.42 | 0.18 |
由表4可知，本发明实施例4～6方法制备的海参浸提膏中重金属砷、铅、铬和镉的含量显著低于对照组，且实施例4组的效果最优；对照组1、3的海参浸提膏中重金属砷、铅、铬和镉的含量相差不大，且显著低于其他对照组，对照组4的海参浸提膏中重金属砷、铅、铬和镉的含量低于对照组2、5，对照组5的海参浸提膏中重金属砷、铅、铬和镉的含量显著高于其他各组，且对照组2、5的海参浸提膏中重金属砷、铅含量已经超过食品中重金属限量标准(无公害食品海参NY 5328-2006：As≤0.5，Pb≤0.5，单位mg/kg)，食用上述海参浸提膏严重危害人体健康；可见在海参浸提膏的制备方法中超声辅助酶解能够有效去除砷与铅等重金属的含量，浸提过程对重金属含量的影响不大。
实施例7
一种即食海参果冻，是由海参浸提膏、大枣浸膏、枸杞浸膏、奇亚籽、异麦芽糖酮糖醇、亚麻籽油、葵花籽油、蜂蜜和玫瑰花酱按100∶200∶20∶1∶150∶1∶1∶10∶1的质量比制备而成。
制备方法如下：
准确称量各组分并混合搅匀后，于70℃，-0.08MPa，浓缩至水分含量占50％-70％，出料，在模具中冷却成型，即得海参果冻。
经动物实验证明，有促进光老化小鼠抗氧化功能的作用，能够延缓皮肤衰老；经细胞实验证实，该产品有显著降低B12细胞黑色素含量，抑制酪氨酸酶活性，且剂量-效果关系明显；体外清除活性氧自由基活性实验证明，产品可有效去除超氧阴离子自由基及羟基自由基，清除作用随浓度的增大而增强，呈现出量-效关系；细胞实验证明，该产品对PC12细胞具有显著的保护作用，且保护作用随浓度升高而加强，呈现量-效关系。
实施例8
一种即食海参营养棒，是由海参浸提膏、白砂糖、大枣、核桃、当归浸提液、党参浸提液、黄芪浸提液和黑芝麻按1000∶1000∶1000∶1000∶1∶1∶1∶1000的质量比制备而成。
制备方法如下：
海参浸提膏置于敞口搅拌加热器中，加入白砂糖熬制至挂旗，加入大枣切片、烘干核桃、当归浸提液、党参浸提液和黄芪浸提液，熬至略成型后，加入黑芝麻，搅拌并熬至水分含量20％后取出，置于模具中冷却成型，置于冷风干燥箱中，干燥至水分含量15％后包装，杀菌，得到即食海参营养棒。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (7)
1.一种海参浸提液，其特征在于：是由干制低值光参经复水、酶解和浸渍制备而成；
所述浸渍为：将酶解海参磨浆后，放入高压反应釜，按海参与去离子水的添加比1∶2.5~1∶6加入去离子水，控制温度90-120℃，压力0.15-0.25MPa，间歇式微波辅助浸提3h，微波功率1000W，频率8000MHz，微波周期频率10s/5min；
所述的复水为超声波、热处理、超声波的三段复水法，步骤如下：
a．将淡干海参于20-30℃去离子水中浸泡，同时辅以超声波，超声波功率400-600W、发射频率为10-15KHz、脉冲周期频率为5-8次/s，维持pH 6-7，处理15-30min，获得第一段复水后的海参；
b．将第一段复水后的海参于低压反应釜中，70℃、-0.8 MPa的条件下，维持pH 6-7，热处理30min后取出，获得第二段复水后的海参；
c．将第二段复水后的海参重新置于超声波反应釜中，超声波功率800-1000W、发射频率25-40KHz、脉冲周期频率为8-12次/s，控制温度30-40℃，压力-0.6 MPa，维持pH 6-7，处理12h；
所述的酶解为：将复水后的海参置于超声低压反应釜中，按照体积分数0.01%-0.1%的量加入木瓜蛋白酶与中性蛋白酶按1∶1.5比例混合的复合蛋白酶，超声波功率500W、发射频率为15KHz、脉冲周期频率为6-10次/s，30-40℃，维持pH 6-7，-0.6 MPa条件下，处理15min，除去表皮及清理内脏残留。
2.一种海参浸提膏，其特征在于：由权利要求1所述的海参浸提液经四次浓缩制备而成；所述的浓缩为：第一次浓缩设置条件为40~60℃，-0.9~-0.8 MPa，浓缩至干重为1.5~2%；第二次浓缩条件为60~80℃，-0.9~-0.8 MPa；第三次浓缩条件为60~80℃，-0.9~-0.8 MPa；第二次和第三次浓缩后海参液干重为8~15%；第四次浓缩条件为40~60℃，-0.9~-0.8 MPa，浓缩至水分含量为60%-80%，冷凝即成膏状，即得。
3.根据权利要求2所述海参浸提膏的应用，其特征在于：用于制备即食海参营养制品；所述即食海参营养制品包括即食海参果冻、即食海参营养棒。
4.一种即食海参果冻，其特征在于：由权利要求2所述海参浸提膏、大枣浸膏、枸杞浸膏、奇亚籽、异麦芽糖酮糖醇、亚麻籽油、葵花籽油、蜂蜜和玫瑰浸膏按1000∶200∶20∶1∶150∶1∶1∶10∶1的质量比制备而成。
5.根据权利要求4所述即食海参果冻的制备方法，其特征在于：步骤如下：
准确称量各组分并混合搅匀后，于70℃，-0.08MPa，浓缩至水分含量占50%-70%，出料，在模具中冷却成型，即得海参果冻。
6.一种即食海参营养棒，其特征在于：由权利要求2所述海参浸提膏、白砂糖、大枣、核桃、当归浸提液、党参浸提液、黄芪浸提液和黑芝麻按1000∶1000∶1000∶1000∶1∶1∶1∶1000的质量比制备而成。
7.根据权利要求6所述即食海参营养棒的制备方法，其特征在于：
海参浸提膏置于敞口搅拌加热器中，加入白砂糖熬制至挂旗，加入大枣切片、烘干核桃、当归浸提液、党参浸提液和黄芪浸提液，熬至略成型后，加入黑芝麻，搅拌并熬至水分含量20%后取出，置于模具中冷却成型，置于冷风干燥箱中，干燥至水分含量15%后包装，杀菌，得到即食海参营养棒。
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