CN114152737A - 尿半乳糖检测试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本申请提供一种尿半乳糖检测试剂盒。上述的尿半乳糖检测试剂盒包括盒体和两份检测纸。盒体的一侧上开设有可视窗口、样品槽和标准槽。两份检测纸,每份检测纸包括检测垫和纯化垫,每份检测纸的检测垫包括层叠设置的催化试剂垫和显色试剂垫,两份检测纸的纯化垫的一端分别设置在样品槽和标准槽处,且两份检测纸的纯化垫的另一端分别与相应的催化试剂垫的一侧连接,每份检测纸的检测垫的显色试剂垫设置在相应的催化试剂垫远离相应的纯化垫的一侧,且两份检测纸的检测垫的催化试剂垫和显色试剂垫均设置于可视窗口处。上述的尿半乳糖检测试剂盒检测的操作方便简单,且检测结果准确度较高。
Description
技术领域
本发明涉及体外诊断技术领域,特别是涉及一种尿半乳糖检测试剂盒。
背景技术
乳糖不耐受是广泛存在的世界性问题,乳糖不耐受是指由于乳糖酶的缺失或活性降低而导致乳糖吸收不良,未被消化的乳糖进入结肠后可被细菌发酵生成醋酸、丙酸等短链脂肪酸及二氧化碳等气体,增加了肠内渗透压,进而出现肠鸣、腹痛、腹胀和渗透性腹泻等临床表现,尤其是乳糖不耐受还影响铁和锌的吸收,进而对婴幼儿的脑发育具有较大的影响,因此,乳糖不耐受的体外检测检测以及时得到治疗是非常重要的。
乳糖不耐受的体外检测包括临床诊断法、“呼氢试验”仪器检测法和尿半乳糖检测法。其中,临床诊断法方法简便,但仅依靠临床表现判断的结果较不可靠;而“呼氢试验”仪器检测法需采用特殊仪器配合,且对受试者具有较高的要求,特别是受试者具有吸烟史时,检测结果不准确;另尿半乳糖检测法,检测方便且仅需利用检测试剂即可完成,但由于受试者的尿液中含有较多干扰物质,且与半乳糖的分离难度较大,进而导致检测准确性较差。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术中的不足之处,提供一种检测的操作方便简单,且检测结果准确度较高的尿半乳糖检测试剂盒。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的:
一种尿半乳糖检测试剂盒,包括:
盒体,所述盒体的一侧上开设有可视窗口、样品槽和标准槽;
两份检测纸,每份所述检测纸包括检测垫和纯化垫,每份所述检测纸的所述检测垫包括层叠设置的催化试剂垫和显色试剂垫,两份所述检测纸的所述纯化垫的一端分别设置在所述样品槽和所述标准槽处,且两份所述检测纸的所述纯化垫的另一端分别与相应的所述催化试剂垫的一侧连接,每份所述检测纸的所述检测垫的所述显色试剂垫设置在相应的所述催化试剂垫远离相应的所述纯化垫的一侧,且两份所述检测纸的所述检测垫的所述催化试剂垫和所述显色试剂垫均设置于所述可视窗口处。
在其中一个实施例中,每份所述检测纸的所述检测垫的所述催化试剂垫上吸附有4-氨基安替吡啉、半乳糖氧化酶、过氧化物酶和抗VC氧化酶。
在其中一个实施例中,每份所述检测纸的所述检测垫的所述显色试剂垫吸附有3,5-二氯-2-羟基苯磺酸。
在其中一个实施例中,每份所述检测纸的所述纯化垫为过滤棉。
在其中一个实施例中,每份所述检测纸的还包括PVC底垫,每份所述检测纸的所述PVC底垫分别承载相应的所述显色试剂垫和所述纯化垫。
在其中一个实施例中,所述尿半乳糖检测试剂盒还包括尿液纯化加样装置,所述尿液纯化加样装置用于对样品进行纯化和加样。
在其中一个实施例中,所述尿液纯化加样装置包括:
弹性纯化盒体,所述弹性纯化盒体上开设有相连通的吸样口和纯化吸附腔;
吸附剂,所述吸附剂填充于所述纯化吸附腔内。
在其中一个实施例中,所述尿液纯化加样装置还包括纯化出样盖,所述纯化出样盖盖设于所述吸样口处,且所述纯化出样盖与所述弹性纯化盒体活动连接。
在其中一个实施例中,所述吸附剂包括活性炭。
在其中一个实施例中,所述尿半乳糖检测试剂盒还包括标准液,所述标准液在进行尿半乳糖检测时滴加至所述标准槽中。
与现有技术相比,本发明至少具有以下优点:
本发明的尿半乳糖检测试剂盒,利用检测纸,即使得检测垫和纯化垫配合,进而使得受试者的尿液样品在纯化垫进行杂质去除后发生半乳糖的显色反应,减少了受试者尿液样品中杂质的干扰,如减少胆红素、蛋白质和葡萄糖的显色干扰,有效地提高了受试者半乳糖不耐受的检测结果的准确性;此外,使用尿半乳糖检测试剂盒对受试者的尿液样品进行检测时,仅需要将受试者的尿液样品和标准半乳糖溶液一一对应滴入样品槽和标准槽中,且在预定时间内对比可视窗口中显示的受试者的尿液样品和标准半乳糖溶液在对应的检测纸上的颜色即可实现了尿半乳糖的检测,操作简单方便。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,应当理解,以下附图仅示出了本发明的某些实施例,因此不应被看作是对范围的限定,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本发明一实施方式的尿半乳糖检测试剂盒的结构示意图;
图2为图1所示尿半乳糖检测试剂盒的检测纸的局部视图;
图3为图1所示尿半乳糖检测试剂盒的检测纸的另一局部视图;
图4为图1所示尿半乳糖检测试剂盒的尿液纯化加样装置的剖视图。
具体实施方式
为了便于理解本发明,下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的较佳实施方式。但是,本发明可以以许多不同的形式来实现,并不限于本文所描述的实施方式。相反地,提供这些实施方式的目的是使对本发明的公开内容理解的更加透彻全面。
需要说明的是,当元件被称为“固定于”另一个元件,它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件,它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。本文所使用的术语“垂直的”、“水平的”、“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的,并不表示是唯一的实施方式。
除非另有定义,本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施方式的目的,不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
本申请提供一种尿半乳糖检测试剂盒。上述的尿半乳糖检测试剂盒包括盒体和两份检测纸。盒体的一侧上开设有可视窗口、样品槽和标准槽。两份检测纸,每份检测纸包括检测垫和纯化垫,每份检测纸的检测垫包括层叠设置的催化试剂垫和显色试剂垫,两份检测纸的纯化垫的一端分别设置在样品槽和标准槽处,且两份检测纸的纯化垫的另一端分别与相应的催化试剂垫的一侧连接,每份检测纸的检测垫的显色试剂垫设置在相应的催化试剂垫远离相应的纯化垫的一侧,且两份检测纸的检测垫的催化试剂垫和显色试剂垫均设置于可视窗口处。
上述的尿半乳糖检测试剂盒,利用检测纸,即使得检测垫和纯化垫配合,进而使得受试者的尿液样品在纯化垫进行杂质去除后发生半乳糖的显色反应,减少了受试者尿液样品中杂质的干扰,如减少胆红素、蛋白质和葡萄糖的显色干扰,有效地提高了受试者半乳糖不耐受的检测结果准确性;此外,使用尿半乳糖检测试剂盒对受试者的尿液样品进行检测时,仅需要将受试者的尿液样品和标准半乳糖溶液一一对应滴入样品槽和标准槽中,且在预定时间内对比可视窗口中显示的受试者的尿液样品和标准半乳糖溶液在对应的检测纸上的颜色即可实现了尿半乳糖的检测,操作简单方便。
请一并参阅图1和图2,为了更好地理解本申请的尿半乳糖检测试剂盒10,以下对本申请的尿半乳糖检测试剂盒10作进一步的解释说明,一实施方式的尿半乳糖检测试剂盒10包括盒体100和两份检测纸200。盒体100的一侧上开设有可视窗口101、样品槽102和标准槽103。两份检测纸200,每份检测纸200包括检测垫210和纯化垫220,每份检测纸200的检测垫210包括层叠设置的催化试剂垫211和显色试剂垫212,两份检测纸200的纯化垫220的一端分别设置在样品槽102和标准槽103处,且两份检测纸200的纯化垫220的另一端分别与相应的催化试剂垫211的一侧连接,每份检测纸200的检测垫210的显色试剂垫212设置在相应的催化试剂垫211远离相应的纯化垫220的一侧,且两份检测纸200的检测垫210的催化试剂垫211和显色试剂垫212均设置于可视窗口101处。
上述的尿半乳糖检测试剂盒10,利用检测纸200,即使得检测垫210和纯化垫220配合,进而使得受试者的尿液样品在纯化垫220进行杂质去除后发生半乳糖的显色反应,减少了受试者尿液样品中杂质的干扰,如减少胆红素、蛋白质和葡萄糖的显色干扰,有效地提高了受试者半乳糖不耐受的检测结果准确性;此外,使用尿半乳糖检测试剂盒10对受试者的尿液样品进行检测时,仅需要将受试者的尿液样品和标准半乳糖溶液一一对应滴入样品槽102和标准槽103中,且在预定时间内对比可视窗口101中显示的受试者的尿液样品和标准半乳糖溶液在对应的检测纸200上的颜色即可实现了尿半乳糖的检测,操作简单方便。
在其中一个实施例中,每份检测纸的检测垫的催化试剂垫上吸附有4-氨基安替比林、半乳糖氧化酶、过氧化物酶和抗VC氧化酶。可以理解,受试者尿液样品中一般含有维生素C,而维生素C较难被前期的过滤等步骤充分去除,且维生素C具有较高的还原性,而恰恰检测纸实现显色的原理为半乳糖在半乳糖氧化酶作用下生成已二醛糖和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶存在的情况下,催化3.5-二氯二羟苯磺酸和4-氨基安替比林缩合成红色醌类化合物,即过氧化氢的生成量与尿半乳糖的浓度相关,检测纸上的颜色与过氧化氢的生成量相关,而尿液中的维生素C和过氧化氢会发生氧化还原反应而消耗掉一部分的过氧化氢,会造成检测结果果不准确的问题,因此,在本申请中,催化试剂垫上吸附抗VC氧化酶,抗VC氧化酶分解掉尿液中的维生素C,有效地减少了尿液中维生素C对尿半乳糖检测的干扰,进而有效地提高了尿半乳糖的检测准确性。
在其中一个实施例中,催化试剂垫的制备方法,包括如下步骤:
获取具有活性的半乳糖氧化酶、过氧化物酶和抗VC氧化酶;
采用缓冲剂和酶稳定剂对半乳糖氧化酶、过氧化物酶和抗VC氧化酶进行混合操作,得到催化试剂;
将酶垫置于催化试剂中进行浸润吸附操作,得到催化试剂垫。
上述催化试剂垫的制备方法的步骤中,由于葡萄糖和半乳糖为立体异构型同分异构体,具有相同的基团分子,较难将葡萄糖与半乳糖进行分离,而半乳糖与半乳糖氧化酶反应生成的过氧化氢会与葡萄糖发生氧化反应,进而消耗过氧化氢,而恰恰检测纸实现显色的原理为半乳糖在半乳糖氧化酶作用下生成已二醛糖和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶存在的情况下,催化3.5-二氯二羟苯磺酸和4-氨基安替比林缩合成红色醌类化合物,即过氧化氢的生成量与尿半乳糖的浓度相关,检测纸上的颜色与过氧化氢的生成量相关,进一步地,若葡萄糖能与生成的过氧化氢充分接触,则会大大影响尿半乳糖的检测结果,因此,在本申请中,使得催化试剂垫中的半乳糖氧化酶、过氧化物酶和抗VC氧化酶三者相互混合,进而使得生成的过氧化氢能较多地与催化试剂垫中的过氧化酶接触,减少了葡萄糖与生成的过氧化氢的接触,且使得生成的过氧化氢能快速与过氧化氢酶接触而发生反应,进而减少了维生素C和葡萄糖对生成的过氧化氢的消耗,减轻了葡萄糖对尿半乳糖检测的干扰,进而进一步提高了尿半乳糖的检测准确性。
在其中一个实施例中,在PH为6.8~7.2的条件下,将酶垫置于催化试剂中进行浸润吸附操作。可以理解,催化试剂吸附有半乳糖氧化酶、过氧化物酶和抗VC氧化酶,在PH为6.8~7.2的条件下进行浸润吸附,较好地确保了催化试剂的生物活性,进而较好地确保了尿半乳糖的检测准确性。
请参阅图3,在其中一个实施中,催化试剂垫211包括含有半乳糖氧化酶与过氧化物酶的组合酶垫2111和抗VC氧化酶垫2112,组合酶垫2111夹设在抗VC氧化酶垫2112和显色试剂垫212之间。可以理解,使得组合酶垫2111夹设在抗VC氧化酶垫2112和显色试剂垫212之间,即使得受试者的尿液样品在经过纯化垫220进行杂质去除后,即到达抗VC氧化酶垫2112,进而进一步减少了受试者尿液样品中维生素C的含量,减轻了维生素C对尿半乳糖检测结果的影响,且使得组合酶垫2111吸附有半乳糖氧化酶与过氧化物酶,有效地确保了生成的过氧化氢能及时与过氧化物酶接触而发生反应,即减少了生成的过氧化氢与葡萄糖的接触,进而减轻了葡萄糖对尿半乳糖检测结果的影响,进一步提高了尿半乳糖的检测准确性。
在其中一个实施例中,催化试剂垫的制备方法,包括如下步骤:
获取具有活性的半乳糖氧化酶、过氧化物酶和抗VC氧化酶;
将缓冲剂、酶稳定剂和抗VC氧化酶进行第一混合操作,得到第一催化试剂;
将第一酶垫置于VC催化试剂中进行第一浸润吸附操作,得到第一催化试剂垫;
将缓冲剂、酶稳定剂、半乳糖氧化酶和过氧化物酶进行第二混合操作,得到第二催化试剂;
将第二酶垫置于混合催化试剂中进行第二浸润吸附操作,得到第二催化试剂垫;
将第一催化试剂垫和第二催化试剂垫进行层叠压合处理,得到催化试剂垫。
上述催化试剂垫的制备方法的步骤中,使得半乳糖氧化酶和过氧化物酶经过第二混合操作混合均匀后,再利用第二催化剂对第二催化试剂垫进行浸润吸附操作,进而使得第二催化试剂垫上吸附有均匀分布的半乳糖氧化酶和过氧化物酶,进而使得过氧化氢在生成时即能快速地与过氧化物酶接触而发生反应,减轻了葡萄糖对尿半乳糖检测的影响,进而提高了半乳糖检测的准确度。
在其中一个实施例中,在PH为6.8~7.2的条件下,将第一酶垫置于VC催化试剂中进行第一浸润吸附操作。可以理解,抗VC氧化酶在PH为6.8~7.2的条件下具有较好的生物活性,进而使得在PH为6.8~7.2的条件下,将第一酶垫置于VC催化试剂中进行第一浸润吸附操作,有效地确保了抗VC氧化酶的活性,进而确保了半乳糖检测的准确性。
在其中一个实施例中,在PH为6.8~7.2的条件下,将第二酶垫置于混合催化试剂中进行第二浸润吸附操作。可以理解,半乳糖氧化酶和过氧化物酶在PH为6.8~7.2的条件下具有较好的生物活性,进而使得在PH为6.8~7.2的条件下,将第二酶垫置于混合催化试剂中进行第二浸润吸附操作,有效地确保了半乳糖氧化酶和过氧化物酶的活性,进而确保了半乳糖检测的准确性。
在其中一个实施例中,酶稳定剂为SG04酶稳定剂。可以理解,SG04酶稳定剂较好地确保了抗VC氧化酶、半乳糖氧化酶和过氧化物酶的活性稳定,进而较好地确保了半乳糖检测的准确性。
在其中一个实施例中,催化试剂中的半乳糖氧化酶的浓度为1.5*105U/m2~2.0*105U/m2。可以理解,当催化试剂中的半乳糖氧化酶的浓度为1.5*105U/m2~2.0*105U/m2时,确保了半乳糖的充分氧化分解而得到过氧化氢,进而确保了半乳糖检测的准确性。
在其中一个实施例中,催化试剂中的过氧化物酶的浓度为2.6*105U/m2~3.0*105U/m2。可以理解,在过氧化物酶浓度减低的时候,过氧化氢与过氧化物酶的反应的反应速度与过氧化物酶的浓度成正比,但是当过氧化物酶的浓度较高时,过氧化氢与过氧化物酶的反应的反应速度与过氧化物酶浓度失去线性,其影响过氧化氢与过氧化物酶的反应的反应速度受到过氧化氢扩散的影响,因此,本申请中,使得过氧化物酶均匀吸附于第二催化试剂垫上,且使得催化试剂中的过氧化物酶的浓度为2.6*105U/m2~3.0*105U/m2,使得过氧化物酶的浓度较高,使得过氧化氢能快速扩散至过氧化酶处,且能减少生成的过氧化氢与葡萄糖的接触,进而减少了葡萄糖对半乳糖检测的影响,减少了半乳糖检测假阴性的出现,提高了半乳糖检测的准确性。
在其中一个实施例中,催化试剂中的抗VC氧化酶的浓度为1.2*105U/m2~2.0*105U/m2。可以理解,当催化试剂中的抗VC氧化酶的浓度为1.2*105U/m2~2.0*105U/m2时,有效地减少了维生素C对生成的过氧化氢的消耗,进而减少了维生素C对半乳糖检测的影响,确保了半乳糖检测的准确性。
在其中一个实施例中,每份检测纸的检测垫的显色试剂垫吸附有3,5-二氯-2-羟基苯磺酸,确保了半乳糖检测时的显色,有利于半乳糖检测的结果的判读。
在其中一个实施例中,每份检测纸的纯化垫为过滤棉。可以理解,过滤棉有利于过滤掉受试者尿液取样中的颗粒物,如活性炭、结晶和脱落细胞等颗粒物,并且有利于进一步减少尿液中的杂质,进而提高了半乳糖检测的准确性。
在其中一个实施例中,每份检测纸的纯化垫为活性炭过滤棉。可以理解,由于在初步采用活性炭等吸附剂对受试者的尿液取样中的蛋白质、胆红素和其它色素成分等物质进行吸附时,尿液中则引入了未被过滤的活性炭,活性炭会干扰颜色的判读,且由于活性炭的吸附量有限,即活性炭的吸附量饱和后,既达到一个吸附的同时又被洗脱的平衡状态,且进而影响半乳糖的检测结果,进而使得纯化垫为活性炭过滤棉,进一步对受试者的尿液取样进行过滤,有效地减少了受试者尿液取样中的活性炭,且进一步减少了受试者尿液取样中的胆红素和蛋白质等物质的含量,进而进一步提高了半乳糖的检测准确性。
在其中一个实施例中,每份检测纸的纯化垫为表面涂有离子交换剂的层析纸。可以理解,利用涂有离子交换剂的层析纸对受试者的尿液取样进行过滤分离的原理与色谱相同,但色谱需要使用大量的流动相,但对受试者的尿液取样的检测中,并不能滴入太多的受试者的尿液取样,因此,涂有离子交换剂的层析纸仅为较小程度上减少受试者尿液取样中的半乳糖中的葡萄糖等物质,进而与过量且均匀分布的过氧化物酶配合,进一步有效地减少了葡萄糖等物质对半乳糖检测的影响,更好地确保了半乳糖检测的准确性。
请一并参阅图2和图3,在其中一个实施例中,每份检测纸200还包括PVC底垫230,每份检测纸200的PVC底垫230承载相应的显色试剂垫212和纯化垫220。可以理解,PVC底垫230为检测垫210和纯化垫220的刚性载体,确保了半乳糖检测的进行。
请一并参阅图1和图4,在其中一个实施例中,尿半乳糖检测试剂盒10还包括尿液纯化加样装置300,尿液纯化加样装置300用于对样品进行纯化。可以理解,为了减少受试者尿液取样中胆红素以及其它色素成分、金属离子和蛋白质对半乳糖检测的影响,先对受试者的尿液取样进行纯化后再采用检测纸200对受试者的尿液取样进行半乳糖检测,有效地减少了尿液中杂质对半乳糖检测的影响,进而提高了半乳糖检测的准确性。
在其中一个实施例中,尿液纯化加样装置包括:
纯化盒体,纯化盒体上开设有进样孔、出样孔和纯化腔,进样孔和出样孔均与纯化腔连通;
吸附填充剂,吸附填充剂填充于纯化腔中。
上述的尿液纯化加样装置中,吸附填充剂填充于纯化盒体的纯化腔中,纯化盒体上开设有与纯化腔相互连通的出样孔,使得受试者的尿液取样加入纯化腔中,进而被填充于纯化腔中的吸附填充剂将胆红素、其它色素成分和蛋白质等物质进行吸附去除,有效地减少了胆红素、其它色素成分和蛋白质等物质对半乳糖检测的影响,进而确保了半乳糖检测的准确性。
在其中一个实施例中,尿液纯化加样装置还包括过滤体,过滤体封堵于出样孔处。可以理解,过滤体封堵于出样孔处,有效地减少了活性炭被带入至受试者的尿液取样中,进而减轻了受试者尿液取样的半乳糖检测的影响,确保了半乳糖检测的准确性。
在其中一个实施例中,尿液纯化加样装置还包括出样盖,出样盖盖设于出样孔处,且出样盖与纯化盒体活动连接。可以理解,为了使受试者尿液取样中的杂质被充分吸附在活性炭中,需要摇晃而使受试者的尿液取样与活性炭充分接触,且需要使得摇晃后的受试者的尿液取样进行静置而使活性炭被充分浸润以对受试者的尿液取样进行杂质吸附,在摇晃静置的过程中,使得出样口处设置出样盖,减少了受试者尿液取样的流失,有效地确保了半乳糖检测的进行。
在其中一个实施例中,进样孔和出样孔分别相对开设于纯化盒体的两端。可以理解,进样孔和出样孔分别相对开设于纯化盒体的两端,有利于确保受试者尿液与活性炭的充分接触,确保了受试者尿液的纯化效果,进而确保了受试者尿液取样的半乳糖的检测准确性。
请参阅图4,在其中一个实施例中,尿液纯化加样装置300包括:
弹性纯化盒体310,弹性纯化盒体310上开设有相连通的吸样口301和纯化吸附腔302;
吸附剂320,吸附剂320填充于纯化吸附腔302内。
上述的尿液纯化加样装置300中,采用弹性纯化盒体310和内部填充的吸附剂320对受试者的尿液取样进行纯化,实现了受试者尿液取样的简单快速的吸入,且确保了受试者尿液的简单快速放出,提高了半乳糖检测的便利性。
请参阅图4,在其中一个实施例中,尿液纯化加样装置300还包括吸嘴结构330,吸嘴结构330与弹性纯化盒体310连接,吸嘴结构330开设有吸液管道303和出液管道304,吸液管道303与出液管到均与吸样口301连通。可以理解,吸嘴结构330有利于受试者尿液取样的吸取和滴入,且使得吸嘴结构330上开设吸液管道303和出液管道304,使得受试者尿液取样的吸入和放出相互独立,减轻了使用同一管道进行受试者尿液取样的吸入和放出,使得在吸入受试者的尿液取样时吸附在管道内壁上的受试者的尿液取样被放出的受试者的尿液取样冲刷滴入至检测纸200上,导致受试者尿液取样的纯化效果降低,进而导致受试者尿液取样的检测影响因素较多,影响了半乳糖检测结果的准确性的问题,进而确保了半乳糖的检测准确性。
在其中一个实施例中,尿液纯化加样装置还包括第一过滤体和第二过滤体,第一过滤体与第二过滤体均位于在吸样口处,且第一过滤体设置于吸液管道中,第二过滤体设置在出液管道中。可以理解,第一过滤体对吸入的受试者的尿液样品进行初步过滤除去受试者尿液中的胆红素等物质,进而进入纯化吸附腔中进行纯化吸附,并进一步通过第二过滤体对受试者的尿液取样进行进一步的过滤除去受试者尿液取样中的活性炭和蛋白质等杂质,有效地减少了受试者尿液样品中蛋白质、胆红素和活性炭等物质对半乳糖的检测结果的影响,进而提高了半乳糖检测的准确性。
请参阅图4,在其中一个实施例中,吸嘴结构330包括吸嘴本体331、进液二尖瓣膜332和出液二尖瓣膜333,吸液管道303和出液管道304开设于吸嘴本体331,进液二尖瓣膜332和出液二尖瓣膜333均与吸嘴本体331连接,进液二尖瓣膜332设置于吸液管道303,出液二尖瓣膜333设置于出液管道304。可以理解,若吸取受试者的尿液取样时,吸液管道303和出液管道304均为打开状态,此时对受试者的尿液取样的吸取效果较差;而若放出受试者的尿液取样时,吸液管道303和出液管道304均为打开状态,此时存在受试者的尿液取样挤出难度较大且易从吸液管道303喷出的情况,进而导致检测纸200中受试者的尿液取样的滴入量不足或滴入速度过慢而影响检测结果的判读的问题;此外,若分别对吸液管道303和出液管道304进行打开和关闭而避免上述问题的出现,但会增加受试者尿液取样的纯化操作工序,因此,在本申请中,使得进液二尖瓣膜332和出液二尖瓣膜333均与吸嘴本体331连接,且使得进液二尖瓣膜332设置于吸液管道303,出液二尖瓣膜333设置于出液管道304,实现了在吸入受试者的尿液取样时,吸液管道303为通路,出液管道304为闭路,而在放出受试者的尿液取样时,出液管道304为通路,吸液管道303为闭路,有利于受试者尿液取样的吸入和放出,且确保了受试者尿液取样的吸入和放出的操作便利性,进而提高了半乳糖检测的操作便利性。
在其中一个实施例中,进液二尖瓣膜为软胶二尖瓣膜,确保了在吸入受试者的尿液取样时,吸液管道为通路,而在放出受试者的尿液取样时,吸液管道为闭路,确保了受试者尿液取样的吸入和放出的操作便利性。
在其中一个实施例中,出液二尖瓣膜为软胶二尖瓣膜,确保了在吸入受试者的尿液取样时,出液管道为闭路,而在放出受试者的尿液取样时,出液管道为通路,确保了受试者尿液取样的吸入和放出的操作便利性。
请参阅图4,在其中一个实施例中,尿液纯化加样装置300还包括过滤膜340,封堵于吸样口301处,配合进液二尖瓣设置于吸液管道303,出液二尖瓣膜333设置于出液管道304,有效地实现了仅利用一个过滤膜340即实现了受试者尿液取样的多次过滤纯化,进而确保了半乳糖检测的准确性。
请参阅图4,在其中一个实施例中,尿液纯化加样装置300还包括纯化出样盖350,纯化出样盖350盖设于所述吸样口301处,且纯化出样盖350与弹性纯化盒体310活动连接。
在其中一个实施例中,吸附剂包括活性炭。可以理解,活性炭对蛋白质、胆红素、其它色素成分和金属离子具有较好的吸附效果,有效地确保了受试者尿液取样的纯化效果,进而确保了半乳糖检测的准确性。
在其中一个实施例中,吸附剂还包括糊精。可以理解,虽然活性炭对蛋白质、胆红素和金属离子具有较好的吸附效果,但依旧还具有部分残留在纯化后的受试者的尿液取样中,残留的部分杂质依旧会影响半乳糖的检测,因此,使得吸附剂还包括糊精,糊精与蛋白质等物质能发生聚合而更好地被活性炭吸附,进而达到了更好地杂质去除效果,进一步降低了蛋白质等物质对半乳糖检测的影响,进而进一步提高了半乳糖检测的准确性。
在其中一个实施例中,活性炭为氨基改性活性炭。在其中一个实施例中,尿半乳糖检测试剂盒还包括标准液,标准液在进行尿半乳糖检测时滴加至标准槽中。可以理解,虽然活性炭对蛋白质、胆红素和金属离子具有较好的吸附效果,但依旧还具有部分残留在纯化后的受试者的尿液取样中,残留的部分杂质依旧会影响半乳糖的检测,因此,使得活性炭为氨基改性活性炭,氨基改性活性炭对胆红素等物质具有更好地的吸附效果,进而达到了更好地杂质去除效果,进一步降低了胆红素等物质对半乳糖检测的影响,进而进一步提高了半乳糖检测的准确性。
与现有技术相比,本发明至少具有以下优点:
本发明的尿半乳糖检测试剂盒10,利用检测纸200,即使得检测垫210和纯化垫220配合,进而使得受试者的尿液样品在纯化垫220进行杂质去除后发生半乳糖的显色反应,减少了受试者尿液样品中杂质的干扰,如减少胆红素、蛋白质和葡萄糖的显色干扰,有效地提高了受试者半乳糖不耐受的检测结果准确性;此外,使用尿半乳糖检测试剂盒10对受试者的尿液样品进行检测时,仅需要将受试者的尿液样品和标准半乳糖溶液一一对应滴入样品槽102和标准槽103中,且在预定时间内对比可视窗口101中显示的受试者的尿液样品和标准半乳糖溶液在对应的检测纸200上的颜色即可实现了尿半乳糖的检测,操作简单方便。
以下列举一些具体实施例,若提到%,均表示按重量百分比计。需注意的是,下列实施例并没有穷举所有可能的情况,并且下述实施例中所用的材料如无特殊说明,均可从商业途径得到。
实施例1
将适量磷酸缓冲剂、10%wt的SG04酶稳定剂、1.5*105U/m2半乳糖氧化酶、2.6*105U/m2过氧化物酶、1.2*105U/m2抗VC氧化酶和4-氨基安替吡啉在PH为6.8的条件下进行混合,并将玻璃纤维棉置于其中进行浸泡,对浸泡后的玻璃纤维棉进行干燥得到催化试剂垫,待用;
将3,5-二氯-2-羟基苯磺酸在磷酸盐缓冲液中溶解后,并将玻璃纤维棉置于其中进行浸泡,对浸泡后的玻璃纤维棉进行干燥得到显色试剂垫,待用;
将催化试剂垫、显色试剂垫和活性炭过滤棉进行组装得到检测纸;
将检测纸与盒体进行组装,并将糊精、氨基改性活性炭填充于弹性纯化盒体中,到尿半乳糖检测试剂盒。
实施例2
将适量磷酸缓冲剂、15%wt的SG04酶稳定剂、1.6*105U/m2半乳糖氧化酶、2.7*105U/m2过氧化物酶、1.5*105U/m2抗VC氧化酶和4-氨基安替吡啉在PH为6.8~7.2的条件下进行混合,并将玻璃纤维棉置于其中进行浸泡,对浸泡后的玻璃纤维棉进行干燥得到催化试剂垫,待用;
将3,5-二氯-2-羟基苯磺酸在磷酸盐缓冲液中溶解后,并将玻璃纤维棉置于其中进行浸泡,对浸泡后的玻璃纤维棉进行干燥得到显色试剂垫,待用;
将催化试剂垫、显色试剂垫和活性炭过滤棉进行组装得到检测纸;
将检测纸与盒体进行组装,并将糊精、氨基改性活性炭填充于弹性纯化盒体中,到尿半乳糖检测试剂盒。
实施例3
将适量碳酸缓冲剂、20%wt的SG04酶稳定剂、1.8*105U/m2半乳糖氧化酶、2.8*105U/m2过氧化物酶、1.8*105U/m2抗VC氧化酶和4-氨基安替吡啉在PH为7.0的条件下进行混合,并将滤纸置于其中进行浸泡,对浸泡后的滤纸进行干燥得到催化试剂垫,待用;
将3,5-二氯-2-羟基苯磺酸在碳酸盐缓冲液中溶解后,并将滤纸置于其中进行浸泡,对浸泡后的滤纸进行干燥得到显色试剂垫,待用;
将催化试剂垫、显色试剂垫和层析纸进行组装得到检测纸;
将检测纸与盒体进行组装,并将糊精、氨基改性活性炭填充于弹性纯化盒体中,到尿半乳糖检测试剂盒。
实施例4
将适量磷酸缓冲剂、10%wt的SG04酶稳定剂、1.5*105U/m2半乳糖氧化酶、2.6*105U/m2过氧化物酶和4-氨基安替吡啉在PH为7.2的条件下进行混合,并将玻璃纤维棉置于其中进行浸泡,对浸泡后的玻璃纤维棉进行干燥得到第一催化试剂垫,待用;
将适量磷酸缓冲剂、20%wt的SG04酶稳定剂和1.2*105U/m2抗VC氧化酶在PH为6.8的条件下进行混合,并将玻璃纤维棉置于其中进行浸泡,对浸泡后的玻璃纤维棉进行干燥得到第二催化试剂垫,待用;
将3,5-二氯-2-羟基苯磺酸在磷酸盐缓冲液中溶解后,并将玻璃纤维棉置于其中进行浸泡,对浸泡后的玻璃纤维棉进行干燥得到显色试剂垫,待用;
将催化试剂垫、显色试剂垫和层析纸进行组装得到检测纸;
将检测纸与盒体进行组装,并将糊精、氨基改性活性炭填充于弹性纯化盒体中,到尿半乳糖检测试剂盒。
实施例5
将适量磷酸缓冲剂、20%wt的SG04酶稳定剂、2.0*105U/m2半乳糖氧化酶、3.0*105U/m2过氧化物酶和4-氨基安替吡啉在PH为7.2的条件下进行混合,并将玻璃纤维棉置于其中进行浸泡,对浸泡后的玻璃纤维棉进行干燥得到第一催化试剂垫,待用;
将适量磷酸缓冲剂、20%wt的SG04酶稳定剂和2.0*105U/m2抗VC氧化酶在PH为7.2的条件下进行混合,并将玻璃纤维棉置于其中进行浸泡,对浸泡后的玻璃纤维棉进行干燥得到第二催化试剂垫,待用;
将3,5-二氯-2-羟基苯磺酸在磷酸盐缓冲液中溶解后,并将玻璃纤维棉置于其中进行浸泡,对浸泡后的玻璃纤维棉进行干燥得到显色试剂垫,待用;
将第一催化试剂垫、第二催化试剂垫、显色试剂垫和层析纸进行组装得到检测纸;
将检测纸与盒体进行组装,并将糊精、氨基改性活性炭填充于弹性纯化盒体中,到尿半乳糖检测试剂盒。
以下将实施例1~5的尿半乳糖检测试剂盒与使用尿半乳糖检测试剂盒在同样的检测方法下的检测结果进行比较。
检测方法如下:
分别取出尿半乳糖检测试剂盒,平衡至室温(18℃~25℃)后打开尿半乳糖检测试剂盒包装,取出尿半乳糖检测试剂盒;
取出尿半乳糖检测试剂盒的尿液纯化加样装置,轻轻挤压瓶体,吸取2至3mL的标本,轻摇后静置30秒钟,轻轻挤压瓶体加入2滴标本至样品孔中;随即在准孔中加入2滴半乳糖标准液;
将加样后的检测纸置室温(18℃~28℃)下反应10至15分钟判读结果(比对颜色,比标准孔的显色浅的为阳性,显色深的为阴性)。
检测结果如下所示:
1、检测35umol/L的胆红素对检测的干扰,使用的尿半乳糖检测试剂盒为实施例1~5的尿半乳糖检测试剂盒和市售尿半乳糖检测试剂盒。
表1:尿半乳糖检测结果
表2:尿半乳糖检测结果
由表1和表2可知,采用实施例1~5的尿半乳糖检测试剂盒对含有35umol/L的胆红素检测结果准确,符合率为100%,说明35umol/L的胆红素对检测没有干扰;市售的尿半乳糖检测试剂盒对含有35umol/L的胆红素检测结果准确度较差,符合率为70%,说明35umol/L的胆红素对检测具有一定的干扰,检测结果存在假阳性。
2、检测12mmol/L的葡萄糖对检测的干扰,使用的尿半乳糖检测试剂盒为实施例1~5的尿半乳糖检测试剂盒与市售尿半乳糖检测试剂盒。
表3:尿半乳糖检测结果
表4:尿半乳糖检测结果
由表3和表4可知,采用实施例1~5的尿半乳糖检测试剂盒对含有12mmol/L的葡萄糖检测结果准确,符合率为100%,说明12mmol/L的葡萄糖对检测没有干扰;市售的尿半乳糖检测试剂盒对含有12mmol/L的葡萄糖检测结果准确度较差,符合率为80%,说明12mmol/L的葡萄糖对检测具有一定的干扰,检测结果存在假阳性。
3、检测20mmol/L的维生素C对检测的干扰,使用的尿半乳糖检测试剂盒为实施例1~5的尿半乳糖检测试剂盒与市售尿半乳糖检测试剂盒。
表5:尿半乳糖检测结果
表6:尿半乳糖检测结果
由表5和表6可知,采用实施例1~5的尿半乳糖检测试剂盒对含有20mmol/L的维生素C检测结果准确,符合率为100%,说明20mmol/L的维生素C对检测没有干扰;市售的尿半乳糖检测试剂盒对含有20mmol/L的维生素C检测结果准确度较差,符合率为30%,说明20mmol/L的维生素C对检测具有较大的干扰,检测结果存在假阳性。
4、检测50mmol/L的蛋白质对检测的干扰,使用的尿半乳糖检测试剂盒为实施例1~5的尿半乳糖检测试剂盒与市售尿半乳糖检测试剂盒。
表7:尿半乳糖检测结果
表8:尿半乳糖检测结果
由表5和表6可知,采用实施例1~5的尿半乳糖检测试剂盒对含有50mmol/L的蛋白质检测结果准确,符合率为100%,说明50mmol/L的蛋白质对检测没有干扰;市售的尿半乳糖检测试剂盒对含有50mmol/L的蛋白质检测结果准确度较差,符合率为80%,说明50mmol/L的蛋白质对检测具有一定的干扰。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种尿半乳糖检测试剂盒,其特征在于,包括:
盒体,所述盒体的一侧上开设有可视窗口、样品槽和标准槽;
两份检测纸,每份所述检测纸包括检测垫和纯化垫,每份所述检测纸的所述检测垫包括层叠设置的催化试剂垫和显色试剂垫,两份所述检测纸的所述纯化垫的一端分别设置在所述样品槽和所述标准槽处,且两份所述检测纸的所述纯化垫的另一端分别与相应的所述催化试剂垫的一侧连接,每份所述检测纸的所述检测垫的所述显色试剂垫设置在相应的所述催化试剂垫远离相应的所述纯化垫的一侧,且两份所述检测纸的所述检测垫的所述催化试剂垫和所述显色试剂垫均设置于所述可视窗口处。
2.根据权利要求1所述的尿半乳糖检测试剂盒,其特征在于,每份所述检测纸的所述检测垫的所述催化试剂垫上吸附有4-氨基安替吡啉、半乳糖氧化酶、过氧化物酶和抗VC氧化酶。
3.根据权利要求1所述的尿半乳糖检测试剂盒,其特征在于,每份所述检测纸的所述检测垫的所述显色试剂垫吸附有3,5-二氯-2-羟基苯磺酸。
4.根据权利要求1所述的尿半乳糖检测试剂盒,其特征在于,每份所述检测纸的所述纯化垫为过滤棉。
5.根据权利要求1所述的尿半乳糖检测试剂盒,其特征在于,每份所述检测纸的还包括PVC底垫,每份所述检测纸的所述PVC底垫分别承载相应的所述显色试剂垫和所述纯化垫。
6.根据权利要求1所述的尿半乳糖检测试剂盒,其特征在于,所述尿半乳糖检测试剂盒还包括尿液纯化加样装置,所述尿液纯化加样装置用于对样品进行纯化和加样。
7.根据权利要求6所述的尿半乳糖检测试剂盒,其特征在于,所述尿液纯化加样装置包括:
弹性纯化盒体,所述弹性纯化盒体上开设有相连通的吸样口和纯化吸附腔;
吸附剂,所述吸附剂填充于所述纯化吸附腔内。
8.根据权利要求7所述的尿半乳糖检测试剂盒,其特征在于,所述尿液纯化加样装置还包括纯化出样盖,所述纯化出样盖盖设于所述吸样口处,且所述纯化出样盖与所述弹性纯化盒体活动连接。
9.根据权利要求7所述的尿半乳糖检测试剂盒,其特征在于,所述吸附剂包括活性炭。
10.根据权利要求1~9中任一项所述的尿半乳糖检测试剂盒,其特征在于,所述尿半乳糖检测试剂盒还包括标准液,所述标准液在进行尿半乳糖检测时滴加至所述标准槽中。
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