CN107299127A - B族链球菌鉴定和药敏检测卡、b族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒及其使用方法 - Google Patents

Abstract

一种B族链球菌鉴定和药敏检测卡、B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒及其使用方法，B族链球菌鉴定和药敏检测卡，包括一检测卡本体，所述检测卡本体上设置有鉴别微孔区和药敏试验区，所述鉴别微孔区开设有若干个鉴别微孔，所述药敏试验区开设有若干个药敏微孔。上述B族链球菌鉴定和药敏检测卡，能够同时进行B族链球菌鉴定和药敏检测实验，便捷性较好。基于显示法/比浊法来对B族链球菌进行鉴定和药敏实验，相对于核酸检测，检测成本较低。

Description

B族链球菌鉴定和药敏检测卡、B族链球菌鉴定和药敏检测试 剂盒及其使用方法

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，特别是涉及一种B族链球菌鉴定和药敏检测卡、B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒及其使用方法。

背景技术

B族链球菌(group B streptococcus，GBS)，又叫无乳链球菌(S.agalactiae)，在1938年首次被发现，1938年Fry首次报告3例感染B族链球菌引起产后心内膜炎的死亡，证实B族链球菌为人类的致病菌。经过科学技术的发展，发现B族链球菌可引起新生儿败血症、肺炎、脑膜炎，甚至死亡等。在感染后存活的新生儿，还有可能有严重的神经系统后遗症，包括脑积水、智力障碍、小头畸形、耳聋等。同时，B族链球菌还可引起孕妇感染、引起早产、胎儿发育不良、胎膜早破及晚期流产等。对围产期孕妇进行GBS筛查，成为预防新生儿感染、降低新生儿死亡率的必须手段。

美国疾病控制中心(CDC)2010年发布的GBS预防指南中建议，对于怀孕35周～37周的孕妇进行阴道和直肠的GBS筛检，我国也已经把孕妇GBS筛查列为产前必须检测项目之一。

对于孕妇感染GBS的治疗方案，国内外都主要采用抗生素治疗，但是近年来随着抗生素的滥用，GBS的耐药性逐年上升。1998年至2001年间，美国及加拿大地区，GBS对红霉素的耐药性由7％上升至25％，2003年达到37％；在我国，广州地区1999年分离的GBS菌株对红霉素和林可霉素耐药率即分别达到45％和26％。为了精准用药用，同时减少抗生素的使用量和避免孕妇病情的延误，我们更有必要对感染GBS的孕妇进行药敏试验。

目前现有的B族链球菌的鉴定方法包括：(1)微生物平板培养法，该种方法操作复杂，需要专业人员，费时费力；(2)抗原金标检测法，该方法的灵敏度和特异性差，实验结果与临床相符度低，难以满足医院需求；(3)分子探针检测法，该方法对试验条件要求很高，同时试验操作复杂，需要昂贵设备和专业人员才能完成。GBS药敏试验方法主要是纸片扩散法，该方法较简易，但消耗时间过长，不能进行定量检测。综上所述，目前GBS的鉴定和药敏试验方法很难满足医院要求的快捷简便、准确可靠的要求。此外，现有的以显色法/浊度法法来对B族链球菌进行鉴定和药敏检测，需要首先做B族链球菌鉴定实验，在B族链球菌鉴定为阳性之后，再进行B族链球菌的药敏实验检测，整个检测过程费时费力，便捷性较差。

发明内容

基于此，有必要提供一种能够同时进行B族链球菌鉴定和药敏的检测实验、操作便捷性较好的B族链球菌鉴定和药敏检测卡、B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒及其使用方法。

一种B族链球菌鉴定和药敏检测卡，其特征在于，包括一检测卡本体，所述检测卡本体上设置有鉴别微孔区和药敏试验区，所述鉴别微孔区开设有若干个鉴别微孔，所述药敏试验区开设有若干个药敏微孔。

在其中一个实施例中，所述检测卡本体上还开设有加样口及废液口，各所述鉴别微孔、各所述药敏微孔均分别与所述加样口及所述废液口连通。

在其中一个实施例中，所述鉴别微孔区开设有至少5个鉴别微孔，所述药敏试验区开设有至少23个药敏微孔。

在其中一个实施例中，所述鉴别微孔区开设有6个鉴别微孔，所述药敏试验区开设有26个药敏微孔。

在其中一个实施例中，其中5个所述鉴别微孔内分别一一对应吸附有葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蜜二糖以及棉子糖的检测底物。

在其中一个实施例中，23个药敏微孔中的其中22个药敏微孔两两分成11个药敏微孔组，11个药敏微孔组中一一对应添加有青霉素、氨苄西林、红霉素、克林霉素、万古霉素、头孢曲松、头孢唑林、左氧氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素以及利奈唑胺，其中，每一组的药敏微孔组的两个药敏微孔中分别盛装最低抑菌浓度值的最高浓度和最低浓度的同一种鉴别药物，23个药敏微孔中除去22个药敏微孔的剩余的1个药敏微孔中添加有诱导性克林霉素耐药试剂。

一种B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒，包括如上任一实施例中所述的B族链球菌鉴定和药敏检测卡。

在其中一个实施例中，B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒还包括B族链球菌培养液。

如上任一实施例中所述的B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒的使用方法，包括如下步骤：

将离体的标本加入B族链球菌培养液中，得到标本液。

将标本液加入各所述鉴别微孔及各所述药敏微孔中；

将B族链球菌鉴定和药敏检测卡在35℃～37℃条件下恒温培养5小时～24小时；

分别对B族链球菌鉴定和药敏检测B族链球菌鉴定和药敏检测卡中的各所述鉴别微孔、各所述药敏微孔进行颜色观察，得到检测结果。

在其中一个实施例中，所述离体的标本通过拭子采集得到。

在其中一个实施例中，所述拭子为孕妇阴道拭子或肛拭子。

上述B族链球菌鉴定和药敏检测卡，鉴别微孔区的鉴别微孔用于进行B族链球菌鉴定实验，药敏微孔区的药敏微孔用于进行B族链球菌的药敏检测实验，从而能够同时进行B族链球菌鉴定和药敏检测实验，便捷性较好。此外，上述B族链球菌鉴定和药敏检测卡，基于显示法/浊度法来对B族链球菌进行鉴定和药敏实验，相对于核酸检测，检测成本较低。

其它实施例中还能够达到的技术效果是，通过在B族链球菌鉴定和药敏检测卡上开设加样口和废液口，且各所述鉴别微孔、各所述药敏微孔均分别与所述加样口及所述废液口连通，使用过程中，将标本液加入至加样口后，通过倾斜B族链球菌鉴定和药敏检测卡，使加样口中的标本液加满各所述鉴别微孔和各所述药敏微孔，使得加样过程非常方便，以往需要手动逐一加样的过程现在一次操作即可完成，进一步提高了加样便捷性。

附图说明

图1为本发明一实施方式的B族链球菌鉴定和药敏检测卡的结构示意图。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的较佳实施方式。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施方式。相反地，提供这些实施方式的目的是使对本发明的公开内容理解的更加透彻全面。当然，它们仅仅为示例，并且目的不在于限制本发明。此外，本发明可以在不同例子中重复参考数字和/或字母。这种重复是为了简化和清楚的目的，其本身不指示所讨论各种实施例和/或设置之间的关系。

需要说明的是，当元件被称为“固定于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。本文所使用的术语“垂直的”、“水平的”、“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的，并不表示是唯一的实施方式。

在本发明的描述中，需要说明的是，除非另有规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是机械连接或电连接，也可以是两个元件内部的连通，可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语的具体含义。

此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。在发明的描述中，“多个”的含义是至少两个，例如两个，三个等，除非另有明确具体的限定。在本发明的描述中，“若干”的含义是至少一个，例如一个，两个等，除非另有明确具体的限定。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中所使用的术语只是为了描述具体的实施方式的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

例如，一种B族链球菌鉴定和药敏检测卡，包括一检测卡本体，所述检测卡本体上设置有鉴别微孔区和药敏试验区，所述鉴别微孔区开设有若干个鉴别微孔，所述药敏试验区开设有若干个药敏微孔。又如，所述鉴别微孔为B族链球菌鉴别微孔，又如，所述药敏微孔为B族链球菌药敏微孔。

为了进一步说明上述B族链球菌鉴定和药敏检测卡，又一个例子是，请参阅图1，B族链球菌鉴定和药敏检测卡包括一检测卡本体100，所述检测卡本体100上设置有鉴别微孔区110和药敏试验区120，所述鉴别微孔区110开设有若干个鉴别微孔111，鉴别微孔区的鉴别微孔用于对B族链球菌进行鉴别实验，例如，鉴别微孔中分别吸附有葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蜜二糖或/及棉子糖的检测底物，来对B族链球菌进行鉴别实验。所述药敏试验区120开设有若干个药敏微孔121，药敏试验区的药敏微孔用于对B族链球菌进行药敏检测实验，例如，药敏微孔中分别吸附有青霉素、氨苄西林、红霉素、克林霉素、万古霉素、头孢曲松、头孢唑林、左氧氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素、利奈唑胺及/或诱导性克林霉素耐药试剂等抗生素，以此来对B族链球菌进行药敏检测实验。使用过程中，将待测样本/标本同时加入鉴别微孔111和药敏微孔121中，通过加入对应的鉴别生化试剂或者药敏生化试剂，同时加入B族链球菌进行培养，然后将检测板放入培养箱中培养一段时间之后，通过观察检测板中鉴别微孔111和药敏微孔121的颜色变化或浊度变化，即可实现对B族链球菌的鉴定和药敏检测，当然，在此过程中，也可以将鉴别生化试剂或者药敏生化试剂预先对应吸附至鉴别微孔或者药敏微孔中，如此，可以省去加试剂的步骤，从而进一步提高了操作便捷性。需要说明的是，使用鉴别生化试剂如葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蜜二糖或/及棉子糖等对B族链球菌的鉴别原理及实验过程，以及使用药敏生化试剂如青霉素、氨苄西林、红霉素、克林霉素、万古霉素、头孢曲松、头孢唑林、左氧氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素、利奈唑胺及/或诱导性克林霉素耐药试剂等抗生素对B族链球菌的药敏的实验过程，可参照现有技术进行实现，本发明在此不再赘述。

上述B族链球菌鉴定和药敏检测卡，鉴别微孔区的鉴别微孔用于进行B族链球菌鉴定实验，药敏微孔区的药敏微孔用于进行B族链球菌的药敏检测实验，从而能够同时进行B族链球菌鉴定和药敏检测实验，便捷性较好。此外，上述B族链球菌鉴定和药敏检测卡，基于显示法/浊度法来对B族链球菌进行鉴定和药敏实验，相对于核酸检测，检测成本较低。

一实施例中，请再次参阅图1，所述检测卡本体100上还开设有加样口131及废液口141，各所述鉴别微孔、各所述药敏微孔均分别与所述加样口及所述废液口连通。加样口用于加样经过B族链球菌培养液稀释后的离体的标本。又如，将标本使用B族链球菌培养液配置成标本液后加入加样口中，又如，标本液为将标本使用B族链球菌培养液稀释或配置而成。B族链球菌培养液用于供B族链球菌生长需要。

例如，离体的标本包括但不限于血液、组织、尿液、粪便、白带等。又如，所述标本离体的标本通过拭子采集得到，又如，所述拭子为孕妇阴道拭子或肛拭子。废液口用于放置一些多余的标本液。又如，废液孔中还设置有吸液棉，所述洗液棉能够吸收废液口中一些多余的标本液。如此，通过倾斜检测卡本体，以使加样口131一侧高于废液口141，从而使加样口131中的液体在重力作用下依次/分别填满各所述鉴别微孔及各所述药敏微孔，待各所述鉴别微孔及各所述药敏微孔填满后，多余的液体会流至废液口141中，从而避免液体流出B族链球菌鉴定和药敏检测卡外。上述B族链球菌鉴定和药敏检测卡，通过在B族链球菌鉴定和药敏检测卡上开设加样口和废液口，且各所述鉴别微孔、各所述药敏微孔均分别与所述加样口及所述废液口连通，使用过程中，将标本液加入至加样口后，通过倾斜B族链球菌鉴定和药敏检测卡，使加样口中的标本液加满各所述鉴别微孔和各所述药敏微孔，使得加样过程非常方便，以往需要手动逐一加样的过程现在一次操作即可完成，进一步提高了加样便捷性。又如，所述检测卡上还开设有流道，各所述鉴别微孔、各所述药敏微孔均分别通过所述流道与所述加样口及所述废液口连通。又如，所述流道为加样通道，即流道也可理解为加样通道。又如，所述加样通道的深度均小于所述鉴别微孔、所述药敏微孔、所述加样口及所述废液口的深度。又如，请再次参阅图1，所述检测卡本体100上还设置有加样区130及废液区140，所述加样区130设置所述加样口131，所述废液区140设置所述废液口141。又如，所述检测卡本体100的一侧面上依次包括鉴别微孔区110、药敏微孔区120、加样区130及废液区140。需要进一步说明的是，图1中的虚线并未在检测卡本体中真实存在，只是为了说明B族链球菌鉴定和药敏检测卡的鉴别微孔区110、药敏微孔区120、加样区130及废液区140的位置。

一实施例中，B族链球菌鉴定和药敏检测卡上还设置有盖板，所述盖板盖合于所述检测卡本体上，又如，所述检测卡本体设置各微孔、加样孔及废液口的一侧面被所述盖板盖合。又如，所述盖板于所述加样口对应的位置还设置有加样孔，如此，可以通过从加样孔进行加样操作，从而使其它各种微孔处于开口被封闭状态，提高了操作安全性，避免了染菌几率。又如，所述加样孔还设置有塞子，塞子塞入加样孔中，如此，在加样后可以通过所述塞子塞住所述加样孔。需要说明的是，上述B族链球菌鉴定和药敏检测卡，鉴别微孔、药敏微孔可以将对应的试剂预先吸附在相应的孔中，也可以在用户使用时根据实际需要将对应的试剂加入/吸附在相应的孔中。又如，标本液为将标本使用B族链球菌培养液稀释或者溶解后所得。又如，鉴别微孔为B族链球菌鉴别微孔，又如，加样口为B族链球菌加样口，

一实施例中，所述鉴别微孔区开设有至少5个鉴别微孔。又如，其中5个所述鉴别微孔内分别一一对应吸附有葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蜜二糖以及棉子糖的检测底物。如此，同时通过葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蜜二糖以及棉子糖来对B族链球菌进行鉴定实验，能够使鉴定结果更为准确。又如，所述药敏试验区开设有至少23个药敏微孔。又如，23个药敏微孔中的其中22个药敏微孔两两分成11个药敏微孔组，11个药敏微孔组中一一对应添加有青霉素、氨苄西林、红霉素、克林霉素、万古霉素、头孢曲松、头孢唑林、左氧氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素以及利奈唑胺，其中，每一组的药敏微孔组的两个药敏微孔中分别盛装最低抑菌浓度值的最高浓度和最低浓度的同一种鉴别药物，23个药敏微孔中除去22个药敏微孔的剩余的1个药敏微孔中添加有诱导性克林霉素耐药试剂，如此，能够对B族链球菌进行12项药敏实验。又如，诱导性克林霉素耐药试剂包括克林霉素纸片(2ug/片)和红霉素纸片(15ug/片)。需要进一步说明的是，如何使用克林霉素纸片及红霉素纸片来对B族链球菌进行诱导性克林霉素耐药实验，请参照现有技术。又如，所述鉴别微孔区开设有6个鉴别微孔，所述药敏试验区开设有26个药敏微孔。请参阅图1，6个鉴别微孔分别为A6～A8、B6～B8，26个药敏微孔分别为A1～A5、B1～B5、C1～C8、D1～D8。

又如，最高浓度即为下列括号中的(H)，又如，最高浓度即为下列括号中的(L)。又如，最高浓度采用国标中药敏规定中最低抑菌浓度(minimal inhibitoryconcentration,MIC)值的最高浓度，即抑制90％受试菌株生长所需的MIC，最低浓度采用国标中药敏规定中最低抑菌浓度值的最低浓度，即抑制50％受试菌株生长所需的MIC。又如，加样如下表格所述(请一并结合图1)：

12项药敏检测实验微孔中试剂表

又如，从至少23个药敏微孔中任意选用17个药敏微孔做9项药敏实验，17个药敏微孔中的其中16个药敏微孔两两分成8个药敏微孔组，11个药敏微孔组中一一对应添加有青霉素、氨苄西林、红霉素、克林霉素、万古霉素、头孢曲松、头孢唑林以及左氧氟沙星，其中，每一组的药敏微孔组的两个药敏微孔中分别盛装最低抑菌浓度值的最高浓度和最低浓度的同一种鉴别药物，17个药敏微孔中除去26个药敏微孔的剩余的1个药敏微孔中添加有诱导性克林霉素耐药试剂，如此，还能够对B族链球菌进行9项药敏实验，从而适配性好，满足不同客户的需要。又如，所述鉴别微孔区开设有6个鉴别微孔，所述药敏试验区开设有26个药敏微孔，多设置一个鉴别微孔，能够在其中一个鉴别微孔损坏的情况下，使用剩下的一个鉴别微孔替代，从而不影响对B族链球菌进行鉴定实验。又如，最高浓度即为下列括号中的(H)，又如，最高浓度即为下列括号中的(L)。又如，最高浓度采用国标中药敏规定中最低抑菌浓度值的最高浓度，即抑制90％受试菌株生长所需的MIC，最低浓度采用国标中药敏规定中最低抑菌浓度值的最低浓度，即抑制50％受试菌株生长所需的MIC。又如，加样如下表格所述(结合图1)：

9项药敏检测实验微孔中试剂表

一实施例中，所述鉴别微孔区开设有至少5个鉴别微孔，所述药敏试验区开设有至少17个药敏微孔。又如，17个药敏微孔中的其中16个药敏微孔两两分成8个药敏微孔组，11个药敏微孔组中一一对应添加有青霉素、氨苄西林、红霉素、克林霉素、万古霉素、头孢曲松、头孢唑林以及左氧氟沙星，其中，每一组的药敏微孔组的两个药敏微孔中分别盛装最低抑菌浓度值的最高浓度和最低浓度的同一种鉴别药物，17个药敏微孔中除去26个药敏微孔的剩余的1个药敏微孔中添加有诱导性克林霉素耐药试剂。如此，能够对B族链球菌进行9项药敏实验。

上述B族链球菌鉴定和药敏检测试卡，通过使用B族链球菌鉴定和药敏检测卡，鉴别微孔区用于进行B族链球菌鉴定实验，药敏微孔用于进行B族链球菌的药敏检测实验，从而能够同时进行B族链球菌鉴定和药敏检测实验，便捷性较好。且在上述B族链球菌鉴定和药敏检测卡的使用过程中，标本B族链球菌培养液加入至加样口后，通过倾斜B族链球菌鉴定和药敏检测卡，使加样口中的标本液加满各所述鉴别微孔及各所述药敏微孔，使得加样的过程非常方便，以往需要手动逐一加样的过程现在一次操作即可完成，进一步提高了加样便捷性。此外，上述B族链球菌鉴定和药敏检测卡，基于显示法来对B族链球菌进行鉴定和药敏实验，相对于核酸检测，检测成本较低。

本发明还提供一种B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒，包括如上任一实施例中所述的B族链球菌鉴定和药敏检测卡。上述B族链球菌鉴定和药敏检测盒，包含了B族链球菌鉴定和药敏检测卡，鉴别微孔区的鉴别微孔用于进行B族链球菌鉴定实验，药敏微孔区的药敏微孔用于进行B族链球菌的药敏检测实验，从而能够同时进行B族链球菌鉴定和药敏检测实验，便捷性较好。此外，上述B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒，基于显示法/浊度法来对B族链球菌进行鉴定和药敏实验，相对于核酸检测，检测成本较低。又如，所述B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒包括包装盒及B族链球菌鉴定和药敏检测卡，所述B族链球菌鉴定和药敏检测卡位于所述包装盒内。

一实施例中，所述B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒还包括B族链球菌培养液。如此，通过直接将B族链球菌培养液一并设置于试剂盒中，能够进一步提高操作便捷性，减少需要额外配置或者购买B族链球菌培养液的问题。例如，B族链球菌培养液包括但不限于链球菌基础营养肉汤和酵母提取液等。

一实施例中，B族链球菌培养液包括基础营养液、促生长剂、生长试剂、生长指示剂、杂菌抑制剂及解毒剂。又如，所述基础液为链球菌基础营养肉汤和酵母提取液中的至少一种，基础营养液提供生长基本营养。又如，所述促生长剂包括主要成分和添加成分，所述主要成分为脱纤维羊血、脱纤维马血、马血清以及小牛血清中任一种，所述添加成分为丙酮酸钠、亚硫酸钠、氯化钠、异抗坏血酸以及氯化血红素中的至少一种，促生长剂用于提高B族链球菌的生长速度。又如，所述解毒剂为可溶性淀粉、活性炭以及环糊精中的至少一种，解毒剂用于吸附不利B族链球菌的生长物质。又如，所述生长指示剂为噻唑蓝、磺基罗丹明B、酚酞、甲基红和碘硝基四唑紫中的任一种。又如，所述杂菌抑制剂包括萘啶酸、粘菌素B、两性霉素B以及甲氧苄氨嘧啶，杂菌抑制用于抑制其他杂菌生长。选用上述组分的B族链球菌培养液，能够减少对B族链球菌鉴定和药敏检测的影响，还能够缩短B族链球菌的鉴定和药敏检测时间，使鉴定和检测时间能够缩减至6小时至20小时。相对于传统中的B族链球菌的鉴定和药敏检测时间动辄24小时的检测时间，缩短了检测时间。

上述B族链球菌鉴定和药敏检测盒，包含了B族链球菌鉴定和药敏检测卡，鉴别微孔区的鉴别微孔用于进行B族链球菌鉴定实验，药敏微孔区的药敏微孔用于进行B族链球菌的药敏检测实验，从而能够同时进行B族链球菌鉴定和药敏检测实验，便捷性较好。此外，上述B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒，基于显示法/浊度法来对B族链球菌进行鉴定和药敏实验，相对于核酸检测，检测成本较低。又如，所述B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒包括包装盒及B族链球菌鉴定和药敏检测卡，所述B族链球菌鉴定和药敏检测卡位于所述包装盒内。

本发明还提供一种B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒的使用方法，其中B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒为如上任一实施例中所述的B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒，所述使用方法包括如下步骤：

S110：将离体的标本加入B族链球菌培养液中，得到标本液。

例如，离体的标本包括但不限于血液、组织、尿液、粪便、白带等。又如，所述离体的标本通过拭子采集得到。又如，所述拭子为孕妇阴道拭子或肛拭子。

例如，将采集的分泌物拭子直接投入到B族链球菌培养液瓶壁旋转挤压数次，使拭子中的样本充分混入B族链球菌培养液中，浸泡几分钟，使其充分溶解至B族链球菌培养液后即得标本液。需要说明的是，为避免其它微生物的污染有必要采取标准的实验操作技术。标本采集后应立即送检，常温下在4小时内完成检测，2-8℃冷藏条件下不要超过48小时。

S120：将标本液加入各所述鉴别微孔及各所述药敏微孔中。

例如，各所述鉴别微孔及各所述药敏微孔中预先吸附有对应的试剂。又如，在使用过程中再加入与各所述鉴别微孔及各所述药敏微孔中对应的试剂。

S130：将B族链球菌鉴定和药敏检测卡在35℃～37℃条件下恒温培养5小时～24小时。

又如，将B族链球菌鉴定和药敏检测卡在35℃～37℃条件下恒温培养18小时～24小时。又如，将B族链球菌鉴定和药敏检测卡在36.5℃条件下恒温培养6小时～12小时。

例如，当B族链球菌鉴定和药敏检测卡中设置有盖板时，用配套塑料塞把加液口盖好后在35-37℃条件下恒温培养18-24小时。

S130：分别对B族链球菌鉴定和药敏检测卡中的各所述鉴别微孔、各所述药敏微孔进行颜色观察，得到检测结果。

例如，若鉴别孔中精氨酸、海藻糖、纤维二糖孔中有至少两孔变黄色，甘露醇、马尿酸钠、山梨醇孔中至少有两孔不变色，则表明为GBS，否则为其他细菌。例如，微孔变红表明该浓度药物不能抑制GBS生长，不变色则能抑制GBS生长。

又如，采用人工误读的方法进行颜色观察。又如，人工误读的方法如下(请结合图1)：

又如，采用药敏检测仪进行颜色观察/读取，按仪器操作说明书进行判读。

上述B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒的使用方法，能够同时进行B族链球菌鉴定和药敏检测实验，便捷性较好。此外，基于显示法/浊度法来对B族链球菌进行鉴定和药敏实验，相对于核酸检测，检测成本较低。

一实施例中，当B族链球菌鉴定和药敏检测卡中设置有加样口及废液口且各所述鉴别微孔、各所述药敏微孔均分别与所述加样口及所述废液口连通时，所述步骤S120具体为：

S121：将标本液加入B族链球菌鉴定和药敏检测卡的加样口中。

例如，取充分溶解混匀后的标本液，从加样口倒入平放置的检测板中。

S122：倾斜B族链球菌鉴定和药敏检测卡，使加样口中的标本液加满各所述鉴别微孔及各所述药敏微孔。

例如，轻轻用手抬高检测板加样口一侧一定角度，使标本液从加样口侧向另一侧通过加液通道把各微孔全部加满，多余的标本液通过吸液棉吸附掉。

所述步骤S130具体为：分别对B族链球菌鉴定和药敏检测卡中的各所述鉴别微孔、各所述药敏微孔进行颜色观察，得到检测结果。

上述B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒的使用方法，通过使用B族链球菌鉴定和药敏检测卡，鉴别微孔区用于进行B族链球菌鉴定实验，药敏微孔用于进行B族链球菌的药敏检测实验，从而能够同时进行B族链球菌鉴定和药敏检测实验，便捷性较好。且在将上述B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒的使用过程中，标本B族链球菌培养液加入至加样口后，通过倾斜B族链球菌鉴定和药敏检测卡，使加样口中的标本液加满各所述鉴别微孔及各所述药敏微孔，使得加样的过程非常方便，以往需要手动逐一加样的过程现在一次操作即可完成，进一步提高了加样便捷性。此外，上述B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒，基于显示法来对B族链球菌进行鉴定和药敏实验，相对于核酸检测，检测成本较低。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种B族链球菌鉴定和药敏检测卡，其特征在于，包括一检测卡本体，所述检测卡本体上设置有鉴别微孔区和药敏试验区，所述鉴别微孔区开设有若干个鉴别微孔，所述药敏试验区开设有若干个药敏微孔。

2.根据权利要求1所述的B族链球菌鉴定和药敏检测卡，其特征在于，所述检测卡本体上还开设有加样口及废液口，各所述鉴别微孔、各所述药敏微孔均分别与所述加样口及所述废液口连通。

3.根据权利要求2所述的B族链球菌鉴定和药敏检测卡，其特征在于，所述鉴别微孔区开设有至少5个鉴别微孔，所述药敏试验区开设有至少23个药敏微孔。

4.根据权利要求3所述的B族链球菌鉴定和药敏检测卡，其特征在于，所述鉴别微孔区开设有6个鉴别微孔，所述药敏试验区开设有26个药敏微孔。

5.根据权利要求3所述的B族链球菌鉴定和药敏检测卡，其特征在于，其中5个所述鉴别微孔内分别一一对应吸附有葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蜜二糖以及棉子糖的检测底物。

6.根据权利要求3所述的B族链球菌鉴定和药敏检测卡，其特征在于，23个药敏微孔中的其中22个药敏微孔两两分成11个药敏微孔组，11个药敏微孔组中一一对应添加有青霉素、氨苄西林、红霉素、克林霉素、万古霉素、头孢曲松、头孢唑林、左氧氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素以及利奈唑胺，其中，每一组的药敏微孔组的两个药敏微孔中分别盛装最低抑菌浓度值的最高浓度和最低浓度的同一种鉴别药物，23个药敏微孔中除去22个药敏微孔的剩余的1个药敏微孔中添加有诱导性克林霉素耐药试剂。

7.一种B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1至6任一项中所述的B族链球菌鉴定和药敏检测卡。

8.根据权利要求7所述的B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒，其特征在于，还包括B族链球菌培养液。

9.根据权利要求7或8中所述的B族链球菌鉴定和药敏检测试剂盒的使用方法，其特征在于，包括如下步骤：

将离体的标本加入B族链球菌培养液中，得到标本液；

将标本液加入各所述鉴别微孔及各所述药敏微孔中；

将B族链球菌鉴定和药敏检测卡在35℃～37℃条件下恒温培养5小时～24小时；

分别对B族链球菌鉴定和药敏检测卡中的各所述鉴别微孔、各所述药敏微孔进行颜色观察，得到检测结果。

10.根据权利要求9所述的使用方法，其特征在于，所述离体的标本通过拭子采集得到。