CN107312081A - 一种hmg粗品的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种HMG粗品的制备方法，是由以下步骤制得的：1）收集尿液，采用40目滤网过滤，用乙酸调节pH值至3.5‑3.7，得溶液；2）将溶液用超滤设备进行超滤，得浓缩液；3）将浓缩液通过冷冻离心机进行离心洗脱3次，得洗脱品；4）将洗脱品进行真空干燥，得干燥品；5）将干燥品过60目筛，得HMG粗品。本发明HMG粗品的制备方法与传统HMG粗品的制备方法相比，成本低，无须采用助滤剂、高岭土和压滤机；步骤简单，可操作性强，无须多次压滤，节省大量时间和人力物力，同时没有污水和废渣的产生，易于工业化生产，具有广阔的市场前景。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种HMG粗品的制备方法。
背景技术
人绝经期促性腺激素（human menopausal gonadotropin，HMG）是由绝经期妇女尿中提取的物质，含有FSH和LH，其促卵泡发育的作用主要是FSH。人绒毛膜促性腺激素（humanchorionic，gonadotropin，HGG）是妊娠妇女尿中提取的物质，可使成熟卵泡排卵，或用于HMG疗法后的黄体支持疗法。
现有的HMG的制备方法是：取绝经期的妇女尿液，在尿液中加入高岭土，再采用压滤机压饼，同时加入氨水，脱出有效成分液体，液体再进入超滤机，超滤到原体积的15%，再加入丙酮溶液沉淀，有效成分沉淀下来，沉淀置于离心机离心，再真空干燥，得到成品HMG。以上的方法中所采用的高岭土其价格昂贵，因此导致HMG的生产成本较高，在以上的方法时，有时会采用珍珠盐作为助滤剂，其成本也较高；另外以上的方法其缺点于，压滤机的成本较高。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供了一种成本低、步骤简单、易于工业化生产的HMG粗品的制备方法。
本发明的目的是通过如下技术方案实现的：
一种HMG粗品的制备方法，是由以下步骤制得的：
1）收集尿液，采用40目滤网过滤，用乙酸调节pH值至3.8-4.0，得溶液；
2）将溶液用超滤设备进行超滤，得浓缩液；
所述超滤完成后，用反渗透水清洗超滤设备，清洗液冷藏并入下次尿液。
3）将浓缩液通过冷冻离心机进行离心洗脱3次，得洗脱品；
4）将洗脱品进行真空干燥，得干燥品；
5）将干燥品过60目筛，得HMG粗品。
所述的，尿液为孕妇尿液或是绝经期妇女尿液。
所述的，超滤的条件为：超滤的温度为5-15℃，超滤膜的截留分子量为10kDa，超滤至浓缩液为溶液重量的10%。
所述的，离心洗脱的温度为10-15℃，时间为40min。
所述的，真空干燥的温度为10℃，时间为8h。
本发明的有益效果：本发明HMG粗品的制备方法与传统HMG粗品的制备方法相比，成本低，无须采用助滤剂、高岭土和压滤机；步骤简单，可操作性强，无须多次压滤，节省大量时间和人力物力，同时没有污水和废渣的产生，易于工业化生产，具有广阔的市场前景。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解本发明，但并不因此限制本发明。
实施例1
一种HMG粗品的制备方法，是由以下步骤制得的：
1）收集尿液，采用40目滤网过滤，用乙酸调节pH值至3.8-4.0，得溶液；
2）将溶液用超滤设备进行超滤，得浓缩液；
所述超滤完成后，用反渗透水清洗超滤设备，清洗液冷藏并入下次尿液。
3）将浓缩液通过冷冻离心机进行离心洗脱3次，得洗脱品；
4）将洗脱品进行真空干燥，得干燥品；
5）将干燥品过60目筛，得HMG粗品。
所述的，尿液为孕妇尿液。
所述的，超滤的条件为：超滤的温度为5℃，超滤膜的截留分子量为10kDa，超滤至浓缩液为溶液重量的20%。
所述的，离心洗脱的温度为10℃，时间为40min。
所述的，真空干燥的温度为10℃，时间为8h。
实施例2
一种HMG粗品的制备方法，是由以下步骤制得的：
1）收集尿液，采用40目滤网过滤，用乙酸调节pH值至3.8-4.0，得溶液；
2）将溶液用超滤设备进行超滤，得浓缩液；
所述超滤完成后，用反渗透水清洗超滤设备，清洗液冷藏并入下次尿液。
3）将浓缩液通过冷冻离心机进行离心洗脱3次，得洗脱品；
4）将洗脱品进行真空干燥，得干燥品；
5）将干燥品过60目筛，得HMG粗品。
所述的，尿液为绝经期妇女尿液。
所述的，超滤的条件为：超滤的温度为10℃，超滤膜的截留分子量为10kDa，超滤至浓缩液为溶液重量的15%。
所述的，离心洗脱的温度为13℃，时间为40min。
所述的，真空干燥的温度为10℃，时间为8h。
实施例3
一种HMG粗品的制备方法，是由以下步骤制得的：
1）收集尿液，采用40目滤网过滤，用乙酸调节pH值至3.8-4.0，得溶液；
2）将溶液用超滤设备进行超滤，得浓缩液；
所述超滤完成后，用反渗透水清洗超滤设备，清洗液冷藏并入下次尿液。
3）将浓缩液通过冷冻离心机进行离心洗脱3次，得洗脱品；
4）将洗脱品进行真空干燥，得干燥品；
5）将干燥品过60目筛，得HMG粗品。
所述的，尿液为孕妇尿液。
所述的，超滤的条件为：超滤的温度为15℃，超滤膜的截留分子量为10kDa，超滤至浓缩液为溶液重量的10%。
所述的，离心洗脱的温度为15℃，时间为40min。
所述的，真空干燥的温度为10℃，时间为8h。
对比例
收集绝经期妇女尿液，绝经期妇女尿液中，未检出艾滋病毒、乙肝病毒HBs-Ab、HBc-Ab、Hbe-Ab，调节pH值至3.8-4.0，在尿液中加入占尿液总重为0.7%的高岭土吸附，吸附时间为6h，沉淀，板框压滤机压滤，将废液排出，有效活性成分被吸附在高岭滤饼中；将高岭土滤饼与冰醋酸混合搅拌2h，冰醋酸的用量为50升/吨原尿液，板框压滤机压滤；将压滤得到的滤饼加氨水洗脱，氨水的用量为40升/吨原尿液，超滤机超滤浓缩，洗脱3次，干燥，60目筛网筛选，得HMG粗品。
性能测试
将实施例1-3和对比例制备的HMG粗品进行粗品比活和生产成本和生产时间测算，结果如表1所示。
表1 HMG粗品性能结果
| 分组 | 粗品比活（IU/mg） | 生产成本（元/50g） | 生产时间（h/批次） |
| 实施例1 | 0.769 | 720 | 14 |
| 实施例2 | 0.772 | 715 | 14 |
| 实施例3 | 0.765 | 720 | 14 |
| 对比例 | 0.751 | 950 | 38 |
由表1可知，实施例1-3制备的粗品比活高于对比例中的粗品比活，而且实施例1-3的生产成本和生产时间大大降低，用工减少50%，材料节省90%，且没有污水和废渣的产生，显著提高生产效率，降低生产成本，易于工业化生产，具有广阔的市场前景。
以上所述的仅是本发明的一些实施方式。对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。
Claims (5)
1.一种HMG粗品的制备方法，其特征在于，是由以下步骤制得的：
1）收集尿液，采用40目滤网过滤，用乙酸调节pH值至3.5-3.7，得溶液；
2）将溶液用超滤设备进行超滤，得浓缩液；
3）将浓缩液通过冷冻离心机进行离心洗脱3次，得洗脱品；
4）将洗脱品进行真空干燥，得干燥品；
5）将干燥品过60目筛，得HMG粗品。
2.根据权利要求1所述HMG粗品的制备方法，其特征在于，所述尿液为孕妇尿液或是绝经期妇女尿液。
3.根据权利要求1所述HMG粗品的制备方法，其特征在于，所述超滤的条件为：超滤的温度为5-15℃，超滤膜的截留分子量为10kDa，超滤至浓缩液为溶液重量的10%。
4.根据权利要求1所述HMG粗品的制备方法，其特征在于，所述离心洗脱的温度为10-15℃，时间为40min。
5.根据权利要求1所述HMG粗品的制备方法，其特征在于，所述真空干燥的温度为10℃，时间为8h。
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