CN107305204A - 液相色谱测定方法、液相色谱测定装置和液相色谱测定程序存储介质 - Google Patents

液相色谱测定方法、液相色谱测定装置和液相色谱测定程序存储介质 Download PDF

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Abstract

本发明涉及液相色谱测定方法、液相色谱测定装置和液相色谱测定程序存储介质。在切换多个测定模式来测定HbA1c的情况下，抑制HbA1c的保留时间产生偏移并且缩短测定时间。HPLC装置中，使用液相色谱法，切换通过将多个种类的洗脱液依次输送至分析柱来对测定试样的血红蛋白A1c和变异血红蛋白进行测定的第一测定模式与通过将多个种类的洗脱液中与第一测定模式中使用的洗脱液共通的多种共通洗脱液依次输送至所述分析柱来对血红蛋白A1c进行测定的第二测定模式，在第一测定模式下测定血红蛋白A1c时，以使血红蛋白A1c的第一保留时间与在第二测定模式下测定的血红蛋白A1c的第二保留时间相同的方式，使分析柱平衡化。

Description

液相色谱测定方法、液相色谱测定装置和液相色谱测定程序 存储介质
技术领域
本发明涉及液相色谱测定方法、液相色谱测定装置和液相色谱测定程序存储介质，特别涉及血液等生物试样的分析中使用的液相色谱测定方法、液相色谱测定装置和液相色谱测定程序存储介质。
背景技术
以往，提出了利用液相色谱法对例如血液等测定试样的糖化血红蛋白(HbA1c)和变异Hb进行测定的方法(例如参照专利文献1和非专利文献1)。
以往，在对测定试样的糖化血红蛋白(HbA1c)进行测定的情况下，在检测变异血红蛋白、将其分离或除去来测定HbA1c和变异血红蛋白这两者的情况(变体模式)以及主要测定血红蛋白A1c的情况(快速模式)下，通常是使用分开的测定装置来进行测定或者更换分析柱来进行测定。这是因为，特别是配管中的洗脱液的浓度等条件对测定的精度产生影响，因此，在各个情况下需要使用不同的洗脱液进行测定。因此，以往，在液相色谱装置中，即使是能够进行快速模式和变体模式的测定的装置，在变更测定模式的情况下，也需要柱和配管内的清洗工序和平衡化工序。具体而言，在变更测定模式的情况下，在测定模式结束时在终止程序中对柱和配管内进行清洗后变更测定模式。而且，在变更后的测定模式中，实施用于使柱和配管内达到平衡状态的开始程序。以往，对于多个测定试样切换多个测定模式，不能在不追加多余工序的情况下连续地进行测定。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2009-236768号公报
非专利文献
非专利文献1：Bio-Rad公司“VariantII Dual Program”的目录
发明内容
发明所要解决的问题
如上所述，在变更测定模式的情况下，需要柱和配管内的清洗工序和平衡化工序，因此，洗脱液的使用量增多，并且测定时间也变成长时间。另外，本发明人发现了如下问题：在1台液相色谱装置中，在对多个测定试样切换变体模式和快速模式而连续地进行测定的情况下，有时仅在变体模式下使用的洗脱液会对其下一个测定产生影响，有时使HbA1c的保留时间(retention time)产生偏移。该问题在1台液相色谱装置中在主要仅执行变体模式和快速模式中的任一者的情况下并不怎么成为问题。
但是，在1台液相色谱装置中切换两个测定模式而连续地执行的情况下，如果测定的HbA1c的保留时间存在偏移，则存在如下问题：在使用者基于HbA1c的保留时间来鉴定HbA1c的峰时产生混乱，或者在液相色谱装置中确定HbA1c的峰的过程变得复杂。因此，在1台液相色谱装置中切换两个测定模式来执行的情况下，需要设置充分的切换时间，难以缩短测定时间。
本发明的目的在于提供在切换多个测定模式来测定HbA1c的情况下能够抑制HbA1c的保留时间产生偏移并且能够缩短测定时间的液相色谱测定方法、液相色谱测定装置和液相色谱测定程序存储介质。
用于解决问题的方法
本发明的液相色谱测定方法的一个方式包含：
使用液相色谱法，切换通过将第一成分分离用洗脱液、第二成分分离用洗脱液和清洗用洗脱液依次输送至分析柱来对测定试样的血红蛋白A1c和变异血红蛋白进行测定的第一测定模式与通过将所述第一成分分离用洗脱液和所述清洗用洗脱液依次输送至所述分析柱来对所述血红蛋白A1c进行测定的第二测定模式的工序；
以使所述第一测定模式下的所述血红蛋白A1c的第一保留时间与所述第二测定模式下的所述血红蛋白A1c的第二保留时间相同的方式，在所述第一测定模式中所述第二成分分离用洗脱液的影响消失之前，输送所述清洗用洗脱液的工序；以及
在所述清洗用洗脱液之后，输送所述第一成分分离用洗脱液的工序。
由此，在一个方式中，在切换多个测定模式来测定HbA1c的情况下，能够抑制HbA1c的保留时间产生偏移，并且能够缩短测定时间。需要说明的是，“保留时间相同”不仅是两者完全相同的情况，而且，即使保留时间具有差，如果为±5％以内的差，则也包含在“相同”中。
另外，本发明的一个方式中，所述第一测定模式下的输送所述清洗用洗脱液后的输送所述第一成分分离用洗脱液的送液时间比所述第二测定模式下的输送所述清洗用洗脱液后的输送所述第一成分分离用洗脱液的送液时间长。
另外，本发明的一个方式中，使两测定份的低浓度用校准器和高浓度用校准器中的一个校准器保持于能够保持至少两测定份以上的所述测定试样的保持单元中，执行所述第一测定模式和所述第二测定模式的校准，
使两测定份的低浓度用校准器和高浓度用校准器中的另一个校准器保持于所述保持单元中，执行所述第一测定模式和所述第二测定模式的校准。
另外，本发明的液相色谱测定装置的一个方式包含：
使用液相色谱法，切换通过将第一成分分离用洗脱液、第二成分分离用洗脱液和清洗用洗脱液依次输送至分析柱来对测定试样的血红蛋白A1c和变异血红蛋白进行测定的第一测定模式与通过将所述第一成分分离用洗脱液和所述清洗用洗脱液依次输送至所述分析柱来对所述血红蛋白A1c进行测定的第二测定模式的切换单元；
以使所述第一测定模式下的所述血红蛋白A1c的第一保留时间与所述第二测定模式下的所述血红蛋白A1c的第二保留时间相同的方式，在所述第一测定模式中所述第二成分分离用洗脱液的影响消失之前，输送所述清洗用洗脱液的第一送液单元；以及
在所述清洗用洗脱液之后，输送所述第一成分分离用洗脱液的第二送液单元。
由此，在一个方式中，在切换多个测定模式来测定HbA1c的情况下，能够抑制HbA1c的保留时间产生偏移，并且能够缩短测定时间。
另外，本发明的一个方式中，所述第一测定模式下的输送所述清洗用洗脱液后的输送所述第一成分分离用洗脱液的送液时间比所述第二测定模式下的输送所述清洗用洗脱液后的输送所述第一成分分离用洗脱液的送液时间长。
本发明的一个方式中，用于过滤所述测定试样、所述第一成分分离用洗脱液、所述第二成分分离用洗脱液和所述清洗用洗脱液的预滤器与所述分析柱成为一体化。
由此，在一个方式中，例如能够减小预滤器的连接部分中的死体积、配管的容量，能够减小装置间差异。在不进行测定模式的切换的情况下，这样的装置间差异，即使放置也不会特别产生问题，但在进行测定模式的切换的装置中，这样的装置间差异会对保留时间的偏移产生影响。因此，从减小保留时间的偏移的观点考虑，使上述预滤器与分析柱一体化是有利的。
本发明的一个方式的液相色谱测定程序存储介质是存储有用于使计算机执行液相色谱测定处理的程序的非暂时性(non-transitory)存储介质，其中，所述液相色谱测定处理包含：
使用液相色谱法，切换通过将第一成分分离用洗脱液、第二成分分离用洗脱液和清洗用洗脱液依次输送至分析柱来对测定试样的血红蛋白A1c和变异血红蛋白进行测定的第一测定模式与通过将所述第一成分分离用洗脱液和所述清洗用洗脱液依次输送至所述分析柱来对所述血红蛋白A1c进行测定的第二测定模式，
以使所述第一测定模式下的所述血红蛋白A1c的第一保留时间与所述第二测定模式下的所述血红蛋白A1c的第二保留时间相同的方式，在所述第一测定模式中所述第二成分分离用洗脱液的影响消失之前，输送所述清洗用洗脱液，
在所述清洗用洗脱液之后，输送所述第一成分分离用洗脱液。
由此，在一个方式中，在切换多个测定模式来测定HbA1c的情况下，能够抑制HbA1c的保留时间产生偏移，并且能够缩短测定时间。
发明效果
根据本发明，在一个方式中具有如下效果：在切换多个测定模式来测定HbA1c的情况下，能够抑制HbA1c的保留时间产生偏移并且能够缩短测定时间。
附图说明
图1是HPLC装置的概略构成图。
图2是HPLC装置的控制系统的构成图。
图3是液相色谱测定程序的流程图。
图4是表示色谱图的一例的线图。
图5(A)是用于对连续进行快速模式的情况下的各洗脱液的送液时机等进行说明的图，图5(B)是用于对从变体模式切换为快速模式的情况下的各洗脱液的送液时机等进行说明的图，图5(C)是用于对变体模式中将在C液之后输送的A液的送液时间延长的情况进行说明的图，图5(D)是用于对变体模式中将在B液之后输送的A液的送液时间延长的情况进行说明的图。
图6(A)是用于对基于保留时间的偏移不进行反馈控制的情况进行说明的图，图6(B)是用于对基于保留时间的偏移进行反馈控制的情况进行说明的图。
图7是表示HPLC装置的变形例的概略构成图。
符号说明
X HPLC装置
5 试样制备单元
6 分析单元
7 测光单元
11 采血管
13 血液试样
60 分析柱
100 控制部
具体实施方式
以下，对本发明的实施方式进行说明。
图1中示出了利用高速液相色谱(High Performance Liquid Chromatography：HPLC)的HPLC装置X的概略构成图。
HPLC装置X以设置采血管11、自动测定全血中的糖化血红蛋白(HbA1c)的浓度的方式构成。该HPLC装置X具备包含多个洗脱液瓶12A、12B、12C、12D、12E(在图1中为5个)等的装置主体2。
各洗脱液瓶12A～12E分别保持应供给至后述的分析柱60的洗脱液A～E。各洗脱液根据用途而使例如组成、成分比、pH、渗透压等有所不同。
装置主体2具有试样制备单元5、分析单元6和测光单元7。
采血管11例如以收纳于架子(未图示)上、移动至可利用后述的试样制备单元5中的喷嘴51进行采样的位置的方式来构成。
试样制备单元5用于由从采血管11采集的血液制备导入至分析柱60的试样。该试样制备单元5具有喷嘴51和稀释槽53。
喷嘴51用于采集以采血管11的血液试样13为代表的各种液体，可以进行液体的抽吸和喷出，并且可以在上下方向和水平方向上移动。该喷嘴51的工作利用后述的控制部100进行控制。
分析单元6用于控制生物成分相对于分析柱60的填充剂的吸附和解吸，将各种生物成分供给至测光单元7。分析单元6中的设定温度例如设定为约40℃。分析柱60保持有用于选择性地吸附试样中的血红蛋白的填充剂。作为填充剂，例如使用甲基丙烯酸-甲基丙烯酸酯共聚物。
分析单元6中，除了分析柱60以外，还具有分流器61、送液泵62和进样阀63。
分流器61用于从多个洗脱液瓶12A～12E中的特定的洗脱液瓶向分析柱60选择性地供给洗脱液。该分流器61经由配管80A～80E而分别与洗脱液瓶12A、12B、12C、12D、12E连接，经由配管84而与进样阀63连接。
送液泵62用于赋予用于使洗脱液移动至进样阀63的动力，设置在配管84的中途。
进样阀63可以采集一定量的导入用试样并且将该导入用试样导入至分析柱60，具备多个导入口和排出口(省略图示)。在该进样阀63上连接有进样环64。该进样环64可以保持一定量(例如数μL)的液体，可以通过适当切换进样阀63来选择进样环64与稀释槽53连通而从稀释槽53向进样环64供给导入用试样的状态、进样环64经由预滤器PF和配管85与分析柱60连通而从进样环64将导入用试样导入至分析柱60的状态。作为这样的进样阀63，可以使用例如六通阀。需要说明的是，预滤器PF是用于过滤试样、洗脱液的过滤器。
测光单元7用于对来自于分析柱60的解吸液中包含的血红蛋白进行光学检测，经由配管87而与用于将来自于分析柱60的解吸液排出的废液槽88连接。
图2中示出了HPLC装置X的控制系统的框图。如图2所示，HPLC装置X具备控制部100。控制部100形成为CPU(Central Processing Unit，中央处理器)100A、ROM(Read OnlyMemory，只读存储器)100B、RAM(Random Access Memory，随机存取存储器)100C、非挥发性存储器100D和输入输出接口(I/O)100E经由总线100F分别连接的构成。另外，HPLC装置X具备接收来自于操作员的输入的操作部(未图示)。
在I/O100E上连接有试样制备单元5、分析单元6和测光单元7。
需要说明的是，后述的液相色谱测定程序在本实施方式中作为一例而预先存储于非挥发性存储器100D中。CPU100A读入存储于非挥发性存储器100D中的液相色谱测定程序并执行。另外，也可以在CD-ROM等记录介质中记录液相色谱测定程序，将其用CD-ROM驱动器等读入，由此来执行。
接着，对本实施方式的作用进行说明。
图3中示出了利用控制部100的CPU100A执行的液相色谱测定处理的流程图。
首先，操作员设置加入有血液试样13的采血管11。通过使收容有多个采血管11的架子移动，将采血管11搬送至采样位置。
如果操作员指示测定开始，则CPU100A读入存储于非挥发性存储器100D中的液相色谱测定程序并执行。
在步骤S10中，判定是在变体模式下对测定对象的血液试样13进行测定还是在快速模式(也称为通常模式)下进行测定，在快速模式下进行测定的情况下，向步骤S12转移，在变体模式下进行测定的情况下，向步骤S26转移。此处，变体模式(第一测定模式)是指，使用液相色谱法通过将后述的多个种类的洗脱液以预先确定的顺序依次输送至分析柱60来测定血液试样13的HbA1c和变异血红蛋白的测定模式。另外，快速模式(第二测定模式)是指，将多个种类的洗脱液中与在变体模式中使用的洗脱液共通的多个共通洗脱液以预先确定的顺序依次输送至分析柱60来测定HbA1c的测定模式。
需要说明的是，关于在变体模式和快速模式中的哪种测定模式下进行测定，对于每个血液试样13例如由使用者预先设定。例如，可以读取粘贴在采血管11上的条形码信息或者接收来自于主机的指示信号，通过来自于操作部的输入识别测定模式，并进行设定。即使在架子上混合地收纳有在快速模式和变体模式下进行测定的采血管11，也可以应对。
此处，多个种类的洗脱液在本实施方式中为A液～C液。A液(第一成分分离用洗脱液)为用于溶出HbA1c和用于使分析柱60平衡化的洗脱液。B液(清洗用洗脱液)为用于使残留在分析柱60中的血红蛋白全部溶出的洗脱液、即用于清洗分析柱60的洗脱液。C液(第二成分分离用洗脱液)为用于使HbA1c溶出后使HbA1c以外的血红蛋白溶出的洗脱液。需要说明的是，血红蛋白的溶出能力高低的顺序是B液、C液、A液。
另外，在变体模式中，将A液、B液和C液以预先确定的顺序输送至分析柱60来进行测定，在快速模式中，将A液和B液以预先确定的顺序输送至分析柱60来进行测定。即，A液和B液是在变体模式和快速模式下共通地使用的共通洗脱液，C液是仅在变体模式下使用的非共通洗脱液。
在步骤S12中，导入血液试样13。具体而言，首先从采血管11采集血液试样13。即，通过使喷嘴51工作，从采血管11采集血液试样13。利用喷嘴51采集的血液试样13通过使喷嘴51工作而被供给至稀释槽53。
然后，通过切换进样阀63而将保持于进样环64的试样利用预滤器PF进行过滤，导入至分析柱60中。将试样导入至分析柱60中时，HbA1c和变异Hb等吸附于填充剂。
在步骤S14中，将A液供给至分析柱60预先确定的时间。由此，使HbA1c从分析柱60溶出。
在步骤S16中，将B液供给至分析柱60预先确定的时间。由此，使残留在分析柱60中的血红蛋白全部溶出，将分析柱60清洗。
在步骤S18中，将A液供给至分析柱60预先确定的时间。由此，使分析柱60平衡化。
这样，在快速模式中，以A液→B液→A液的顺序向分析柱60进行送液。
包含从分析柱60排出的各种血红蛋白的解吸液经由配管86而供给至测光单元7。该解吸液经由配管87而导入至废液槽88。
在测光单元7中，对解吸液连续地照射光，将其受光结果(吸光度)输出至控制部100。然后，在控制部100中演算色谱图。
如图4所示，色谱图是表示从开始测定起经过的时间与作为受光结果的吸光度的关系的图。根据该色谱图的峰出现在哪个位置，可以获知检测到哪种血红蛋白，并且，通过峰部分(弧形的部分)中的吸光度的积分值、即峰部分的面积的大小，可以获知血红蛋白的浓度。
在本实施方式中，例如，在测定试样中含有HbA1c和HbA0、某种血红蛋白、特定的变异血红蛋白、例如变异血红蛋白C及变异血红蛋白S的情况下，切换洗脱液而依次输送至分析柱60时，如图4所示，预先设想在ta、tb、tc、tf、tg的各时刻出现峰。在这种情况下，根据演算出的色谱图判断在ta秒的时刻是否出现峰，由此，可以判断是否检测到某种血红蛋白。同样地，可以通过判断在tb的时刻是否出现峰来判断是否检测到HbA1c，可以通过判断在tc的时刻是否出现峰来判断是否检测到HbA0，可以通过判断在tf的时刻是否出现峰来判断是否检测到HbS，可以通过判断在tg的时刻是否出现峰来判断是否检测到变异血红蛋白C。另外，在ta、tb、tc、tf、tg以外的时刻出现峰时，可以判断为检测到预先未设想到的血红蛋白。另外，根据各时刻处的吸光度的大小，可以测定各血红蛋白的浓度。
在本实施方式中，在快速模式中，例如在测定试样中含有HbA1c、HbA0、某种血红蛋白、变异血红蛋白C和变异血红蛋白S的情况下，通过上述控制程序切换洗脱液并依次输送至分析柱60时，如图4所示，预先设想到从测定开始至tb的时刻出现HbA1c的峰。在这种情况下，根据演算出的色谱图判断在tb附近是否出现峰，由此，可以判断是否检测到HbA1c。
因此，在步骤S20中，基于演算出的色谱图，测定HbA1c。即，如前所述，判断在tb附近是否出现峰，如果在tb附近出现峰，则判断为检测到HbA1c。而且，由tb附近的峰部分的吸光度的积分值来测定HbA1c的浓度。
在步骤S24中，将测定结果存储于非挥发性存储器100D中。即，将HbA1c的浓度和变异血红蛋白的检测的有无存储于非挥发性存储器100D中。
在步骤S44中，对于全部的采血管11判断上述的测定是否结束，在对于全部的采血管11测定已结束的情况下，结束本程序，在存在测定未结束的采血管11的情况下，返回至步骤S10，判定将测定对象的血液试样13是在变体模式下进行测定还是在快速模式下进行测定。
在步骤S10中判定为在变体模式下进行测定的情况下，向步骤S26转移。
在步骤S26中，以与步骤S12同样的方式导入血液试样13。
在步骤S28中，将A液供给至分析柱60预先确定的时间。由此，使HbA1c从分析柱60溶出。
在步骤S30中，将C液供给至分析柱60预先确定的时间。由此，在使HbA1c从分析柱60溶出后使HbA1c以外的血红蛋白溶出。
在步骤S32中，将A液供给至分析柱60预先确定的时间。由此，使分析柱60平衡化。
在步骤S34中，将B液供给至分析柱60预先确定的时间。由此，使残留在分析柱60中的血红蛋白全部溶出，将分析柱60清洗。
在步骤S36中，将A液供给至分析柱60预先确定的时间。由此，使分析柱60平衡化。
这样，在变体模式中，以A液→C液→A液→B液→A液的顺序向分析柱60进行送液。
在步骤S38中，以与步骤S20同样的方式测定HbA1c。
在步骤S40中，测定变异血红蛋白。即，如前所述，通过判断在tb和tc以外的时刻是否出现峰来判断是否检测到变异血红蛋白。而且，在tb和tc以外的时刻出现峰的情况下，由该峰部分的积分值测定变异血红蛋白的浓度。
在步骤S42中，将测定结果存储于非挥发性存储器100D中。即，将HbA1c的浓度和变异血红蛋白的浓度存储于非挥发性存储器100D中。
这样，在本实施方式中，可以在一个装置中切换快速模式和变体模式来进行测定。
接着，参照图5(A)，对连续进行快速模式下的测定的情况下的A液和B液的送液时机、HbA1c的峰出现的时机和将B液输送至分析柱60后的分析柱60内的B液的残留量进行说明。
在图5(A)中，由阴影线表示的波形W1表示HbA1c的吸光度的峰的波形。另外，波形W2表示B液的送液时机。另外，波形W3表示分析柱60内的B液的残留量。即，图5(A)中的纵轴具有HbA1c的吸光度和B液的残留量这两个含义。
例如，如图5(A)所示，在快速模式的第n个测定中，从t1时刻至t2时刻输送A液，从t2时刻至t3时刻输送B液，从t3时刻至t4时刻输送A液。此处，在从t2时刻至t3时刻输送B液时，B液在进入至分析柱60之前的配管内与A液混合，因此，分析柱60内的B液的残留量(浓度)实际上并不像波形W2那样，而是形成像波形W3那样缓慢地增加、然后缓慢地减小的波形。另外，HbA1c的峰在tpn时刻出现。将从作为测定开始时刻的t1时刻至出现HbA1c的峰的tpn时刻的时间T秒称为保留时间。
然后，从t4时刻起开始第(n+1)个测定中的A液的输送，尽管是第n个测定中输送的B液少量残留在分析柱60中的状态，但开始第(n+1)个测定中的A液的输送。这是因为会极力缩短1次的测定时间，但如果下一个的第(n+2)个测定也是快速模式的测定，则在第(n+2)个测定的开始时残留在分析柱60中的B液的残留量与在第(n+1)个测定的开始时残留在分析柱60中的B液的残留量大致相同。这样，在连续进行快速模式的情况下，测定开始时的B液的残留量大致相同。因此，例如第(n+1)个测定中的保留时间、即从t1时刻至tpn时刻的时间与第(n+1)个测定中的保留时间、即从t4时刻至tp(n-1)时刻的时间大致相同，没有特别的问题。
接着，对在从变体模式切换为快速模式的情况下的、A液～C液的送液时机、HbA1c的峰出现的时机、将C液输送至分析柱60后的分析柱60内的C液的残留量和将B液输送至分析柱60后的分析柱60内的B液的残留量进行说明。
例如，如图5(B)所示，在变体模式的第n个测定中，从t1时刻至t2时刻输送A液，从t2时刻至t3时刻输送C液，从t3时刻至t4时刻输送A液，从t4时刻至t5时刻输送B液，从t5时刻至t6时刻输送A液。需要说明的是，图5(B)的t4至t6的时刻各自对应于图5(A)的t2至t4的时刻。即，图5(B)的B液的送液时间(从t4至t5的时间)与图5(A)的B液的送液时间(从t2至t3的时间)相同，图5(B)的A液的送液时间(从t5至t6的时间)与图5(A)的A液的送液时间(从t3至t4的时间)相同。
此处，波形W4表示C液的送液时机。另外，波形W5表示分析柱60内的C液的残留量。在从t2时刻至t3时刻输送C液的情况下，分析柱60内的C液的残留量与前述的B液的情况同样，实际上并不像波形W4那样，而是形成像波形W5那样缓慢地增加、然后缓慢地减小的波形。因此，在第(n+1)个测定开始的t6时刻，形成第n个测定中输送的C液少量残留在分析柱60中的状态。另外，与图5(A)同样，形成B液也少量残留的状态。
由此，如图5(B)所示，第(n+1)个测定中HbA1c的峰出现的时机比图5(A)的情况早a秒，保留时间为(T-a)秒。这是因为，在t6时刻，虽然B液的残留量与图5(A)的情况相同，但残留有C液。
因此，在本实施方式中，如图5(C)所示，使在C液之后输送的A液的送液时间比图5(B)的情况长。即，使在C液之后输送的A液的送液量比图5(B)的情况多。在图5(C)的例中，与图5(B)的情况相比，将在C液之后输送的A液的送液时间(从t3至t4的时间)延长。即，将在步骤S32中输送的A液的送液时间延长。需要说明的是，在C液、A液之后输送的B液和A液的送液时间与图5(B)的情况相同。
由此，如图5(C)所示，在第(n+1)个测定开始的t6时刻，第n个测定中输送的C液消失，C液的影响消失。B液的残留量与图5(A)的情况相同，因此，第(n+1)个测定的HbA1c的保留时间为T秒，与如图5(A)所示在连续进行快速模式的情况下的HbA1c的保留时间相同。需要说明的是，对于在C液之后输送的A液的送液时间，可以不一定设定为C液从分析柱60中消失的时间，设定为即使在分析柱60中少量残留有C液也不会使保留时间产生偏移的时间即可。
另外，如图5(D)所示，可以不延长在C液之后输送的A液的送液时间，而是使在B液之后输送的A液的送液时间比图5(B)的情况延长b秒。即，将步骤S36中输送的A液的送液时间延长。由此，能够使第n个测定的测定时间(从t1至t6的时间)与图5(C)的情况相比缩短。这是因为，C液的残留增加，相应地B液的残留减少。
这样，在本实施方式中，在变体模式下测定HbA1c的情况下，以使HbA1c的保留时间与在快速模式下测定的HbA1c的保留时间相同的方式，对在C液的输送后输送至分析柱60的A液、即紧随着C液之后输送的A液和紧随着B液之后输送的A液中的至少一者的送液时间进行控制。由此，可以设定为在快速模式和变体模式的测定开始时，使B液和C液的残留成分以及残留量对HbA1c的溶出产生的影响实质上相同。因此，在切换变体模式和快速模式来测定HbA1c的情况下，能够抑制HbA1c的保留时间产生偏移。
需要说明的是，在本实施方式中，作为控制分析柱60内的洗脱条件的一个方式，对以使在变体模式和快速模式下测定的HbA1c的保留时间相同的方式控制洗脱液的送液时间的情况进行了说明，但作为控制分析柱60内的洗脱条件的方式，并不限定于此。例如，作为控制分析柱60内的洗脱条件的其他方式，包含：控制洗脱液的送液时机，控制洗脱液的送液量，控制洗脱液的流速，添加消去液和变更洗脱液的浓度。通过使这样的洗脱条件与不切换变体模式和快速模式的情况下的洗脱条件不同，可以以使在变体模式和快速模式下测定的HbA1c的保留时间相同的方式进行控制。
另外，在变体模式下测定的第一保留时间与在快速模式下测定的第二保留时间不同的情况下，可以根据第一保留时间与第二保留时间的差而使变体模式中的B液的送液时机有所不同。
一般而言，在变体模式中，与快速模式相比，所使用的洗脱液的种类多，因此，通常C液的影响残留至下一个测定中，在下一个测定中使HbA1c的保留时间变早。需要说明的是，B液可以在变体模式下使用也可以在快速模式下使用，因此认为，不会影响保留时间的差，C液的残留量的差会影响保留时间的差。
因此，例如，如图6(B)所示，根据第一保留时间与第二保留时间的差(c秒)，进行使B液的送液时机提前d秒的反馈控制。由此，调节第n个测定中的C液和B液的合成的残留量，如图6(B)所示，在下一个的变体模式下测定的第一保留时间T1秒与在快速模式下测定的第二保留时间T2秒相同。需要说明的是，在图6(B)的例中，在变体模式下测定的第一保留时间比在快速模式下测定的第二保留时间短c秒，因此使B液的送液时机提早了d秒，但例如在变体模式下测定的第一保留时间比在快速模式下测定的第二保留时间晚c秒的情况下，使B液的送液时机晚d秒即可。对于根据第一保留时间与第二保留时间的差而以何种程度调节B液的送液时机、即c秒与d秒的对应关系，可以预先通过实验求出，也可以实际反复进行测定而由测定结果求出。
需要说明的是，上述的反馈控制例如在C液的残留量影响保留时间的变体模式的测定时进行，但并不限定于此。
另外，在本实施方式中，对预滤器PF设置在进样阀63与分析柱60之间的情况进行了说明，但并不限定于此，例如如图7所示，也可以形成使预滤器PF与分析柱60一体化的构成。由此，能够减少配管85的容量，能够极力抑制C液的残留量。因此，能够极力抑制HbA1c的保留时间产生偏移。
另外，在液相色谱装置中，在如分析柱的更换时、液相色谱装置的维护时担心测定条件发生变更的情况下，通常使用校正用的试样(以下，称为校准器)实施液相色谱装置的校正(以下，称为校准)。另外，即使在不担心测定条件发生变更的情况下，通常也定期地实施校正而维持测定精度。
在这种情况下，需要准备低浓度的低(Low)校准器和高浓度的高(High)校准器这两种校准器，对每种校准器执行校准。
如本实施方式所示，在1台液相色谱装置中切换变体模式和快速模式的情况下，需要对每个测定模式进行校准，但例如在变体模式下使用Low校准器和High校准器执行校准后，切换至快速模式并使用低浓度和高浓度的校准器执行校准时，装置的清洗、校准器的准备变得繁杂，使用者弄错设置校准器的次序、设置的数量等的可能性变高。即，在上述例的情况下，必须以Low(变体模式)→High(变体模式)→Low(快速模式)→High(快速模式)的顺序执行测定，执行3次校准器的切换，执行3次流路的清洗。另外，必须对于变体模式和快速模式的每个测定模式准备Low校准器和High校准器。
因此，将连接稀释槽53与进样阀63的配管83设定为具有能够保持至少两测定份以上的测定试样的容量的配管，例如可以使两测定份的Low校准器保持于配管83中而在变体模式和快速模式的各测定模式下执行基于Low校准器的校准，记录各测定模式的测定结果，然后使两测定份的High校准器保持于配管83中而在变体模式和快速模式的各测定模式下执行基于High校准器的校准，记录各测定模式的测定结果。
由此，以Low(变体模式)→Low(快速模式)→High(变体模式)→High(快速模式)的顺序执行测定，校准器的切换为1次，流路的清洗为1次即可。这样，能够使校正作业简化，能够降低成本，并且能够降低使用者弄错设置校准器的次序、设置的数量等的可能性。需要说明的是，该方法并不限于校准，也可以用于精度管理物质(样本)的测定(控制测定)等，能够有助于试药的使用量削减、精度管理物质的使用量削减等的成本降低，并且能够减少使用者的精度管理物质的设置错误等。
另外，在将配管83设定为具有能够保持两测定份的测定试样的容量的配管的情况下，首先使用一半测定试样而在快速模式下执行测定，在发生某些异常的情况下，例如在测定的HbA1c的值为异常低的值的情况下，可以使用剩余的一半测定试样在变体模式下执行测定。
需要说明的是，本发明并不限定于上述的实施方式，可以进行各种变更。例如，并不限定于用于测定血液中的血红蛋白浓度的HPLC装置，对于使用血液以外的样本的情况、测定血红蛋白浓度以外的成分的情况或HPLC装置以外的液相色谱装置，也可以应用本发明。

Claims (7)

1.一种液相色谱测定方法，其包含：
使用液相色谱法，切换通过将第一成分分离用洗脱液、第二成分分离用洗脱液和清洗用洗脱液依次输送至分析柱来对测定试样的血红蛋白A1c和变异血红蛋白进行测定的第一测定模式与通过将所述第一成分分离用洗脱液和所述清洗用洗脱液依次输送至所述分析柱来对所述血红蛋白A1c进行测定的第二测定模式的工序；
以使所述第一测定模式下的所述血红蛋白A1c的第一保留时间与所述第二测定模式下的所述血红蛋白A1c的第二保留时间相同的方式，在所述第一测定模式中所述第二成分分离用洗脱液的影响消失之前，输送所述清洗用洗脱液的工序；以及
在所述清洗用洗脱液之后，输送所述第一成分分离用洗脱液的工序。
2.如权利要求1所述的液相色谱测定方法，其中，所述第一测定模式下的输送所述清洗用洗脱液后的输送所述第一成分分离用洗脱液的送液时间比所述第二测定模式下的输送所述清洗用洗脱液后的输送所述第一成分分离用洗脱液的送液时间长。
3.如权利要求1或权利要求2所述的液相色谱测定方法，其中，使两测定份的低浓度用校准器和高浓度用校准器中的一个校准器保持于能够保持至少两测定份以上的所述测定试样的保持单元中，执行所述第一测定模式和所述第二测定模式的校准，
使两测定份的低浓度用校准器和高浓度用校准器中的另一个校准器保持于所述保持单元中，执行所述第一测定模式和所述第二测定模式的校准。
4.一种液相色谱测定装置，其包含：
使用液相色谱法，切换通过将第一成分分离用洗脱液、第二成分分离用洗脱液和清洗用洗脱液依次输送至分析柱来对测定试样的血红蛋白A1c和变异血红蛋白进行测定的第一测定模式与通过将所述第一成分分离用洗脱液和所述清洗用洗脱液依次输送至所述分析柱来对所述血红蛋白A1c进行测定的第二测定模式的切换单元；
以使所述第一测定模式下的所述血红蛋白A1c的第一保留时间与所述第二测定模式下的所述血红蛋白A1c的第二保留时间相同的方式，在所述第一测定模式中所述第二成分分离用洗脱液的影响消失之前，输送所述清洗用洗脱液的第一送液单元；以及
在所述清洗用洗脱液之后，输送所述第一成分分离用洗脱液的第二送液单元。
5.如权利要求4所述的液相色谱测定装置，其中，所述第一测定模式下的输送所述清洗用洗脱液后的输送所述第一成分分离用洗脱液的送液时间比所述第二测定模式下的输送所述清洗用洗脱液后的输送所述第一成分分离用洗脱液的送液时间长。
6.如权利要求4或权利要求5所述的液相色谱测定装置，其中，用于过滤所述测定试样、所述第一成分分离用洗脱液、所述第二成分分离用洗脱液和所述清洗用洗脱液的预滤器与所述分析柱成为一体化。
7.一种存储介质，其为存储有用于使计算机执行液相色谱测定处理的程序的非暂时性存储介质，其中，所述液相色谱测定处理包含：
使用液相色谱法，切换通过将第一成分分离用洗脱液、第二成分分离用洗脱液和清洗用洗脱液依次输送至分析柱来对测定试样的血红蛋白A1c和变异血红蛋白进行测定的第一测定模式与通过将所述第一成分分离用洗脱液和所述清洗用洗脱液依次输送至所述分析柱来对所述血红蛋白A1c进行测定的第二测定模式，
以使所述第一测定模式下的所述血红蛋白A1c的第一保留时间与所述第二测定模式下的所述血红蛋白A1c的第二保留时间相同的方式，在所述第一测定模式中所述第二成分分离用洗脱液的影响消失之前，输送所述清洗用洗脱液，
在所述清洗用洗脱液之后，输送所述第一成分分离用洗脱液。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5543315A (en) * 1992-06-30 1996-08-06 Kyoto Daiichi Kagaku Co., Ltd. Method for stabilizing measurement values by high speed liquid chromatography
US6428704B1 (en) * 1998-08-07 2002-08-06 Sekisui Chemical Co., Ltd. Method for determination of hemoglobins
CN101484792A (zh) * 2006-03-24 2009-07-15 爱科来株式会社 糖基血红蛋白浓度测定方法和浓度测定装置
CN105223299A (zh) * 2014-06-26 2016-01-06 爱科来株式会社 测定方法、测定装置及洗脱液

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1990006516A1 (en) * 1988-12-05 1990-06-14 Primus Corporation Method for determination of glycated proteinaceous species
JP2619537B2 (ja) * 1989-09-18 1997-06-11 株式会社日立製作所 液体クロマトグラフの方法，その装置，そのシステム，及びその分離カラム
JP3131439B2 (ja) * 1990-09-21 2001-01-31 株式会社日立製作所 液体クロマトグラフ装置
JP2800509B2 (ja) * 1990-11-30 1998-09-21 株式会社日立製作所 液体クロマトグラフ装置
US5719053A (en) 1996-05-06 1998-02-17 Primus Corporation Chromatographic method for the identification and characterization of hemoglobin variants in blood
JPH1010107A (ja) 1996-06-21 1998-01-16 Sekisui Chem Co Ltd 液体クロマトグラフィーによる試料の分析方法
JP4420539B2 (ja) * 1999-09-24 2010-02-24 積水化学工業株式会社 ヘモグロビンａ２の分離方法
US8021887B2 (en) * 2006-03-24 2011-09-20 Arkray, Inc. Method of measuring glycated hemoglobin concentration
JP5238319B2 (ja) 2008-03-27 2013-07-17 積水化学工業株式会社 ヘモグロビン類の測定方法
JP2011141120A (ja) * 2008-10-07 2011-07-21 Arkray Inc 液体クロマトグラフィ装置および液体クロマトグラフィ
JP5013560B2 (ja) * 2010-02-02 2012-08-29 積水メディカル株式会社 ヘモグロビンｓの分析方法、及び、ヘモグロビンａ２の分析方法
JP5843509B2 (ja) * 2010-07-26 2016-01-13 アークレイ株式会社 クロマトグラムの表示方法
JP5778547B2 (ja) * 2010-10-28 2015-09-16 アークレイ株式会社 ヘモグロビンＡ１ｃ測定における校正方法
EP2762876A4 (en) * 2011-09-29 2015-05-06 Sekisui Medical Co Ltd METHOD FOR MEASURING STABILE HEMOGLOBIN A1C BY MEANS OF LIQUID CHROMATOGRAPHY AND A METHOD OF MEASURING STABLE HEMOGLOBIN A1C AND IRREGULAR HEMOGLOBIN AT THE SAME TIME BY MEANS OF LIQUID CHROMATOGRAPHY

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5543315A (en) * 1992-06-30 1996-08-06 Kyoto Daiichi Kagaku Co., Ltd. Method for stabilizing measurement values by high speed liquid chromatography
US6428704B1 (en) * 1998-08-07 2002-08-06 Sekisui Chemical Co., Ltd. Method for determination of hemoglobins
CN101484792A (zh) * 2006-03-24 2009-07-15 爱科来株式会社 糖基血红蛋白浓度测定方法和浓度测定装置
CN105223299A (zh) * 2014-06-26 2016-01-06 爱科来株式会社 测定方法、测定装置及洗脱液

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