CN107298687A - 从牛大力提取提纯高丽槐素工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，属于天然产物提取技术领域，包括牛大力干燥、粉碎、粗提取、浓缩、树脂提取、精制等步骤。所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，各步骤简明，易于实现规模化生产，所提取所得高丽槐素含量高，杂质含量低。
Description
技术领域
本发明属于天然产物提取领域，具体涉及从牛大力中提取提纯高丽槐素的方法。
背景技术
牛大力，别名猪脚笠、金钟根、山莲藕、倒吊金钟、大力薯。为豆科豆科崖豆藤属植物，美丽崖豆藤Millettia specisoa Champ.。牛大力以根入药，主要成份为蛋白质、淀粉质及生物碱等。牛大力具有很高的药用价值，早在《生草药性备要》中记载有“壮筋活络，补虚润肺，治腰腿痛，风湿痹痛，慢性肝炎，肺结核”。《陆川本草》也记载其：“清肺止咳，清凉解毒。治咳血、痢疾，温病身热口渴，头晕”。现有的药理研究表明，牛大力具有免疫调节、降血糖、抗氧化和清除自由基等功效，牛大力块根中含有三萜、黄酮、酚类、木质素等化学组分，将牛大力中的有效化学组分分离提纯，对于研究牛大力的药理及养分，具有重要意义。
高丽槐素又称朝鲜槐英、山槐素，天然存在于植物高丽槐、广豆根等植物中，高丽槐素具有很强的抗真菌作用，同时具有较强的抗过敏活性，对芳烃羟化酶具有显著抑制作用，可用于参与对高发病肺癌的治疗；对诱导白血病细胞凋亡具有促进作用，对治疗白血病也有一定的辅佐作用。
近年来，随着牛大力种植面积的不断扩大、产量的不断增长，牛大力作为一种药食同源的中药材，针对其药性的理论研究越来越多。如论文《牛大力石油醚部位化学成分研究》是对牛大力的95％乙醇浸膏进行分离纯化后，通过光谱方法鉴定出不同化合物的结构，证实了牛大力中含有高丽槐素、咖啡酸雨扇豆醇酯、二肽金色酰胺醇酯等；发明专利申请文献《一种牛大力提取物复合茶及其制备方法》则公开了一种由牛大力提取物、罗汉果提取物等组成的复合茶，其中公开了牛大力的提取方法，包括连续逆流超声提取、离心、酶解、超滤等步骤制备而成的牛大力提取物。但是，现有的文献中，鲜有针对牛大力中的其它成分，尤其是黄酮类组分提取的研究记载。
以上背景技术内容的公开仅用于辅助理解本发明的发明构思及技术方案，其并不必然属于本专利申请的现有技术，在没有明确的证据表明上述内容在本专利申请的申请日已经公开的情况下，上述背景技术不应当用于评价本申请的新颖性和创造性。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，以实现从牛大力规模化、工业化提取高丽槐素成分，可控性强，效率高。
为了解决以上技术问题，本发明采用以下技术方案：
从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，包括以下步骤：
a1：前处理：将鲜牛大力经清洗外层杂质后，切成厚度为0.5～1.0cm的切片，平摊放置于功率为500～800w红外灯下晾晒1～2h，再置于热风干燥箱中干燥；
a2：粗提取：将步骤a1所得牛大力经粉碎至50～80目后，置于75％乙醇溶液中，加热至65～80℃浸提，过滤，滤渣再重复提取2次，合并提取液；
a3：浓缩干燥：将步骤a2所得溶提取液经减压蒸馏，回收溶剂，得粗提取物；
a4：萃取：将步骤a3所得粗提取物用去离子水溶解，用甲醇常温萃取2次，合并萃取物；
a5：柱层析分离提取：将步骤a4所得溶液过极性硅胶柱，使用70％异丙醇和30％乙醇混合液洗脱，得洗脱液，减压蒸馏除去溶剂；
a6：树脂提取：将步骤a4所得提取物用75％乙醇按质量比1:1搅拌溶解，溶液经AB-8型大孔吸附树脂吸附2次；
a7：洗脱：采用浓度为10％～95％的乙醇溶液，由低浓度到高浓度地对步骤a6所述树脂梯度洗脱，得到洗脱液；
a8：过滤：将步骤a7所得洗脱液经截留分子量为600的超滤膜，收集滤液；
a9：浓缩：将步骤a5所得超滤液减压蒸去溶剂；
a10：干燥：将步骤a7所得物置于真空干燥箱中，在65～85℃下干燥1.5～3h。
优选地，所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，步骤a1中干燥至水分含量为8～15％；
优选地，所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，步骤a2中所述粉碎方式为锤片粉碎机、流能磨、球磨机的一种；
优选地，所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，步骤a2中所述加热浸提方式为索式提取法、回流提取中的一种；
优选地，所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，步骤a3中减压蒸馏的蒸馏温度为70～85℃，蒸馏压力为50～100Pa。
优选地，所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，步骤a5中层析柱所使用的硅胶为200～300目。
优选地，所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，步骤a6中所述的大孔径树脂为40～80nm孔径、25％～40％孔度的AB-8型大孔吸附树脂。
优选地，所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，步骤a6中，树脂吸附过程保持溶液温度为25～35℃，吸附流速为2.5～3.5BV/h。
优选地，所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，步骤a8中所述超滤膜材质为聚丙烯腈、聚醚砜、聚偏氟乙烯。
更优选地，所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，步骤a8中过滤压力为0.15～0.20MPa。
本发明具有以下有益效果：
(1)本发明所述的高丽槐素的提取工艺中，牛大力鲜品先经红外干燥脱水，有效灭杀细菌、霉菌；
(2)本发明所述的高丽槐素的提取工艺中，牛大力分别经柱层析、大孔吸附树脂、超滤膜提取，牛大力所含的多糖及其他主要杂质分离效果好；
(3)采用本发明所述工艺进行高丽槐素的提取，所产出的高丽槐素回收率高，纯度好，有利于牛大力中高丽槐素含量及性质的进一步研究。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明。应该强调的是，下述说明仅仅是示例性的，而不是为了限制本发明的范围及其应用。
实施例1：
从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，包括以下步骤：
a1：前处理：将鲜牛大力经清洗外层杂质后，切成厚度为0.5cm的切片，平摊放置于功率为500w红外灯下晾晒2h，再置于热风干燥箱中干燥至水分含量为8％；
a2：粗提取：将步骤a1所得牛大力经锤片粉碎机粉碎至50目后，置于75％乙醇溶液中，加热至65℃采用索式提取法浸提，过滤，滤渣再重复提取2次，合并提取液；
a3：浓缩干燥：将步骤a2所得溶提取液经蒸馏温度为70℃，蒸馏压力为100Pa减压蒸馏，回收溶剂，得粗提取物；
a4：萃取：将步骤a3所得粗提取物用去离子水溶解，用甲醇常温萃取2次，合并萃取物；
a5：柱层析分离提取：将步骤a4所得溶液过200目极性硅胶柱，使用70％异丙醇和30％乙醇混合液洗脱，得洗脱液，减压蒸馏除去溶剂；
a6：树脂提取：将步骤a4所得提取物用75％乙醇按质量比1:1搅拌溶解，溶液经40nm孔径、25％孔度AB-8型大孔吸附树脂吸附2次，吸附过程中溶液温度为25℃，吸附流速为2.5BV/h；
a7：洗脱：采用浓度为10％～95％的乙醇溶液，由低浓度到高浓度地对步骤a6所述树脂梯度洗脱，得到洗脱液；
a8：过滤：将步骤a7所得洗脱液经截留分子量为600的聚丙烯腈超滤膜，过滤压力为0.15MPa，收集滤液；
a9：浓缩：将步骤a5所得超滤液减压蒸去溶剂；
a10：干燥：将步骤a7所得物置于真空干燥箱中，在65℃下干燥3h。
实施例2
从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，包括以下步骤：
a1：前处理：将鲜牛大力经清洗外层杂质后，切成厚度为1.0cm的切片，平摊放置于功率为800w红外灯下晾晒1h，再置于热风干燥箱中干燥至水分含量为15％；
a2：粗提取：将步骤a1所得牛大力经流能磨粉碎至80目后，置于75％乙醇溶液中，加热至80℃回流提取，过滤，滤渣再重复提取2次，合并提取液；
a3：浓缩干燥：将步骤a2所得溶提取液在蒸馏温度为85℃，蒸馏压力为100Pa下减压蒸馏，回收溶剂，得粗提取物；
a4：萃取：将步骤a3所得粗提取物用去离子水溶解，用甲醇常温萃取2次，合并萃取物；
a5：柱层析分离提取：将步骤a4所得溶液过300目极性硅胶柱，使用70％异丙醇和30％乙醇混合液洗脱，得洗脱液，减压蒸馏除去溶剂；
a6：树脂提取：将步骤a4所得提取物用75％乙醇按质量比1:1搅拌溶解，溶液经80nm孔径、40％孔度的AB-8型大孔吸附树脂吸附2次，保持溶液温度为35℃，吸附流速为3.5BV/h；
a7：洗脱：采用浓度为10％～95％的乙醇溶液，由低浓度到高浓度地对步骤a6所述树脂梯度洗脱，得到洗脱液；
a8：过滤：将步骤a7所得洗脱液经截留分子量为600的聚偏氟乙烯超滤膜，过滤压力为0.20MPa，收集滤液；
a9：浓缩：将步骤a5所得超滤液减压蒸去溶剂；
a10：干燥：将步骤a7所得物置于真空干燥箱中，在85℃下干燥1.5h。
实施例3
从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，包括以下步骤：
a1：前处理：将鲜牛大力经清洗外层杂质后，切成厚度为0.8cm的切片，平摊放置于功率为700w红外灯下晾晒1.5h，再置于热风干燥箱中干燥至水分含量为10％；
a2：粗提取：将步骤a1所得牛大力经球磨机粉碎至60目后，置于75％乙醇溶液中，加热至75℃索式提取法回流浸提，过滤，滤渣再重复提取2次，合并提取液；
a3：浓缩干燥：将步骤a2所得溶提取液经蒸馏温度为75℃，蒸馏压力为80Pa减压蒸馏，回收溶剂，得粗提取物；
a4：萃取：将步骤a3所得粗提取物用去离子水溶解，用甲醇常温萃取2次，合并萃取物；
a5：柱层析分离提取：将步骤a4所得溶液过250目极性硅胶柱，使用70％异丙醇和30％乙醇混合液洗脱，得洗脱液，减压蒸馏除去溶剂；
a6：树脂提取：将步骤a4所得提取物用75％乙醇按质量比1:1搅拌溶解，溶液经60nm孔径、35％孔度的AB-8型大孔吸附树脂吸附2次，保持溶液温度为30℃，吸附流速为3BV/h；
a7：洗脱：采用浓度为10％～95％的乙醇溶液，由低浓度到高浓度地对步骤a6所述树脂梯度洗脱，得到洗脱液；
a8：过滤：将步骤a7所得洗脱液经截留分子量为600的聚偏氟乙烯超滤膜，过滤压力为0.18MPa，收集滤液；
a9：浓缩：将步骤a5所得超滤液减压蒸去溶剂；
a10：干燥：将步骤a7所得物置于真空干燥箱中，在75℃下干燥2h。
,为详细说明本发明的有益效果，进一步提供了实验结果。
将等量的、同产地鲜牛大力分为等量4组，每组500g，分别经对照组的实验方法与本发明3个实施例所述方法进行高丽槐素的提取，用分析天平称量提取物质量，用液相色谱法检测提取物中高丽槐素的含量。具体实验条件及结果如下所示。
对照组牛大力提取高丽槐素方法：将牛大力鲜品经120℃热风干燥至水分含量≤15％、粉碎成≤50目颗粒、用75％甲醇浸泡36h后，加热回流提取3次，合并提取液，减压蒸馏得到乙醇浸膏，用异丙醇萃取3次，合并萃取液，使用乙酸乙酯-氯仿按7:1至1:1梯度洗脱，对洗脱液过极性硅胶柱，收集主要成分，减压蒸馏，经真空干燥箱干燥。
高丽槐素含量检测方法：称取高丽槐素对照品(HPLC≥98％)0.020g溶于20ml氯仿中，配成0.0010g/ml高丽槐素标准溶液，用0.45μm滤膜过滤，备用。选择紫菀末端吸收检测波长为310nm。选用Symmetry C18(150mm×4.6mm，5μm)作为色谱柱，柱温30℃，流动相为V(乙腈):V(0.1％冰醋酸水溶液)＝30:70，流速1.0ml/min，用高效液相色谱仪检测标准品，并记录其峰形面积。再采用相同的检查方法检测4组提取物的也想色谱峰，以4组提取物的液相峰面积计算其含量。
由实验结果可见，相比对照组的常规提取方法，采用本发明所述方法对牛大力进行高丽槐素的提取，具有提取物质量多、高丽槐素含量高的优势。
以上内容不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明，对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明由所提交的权利要求书确定的专利保护范围。
Claims (10)
1.从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，包括以下步骤：
a1：前处理：将鲜牛大力经清洗外层杂质后，切成厚度为0.5～1.0cm的切片，平摊放置于功率为500～800w红外灯下晾晒1～2h，再置于热风干燥箱中干燥；
a2：粗提取：将步骤a1所得牛大力经粉碎至50～80目后，置于75％乙醇溶液中，加热至65～80℃浸提，过滤，滤渣再重复提取2次，合并提取液；
a3：浓缩干燥：将步骤a2所得溶提取液经减压蒸馏，回收溶剂，得粗提取物；
a4：萃取：将步骤a3所得粗提取物用去离子水溶解，用甲醇常温萃取2次，合并萃取物；
a5：柱层析分离提取：将步骤a4所得溶液过极性硅胶柱，使用70％异丙醇和30％乙醇混合液洗脱，得洗脱液，减压蒸馏除去溶剂；
a6：树脂提取：将步骤a4所得提取物用75％乙醇按质量比1:1搅拌溶解，溶液经AB-8型大孔吸附树脂吸附2次；
a7：洗脱：采用浓度为10％～95％的乙醇溶液，由低浓度到高浓度地对步骤a6所述树脂梯度洗脱，得到洗脱液；
a8：过滤：将步骤a7所得洗脱液经截留分子量为600的超滤膜，收集滤液；
a9：浓缩：将步骤a5所得超滤液减压蒸去溶剂；
a10：干燥：将步骤a7所得物置于真空干燥箱中，在65～85℃下干燥1.5～3h。
2.根据权利要求1所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，步骤a1中干燥至水分含量为8～15％。
3.根据权利要求1所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，步骤a2中所述粉碎方式为锤片粉碎机、流能磨、球磨机的一种。
4.根据权利要求1所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，步骤a2中所述加热浸提方式为索式提取法、回流提取中的一种。
5.根据权利要求1所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，步骤a3中减压蒸馏的蒸馏温度为70～85℃，蒸馏压力为50～100Pa。
6.根据权利要求1所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，步骤a5中层析柱所使用的硅胶为200～300目。
7.根据权利要求1所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，步骤a6中所述的大孔径树脂为40～80nm孔径、25％～40％孔度的AB-8型大孔吸附树脂。
8.根据权利要求1所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，步骤a6中，树脂吸附过程保持溶液温度为25～35℃，吸附流速为2.5～3.5BV/h。
9.根据权利要求1所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，步骤a8中所述超滤膜材质为聚丙烯腈、聚醚砜、聚偏氟乙烯。
10.根据权利要求1所述的从牛大力提取提纯高丽槐素工艺，其特征在于，步骤a8中过滤压力为0.15～0.20MPa。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110917238A (zh) * | 2019-12-26 | 2020-03-27 | 广州泽力医药科技有限公司 | 牛大力全成分提取物及其制备方法和应用 |
| CN113416689A (zh) * | 2021-08-04 | 2021-09-21 | 海南鑫开源医药科技有限公司 | 一种利用植物细胞发酵技术生产高丽槐素的方法 |
| WO2023010317A1 (zh) * | 2021-08-04 | 2023-02-09 | 海南鑫开源医药科技有限公司 | 一种利用植物细胞发酵技术生产高丽槐素的方法 |
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Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| 杨玺文等: "初加工对牛大力中高丽槐素质量分数的影响", 《西南大学学报（自然科学版）》 * |
| 王呈文等: "牛大力中黄酮类成分", 《中成药》 * |
| 王春华等: "RP- HPLC法测定牛大力药材中高丽槐素的含量", 《药物分析杂志》 * |
| 王祝年等: "牛大力根的化学成分研究", 《热带作物学报》 * |
| 王茂媛等: "牛大力茎的化学成分研究", 《天然产物研究与开发》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110917238A (zh) * | 2019-12-26 | 2020-03-27 | 广州泽力医药科技有限公司 | 牛大力全成分提取物及其制备方法和应用 |
| CN113416689A (zh) * | 2021-08-04 | 2021-09-21 | 海南鑫开源医药科技有限公司 | 一种利用植物细胞发酵技术生产高丽槐素的方法 |
| WO2023010317A1 (zh) * | 2021-08-04 | 2023-02-09 | 海南鑫开源医药科技有限公司 | 一种利用植物细胞发酵技术生产高丽槐素的方法 |
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