CN107184654A - 增强免疫的无花果根的黄酮提取物及制剂和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了增强免疫的无花果根的黄酮提取物及制剂和应用，解决了现有技术中增强人体免疫力药物不良反应明显，效果不确切的问题，并促进了无花果资源的综合利用。该黄酮提取物中黄酮含量不少92％，由无花果根经纤维素酶酶解后，再由碱性稀乙醇提取，经大孔吸附树脂二次吸附分离后，再经洗脱液酸化，浓缩干燥而得。该黄酮提取物的制剂，为黄酮提取物加上药学上可接受的辅料，按照常规制剂方法制备而成的制剂。在制备具有增强免疫作用的食品、保健食品或药品中的用途。本发明无花果根的黄酮提取物纯度高，增加免疫作用确切，安全有效。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及增强免疫的无花果根的黄酮提取物及制剂和应用。
背景技术
无花果根为桑科植物无花果树Ficus carica Linn.的根。具有清热解毒，散瘀消肿的作用。肺热咳嗽，咽喉肿痛，痔疮，瘰疬，筋骨疼痛。无花果中含有多种化学成分，主要为酚类化合物、类黄酮化合物和多糖类化合物。目前对于无花果的研究多集中在其果实上，对于无花果根的研究鲜有报道。
免疫力是人体抵御外界致病因子和维持体内环境稳定的能力，也就是人体免疫系统进行自我保护的一种能力。免疫力的主要任务是抵抗细菌或病毒等的感染，维系生命的正常生长发育和健康。使免疫系统不能正常发挥保护作用的原因多种多样。随着人们生活节奏的加快和工作压力的增强，心理失衡、营养不全、生活没有规律、锻炼不得法、乱用药品等等，都会导致免疫力低下。免疫力低下，会直接影响人们的身体健康，导致发生影响日常生活、工作和学习的机体障碍免疫力低下，人体容易生病。现有技术中，增强人体免疫力药物存在不良反应明显，效果不确切的问题。
发明内容
本发明的目的之一在于针对以上问题，提供增强免疫的无花果根的黄酮提取物，解决现有技术中增强人体免疫力药物不良反应明显，效果不确切的问题，并促进无花果资源的综合利用。
本发明的目的之二在于提供增强免疫的无花果根的黄酮提取物的制剂。
本发明的目的之三在于提供所述黄酮提取物在制备具有增强免疫作用的食品、保健食品或药品中的用途。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
增强免疫的无花果根的黄酮提取物，所述黄酮提取物中黄酮含量不少92％，由无花果根经纤维素酶酶解后，再由碱性稀乙醇提取，经大孔吸附树脂二次吸附分离后，再经洗脱液酸化，浓缩干燥而得。
本发明所述的增强免疫的无花果根的黄酮提取物的制剂，其特征在于：所述黄酮提取物加上药学上可接受的辅料，按照常规制剂方法制备而成的制剂。
优选地，所述制剂为口服固体制剂。
优选地，所述口服固体制剂为胶囊剂、颗粒剂、片剂、丸剂、散剂中的一种。
本发明所述的黄酮提取物在制备具有增强免疫作用的食品、保健食品或药品中的用途。
本发明中所提到的药学上可接受的辅料，包括《药用赋型剂手册》(美国药学协会，1986年10月)、化学工业出版社出版的《药用辅料手册》(Handbook of PharmaceuticalExcipients，原著第四版)或《药剂辅料大全》(四川出版集团、四川科学技术出版社出版，2006年1月)所列的辅料，但并不局限于这些辅料。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明无花果根的黄酮提取物纯度高，增加免疫作用确切，安全有效。
本发明采用口服固定制剂的形式给药，制备简单，生物利用度高，不良反应小。且所用原料来源价廉易得。
本发明方法简单，操作简便，条件温和，对环境友好，能够实现规模化生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明，本发明的方式包括但不仅限于以下实施例。
增强免疫的无花果根的黄酮提取物，所述黄酮提取物中黄酮含量不少92％，由无花果根经纤维素酶酶解后，再由碱性稀乙醇提取，经大孔吸附树脂二次吸附分离后，再经洗脱液酸化，浓缩干燥而得。
本发明所述的增强免疫的无花果根的黄酮提取物的制剂，其特征在于：所述黄酮提取物加上药学上可接受的辅料，按照常规制剂方法制备而成的制剂。
优选地，所述制剂为口服固体制剂。
优选地，所述口服固体制剂为胶囊剂、颗粒剂、片剂、丸剂、散剂中的一种。
本发明所述的黄酮提取物在制备具有增强免疫作用的食品、保健食品或药品中的用途。
实施例1
增强免疫的无花果根的黄酮提取物的制法，包括以下步骤：
步骤1：取无花果根，粉碎成粗粉，加入无花果根质量的5倍的纤维素酶溶液，35℃温浸72小时，过滤，取滤渣，备用。所述纤维素酶溶液pH值为3，酶活为5万U/g。
步骤2：将所述滤渣中加入pH值8的50％乙醇水溶液，60℃温浸72小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，得浓缩液；50％乙醇水溶液用量以每克无花果根计为3ml。
步骤3：一次吸附分离：将所述浓缩液中加入D101大孔吸附树脂，室温搅拌吸附，过滤，取吸附后的大孔吸附树脂装柱。大孔吸附树脂的用量按每克无花果计为分别为0.3g。依次用水、25％碱性乙醇水溶液、48％碱性乙醇水溶液、70％碱性乙醇水溶液、92％碱性乙醇水溶液作为洗脱液进行洗脱，每个洗脱液的用量均为其洗脱的大孔吸附树脂柱柱体积的6倍，收集92％碱性乙醇洗脱液。将所述92％乙醇洗脱液浓缩，得浓缩洗脱液；
步骤4：二次吸附分离：将步骤3所得浓缩洗脱液加入D101大孔吸附树脂，室温搅拌吸附，过滤，取吸附后的大孔吸附树脂装柱，大孔吸附树脂的用量按每克无花果计为分别为0.02g。大孔吸附树脂柱依次用水、40％乙醇水溶液、58％乙醇水溶液、79％乙醇水溶液作为洗脱液进行洗脱，每个洗脱液的用量均为其洗脱的大孔吸附树脂柱柱体积的6倍，收集79％乙醇洗脱液。
步骤5：将步骤4所得的79％乙醇洗脱液挥干乙醇，调节Ph值为5，静置48小时，过滤，滤液浓缩，冷冻干燥，即得。
本实施例所得无花果根的黄酮提取物中黄酮含量为93.5％。
实施例2
增强免疫的无花果根的黄酮提取物的制法，包括以下步骤：
步骤1：取无花果根，粉碎成粗粉，加入无花果根质量的3倍的纤维素酶溶液，50℃温浸24小时，过滤，取滤渣，备用。所述纤维素酶溶液pH值为5，酶活为8万U/g。
步骤2：将所述滤渣中加入pH值14的10％乙醇水溶液，40℃温浸24小时，过滤，滤液回收乙醇，浓缩，得浓缩液；10％乙醇水溶液用量以每克无花果根计为5ml。
步骤3：一次吸附分离：将所述浓缩液中加入D101大孔吸附树脂，室温搅拌吸附，过滤，取吸附后的大孔吸附树脂装柱。大孔吸附树脂的用量按每克无花果计为分别为0.5g。依次用水、15％碱性乙醇水溶液、40％碱性乙醇水溶液、80％碱性乙醇水溶液、95％碱性乙醇水溶液作为洗脱液进行洗脱，每个洗脱液的用量均为其洗脱的大孔吸附树脂柱柱体积的8倍，收集92％碱性乙醇洗脱液。将所述92％乙醇洗脱液浓缩，得浓缩洗脱液；
步骤4：二次吸附分离：将步骤3所得浓缩洗脱液加入D101大孔吸附树脂，室温搅拌吸附，过滤，取吸附后的大孔吸附树脂装柱，大孔吸附树脂的用量按每克无花果计为分别为0.08g。大孔吸附树脂柱依次用水、32％乙醇水溶液、55％乙醇水溶液、76％乙醇水溶液作为洗脱液进行洗脱，每个洗脱液的用量均为其洗脱的大孔吸附树脂柱柱体积的8倍，收集76％乙醇洗脱液。
步骤5：将步骤4所得的76％乙醇洗脱液挥干乙醇，调节Ph值为5，静置24小时，过滤，滤液浓缩，冷冻干燥，即得。
本实施例所得无花果根的黄酮提取物中黄酮含量为94.8％。
实施例3
增强免疫的无花果根的黄酮提取物的胶囊剂的制法，包括以下步骤：
取实施例2所得的黄酮提取物50g，加入羧甲基纤维素钠20g，预胶化淀粉120g，乳糖5g，混合均匀，制粒，整粒，加入硬脂酸镁5g，装入胶囊，即得胶囊1000粒。人口服推荐用量为每人(成人)每日3次，每次1粒。
实施例4
增强免疫作用试验，试验方法如下：
取实施例2制备所得样品进行增强免疫作用实验。人口服推荐用量为每人(成人)每日3次，每次50mg，成人体重按60kg计算，每日折合给药剂量为2.5mg/kg。
剂量选择与受试物给予方式：根据人口服用推荐用量，设样品低、中、高剂量组分别为12.5、25、50mg/kg(分别相当于人体推荐用量的5、10、20倍)，同时设一个阴性对照组，每组10只动物。
分别称取样品，加水制成不同浓度的混悬液。分别给予相应剂量组动物灌胃，灌胃体积为0.2mL/10g BW(体重)，阴性对照组给予等体积的蒸馏水，每天灌胃一次，连续灌胃30天。
实验动物：昆明种小鼠，雌雄各半，体重25g。
1对小鼠抗体生成细胞的影响
采用抗体生成细胞检测测试本品对小鼠体液免疫的影响。
每只小鼠腹腔注射2％压积SRBC0.2ml，将免疫5天后的小鼠颈椎脱臼处死，取出脾脏放在盛有Hank’s的平皿内，磨碎脾脏，制成细胞悬液，经200目筛网过滤，离心(1000r/min)10min，用Hank’s液洗2遍，最后将细胞悬浮在5mlRPMI1640培养液中，台酚兰染色计数(应在95％以上)，并将细胞浓度调整为5×106个/ml，制成脾细胞悬液。将琼脂糖配制成1％水溶液，水浴煮30分钟，与等量双倍浓度Hank’s液混合，分装小试管，每管0.5ml，再向管内加10％(用SA缓冲液配制)压积SRBC 50μl，脾细胞悬液各20μl做两个平行样，迅速混匀后，倾倒于琼脂糖薄层玻片上，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培养箱中孵育1.5h，然后将补体加入到玻片架凹槽内，继续温育1.5h，计数溶血空斑数。补体制备是采集豚鼠血，分离出血清(至少5只豚鼠的混合血清)，将1ml压积SRBC加入到5ml豚鼠血清中，4℃冰箱放置30min，经常振荡，离心取上清液，分装，-70℃保存。用时以SA缓冲液按1:1.5稀释。试验结果，见表1。
表1对小鼠抗体生成细胞的影响
由表1可见，连续灌胃30天后，本发明3个浓度组动物的溶血空斑数与阴性对照组相比，经统计学处理，均有显著性差异(P<0.05)。
2对小鼠血清溶血素的影响
采用血清溶血素测定(血凝法)测试本发明对小鼠体液免疫的影响。
每只小鼠腹腔注射2％SRBC0.2ml免疫，继续灌胃5天后，摘除眼球取血于离心管内，放置1小时，剥离，2000r/min离心10分钟，收集血清，用生理盐水将血清作倍比稀释，每份稀释12孔，将不同稀释度的血清置于血凝板中，每孔100μl，再加入0.5％SRBC悬液100μl，混匀，置湿盒37℃3小时后观察结果，记录每孔的凝集程度。计算抗体积数。
试验结果，见表2。
表2对小鼠血清溶血素的影响
由表2可知，连续灌胃30天后，本发明3个浓度组动物的抗体积数与阴性对照组相比，经统计学处理，均有显著性差异(P<0.05)。
3结论
表1、表2的结果表明，本发明对小鼠体液免疫试验结果呈阳性。
将连续灌胃本发明30天后的小鼠进行解剖，其脏器重量及外观与阴性对照组相比，均无明显差异。且饲喂期间，无异常行为。说明要发明对小鼠无明显不良反应。
上述实施例仅为本发明的优选实施方式之一，不应当用于限制本发明的保护范围，但凡在本发明的主体设计思想和精神上作出的毫无实质意义的改动或润色，其所解决的技术问题仍然与本发明一致的，均应当包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.增强免疫的无花果根的黄酮提取物，其特征在于：所述黄酮提取物中黄酮含量不少92％，由无花果根经纤维素酶酶解后，再由碱性稀乙醇提取，经大孔吸附树脂二次吸附分离后，再经洗脱液酸化，浓缩干燥而得。
2.根据权利要求1所述的增强免疫的无花果根的黄酮提取物的制剂，其特征在于：所述黄酮提取物加上药学上可接受的辅料，按照常规制剂方法制备而成的制剂。
3.根据权利要求2所述的增强免疫的无花果根的黄酮提取物的制剂，其特征在于：所述制剂为口服固体制剂。
4.根据权利要求3所述的增强免疫的无花果根的黄酮提取物的制剂，其特征在于：所述口服固体制剂为胶囊剂、颗粒剂、片剂、丸剂、散剂中的一种。
5.如权利要求1－4任意一项所述的黄酮提取物在制备具有增强免疫作用的食品、保健食品或药品中的用途。
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|---|---|---|---|
| CN201710338289.1A CN107184654A (zh) | 2017-05-15 | 2017-05-15 | 增强免疫的无花果根的黄酮提取物及制剂和应用 |
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107744070A (zh) * | 2017-09-28 | 2018-03-02 | 临汾市碧丰霖农业科技开发有限公司 | 一种无花果家禽饲养液 |
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2017
- 2017-05-15 CN CN201710338289.1A patent/CN107184654A/zh active Pending
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