CN107173228A - 一种红心猕猴桃育苗方法 - Google Patents

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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
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    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture

Abstract

本发明提供了一种红心猕猴桃育苗方法，属于种植技术，本方法包括外植体选取和灭菌、诱导生根、诱导生芽和组培苗移植。本发明设计的诱导生根溶液和诱导生芽溶液针对性强、适用性好，使用海绵作为溶液的附着物，使得外植体能正常有氧呼吸，有效避免了传统培养基因氧气供应不足而造成外植体坏死现象的发生，并且将诱导生根培养设计在诱导生芽培养的前面，有效避免了传统诱导生芽在先而导致的新生芽因营养不足而坏死的现象发生，并且在生芽阶段对光强独特的线性变化设计，使得外植体更快生芽形成组培苗，经过试验证明，使用本发明育苗方法进行育苗，其红心猕猴桃外植体的生根率达到95%以上，生芽率96%以上，移栽成活率达到95%以上。

Description

一种红心猕猴桃育苗方法
技术领域
本发明属于种植技术，尤其涉及红心猕猴桃的育苗方法。
背景技术
红心猕猴桃，是一种可食用与药用为一体的水果，每百克鲜果肉含维生素C100～420毫克，比柑橘高5～10倍，比柠檬高11～13倍，比苹果高20～80倍。红心猕猴桃果肉细嫩、香气浓郁、口感香甜清爽、酸度极低，营养丰富，看之饱眼福、食之饱口福。富含超高的维生素C及P、K、Ca、Mg、Fe、Cu等多种矿物质和18种氨基酸，微量元素的含钙量为果中之首，被誉为“人间仙果”、被称为“果中之王”、“维C之王”，特别由于含钙量较高，可直接被人体吸收，是中老年人良好的补钙剂，营养价值丰富。红心猕猴桃是新品种，属中华猕猴桃中的红肉猕猴桃变种，是特早熟红心品种，其子代遗传性状稳定，抗逆性强，果实较大，风味浓甜可口，较耐贮藏。
红心猕猴桃的茎枝上容易产生不定根，跟上容易产生不定芽，适于猕猴桃繁殖的方式有很多种，如扦插繁殖、压条繁殖、嫁接繁殖和种子繁殖等。上述繁殖方法具有繁殖周期长、易感染真菌性病害、良种化程度降低，而劣质种苗的使用又导致猕猴桃的果实质量及营养价值降低，同时口感下降，这在一定程度上约束了猕猴桃的大力发展和推广应用。
发明内容
本发明的目的是提供一种红心猕猴桃育苗方法，以解决上述技术问题。提供的方法包括以下步骤：
1）外植体选取和灭菌
取红心猕猴桃木质化茎段的外植体，经过水洗，然后用70%的酒精消毒20～50s，在用2%的次氯酸钠溶液灭菌10～15min，然后用水清洗，备用；
2）诱导生根
将灭菌后的外植体切成含单芽切段，然后放置在海绵上，并盖上一层海绵，每天对海绵喷洒一次诱导生根溶液，至下层海绵滴出溶液时停止喷洒，培养温度为18～22℃，培养10～15天；
3）诱导生芽
用诱导生芽溶液替换诱导生根溶液，每天对海绵喷洒一次，至下层海绵滴出溶液时停止喷洒；前10～15天每天取下上层海绵，光照培养，培养温度23～25℃，光强2000～3500LuX，光照培养3～5h；其余时间为盖上海绵黑暗培养，培养温度为18～22℃；然后取下上层海绵，每天光照10～12h，光强2000～3500LuX，然后黑暗培养，光照和黑暗培养温度相同为，20～23℃，培养20～30天，得到组培苗；
4）组培苗移植
将组培苗移栽至基质中，并置于大棚温室中，浇水、保湿至组培苗成苗、出圃。
进一步的，所述的诱导生根溶液为MS+6-BA 2～5mg/L+IAA 0.5～1mg/L+LZT 0.5～1mg/L+LAC 100～300 mg/L+左旋龙脑 5～10mg/L mg/L。
进一步的，所述的诱导生根溶液为MS+6-BA 3mg/L+IAA 0.7mg/L+LZT0.7mg/L+LAC200 mg/L+左旋龙脑7mg/L mg/L。
进一步的，所述的诱导生芽溶液为MS+6-BA 2～5mg/L+IAA 1～1.5mg/L+TDZ 0.5～1mg/L+LAC 50～100 mg/L。
进一步的，所述的诱导生芽溶液为MS+6-BA 3mg/L+IAA 1.2mg/L+TDZ 0.7mg/L+LAC 80 mg/L。
进一步的，所述步骤3）光照培养的光强控制为前一半时间光强由2000 LuX线性变化为3500LuX，后一半时间光强由3500LuX线性变化为2000 LuX。
本发明的中MS的成分含量为常规含量。
上述MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。其成分及浓度如下表：
大量元素 使用浓度 (mg/L)
硝酸钾　KNO3 1900
硝酸铵　NH4NO3 1650
磷酸二氢钾　KH2PO4 170
硫酸镁　MgSO4·7H2O 370
氯化钙　CaCl2·2H2O 440
微量元素
碘化钾　KI 0.83
硼酸　H3BO3 6.2
硫酸锰　MnSO4·4H2O 22.3
硫酸锌　ZnSO4·7 H2O 8.6
钼酸钠　Na2MoO4·2H2O 0.25
硫酸铜　CuSO4·5 H2O 0.025
氯化钴　CoCl2·6H2O 0.025
铁盐
乙二胺四乙酸二钠　Na2.EDTA 37.25
硫酸亚铁　FeSO4·7H2O 27.85
有机成分
肌醇 100
甘氨酸 2
盐酸硫胺素　VB1 0.1
盐酸吡哆醇　VB6 0.5
烟酸　VB5 或 VPP 0.5
蔗糖　sucrose 30g /L
琼脂　agar 7 g /L
所述6-BA为6-Benzylaminopurine，6-苄氨基腺嘌呤；所述IAA 为indol- yl-3-aceticacid， 吲哚-3-乙酸；所述ZT为Zeatin，玉米素；所述AC为Active carbon，活性炭；所述TDZ为Thidiazuron，噻重氮苯基脲。
本发明的技术效果在于：本发明设计的诱导生根溶液和诱导生芽溶液针对性强、适用性好，使用海绵作为溶液的附着物，使得外植体能正常有氧呼吸，有效避免了传统培养基因氧气供应不足而造成外植体坏死现象的发生，并且将诱导生根培养设计在诱导生芽培养的前面，有效避免了传统诱导生芽在先而导致的新生芽因营养不足而坏死的现象发生，并且在生芽阶段对光强独特的线性变化设计，使得外植体更快生芽形成组培苗，经过试验证明，使用本发明育苗方法进行育苗，其红心猕猴桃外植体的生根率达到95%以上，生芽率96%以上，移栽成活率达到95%以上。
具体实施方式
下面进一步描述本发明的技术方案，但要求保护的范围并不局限于所述。
实施例１
本实施例提供了一种红心猕猴桃育苗方法，包括以下步骤：
1、培养溶液准备：
诱导生根溶液：MS+6-BA5mg/L+IAA 0.5mg/L+LZT1mg/L+LAC100mg/L+左旋龙脑5～10mg/L mg/L。
诱导生芽溶液：MS+6-BA5mg/L+IAA1mg/L+TDZ 1mg/L+LAC50 mg/L。
本发明的中MS的成分含量为常规含量。
2、育苗
1）外植体选取和灭菌，取红心猕猴桃木质化茎段的外植体，经过水洗，然后用70%的酒精消毒20～50s，在用2%的次氯酸钠溶液灭菌10～15min，然后用水清洗，备用；
2）诱导生根，将灭菌后的外植体切成含单芽切段，然后放置在海绵上，并盖上一层海绵，每天对海绵喷洒一次诱导生根溶液，至下层海绵滴出溶液时停止喷洒，培养温度为18℃～22℃，培养10～15天；
3）诱导生芽，用诱导生芽溶液替换诱导生根溶液，每天对海绵喷洒一次，至下层海绵滴出溶液时停止喷洒；前10～15天每天取下上层海绵，光照培养，培养温度23℃～25℃，光强2000～3500LuX，光照培养3～5h；其余时间为盖上海绵黑暗培养，培养温度为18℃～22℃；然后取下上层海绵，每天光照10～12h，光强2000～3500LuX，然后黑暗培养，光照和黑暗培养温度相同为，20℃～23℃，培养20～30天，得到组培苗；
光照培养的光强控制为前一半时间光强由2000 LuX线性变化为3500LuX，后一半时间光强由3500LuX线性变化为2000 LuX。
4）组培苗移植，将组培苗移栽至基质中，并置于大棚温室中，浇水、保湿至组培苗成苗、出圃。
经过试验证明，使用本实施例育苗方法进行育苗，其红心猕猴桃外植体的生根率达到96.5%，生芽率96.5%，移栽成活率达到96.3%。
实施例2
本实施例提供了一种红心猕猴桃育苗方法，包括以下步骤：
1、培养溶液准备：
诱导生根溶液：MS+6-BA2mg/L+IAA 1mg/L+LZT0.5mg/L+LAC300 mg/L+左旋龙脑5～10mg/L mg/L。
诱导生芽溶液：MS+6-BA2mg/L+IAA1.5mg/L+TDZ 0.5mg/L+LAC100 mg/L。
本发明的中MS的成分含量为常规含量。
2、育苗
1）外植体选取和灭菌，取红心猕猴桃木质化茎段的外植体，经过水洗，然后用70%的酒精消毒20～50s，在用2%的次氯酸钠溶液灭菌10～15min，然后用水清洗，备用；
2）诱导生根，将灭菌后的外植体切成含单芽切段，然后放置在海绵上，并盖上一层海绵，每天对海绵喷洒一次诱导生根溶液，至下层海绵滴出溶液时停止喷洒，培养温度为18℃～22℃，培养10～15天；
3）诱导生芽，用诱导生芽溶液替换诱导生根溶液，每天对海绵喷洒一次，至下层海绵滴出溶液时停止喷洒；前10～15天每天取下上层海绵，光照培养，培养温度23℃～25℃，光强2000～3500LuX，光照培养3～5h；其余时间为盖上海绵黑暗培养，培养温度为18℃～22℃；然后取下上层海绵，每天光照10～12h，光强2000～3500LuX，然后黑暗培养，光照和黑暗培养温度相同为，20℃～23℃，培养20～30天，得到组培苗；
光照培养的光强控制为前一半时间光强由2000 LuX线性变化为3500LuX，后一半时间光强由3500LuX线性变化为2000 LuX。
4）组培苗移植，将组培苗移栽至基质中，并置于大棚温室中，浇水、保湿至组培苗成苗、出圃。
经过试验证明，使用本实施例育苗方法进行育苗，其红心猕猴桃外植体的生根率达到96.3%，生芽率96.7%，移栽成活率达到96.6%。
实施例3
本实施例提供了一种红心猕猴桃育苗方法，包括以下步骤：
1、培养溶液准备：
诱导生根溶液：MS+6-BA3mg/L+IAA 0.7mg/L+LZT0.7mg/L+LAC200 mg/L+左旋龙脑7mg/L mg/L。
诱导生芽溶液：MS+6-BA3mg/L+IAA1.2mg/L+TDZ 0.7mg/L+LAC80 mg/L。
本发明的中MS的成分含量为常规含量。
2、育苗
1）外植体选取和灭菌，取红心猕猴桃木质化茎段的外植体，经过水洗，然后用70%的酒精消毒20～50s，在用2%的次氯酸钠溶液灭菌10～15min，然后用水清洗，备用；
2）诱导生根，将灭菌后的外植体切成含单芽切段，然后放置在海绵上，并盖上一层海绵，每天对海绵喷洒一次诱导生根溶液，至下层海绵滴出溶液时停止喷洒，培养温度为18℃～22℃，培养10～15天；
3）诱导生芽，用诱导生芽溶液替换诱导生根溶液，每天对海绵喷洒一次，至下层海绵滴出溶液时停止喷洒；前10～15天每天取下上层海绵，光照培养，培养温度23℃～25℃，光强2000～3500LuX，光照培养3～5h；其余时间为盖上海绵黑暗培养，培养温度为18℃～22℃；然后取下上层海绵，每天光照10～12h，光强2000～3500LuX，然后黑暗培养，光照和黑暗培养温度相同为，20℃～23℃，培养20～30天，得到组培苗；
光照培养的光强控制为前一半时间光强由2000 LuX线性变化为3500LuX，后一半时间光强由3500LuX线性变化为2000 LuX。
4）组培苗移植，将组培苗移栽至基质中，并置于大棚温室中，浇水、保湿至组培苗成苗、出圃。
经过试验证明，使用本实施例育苗方法进行育苗，其红心猕猴桃外植体的生根率达到96.7%，生芽率96.8%，移栽成活率达到96.9%。

Claims (6)

1.一种红心猕猴桃育苗方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
1）外植体选取和灭菌
取红心猕猴桃木质化茎段的外植体，经过水洗，然后用70%的酒精消毒20～50s，在用2%的次氯酸钠溶液灭菌10～15min，然后用水清洗，备用；
2）诱导生根
将灭菌后的外植体切成含单芽切段，然后放置在海绵上，并盖上一层海绵，每天对海绵喷洒一次诱导生根溶液，至下层海绵滴出溶液时停止喷洒，培养温度为18℃～22℃，培养10～15天；
3）诱导生芽
用诱导生芽溶液替换诱导生根溶液，每天对海绵喷洒一次，至下层海绵滴出溶液时停止喷洒；前10～15天每天取下上层海绵，光照培养，培养温度23℃～25℃，光强2000～3500LuX，光照培养3～5h；其余时间为盖上海绵黑暗培养，培养温度为18℃～22℃；然后取下上层海绵，每天光照10～12h，光强2000～3500LuX，然后黑暗培养，光照和黑暗培养温度相同为，20℃～23℃，培养20～30天，得到组培苗；
4）组培苗移植
将组培苗移栽至基质中，并置于大棚温室中，浇水、保湿至组培苗成苗、出圃。
2.如权利要求1所述的红心猕猴桃育苗方法，其特征在于：所述的诱导生根溶液为MS+6-BA 2～5mg/L+IAA 0.5～1mg/L+LZT 0.5～1mg/L+LAC 100～300 mg/L+左旋龙脑 5～10mg/L mg/L。
3.如权利要求1或2所述的红心猕猴桃育苗方法，其特征在于：所述的诱导生根溶液为MS+6-BA 3mg/L+IAA 0.7mg/L+LZT 0.7mg/L+LAC 200 mg/L+左旋龙脑 7mg/L mg/L。
4.如权利要求1所述的红心猕猴桃育苗方法，其特征在于：所述的诱导生芽溶液为MS+6-BA 2～5mg/L+IAA 1～1.5mg/L+TDZ 0.5～1mg/L+LAC 50～100 mg/L。
5.如权利要求1或2所述的红心猕猴桃育苗方法，其特征在于：所述的诱导生芽溶液为MS+6-BA 3mg/L+IAA 1.2mg/L+TDZ 0.7mg/L+LAC 80 mg/L。
6.如权利要求1所述的红心猕猴桃育苗方法，其特征在于：所述步骤3）光照培养的光强控制为前一半时间光强由2000 LuX线性变化为3500LuX，后一半时间光强由3500LuX线性变化为2000 LuX。
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